KHẢO SÁT ẢNH HƯỞNG CỦA BỨC XẠ GAMMA LÊN CALLUS CỦA CÂY BẠC HÀ (Mentha arvensis L.)

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BỘ MƠN CƠNG NGHỆ SINH HỌC KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP KHẢO SÁT ẢNH HƯỞNG CỦA BỨC XẠ GAMMA LÊN CALLUS CỦA CÂY BẠC HÀ (Mentha arvensis L.) Ngành học : CÔNG NGHỆ SINH HỌC Họ tên sinh viên : BÙI THỊ THÚY LIỄU Niên khóa : 2007-2011 Tháng 07 năm 2011 i BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BỘ MƠN CƠNG NGHỆ SINH HỌC KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP KHẢO SÁT ẢNH HƯỞNG CỦA BỨC XẠ GAMMA LÊN CALLUS CỦA CÂY BẠC HÀ (Mentha arvensis L.) Hướng dẫn khoa học Sinh viên thực TS TRẦN THỊ LỆ MINH BÙI THỊ THÚY LIỄU Tháng 07 năm 2011 ii LỜI CẢM ƠN Con xin thành kính ghi ơn cha mẹ người thân gia đình ln tạo điều kiện động viên suốt q trình học tập Tơi xin chân thành cảm ơn:  Ban Giám hiệu trường Đại học Nông Lâm Tp Hồ Chí Minh, Ban chủ nhiệm Bộ mơn Công nghệ sinh học, thầy cô môn công nghệ sinh học, tất Quý Thầy Cô truyền đạt kiến thức cho tơi suốt q trình học trường  TS Trần Thị Lệ Minh hết lòng giúp đỡ tận tình hướng dẫn tơi suốt thời gian thực đề tài tốt nghiệp  KS Bùi Thị Hồng Gấm hết lòng giúp đỡ hướng dẫn tơi q trình làm khóa luận  Các bạn lớp DH07SH, em lớp DH09SH bạn làm đề tài môn bạn Remi –Nghiem Xuan hết lòng hỗ trợ, giúp đỡ suốt thời làm đề tài Chân thành cám ơn! Sinh viên thực Bùi Thị Thúy Liễu i TÓM TẮT Bạc hà vị thuốc phổ biến có từ lâu đời, từ xưa người ưa chuộng dùng tinh dầu bạc hà Menthol có tinh dầu nhiều lĩnh vực dược liệu, hương liệu thực phẩm ngày nhu cầu tăng cao song lượng tinh dầu menthol tự nhiên có hạng menthol cơng nghiệp chất lượng khơng cao Vì lý mà thực đề tài : “ Khảo sát ảnh hưởng xạ Gamma lên callus bạc hà (Mentha arvensis L)” nhằm tạo nhiều giống bạc hà biến dị cho nhiều tinh dầu nhằm làm tăng hàm lượng menthol tinh dầu Thời gian địa điểm Đề tài thực từ tháng 11/2010 đến tháng 7/2011, Bộ môn Công nghệ Sinh học trường Đại học Nông Lâm Hồ Chí Minh Mục tiêu đề tài tìm liều gây chết 50% mẫu (LD 50 ) cho callus từ thân bạc hà in vitro, tìm liều gây biến dị hiệu Kết ghi nhận sau : Đã tạo callus từ bạc hà in vitro môi trường MS có bổ sung 0,2mg/l TDZ + 0,5mg/l 2,4-D thân bạc hà in vitro mơi trường MS có bổ sung 10mg/l BA+ 2mg/l NAA tìm mơi trường tái sinh chồi từ callus thân tối ưu mơi trường MS có bổ sung :1mg/l BA + 1mg/l Kn + 0,5mg/l NAA Sau tạo callus chúng tơi tiến hành khảo sát ảnh hưởng xạ Gamma lên callus thân đạt kết khả quan xác định liều gây chết 50% mẫu (LD 50 ) mẫu callus tuần tuổi sau 30 ngày theo dõi 57,67Gy xác định liều xạ có tần số biến dị chồi cao nhất: liều 60Gy ii SUMMARY The study namely “Study on the effects of Gamma rays on callus of mint.