Nghiên cứu giải phẫu bệnh

NGHIÊN CỨU GIẢI PHẪU BỆNH VÀ HÓA MÔ MIỄN DỊCH CÁC YẾU TỐ TIÊN LƯỢNG CỦA CARCINÔM TẾ BÀO GAN

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH --------------------------- LÊ MINH HUY NGHIÊN CỨU GIẢI PHẪU BỆNH VÀ HÓA MÔ MIỄN DỊCH CÁC YẾU TỐ TIÊN LƯỢNG CỦA CARCINÔM TẾ BÀO GAN LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC TP Hồ Chí Minh -2012 i BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH ---------------------------  LÊMINHHUY NGHIÊN CỨU GIẢI PHẪU BỆNH VÀ HÓA MÔ MIỄN DỊCH CÁC YẾU TỐ TIÊN LƯỢNG CỦA CARCINÔM TẾ BÀO GAN  Chuyên ngành: Giải Phẫu Bệnh Mã số: 62.72.01.05 LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: 1. PGS.TS. HỨA THỊ NGỌC HÀ 2. PGS.TS. NGUYỄN THÚY OANH TP Hồ Chí Minh -2012 ii LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu của riêng tôi. Các số liệu, kết quả nêu trong luận án là trung thực và chưa từng được ai công bố trong bất kỳ công trình nào khác. Tác giả Lê Minh Huy iii MỤC LỤC Trang Trang phụ bìa i Lời cam đoan . ii Mục lục iii Bảng đối chiếu thuật ngữ Việt-Anh . iv Danh sách các chữ viết tắt . v Danh sách bảng . vi Danh sách biểu đồ . viii Danh sách hình viii ĐẶT VẤN ĐỀ 1 Mục tiêu nghiên cứu: . 2 CHƯƠNG 1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU . 3 1.1. Các đặc điểm có ý nghĩa tiên lượng của CTBG . 3 1.2. P53 và CTBG 20 1.3. Ki-67 và CTBG . 28 CHƯƠNG 2. ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 30 2.1. Đối tượng nghiên cứu . 30 2.2. Phương pháp nghiên cứu 31 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 42 3.1. Các đặc điểm có ý nghĩa tiên lượng của CTBG . 42 3.2. Biểu hiện của p53, Ki67 trên CTBG . 60 3.3. Mối liên quan giữa các đặc điểm có ý nghĩa tiên lượng và biểu hiện của p53, Ki67 trên CTBG 64 CHƯƠNG 4: BÀN LUẬN 81 4.1. Các đặc điểm có ý nghĩa tiên lượng của CTBG . 81 4.2. Biểu hiện của p53, Ki67 trên CTBG . 101 4.3. Mối liên quan giữa các đặc điểm có ý nghĩa tiên lượng và biểu hiện của p53, Ki67 trên CTBG 108 KẾT LUẬN 116 KIẾN NGHỊ 118 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC iv BẢNG ĐỐI CHIẾU THUẬT NGỮ VIỆT – ANH Biệt hóa rõ: well differentiated Biệt hóa vừa: moderately differentiated Biệt hóa kém: poorly differentiated Carcinôm tế bào gan: hepatocellular carcinoma Chết tế bào theo chương trình: apoptosis Chỉ số đánh giá hoạt tính mô học: Histological activity index Dạng bè: trabecular variant Dạng đặc: compact variant Dạng giả tuyến: pseudoglandular variant Dạng phiến sợi: fibrolamellar variant Dạng xơ hóa: scirrhous variant Dạng khối: massive Dạng nốt: nodular Độ mô học: Histological Grade Hóa mô miễn dịch: immunohistochemistry Kháng nguyên: antigen Kháng thể: antibody Không biệt hóa: undifferentiated Nghịch sản tế bào gan: liver cell dysplasia Nghịch sản loại tế bào lớn: Large cell dysplasia Tế bào khổng lồ: giant cell Tế bào sáng: clear cell Tế bào dạng phồng bào: oncocyte – like cell Tế bào hình thoi: spindle cell v DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT VIẾT TẮT THUẬT NGỮ VIẾT AFP: Alpha-feto protein Anti – HbcAg: Anti – Hepatitis B core Antigen CTBG: Carcinôm tế bào gan HBV: Hepatitis B virus HCV: Hepatitis C virus HbsAg: Hepatitis B surface Antigen HE: Haematoxylin-Eosin HAI: Histological activity index HMMD: Hóa mô miễn dịch KT: Kháng thể KN: Kháng nguyên LCD: Large cell dysplasia MS: Mã số PB: Phân bào QTx400: Quang trường x400 lần vi DANH MỤC BẢNG Bảng 3.1: Nồng độ AFP trong huyết thanh 45 Bảng 3.2: Phân loại mô học theo cấu trúc mô học 47 Bảng 3.3: Phân loại mô học theo hình thái tế bào . 