Tiểu luận vi sinh vật học nghiên cứu vi khuẩn cố định đạm với kiến thức được mở rộng giúp ích cho học sinh, sinh viên và giáo viên. Nhận thấy được tầm quan trọng, thiết yếu của vi sinh vật cố định đạm đối với nông nghiệp nói chung và nông dân nói riêng, tác giả đã tìm hiểu nhiều tài liệu nhằm giúp học sinh, sinh viên và các giáo viên tìm hiểu mở rộng kiến thức chuyên môn cũng như đời sống của mình
Đề tài: Nghiên cứu chế cố định Nitơ vi khuẩn cố định đạm Rhizobium họ đậu ứng dụng Phần I: Phần mở đầu Lý chọn đề tài Mục đích nghiên cứu Mục tiêu nghiên cứu Nội dung 4.1 Khái quát trình cố định đạm 4.2 Tổng quan vi khuẩn cố định đạm Rhizobium 4.3 Ứng dụng Ý nghĩa lý luận thực tiễn Phần II: Nội dung Khái quát trình cố định đạm Tổng quan vi khuẩn cố định đạm Rhizobium 2.1 Đặc điểm vi khuẩn Rhizobium 2.2 Cơ chế cố định đạm vi khuẩn Rhizobium 2.2.1 Sự hình thành nốt sần rễ họ đậu 2.2.2 Enzym Nitrogenase 2.2.3 Cơ chế cố định đạm 2.3 Các yếu tố ảnh hưởng đến trình cố định đạm 2.4 Vai trò vi khuẩn Rhizobium Ứng dụng Ý nghĩa lý luận thực tiễn Phần III: Kết luận đề nghị Tài liệu tham khảo I Phần mở đầu Lí chọn đề tài Nitơ nguồn dinh dưỡng quan trọng thiếu động vật, thực vật loài vi sinh vật Dự trữ nitơ tự nhiên lớn, riêng khơng khí, nitơ chiếm 78,16% Người ta ước tính rằng, bầu khí chứa tới 4x105 nitơ, km2 đất đai có khoảng 8.000.000 nitơ Số lượng nitơ đủ thỏa mãn cho nhu cầu nitơ trồng mảnh đất (với thu hoạch 20 tạ/hecta) khoảng 80 triệu năm Thế trồng lại khơng có khả đồng hóa trực tiếp nguồn nitơ lớn lao Sở dĩ khơng khí, phân tử nitơ tồn trạng thái liên kết hai nguyên tử nitơ lại với nhờ ba dây nối bền vững (N≡N) Mặc dù cần nguyên tố hấp thụ nitơ dạng NO3- NH4+ Để sử dụng nguồn nitơ lớn từ không khí có hai đường hóa học sinh học Trong đường hóa học, người phải cung cấp điều kiện để phá vỡ liên kết ba nhiệt độ cao (khoảng 1000oC), áp suất lớn (vài trăm đến 1000 atm),lại đòi hỏi nhiều chất xúc tác thiết bị đắt tiền hiệu khơng cao Năm 1995, phân đạm hóa học sản xuất khoảng 20 triệu tấn; năm 2013, sản xuất 198,4 triệu Bằng cách bón phân nitơ người trả lại cho đất 50% Ngoài ra, việc sủ dụng nhiều phân đạm vô làm cho môi trường đất nước bị ô nhiễm, hàm lượng nitrate tích lũy nhiều loại sản phẩm nông nghiệp gây ảnh hưởng đến sứ khỏe người chí gây ung thư biến dổi thành nitrite Trong đường sinh học, vi sinh vật cố định nitơ khơng khí cung cấp cho trồng Chính mà vai trò vi sinh vật cố định nitơ có ý nghĩa lớn lao nơng nghiệp nói chung đậu nói riêng Những nghiên cứu gần cho biết tổng số nitơ cố định vi sinh vật toàn giới 200 triệu tấn/năm Đặc biệt, vi sinh vật cố định đạm sống cộng sinh họ đậu (Rhizobium) đóng góp 80 triệu tấn/năm, chúng cố định 80-300 kg N/ha Từ việc nhận thấy vai trò quan trọng vi khuẩn Rhizobium đố với nông nghiệp, chọn đề tài Nghiên cứu chế cố định Nitơ vi khuẩn cố định đạm Rhizobium họ đậu ứng dụng để tìm hiểu rõ chế trình cố định đạm ứng dụng sống 2 Mục tiêu nghiên cứu - Tìm hiểu chế cố định Nitơ vi khuẩn cố định đạm Rhizobium - Tìm hiểu vai trò chế phẩm phân vi sinh có nhiễm vi khuẩn cố định đạm nông nghiệp Mục đích nghiên cứu - Hồn thiện kiến thức vi khuẩn cố định đạm sống cộng sinh họ đậu ứng dụng nơng nghiệp II Nội dung Khái quát trình cố định đạm Quá trình cố định đạm (quá trình cố định N) q trình sinh hóa đặc trưng riêng số vi sinh vật sống cộng sinh với thực vật nốt sần sống tự đất, nước Chúng sử dụng nitơ khí để chuyển thành NH3 Có thể xếp chúng thành nhóm lớn[3]: - Vi sinh vật cộng sinh, chủ yếu thuốc họ vi khuẩn nốt sần - Vi khuẩn sống tự gồm nhiều loại khác - Vi khuẩn lam Tổng quan vi khuẩn cố định đạm Rhizobium 2.1 Đặc điểm vi khuẩn Rhizobium Dựa vào tốc độ phát triển môi trường thạch đặc nhân tạo, vi khuẩn nốt sần chia thành hai loại: - Loại mọc nhanh (Rhizobium): Ví dụ Rhizobium meliloti, sống cộng sinh với đậu xanh, đậu Hà Lan, đậu tằm, Loại có chu kì sinh trưởng 2-4 Trên môi trường thạch đĩa tạo khuẩn lạc đường kính 2-4 mm sau 3-5 ngày ni cấy[1] - Loại mọc chậm (Bradyrhizobium): Bradyrhizobium japonicum sống cộng sinh với đậu tương, đậu đũa, Loại có chu kì sinh trưởng 6-8 Khuẩn lạc hình thành môi trường thạch đĩa sau 5-7 ngày nuôi cấy Đường kính khuẩn lạc nhỏ khơng q mm[1] Vi khuẩn Rhizobium loại vi khuẩn đơn bào có đất, xâm nhiễm vào rễ họ đậu tạo thành nốt sần gọi vi khuẩn nốt sần Vi khuẩn Rhizobium thuộc loại vhui khuẩn hiếu khí, có dạng hình que, kích thước 0,5-0,9 x 1,2-3 micromet Khi non có khả di động nhờ tiên mao, khơng có bào tử, sinh sản cách phân bào[1] Vi khuẩn Rhizobium thuộc loại vi khuẩn nhuộm gram âm, phát triễn tốt nhiệt độ 28-30 oC, pH 6,5-7,0 Trên môi trường đặc, Rhizobium thường tạo khuẩn lạc tròn, lồi, mép nhăn, bóng, nhầy, đục không màu Khi già vi khuẩn trở nên bất động, lúc vi khuẩn bắt màu đoạn nhuộm anilin Có lúc vi khuẩn tạo thành dạng hình cầu di động không di động Chúng sử dụng nhiều loại đường, vài axit hữu cơ, chí polysacarit làm nguồn cung cấp lượng, phát triễn mơi trường nghèo đạm[1] Hình Khuẩn lạc Rhizobium meliloti 2.2 Cơ chế cố định đạm vi khuẩn Rhizobium 2.2.1 Sự hình thành nốt sần rễ họ đậu Người chứng minh họ đậu sinh trưởng đất khơng chứa nitơ chúng có khả sử dụng nitơ khơng khí hai nhà khoa học Đức H Hellrigel H Wilfard vào năm 1886 Hai năm sau (1888), nhà khoa học Hà Lan M.W.Beijerinck phân lập loại vi khuẩn nốt sần rễ mốt số họ Đậu Ông đặt tên cho vi khuẩn bacilulus radicicola Năm 1889 đổi tên thành Rhizobium (B.Frank, 1889)[4] Nốt sần vơ hiệu Nốt sần hữu hiệu Hình Nốt sần rễ đậu Cần lưu ý loại vi khuẩn nốt sần thường xâm nhiễm vào số họ đậu, tính chuyên hóa vi khuẩn nốt sần Cũng có trường hợp vi khuẩn nốt sần xâm nhập vào loại đậu khơng đặc biệt chúng, chúng tạo nốt sần hữu hiệu cố định nitơ yếu Có khoảng 57/969 lồi họ Đậu khơng có khả tạo nốt sần Nhân tố định tính chun hóa vi khuẩn nốt sần tồn ADN chúng[2] Tính chun hóa bị dao động nhiều tác nhân: bacteriocide (meloloticin triolicin, phaseolicin ) vi khuẩn tiết ra, nâng cao tính xâm nhiễm cách đưa nhiều lần vi khuẩn vào thực vật, xử lí phóng xạ, dòng điện, conxixin [3] Con đường xâm nhiễm rễ họ đậu bắt nguồn từ lông hút, thông qua vết thương vỏ rễ Mỗi loại đậu thường tiết chung quanh rễ chất kích thích phát triễn vi khuẩn tương ứng Muốn cho trình xâm nhiễm nhanh, cần đạt tới mật độ 104 tế bào/g đất[3] Dưới ảnh hưởng vi khuẩn nốt sần, rễ họ đậu tiết enzym polygalacturonaza, phá hủy thành tế bào lơng hút giúp cho vi khuẩn xâm nhập vào rễ, lông hút vi khuẩn nốt sần tạo thành dây xâm nhập, khối chất nhầy dạng sợi[2], lơng hút chúng phát triễn thành đường xâm nhập, đường bao bọc màng mỏng xenlulaza, đường xâm nhập tiếp tục luồn sâu qua tế bào biểu bì vào đến vỏ rễ với tốc độ 5-8 Mm/s, vi khuẩn đến đâu bao bọc màng chất nguyên sinh tế bào chủ với sắc tố leghemoglobin - gần giống với hemoglobin tế bào máu, cố định oxy giúp cho vi khuẩn hiếu khí phát triễn điều kiện kị khí Ở tế bào vỏ rễ, vi khuẩn kích thích tế bào nhân lên nhanh chóng, với tham gia đoạn gen vi khuẩn, làm tế bào thành tế bào tứ bội, tế bào tứ bội phát triễn nhanh tạo thành đường xâm nhiễm chằng chịt, kết cục tạo nốt sần Trong nốt sần hữu hiệu vi khuẩn biến dạng: phình to lên (10-12 lần) có hình cơn, hình chùy, giọt nước, thể chữ V, chữ X, mà người ta gọi thể giả khuẩn (bacteroid) Trong nốt sần vô hiệu vi khuẩn có dạng hình que, kích thước bé nốt sần có màu trắng[3] Hình Hình ảnh nốt sần trình vi khuẩn nốt sần xâm nhập vào rễ Vi khuẩn nốt sần hữu hiệu thường tạo nên nốt sần lớn tập trung rễ đậu Còn vi khuẩn vơ hiệu thường tạo nên nốt sần nhỏ phân tán khắp rễ Nốt sần tạo nên vi khuẩn hữu hiệu thường có màu hồng, sắc tố hồng thuộc loại heamin Sắc tố tồn tế bào tế bào thực vật tế bào vi khuẩn Ở đậu năm kết thúc trình cố định nitơ, người ta nhận thấy màu hồng nốt sần chuyển thành màu lục Khi số dây nối metin vòng pocrhirin sắc tố bị rách liên kết oxy Ở đậu nhiều năm, tượng không xảy ra[2] Ở nốt sần trưởng thành, người ta thấy rõ ba vùng sau đây: - Vỏ nốt sần: Gồm vài lớp té bào không bị vi khuẩn xam nhiễm Những tế bào thường có kích thước nhỏ tế bào vỏ rễ Sau hình thành vỏ nốt sần phần vỏ rễ bị nát đi, lại dính vào bên ngồi phần vỏ nốt sần[2] - Vùng phân cắt mạnh mẽ: Vùng gồm tế bào không bị xâm nhiễm, nằm bên lớp vỏ nốt sần Từ tế bào vùng sau phân hóa tạo thành tế bào vỏ nốt sần, tế bào chứa vi khuẩn tế bào mạch dẫn[2] - Vùng mô bị xâm nhiễm: Trong vùng tế bào chứa vi khuẩn nằm xen lẫn với các- tế bào không chứa vi khuẩn Thể tích tế bào chưa vi khuẩn lớn gấp lần so với tế bào không chứa vi khuẩn[2] - Hệ thống mạch dẫn nốt sần: Khi nốt sần bắt đầu phát triển, số tế bào nằm phần vỏ nốt sần phần mơ bị xâm nhiễm phân hóa phân cắt thành tế bào mạch dẫn nốt sần Về sau mạch dẫn liên kết với hệ thống mạch dẫn rễ cây[2] 2.2.2 Enzym Nitrogenase Nitrogenase chứa loại protein molybdoferredoxin azoferredoxin Ở hầu hết vikhuẩn, điện tử chuyển từ NAD(P)H pyruvate đến ferredoxin, FeS protein Nếu Fe ferredoxin thiếu thay flavodoxin, flavoprotein Azoferredoxin chuyển điện tử từ khử flavodoxin (hoặc ferrodoxin) đến