Enzyme lipase trong xúc tác sinh học

Enzyme Lipase xúc tác sinh học I/ Mở đầu: Giới thiệu chung enzyme Enzyme chất xúc tác sinh học có thành phần protein.Trong sống sinh vật xảy nhiều phản ứng hóa học, với hiệu suất cao, điều kiện bình thường nhiệt độ, áp suất, pH Sở dĩ có diện chất xúc tác sinh học gọi chung enzyme Như vậy, enzyme protein xúc tác phản ứng hóa học Trong phản ứng này, phân tử lúc bắt đầu trình gọi chất (substrate), enzyme biến đổi chúng thành phân tử khác Tất trình tế bào cần enzym Enzym có tính chọn lọc cao chất Hầu hết phản ứng xúc tác enzym có tốc độ cao nhiều so với khơng xúc tác Có 000 phản ứng sinh hóa xúc tác enzym Hoạt tính enzym chịu tác động nhiều yếu tố Chất ức chế phân tử làm giảm hoạt tính enzym, yếu tố hoạt hóa phân tử làm tăng hoạt tính enzym Ứng dụng enzyme xúc tác sinh học Từ nhiều thập kỷ trước, E sử dụng công nghiệp chế biến có tính chất kinh nghiệm tuý Công nghệ E đời bước phát triển ứng dụng E Ngày nay, việc nghiên cứu enzyme bước vào giai đoạn mới, giai đoạn có tích hợp nhiều nghành khoa học khác : Hoá học protein, Lý sinh phân tử, sinh học phân tử v.v , có hiểu biết đầy đủ tính chất hoá học, cấu trúc, động học tiềm ứng dụng lớn Enzyme Công nghệ enzyme ngày khơng khai thác E vốn có hệ thống sống mà thiết kế, định hướng phân tử Enzyme có tính chất ưu việt dạng tự nhiên nhằm sản xuất enzyme quy mô lớn, giá thành ngày giảm, hiệu ứng dụng ngày cao Sử dụng enzyme sản xuất nâng cao chất lượng, hạ giá thành sản phẩm, cải thiện lao động, giảm ô nhiễm môi trường Cùng với phát triển khoa học E học, việc ứng dụng E ngày mở rộng, phát triển tầm cao hơn, không lĩnh vực truyền thống mà nhiều lĩnh vực tạo sản phẩm Do số enzyme phát ngày nhiều nảy sinh nhu cầu tất yếu phải phân loại enzyme đến có hệ thống phân loại enzyme tương đối hồn chỉnh Gọi tương đối hồn chỉnh hệ thống phân loại hồn thiện khơng ngừng Theo hệ thống phân loại hành, enzyme phân chia thành nhóm chính; enzyme nhóm lại chia thành nhóm phụ enzyme nhóm phụ lại chia thành phân nhóm Trong phân nhóm có số enzyme định theo thời gian số enzyme phân nhóm lại bổ sung thêm enzyme phát thêm Để cho tiện lợi, enzyme hệ thống phân loại có mã số gồm số, số viết cách dấu chấm; số thứ (từ đến 6) số nhóm, số thứ hai – số nhóm phụ, số thứ ba – phân nhóm số thứ tư số thứ tự enzyme phân nhóm Các nhóm enzyme hệ thống phân loại enzyme hành là: EC Oxidoreductase enzyme tham gia vào phản ứng oxy hóa khử EC Transferase enzyme tham gia vào phản ứng vận chuyển nhóm từ chất tới chất khác EC Hydrolase enzyme tham gia vào phản ứng thủy phân EC Lyase enzyme xúc tác phản ứng phá vỡ liên kết hóa học cách khác với thủy phân oxy hóa, thường tạo thành liên kết đơi hay cấu trúc vòng Hay nói cách khác, lyase liên kết nhóm vào mối liên kết đơi hay, ngược lại, tách nhóm với tạo thành mối liên kết đơi Ví dụ, enzyme xúc tác phản ứng sau lyase: ATP → cAMP + PPi Các lyase khác với enzyme khác điểm chúng cần chất hướng, cần hai chất cho phản ứng ngược EC Isomerase xúc tác biến đổi cấu trúc hay hình học phạm vi phân tử, tức phản ứng isomer hóa khác Tiền tố tên gọi nhóm phụ cho biết rõ kiểu phản ứng