(Mentha arvensis L.” Time and place: The study was carried out from November, 2010 to July, 2011 at Biotechnology Department Nong Lam University of Ho Chi Minh City Aims: Find out the lethal dose of 50% callus samples (LD 50 ) induced from shoot and the effective dose for variationon callus from in vitro Results: The callus was success induced from leaves on MS medium supplemented with 0,2mg/l TDZ and 0,5mg/l 2,4-D, and from trunk on MS medium supplemented with 10mg/l BA and 2mg/l NAA; in addition, the MS medium supplemented with 1mg/l BA +1mg/l Kn +0,5mg/l NAA was found as the optimal medium for inducing shoot from callus After froming callus, we started studying on the effects of Gamma rays on callus and achieved satisfactory results for obtained such as the lethal dose 50% efective on 4-week callus samples (LD 50 ) after 30 days cultivation was found as 57.67 Gy, and the dose for inducing variation was found at 60 Gy iii MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN i TÓM TẮT Error! Bookmark not defined SUMMARY Error! Bookmark not defined MỤC LỤC Error! Bookmark not defined DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT Error! Bookmark not defined DANH SÁCH CÁC BẢNG Error! Bookmark not defined Chương MỞ ĐẦU 1.1.Đặt vấn đề 1.2.Yêu cầu 1.3.Nội dung thực Chương TỔNG QUAN 2.1 Giới thiệu chung bạc hà Châu Á 2.1.1 Nguồn gốc 2.1.2 Đặc điểm thực vật bạc hà Á 2.1.3 Phân bố sinh thái 2.2 Tinh dầu 2.3 Nhân giống vơ tính in vitro 2.3.1 Khái niệm 2.3.2 Ý nghĩa ứng dụng phương pháp nuôi cấy mô 2.3.3 Một số phương pháp nhân giống vơ tính in vitro 2.3.4 Q trình thực nhân giống vơ tính in vitro 10 2.3.5 Các yếu tố ảnh hưởng đến nhân giống vô tính in vitro 10 2.4 Sơ lược số nghiên cứu tạo dòng thực vật đột biến 11 2.5 Chiếu xạ 12 2.5.1 Khái niệm xạ 12 2.5.2 Bức xạ Gamma 13 2.5.3 Cơ chế tác động xạ ion hóa thể sống 13 2.5.4 Cơ chế gây đột biến xạ ion hóa 14 2.5.5 Nguồn xạ 15 Chương VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 16 3.1.Thời gian địa điểm 16 3.2.Vật liệu nghiên cứu 16 3.3 Nội dung nghiên cứu 16 3.3.1 Nội dung 1: Tạo callus từ bạc hà in vitro 16 3.3.2 Nội dung 2: Khảo sát ảnh hưởng nồng độ BA, Kn, NAA lên khả tái sinh chồi bạc hà 19 3.3.3 Nội dung 3: Khảo sát ảnh hưởng xạ Gamma lên callus bạc hà 20 iv Chương KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 22 4.1 Nội dung 1: Tạo callus từ bạc hà in vitro 22 4.1.1 Kết tạo bạc hà in vitro 22 4.1.2 Tạo callus từ in vitro tuần tuổi 22 4.2 Nội dung 2: Khảo sát ảnh hưởng nồng độ BA đến khả tái sinh chồi từ callus thân 30 ngày tuổi 34 4.3 Nội dung 3: Khảo sát ảnh hưởng xạ Gamma lên callus thân bạc hà 35 4.3.1 Liều kích thích 36 4.3.2 Liều gây biến dị 37 Chương KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 48 5.1 Kết luận 48 5.1.1 Tạo callus từ bạc hà in vitro 48 5.1.2 Khảo sát ảnh hưởng xạ Gamma lên callus bạc hà 48 5.2 Đề nghị 48 TÀI LIỆU THAM KHẢO 49 v DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT BA : Benzyladenine NAA : Naphthylacetic Acid MS : Murashige and Skoog LD 50 : liều gây chết 50% mẫu Gy : Gray 2,4-D : 2,4-Dichloro phenoxy acetic acide TDZ : Thidiaruzon