NGHIÊN CỨU MỘT CÔNG THỨC PHỐI HỢP CAO DƯỢC LIỆU CÓ TÁC DỤNG GIẢM CÂN

SỞ KHOA HỌC VÀ CƠNG NGHỆ TP HỒ CHÍ MINH THÀNH ĐỒN TP HỒ CHÍ MINH CHƯƠNG TRÌNH VƯỜN ƯƠM SÁNG TẠO KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ TRẺ X*W BÁO CÁO NGHIỆM THU NGHIÊN CỨU MỘT CÔNG THỨC PHỐI HỢP CAO DƯỢC LIỆU CÓ TÁC DỤNG GIẢM CÂN Chủ nhiệm đề tài: NGUYỄN ĐỨC HẠNH Cơ quan chủ trì: TRUNG TÂM PHÁT TRIỂN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ TRẺ LỜI GIỚI THIỆU Chè xanh Sen sử dụng nhiều thuốc giảm cân, chống béo phì Tuy nhiên, độc tính tác dụng giảm cân phối hợp hai dược liệu chưa nghiên cứu Đề tài nghiên cứu phối hợp cao chiết xuất từ hai dược liệu vào thức ăn với tỷ lệ cao chiết 3% (CTa), 5% (CTb) nghiên cứu tác dụng giảm cân hai công thức chuột nhắt với chế ăn độ giàu chất béo (HF) Chuột Swiss albino đực trở nên béo phì sau tuần cho ăn thức ăn giàu chất béo so với nhóm chuột cho ăn thức ăn thường Sau tuần thử nghiệm, chuột cho ăn theo CTa CTb giảm cân đáng kể so với chuột ăn thức ăn giàu chất béo Kết nghiên cứu cho thấy hai công thức khơng biểu độc tính cấp dùng liều 6g/kg (liều cao cho chuột uống) CTa, CTb có tác dụng giảm cân chống béo phì INTRODUCTION Camellia sinensis and Nelumbo nucifera have been mentioned to be beneficial for the suppression of obesity However, the effect and toxicity of a combination of these plants still remain unclear In this study, formula a (CTa) and b (CTb) were prepared from extracts of above-mentioned plants Anti-obesity effects of these two formulae were investigated in the mice fed on a high-fat (HF) diet Male Swiss albino mice became obese by feeding the HF diet over weeks compared to normal diet group Mice fed on HF containing 3% (CTa) and 5% (CTb) gained significantly less body weight than that of control animal fed on HF diet alone during a 9-week experimental period Acute toxicity study of these formulae revealed normal behaviour and no mice was dead even at 6g/kg (highest dose that could be administered through oral route for mice) Our results suggest that CTa may be useful in the treatment of obesity and related disorders as anti-obesity agents MỤC LỤC MỤC LỤC DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT DANH SÁCH BẢNG DANH SÁCH HÌNH CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 TỔNG QUAN VỀ THỪA CÂN VÀ BỆNH BÉO PHÌ 1.2 TỔNG QUAN VỀ CHÈ XANH VÀ LÁ SEN 11 1.3 PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH ĐỘC TÍNH CẤP 19 1.4 CÁC MƠ HÌNH THỬ TÁC DỤNG CHỐNG BÉO PHÌ 21 CHƯƠNG NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP 24 2.1 NGUYÊN VẬT LIỆU 24 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 26 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 36 3.1 KIỂM NGHIỆM DƯỢC LIỆU 36 3.2 KẾT QUẢ CHIẾT XUẤT VÀ TIÊU CHUẨN HÓA CAO 47 3.3 THỬ NGHIỆM ĐỘC TÍNH