BỆNH TRÊN CÁ TRA (Pangasianodon hypophthalmus) VÀ QUẢN LÝ DỊCH BỆNH TRONG NUÔI

A: Hiện trạng ao nuôi cá tra thâm canh; B: Hình dạng cá tra Một trong những nguyên nhân làm cho diện tích và sản lượng cá tra ở vùng ĐBSCL cao là do chúng có khả năng thích nghi tốt với

BỆNH TRÊN CÁ TRA (Pangasianodon hypophthalmus)

VÀ QUẢN LÝ DỊCH BỆNH TRONG NUÔI

Từ Thanh Dung, Khoa Thủy sản, Trường Đại học Cần Thơ

MỤC LỤC

Mục lục i

Danh sách bảng ii

Danh sách hình iii

1 Tình hình nuôi cá tra ở Đồng bằng sông Cửu Long 1

2 Các bệnh thường gặp và phương pháp quản lý, chẩn đoán 2

2.1 Bệnh do vi khuẩn 3

2.1.1 Bệnh xuất huyết trên cá 3

2.1.2 Bệnh gan thận mủ trên cá tra 6

2.1.3 Bệnh trắng đuôi trên cá tra 9

2.2 Bệnh trương bụng do vi nấm 13

2.3 Bệnh do ký sinh trùng 16

2.3.1 Bệnh do ngoại ký sinh trùng 16

2.3.2 Bệnh do nội ký sinh trùng 18

2.4 Bệnh chưa rõ nguyên nhân 20

2.4.1 Hội chứng đỏ cơ 20

2.4.2 Hội chứng vàng da 20

2.4.3 Bệnh trắng gan trắng mang 21

3 Phương pháp phòng bệnh tổng hợp 21

Tài liệu tham khảo 22

DANH SÁCH BẢNG

Bảng 2.1 Đă ̣c điểm sinh hoá A hydrophila, A caviae và A Sobria 5 Bảng 2.2 Đặc điểm sinh hoá sinh lý vi khuẩn E ictaluri 8 Bảng 2.3 Đặc điểm của vi khuẩn F columnare phân lập được trên cá tra 11

DANH SÁCH HÌNH

Hình 1.1 A: Hiện trạng ao nuôi cá tra thâm canh; B: Hình dạng cá tra 1

Hình 1.2: Sản lượng và kim ngạch xuất khẩu cá tra của ĐBSCL 2

Hình 2.1: Cá tra bị xuất huyết Hình 2: Cá tra bị xuất huyết do vi khuẩn Aeromonas hydrophila va ̀ A Sobria (Nguồn: Dung et al., 2008a) 4

Hình 2.2: Khuẩn lạc và hình dạng vi khuẩn A hydrophila (Phạm Thanh Hương, 2010; Aberoum and Jooyandeh, 2010) 4

Hình 2.3 Kết quả định danh vi khuẩn A hydrophila bằng bộ kít API 20E 5

Hình 2.4 Dấu hiệu bệnh lý cá tra bị mủ gan 7

Hình 2.5: Khuẩn lạc và hình dạng vi khuẩn E ictaluri 7

Hình 2.6: Kết quả định danh vi khuẩn E ictaluri bằng bộ kít API 20E 9

Hình 2.7 Bệnh trắng đuôi do F columnare trên cá tra 10

Hình 2.8 Hình dạng vi khuẩn F columnare 13

Hình 2.9: Bệnh lý cá trương bóng hơi 15

Hình 2.10 Đặc điểm hình thái Fusarium sp 16

Hình 2.11 Sán lá đơn chủ ký sinh trên mang cá; Sán lá đơn chủ Monogenea 17

Hình 2.12 A Trùng mặt trời Trichodina spp ngoại ký sinh trên cá tra (10X); B Trùng mặt trời (40X) 17

Hình 2.13 Cá tra bị đốm trắng do trù ng quả dưa (1), quan sát trùng quả dưa dưới kính hiển vi quang học(10X) (Nguồn: Dung et al., 2008a) 18