Kn : Kinetin Đc : Đối chứng vi DANH SÁCH CÁC BẢNG Bảng 3.1 Phân bố chất kích thích sinh trưởng tạo callus 17 Bảng 3.2 Phân bố chất kích thích sinh trưởng tạo callus thân 18 Bảng 3.3 Phân bố chất kích thích sinh trưởng nghiệm tạo chồi 19 Bảng 3.4 Bố trí thí nghiệm liều xạ kích thích lên callus 20 Bảng 3.5 Bố trí thí nghiệm liều xạ gây biến dị lên callus 20 Bảng 4.1 Sự hình thành phát triển callus từ sau 40 ngày nuôi cấy 23 Bảng 4.2 Màu sắc hình dạng vá tính chất callus 24 Bảng 4.3 Sự hình thành phát triển callus từ thân bạc hà sau 30 ngày nuôi cấy 31 Bảng 4.4 Kết theo dõi khả tái sinh chồi từ callus thân mơi trường MS có bổ xung BA, Kn, NAA 34 Bảng 4.5 Kết khảo sát khả tái sinh chồi từ callus sau chiếu xạ liều kích thích 36 Bảng 4.6 Tỷ lệ callus sống sau 30 ngày chiếu xạ 37 Bảng 4.7 Kết tái sinh chồi bạc hà từ callus chiếu xạ 38 Bảng 4.8 Kết ghi nhận tần số biến dị 40 Bảng 4.9 So sánh tần số biến dị chồi tái sinh từ callus chiếu xạ tần số biến dị chồi chiếu xạ 41 Biểu đồ 4.1 Ảnh hưởng liều xạ đến tỷ lệ sống callus .38 Biểu đồ 4.2 So sánh tần số biến dị chồi tái sinh từ callus chiếu xạ liều gây biến dị tần số biến dị chồi chiếu xạ liều gây biến dị 42 vii DANH SÁCH CÁC HÌNH Hình 2.1 Mentha arvensis L Hình 4.1 Cây bạc hà in vitro tuần tuổi 22 Hình 4.2 Callus từ mơi trường L2 26 Hình 4.3 Callus mơi trường L5 27 Hình 4.4 Callus môi trường L6 28 Hình 4.5 Callus môi trường L7 29 Hình 4.6 Callus mơi trường L8 30 Hình 4.7 Callus từ thân bạc hà 33 Hình 4.8 Cụm chồi tuần tuổi 35 Hình 4.9 Cụm chồi bạc hà 4Gy (B), cụm chồi đối chứng(A) 37 Hình 4.10 Chồi bạc hà biến dị thân mập, thân tím, đốt dài 43 Hình 4.11 Chồi bạc hà biến dị tím, dày nhọn, thân mập 44 Hình 4.12 Chồi bạc hà biến dị to 45 Hình 4.13 Chồi bạc hà biến dị vàng cụm chồi đối chứng 46 viii Bảng 15 Bảng trắc nghiệm phân hạng thí nghiệm tạo mô sẹo từ thân bạc hà sau 10 ngày bảng 14 Multiple Range Tests for so callus by nghiem thuc Method: 95.0 percent LSD nghiem thuc Count LS Mean Homogeneous Groups -1 0.0 X 0.0 X 66.6667 X 3 77.7778 XX 85.1852 X 88.8889 XX 100.0 X Contrast Difference +/- Limits - *-85.1852 11.234 - *-88.8889 11.234 - *-77.7778 11.234 - 0.0 11.234 - *-66.6667 11.234 - *-100.0 11.234 - -3.7037 11.234 - 7.40741 11.234 - *85.1852 11.234 - *18.5185 11.234 - *-14.8148 11.234 - 11.1111 11.234 - *88.8889 11.234 - *22.2222 11.234 - -11.1111 11.234 - *77.7778 11.234 - 11.1111 11.234 - *-22.2222 11.234 - *-66.6667 11.234 - *-100.0 11.234 - *-33.3333 11.234 -* denotes a statistically significant difference Bảng 16 Số liệu dùng cho xử lý thống kê: Tỉ lệ mẫu tạo sẹo từ thân bạc hà (%) sau 30 ngày Nghiệm thức T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 Lần lặp lại 0 77.77778 77.77778 66.66667 100 0 88.88889 77.77778 55.55556 100 0 100 77.77778 77.77778 100 Trung bình 0 88.88889 77.77778 66.66667 100 Bảng 17 Bảng ANOVA thí nghiệm tạo mơ sẹo từ thân bạc hà sau 30 ngày bảng 16 Analysis of Variance for so