molybdoferredoxin[5] Molybdoferrodoxin tetramer gồm chuỗi alpha chuỗi beta Các tiểu đơnvị alpha beta tương tự khác mã hóa gen hai gen khácnhau (nifK nifD) Mỗi tetramer chứa nguyên tố Mo nhiều nhóm FeS Molypden phần cofactor phân tử trọng lượng thấp có chứa Mo liên kết với cụm Fe7S8 homocitrate Cofacter MoFe cố định đạm khác vớicác cofactor Mo-protein Mo protein khác (như nitrate reductase, xanthineoxidase)[5] Azoferredoxin dimmer tiểu đơn vị giống mã hóa gen nifH chưa nhóm Fe4S4 cho dimmer Azoferrdoxin biến đổi NifM protein Molybdoferrodoxin từ chi (gennus) thường tương tác với azoferredoxin từ chi khác cho hoạt động enzym Hai loại protein có nhiều tên khác nhau[5]: Molybdoferredoxin = thành phần I, MoFe protein, "nitrogenase" Azoferredoxin = thành phần II, Fe protein, "reductase nitrogenase" Một số chức cụ thể gene nif đề cập dây Cácgene mã hóa nifHDK, protein cấu trúc enzyme nitrogenase Các sản phẩm gene khác mã hóa cụm nif (nifV, nifEN, nifH) cần thiết cho tổng hợp Fe-Mo-cofactor, thành phần thiết yếu enzyme giúp cho việc gắn với chất thực phản ứng Sự hình thành cụm Fe-S nằm vị trí khác enzyme có liên quan đến vận chuyển điện tử đến cofactor (NifU, NifS) tham gia vào khía cạnh khác trưởng thành enzyme Thêm vào cụm, nằm nơi khác gene A vinelandii, bao gồm nifL và, nifA operon mã hóa cho protein điều hòa NifL NifA, protein khác tham gia vào tổng hợp cofactor nitrogenase chế biến Mo (sản phẩm operon nifB, fdxN, nifO, nifQ) NifL cản trở biểu gennif khác hàm lượng cao ammonia oxy có mặt, điều kiện tương ứng, làm cho nitrogenase không cần thiết cho tăng trưởng trở nên không hoạt động Protein NifL, mang cofactor flavin, ức chế hoạt tính NifA, lại hoạt hóa phiên mã gen nif operon khác điều kiện (Dixon, 1998) Sự diện gen nif đặc điểm vi khuẩn cố định đạm (diazotroph)[5] Các protein Nif (liên quan đến cố định nitơ) thường gọi tên gen[5]: nifJ = pyruvate flavodoxin reductase nifF = flavodoxin nifH = azoferredoxin nifM = trình chế biến NifH protein nifK, D = molybdoferredoxin nifB,N,E,V,W,Z = tổng hợp MoFe cofactor nifY = gắn MoFe cofactor nifQ = thu hút molybdenum nifA,L,R = điều hòa nifU,S = Trung tâm tổng hợp kim loại (metal center biosynthesis) nifX,T = chưa rõ chức Giảm cân Sơ đồ 2.2.2 Vai trò thành phần enzym nitrogenase 2.2.3 Cơ chế cố định đạm vi khuẩn Rhizobium Phản ứng cố định nitơ xúc tác enzym nitrogenase theo phương trình sau[5]: N2 + 8H+ + 8e- + 16 ATP → 2NH3 + H2 + 16 ADP + 16Pi Cơ chế cố định đạm tóm tắt sau (Sylvia cộng sự, 1999): - Dinitrogenase reductase nhận electron từ chất khử yếu, chẳng hạn ferrodoxin flavodoxin liên kết với hai phức hợp MgATP - Phức hợp chuyển electron lúc cho dinitrogenase - Dinitrogenase reductase dinitrogenase từ phức hợp, điện tử chuyển MgATP thủy phân thành MgADP + Pi - Dinitrogenase reductase dinitrogenase tách trình lặp lặp lại - Khi dinitrogenase nhận đủ điện tử, liên kết với phân tử N2, khử N2 thành amoni - Dinitrogenase sau nhận thêm điện tử từ dinitrogenase reductase để lập lại chu kì