Hình 2.14 A Cá bị bệnh gạo; B Vi bào tử trùng; C Bào tử trùng Myxobolus spp 19

Hình 2.15 Ký sinh trùng Ichthyonyctus spp ký sinh trong ruột cá tra 19

Hình 2.16 A Giun tròn trong nội tạng cá tra; B Giun đầu gai 20

Hình 2.17 Cá tra biểu hiê ̣n hội chứng vàng da 21

Hình 2.18: A Cá tra có dấu hiê ̣u trắng gan trắng mang 21

BỆNH TRÊN CÁ TRA (Pangasianodon hypophthalmus) VÀ QUẢN LÝ

DỊCH BỆNH TRONG NUÔI

Từ Thanh Dung, Khoa Thủy sản, Trường Đại học Cần Thơ

1 Tình hình nuôi cá tra ở Đồng bằng sông Cửu Long

Nghề nuôi cá tra thương phẩm ở ĐBSCL bắt đầu xuất hiện từ những năm của thập niên 1950 với quy mô nhỏ và cá nuôi chủ yếu là dựa vào nguồn cá giống sẵn có trong

tự nhiên Tuy nhiên, từ cuối thập niên 1990 nghề nuôi cá tra đã phát triển vượt bậc do

sự thành công trong việc sản xuất giống nhân tạo loài cá này cùng với các hệ thống và phương pháp nuôi đa dạng như từ nuôi đăng quầng, nuôi bè cho đến nuôi trong ao đất

Theo báo cáo của Phan et al (2009) thì cá tra đạt sản lượng kỷ lục 683 nghìn tấn với giá

trị xuất khẩu hơn 645 triệu đô la vào năm 2007, đến năm 2010 thì sản lượng cá tra là 1.141.000 tấn và đạt kim ngạch xuất khẩu khoảng 1,4 tỷ đô la (De Silva and Phuong, 2011) Trong 10 năm, từ năm 1997 đến 2007 được xem là giai đoạn hoàng kim của nghề nuôi cá tra với diện tích nuôi tăng 8 lần (từ 1.250 ha lên hơn 9.000 ha), sản lượng cá tra thương phẩm tăng 45 lần (từ 22.500 tấn lên hơn 1.200.000 tấn) và giá trị xuất khẩu tăng

50 lần (từ 19,7 triệu đô la lên đến 979.036 triệu đô la) (Hình 1.2) Tuy nhiên, sự phát triển của hệ thống nuôi bè và nuôi đăng quầng đã giảm dần theo thời gian do sự kém hiệu quả kinh tế của mô hình này như cá nuôi chậm lớn, tỉ lệ sống thấp, dễ bùng phát dịch bệnh và sự ô nhiễm nguồn nước

Hình 1.1 A: Hiện trạng ao nuôi cá tra thâm canh; B: Hình dạng cá tra

Một trong những nguyên nhân làm cho diện tích và sản lượng cá tra ở vùng ĐBSCL cao là do chúng có khả năng thích nghi tốt với điều kiện môi trường, khí hậu khắc nghiệt

và đặc biệt chúng là loài cá rất thích hợp sinh trưởng của vùng này Hiện nay, nghề nuôi

cá tra ở các tỉnh ĐBSCL chủ yếu được nuôi thâm canh trong ao đất Ngoài ra, cá tra có thịt ngon và được ưa chuộng bởi người tiêu dùng của nhiều nước trên thế giới Hiện tại,

cá tra đã được nuôi thâm canh ở hầu hết các tỉnh ở ĐBSCL, trong đó An Giang, Đồng Tháp và Cần Thơ là các tỉnh có diện tích và sản lượng cá tra lớn nhất của vùng Theo báo cáo thì phần lớn (trên 90%) sản lượng cá tra nuôi ở nước ta được chế biến và xuất khẩu Hiện tại, cá tra nước ta đã được xuất khẩu sang hơn 180 quốc gia và vùng lãnh thổ

trên thế giới (Nguyễn Thanh Phương và ctv., 2015) Tuy nhiên, trong những năm gần

đây, việc sản xuất và tiêu thụ cá tra ở ĐBSCL gặp nhiều khó khăn do giá nguyên liệu

B

A

giảm nhưng diện tích và sản lượng cá tra vẫn duy trì ở mức cao, theo đó diện tích nuôi hiện nay khoảng 5.100 ha, sản lượng nuôi dao động từ 1,1-1,2 triệu tấn/năm và kim ngạch xuất khẩu đạt khoảng 1,8 tỉ đô la/năm