callus - Type III Sums of Squares -Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value -MAIN EFFECTS A:nghiem thuc RESIDUAL 37566.1 6261.02 493.827 14 35.2734 177.50 0.0000 -TOTAL (CORRECTED) 38060.0 20 -All F-ratios are based on the residual mean square error Bảng 18 Bảng trắc nghiệm phân hạng thí nghiệm tạo mơ sẹo từ thân bạc hà sau 30 ngày bảng 17 Multiple Range Tests for so callus by nghiem thuc Method: 95.0 percent LSD nghiem thuc Count LS Mean Homogeneous Groups -1 0.0 X 0.0 X 0.0 X 66.6667 X 10 77.7778 3 88.8889 100.0 X X X Contrast Difference +/- Limits -1 - 0.0 10.4007 - *-88.8889 10.4007 - *-77.7778 10.4007 - 0.0 10.4007 - *-66.6667 10.4007 - *-100.0 10.4007 - *-88.8889 10.4007 - *-77.7778 10.4007 - 0.0 10.4007 - *-66.6667 10.4007 - *-100.0 10.4007 - *11.1111 10.4007 - *88.8889 10.4007 - *22.2222 10.4007 - *-11.1111 10.4007 - *77.7778 10.4007 - *11.1111 10.4007 - *-22.2222 10.4007 - *-66.6667 10.4007 - *-100.0 10.4007 - *-33.3333 10.4007 * denotes a statistically significant difference 11 Bảng 19 Số liệu khối lượng callus thân sau 30 ngày Lần lặp lại Nghiệm thức 0 0.323 0.443 0.245 0.735 0 0.312 0.423 0.301 0.674 0 0.376 0.458 0.298 0.723 Trung bình 0 0.337 0.441333 0.281333 0.710667 Bảng 20 Bảng ANOVA khối lượng sẹo từ thân bạc hà sau 30 ngày bảng 19 Analysis of Variance for khoi luong callus than - Type III Sums of Squares -Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value -MAIN EFFECTS A:nghiem thuc 0.222407 0.007032 14 0.000502286 RESIDUAL 1.33444 442.79 0.0000 -TOTAL (CORRECTED) 1.34147 20 -All F-ratios are based on the residual mean square error Bảng 21 Bảng trắc nghiệm khối lượng từ thân bạc hà sau 30 ngày bảng 20 Multiple Range Tests for khoi luong callus than by nghiem thuc -Method: 95.0 percent LSD nghiem thuc Count LS Mean Homogeneous Groups -2 0.0 X 0.0 X 0.0 X 0.281333 3 0.337 0.441333 0.710667 X X X X 12 Contrast Difference +/- Limits -1 - 0.0 0.0392478 - *-0.337 0.0392478 - *-0.441333 0.0392478 - 0.0 0.0392478 - *-0.281333 0.0392478 - *-0.710667 0.0392478 - *-0.337 0.0392478 - *-0.441333 0.0392478 - 0.0 0.0392478 - *-0.281333 0.0392478 - *-0.710667 0.0392478 - *-0.104333 0.0392478 - *0.337 0.0392478 - *0.0556667 0.0392478 - *-0.373667 0.0392478 - *0.441333 0.0392478 - *0.16 0.0392478 - *-0.269333 0.0392478 - *-0.281333 0.0392478 - *-0.710667 0.0392478 - *-0.429333 0.0392478 -* denotes a statistically significant difference Bảng 22 Số liệu dùng cho xử lý thống kê :Tỉ lệ callus thân tạo chồi môi trường Nghiệm thức S1(ĐC) S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 Lần lặp lại 0 0 0 0 0 0 55.55556 77.77778 66.66667 66.66667 100 100 100 100 0 0 33.33333 44.44444 55.55556 44.44444 0 0 0 0 13 Trung bình Bảng 23 Bảng ANOVA thí nghiệm – Tỉ lệ callus thân tạo chồi số liệu bảng 22 Analysis of Variance for ty le callus tao choi - Type III Sums of Squares -Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value -MAIN