CẤP CỦA CÔNG THỨC PHỐI HỢP CAO DƯỢC LIỆU TRÊN CHUỘT 57 3.4 THỬ NGHIỆM TÁC DỤNG GIẢM CÂN CỦA CÔNG THỨC PHỐI HỢP CAO DƯỢC LIỆU TRÊN CHUỘT 59 3.5 KẾT QUẢ THỬ NGHIỆM ĐỘC TÍNH BÁN TRƯỜNG DIỄN 65 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 75 TÀI LIỆU THAM KHẢO 77 DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT BMI Body Mass Index DĐVN III Dược điển Việt Nam III FDA Food and Drug Administration LD50 Lethal Dose 50 NICE Nation Institute of Clinical Excellence SEM Standard Error of Mean UV Ultra Violet HF High-fat TT Thuốc thử DANH SÁCH BẢNG Bảng 2.1 Các hành vi chuột cần ý thời gian theo dõi 30 Bảng 2.2 Thành phần 100 g thức ăn chuột 32 Bảng 3.1 Dự thảo tiêu chuẩn Chè xanh 40 Bảng 3.2 Độ ẩm Sen 44 Bảng 3.3 Tỷ lệ tạp chất Sen 44 Bảng 3.4 Tỷ lệ vụn nát Sen 44 Bảng 3.5 Hàm lượng alkaloid toàn phần Sen 46 Bảng 3.6 Kết chiết xuất dược liệu 47 Bảng 3.7 Độ tan nước cao Chè xanh Sen 49 Bảng 3.8 Độ tan EtOH 96% cao Chè xanh Sen 49 Bảng 3.9 Độ ẩm cao Chè xanh Sen 50 Bảng 3.10 Độ tro toàn phần cao Chè xanh Sen 50 Bảng 3.11 Tro không tan HCl cao Chè xanh Sen 50 Bảng 3.12 Hàm lượng tannin cao Chè xanh 53 Bảng 3.13 Hàm lượng tannin alkaloid cao Sen 54 Bảng 3.14 Dự thảo tiêu chuẩn cao Chè xanh 55 Bảng 3.15 Dự thảo tiêu chuẩn cao Sen 56 Bảng 16 Kết thử nghiệm độc tính cấp đường uống 57 Bảng 3.17 Theo dõi cân nặng chuột nhóm 59 Bảng 3.18 Theo dõi cân nặng chuột nhóm 60 Bảng 3.19 Theo dõi cân nặng chuột nhóm 60 Bảng 3.20 Theo dõi cân nặng chuột nhóm 61 Bảng 3.21 Theo dõi cân nặng chuột nhóm 61 Bảng 3.22 Khối lượng trung bình nhóm chuột thử nghiệm 62 Bảng 3.23 Thể trọng chuột thử nghiệm độc tính mãn 66 Bảng 3.24 Đánh giá chức gan sử dụng cao dược liệu 66 Bảng 3.25 Đánh giá chức thận sử dụng cao dược liệu 67 Bảng 3.26 Đánh giá ảnh hưởng cao dược liệu đến thông số triglycerid 68 Bảng 3.27 Đánh giá ảnh hưởng cao dược liệu lên thông số bạch cầu 68 Bảng 3.28 Đánh giá ảnh hưởng cao dược liệu lên thông số hồng cầu 69 Bảng 3.29 Đánh giá ảnh hưởng cao dược liệu lên thông số tiểu cầu 70 DANH SÁCH HÌNH Hình 1.1 Dược liệu Chè xanh 11 Hình 1.2 Dược liệu Sen 16 Hình 2.1 Chuột ni lồng với đầy đủ thức ăn nước uống 24 Hình 2.2 Dụng cụ đun hồi lưu (a) máy cô quay chân khơng (b) 25 Hình 2.3 Sơ đồ quy trình chiết xuất dược liệu Chè xanh 26 Hình 2.4 Sơ đồ quy trình chiết xuất dược liệu Sen 27 Hình 3.1 Lá Chè xanh 36 Hình 3.2 Vi phẫu phiến Chè xanh 37 Hình 3.3 Các thành phần vi phẫu phiến Chè xanh 37 Hình 3.4 Các cấu tử soi bột Chè xanh 38 Hình 3.5 Lá Sen khô 41 Hình 3.6 Vi phẫu Sen 42 Hình 3.7 Các thành phần vi phẫu Sen 42 Hình 3.8 Các cấu tử soi bột Sen 43 Hình 3.9 Cao Chè xanh 48 Hình 3.10 Cao Sen 48 Hình 3.11 Sắc ký lớp mỏng cao Chè xanh (a) Sen (b) 52 Hình 3.12 Vi phẫu gan mẫu đại diện lơ chứng lơ thử 71 Hình 3.13 Vi phẫu thận mẫu đại diện lô chứng lô thử 