isomer hóa mà chúng xúc tác EC Ligase (synthetase) xúc tác phản ứng trùng ngưng hai phân tử, liên hợp với thủy phân liên kết pyrophosphate phân tử ATP hay nucleoside triphosphate (NTP) tương tự, tức tổng hợp liên kết hóa học mới, với tiêu hao lượng dạng ATP, nên enzyme có tên gọi khác synthetase Lipase xúc tác sinh học Lipase enzym xúc tác thuỷ phân triglyxerit thành di, mono glyxerit glyxerol axit béo nhờ hoạt động bề mặt phân pha dầu nước Lipase (EC 3.1.1.3) enzym linh hoạt sử dụng xúc tác nhiều loại phản ứng khác nhau, có khả chịu kiềm, chịu nhiệt Chính thế, lipase ứng dụng rộng rãi công nghiệp công nghiệp thực phẩm, cơng nghiệp hố học, cơng nghiệp mỹ phẩm, công nghiệp da, y dược ngành công nghip khỏc[2] Lipase đợc phân bố động vật, thực vật vi sinh vật, song công nghiệp ngn thu lipase lín nhÊt lµ tõ vi sinh vËt Trong nấm mốc, nấm men, vi khuẩn xạ khuẩn có khả tổng hợp lipase Vo năm cuối kỷ XX, tổng sản lợng loại enzym ton th gii vo khong 1300 tn/nm[3] Thị trường giới enzym công nghiệp năm 1994 ước tính khoảng tỷ đơla Mỹ, lipase chiếm 7% (70 triệu) [sheldon, 1996] Trong công nghiệp dầu chất béo, việc sử dụng lipase phổ biến Có khoảng 100 loại lipase khác dùng để chuyển đổi lipit thành chất khác[13] Hiện nay, Việt Nam sử dụng phổ biến lipase ngành công nghiệp thực phẩm, công nghiệp tẩy rửa, hoá học, y học… cần lượng lớn lipase, song chế phẩm lipase sử dụng phần ln l nhp khu Do vy, đề tài tập trung nghiên cứu thu nhận sử dụng hiệu lipase từ hai đối tợng nấm men Candida rugosa Bacillus sp II Các nguồn thu lipase Lipase phân bố rộng loài vi sinh vật, động vật thực vật Ở người động vật có xương sống, nhiều lipase kiểm sốt thuỷ phân, hấp thụ, tạo thành chất béo chuyển hố lipoprotein Lipase động vật chia làm nhóm dựa vị trí hoạt động chúng: lipase thực phẩm, lipase mô lipase sữa Ở thực vật, lipase tìm thấy mơ dự trữ hạt dầu, hạt ngũ cốc trình nảy mầm hạt Hầu hết lipase không hoạt động thời kỳ ngủ đơng, ngoại trừ lipase tìm thấy hạt đậu caston[16] Lượng lớn lipase công nghiệp sản xuất từ loại vi sinh vật: vi khuẩn, nấm mốc, nấm men[10] Vi khuẩn: Lipase ngoại bào Streptomyces rimous R6554 W tách từ dịch lọc canh trường sắc ký cột Streptomyces vi khuẩn đất Gram (+) thể khả đặc biệt tổng hợp chất trao đổi thứ cấp sử dụng lipase thuỷ phân ngoại bào để phá huỷ nguyên liệu hữu môi trường sống tự nhiên Tuy nhiên nay, có vài lipase Streptomyces xác định hoạt tính[10] Ngồi ra, người ta tìm thấy lipase có số lồi vi khuẩn khác Pseudomonas cepacia có hoạt tính nhiệt độ cao, môi trường kiềm kỵ nước[5] Nấm mốc: Lipase tìm thấy số loài như: Aspergillus, Rhizopus (tách từ dừa), Rhizopus oryzae (phân lập từ dầu dừa), Pythiumnltimum (trong dung dịch hữu cơ, khơng có nhũ tương), Mucor sp humicola lamuginosa[6] Nấm men: Nấm men Candida rugosa nguồn sản xuất lipase quan trọng Các đặc tính xúc tác cấu trúc hố sinh lipase lồi nấm men Candida rugosa cơng bố nhiều tài liệu[7] Có giống lipase từ Candida rugosa có giống xác định đặc tính giống dùng để sản xuất enzym thương phm iii yếu tố ảnh hởng đến khả sinh tổng hợp lipase Có nhiều yếu tố ảnh hởng đến sinh tổng hợp enzym