Nghiên cứu thành phần alkaloid, flavonoid và hoạt tính chống oxy của lá sen nelumbo nucifera

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHỆ TP HỒ CHÍ MINH ĐỒ ÁN/ KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN ALKALOID, FLAVONOID VÀ HOẠT TÍNH CHỐNG OXY HĨA CỦA LÁ SEN NELUMBO NUCIFERA Ngành: CƠNG NGHỆ SINH HỌC Chuyên ngành: CÔNG NGHÊ SINH HỌC Giảng viên hướng dẫn : TS Nguyễn Ngọc Hồng Th.S: Nguyễn Thị Thu Hương Sinh viên thực MSSV: 1151110218 : Trần Thị Kim Ngân Lớp: 11DSH04 TP Hồ Chí Minh, 2015 LỜI CAM ĐOAN Em xin cam đoan: Đồ án cơng trình nghiên cứu thực cá nhân, thực đồng hướng dẫn khoa học Tiến sĩ Nguyễn Ngọc Hồng Thạc sĩ Nguyễn Thị Thu Hương Các số liệu, kết luận trình bày đồ án hồn tồn trung thực chưa công bố hình thức Em xin chịu trách nhiệm nghiên cứu Sinh viên Trần Thị Kim Ngân LỜI CẢM ƠN Lời xin gửi lời cảm ơn chân thành đến TS Nguyễn Ngọc Hồng Th.S Nguyễn Thị Thu Hương, giáo viên hướng dẫn, giúp đỡ tận tình, tạo điều kiện thuận lợi để tơi hồn thành đồ án Tơi xin gửi lời cảm ơn đến quý thầy cô giảng dạy khoa Công nghệ sinh học – Thực phẩm – Môi trường truyền đạt kiến thức quý cho suốt khoảng thời gian học tập Trường Đại học Công nghệ TP.HCM Tôi xin chân thành cảm ơn giúp đỡ quý báu tập thể cán bộ, anh, chị bạn Phòng thí nghiệm – Trường Đại học Cơng Nghệ TP.HCM Cuối xin gửi lời biết ơn sâu sắc tới gia đình bạn bè ln động viên, giúp đỡ suốt thời gian qua Sinh viên Trần Thị Kim Ngân Mục lục DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT .3 DANH MỤC BẢNG .4 DANH MỤC HÌNH ẢNH .5 MỞ ĐẦU Lý chọn đề tài Tình hình nghiên cứu ngồi nước Mục đích nghiên cứu .9 Nhiệm vụ nghiên cứu Phương pháp nghiên cứu .9 Các kết đạt đề tài 10 Kết cấu ĐATN 10 CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU .11 1.1 Tổng quan Sen 11 1.1.1 Vị trí, phân loại 11 1.1.2 Đặc điểm thực vật học, sinh thái .11 1.1.3 Thành phần hóa học 12 1.1.4 Tính vị, tác dụng .14 1.1.5 Công dụng, định, phối hợp 14 1.2 Tổng quan hợp chất Phenolics 16 1.2.1 Phân loại 16 1.2.2 Tính chất hóa học 17 1.2.3 Vai trò hợp chất phenol thực vật .17 1.2.4 Flavonoid 18 1.3 Tổng quan hợp chất alkaloid .20 1.4 Tổng quan khả kháng oxy hóa 24 1.4.1 Quá trình oxy hóa ngun nhân gây bệnh cân oxy hóa 24 1.4.2 Tính chống oxy hóa hợp chất sen 25 1.5 Tổng quan phương pháp khối phổ LC-MS 26 1.5.1 Phổ khối lượng 26 1.5.2 Cấu tạo khối phổ kế 27 CHƯƠNG 2: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 35 ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP 2.1 Vật liệu nghiên cứu 35 2.2 Dụng cụ, hóa chất thí nghiệm 35 2.3 Phương pháp thí nghiệm 36 2.3.1 Phương pháp vi học kiểm nghiệm dược liệu 37 2.3.2 Thử độ tinh khiết dược liệu .39 2.3.3 Quá trình chiết thu nhận cao chiết 41 2.3.4 Phương pháp xác định lượng cao thu .43 2.3.5 Phương pháp định tính thành phần hóa học sen 44 2.3.6 Phương pháp xác định hàm lượng polyphenol tổng số 45 2.3.7 Phương pháp định lượng flavonoid tổng số 45 2.3.8 Phương pháp định lượng alkaloid tổng số 46 2.3.9 Phương pháp xác