72 CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 TỔNG QUAN VỀ THỪA CÂN VÀ BỆNH BÉO PHÌ Thừa cân béo phì rối loạn dinh dưỡng thường gặp quốc gia toàn giới Vấn đề làm cho chất lượng sống người bệnh bị giảm sút tạo gánh nặng khổng lồ hệ thống chăm sóc sức khỏe [7,14] Nhiều chứng cho thấy thừa cân béo phì có liên quan mật thiết đến nguy mắc phải bệnh mạch vành, loạn lipid huyết, không dung nạp glucose, kháng insulin tăng huyết áp [7,17,20] Do đó, nhiều quốc gia xem chương trình phòng chống thừa cân béo phì biện pháp để phòng ngừa bệnh nói Một người gọi béo phì có BMI ≥ 25 người Châu Á, hay BMI ≥ 30 người Châu Âu (Chỉ số BMI tính cân nặng (kg) chia bình phương chiều cao (m2)) [7,22] Hiện nay, Việt Nam nói riêng tồn giới nói chung, tỷ lệ người thừa cân béo phì tăng nhanh đến tốc độ báo động Trên giới, có khoảng tỷ người thừa cân 300 triệu người béo phì Tỷ lệ béo phì tăng từ 10 – 40% hầu hết quốc gia Châu Âu suốt thập kỷ qua [7,20] Sự tăng trưởng kinh tế, tốc độ đô thị hóa, thay đổi lối sống,…đang làm tỷ lệ thừa cân béo phì tăng lên nhanh chóng ngun nhân sau : + Cơng nghiệp hóa, thị hóa cách mạng cơng nghệ mang lại nhiều thuận tiện cho người, làm giảm tiêu thụ lượng cần thiết cho sinh họat ngày Tuy nhiên, những thuận tiện lại làm điều kiện họat động thể lực + Sự gia tăng thu nhập lượng tăng sẵn có thức ăn ngon, giá rẻ, nhiều chất béo lượng Hai nguyên nhân làm lệch cán cân cung – cầu lượng, dẫn đến tình trạng thừa cân béo phì – bệnh "thế kỷ tự động hóa" Một số phương pháp sử dụng để quản lý điều trị thừa cân béo phì gồm: chế độ ăn, họat động thể lực, sử dụng thuốc phẫu thuật Việc giảm cân đem lại lợi ích: + Giảm nguy tử vong bệnh tật kết hợp với béo phì Nhiều nghiên cứu cho thấy giảm 10 kg cân nặng dẫn tới: Giảm 20 – 25% tỷ lệ tử vong chung Giảm 30 – 40% tỷ lệ tử vong liên quan đến đái tháo đường Giảm 40 – 50% tỷ lệ tử vong ung thư liên quan đến béo phì + Việc giảm nhẹ từ – 10% cân nặng so với trước can thiệp góp phần cải thiện rối loạn sức khỏe kèm đái tháo đường tuýp 2, tăng huyết áp, bệnh tim mạch kéo dài tuổi thọ [7,19] Hiện nay, loại thuốc FDA NICE công nhận dùng để điều trị béo phì thời gian dài orlistat (Xenical) sibutramin (Reductil, Meridia) Ngồi ra, có rimonabant (Acomplia) FDA xem xét để sớm đưa thị trường Các thuốc cho phép trì giảm cân khoảng 10% – năm Tuy nhiên, nhiều tác dung phụ ghi nhận thường làm bệnh nhân ngừng sử dụng thuốc không hợp tác điều trị [17,20,22] Trong đó, Chè xanh Sen sử dụng nhiều thuốc giảm cân cổ truyền Dịch chiết từ Sen có tác dụng ngăn cản hoạt động α – amylase lipase, làm giảm hấp thu lipid tăng chuyển hóa lipid, điều hòa tiêu thụ lượng [25] Chè xanh giúp tăng cường lực phân giải mỡ thừa thúc đẩy phản ứng oxy hoá mỡ, làm tăng sử dụng lượng giúp giảm cân Các catechin Chè xanh có khả ức chế hoạt động men phân giải mỡ dày tuyến tụy, giảm nhũ hoá, phân giải hấp thu chất béo Cafein Chè tăng cường hoạt động polyphenol tác dụng kiểm sốt cân nặng tích luỹ lượng [12,23] Với tác dụng Chè xanh Sen sử dụng rộng rãi để điều trị thừa cân béo phì nhiều quốc gia giới [12,23,24, 25] Tuy nhiên, tác dụng chống béo phì dược liệu nghiên cứu dùng riêng lẻ Việc phối hợp cao chiết dược liệu trì tác dụng chống béo phì giảm độc tính chưa nghiên cứu Kết nghiên cứu đề tài góp phần giải vấn đề xã hội - y tế ngày phát triển, giúp ngăn ngừa bệnh nguy hiểm (đái tháo đường, bệnh mạch vành, cao huyết áp, cao lipid máu, thấp khớp…) cộng đồng, góp phần nâng cao suất lao động xã hội giảm số người béo phì, tiết kiệm ngoại tệ nhập thuốc trị béo phì Hơn nữa, đề tài thành cơng góp phần nâng cao khả sử dụng nguồn dược liệu, mạnh đất nước, việc bảo vệ chăm sóc sức khoẻ cộng đồng 10 Khơng có khác biệt khối lượng có ý nghĩa nhóm dùng cơng thức a, b nhóm thường - Về lượng thức ăn đưa vào: Lượng thức ăn đưa vào ghi nhận cách trừ lượng thức ăn ngày với lượng thức ăn thừa lại Quan sát thấy khơng có khác biệt thức ăn có ý nghĩa nhóm Do khơng thể tính xác lượng thức ăn chuột nên kết có tính tương đối Có thể rút kết luận: Hai nhóm dùng cơng thức phối hợp cao dược liệu thể rõ giảm cân Tác dụng tương đương hai nhóm, yếu so với dùng orlistat trọng lượng sau thử nghiệm có xu hướng trở gần với bình thường Tác dụng chống béo phì cao dược liệu dùng mà từ từ (sau tuần) kéo dài sau Điều phù hợp với tính chất thuốc có nguồn gốc dược liệu thuận lợi cho sử dụng lâu dài người 3.5 KẾT QUẢ THỬ NGHIỆM ĐỘC TÍNH BÁN TRƯỜNG DIỄN TÌNH TRẠNG CHUNG CỦA CHUỘT Sau 60 ngày, tất chuột thử nghiệm hai lơ (lơ chứng lơ thử) hoạt động bình thường, ăn uống tốt, phân khơ, lơng mượt, khơng có tượng rụng lông khô cứng Tất chuột thử nghiệm sống bình thường khỏe mạnh Ảnh hưởng cao thuốc lên thể trọng chuột 65 Bảng 3.23 Thể trọng chuột thử nghiệm độc tính mãn Tuần Lô chứng (g) 31,01±0,85 Lô thử (g) 33,10±0,74 35,10±0,90 37,31±1,07 40,14±1,05 32,52± 1,10 32,56±0,93 30,32±0,75 Tuần 32,3 ±0,83 32,71±1,33 Lô chứng 40,99±1,05 39,80±0,81 38,98±0,88 37,55±0,90 37,41±1,02 Lô thử 36,74±0,82 36,24±0,81 37,58±0,73 36,04±0,71 37,44±0,78 NHẬN XÉT KẾT QUẢ Trong tuần 2-6 thể trọng chuột lơ chứng giảm có ý nghĩa thống kê so với lô thử Các tuần sau, khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê Ảnh hưởng cao thuốc lên chức sinh hoá, sinh lý Chức gan Bảng 3.24 Đánh giá chức gan sử dụng cao dược liệu Lô Bilirubin (mg/dl) Toàn phần Trực tiếp GOT (U/L) GPT (U/L) Gián tiếp Chứng 0,46± 0,05 0,11± 0,01 0,35± 0,05 94,08±5,93 44,85± 3,97 Thử 0,45± 0,18 0,11± 0,01 0,35± 0,05 115 ± 8,15 Chú thích: - Lơ chứng: uống nước cất 66 53,92± 5,38 - Lô thử: uống cao sen chè xanh (1: 1) - GOT (AST): Glutamo Pyruvic Transaminase - GPT (ALT): Glutamo Oxalo Transaminase Nhận xét kết quả: Tất thông số bilirubin, GPT, GOT hai lơ khác khơng có ý nghĩa Chức thận Bảng 3.25 Đánh giá chức thận sử dụng cao dược liệu Lô Creatinin (mg/dl) B.U.N (mg/dl) Chứng 0,62 ± 0,01‫٭‬ 18,46 ± 0,87 Thử 0,57 ± 0,02 17,46 ± 1,02 Chú thích: - Creatinin: độ thải thận - B.U.N: Blood Ure Nitrogen Nhận xét kết quả: Thơng số B.U.N hai lơ khơng khác có ý nghĩa thống kê, thông số creatinin lô chứng cao lơ thử có ý nghĩa thống kê (p < 0,05) 67 Các thông số khác Triglycerid Bảng 3.26 Đánh giá ảnh hưởng cao dược liệu đến thông số triglycerid Lô Triglycerid (mg/dl) Chứng 415,85 ± 18,36 Thử 446,85 ± 28,04 Nhận xét kết quả: Triglycerid hai lô không khác đạt ý nghĩa thống kê Thông số huyết học Bảng 3.27 Đánh giá ảnh hưởng cao dược liệu lên thông số bạch cầu Lô WBC Neut% Lymp% Mono% Eos% Bas% Chứng 13,9 ±0,1 32,4 ± 2,9 61,8 ± 2,3 4,5± 1,5 0,1 ± 0,2±0 * Thử 33,3 ± 2,8 62,2 ± 2,7 3,1± 0,2 0,1 ± 1,3±0,2 13,1±1,0 Chú thích: Thơng số Đơn vị WBC: Lượng bạch cầu (x109/L) Neut% : Tỷ số bạch cầu trung tính tổng số bạch cầu (%) Lymp%: Tỷ số bạch cầu lympho tổng số bạch cầu (%) Mono%: Tỷ số bạch cầu đơn nhân tổng số bạch cầu (%) Eos%: Tỷ số bạch cầu hạp phẩm eosin tổng số bạch cầu (%) Bas%: Tỷ số bạch cầu hạp phẩm base tổng số bạch cầu (%) 68 Nhận xét kết quả: Thông số basephile % lơ thử tăng có ý nghĩa thống kê so với lô chứng (p < 0,05) Các thông số bạch cầu lại hai lơ khơng khác đạt ý nghĩa thống kê Bảng 3.28 Đánh giá ảnh hưởng cao dược liệu lên thông số hồng cầu Lô RBC Hgb Hct% MCV MCH MCHC RDW% Chứng 9,6±0,1 15,7±0,2 44,6±0,7 46,7±0,6 16,4±0,2 35,2±0,2 16,6±0,2 Thử 9,6±0,1 15,7±0,2 44,3±0,5 46,3±0,5 16,4±0,1 35,5±0,2 17,1±0,3 Chú thích: Thơng số Đơn vị (x1012/L) RBC: Lượng hồng cầu Hgb: Huyết sắc tố (g/L) Hct: Tỷ số huyết cầu thể tích máu (%) MCV : Thể tích trung bình hồng cầu (fL) MCH: Lượng huyết sắc tố trung bình hồng cầu (pg) MCHC: Nồng độ huyết sắc tố trung bình hồng cầu (g/L) RDW: Sự thay đổi hình dáng hồng cầu (fL) Nhận xét kết quả: Tất thông số hồng cầu hai lơ khơng khác có ý nghĩa thống kê 69 Bảng 3.29 Đánh giá ảnh hưởng cao dược liệu lên thông số tiểu cầu Plt MPV PCT% PDW Chứng 896 ± 51,6 5,4 ± 0,1 0,5 ± 10,7 ± 0,2 Thử 948,9 ± 46 5,4 ± 0,1 0,5 ± 10,7 ± 0,1 Lơ Chú thích: Thơng số Đơn vị Plt: Lượng tiểu cầu (x109/L) MPV: Thể tích trung bình tiểu cầu (fL) PCT: Tỷ số tiểu cầu thể tích máu (%) PDW: Sự phân bố độ rộng tiểu cầu (fL) Nhận xét kết quả: Tất thông số tiểu cầu lô không khác đạt ý nghĩa thống kê Quan sát thay đổi hình thái (giải phẫu bệnh) Quan sát thay đổi hình thái đại thể gan, thận Sau thời gian theo dõi, chuột tất lô mổ để quan sát đại thể phủ tạng chuột Kết quả: không thấy thay đổi bệnh lý hình thái đại thể quan tim, phổi, gan, thận, bàng quang hệ thống tiêu hóa Quan sát thay đổi hình thái