EFFECTS A:nghiem thuc RESIDUAL 5294.92 2647.46 576.132 96.0219 27.57 0.0009 -TOTAL (CORRECTED) 5871.06 -All F-ratios are based on the residual mean square error Bảng 24 Bảng trắc nghiệm phân hạng thí nghiệm – tỉ lệ callus thân tạo chồi kết bảng 23 Multiple Range Tests for ty le callus tao choi by nghiem thuc Method: 95.0 percent LSD nghiem thuc Count LS Mean Homogeneous Groups 40.7407 66.6667 100.0 X X X Contrast Difference +/- Limits - *-33.3333 19.5776 - *25.9259 19.5776 - *59.2593 19.5776 * denotes a statistically significant difference 14 Bảng 25 Số liệu dùng cho xử lý thống kê thí nghiệm – Số chồi trung bình/callus thân Nghiệm thức S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 Lần lặp lại 0 6.285714 21.11111 3.333333 0 0 4.8 20.4 1.666667 0 Trung bình 0 4.75 20.55556 1.4 0 0 5.278571 20.68889 2.133333 0 Bảng 26 Bảng ANOVA thí nghiệm – Số chồi trung bình/callus thân theo số liệu bảng 25 Analysis of Variance for so choi trung binh tren callus - Type III Sums of Squares -Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value -MAIN EFFECTS A:nghiem thu RESIDUAL 581.189 290.595 3.28078 0.546797 531.45 0.0000 -TOTAL (CORRECTED) 584.47 -All F-ratios are based on the residual mean square error Bảng 27 Bảng trắc nghiệm phân hạng thí nghiệm – Số chồi trung bình/callus theo kết bảng 26 Multiple Range Tests for so choi trung binh tren callus by nghiem thu Method: 95.0 percent LSD nghiem thu Count LS Mean Homogeneous Groups 2.37778 X 5.27857 X 20.6889 X Contrast Difference +/- Limits 15 - *-15.4103 1.47736 - *2.90079 1.47736 - *18.3111 1.47736 * denotes a statistically significant difference Bảng 28: Bảng số liệu cho thí nghiệm tỷ lệ callus tạo chồi sau chiếu xạ liều kích thích Liều xạ Lần lặp lại Trung bình 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 91.66667 97.22222 91.66667 100 100 97.22222 10 100 91.66667 100 97.22222 Bảng 29: Bảng ANOVA thí nghiệm- tỷ lệ callus tạo chổi sau chiếu xạ liều kích thích theo số liệu bảng 28 Analysis of Variance for ty le callus len choi lieu kt - Type III Sums of Squares -Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value -MAIN EFFECTS A:Lieu xa RESIDUAL 34.7222 6.94444 138.889 12 11.5741 0.60 0.7013 -TOTAL (CORRECTED) 173.611 17 -All F-ratios are based on the residual mean square error Bảng 30: Bảng trắc nghiệm phân hạng thí nghiệm - tỷ lệ callus tạo chồi sau chiếu xạ liểu kích kích theo dố liệu bảng 29 Multiple Range Tests for ty le callus len choi lieu kt by Lieu xa 16 Method: 95.0 percent LSD Lieu xa Count LS Mean Homogeneous Groups 10 97.2222 X 97.2222 X 97.2222 X 100.0 X 3 100.0 X 100.0 X Contrast Difference +/- Limits - 0.0 6.05227 - 0.0 6.05227 - 2.77778 6.05227 - 2.77778 6.05227 - 10 2.77778 6.05227 - 0.0 6.05227 - 2.77778 6.05227 - 2.77778 6.05227 - 10 2.77778 6.05227 - 2.77778 6.05227 - 2.77778 6.05227 - 10 2.77778 6.05227 - 0.0 6.05227 - 10 0.0 6.05227 - 10 0.0 6.05227 * denotes a statistically