định lực khử .48 2.3.10 Đánh giá hoạt tính kháng oxy hóa mơ hình DPPH 49 2.3.11 Phương pháp phân tích phổ khối lượng MS .50 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 53 3.1 Khảo sát vi phẫu soi bột sen 53 3.2 Thử độ tinh khiết dược liệu 55 3.3 Khảo sát ảnh hưởng nồng độ cồn đến lượng cao thu 56 3.4 Định tính thành phần hóa học có dịch chiết sen 58 3.5 Định lượng polyphenol tổng số dịch chiết .61 3.6 Định lượng Flavonoid tổng số 64 3.7 Định lượng alkaloid tổng số 67 3.8 Xác định lực khử .68 3.9 Xác định hoạt tính kháng gốc tự DPPH 69 3.10 Kết phân tích TPHH dịch chiết sen HPLC-ESI/MS 74 CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 78 4.1 Kết luận 78 4.2 Kiến nghị 79 TÀI LIỆU THAM KHẢO .80 ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT AG: Acid Gallic DPPH: 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl EtOAC: Ethyl Acetate Et-F: Ethyl acetate Fraction IC50: half maximal inhibitory concentration LC-MS: Liquid Chromatography–Mass Spectrometry TPHH: Thành Phần Hóa Học TPC: Total Polyphenols Content (Hàm lượng polyphenol tổng số) TFC: Total Flavonoids Content (Hàm lượng flavonoid tổng số) db: gam dược liệu khô ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP DANH MỤC BẢNG Bảng 3.1: Độ ẩm dược liệu 55 Bảng 3.2: Ảnh hưởng nồng độ cồn đến lượng chất khô thu 56 Bảng 3.3: Kết phân tích sơ thành phần hóa học sen 59 Bảng 3.4: Kết đường chuẩn Acid Gallic 60 Bảng 3.5: Kết hàm lượng polyphenol tổng số 61 Bảng 3.6: Kết đường chuẩn Rutin 63 Bảng 3.7: Kết hàm lượng Flavonoid tổng số 64 Bảng 3.8: Kết hàm lượng alkaloid toàn phần 65 Bảng 3.9: Năng lực khử dịch chiết ethanol tối ưu 66 Bảng 3.10: Giá trị %I kết IC50của vitamin C 68 Bảng 3.11: Giá trị %I IC50 mẫu sen trưởng thành chiết ethanol 96% 70 Bảng 3.12: Giá trị %I IC50 sen non chiết ethanol 70% 71 Bảng 3.13: Kết phân tích TPHH dịch chiết cồn từ sen 73 ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP DANH MỤC HÌNH ẢNH Hình 1.1: Cây sen 11 Hình 1.2: Cấu trúc Nuciferine 13 Hình 1.3: Cơng thức cấu tạo số chất có sen 13 Hình 1.4: Cơng thức cấu tạo số chất có tâm sen 14 Hình 1.5: Một số hợp chất phenol 17 Hình 1.6: Sơ đồ khối phổ kế 27 Hình 2.1: Lá sen non 34 Hình 2.2: Lá sen trưởng thành 34 Hình 2.3: Sơ đồ tiến trình thí nghiệm 35 Hình 2.4: Sơ đồ tiến trình nhuộm vi phẫu 37 Hình 2.5: Sơ đồ quy trình chiết phân tích cao chiết sen 40 Hình 2.6: Sơ đồ xác định alkaloid tồn phần 46 Hình 2.7: Sơ đồ tiến trình lực khử 48 Hình 3.1: Vi phẫu cấu trúc sen 53 Hình 3.2: Bột sen 53 Hình 3.3: Vi phẫu bột sen 54 Hình 3.4: Sự biến đổi màu sắc dịch chiết nồng độ cồn khác 56 Hình 3.5: Sự biến đổi màu sắc hơ dịch chiết qua NH4OH 57 Hình 3.6: Sự tạo tủa với thuốc thử Mayer 57 Hình 3.7: Cột bọt trước sau để yên 15 phút 58 Hình 3.8: Kết tủa đỏ gạch hình thành 58 Hình 3.9: Sự đổi màu dịch chiết 59 Hình 3.10: Dung dịch dựng đường chuẩn Acid Gallic 60 Hình 3.11: Đường chuẩn Acid Gallic 61 Hình 3.12: Dung dịch Rutin chuẩn 63 ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Hình 