vi thể gan, thận Hình thái gan Đối với lô thử nghiệm: cấu trúc chung nhu mô gan không bị thay đổi, ranh giới tiểu thùy rõ, khoang cửa khơng xung huyết Khơng có 70 tượng hủy hoại tế bào gan, Các tế bào gan bình thường: bào tương mịn, nhân tròn, màng nhân rõ Đối với lơ chứng: - Đa số chuột thí nghiệm có cấu trúc gan bình thường - Hai số mười chuột xét nghiệm vi thể có tượng hoại tử tế bào gan vùng quanh khoảng cửa, đa số lại vùng mơ gan bình thường A B C D D Hình 3.12 Vi phẫu gan mẫu đại diện lô chứng lơ thử (A): Mẫu gan bình thường xem vật kính 40X (B): Mẫu gan bình thường xem vật kính 100X (C): Mẫu gan hoại tử xem vật kính 40X (D): Mẫu gan hoại tử xem vật kính 100X 71 Hình thái thận Lơ thử nghiệm: Cấu trúc thận không thay đổi, cầu thận, ống thận mơ kẽ có hình thái bình thường Trong vùng vỏ, tiểu cầu thận, ống lượn gần ống lượn xa có cấu trúc bình thường Trong vùng tủy, cấu tạo quai Henle ống góp có hình ảnh bình thường, lòng ống sáng Lơ chứng: - Đa số chuột thí nghiệm có cấu trúc thận không thay đổi - Một số mười chuột xét nghiệm vi thể có tượng viêm loét cấp tính phần đài bể thận với nhiều chất hoại tử tơ huyết bề mặt ổ loét kèm theo xác tế bào, bạch cầu nhân múi lympho bào Mô thận phần cầu thận, ống thận, mô kẽ bình thường A B C D Hình 3.13 Vi phẫu thận mẫu đại diện lô chứng lơ thử 72 (A): Mẫu thận bình thường xem vật kính 100X (B): Mẫu thận bình thường xem vật kính 200X (C): Mẫu thận viêm xem xem vật kính 100X (D): Mẫu thận viêm xem vật kính 200X BÀN LUẬN KẾT QUẢ Khi cho chuột uống cao dược liệu với liều 0,6 g/kg liên tục khoảng thời gian 60 ngày, không nhận thấy biểu bệnh lý nào, khơng có chuột chết thời gian thử nghiệm Kết xét nghiệm sinh hóa khơng có khác có ý nghĩa thống kê trừ thông số creatinin lô thử giảm có ý nghĩa so với lơ chứng Hầu hết kết xét nghiệm huyết học khơng có khác có ý nghĩa thống kê trừ thơng số Bas% lơ thử tăng có ý nghĩa thống kê so với lô chứng với độ tin cậy 95% Các thông số bạch cầu (WBC, Neut%, Lymp%, Mono%, Eos%) lô thử không khác lô chứng, chứng tỏ uống cao dược liệu khơng có tượng nhiễm trùng, viêm hay suy giảm miễn dịch Bạch cầu ưa base loại bạch cầu chiếm tỉ lệ thấp loại bạch cầu thường tăng nhẹ trường hợp dị ứng Như vậy, chuột lô thử uống dược liệu bị dị ứng với thành phần hỗn dịch cao thuốc Cần tiến hành thêm thử nghiệm khác để khảo sát tượng Đặc biệt, lô thử khơng có thay đổi hình thái gan, thận (cả đại thể lẫn vi thể) Những bất thường tế bào học xuất lô chứng ngẫu nhiên 73 Như vậy, kết luận việc sử dụng dài ngày dược liệu với liều 0,6 g/kg chuột không ảnh hưởng đến thơng số sinh hóa hình thái gan, thận chuột thí nghiệm Riêng thơng số huyết học, gây tăng nhẹ bạch cầu ưa base 74 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ Nghiên cứu thu số kết sau: Qua tham khảo tài liệu khoa học