Báo cáo thực tập chuyên nghành vi sinh

Đại học Quốc Gia TP HCM Trường ĐH Khoa Học Tự Nhiên TP HCM Khoa Sinh học– Công Nghệ Sinh Học Báo cáo Thực Tập Chuyên Nghành Vi Sinh GVHD: Ths.Nguyễn Mỹ Phi Long Thành viên nhóm ca chiều – Xạ khuẩn: Nội dung I Vật liệu, phương pháp II Khảo sát khả phân giải cellulose III Khảo sát đối kháng với nấm men vi khuẩn IV Khảo sát đối kháng với nấm bệnh Phythium V Khảo sát đường cong tăng trưởng nấm mốc I Vật liệu, phương pháp Vật liệu: Mẫu ban đầu: Mẫu đất trường Đất vùng trồng dừa Tiền Giang Đất Mã Đà Đất Lâm Đồng Vật liệu phòng thí nghiệm: Bình nắp xanh 250 ml, 500ml, becher, que cấy móc, que cấy vòng, que trải tam giác, đĩa petri, ống nghiệm… I Vật liệu,phương pháp Môi trường Thành phần Môi trường Gause Môi trường PCA ISP2 Gause- CMC Tinh bột tan 20 (NH4)2SO4 2 K2HPO4 0.5 0.5 MgSO4.7H2O 0.5 0.5 KNO3 0.5 0.5 FeSO4 0.01 0.01 Cao nấm men Dịch malt 10 Dextrose Cellulose Khoai tây 10 200 I Vật liệu, phương pháp Phân lập Làm Giữ Giống Khảo sát khả phân giải Cellulose Nuôi bình dịch lỏng Đường cong tăng trưởng Đồng ni cấy nấm mốc Đục lổ thạch (nấm men, vi khuẩn) I Vật liệu,phương pháp Phân lập • Mơi trường Gause Làm • Mơi trường Gause Giữ giống • Mơi trường khoai tây- cà rốt (PCA) I Vật liệu, phương pháp CIIA2.5 CIIA2.4 Các mẫu xạ khuẩn thu CIIA2.6 CIIA2.8 CIIA2.7 Khuẩn lạc môi trường Gause Đặc điểm Hình dạng Màu Sắc Bề mặt khuẩn lạc Mép khuẩn lạc Chủng CIIA2.4 CIIA2.5 Tròn Tròn Có nhiều màu phát triển đồng tâm, Bề mặt khơ ráp, có nhung, tạo ngồi viền màu trắng- nâu đen- bạc vòng đồng tâm, nhơ lên Nâu nhạt, có chấm đen Bề mặt khơ có nhung, tiết sắc tố Bìa cưa Bìa trơn màu nâu CIIA2.6 Tròn Trắng đục, có vòng tan trắng Bề mặt khơ, nhơ lên Bìa trơn CIIA2.7 Tròn Trắng đục, có vòng tan trắng Bề mặt khơ, nhơ lên Bìa trơn CIIA2.8 Tròn Ở tâm có màu trắng đục, viền ngồi Bề mặt khơ, phần trắng nhơ có màu đen,tiết sắc tố màu xanh lên đen, có vòng tan trắng II Khảo sát khả phân giải cellulose Kết Mẫu CIIA2.4 10 II Khảo sát khả phân giải cellulose Kết Mẫu CIIA2.8 12 II Khảo sát khả phân giải cellulose Bảng tổng hợp đường kính vòng phân giải Mẫu Đường kính vòng phân giải (cm) Sau ngày Sau ngày CIIA2.4 0.6 0.5 0.5 Nhiễm mốc CIIA2.5 Khơng có Khơng có CIIA2.6 0.7 0.5 0.6 Nhiễm mốc CIIA2.7 0.7 0.5 0.6 1,4 1,4 1,5 CIIA2.8 1.9 1.9 1.7 13 II Khảo sát khả phân giải cellulose Kết luận Sau ngày khảo sát khả phân giải cellulose thấy chủng CIIA2.8 chủng có vòng phân giải lớn mơi trường Gause-CMC Tuy nhiên, quan sát hình thái nghi ngờ chủng không nên chọn CIIA2.7 để thực khảo sát 14 III Khảo sát đối kháng xạ khuẩn nấm men Kết lổ chứa dịch xạ khuẩn CIIA2.7 Saccharomyces cerevisiae t5 CIIA2.7 Saccharomyces cerevisiae t1 15 III Khảo sát đối kháng xạ khuẩn vi khuẩn Kết lổ chứa dịch xạ khuẩn lổ chứa chất kháng