Hình 1.2: Sản lượng và kim ngạch xuất khẩu cá tra của ĐBSCL giai đoạn

1997-2014 (Nguyễn Thanh Phương và ctv., 2015)

2 Các bệnh thường gặp và phương pháp quản lý, chẩn đoán

Cá tra (Pangasianodon hypophthalmus) là 1 trong những loài cá da trơn nước ngọt

có giá trị kinh tế cao được nuôi phổ biến ở vùng Đồng bằng sông Cửu Long (ĐBSCL), cung cấp thực phẩm trong nước và là mặt hàng xuất khẩu thủy sản quan trọng (Hình 1.1) Tuy nhiên, trong những năm gần đây, việc sản xuất và tiêu thụ cá tra đang phải đối mặt với nhiều khó khăn và thách thức do giá cả bấp bênh, thị trường xuất khẩu không

ổn định và việc thâm canh hóa với mật số nuôi cao đã làm cho bệnh trên cá xảy ra thường

xuyên hơn (Dung et al., 2008; Le and Cheong, 2010) Hiện tại, các nhà khoa học đã xác

định vi khuẩn, KST và vi nấm là 3 tác nhân gây bệnh gây bệnh truyền nhiễm thường

hay xuất hiện trên cá tra nuôi ở ĐBSCL (Crumlish et al., 2002; Dung et al., 2008; Nguyễn Thị Thu Hằng và ctv., 2008; Từ Thanh Dung và ctv., 2012) bao gồm các bệnh

do vi khuẩn (Edwardsiellla ictaluri, Aeromonas hydrophila, Flavobacterium

columnare), nấm Fusarium sp, ký sinh trùng ngoại ký sinh (Trichodina spp., Ichthyophthirius multifiliis, Apinosoma spp., Epistylis sp và Thaparocleidus spp.), nội

ký sinh (Microsporidian, Myxobolus spp., Henneguya spp.,…và các hội chứng vàng da, bệnh trắng gan trắng mang Đặc biệt trong các bệnh này, thì bệnh gan thận mủ do vi khuẩn Edwardsiellla ictaluri và bệnh xuất huyết do vi khuẩn Aeromonas hydrophila

trên cá tra là các bệnh có thể gây thiệt hại lớn về kinh tế cho người nuôi cá tra thâm canh; bệnh xuất hiện ở hầu hết các vùng nuôi và có chiều hướng gia tăng trong những năm gần đây Chính vì thế, để kiểm soát tốt dịch bệnh thì người nuôi cần phải sớm nhận biết được các dạng bệnh khác nhau, hiểu được nguyên nhân và điều kiê ̣n xuất hiện bệnh, nắm được phương pháp phòng bệnh thì mới có thể ngăn chặn được bệnh xảy ra, giảm thiệt hại

Hiện tại, các nhà khoa học đã xác định vi khuẩn, KST và vi nấm là 3 tác nhân gây bệnh thường hay xuất hiện trên cá tra nuôi ở ĐBSCL Tuy nhiên, cho đến nay trên thế giới chưa có báo cáo chính thức nào công bố cho thấy sự xuất hiện của virut gây bệnh

trên cá tra Việt Nam mặc dù trên các loài cá da trơn khác như cá nheo xanh (Ictalurus

furcatus), cá nheo (I punctatus) và cá lai giữa cá nheo xanh và cá nheo đã báo cáo là có

sự xuất hiện của virut CCV (channel catfish virus) (Hanson et al., 2004; Silverstein et

al., 2008)

2.1 Bệnh do vi khuẩn

Vi khuẩn là một trong những tác nhân gây bệnh quan trọng, là trở ngại chủ yếu kìm hãm sự phát triển và mở rộng sản xuất trong nuôi trồng thuỷ sản Hầu hết các vi khuẩn gây bệnh là một phần của hệ vi sinh vật bình thường trong môi trường (nước biển,

ao, hồ, sông rạch, ) Trong môi trườ ng nuôi thuỷ sản, đa số vi khuẩn được xem là tác nhân cơ hội Tuy nhiên, cũng có một số ít loài vi khuẩn là tác nhân khởi phát (tác nhân chính)