Các nhóm NH3 (được hấp thu dạng NH4+ hay NO3-) sau hấp thu tham gia q trình chuyển hóa chất sau[3]: - Axit α xetoglutaric + NH3 + NADPH + H+ → Axit glutamic + H2O - Axit glutamic + ATP + NH3 → Glutamine + ADP + P - Axit aspartic + NH3 → Asparagine + AMP + P-P Sơ đồ 2.2.3 Sơ đồ trình cố định nitơ phân tử 2.3 Các yếu tố ảnh hưởng đến trình cố định đạm Mối quan hệ cộng sinh vi khuẩn nốt sần họ đậu hoạt tính cố định nitơ chúng chịu ảnh hưởng số điều kiện ngoại cảnh sau đây: - Độ ẩm đất: Nốt sần thường tạo thành đất có độ ẩm khoảng 40-80% so với độ ẩm tuyệt đối Độ ẩm thích hopwh 60-70% Khi nốt sần hình thành độ ẩm có cao khơng ảnh hưởng đến hoạt động chúng Mức độ phản ứng độ ẩm tùy theo loại vi khuẩn loại Chẳng hạn Medicago mẫn cảm khơ cạn, Ornobrychis lại tạo thành nốt sần nơi có độ ẩm thấp [2] - Độ thống khí: Trong thí nghiệm trồng họ đậu với kĩ thuật tách rễ thành nhóm ni dung dịch có độ thơng khí khác người ta nhận thấy nốt sần tạo thành nhiều bình thơng khí tốt Khi thơng khí, người ta nhận thấy lượng chứa leghemoglobin nốt sần giảm cách rõ rệt Người ta nhận thấy lớp rễ sâu, số lượng nốt sần giảm [2] - Nhiệt độ: Hoạt động cố định nitơ thực mạnh mẽ phạm vi nhiệt độ xác định Phạm vi thay đổi tùy loại họ đậu Những thuộc vùng nhiệt đới có khả cố định nitơ cao lồi vùng ơn đới [2] - pH đất: Một số nghiên cứu cho biết nhiều loại đậu mọc phạm vi pH = 3,9-9,6, tạo nốt sần phạm vi pH = 4,6-8,0 [2] - Phân đạm: Khi non, chưa hình thành nốt sần việc bổ sung lượng đạm thích hợp kích thích phát triễn nốt sần Đến thời kì trưởng thành, tồn lượng nitơ dể tiêu định thường làm ức chế tạo thành nốt sần [2] - Phân lân, K: Photpho làm tăng cường hoạt động cố định nitơ vi khuẩn nốt sần Trong đó, K khơng có ý nghĩa đặc hiệu q trình cố định nitơ, làm thúc đẩy phát triển họ đậu thơng qua mà làm tăng cường hoạt động cố định nitơ [2] - Ca: Bón vơi khơng làm cải thiện pH đất mà nâng cao hàm lượng Ca đất nhờ mà tăng cường hoạt động cố định nitơ [2] - Mg, S Fe: Các yếu tố có ảnh hưởng tích cực lên tạo thành nốt sần hoạt động sống phát triễn vi khuẩn nốt sần [2] - Các nguyên tố vi lượng: Các nguyên tố vi lượng Mo, Co, V, tác động tích cực lên việc nâng cao sản lượng nâng cao hoạt động cố định nitơ [2] 2.4 Vai trò vi khuẩn Rhizobium Vai trò quan trọng vi khuẩn cố định nitơ Rhizobium khả cố định nitơ để cung cấp đạm cho trồng Bên cạnh đó, vi khuẩn Rhizobium biết đến với nhiều loại vai trò khác có ích cho trồng như: - Kích thích sinh trưởng thực vật cách tạo enzym ACC deaminase (1-aminocyclopropane-1arbonxylate deaminase), hay tạo hormone thực vật auxin, cytokinin gibberellin[5] - Giảm tác động có hại mầm bệnh cách cạnh tranh dinh dưỡng, cạnh tranh nơi cư trú hay tạo chất kháng sinh, enzym thủy phân chống lại xâm nhập kẻ thù hay cảm ứng hệ thống phòng vệ cây[5] - Ngồi ra, chúng giúp trồng hấp thu hiệu ion sắt, kẽm nguyên tố vi lượng khác[5] Ứng dụng Ở nhiều nước việc sử dụng vi khuẩn cố định đạm chủ động làm giàu nitơ cho đất trở nên phổ biến quy mô công nghiệp