Báo cáo tn dược liệu 2

Báo cáo thí nghiệm: ĐỊNH TÍNH ALKALOID TRONG DƯỢC LIỆU BẰNG PHẢN ỨNG HÓA HỌC VÀ BẰNG SẮC KÝ LỚP MỎNG2KIỂM NGHIỆM DƯỢC LIỆU CHỨA ALKALOID4XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG CHẤT BÉO CÓ TRONG DƯỢC LIỆU9XÁC ĐỊNH CHỈ SỐ IOD, CHỈ SỐ ACID, CHỈ SỐ XÀ PHÒNG VÀ CHỈ SỐ ESTER CỦA CHẤT BÉO11

BÁO CÁO THỰC HÀNH DƯỢC LIỆU 2

BÀI 1 ĐỊNH TÍNH ALKALOID TRONG DƯỢC LIỆU BẰNG PHẢN ỨNG HÓA

HỌC VÀ BẰNG SẮC KÝ LỚP MỎNG

I) Kết quả định tính

1 Phương pháp chiết xuất alkaloid

● Chiết xuất alkaloid bằng dung môi hữu cơ trong môi trường kiềm

● Chiết xuất alkaloid bằng nước acid

● Chiết xuất alkaloid bằng cồn acid

2 Định tính bằng thuốc thử chung: cho biết có alkaloid hay không.

❖ Theo thứ tự 1,2,3,4 là định tính alkaloid với TT Bouchardat, TT

Dragendorff, TT Valse - Mayer, TT Bertrand và ống chứng.

● Chiết xuất alkaloid bằng dung môi hữu cơ trong môi trường kiềm

● Chiết xuất alkaloid bằng nước acid

● Chiết xuất alkaloid bằng cồn acid.

3 Sắc ký lớp mỏng: cho biết có bao nhiêu alkaloid.

a) Bản sắc ký Alkaloid của Vong nem lần lượt của 3 phương pháp chiết

UV 365 nm

b) Bản sắc ký Alkaloid của dược liệu theo thứ tự 1,2,3,4 là Bách bộ, Vong nem, Lá sen, Bình vôi

UV 254nm UV 365nm TT Dragendorff

* Sự phát hiện của UV 254 nm, 365 nm và thuốc thử Dragendorff

- UV 254 nm: tắt huỳnh quang rõ rệt với hầu hết alkaloid

- UV 365 nm: phát huỳnh quang rõ rệt với hầu hết alkaloid

- Thuốc thử Dragendorff: cho vết màu vàng cam

II) Trả lời câu hỏi

1 Tại sao ở Phương pháp 1, dược liệu phải làm ẩm với NH4OH trước khi chiết, nhưng PP2 không cần qua bước làm ẩm?

- Để chuyển alkaloid dưới dạng muối trong cơ thể sinh vật thành dạng base tự do tan trong dung môi hữu cơ người ta thường ngâm tẩm mẫu trong dung dịch kiềm loãng hoặc dung dịch amoniac

- Ngoài ra, dược liệu khi được làm ẩm sẽ trương nở, giúp cho dung môi thấm vào tế bào, kéo hoạt chất ra dễ dàng hơn

2 Tại sao định tính với thuốc thử chung phải sử dụng alk dạng muối trong nước acid

- Vì các thuốc thử alkaloid kém bền trong dung dịch kiềm, nên dung dịch thử cần có môi trường từ trung tính đến acid nhẹ để có thể quan sát sự thay đổi của hoạt chất khi cho thuốc thử vào rõ ràng hơn Ngoài ra khi ở dạng muối trong nước acid, lượng tạp chất đi kèm với alkaloid cũng thấp, đảm bảo cho việc thực hiện phản ứng định tính

3 So sánh khả năng hiện màu với thuốc thử chung của các phương pháp chiết khác nhau

- Trong 3 phương pháp, phương pháp chiết xuất bằng nước acid cho kết quả với thuốc thử rõ nhất

Giải thích:

● Phương pháp 1 - Chiết xuất bằng dung môi hữu cơ trong môi trường kiềm: Dịch chiết xuất tinh khiết, lẫn ít tạp, nhưng hoạt chất chiết được cũng sẽ ít Do

