Việc lựa chọn tinh trùng chỉ dựa trên hình thái, tính chất di động không phải là chọn lọc tự nhiên có thể ảnh hưởng đến kết quả điều trị. Đã có nhiều nghiên cứu đưa ra kết quả trái chiều về mối liên quan giữa tinh trùng với tỷ lệ thụ tinh, chất lượng phôi và kết quả có thai khi thực hiện kỹ thuật ICSI trên bệnh nhân (BN) hiếm muộn con do yếu tố tinh trùng. Do vậy nghiên cứu này có mục tiêu: Đánh giá ảnh hưởng của tinh trùng ít, yếu, dị dạng đến kết quả thụ tinh, hình thái phôi và kết quả lâm sàng.
Tạp chí y - dợc học quân số 9-2018 NGHIÊN CỨU ẢNH HƯỞNG CỦA TINH TRÙNG ÍT, YẾU, DỊ DẠNG ĐẾN KẾT QUẢ THỤ TINH TRONG ỐNG NGHIỆM TÓM TẮT Nguyễn Thanh Tùng1; Nguyễn Thị Thứ2 Mục tiêu: đánh giá mối liên quan tinh trùng ít, yếu, dị dạng với kết thụ tinh, hình thái phơi kết lâm sàng Đối tượng phương pháp: 168 cặp vợ chồng muộn nguyên nhân chồng chia làm hai nhóm: tinh trùng ít, yếu, dị dạng tinh trùng ít, yếu, dị dạng nặng theo phân loại WHO (2010) so sánh với nhóm chứng gồm 53 cặp vợ chồng muộn có tinh trùng bình thường thụ tinh phương pháp ICSI Kết quả: tỷ lệ thụ tinh nhóm bệnh nhân tinh trùng ít, yếu, dị dạng tinh trùng ít, yếu, dị dạng nặng 67,4 ± 21,2% 58,7 ± 24,4%, thấp so với nhóm tinh dịch đồ bình thường (77,5 ± 16,5%) với p < 0,05 Tỷ lệ phơi loại I II nhóm tinh trùng ít, yếu, dị dạng tinh trùng ít, yếu, dị dạng nặng tương đương nhau, thấp so với nhóm tinh dịch đồ bình thường có ý nghĩa thống kê (p < 0,05) Tỷ lệ thai lâm sàng nhóm tinh trùng ít, yếu, dị dạng (25,7%) cao nhóm tinh trùng ít, yếu, dị dạng nặng (17,5%), hai nhóm thấp nhóm có tinh dịch đồ bình thường (42,6%) Kết luận: cặp vợ chồng muộn nguyên nhân tinh trùng ít, yếu dị dạng ảnh hưởng đến tỷ lệ thụ tinh, số phôi tạo chất lượng phôi, tỷ lệ thai lâm sàng * Từ khóa: Tinh trùng ít, yếu, dị dạng; Tiêm tinh trùng vào bào tương noãn Study Influence of Oligo-Astheno-tetratozoospermia on the Results of In Vitro Fertilization Summary Objectives: To evalutate correlation between oligo-astheno-tetratozoospermia semen and fertility, embryo morphology and the clinical result Subjects and methods: 168 couples with male factor infertillity The patients were divided into oligo-astheno-tetratozoospermia and severe oligo-astheno-tetratozoospermia according to WHO (2010), which were compared with 53 infertility couples with normal semen All couples underwent fertilization following intracytoplasmic sperm injection Results: Fertilization rate of oligo-astheno-tetratozoospermia and severe oligo-astheno-tetratozoospermia (67.4 ± 21.2% and 58.7 ± 24.4%, respectively) were significantly lower than normal semen (77.5 ± 16.5%) with p < 0.05 The number of I, II class embryo quality of oligo-astheno-tetratozoospermia and severe oligo-astheno-tetratozoospermia were similar, but were lower than normal semen Clinical pregnancy rate of