50 Bảng 3.4: Phân độ biệt hóa . 52 Bảng 3.5: Xâm nhập mạch máu vi thể . 54 Bảng 3.6: Biểu hiện phân bào . 55 Bảng 3.7: Hiện tượng hoại tử u . 56 Bảng 3.8: Tương quan giữa nghịch sản với mức độ viêm gan và xơ gan 60 Bảng 3.9: Biểu hiện của p53 trong khối u 61 Bảng 3.10: Biểu hiện của Ki67 trong chủ mô và trong khối u 64 Bảng 3.11: Tương quan p53 và hoại tử u . 65 Bảng 3.12: Tương quan p53 và phân bào 65 Bảng 3.13: Tương quan p53 và độ biệt hóa . 66 Bảng 3.14: Tương quan p53 và xâm nhập mạch máu . 67 Bảng 3.15: Tương quan p53 và Ki-67 67 Bảng 3.16: Tương quan p53 và tuổi . 68 Bảng 3.17: Tương quan p53 và giới . 68 Bảng 3.18: Tương quan p53 và tình trạng viêm gan siêu vi . 69 Bảng 3.19: Tương quan p53 và nồng độ AFP . 69 Bảng 3.20: Tương quan p53 và vị trí u 70 Bảng 3.21: Tương quan p53 và số lượng u 70 Bảng 3.22: Tương quan p53 và kích thước u . 70 Bảng 3.23: Tương quan p53 và cấu trúc mô học . 71 Bảng 3.24: Tương quan p53 và tình trạng hoại tử u 71 Bảng 3.25: Tương quan Ki67 trong chủ mô và tình trạng nghịch sản tế bào gan . 72 Bảng 3.26: Tương quan Ki67 và phân bào 73 Bảng 3.27: Tương quan Ki67 và độ biệt hóa . 73 Bảng 3.28: Tương quan Ki67 và tuổi . 74 Bảng 3.29: Tương quan Ki67 và giới . 74 Bảng 3.30: Tương quan Ki67 và tình trạng nhiễm siêu vi 75 Bảng 3.31 : Tương quan Ki67 và nồng độ AFP . 75 Bảng 3.32: Tương quan Ki67 và vị trí u 76 Bảng 3.33: Tương quan Ki67 và số lượng u 76 vii Bảng 3.34: Tương quan Ki67 và kích thước u . 77 Bảng 3.35: Tương quan Ki67 và cấu trúc mô học . 77 Bảng 3.36: Tương quan Ki67 và tình trạng xâm nhập mạch máu 77 Bảng 3.37: Tương quan Ki67 và loại tế bào u . 78 Bảng 3.38: Tương quan Ki67 và tình trạng hoại tử u 79 Bảng 4.1: So sánh tuổi trung bình của bệnh nhân CTBG giữa các nghiên cứu . 82 Bảng 4.2: So sánh tỷ lệ giới tính bệnh nhân CTBG với các tác giả . 84 Bảng 4.3: So sánh tuổi trung bình nam, nữ với các nghiên cứu khác 85 Bảng 4.4: So sánh với các nghiên cứu khác về tỷ lệ nhiễm virút viêm gan 86 Bảng 4.5: So sánh tuổi trung bình bệnh nhân nhiễm HBV, bệnh nhân nhiễm HCV với các nghiên cứu khác . 87 Bảng 4.6: So sánh kích thước u với các nghiên cứu khác 91 Bảng 4.7: So sánh cấu trúc mô học với các nghiên cứu khác . 92 Bảng 4.8: So sánh độ biệt hóa với các nghiên cứu khác . 94 Bảng 4.9: So sánh mức độ biểu hiện p53 trên mô u với các nghiên cứu khác 105 Bảng 4.10: So sánh tương quan giữa p53 và độ biệt hóa với các nghiên cứu khác 108 Bảng 4.11: So sánh tương quan giữa p53 và xâm nhập mạch máu với nghiên cứu khác 110 viii DANH MỤC BIỂU ĐỒ Biểu đồ 3.1. Phân bố tuổi của CTBG . 42 Biểu đồ 3.2: Phân bố giới & tuổi của CTBG . 43 Biểu đồ 3.3: Phân bố tỷ lệ nhiễm virút viêm gan 44 Biểu đồ 3.4: Vị trí u . 