Nhng đặc điểm tÝnh chÊt, sinh lý, sinh ho¸ cđa vi sinh vËt có ý nghĩa định Vì việc tuyển chọn chủng có hoạt lực tơng đối tự nhiên sau tăng cờng khả sinh tổng hợp cao chúng phơng pháp gây đột biến làm thay đổi nguồn gen trung tâm nhờ yếu tố hoá học, vật lý,có ý nghĩa vô quan trọng Không phải tất vi sinh vật có khả sinh tổng hợp enzym nh nhau, chủng chi, loài khác lợng enzym chúng sản sinh Vì việc tuyển chọn vi sinh vật có khả tạo nhiều enzym cần phải kết hợp chặt chẽ với việc kiểm tra hoạt lực hàng chục, hàng trăm chủng vi sinh vật để tìm chủng có khả sinh tổng hợp enzym cao nhÊt Ngoµi viƯc tn chän chđng vi sinh vật có kảh sinh tổng hợp hệ enzym có hoạt độ cao cần phải tiến hành nuôi cấy chúng điều kiện tối u nhằm đảm bảo kảh sinh tổng hợp trì hoạt lực enzym chúng ảnh hởng thành phần môi trờng dinh dỡng Thành phần môi trờng nhân tố có tác động quan trọng đến hoạt động nh trình tổng hợp enzym vi sinh vâtj, muốn sinh trởng, phát triển đợc cần phải có hoạt chất chứa C, N, H O đầy đủ Ngoài vi sinh vật cần đợc cung cấp chất khoáng Mg, Ca, S, P, Fe, K số chất cảm ứng đặc trng enzym ¶nh h−ëng cđa ngn cacbon C¸c ngn cacbon kh¸c ảnh hởng khác lên phát triển sản sinh enzym sinh vật E Dalmau cộng (2000) nghiên cứu ảnh hởng nguồn cacbon đến sinh tổng hợp lipase chủng Candida rugosa phơng pháp nuôi bán liên tục cho thấy hydratcacbon axit không liên quan đến chất béo không làm tăng sản xuất lipase Hiệu suất thu đợc enzym cao với nguồn cacbon lipit axit béo Sự kết hợp loại chất hydratcacbon axit béo không cải thiện sinh tổng hợp lipase Glucose kìm hãm sinh tổng hợp lipase, ngợc lại, tween 80 kích thích tổng hợp lipase ảnh hởng nguồn nitơ Nitơ yếu tố ảnh hởng lớn đến sinh tổng hợp nhiều enzym, nitơ nguồn cung cấp vật liệu (nguyên tố nitơ) cho trình sinh tổng hợp protein enzym trình phát triển.Silbel F cộng (2002) nghiên cứu ảnh hởng nguồn cacbon nitơ đến sinh tổng hợp lipase chủng Candida rugosa cho thấy nguồn cacbon nitơ nghiên cứu hoạt độ lipase canh trờng nuôi đạt đợc cao (5,58 U/ml) môi trờng nuôi chứa nguồn nitơ cao nấm men proteose-pepton với nguồn cacbon dầu oliu Và hoạt độ đạt thấp môi trờng nuôi cấy chứa nguồn nitơ trypton nguồn cacbon lactose Tuy nhiên ảnh hởng nguồn nitơ đến tổng hợp lipase chủng khác khác nhau, nghiên cøu cđa Melisa E L Gutara vµ céng sù cho thấy lên men bề mặt chủng Penicillium simplicissimum ảnh hởng nguồn nitơ đến sinh tổng hợp lipase không đáng kể ảnh hởng nguồn khoáng Các nguyên tố đa lợng vi lợng có ảnh hởng lớn tới sinh trởng sinh tổng hợp lipase cđa vi sinh vËt Theo c«ng bè cđa Rohit Sharma cộng (2001) cho thấy Mg có ảnh h−ëng ®Õn ®é bỊn nhiƯt cđa enzym, nÕu thiÕu Mg môi trờng nuôi sinh tổng hợp lipase bị giảm xuống Phospho ảnh hởng trực tiếp tới sinh sản nấm mốc vi sinh vật Vì muốn tăng cờng tổng hợp lipase cần cung cấp đầy đủ lợng phospho đầy đủ lợng cần thiết nguyên tố Lu huỳnh kích thích tạo thành lipase nấm men, nguồn lu huỳnh dùng (NH4)2SO4 Khi chọn môi trờng dinh dỡng để nuôi vi sinh vật cần ý đến thành phần, chất lợng tơng quan khối lợng cấu tử Các nghiên cứu trớc cho thấy có khả tăng cờng sinh tổng hợp enzym lên