công bố với kinh nghiệm sử dụng dược liệu y học cổ truyền chọn Chè xanh Sen để xây dựng cơng thức phối hợp có tác dụng giảm cân Dược liệu Chè xanh nghiên cứu xây dựng tiêu chuẩn dược liệu Sen kiểm nghiệm theo tiêu chuẩn DĐVN III trước đưa vào nghiên cứu Dược liệu Chè xanh Sen chiết xuất với quy trình khác phù hợp cho dược liệu để thu cao, tiêu chuẩn hóa cao thử tác dụng dược lý Dựa vào kết thực nghiệm, đề xuất số tiêu chất lượng cho cao gồm: hình thức cảm quan, độ tan nước, độ tan cồn, độ ẩm, tro tồn phần, tro khơng tan acid hydrochloric, định tính định lượng Kết thử độc tính cấp cho thấy: dùng đến liều tối đa bơm qua kim mà khơng có chuột chết, nên xác định LD50 đường uống Vậy công thức phối hợp cao dược liệu khơng có độc tính cấp, có độ an tồn cao Đề tài nghiên cứu thăm dò mơ hình thích hợp để thử nghiệm thuốc có tác dụng giảm cân Thử nghiệm hai liều dùng khác 3% 5% lượng thức ăn cho thấy hai liều có tác dụng giảm cân mức độ tương đương 75 Do vậy, nên chọn liều dùng 3% lượng thức ăn để tiếp tục nghiên cứu, phù hợp bào chế thành chế phẩm, bổ sung thêm lựa chọn cho điều trị giảm cân Đề nghị Tìm liều dùng nhỏ có tác dụng chống béo phì cho phối hợp cao dược liệu để làm sở cho việc xây dựng liều dùng người Xây dựng công thức để bào chế thành chế phẩm sử dụng điều trị béo phì 76 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng việt Bộ môn dược liệu (1998), Bài giảng dược liệu tập 1, Trường ĐH Dược Hà Nội, Hà Nội, tr,102-104, 132-134 Bộ môn dược liệu (1998), Bài giảng dược liệu tập 2, Trường ĐH Dược Hà Nội, Hà Nội, tr 153-155 Bộ mơn dược liệu (2005), Giáo trình thực tập dược liệu, Trường ĐH Y Dược TP Hồ Chí Minh, TP Hồ Chí Minh, tr 26-32, 45-48 Bộ mơn dược lý (2006), Giáo trình thực tập dược lý, Trường ĐH Y Dược TP Hồ Chí Minh, TP Hồ Chí Minh, tr 20-24 Bộ y tế (2002), Dược điển Việt Nam III, NXB Y học Hà Nội, Hà Nội, tr 457-459 Đỗ Trung Đàm (1996), Phương pháp xác định độc tính cấp thuốc, NXB Y học Hà Nội, Hà Nội, tr 7-20 Tạ Văn Bình (2004), Bệnh béo phì, NXB Y học, TP Hồ Chí Minh Viện dược liệu (1997), “Định lượng alkaloid toàn phần Sen phương pháp so màu phương pháp quang phổ tử ngoại”, Tạp chí dược liệu, 9(3), tr 79-82 Viện dược liệu (2004), Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam tập 1, NXB khoa học kỹ thuật, Hà Nội, tr 345-349, 419-424 10 Viện dược liệu (2004), Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam tập 2, NXB khoa học kỹ thuật, Hà Nội, tr 721-726 11 Võ Văn Chi (1997), Từ điển thuốc Việt Nam, NXB Y học, TP Hồ Chí Minh, tr, 186, 222-223, tr 1040-1041 77 Tài liệu tiếng Anh 12 Akira Shimotoyodome, Satoshi Haramizu, Misako Inaba, Takatoshi Murase and Ichiro Tokimitsu (2005), “Exercise and Green tea extract stimulatie fat oxidation and prevent obesity in mice”, Medicine and Science in Sports and