Cho đến nay, 3 loài vi khuẩn gây bệnh trên cá tra nuôi thâm canh ở các tỉnh ĐBSCL

đã được xác định, đó là vi khuẩn E ictaluri gây bệnh gan thận mủ, vi khuẩn A

hydrophila gây bệnh xuất huyết và vi khuẩn Flavobacterium columnare gây bệnh trắng

đuôi (Dung et al., 2008; Từ Thanh Dung và ctv., 2012) Đây là những bệnh thường hay

xuất hiện và gây nhiều thiệt hại trong quá trình nuôi cá tra

2.1.1 Bệnh xuất huyết trên cá

Mùa vụ xuất hiện

Bệnh xuất huyết là một trong những bệnh có tần số xuất hiện cao nhất trên cá tra nuôi Ở ĐBSCL, bệnh xuất hiện hầu như quanh năm, phổ biến nhất là mùa khô, lúc bị sốc do vận chuyển, ao nuôi có hàm lượng nitrite và ammonia cao, oxy hoà tan thấp Bệnh có thể xuất hiện ở tất cả giai đoạn phát triển của cá tra nuôi

b) Dấu hiệu bệnh lý

Trên cá tra, vi khuẩn A hydrophila gây bệnh xuất huyết còn được gọi là bệnh đốm

đỏ, bệnh đỏ mỏ đỏ kỳ hoặc bệnh nhiễn trùng máu (Từ Thanh Dung và ctv., 2015) Đây

là 1 trong những bệnh xuất hiện tần số cao nhất trên cá tra ở ĐBSCL (Hình 2.3) Bệnh thường xuất hiện hầu như quanh năm, đặc biệt là khi cá bị sốc, môi trường ao nuôi không

đảm bảo (Từ Thanh Dung và ctv., 2015) Bệnh xuất huyết trên cá tra thường có các biểu

hiện đặc trưng như xuất hiện các đốm xuất huyết (petechial haemorrhage) ở da, tập trung nhiều ở gốc vây, xung quanh miệng, hầu, hậu môn (Hình 2.10) Bên cạnh đó, bụng cá phình to, bên trong chứa dịch màu vàng hoặc màu hồng Các nội tạng như bóng hơi, ruột, tuyến sinh dục cũng xuất huyết Ngoài ra, gan tái nhạt, thận và tỳ tạng xưng to,

mềm nhũn, màu đỏ sậm (Ly et al., 2009; Crumlish et al., 2010; Từ Thanh Dung và ctv.,

2015)

Vi khuẩn Aeromonas spp di động có khả năng gây bệnh trên hầu hết các loài động

vâ ̣t thủy sản nước ngọt Ở cá tra, bệnh gây xuất huyết ở da, nhiều ở gốc vây, xung quanh miệng, hầu; hậu môn viêm, xuất huyết; bụng trương to có chứa dịch màu vàng hoặc hồng, các nội tạng như ruột, bóng hơi, tuyến sinh dục cũng xuất huyết (Hình 2.1); gan tái nhạt, thận, tỳ tạng xưng to, mềm nhũn, màu đỏ sậm Trường hợp cá bị bệnh nặng, cá

nhiễm ngoại ký sinh trùng hoặc nhiễm bệnh do vi khuẩn khác như Edwardsiella ictaluri

tỉ lệ hao hụt có thể rất cao >50%

Hình 2.1: Cá tra bị xuất huyết A: Dấu hiệu bên ngoài cá tra bệnh xuất

huyết B: Dấu hiệu bên trong cá tra bị xuất huyết

c) Tác nhân gây bệnh

Bệnh xuất huyết còn gọi là bệnh đốm đỏ hay bệnh đỏ mỏ đỏ kỳ Tác nhân gây bê ̣nh

là do vi khuẩn Aeromonas hydrophila loài vi khuẩn đặc thù vùng nước ngọt Ngoài ra, một số trường hợp còn phân lập được vi khuẩn A Sobria trên cá bị bệnh

Hình 2.2: A, B: Khuẩn lạc và hình dạng vi khuẩn A hydrophila; C: vi

khuẩn A hydrophila dưới kính hiển vi điện tử (Nguồn: Aberoum and

Jooyandeh, 2010)