45 Biểu đồ 3.5: Phân bố tỷ lệ kích thước u theo nhóm 47 Biểu đồ 3.6: Tình trạng nghịch sản của mô gan xung quanh u . 57 Biểu đồ 3.7: Mức độ viêm của chủ mô gan trên bệnh nhân CTBG . 58 Biểu đồ 3.8: Mức độ xơ hóa của chủ mô gan trên bệnh nhân CTBG 59 Biểu đồ 3.9: Mối tương quan p53 và các yếu tố có ý nghĩa tiên lượng khác …………………………80 Biểu đồ 3.10: Mối tương quan Ki67 và các yếu tố có ý nghĩa tiên lượng khác………… 80 DANH MỤC HÌNH Hình 1.1: Đại thể dạng khối 07 Hình 1.2: Đại thể dạng nốt 07 Hình 1.3: Đại thể dạng lan tỏa 07 Hình 1.4: CTBG biệt hóa rõ 10 Hình 1.5: CTBG biệt hóa vừa . 11 Hình 1.6: CTBG biệt hóa kém 11 Hình 1.7: CTBG không biệt hóa . 11 Hình 1.8: Tế bào u xếp dạng bè 14 Hình 1.9: Tế bào u sắp xếp cấu trúc giả tuyến 14 Hình 1.10: Tế bào u sắp xếp cấu trúc đặc 14 Hình 1.11: CTBG dạng sợi mảnh . 15 Hình 1.12: Cấu trúc gen p53 . 19 Hình 1.13: Cấu trúc protein p53 . 20 Hình 1.14: Biểu hiện dương tính của p53 trên CTBG so với mô gan không u . 26 Hình 1.15; 1.16, 1.17, 1.18: Biểu hiện của p53 trên tiêu bản nhuộm hóa mô miễn dịch . 27 Hình 3.1: CTBG với 1 khối u đơn độc trên nền mô gan không xơ 46 Hình 3.2: CTBG với 1 khối u đơn độc trên nền xơ gan 46 Hình 3.3: CTBG với 1 khối u lớn và nhiều nốt vệ tinh . 46 Hình 3.4: CTBG với nhiều khối u 46 Hình 3.5: CTBG loại bè nhỏ . 48 Hình 3.6: CTBG loại bè lớn 48 ix Hình 3.7: CTBG loại đặc . 49 Hình 3.8: CTBG loại giả tuyến . 49 Hình 3.9: CTBG loại xơ hóa . 49 Hình 3.10: CTBG loại điển hình 50 Hình 3.11: CTBG loại tế bào sáng . 51 Hình 3.12: CTBG loại tế bào hình thoi 51 Hình 3.13: CTBG loại phồng bào 51 Hình 3.14: CTBG loại hỗn hợp 52 Hình 3.15: CTBG biệt hóa rõ . 53 Hình 3.16: CTBG biệt hóa vừa . 53 Hình 3.17: CTBG biệt hóa kém 53 Hình 3.18: CTBG không biệt hóa 54 Hình 3.19: Xâm nhập mạch máu 55 Hình 3.20: Phân bào trong khối u . 56 Hình 3.21: Hiện tượng hoại tử trong khối u 57 Hình 3.22: Nghịch sản tế bào gan ở chủ mô gan . 58 Hình 3.23: Biểu hiện âm tính của p53 61 Hình 3.24: Biểu hiện dương tính 1+ của p53 62 Hình 3.25: Biểu hiện dương tính 2+ của p53 62 Hình 3.26: Biểu hiện dương tính 3+ của p53 62 Hình 3.27: Biểu hiện dương tính của Ki-67 trong chủ mô gan 64 Hình 3.28: Biểu hiện dương tính của Ki-67 ở tế bào u . 64 [...]... tuổi ở các nước Âu Mỹ Lứa tuổi mắc bệnh cũng có sự tương phản rõ ràng: vùng có nguy cơ thấp, bệnh thường ở độ tuổi 60 đến 70 tuổi; vùng có nguy cơ cao bệnh thường gặp ở độ tuổi 30 đến 40 tuổi Tuổi càng cao tiên lượng của bệnh nhân CTBG càng kém, nhất là khi xảy ra trên những bệnh nhân có các bệnh như tim mạch, đái tháo đường,…[8], [16], [32], [99] Theo một nghiên cứu ở Nhật, tỉ lệ CTBG cũng có xu hướng... nghiên cứu tại Nhật thấy các bệnh nhân CTBG nhiễm HCV (42% tái phát sau 5 năm) có tiên lượng sống tốt hơn so với các bệnh nhân CTBG nhiễm HBV (54% tái phát sau 5 năm) [93], [145] 5 Hầu hết các bệnh nhân CTBG chết do suy gan Tỉ lệ tử vong ở bệnh nhân CTBG không có xơ gan, viêm gan thấp hơn các bệnh nhân có CTBG xảy ra trên nền xơ gan, viêm gan Tình trạng viêm gan, xơ gan làm cho chức năng gan của bệnh. .. tăng sinh tế bào ung thư Theo nghiên cứu tại bệnh viện 108 của tác giả Trịnh Tuấn Dũng & cộng sự [1] năm 2007 thì tỉ lệ dương tính với