Trong nhà máy người ta chế loại phân chứa vi khuẩn cố định đạm như: azotobacterin, Nitragin, trước gieo chủ động nhiễm loại phân vào đất trộn với hạt giống để nhiễm vi khuẩn nốt sần Phân Nitragin sản xuất nhiều nước giới làm tăng suất làm tăng phẩm chất sản phẩm hàm lượng protein hay vitamin Ở vùng đất chưa trồng quen loại đậu đỗ sử dụng phân Nitragin tương ứng làm tăng sản lượng lên đến 50-100% Ở đất trồng quen loại đậu nhận thấy sản lượng tăng 15-25%[2] Đối với nơi chưa có cơng nghiệp chế phân vi khuẩn nốt sần, làm thủ cơng theo cách thức sau Trước mùa gieo loại đậu đó, phòng thí nghiệm nhỏ tỉnh sản xuất giống thạch nghiêng cấy vi khuẩn nốt sần chuyển trực tiếp đến hợp tác xã, nông trường Ở giống nhân lên môi trường đơn giản (chưa nước chiết đậu 5% với 1% đường kính) Sau 72 ni cấy ml mơi trường đạt tới 2800 x 106 tế bào vi khuẩn nốt sần lạc[2] Ý nghĩa lý luận thực tiễn - Trong tình tìm kiếm tài liệu, tơi thấy tài liệu tiếng việt nội dung hạn chế, thế, viết nhằm hoàn thiện kiến thức vi khuẩn cố định đạm Rhizobium chế cố định đạm chúng - Nhờ việc hiểu rõ chế này, áp dụng vào sản xuất nơng nghiệp nhằm tăng suất chất lượng sản phẩm góp phần nâng cao kinh tế III Kết luận đề nghị a Kết luận - Có nhiều loại vi sinh vật với nhiều chủng khác có khả cố định nitơ Những vi sinh vật gọi chung vi sinh vật cố định đạm - Muốn cố định nitơ, vi sinh vật phải có khả tổng hợp enzzym nitrogenase, gen nif quy định tổng hợp enzym Quá trình cố định nitơ có ý nghĩa quan trọng chu trình nitơ tự nhiên Nó có ý nghĩa trì nitơ hữu thể động vật, thực vật vi sinh vật, tức giữ vững sống Trái đất Nhờ hiểu rõ chế mà nhà khoa học tìm phương pháp sản xuất phân nitơ hóa học - Vi khuẩn cố định có nhiều ứng dụng nơng nghiệp, đặc biệt sản xuất phân vi sinh để tăng suất trồng b Đề nghị - Hiện nay, chế cố định nitơ nhiều quan điểm khác Điều cần có nghiên cứu chuyên sâu nhà khoa học nhằm thống chế cố định nitơ - Khó khăn lớn việc trì đảm bảo chất lượng Nitagin thời gian sản xuất đến sử dụng Vi khuẩn nốt sần khơng có bào tử nên dể dàng chết tỏng trình bảo quản Vì thế, cần tìm phương pháp trì đảm bảo chất lượng chế phẩm trình bảo quản, đồng thời đảm bảo việc áp dụng đại trà quuy mô lớn Tài liệu tham khảo Ngô Thế Dân, Nguyễn Ngọc Quyên, Nguyễn Kim Vũ Phân vi khuẩn nốt sần cách sử dụng cho đậu đỗ NXB Nơng Nghiệp Nguyễn Lân Dũng, Nguyễn Đình Quyến, Phạm Văn Ty, 2009 Vi sinh vật học NXB Giáo dục Hà Nội 3 Nguyễn thành Đạt, 2005 Cơ sở sinh học vi sinh vật, tập II NXB ĐHSP Hà Nội Biền Văn Minh cộng sự, 2006 Vi sinh vật học NXB Đại học Huế https://www.scribd.com/document/178275312/1TONGQUAN ... ước tính rằng, bầu khí chứa tới 4x105 nitơ, km2 đất đai có khoảng 8.000.000 nitơ Số lượng nitơ đủ thỏa mãn cho nhu cầu nitơ trồng mảnh đất (với thu hoạch 20 tạ/hecta) khoảng 80 triệu năm Thế... MgADP + Pi - Dinitrogenase reductase dinitrogenase tách trình lặp lặp lại - Khi dinitrogenase nhận đủ điện tử, liên kết với phân tử N2, khử N2 thành amoni - Dinitrogenase sau nhận thêm điện tử từ