3.13: Đường chuẩn Rutin 64 Hình 3.14: Mẫu sen phản ứng AlCl3 64 Hình 3.15: Đồ thị lực khử dịch chiết 67 Hình 3.16: Sự đổi màu dung dịch tưởng khử Fe3+ 68 Hình 3.17: Biểu đồ biểu thị ức chế gốc tự vitamin C 69 Hình 3.18: Phản ứng màu dung dịch DPPH + Vitamin C 69 Hình 3.19: Phản ứng dịch mẫu + DPPH 70 Hình 3.20: Biểu đồ % I (% ức chế) mẫu sen trưởng thành cồn 96% 70 Hình 3.21: Biểu đồ % I (% ức chế) mẫu sen non ethanol 70% 71 Hình 3.22: Biểu đồ so sánh giá trị IC50 đối tượng sen vitamin C 71 Hình 3.23: Sắc ký đồ HPLC-ESI/MS dịch chiết cồn 96% từ sen 73 ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP MỞ ĐẦU Lý chọn đề tài Từ người ta biết dùng đến loại thảo dược để chữa trị nhiều loại bệnh khác nhau, có bệnh béo phì tim mạch, Bên cạnh đó, khả chống béo phì người nhóm hợp chất catechin nghiên cứu chứng minh Sen loại quen thuộc với người dân Việt Nam, loại mà tất phận sử dụng để phục vụ cho việc trang trí, thực phẩm, dược phẩm chữa bệnh…Dù vậy, việc nghiên cứu hoạt chất sinh học có sen hạn chế nước ta Việc nghiên cứu sản xuất chất chiết từ thiên nhiên để bổ sung vào đồ uống, thực phẩm nói riêng ngành cơng nghiệp khác nói chung ln quan tâm mà chủ yếu hợp chất phenolic flavonoid hợp chất alkaloid Những hợp chất tồn nhiều loại hoa lá, củ quả…của nhiều loại thảo dược, Những thành phần sử dụng loại thực phẩm chức nhằm mục đích ngừa bệnh có tính chống oxy hóa mạnh Chúng sử dụng với nhiều mục đích khác ngành công nghiệp thực phẩm, dược phẩm, mỹ phẩm… Việt Nam nước có khí hậu nhiệt đới gió mùa, nóng ẩm quanh năm, điều kiện tốt để sen tồn phát triển Việc nghiên cứu, phân tích thành phần hóa học có sen bước cụ thể nhằm tìm hợp chất thứ cấp có dược tính tốt sen, có alkaloid flavonoid, tạo tiền đề cho việc ứng dụng hợp chất vào chế phẩm phòng chữa bệnh cho người Sen lồi thực vật gần gũi với đời sống người dân Việt Nam Tất phận sen sử dụng để phục vụ cho người: dùng gói xơi, hoa sen dùng để trang trí, hạt sen dùng nấu chè, tâm sen lại có dược tính an thần cho mắc bệnh ngủ Trong dân gian, sen dùng nấu nước uống thay trà, nay, có số cơng trình nghiên cứu sen thành phần dược tính có giá trị Do vậy, đề tài “Nghiên cứu thành phần alkaloid, flavonoid hoạt tính chống oxy sen Nelumbo % cao thu (%) 5,88% 5,93% 5,99% Cồn 90% D1 D2 D3 Cồn 96% E1 E2 E3 % cao thu (%) 5,15% 5,18% 5,28% Trung bình 5,93 Trung bình 5,2 Hàm lượng polyphenol tổng số, nồng độ 0,5mg/ml Cồn 60% Giá trị OD A1 A2 A3 0,166 0,171 0,151 Cồn 70% Giá trị OD B1 B2 B3 0,171 0,163 0,172 Cồn 80% Giá trị OD C1 C2 C3 0,181 0,192 0,191 Cồn 90% Giá trị OD D1 D2 D3 0,18 0,199 0,208 Polyphenol tổng Trung bình (mg GE/g db) 280,22 273,07  22,3 290,93 248,08 Polyphenol tổng Trung bình (mg GE/g db) 305,98 300,73  11,11 287,96 308,24 Polyphenol tổng Trung bình (mg GE/g db) 290,47 304,42  12,12 312,39 310,39 Polyphenol tổng Trung bình (mg GE/g db) 238,62 264,44  23,6 269,93 284,77 Cồn 96% Giá trị OD E1 E2 E3 0,257 0,252 0,253 Polyphenol tổng (mg GE/g db) 340,06 332,4 333,93 Trung