Exercise, 10,1884-1892, 13 Bray G, Bouchard C (1997), “Genetics and human obesity: research directions”, FASEB J, 11, 937-945, 14 Coleman DL, Eicher EM (1990), “Fat (fat) and Tubby (tub): two autosomal recessive mutations causing obesity syndroms in the mouse”, J Hered, 88, 424-427, 15 H, Gerphard Vogel (ED,) (2002), Drug discovery and evaluation pharmacological assays, pp, 1053-1065, 16 Heckenlively JR, Chang B, Erway LC, Peng C, Hawes NL, Hageman GS, Roderick TH (1995), “Mouse model for Usher syndrom: linkage mapping suggests homology to Usher type I reported at human chromosome 11p15”, Proc Natl Acad Sci USA, 92, 11100-11104, 17 Jason CG Harford (2006), “Obesity drugs in clinical development”, Current Opinion in Investigation Drugs, 7(4), 312-318, 18 Jean-Philippe Chaput, Angleo Tremblay (2006), “Current and novel approaches to the drug therapy of obesity”, Eur J Clin Pharmacol, 62, 793 – 803, 19 John B Dixon (2006),“Weight loss medications, Where they fit in?”, Autarlian Family Physician, 35(8), 576 – 579, 20 Karl G, Hofbauer, Janet R, Nicholson, and Olivier Boss (2007), “The obesity epidemic current and future pharmacological treatment”, Annu, Rev, Pharmacol, Toxical,, 47(11), – 28, 21 Li-kun Han, Yi-nan Zheng, Masayuki Yoshikawa, Hiromichi Okuda and Yosh Yuki Kimura, (2005), “Anti-obesity effects of Chikusetsu 78 saponins isolated from Panax japonicus rhizomes”, complementary and Alternative medicine, 5(9),1-10, BMC 22 Marcio C, Mancini, Alfredo Halpern (2006), “Pharmacological treatment of obesity”, Arq Bras Endocrinol Metab, 50(2), 377 – 389, 23 P, Chantre and D, Lairon (2002), “Recent findings of green tea extract AR25 (Exolise) and its activity for the treatment of obesity”, Phytomedicine, 9, 3-8 24 Tomonori Nagao, Yumiko Komine, Satoko Soga, Shinichi Meguro, Tadashi Hase, Yukitaka Tanaka, and Ichiro Tokimitsu (2005), “Ingestion of a tea catechins leads to a reduction in body fat and malondialdehyde-modified LDL in men”, Am J Clin Nutr, 81, 9-122, 25 Yuka Omo, Eri Hattori, Yukikata Fukaya, Shoji Imai, Yasushi Ohizumi (2006), “Anti-obesity effect of Nelumbo nucifera leaves extract in mice and rats”, Journal of Ethnopharmacology, 106, 238244 79 ... 1. 1 TỔNG QUAN VỀ THỪA CÂN VÀ BỆNH BÉO PHÌ 1. 2 TỔNG QUAN VỀ CHÈ XANH VÀ LÁ SEN 11 1. 3 PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH ĐỘC TÍNH CẤP 19 1. 4 CÁC MÔ HÌNH THỬ TÁC DỤNG CHỐNG BÉO PHÌ 21 CHƯƠNG... cao dược liệu lên thơng số tiểu cầu 70 DANH SÁCH HÌNH Hình 1. 1 Dược liệu Chè xanh 11 Hình 1. 2 Dược liệu Sen 16 Hình 2 .1 Chuột ni lồng với đầy đủ thức ăn nước uống 24 Hình 2.2... Hình 3 .11 Sắc ký lớp mỏng cao Chè xanh (a) Sen (b) 52 Hình 3 .12 Vi phẫu gan mẫu đại diện lô chứng lô thử 71 Hình 3 .13 Vi phẫu thận mẫu đại diện lô chứng lô thử 72 CHƯƠNG TỔNG QUAN 1. 1 TỔNG