hàng chục lần cách thay đổi thành phần môi trờng cách chuẩn xác, Tỷ lệ tối u cấu tử chính, tuyển chọn cho thêm chất cảm ứng có hiệu lực, bổ sung lợng cần thiết chất khoáng nh u tè kÝch thÝch sinh tr−ëng  ¶nh h−ëng cđa điều kiện nuôi Điều kiện nuôi có ảnh hởng lớn đến trình sinh trởng phát triển vi sinh vật, điều kiện nuôi bao gồm yếu tố độ ẩm, pH, độ thông khí, tốc độ lắc, nhiệt độ môi trờng pH môi trờng pH ban đầu môi ảnh hởng không nhỏ tới phát triển khả tạo enzym Jau-Yann Wu (2000) nghiên cứu sinh tổng hợp lipase cho thấy hoạt độ lipase đợc tổng hợp cao pH 8,5 Độ thông khí Trong trình sinh tr−ëng vi sinh vËt tiªu thơ 25-35% chÊt dinh d−ìng môi trờng thải lợng lớn nhiệt CO2 Vì phải hạ nhiệt thông gió với không khí vô trùng có độ ẩm tơng đối gần 100%, chế độ thông khí vô trùng liên tục giám đoạn thông khí tự nhiên Trong môi trờng nuôi cấy chìm phải đảm bảo cho độ oxy hoà tan không thấp 20% độ bão hoà (F Valero, 1998) Mật độ tế bào Số lợng tế bào vi sinh vật có ảnh h−ëng tíi sinh tỉng hỵp lipase cđa nÊm men Candida rugosa Trong môi trờng nuôi, số lợng tế bào làm kéo dài pha ổn định pha logarit ảnh hởng đến sinh tôngr hợp lipase, ngợc lại số lợng tế bào ban đầu nhiều pha logảit cha hoàn thành môi trờng cạn kiệt nguồn dinh dỡng lipase đợc tổng hợp Do ta cần phải nghiên cứu tìm mật độ tế bào ban đầu thích hợp khả sinh tổng hợp lipase cao IV CẤU TẠO CỦA LIPASE Khối lượng phân tử Cũng enzym khác, lipase thu từ mô, quan động, thực vật vi sinh vật Các lipase có tính chất chung, song chúng khác số tính chất như: tính đặc hiệu chất, mức độ phân giải chất, khối lượng phân tử, thành phần axit amin điều kiện hoạt động Sự khác loài mà chủng loài[7] Khối lượng phân tử lipase dao động nhiều chủng vi sinh vật: Candida rugosa có đồng phân LipA (58kDa) LipB (62kDa); Geotrichum candidum khoảng 60.000 Da[34], Aspergillus niger 97.000 Da, Penicillium crustosum 29.300 Da, C.Paralipolytica 55.900 Da Awai cộng tách từ P.cyclopum hai lipase có khối lượng phân tử 27 kDa 30 kDa Lipase sản xuất P.camemberti gluco-protein có khối lượng phân tử 38 kDa Cấu trúc khơng gian Đã có nhiều thí nghiệm triển khai nhằm tìm hiểu cấu trúc lipase, cấu trúc ba chiều lipase coi sở để hiểu phản ứng động học, đặc hiệu chất, tiên đoán đặc điểm sinh hoá hoạt động lipase bề mặt phân pha dầu nước Lipase từ Rhizomun miehei enzym thuỷ phân có cấu trúc bậc xác định tinh thể học tia X[16] Dùng phương pháp tia X phát cấu trúc α/β Liên kết β song song làm cầu nối với cấu trúc xoắn ốc α để hình thành cấu trúc phức tạp Các cầu disunfua tìm thấy phân tử lipase có lẽ nhằm làm ổn định cấu trúc gấp nếp enzym Trong cấu trúc protein hình cầu chứa nhân kị nước tạo nên chuỗi không cực cạnh có ý nghĩa quan trọng cho ổn định phân tử Bên cạnh có vài nhóm có cực phân tử liên kết Sự có mặt phân tử nước làm tăng lực liên kết Vander Wall lực phân tán nhân, ổn định cấu trúc khơng gian phân tử enzym tăng lên[16] 10 Hình Cấu trúc không gian lipase từ Candida rugosa [21] Nhóm quan trọng tạo thành trung tâm hoạt động lipase ba Asp…His…Ser Lipase tham gia vào vị trí xúc tác với proteinase esterase Đối lập với proteinase, trung