bình 335,46  4,05 Hàm lượng Flavonoid tổng số, nồng độ mẫu 0,25mg/ml Cồn 60% Giá trị OD A1 A2 A3 0,528 0,525 0,526 Cồn 70% Giá trị OD B1 B2 B3 0,512 0,504 5,508 Cồn 80% Giá trị OD C1 C2 C3 0,626 0,643 0,639 Cồn 90% Giá trị OD D1 D2 D3 0,57 0,586 0,58 Cồn 96% Giá trị OD Flavonoid tổng (mg RE/g db) 140,98 140,17 140,44 Flavonoid tổng (mg RE/g db) 146,26 143,95 145,10 Flavonoid tổng (mg RE/g db) 156,86 161,16 160,15 Flavonoid tổng (mg RE/g db) 126,87 130,46 129,11 Flavonoid tổng (mg RE/g db) Trung bình 140,53 ± 0,41 Trung bình 145,1 ± 1,2 Trung bình 159,39 ± 2,25 Trung bình 128,81 ± 1,81 Trung bình E1 E2 E3 0,505 0,545 0,532 98,43 106,32 103,75 102,83 ± 4,02 Hàm lượng alkaloid toàn phần M0 (g) M1 (g) % Alkaloid toàn phần (%) F1 113,3833 113,5180 4,96 F2 112,4586 112,5931 4,95 120,6156 4,96 F3 120,4805 Trung bình 4,96 Kết giá trị đánh giá lực khử Nồng độ (mg/ml) 0,001 0,002 0,003 0,004 0,005 Độ hấp thu Acid Gallic 0,180 0,202 0,218 0,246 0,301 Nồng độ (mg/ml) 0,001 0,002 0,003 0,004 0,005 0,132 0,139 0,142 0,159 0,161 Độ hấp thu Acid Gallic 0,185 0,197 0,199 0,241 0,294 Nồng độ (mg/ml) 0,001 0,002 0,003 0,004 0,005 Mẫu TN Mẫu TN 0,132 0,141 0,143 0,155 0,164 Độ hấp thu Acid Gallic 0,184 0,198 0,222 0,239 0,285 Mẫu TN 0,132 0,140 0,142 0,159 0,165 Kết đo OD517nm phản ứng với DPPH Nồng độ ( 6,1 2,4 1,2 0,61 Phương trình I1 I2 75,89 49,65 41,28 29,93 72,20 73,12 44,11 43,40 39,57 30,92 30,92 30,35 y=7,4892x + 28,227 R2=0,9853 2,907 IC50 I3 LÁ SEN NON Kết xác định độ ẩm dược liệu (w) Khối lượng M0 (g) Khối lượng M1 (g) Độ ẩm (%) 36,2781 36,8023 37,2009 37,2821 37,8053 38,2037 11,66 N1 N2 N3 Kết xác định % cao thu sen non Cồn 60% A1 A2 A3 Cồn 70% B1 B2 B3 % cao thu (%) 7,24 7,24 7,36 % cao thu (%) 7,79 7,81 7,81 Trung bình 7,28 Trung bình 7,8 Cồn 80% C1 C2 C3 Cồn 90% D1 D2 D3 Cồn 96% E1 E2 E3 % cao thu (%) 7,12 7,20 7,10 Trung bình % cao thu (%) 5,21 5,27 5,32 Trung bình % cao thu (%) 4,26 4,30 4,30 Trung bình 7,14 5,27 4,29 Hàm lượng polyphenol tổng số, nồng độ 0,5mg/ml Cồn 60% Giá trị OD A1 A2 A3 0,192 0,195 0,197 Cồn 70% Giá trị OD B1 B2 B3 0,215 0,214 0,211 Cồn 80% Giá trị OD C1 C2 C3 0,246 0,254 0,238 Polyphenol tổng (mg GE/g db) 248,71 253,47 256,64 Polyphenol tổng (mg GE/g db) 325,06 323,25 317,82 Polyphenol tổng (mg GE/g db) 293,63 304,77 282,49 Trung bình 252,94 ± 3,99 Trung bình 322,04 ± 3,77 Trung bình 293,63 ± 11,14 Cồn 90% Giá trị OD D1 D2 D3 0,157 0,168 0,165 Cồn 96% Giá trị OD E1 E2 E3 0,178 0,17 0,176 Polyphenol tổng (mg GE/g db) 126,29 137,69 134,58 Polyphenol tổng (mg GE/g db) 100,84 95,21 99,44 Trung bình 132,85 ± 5,89 Trung bình 98,50 ± 2,94 Hàm lượng Flavonoid tổng số, nồng độ mẫu 0,25mg/ml Cồn 60% Giá trị OD A1 A2 A3 0,562 0,541 0,542 Cồn 70% Giá trị OD B1 B2 B3 0,688 0,698 0,713 Cồn 80% Giá trị OD C1 C2 C3 0,708 0,71 0,698 Flavonoid tổng (mg RE/g db) 153,54 147,74 148,02 Flavonoid tổng (mg RE/g db) 201,78 204,74 209,17 Flavonoid tổng (mg RE/g db) 189,85 190,39 187,15 Trung bình 149,77 ± 3,27 Trung bình 