sinh CIIA2.7 vi khuẩn Staphylococcus aureus t1 CIIA2.7 vi khuẩn Staphylococcus aureus t5 16 III Khảo sát đối kháng xạ khuẩn với nấm men vi khuẩn Kết luận Qua kết thử nghiệm phương pháp đục lổ thạch.Ta thấy chủng xạ khuẩn CIIA2.7 phân lập từ đất Tiền Giang khơng có khả tiết kháng sinh để ức chế nấm men Saccharomyces cerevisiae vi khuẩn Staphylococcus aureus 17 IV Khảo sát đồng nuôi cấy xạ khuẩn nấm mốc Kết CIIA2.7 Phythium t3 CIIA2.7 Phythium t5 18 IV Khảo sát đồng nuôi cấy xạ khuẩn nấm mốc Kết CIIA2.7 Phythium môi trường Gause CIIA2.7 Phythium Gause (trái) ISP2 (phải) 19 IV Khảo sát đồng nuôi cấy xạ khuẩn nấm mốc Kết CIIA2.7 Phythium Gause-CMC 20 IV Khảo sát đồng nuôi cấy xạ khuẩn nấm mốc Kết luận • Chủng CIIA2.7 có kết đối kháng với nấm bệnh Phythium hay khơng tùy thuộc vào mơi trường ni cấy • Mơi trường ni cấy khác cho kết khảo sát khác 21 V Khảo sát đường cong tăng trưởng Nuôi cân sinh khối B1 Đục lấy phần thạch B1 Đục lấy phần thạch chứa sinh khối CIIA2.7 chứa sinh khối CIIA2.7 đĩa Petri đĩa Petri B2 Bỏ thạch vào bình B2 Bỏ thạch vào bình đánh dấu từ t0-t7 (100cc mt đánh dấu từ t0-t7 (100cc ISP2/bình) mt ISP2/bình) B3 Ủ bình điều kiện tĩnh B4 Lọc bình theo B6 Cân giấy lọc chứa B5 Sấy giấy lọc sinh thứ tự t0-t7 sinh khối CIIA2.7 khối tủ sấy (Cách ngày lọc t) V Khảo sát đường cong tăng trưởng Kết nuôi sinh khối Mẫu CIIA2.7 Thời gian 22/12/2017 27/12/2017 29/12/2017 3/1/2018 5/1/2018 8/1/2018 T KL sinh khối TB/T 0.0013 0.0022 0.0034 0.0037 0.006 0.0031 0.0032 0.0029 0.0096 0.0084 0.0009 0.0052 V Khảo sát đường cong tăng trưởng ĐỒ THỊ HỒI QUY TUYẾN TÍNH 0.01 f(x) = 0x - R² = 0.88 KL sinh khối T B 0.01 0.01 0.01 0 0 0 0 Sample Percentile V Khảo sát đường cong tăng trưởng Nhận xét: • -5 -5 y = 8.10 x-3.10 R² = 88,13% => Thời gian T ảnh hưởng đến 88.13% thay đổi khối lượng sinh khối CIIA2.7 • Các điểm khơng nằm đường thẳng tuyến tính Kết luận: Sinh khối CIIA2.7 khơng tăng trưởng tuyến tính Giải thích: • • Trong bảng số liệu bị T1 T4, đồ thị chưa đạt đủ 15 điểm thời gian khảo sát bị thay đổi Trong q trình bố trí thí nghiệm, lọc, sấy, cân sinh khối xảy sai sót làm ảnh hưởng đến kết cân sinh khối CẢM ƠN THẦY VÀ CÁC BẠN ĐÃ LẮNG NGHE! 26 ... thực khảo sát 14 III Khảo sát đối kháng xạ khuẩn nấm men Kết lổ chứa dịch xạ khuẩn CIIA2.7 Saccharomyces cerevisiae t5 CIIA2.7 Saccharomyces cerevisiae t1 15 III Khảo sát đối kháng xạ khuẩn vi. .. xạ khuẩn lổ chứa chất kháng sinh CIIA2.7 vi khuẩn Staphylococcus aureus t1 CIIA2.7 vi khuẩn Staphylococcus aureus t5 16 III Khảo sát đối kháng xạ khuẩn với nấm men vi khuẩn Kết luận Qua kết thử... chủng xạ khuẩn CIIA2.7 phân lập từ đất Tiền Giang khơng có khả tiết kháng sinh để ức chế nấm men Saccharomyces cerevisiae vi khuẩn Staphylococcus aureus 17 IV Khảo sát đồng nuôi cấy xạ khuẩn nấm