significant difference Bảng 31: Bảng số liệu cho xử lỳ thống kê - số chồi trung bình/callus sau chiếu xạ liều kích thích Liều xạ Lần lặp lại 3 10 20.235 20.334 22.765 21.045 20.678 20.145 21.89 21.231 23.456 20.145 20.435 20.546 20.567 20.021 22.987 20.023 20.002 20.236 17 Trung bình 20.89733 20.52867 23.06933 20.40433 20.37167 20.309 Bảng 32: Bảng ANOVA thí nghiệm- số chồi trung bình/callus sau chiếu xạ liều kích thích theo số liệu bảng31 Analysis of Variance for so choi tren callus kt - Type III Sums of Squares -Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value -MAIN EFFECTS A:Lieu xa RESIDUAL 17.1378 3.42755 3.51702 12 0.293085 11.69 0.0003 -TOTAL (CORRECTED) 20.6548 17 All F-ratios are based on the residual mean square error Bảng 33: Bảng trắc nghiệm phân hạng thí nghiệm - số chồi trung bình/callus sau chiếu xạ liểu kích kích theo dố liệu bảng 32 Multiple Range Tests for so choi tren callus kt by Lieu xa Method: 95.0 percent LSD Lieu xa Count LS Mean Homogeneous Groups 10 20.309 X 20.3717 X 20.4043 X 3 20.5287 X 20.8973 X 23.0693 X Contrast Difference +/- Limits - 0.368667 0.963101 - *-2.172 0.963101 - 0.493 0.963101 18 - 0.525667 0.963101 - 10 0.588333 0.963101 - *-2.54067 0.963101 - 0.124333 0.963101 - 0.157 0.963101 - 10 0.219667 0.963101 - *2.665 0.963101 - *2.69767 0.963101 - 10 *2.76033 0.963101 - 0.0326667 0.963101 - 10 0.0953333 0.963101 - 10 0.0626667 0.963101 * denotes a statistically significant difference Bảng 34: Số liệu cho xử lý thống kê: tỷ callus lên chồi sau chiếu xạ liều gây biến dị Nghiệm thức 30 40 50 60 70 80 100 Lần lặp lại 100 83.33333 75 66.66667 50 41.66667 16.66667 100 91.66667 66.66667 66.66667 41.66667 41.66667 16.66667 100 75 83.33333 75 50 33.33333 8.333333 19 Trung bình 100 83.33333 75 69.44444 47.22222 38.88889 13.88889 Bảng 35 Bảng ANOVA thí nghiệm tỷ lệ callus lên chồi sau chiếu xạ liều gây biến dị theo số liệu bảng 34 Analysis of Variance for ty le callus len choi lieu bd - Type III Sums of Squares -Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value -MAIN EFFECTS A:Lieu xa RESIDUAL 25358.8 3622.69 462.963 16 28.9352 125.20 0.0000 -TOTAL (CORRECTED) 25821.8 23 -All F-ratios are based on the residual mean square error Bảng 36: Bảng trắc nghiệm phân hạng thí nghiệm : tỷ lệ callus lên chồi sau chiếu xạ liều gây biến dị theo kết bảng 35 Multiple Range Tests for ty le callus len choi lieu bd by Lieu xa Method: 95.0 percent LSD Lieu xa Count LS Mean Homogeneous Groups 100 0.0 X 80 13.8889 70 38.8889 X 60 47.2222 X 50 69.4444 X 40 75.0 XX 30 83.3333 100.0 X X X Contrast Difference +/- Limits - 20 - 30 *16.6667 9.31075 - 40 *25.0 9.31075 - 50 *30.5556 9.31075 - 60 *52.7778 9.31075 - 70 *61.1111 9.31075 - 80 *86.1111 9.31075 - 100 *100.0 9.31075 30 - 40 8.33333 9.31075 30 - 50 *13.8889 9.31075 30 - 60 *36.1111 9.31075 30 - 70 *44.4444 9.31075 30 - 80 *69.4444 9.31075 30 - 100 *83.3333 9.31075 40 - 50 5.55555 9.31075 40 - 60 *27.7778 9.31075 40 - 70 *36.1111 9.31075 40 - 80 *61.1111 9.31075 40 - 100 *75.0 9.31075 50 - 60 *22.2222 9.31075 50 - 70 *30.5556 9.31075 50 - 80 *55.5556 9.31075 50 - 100 *69.4444 9.31075 60 - 70 8.33333 9.31075 60 - 80 *33.3333 9.31075 60 - 100 *47.2222 9.31075 70 - 80 *25.0 9.31075 70 - 100 *38.8889 9.31075 80 - 100 *13.8889 9.31075 * denotes a statistically significant difference Bảng 37: Số liệu cho xử lý thống kê: số chồi trung bình/callus sau chiếu xạ liều gây biến dị Nghiệm thức 30 40 Lần lặp lại 21.342 19.9 16.44444 20.098 17.09091 16.625 20.567 18.33333 15.5 21 Trung bình 20.669 18.44141 16.18981 50 60 70 80 100 15.66667 15.4 10.456 4.5 15.6 14 11.078 5.342 15.66667 15.24 10.988 6.3454 15.64444 14.958 10.84067 5.3958 Bảng 38 : Bảng ANOVA thí nghiệm số chồi trung bình/callus sau chiếu xạ liều gây biến dị theo số liệu bảng 37 Analysis of Variance for so choi tren callus lieu bd - Type III Sums of Squares -Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value -MAIN EFFECTS A:Lieu xa RESIDUAL 1020.42 145.775 8.59291 16 0.537057 271.43 0.0000 -TOTAL (CORRECTED) 1029.02 23 -All F-ratios are based on the residual mean square error Bảng 39: Bảng trắc nghiệm phân hạng thí nghiệm : số chồi trung bình/callus sau chiếu xạ liều gây biến dị theo kết bảng 38 Multiple Range Tests for so choi tren callus lieu bd by Lieu xa Method: 95.0 percent LSD Lieu xa Count LS Mean Homogeneous Groups 100 0.0 X 80 5.3958 X 70 10.8407 X 60 14.88 X 50 15.6444 XX 40 16.1898 X 30 18.4414 X 20.669 X Contrast Difference +/- Limits - 30 *2.22759 1.26848 - 40 *4.47919 1.26848 - 50 *5.02455 1.26848 - 60 *5.789 1.26848 22 - 70 *9.82833 1.26848 - 80 *15.2732 1.26848 - 100 *20.669 1.26848 30 - 40 *2.2516 1.26848 30 - 50 *2.79697 1.26848 30 - 60 *3.56141 1.26848 30 - 70 *7.60075 1.26848 30 - 80 *13.0456 1.26848 30 - 100 *18.4414 1.26848 40 - 50 0.545367 1.26848 40 - 60 *1.30981 1.26848 40 - 70 *5.34915 1.26848 40 - 80 *10.794 1.26848 40 - 100 *16.1898 1.26848 50 - 60 0.764447 1.26848 50 - 70 *4.80378 1.26848 50 - 80 *10.2486 1.26848 50 - 100 *15.6444 1.26848 60 - 70 *4.03933 1.26848 60 - 80 *9.4842 1.26848 60 - 100 *14.88 1.26848 70 - 80 *5.44487 1.26848 70 - 100 *10.8407 1.26848 80 - 100 *5.3958 1.26848 * denotes a statistically significant difference 23 ... mẫu callus từ thân bạc hà in vitro - Khảo sát môi trường tái sinh chồi từ callus thân - Khảo sát ảnh hưởng xạ Gamma lên callus thân - Khảo sát biến dị chồi bạc hà tái sinh từ callus chiếu xạ Chương... TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BỘ MƠN CƠNG NGHỆ SINH HỌC KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP KHẢO SÁT ẢNH HƯỞNG CỦA BỨC XẠ GAMMA LÊN CALLUS CỦA CÂY BẠC HÀ (Mentha arvensis L.) Hướng dẫn khoa học... trạng thực đề tài: “ Khảo sát ảnh hưởng xạ Gamma lên callus bạc hà (Mentha arvensis L.) nhằm nhân nhanh giống bạc hà nguyên thủy phương pháp in vitro tạo nhiều giống bạc hà biến dị có tính thích