205,23 ± 3,72 Trung bình 189,13 ± 1,74 Cồn 90% Giá trị OD D1 D2 D3 0,748 0,758 0,764 Cồn 96% Giá trị OD E1 E2 E3 0,691 0,69 0,693 Flavonoid tổng (mg RE/g db) 148,32 150,32 151,52 Flavonoid tổng (mg RE/g db) 111,47 111,30 111,79 Trung bình 150,05 ± 1,62 Trung bình 111,52 ± 0,25 Hàm lượng alkaloid toàn phần M1 M2 M3 M0 (g) 121,5323 121,5365 130,6728 M1 (g) 121,6143 121,6175 130,7558 % Alkaloid 3,09 3,05 3,1 Trung bình 3.09 ± 0,03 Kết giá trị đánh giá lực khử Nồng độ (mg/ml) 0,001 0,002 0,003 0,004 0,005 Nồng độ (mg/ml) 0,001 0,002 0,003 0,004 0,005 Độ hấp thu Acid Gallic 0,180 0,202 0,218 0,246 0,301 Mẫu TN 0,048 0,06 0,068 0,074 0,088 Độ hấp thu Acid Gallic 0,185 0,197 0,199 0,241 0,294 Mẫu TN 0,048 0,064 0,069 0,073 0,091 Nồng độ (mg/ml) 0,001 0,002 0,003 0,004 0,005 Độ hấp thu Acid Gallic 0,184 0,198 0,222 0,239 0,285 Mẫu TN 0,045 0,065 0,069 0,078 0,088 Kết đo OD517nm phản ứng với DPPH Nồng độ ( 6,1 2,4 1,2 0,61 I1 I2 I3 26,81 15,18 11,91 11,77 27,66 14,33 12,62 11,06 y= 3,06x + 8,4227 R2=0,9799 13,58 27,80 14,75 11,77 10,07 Phương trình IC50 Xử lý số liệu phần mềm Statgraphic Xác định độ ẩm nguyên liệu Summary Statistics for D0 AM YTTN Count Average Median M 9.39333 9.36 N 11.66 11.66 Total 10.5267 10.58 ANOVA Table for D0 AM by YTTN Source Sum of Squares Between groups 7.70667 Within groups 0.0826667 Total (Corr.) 7.78933 Standard deviation 0.1823 0.09 1.24815 Df Multiple Range Tests for D0 AM by YTTN Method: 95.0 percent LSD YTTN Count Mean Homogeneous Groups M 9.39333 X N 11.66 X Contrast Sig Difference +/- Limits M-N * -2.26667 0.325897 * denotes a statistically significant difference Coeff of variation 1.94074% 0.77187% 11.857% Minimum 9.23 11.57 9.23 Maximum 9.59 11.75 11.75 Mean Square 7.70667 0.0206667 F-Ratio 372.90 P-Value 0.0000 Ảnh hưởng nồng độ cồn đến lượng chất khô thu Summary Statistics for HAM LUONG CAO NONG DO CON A60 A70 A80 A90 A96 B60 B70 B80 B90 B96 Total Count 3 3 3 3 3 30 Average 7.16667 7.61667 6.66333 5.93333 5.20333 7.28 7.80333 7.13 5.26667 4.28667 6.435 Median 7.1 7.6 6.65 5.93 5.18 7.24 7.81 7.12 5.27 4.3 6.875 Standard deviation 0.189033 0.0763763 0.061101 0.0550757 0.0680686 0.069282 0.011547 0.105357 0.0550757 0.023094 1.15298 ANOVA Table for HAM LUONG CAO by NONG DO CON Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio Between groups 38.4066 4.2674 588.07 Within groups 0.145133 20 0.00725667 Total (Corr.) 38.5517 29 Coeff of variation 2.63766% 1.00275% 0.916974% 0.928242% 1.30817% 0.951676% 0.147975% 1.47765% 1.04574% 0.538741% 17.9174% Minimum 7.02 7.55 6.61 5.88 5.15 7.24 7.79 7.03 5.21 4.26 4.26 P-Value 0.0000 Multiple Range Tests for HAM LUONG CAO by NONG DO CON Method: 95.0 percent LSD NONG DO CON Count Mean Homogeneous Groups X B96 4.28667 X A96 5.20333 X B90 5.26667 X A90 5.93333 X A80 6.66333 X B80 7.13 XX A60 7.16667 X B60 7.28 X A70 7.61667 X B70 7.80333 * denotes a statistically significant difference Hàm lượng Polyphenol tổng số Summary Statistics for POLYPHENOL TS YTTN