Các loài vi khuẩn di đô ̣ng thuộc giống Aeromonad gây bệnh xuất huyết trên cá tra

là vi khuẩn Gram âm, hình que ngắn kích thước 0,5x1,0-1,5 m, hai đầu hơi tròn, đầu

có 1 tiêm mao, di động, không có nha bào, kháng với thuốc thử Vibriostat O/129 Phát triển tốt nhất ở nhiệt độ 28-30ºC trong môi trường nuôi cấy Sinh trưởng trong môi trường có độ pH 7,1-7,2 Trong môi trường dinh dưỡng thì sau 24 giờ phát triển làm đục môi trường, trên mặt có một lớp váng mỏng, nhớt, vài ngày sau màng này chìm xuống Trên môi trường thạch, khuẩn lạc tròn, rìa đều hơi lồi, ướt, nhẵn bóng, màu kem Đặc

điểm sinh hóa của loài vi khuẩn Aeromonas được thể hiện ở Bảng 2.1

Bảng 2.1 Đă ̣c điểm sinh hoá A hydrophila, A caviae và A Sobria (Buller, 2014)

Vi khuẩn gây bệnh xuất huyết được định danh bằng bộ kít API 20E (Hình 2.3) trình

bày tóm tắt kết quả định danh vi khuẩn A hydrophila dựa vào các đặc điểm về hình thái, sinh hóa và bằng bộ kít API 20E Vi khuẩn A hydrophila cho phản ứng âm tính với các

chỉ tiêu như ornithine, citrate, H2S, urease, tryptophane deaminase, indole, inositol, sorbitol, rhamnose, melibiose và arabinose Trong khi đó, vi khuẩn cho các phản ứng dương tính gồm: orthonitrophenyl galactosidase, arginine, lysine, Voges-Proskauer, gelatin, glucose, mannitol, sucrose và amygdalin

danh vi khuẩn bằng phương pháp truyền thống sử dụng bô ̣ kít API 20E để xác định đúng tác nhân gây bệnh Hiện nay, tại một số phòng thí nghiệm đã áp dụng phương pháp PCR để phát hiê ̣n bê ̣nh gan thận mủ và xuất huyết

và cho cá ăn liên tục ít nhất là 5-7 ngày Các kết quả nghiên cứu gần đây cho thấy vi khuẩn gây bệnh này đã có hiện tượng kháng thuốc, vì thế khi cá bệnh ngoài việc chẩn đoán cẩn thận, chính xác thì cần phải làm kháng sinh đồ để tìm loại kháng sinh nhạy, trị đúng liều, đúng thời gian để việc điều trị có hiệu quả hơn

Trường hợp cá ương cá giống bị bệnh xuất huyết, trị bằng thuốc kháng sinh và đưa thuốc vào cơ thể cá bằng đường miệng (trộn thuốc vào thức ăn) chỉ có kết quả khi cá mới chớm bệnh Phát hiện bệnh ở giai đoạn sớm là rất quan trọng trong điều trị; khi cá bệnh nặng, cá sẽ ăn ít hoă ̣c bỏ ăn nên việc điều trị thường sẽ không mang lại kết quả

2.1.2 Bệnh gan thâ ̣n mủ trên cá tra

a) Mùa vụ xuất hiện

Bệnh gan thận mủ xuất hiện đầu tiên vào mùa lũ năm 1998 tại các tỉnh An Giang, Đồng Tháp và Cần Thơ ở cá nuôi thâm canh; bệnh lan dần đến các vùng có nuôi cá lân cận Bệnh gan thận mủ thường xuất hiện vào mùa lũ, cao điểm vào tháng 7, 8 và 9 Trong một chu kỳ nuôi, bệnh mủ gan có thể xuất hiện trên 3-5 lần; đặc biệt những năm gần đây bệnh xuất hiê ̣n hầu như quanh năm và lây lan khắp các tỉnh có nuôi cá tra ở Viê ̣t Nam Bệnh xuất hiện trên tất cả các giai đoạn phát triển của cá tra, tỉ lệ hao hụt lớn nhất