đó, kết quả khi thử màu sẽ không rõ ràng

● Phương pháp 2 - Chiết xuất bằng nước acid: Alkaloid trong tự nhiên tồn tại ở dạng muối, nước trong acid sẽ hòa tan alkaloid, giúp kéo triệt để hoạt chất trong dược liệu ra dịch chiết Bên cạnh đó, các tạp hòa tan trong chloroform cũng có thể bị tách ra khác pha, giúp dịch chiết tinh sạch, cho kết quả phản ứng màu rõ ràng nhất

● Phương pháp 3 - Chiết xuất bằng cồn acid: Cồn là dung môi vạn năng, vì vậy cồn gần như chiết alkaloid và tạp chất một cách không chọn lọc, gây ra sự không rõ ràng trong kết quả phản ứng

4 Tại sao phải sử dụng dịch alk ở dạng base để định tính bằng sắc ký lớp lỏng

- Alkaloid ở dạng base có lẫn ít tạp chất, giúp phân đoạn trên sắc ký rõ ràng hơn

5 Vai trò của amoniac trong pha động SKLM?

- Amoniac là một chất kiềm yếu, được thêm vào để hệ dung môi về pKa + 2, làm gọn vết alkaloid ( tránh kéo vệt )

BÁO CÁO THỰC TẬP BUỔI 2 KIỂM NGHIỆM DƯỢC LIỆU CHỨA ALKALOID

1 Định tính bằng thuốc thử chung, thuốc thử đặc hiệu

Dược

liệu Định tính bằng thuốc thử chung Định tính bằng thuốc thử đặchiệu

Mã

tiền



Định tính strychnin

 Định tính brucin

 Phản ứng Murexid

Cà độc dược

 Phản ứng Vitali – Mori

Hoàng

đằng

2 Sắc ký lớp mỏng so với chuẩn

Trinh nữ hoàng cung

BÁO CÁO THỰC HÀNH DƯỢC LIỆU 2

BÀI KIỂM NGHIỆM TINH DẦU

1 Tìm tạp chất

Tìm H2 O Bột Na2SO4 bị chảy ướt

trong ống nghiệm có chứa tinh dầu  Tinh dầu có nước

Tìm dầu mỡ Sau khi hơ nhẹ trên bếp điện cho bay hơi hết tinh

dầu thì tờ giấy còn lại vết trong mờ  Có dầu mỡ trong tinh dầu

hơn ban đầu khi chưa cho tinh dầu vào  tinh dầu

có alcol

2 Định tính thành phần chính của một số tinh dầu

Định tính

menthol

trong tinh

dầu Bạc hà

Sau khi cho 3-5 giọt acid sulfuric đậm đặc và vài tinh thể vanilin vào xuất hiện màu đỏ cam, thêm 1 giọt nước thì chuyển sang màu tím 

có menthol trong tinh dầu

Định tính

eugenol có

trong tinh

dầu Hương

nhu, Đinh

hương

Sau thêm 2 giọt dung dịch sắt (III) clorid 3% vào dung dịch xuất hiện màu xanh rêu  có eugenol trong tinh dầu

Định tính

cineol trong

tinh dầu

Tràm

Tạo thành cineol phosphat có thể chức như kem, trắng ngà đến

đỏ cam  có cineol trong tinh dầu

3 Định tính và định lượng aldehyd trong tinh dầu Sả

Định tính

Sau khi cho dung dịch NaHSO3 bão hòa và đặt trong cốc nước đá, vừa làm lạnh vừa khuấy kỹ thì không tạo được thể chất giống như kem  phản ứng âm tính

Định lượng

aldehyd toàn

phần bằng

phương

Lagneau

- Hỗn hợp chuyển từ màu hồng sang màu vàng bền vững trong

15 phút

- Kết quả:

Hàm lượng (%) aldehyd toàn phần là: X=(a−b) x 7,6 P =

(2,2−0 ) x 7,6

1,06 =15,77 (%) Với a: số ml dung dịch KOH 0,5

N của mẫu thử b: số ml dung dịch KOH 0,5 N của mẫu trắng

P: khối lượng tinh dầu Sả

4.Soi bột

Mã tiền

Chè

Hoằng đằng

Lông che chở đơn bào

Mảnh nội nhũ

Biểu bì mang lỗ khí

Sợi mô cứng vách dày

Cà độc dược

BÁO CÁO THÍ NGHIỆM DƯỢC LIỆU XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG CHẤT BÉO CÓ TRONG DƯỢC LIỆU

1 Xác đ nh hàm l ịnh hàm lượng chất béo có trong dược liệu ượng chất béo có trong dược liệu ng ch t béo có trong d ất béo có trong dược liệu ượng chất béo có trong dược liệu c li u ệu

Kh i l ối lượng đậu phộng = 10,07 g ượng đậu phộng = 10,07 g ng đ u ph ng = 10,07 g ậu phộng = 10,07 g ộng = 10,07 g

Kh i l ối lượng đậu phộng = 10,07 g ượng đậu phộng = 10,07 g ng becher = 110,58 g

Kh i l ối lượng đậu phộng = 10,07 g ượng đậu phộng = 10,07 g ng sau cô = 112,58 g

 Kh i l ối lượng đậu phộng = 10,07 g ượng đậu phộng = 10,07 g ng ch t béo trong d ất béo trong dược liệu = 112,58 – 110,58 = 2 g ượng đậu phộng = 10,07 g c li u = 112,58 – 110,58 = 2 g ệu = 112,58 – 110,58 = 2 g

Hạt

 Hàm l ượng đậu phộng = 10,07 g ng (%) ch t béo trong d ất béo trong dược liệu = 112,58 – 110,58 = 2 g ượng đậu phộng = 10,07 g c li u = ệu = 112,58 – 110,58 = 2 g 2

10,07x100 = 19,86 (%)

2 Ki m đ nh d u m ểm định dầu mỡ ịnh hàm lượng chất béo có trong dược liệu ầu mỡ ỡ

a) Đ nh tính d u Đ u ph ng ịnh tính dầu Đậu phộng ầu Đậu phộng ậu phộng ộng

- Có nh ng tinh th không ững tinh thể không ể không màu đ y bình do s hình ở đấy bình do sự hình ất béo trong dược liệu = 112,58 – 110,58 = 2 g ự hình thành tinh th kali ể không arachidat.

b) Đ nh tính vitamin A trong d u gan cá ịnh tính dầu Đậu phộng ầu Đậu phộng

Phản ứng

Carr - Price

- Thêm vài gi t anhydrid ọt anhydrid acetic, l c đ u và nh vài ắc đều và nhỏ vài ều và nhỏ vài ỏ vài

gi t dd SbCl bão hòa trong ọt anhydrid cloroform vào h n h p ỗn hợp ợng đậu phộng = 10,07 g

xu t hi n màu xanh da ất béo trong dược liệu = 112,58 – 110,58 = 2 g ệu = 112,58 – 110,58 = 2 g

tr i kém b n ời kém bền ều và nhỏ vài

XÁC ĐỊNH CHỈ SỐ IOD, CHỈ SỐ ACID, CHỈ SỐ XÀ PHÒNG

VÀ CHỈ SỐ ESTER CỦA CHẤT BÉO

1 Ch s acid ỉ số acid ố acid

CSA =5,61 x a

Trong đó:

a : s ml dung d ch KOH 0,1 N đã dùng ối lượng đậu phộng = 10,07 g ịch KOH 0,1 N đã dùng

b: l ượng đậu phộng = 10,07 g ng ch t th tính b ng gam ất béo trong dược liệu = 112,58 – 110,58 = 2 g ử tính bằng gam ằng gam

2 Ch s xà phòng ỉ số acid ố acid

CSX= 28,05 x (a−b)

c = 28,05 x (25−11,5)

Trong đó:

a: số ml dung dịch HCl 0,5 N dùng cho mẫu trắng

b: số ml dung dịch HCl 0,5 N dùng cho mẫu thử

c: lượng chất thử tính bằng gam

3 Ch s ester ỉ số acid ố acid

Chỉ số ester được tinh theo công thức: CSE = CSX – CSA = 184,72 – 0,112 = 184, 61