oligo-astheno-tetratozoospermia (25.7%) was significantly higher than severe oligo-astheno-tetratozoospermia (17.5%), but both were significantly lower than normal semen (42.6%) Conclusions: Infertility couples with oligo-astheno-tetratozoospermia sperm had impact on fertilization, embryo quantity, quality and clinical pregnancy rate * Keywords: Oligo-astheno-teratozoospermia; Intracytoplasmic sperm injection Học viện Quân y Bệnh viện Bưu điện Người phản hồi (Corresponding): Nguyễn Thanh Tùng (tung_ttcnp@yahoo.com) Ngày nhận bài: 10/09/2018; Ngày phản biện đánh giá báo: 26/10/2018 Ngày báo đăng: 12/11/2018 25 T¹p chÝ y - dợc học quân số 9-2018 T VN Vụ sinh nam tinh trùng ít, yếu, dị dạng (OAT) ngày xuất nhiều Hầu hết người đàn ông khỏe mạnh nguyên nhân bất thường trình sinh tinh Kỹ thuật tiêm tinh trùng vào bào tương noãn (ICSI) xuất năm đầu 1990 mang lại niềm hy vọng hội lớn cho cặp vợ chồng muộn nguyên nhân người chồng tinh trùng OAT Tuy nhiên, việc lựa chọn tinh trùng dựa hình thái, tính chất di động khơng phải chọn lọc tự nhiên ảnh hưởng đến kết điều trị Đã có nhiều nghiên cứu đưa kết trái chiều mối liên quan tinh trùng với tỷ lệ thụ tinh, chất lượng phơi kết có thai thực kỹ thuật ICSI bệnh nhân (BN) muộn yếu tố tinh trùng Do nghiên cứu có mục tiêu: Đánh giá ảnh hưởng tinh trùng ít, yếu, dị dạng đến kết thụ tinh, hình thái phơi kết lâm sàng ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đối tượng nghiên cứu 168 cặp vợ chồng muộn nguyên nhân tinh trùng đánh giá ít, yếu, dị dạng theo tiêu chuẩn WHO (2010) điều trị phương pháp ICSI Trung tâm Hỗ trợ Sinh sản, Bệnh viện Bưu điện từ tháng - 2017 đến - 2018 * Tiêu chuẩn lựa chọn: - Tuổi vợ < 35, dự trữ trứng bình thường - Chồng có tinh dịch đồ OAT theo tiêu chuẩn WHO (2010) [1] 26 * Tiêu chuẩn loại trừ: - Suy buồng trứng - Hội trứng buồng trứng đa nang - Bất thường tử cung: polýp, dính buồng tử cung, dị dạng tử cung - Quá kích buồng trứng Phương pháp nghiên cứu * Thiết kế nghiên cứu: Nghiên cứu theo phương pháp mơ tả, so sánh có nhóm chứng Căn vào tính chất mẫu tinh trùng theo tiêu chuẩn WHO (2010) [1], chia làm ba nhóm: - Nhóm (nhóm chứng): tinh trùng đánh giá bình thường (53 cặp vợ chồng) - Nhóm (OAT): tinh trùng đánh giá bất thường ba số (số lượng, độ di động, hình dạng) (116 cặp vợ chồng) - Nhóm (OAT nặng): tinh trùng đánh giá bất thường ba số thể nặng (số lượng < triệu/ml, tinh trùng di động < 5%, hình thái bình thường < 4%) (52 cặp vợ chồng) * Kích thích buồng trứng, thực kỹ thuật ICSI ni cấy phơi: Kích thích buồng trứng có kiểm soát, sử dụng phác đồ GnRH đối đồng vận BN kích trứng vào ngày chu kỳ liều FSH phù hợp với đáp ứng BN GnRH đối đồng vận 0,25 mg (orgalutran cetrotide) bắt đầu vào ngày thứ FSH Khi có nang > 17 mm gây trưởng thành noãn hCG 5.000 IU Chọc hút noãn qua ngả âm đạo sau 35 dùng hCG Sau chọc hút noãn, thực kỹ thuật ICSI Sau 16 - 18 thụ tinh kỹ thuật ICSI, đánh giá nỗn thụ tinh, nỗn thụ tinh bình thường c Tạp chí y - dợc học quân số 9-2018 nuôi cấy đến ngày Hệ thống môi trường nuôi cấy Hãng Vitrolife (Thụy Điển) Phân loại phôi ngày dựa đánh giá đồng thuận Alpha Hiệp hội ESHRE (2011) [2] - Đánh giá có thai lâm sàng: sau - tuần chuyển phôi, siêu âm kiểm tra thấy có túi ối * Xử lý số liệu: Số liệu xử lý theo chương trình SPSS 20, dùng test X 2, test t-student để so sánh kết giá trị trung bình, tỷ lệ %, khác biệt với p < 0,05 coi có ý nghĩa thống kê * Phương pháp đánh giá kết lâm sàng: - Đánh giá có thai sinh hóa: sau tuần chuyển phơi, định lượng nồng độ βhCG > 30 mIU/ml KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU Bảng 1: Đặc điểm lâm sàng cận lâm sàng nhóm nghiên cứu Nhóm chứng (n = 53) Nhóm OAT (n = 116) Nhóm OAT nặng (n = 52) Tuổi 31,4 ± 2,8 30,4 ± 3,5 30,1 ± 3,3 > 0,05 AFC (nang trứng thứ cấp) 13,7 ± 4,4 12,40 ± 3,9 12,3 ± 3,9 > 0,05 220,2 ± 58,6 238,3 ± 57,9 230,9 ± 47,9 > 0,05 4.272,3 ± 2.561,5 3.944,3 ± 2.102,8 4.150,3 ± 1.907,1 > 0,05 Số ngày dùng FSH 9,7 ± 0,8 9,7 ± 0,7 9,8 ± 0,7 > 0,05 Độ dày niêm mạc tử cung (mm) 11,1 ± 1,4 11,1 ± 1,7 11,7 ± 1,7 > 0,05 Chỉ tiêu Liều FSH khởi đầu (mIU/ngày) E2 ngày tiêm hCG (pg/ml) Tuổi trung bình, số lượng nang thứ cấp, liều FSH khởi đầu nồng độ E2 ngày tiêm hCG, số ngày dùng FSH độ dày niêm mạc tử cung ba nhóm tương đồng nhau, khơng có khác biệt (p > 0,05) Bảng 2: Kết xét nghiệm nhóm nghiên cứu Chỉ tiêu Nhóm chứng (n = 53) (1) Nhóm OAT (n = 116) (2) Nhóm OAT nặng (n = 52) (3) p Số noãn chọc hút 14 ± 6,4 14 ± 5,5 15,3 ± 8,1 > 0,05 12,7 ± 5,9 11,5 ± 5,4 12,1 ± 7,9 > 0,05 Số noãn trưởng thành p1,2 < 0,05 Tỷ lệ thụ tinh (%) 77,5 ± 16,5 67,4 ± 21,2 58,7 ± 24,4 p1,3 < 0,01 p2,3 > 0,05 p1,2 < 0,05 Số phôi tạo 10,2 ± 4,6 7,7 ± 4,3 7,1 ± 5,7 p1,3 < 0,05 p2,3 > 0,05 27 T¹p chÝ y - dợc học quân số 9-2018 p1,2 < 0,05 Số phôi loại I 51/543 (9,4%) 72/902 (7,9%) 20/372 (5,4%) p1,3 < 0,05 p2,3 > 0,05 p1,2 < 0,05 Số phôi loại II 261/543 (48,1%) 367/902 (40,7%) 154/372 (41,4%) p1,3 < 0,05 p2,3 > 0,05 Số phôi loại III 231/543 (42,5%) 462/902 (51,2%) p1,2 < 0,05 197/372 52,9%) p1,3 < 0,05 p2,3 > 0,05 (Nhóm OAT có 2/116 trường hợp khơng có nỗn thụ tinh nào; nhóm OAT nặng: 3/52 trường hợp khơng có nỗn thụ tinh nào) Số nỗn thu trung bình số nỗn trưởng thành nhóm chứng nhóm nghiên cứu tương đương nhau, khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê (p > 0,05) Tuy nhiên, tỷ lệ thụ tinh hai nhóm tinh trùng OAT giảm so với nhóm tinh trùng bình thường, với tỷ lệ thụ tinh nhóm 67,4 ± 21,2%; 58,7 ± 24,4% 77,5 ± 16,5%, khác biệt có ý nghĩa thống kê (p < 0,05) Nhóm OAT có trường hợp khơng có nỗn thụ tinh nhóm OAT nặng có trường hợp khơng có nỗn thụ tinh So sánh hai nhóm OAT, tỷ lệ thụ tinh nhóm OAT nặng thấp nhóm OAT, khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê (p > 0,05) Tỷ lệ phôi loại I II nhóm tinh dịch đồ bình thường (9,4%; 48,1%) cao nhóm OAT (7,9%; 40,7%) nhóm OAT nặng (5,4%; 41,4%), khác biệt có ý nghĩa thống kê với p < 0,05 Số phôi loại I II tương đương hai nhóm OAT OAT nặng, khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê với p > 0,05 Tuy nhiên, số phôi loại III nhóm OAT OAT nặng 51,2%; 52,9% cao nhóm tinh dịch đồ bình thường (42,5%), khác biệt có ý nghĩa thống kê với p < 0,05 Bảng 3: Kết lâm sàng nhóm nghiên cứu Chỉ tiêu nghiên cứu Nhóm tinh dịch đồ bình thường (n = 53) (1) Nhóm OAT (n = 114) (2) Nhóm OAT nặng (n = 49) (3) p Số phơi trung bình chuyển 2,06 ± 0,8 1,98 ± 0,6 1,99 ± 0,7 > 0,05 42,6% 25,7% 17,5% p1,2 < 0,01 p1,3 < 0,01 p2,3 < 0,05 Tỷ lệ thai lâm sàng Số phơi chuyển trung bình nhóm tương đương nhau, tỷ lệ có thai lâm sàng nhóm có tinh dịch đồ bình thường (42,6%) cao nhóm OAT OAT nặng có tỷ lệ có thai 25,7% 17,5%, khác biệt có ý nghĩa thống kê với p < 0,05 Khi so sánh tỷ lệ thai lâm sàng, nhóm OAT cao nhóm OAT nặng có ý nghĩa thống kờ (p < 0,05) 28 Tạp chí y - dợc häc qu©n sù sè 9-2018 BÀN LUẬN Vấn đề tinh trùng OAT nặng giảm hội cho việc lựa chọn hình thái tinh trùng Tỷ lệ thụ tinh bất thường hình thái tinh trùng liên quan đến tỷ lệ làm tổ [3, 4] Nagvenkar CS (2005) tìm thấy mối liên quan lỗi phân bào số lượng tinh trùng thấp, tỷ lệ lệch bội nhiễm sắc thể giới tính cao OAT nặng so với OAT nhẹ [5] Kết tương tự số tác giả khác nghiên cứu ICSI BN OAT Theo Lu Y.H (2012), tỷ lệ thụ tinh trung bình nhóm tinh dịch đồ bình thường sau ICSI 73,6 ± 20,2%, nhóm OAT 67,7 ± 24,5%, nhóm OAT nặng 65,9 ± 21,5% [6] Theo Kim H.J (2014), nhóm OAT có tỷ lệ thụ tinh 65,0 ± 21,1%, nhóm OAT nặng 67,7 ± 19,9%, khơng có khác biệt hai nhóm [7] Đánh giá hình thái tinh trùng đóng vai trò định chẩn đoán khả sinh sản nam giới chứng minh có giá trị dự đốn Cohen-Bacrie CS (2009) thấy bất thường hình thái tinh trùng liên quan đến đứt gãy ADN, bất thường nhiễm sắc thể thiếu hụt trung thể [8] Nghiên cứu Knez CS (2011) cho lựa chọn hình thái tinh trùng độ phóng đại lớn cải thiện phát triển phôi, tỷ lệ làm tổ, tỷ lệ sảy thai mà trước kết có thai thất bại làm tổ liên tiếp tinh trùng bất thường hình thái thực kỹ thuật ICSI thông thường [9] Tỷ lệ có thai phụ thuộc vào nhiều yếu tố chất lượng phôi, số lượng phôi chuyển, tuổi người phụ nữ, chất lượng phơi yếu tố định Trong nghiên cứu chúng tơi, nhóm tinh dịch đồ bình thường có tỷ lệ có thai cao nhất, tương đồng với số phôi loại I II cao hai nhóm OAT OAT nặng Kết tương tự số tác giả khác nghiên cứu vấn đề Loutradi K.E (2006), tỷ lệ có thai lâm sàng nhóm tinh dịch đồ bình thường 26,0%, nhóm OAT 17,2%, nhóm cryptozoospermia 12,1% [10] KẾT LUẬN Cặp vợ chồng muộn nguyên nhân tinh trùng ít, yếu dị dạng ảnh hưởng đến tỷ lệ thụ tinh, số phôi tạo chất lượng phôi, tỷ lệ thai lâm sàng TÀI LIỆU THAM KHẢO Organisation W.H WHO laboratory manual for the examination of human semen and sperm-cervical mucus interaction Cambridge University Press 2010 Alpha Scientists in Reproductive Medicine and ESHRE Special Interest Group of Embryo The Istabul consensus workshop on embryo assessment proceedings of an expert meeting Human Reproduction 2011, 26 (6), pp.1270-1283 De Vos A, Van De Velde H, Joris H, Verheyen G, Devroey P, Van Steirteghem A Influence of individual sperm morphology on fertilization, embryo morphology, and pregnancy outcome of intracytoplasmic sperm injection Fertil Steril 2003, 79, pp.42-48 Verza SJr, Esteves S.C Sperm defect severity rather than sperm source is associated with lower fertilization rates after intracytoplasmic sperm injection Braz J Urol 2008, 34, pp.49-56 Nagvenkar P, Zaveri K, Hinduja I Comparision of the sperm aneuploidy rate in 29 T¹p chÝ y - dợc học quân số 9-2018 severe oligozoospermic and oligozoospermic men and its relation to intracytoplasmic sperm injection outcome Fertil Steril 2005, 84, pp.925-931 Lu Y.H, Gao H.J, Li B.J et al Different sperm sources and parameters can influence intracytoplasmic sperm injection outcomes before embryo implantation Journal of Zhejiang University Science 2012, 13 (1), pp.1-10 Kim H.J, Yoon H.J, Jang J.M et al Comparison between intracytoplasmic sperm injection and intracytoplasmic morphologically selected sperm injection in oligo-asthenoteratozoospermia patients Clinical and Experimental Reproductive Medicine 2014, 41 (1), pp.9-14 30 Cohen-Bacrie P, Belloc S, Ménézo Y.J, Clement P, Hamid, J, Benkhalifa M Correlation between DNA damage and sperm parameters: A prospective study of 1,633 patients Fertil Steril 2009, 91, pp.1801-1805 Knez K, Zorn B, Tomazevic T, VrtacnikBokal E, Virant-Klun I The IMSI procedure improves poor embryo development in the same infertile couples with poor semen quality: A comparative prospective randomized study Repro Biol Endocrinol 2011, 9, p.123 10 Loutradi K.E, Tarlatzis B.C, Goulis D.G et al The effects of sperm quality on embryo development after intracytoplasmic sperm injection Journal of Assisted Reproduction and Genetics 2006, 23 (2), pp.69-74 ... tinh trùng với tỷ lệ thụ tinh, chất lượng phôi kết có thai thực kỹ thuật ICSI bệnh nhân (BN) muộn yếu tố tinh trùng Do nghiên cứu có mục tiêu: Đánh giá ảnh hưởng tinh trùng ít, yếu, dị dạng đến. .. yếu, dị dạng đến kết thụ tinh, hình thái phơi kết lâm sàng ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đối tượng nghiên cứu 168 cặp vợ chồng muộn nguyên nhân tinh trùng đánh giá ít, yếu, dị dạng theo tiêu... sàng nhóm tinh dịch đồ bình thường 26,0%, nhóm OAT 17,2%, nhóm cryptozoospermia 12,1% [10] KẾT LUẬN Cặp vợ chồng muộn nguyên nhân tinh trùng ít, yếu dị dạng ảnh hưởng đến tỷ lệ thụ tinh, số phôi