ở giai đoạn giống, có thể gây chết đến 10-50%, tùy thuộc vào chế độ chăm sóc và quản

lý Bệnh gan thận mủ đã gây thiệt hại lớn cho người nuôi cá tra, làm tăng tỉ lệ hao hụt

và chi phí do điều trị (Ferguson et al., 2001; Dung et al., 2004)

b) Dấu hiệu bệnh lý

Khi cá mới nhiễm bệnh thì dấu hiệu bệnh bên ngoài không rõ ràng (Hình 3); cá bệnh tách đàn bơi lờ đờ, đôi lúc cá giảm ăn; cá bệnh nặng bỏ ăn và tỉ lệ chết cao (Dung

et al., 2008a) Cá bị bệnh xuất hiện nhiều đốm trắng đục kích cở 1-3 mm trên gan, thận

và tỳ tạng (Hình 2.4) Quan sát mô bệnh học nhuộm H&E (Haematoxylin & Eosin) dưới kính hiển vi ở gan, thận và tỳ tạng cho thấy các vết tổn thương đặc trưng bởi sự hoại tử nội tạng gan thận tì tạng, nhiều vùng bị xung huyết ở động mạch và tĩnh mạch gan Nhiều cụm vi khuẩn xuất hiện ở rìa các vết thương ở các cơ quan nội tạng này Tuy

nhiên, ở giai đoạn đầu của bệnh thì những đốm trắng nhỏ li ti chỉ xuất hiện trên thận hoặc tỳ tạng của cá

Hình 2.4 A: Giai đoạn đầu cá tra bệnh gan thận mủ biểu hiện bên ngoài không rõ ràng; B: Cá tra bệnh gan thận mủ nội tạng biểu hiện nhiều đốm trắng

c) Tác nhân gây bệnh

Vi khuẩn Edwardsiella ictaluri là tác nhân chính gây ra bệnh gan thận mủ

(Ferguson et al., 2001; Crumlish et al., 2002) Vi khuẩn E ictaluri gây bệnh chủ yếu ở

cá da trơn nuôi thâm canh Vi khuẩn E ictaluri phân lâ ̣p được đầu tiên ở cá nheo Mỹ (Ictalurus furcatus) gây bê ̣nh nhiễm trùng máu (Hawke, 1979), cá trê trắng (Clarias

batrachus) ở Thái lan (Kasornchandra et al., 1987), cá tra (Pangasianodon hypophthalmus) ở Việt Nam và Indonesia (Dung và ctv., 2004, Yuasa et al., 2003) và

trên một số loài cá da trơn khác

Vi khuẩn E ictalluri là vi khuẩn Gram âm, có dạng que, mảnh và có kích thước

biến đổi (0,75x1,5-2,5µm), phát triển tốt ở 26-28oC, di động yếu hoă ̣c không di động khi nhiệt độ >30oC

Hình 2.5: Khuẩn lạc và hình dạng vi khuẩn E ictaluri, A Sự phát triển của vi

khuẩn E ictaluri trên môi trường TSA sau 48 giờ ủ ở 28oC B Vi khuẩn E ictaluri

nhuộm Gram (100X) C Vi khuẩn dưới kính hiển vi điện tử (Nguồn: http://microgen.ouhsc.edu)

Vi khuẩn E ictalluri lên men trong môi trường O/F glucose, phản ứng catalase

dương tính, phản ứng cytochrome oxidase âm tính Nhìn chung, các đặc điểm sinh hoá

của vi khuẩn E ictaluri cho hầu hết các phản ứng âm tính, chỉ có 2 phản ứng dương tính

là Lysine và Glusose (Bảng 2.2)

Bảng 2.2 Đặc điểm sinh hoá sinh lý vi khuẩn E ictaluri (Buller, 2014)

Axit hoá từ:

Nhân đen (black centres)

Vi khuẩn E ictaluri bằng bộ kít API 20E (Hình 2.6) trình bày kết quả định danh vi khuẩn E ictaluri dựa vào các đặc điểm về hình thái, sinh hóa và bằng bộ kít API 20E

Vi khuẩn này đều cho phản ứng âm tính với các chỉ tiêu được kiểm tra như orthonitrophenyl galactosidase, arginine, ornithine, citrate, H2S, urease, tryptophane deaminase, indole, gelatin, mannitol, inositol, sorbitol, rhamnose, sucrose, melibiose, amygdalin và arabinose Trong khi đó, các chủng vi khuẩn chỉ cho phản ứng dương tính với lysine, Voges-Proskauer và glucose