M60 M70 M80 M90 M96 N60 N70 N80 N90 N96 Total Count 3 3 3 3 3 30 Average 273.08 300.73 304.423 264.447 335.467 252.94 322.043 293.63 132.853 98.5033 257.812 Median 280.22 305.99 310.4 269.94 333.93 253.47 323.25 293.63 134.58 99.44 286.365 Standard deviation 22.2946 11.1162 12.1162 23.5554 4.05934 3.99148 3.76782 11.14 5.89288 2.93916 77.3076 10 Coeff of variation 8.16414% 3.69641% 3.98005% 8.90743% 1.21006% 1.57803% 1.16997% 3.79389% 4.43563% 2.98381% 29.9861% Minimum 248.09 287.96 290.48 238.63 332.4 248.71 317.82 282.49 126.29 95.21 95.21 Maximum 290.93 308.24 312.39 284.77 340.07 256.64 325.06 304.77 137.69 100.86 340.07 Maximum 7.38 7.7 6.73 5.99 5.28 7.36 7.81 7.24 5.32 4.3 7.81 ANOVA Table for POLYPHENOL TS by YTTN Source Between groups Within groups Total (Corr.) Sum of Squares 170245 3072.7 173317 Df 20 29 Mean Square 18916.1 153.635 F-Ratio 123.12 P-Value 0.0000 Multiple Range Tests for POLYPHENOL TS by YTTN Method: 95.0 percent LSD YTTN N96 Count Mean 98.5033 N90 N60 M90 3 132.853 252.94 264.447 M60 N80 3 273.08 293.63 M70 M80 N70 3 300.73 304.423 322.043 Homogeneous Groups X X X X XX XX X XX XX X M96 335.467 * denotes a statistically significant difference Định lượng Flavonoid tổng số Summary Statistics for FLAVONOID TS YTTN M60 M70 M80 M90 M96 N60 N70 N80 N90 N96 Total Count 3 3 3 3 3 30 Average 127.643 131.45 144.337 116.22 92.3533 132.277 180.76 159.953 127.277 98.0033 131.027 Median 127.56 131.45 145.02 116.49 93.18 130.73 180.33 160.56 127.5 97.96 129.46 Standard deviation 0.372066 1.05 2.03304 1.63184 3.61167 2.88924 3.27623 1.46729 1.36873 0.218251 25.6289 ANOVA Table for FLAVONOID TS by YTTN Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 18959.9 2106.66 Within groups 88.4733 20 4.42366 Total (Corr.) 19048.4 29 Coeff of variation 0.291489% 0.798783% 1.40854% 1.4041% 3.9107% 2.18424% 1.81248% 0.917322% 1.0754% 0.222697% 19.56% F-Ratio 476.22 11 Minimum 127.32 130.4 142.05 114.47 88.4 130.49 177.72 158.28 125.81 97.81 88.4 P-Value 0.0000 Maximum 128.05 132.5 145.94 117.7 95.48 135.61 184.23 161.02 128.52 98.24 184.23 Multiple Range Tests for FLAVONOID TS by YTTN Method: 95.0 percent LSD YTTN M96 N96 M90 N90 M60 M70 N60 M80 N80 N70 Count 3 3 3 3 3 Mean 92.3533 98.0033 116.22 127.277 127.643 131.45 132.277 144.337 159.953 180.76 Homogeneous Groups X X X X X X X X X X Định lượng alkaloid toàn phần Summary Statistics for ALKALOID TP YTTN A B Total Count 3 Average 4.95667 3.08 4.01833 Median 4.96 3.09 4.025 Standard deviation 0.0057735 0.0264575 1.02804 Coeff of variation 0.11648% 0.85901% 25.5836% ANOVA Table for ALKALOID TP by YTTN Source Sum of Squares Df Between groups 5.28282 Mean Square 5.28282 Within groups 0.00146667 0.000366667 Total (Corr.) 5.28428 Minimum 4.95 3.05 3.05 F-Ratio 14407.68 Maximum 4.96 3.1 4.96 P-Value 0.0000 Multiple Range Tests for ALKALOID TP by YTTN Method: 95.0 percent LSD YTTN B A Count 3 Mean 3.08 4.95667 Homogeneous Groups X X Contrast Sig Difference +/- Limits A-B * 