kháng nguyên của p53 ở ung thư đại trực tràng là 54,55% Theo nghiên cứu của tác giả Nguyễn Sào Trung và cộng sự [10] trong carcinôm ống tuyến vú xâm nhập, biểu hiện của protein p53 trên mô ung thư là 27,5% và của Ki67 là 62% Theo nghiên cứu của tác giả Văn Tần và cộng... gan của phần gan còn lại xung quanh u qua mức độ xơ hóa, viêm để áp dụng vào thực tiễn là hết sức cần thiết và bức xúc hiện nay Nghiên cứu thuộc loại nghiên cứu cơ bản này nhằm đáp ứng nhu cầu điều trị và tiên lượng cho bệnh nhân ung thư tế bào gan ở Việt Nam Mục tiêu nghiên cứu: 1 Khảo sát các đặc điểm có ý nghĩa tiên lượng của CTBG 2 Đánh giá sự biểu hiện của p53, Ki67 trên CTBG 3 Xác định mối liên... ZD, Stocker JT, 2001, AFIP) Nhiều nghiên cứu đã chứng minh có sự tương quan chặt chẽ giữa độ biệt hóa và tiên lượng của bệnh nhân Bệnh nhân có độ biệt hóa càng cao tiên lượng càng xấu Tuy nhiên, cũng không ít trường hợp CTBG không theo qui luật này Ở các 12 bệnh nhân này, tiên lượng còn phụ thuộc vào nhiều yếu tố khác như tình trạng sức khỏe của bệnh nhân, tình trạng bệnh lý ở chủ mô gan, kích thước... đột biến gen p53 Thời gian sống trung bình của các trường hợp CTBG có đột biến p53 là 43 tháng Qua nghiên cứu này các tác giả cũng chứng minh được p53 có liên quan đến tiên lượng xấu của các bệnh nhân CTBG Hầu hết các nghiên cứu đều không thấy sự biểu hiện của p53 trên mô gan xung quanh khối u Theo nghiên cứu của tác giả Caruso MI và cs [20] trên 193 trường hợp CTBG, tỉ lệ dương tính của p53 trên HMMD... các bệnh nhân CTBG Hầu hết các nghiên cứu chúng tôi có được đến nay cho thấy có khoảng 22,5%-27% các trường hợp CTBG tìm thấy protein p53 bằng phương pháp hoá mô miễn dịch Trong một số nghiên cứu khác, các trường hợp có biểu hiện p53 dương tính lên đến 50% các trường hợp Kích thước u càng lớn tỉ lệ này càng tăng lên Tỉ lệ biểu hiện của p53 trong huyết thanh của các trường hợp CTBG theo nghiên cứu của... gan, xơ hóa được y văn ghi nhận [18], [20], [35], [36], [37] Điều trị và tiên lượng của bệnh nhân phụ thuộc vào giai đoạn bệnh lúc được chẩn đoán và những đặc điểm giải phẫu bệnh của khối ung thư và chức năng phần gan còn lại [27], [29], [61], [69], [86], [90], [125] Tuy nhiên, việc tiên lượng thời gian sống của bệnh nhân và sự tái phát của khối u sẽ chính xác hơn khi phối hợp nhiều yếu tố tiên lượng... và thời gian sống thêm của bệnh nhân [120], [121] Trong đó, p53, Ki67 là hai yếu tố được một số tác giả khuyến cáo sử dụng để tiên lượng cho bệnh nhân CTBG [26], [56], [59], [80], [119] Hiện nay, ở nước ta có nhiều nghiên cứu về các dấu chứng sinh học, dựa trên hóa mô miễn dịch trên ung thư đường tiêu hóa, ung thư vú, ung thư hạch, Trong những dấu chứng sinh học được nghiên cứu trên các loại ung thư... nam và hàng thứ 7 ở giới nữ trong 10 loại ung thư thường gặp nhất [1], [2] Theo nghiên cứu của Cơ quan nghiên cứu ung thư thế giới (IARC) ung thư gan đứng hàng thứ 5 trong 10 loại ung thư thường gặp nhất [53], [54] Trong ung thư gan nguyên phát, carcinôm tế bào gan (CTBG) chiếm tỉ lệ chủ yếu, từ 80-90% tùy theo các nghiên cứu khác nhau trên thế giới [137] Nhiều yếu tố tiên lượng kinh điển như tuổi, giới,