ONPG ADH LDC ODC CIT H2S URE TDA IND VP

Trong quá trình nuôi nên định kỳ kiểm tra sức khỏe cá Thu ngẫu nhiên 6-10 con

cá (cá khỏe, cá lờ đờ) trong ao nuôi, tiến hành mổ và quan sát các đốm trắng ở gan, thận,

tỳ tạng Bên cạnh, lấy mẫu bệnh phẩm của các cơ quan cấy trên đĩa môi trường BHIA (Brain Heart Infusion Agar), môi trường máu hoặc môi trường tổng quát TSA (Tryptic Soy Agar) trong điều kiện tiệt trùng Ngoài ra, có thể sử du ̣ng môi trường đă ̣c thù EIA

(Edwardsiella ictaluri agar) để tránh trườ ng hợp ta ̣p nhiễm Những khuẩn lạc màu trắng

li ti đường kính 2 mm của vi khuẩn E ictaluri sẽ phát triển trên bề mặt thạch sau khi ủ

trong tủ ấm ở nhiệt độ 28oC trong 48 giờ Chẩn đoán bệnh có thể dựa vào dấu hiệu bệnh

lý, kết quả phân lập và xác định đặc điểm sinh lý sinh hóa bằng bộ kít API 20E Ngoài

ra, dựa trên phương pháp PCR có thể phát hiện bệnh nhanh và ở giai đoạn sớm

khuẩn E ictaluri gây bệnh gan thận mủ đã kháng với nhiều loại kháng sinh sử dụng

trong thủy sản cho nên việc lập kháng sinh đồ trước khi cho ̣n thuốc tri ̣ bê ̣nh là rất cần thiết Không sử dụng thuốc kháng sinh mà vi khuẩn này đã kháng ví dụ như Colistin,

Oxytetracyclin, Oxolinic acid và Sulphonamides …để trị bệnh gan thâ ̣n mủ (Dung et

al., 2008b) và không tùy tiện kết hợp nhiều loại kháng sinh cùng một lúc (không điều

trị bao vây, tùy tiện)

Hiện nay, vaccine đầu tiên phòng bệnh gan thận mủ trên cá (chống vi khuần

E.ictaluri) được cấp giấy phép thông hành:“ALPHA JECT® Panga 1” (licenses 4/2013)

2.1.3 Bệnh trắng đuôi trên cá tra

a) Mùa vụ và điều kiện xuất hiện

Bệnh trắng đuôi xuất hiện gây hao hụt rất cao ở giai đoạn ương (cá nhỏ) nhất là

cá Cá giống cá bị sốc do vận chuyển hay nhiệt độ môi trường tăng cao bị bệnh này nhiều (Bader, 2006; Kunttu et al., 2009) Các yếu tố môi trường thuận lợi nhưng cá bị sốc hoặc

bị xây xát, tổn thương,… là nguyên nhân làm giảm khả năng đề kháng của cá đối với mầm bệnh đồng thời mầm bệnh dễ dàng xâm nhập vào cơ thể, tăng mật số gây bệnh Tùy vào mùa mà mức độ thiệt hạikhác nhau; nhiều nghiên cứu trước đây cho rằng bệnh xảy ra suốt các mùa trong năm; nhiều nghiên cứu đã ghi nhận thời điểm mùa hè, khi nhiệt độ nước tăng và mật độ cá cao trong ao ương được xem là lúc gây hại và lây lan cao nhất

b) Dấu hiệu bệnh lý

Cá bị bệnh trắng đuôi thường bơi lội lờ đờ gần mặt nước và có thể nhìn thấy vệt

trắng ở đuôi Cá bị bệnh có thể giảm ăn hoặc bỏ ăn Cá bệnh trắng đuôi do vi khuẩn F

columnare có dấu hiệu bệnh lý đặc trưng gồm 2 dạng (i) cá bệnh nhẹ thì da có có vệt

trắng ở thân và cuốn đuôi, trên vây nhiều nhớt và cụm màu vàng do vi khuẩn bám lên,