1.87667 0.0434091 * denotes a statistically significant difference Khảo sát lực khử dịch chiết sen  Chất chuẩn Acid Gallic Summary Statistics for DO HAP THU NONG DO Count Average Median 0,001 0.183 0.184 0,002 0.198667 0.198 0,003 0.213 0.218 Standard deviation 0.00264575 0.00305505 0.0122882 Coeff of variation 1.44577% 1.53778% 5.76911% Minimum 0.18 0.196 0.199 Maximum 0.185 0.202 0.222 0,004 0,005 Total 0.00351188 0.00818535 0.0409358 1.4492% 2.78413% 18.0972% 0.239 0.285 0.18 0.246 0.301 0.301 3 15 0.242333 0.294 0.2262 0.242 0.296 0.218 12 ANOVA Table for DO HAP THU by NONG DO Source Between groups Within groups Total (Corr.) Sum of Squares 0.0229671 0.000493333 0.0234604 Df 10 14 Mean Square 0.00574177 0.0000493333 F-Ratio 116.39 P-Value 0.0000 Multiple Range Tests for DO HAP THU by NONG DO Method: 95.0 percent LSD NONG DO Count Mean Homogeneous Groups X 0,001 0.183 X 0,002 0.198667 X 0,003 0.213 X 0,004 0.242333 X 0,005 0.294 * denotes a statistically significant difference  Lá sen trưởng thành Summary Statistics for DO HAP THU B.NONG DO 0,001 0,002 0,003 0,004 0,005 Total Count 3 3 15 Average 0.132 0.14 0.142333 0.157667 0.163333 0.147067 Median 0.132 0.14 0.142 0.159 0.164 0.142 Standard deviation 0.0 0.001 0.00057735 0.0023094 0.00208167 0.0121035 Coeff of variation 0.0% 0.714286% 0.405633% 1.46474% 1.27449% 8.22996% Multiple Range Tests for DO HAP THU by B.NONG DO Method: 95.0 percent LSD B.NONG DO 0,001 Count Mean 0.132 0,002 0,003 3 0.14 0.142333 Homogeneous Groups X 0,004 0.157667 0,005 0.163333 * denotes a statistically significant difference X X X X ANOVA Table for DO HAP THU by B.NONG DO CON Source Between groups Within groups Total (Corr.) Sum of Squares 0.00202893 0.000022 0.00205093 Df 10 14 Mean Square 0.000507233 0.0000022 F-Ratio 230.56 13 P-Value 0.0000 Minimum 0.132 0.139 0.142 0.155 0.161 0.132 Maximum 0.132 0.141 0.143 0.159 0.165 0.165  Lá sen non Summary Statistics for DO HAP THU C.NONG DO Count Average Median 0,001 0.047 0.048 0,002 0.063 0.064 0,003 0.068 0.069 0,004 0.075 0.074 0,005 0.089 0.088 Total 15 0.0684 0.069 Standard deviation 0.00173205 0.00264575 0.00173205 0.00264575 0.00173205 0.0144212 ANOVA Table for DO HAP THU by C.NONG DO Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 0.0028656 0.0007164 Within groups 0.000046 10 0.0000046 Total (Corr.) 0.0029116 14 F-Ratio 155.74 Coeff of variation 3.68521% 4.19961% 2.54713% 3.52767% 1.94612% 21.0836% Minimum 0.045 0.06 0.066 0.073 0.088 0.045 Maximum 0.048 0.065 0.069 0.078 0.091 0.091 P-Value 0.0000 Table of Means for DO HAP THU by C.NONG DO with 95.0 percent LSD intervals Stnd error C.NONG DO Count Mean (pooled s) Lower limit Upper limit 0,001 0.047 0.00123828 0.045049 0.048951 0,002 0.063 0.00123828 0.061049 0.064951 0,003 0.068 0.00123828 0.066049 0.069951 0,004 0,005 3 0.075 0.089 0.00123828 0.00123828 0.073049 0.087049 0.076951 0.090951 Total 15 0.0684 Multiple Range Tests for DO HAP THU by C.NONG DO Method: 95.0 percent LSD C.NONG DO Count Mean Homogeneous Groups X 0,001 0.047 X 0,002 0.063 X 0,003 0.068 X 0,004 0.075 X 0,005 0.089 * denotes a statistically significant difference Đánh giá khả kháng oxy hóa mơ hình DPPH  Vitamin C Summary Statistics for % UC CHE VITA C NONG DO Count Average Median 0.61 28.8433 28.94 1.2 34.8933 34.89 2.4 41.23 41.42 6.1 56.8333 56.88 Total 12 40.45 38.085 Standard deviation 0.859089 0.565007 0.455741 0.781046 10.9028 14 Coeff of variation 2.97847% 1.61924% 1.10536% 1.37428% 26.9539% Minimum 27.94 34.33 40.71 56.03 27.94 Maximum 29.65 35.46 41.56 57.59 57.59 ANOVA Table for % UC CHE by NONG DO MAU Source Between groups Within groups Total (Corr.) Sum of Squares 1303.84 3.75 1307.59 Df 11 Mean Square 434.613 0.46875 F-Ratio 927.17 P-Value 0.0000 Multiple Range Tests for % UC CHE by NONG DO MAU Method: 95.0 percent LSD NONG DO Count Mean Homogeneous Groups X 0.61 28.8433 X 1.2 34.8933 X 2.4 41.23 X 6.1 56.8333 * denotes a statistically significant difference  Lá sen trưởng thành Summary Statistics for % UC CHE NONG DO Count Average Variance 0.61 30.4 0.2469 1.2 40.2567 0.816033 2.4 45.72 11.7097 6.1 73.7367 3.68923 Total 12 47.5283 285.649 Standard deviation 0.49689 0.903346 3.42194 1.92074 16.9011 Coeff of variation 1.63451% 2.24397% 7.48457% 2.60486% 35.5601% Minimum 29.93 39.57 43.4 72.2 29.93 Maximum 30.92 41.28 49.65 75.89 75.89 Coeff of variation 7.78572% 3.76646% 2.88077% 1.95365% 42.1297% Minimum 10.07 11.77 14.33 26.81 10.07 Maximum 11.77 12.62 15.18 27.8 27.8 Multiple Range Tests for % UC CHE by NONG DO Method: 95.0 percent LSD NONG DO Count Mean Homogeneous Groups X 0.61 30.4 X 1.2 40.2567 X 2.4 45.72 X 6.1 73.7367 * denotes a statistically significant difference  Lá sen non Summary Statistics for % UC CHE NONG DO 0.61 1.2 2.4 6.1 Total Count 3 3 12 Average 10.9667 12.1 14.7533 27.4233 16.3108 Median 11.06 11.91 14.75 27.66 13.475 Standard deviation 0.853834 0.455741 0.42501 0.535755 6.8717 ANOVA Table for % UC CHE by NONG DO Source Sum of Squares Df Between groups 516.614 Mean Square 172.205 Within groups 2.8088 0.3511 Total (Corr.) 519.423 11 15 F-Ratio 490.47 P-Value 0.0000 Multiple Range Tests for % UC CHE by NONG DO Method: 95.0 percent LSD NONG DO Count Mean Homogeneous Groups X 0.61 10.9667 1.2 2.4 3 12.1 14.7533 X X X 6.1 27.4233 * denotes a statistically significant difference 16 ... tài Nghiên cứu thành phần alkaloid, flavonoid hoạt tính chống oxy sen Nelumbo ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP nucifera thực hiện, tạo tiền đề khoa học cho việc tạo sản phẩm trà túi lọc từ sen tạo viên nang... Nghiên cứu thành phần hóa học tâm sen gương sen, - Tinh chế xác định vài tính chất đặc trưng lectin từ nhị hoa sen (Nelumbo nucifera) hoa thiên lý (Telosma condata) - Chiết xuất alkaloid từ sen. .. tâm sen lại có dược tính an thần cho mắc bệnh ngủ Trong dân gian, sen dùng nấu nước uống thay trà, nay, có số cơng trình nghiên cứu sen thành phần dược tính có giá trị Do vậy, đề tài Nghiên cứu