ở mang có màu đỏ xẩm hoặc hồng nhạt, đối với mang từ màu đỏ đậm đến hồng nhạt; (ii) cá bệnh nặng có dấu hiệu bệnh lý trầm trọng hơn như có nhiều vệt trắng ở thân và lưng đồng thời mất nhớt, vây tưa rách, đuôi mòn cụt và mang có màu xám trắng và hoại

tử, đôi khi vết loét hình thành ăn sâu vào bên trong cơ cá (Hình 2.7)

Hình 2.7 Bệnh trắng đuôi do F columnare trên cá tra (Từ Thanh Dung và ctv., 2012)

c) Tác nhân gây bệnh

Theo Dung và ctv (2012) thì bệnh trắng đuôi do vi khuẩn Flavobacterium

columnare (trước đây vi khuẩn này có tên là Flexibacter columnaris) gây ra Vi khuẩn

này dạng sợi (Myxobacterial) ngoại ký sinh, gây tổn thương chủ yếu trên da và mang cá

tra Theo USDA (2003) và Holt et al (1975) thì ở Mỹ vi khuẩn F columnare gây thiệt

hại hơn 70% trại ương nuôi cá nheo; khả năng gây hao hụt cá có thể lên đến 100% Cá tra bị bệnh này thường hao hụt rất lớn ở giai đoạn nhỏ (<100g); đặc biệt sau khi vận chuyển cá hương, cá giống, cá bị xây xát do vận chuyển hay stress do thay đổi điều kiện môi trường Cá bị nhiễm bệnh chết nhanh trong thời gian từ 2-4 ngày sau khi biểu hiện bệnh lý; tỉ lệ cá chết qua ghi nhận là ở bể khoảng 80-100% và ở ao là 35-60% (Dung và

ctv., 2012)

Vi khuẩn F columnare không phát triển trên môi trường chung TSA và Nutrient

agar mà chỉ phát triển trên môi trường chọn lọc đặc trưng như môi trường Cytophaga

agar, Hsu-Shotts agar và Shieh agar, các môi trường này có điểm chung là nghèo dinh dưỡng Sau thời gian ủ 24-48 giờ và nhiệt độ là 25-28oC thì khuẩn lạc phát triển có sắc

tố vàng, rìa dạng rễ, bám chặt và sâu vào nền môi trường thạch Vi khuẩn F columnare

thuộc vi khuẩn Gram âm, hình que, dài và mảnh, kích thước vi khuẩn (0,5-1,0x4-10

µm) So với nhiều loài vi khuẩn khác thì F columnare tương đối dài hơn nhưng mảnh hơn như E ictaluri (0,75x1,5-2,5 µm) Vi khuẩn F columnare hoạt động rất mạnh, di

động trượt, có khả năng hấp thu Congo red, phản ứng flexirubin, thủy phân gelatin,

không tạo acid từ các loại đường (Inglis et al., 1993; Dung và ctv., 2012)

Bảng 2.3 Đặc điểm của vi khuẩn F columnare phân lập được trên cá tra

Hình dạng Dài, mảnh Dài mảnh Flexirubin + +

nhiễm F columnare có thể kiểm tra mẫu tươi trên da và mang cá bệnh (tốt nhất là vị trí

vết thương), quan sát vi khuẩn dưới kính hiển vi (100X) sẽ thấy sự hiện diện lượng lớn

vi khuẩn hình que dài mảnh kích thước (0,5-1,0x4-10 µm) gom dính lại thành từng cụm

ở da và mang dạng sợi mảnh giống như đám cỏ (vì thế bệnh này còn được gọi là

“Columnaris disease”)

Phân lập vi khuẩn bằng cách thu những mẫu cá bệnh và lấy mẫu vi sinh cấy trên môi trường Cytophaga agar (CA) và môi trường Tryptone-yeast extract-gelatin medium (TYG) ở 28oC trong 36-48 giờ Định danh vi khuẩn dựa vào những đặc điểm như (i) sự bám chặt trên môi trường nuôi cấy; (ii) khuẩn lạc từ màu vàng chuyển sang màu hồng trong môi trường nuôi cấy với sự có mặt của 3% NaOH; và (iii) sản xuất ra enzyme

chondroitinase