tâm xúc tác khơng phân bố bề mặt mà nằm chuỗi xoắn bề mặt Vị trí hoạt động lipase có Ser, His Asp (hoặc Glu) hồn tồn bị che khuất đoạn nắp cấu tạo hai chuỗi xoắn Bề mặt mang Trypsin hoàn tồn khơng cực tác động qua lại với đầu kị nước bao quanh trung tâm hoạt động Trong hầu hết cấu trúc lipase, đầu serin hoạt động chuỗi pentapeptit có trình tự Gly-X1Ser-X2-Gly cấu trúc tìm thấy protease serin (Boel cộng sự, 1998) V MỘT VÀI ĐẶC TÍNH CỦA LIPASE Chất hoạt hố chất kìm hãm Phản ứng enzym xúc tác phụ thuộc vào nhiều yếu tố, chất hoạt hố chất kìm hãm ảnh hưởng tới vận tốc phản ứng hoạt độ enzym phản ứng Hoạt độ enzym bị thay đổi tác dụng 11 số chất có chất hoá học khác * Chất hoạt hoá enzym Chất làm tăng hoạt độ xúc tác enzym Các chất có chất hố học khác nhau, anion, ion kim loại chất hữu có cấu tạo phức tạp Các chất hoạt động cation muối amon đưa vào để làm tăng khả thuỷ phân dầu oliu lipase từ Mucor [Shamkant Patkar Fredrick Bjorkling, 1992] Didier Rotticci cộng chứng minh lipase từ Candida antaractica hoạt hố chất hoạt động bề mặt Trong môi trường chất axetat p-nitrophenyl có chứa chất hoạt động ion SDS (Sodium dodecyl sulfate) tốc độ phản ứng tăng lên Chứng tỏ SDS có tác dụng việc tăng cường tốc độ phản ứng lipase[9] Tuy nhiên tác dụng kích hoạt giới hạn nồng độ xác định, vượt giới hạn làm giảm hoạt độ enzym * Chất kìm hãm enzym Các chất làm giảm hoạt độ enzym gọi chất kìm hãm (ức chếInhibitor), kí hiệu I Các chất ion, phân tử vơ cơ, hữu cơ, kể protein Các hợp chất kìm hãm hoạt tính lipase cách thay đổi cấu trúc lipase tác động vào tính chất bề mặt Cơ chế hoạt động kìm hãm lipase protein polypeptit chưa nghiên cứu rõ ràng Để giải thích hoạt động kìm hãm có hai giả thuyết đưa ra: (1) chất kìm hãm protein hấp phụ lên bề mặt gây thay đổi tính chất bề mặt đó; (2) Sự tác động qua lại trực tiếp protein với lipase cạnh tranh với chất Người ta làm nghiên cứu kìm hãm lipase từ tuỵ tạng ngựa lipase từ Rhizopus arrhizus , R.delemar với loạt protein phổ biến gồm : myoglobin, serum albumin, ovalbumin, 12 meltin Tất protein kìm hãm lipase từ tuỵ tạng ngựa khơng có mặt colipase muối mật Một điều thú vị lipase từ R.delmar bị kìm hãm protein lipase từ R Arrhizus khơng bị ảnh hưởng protein đó[24] Tính đặc hiệu chất * Đặc điểm nguồn chất Lipase (EC.3.1.1.3) enzym xúc tác trình thuỷ phân triglyceride không trộn nước mặt phân cách nước lipit Các este axit cacboxinic mạch ngắn dễ tan nước thuỷ phân từ từ với thể tích nước lớn thuỷ phân hồn tồn Các chất tạo thành trình thuỷ phân 1,2- 2,3- diglyxerit; 2-monoglyxerit; 1- 3monoglyxerit glyxerol Dựa vào điều kiện phản ứng thuỷ phân đạt đến cân thành phần trung gian chuỗi thuỷ phân tách nhờ kết tinh, chưng cất sắc ký[16] Lipase chất xúc tác thuỷ phân chuỗi triglyxerit dài este metyl alcohol chuỗi dài axit béo lipase Triglyxerit + H2O > Điglyxerit + axit béo * Thuỷ phân liên kết este glyxerol axit béo Lipase chất xúc tác sinh học sử dụng vào nhiều mục đích khác Trên giới áp dụng thành công lipase từ nguồn khác xúc tác cho thuỷ phân, tổng hợp chất béo trao đổi nhóm chất este[13] Tính chất đặc thù phổ biến với tất lipase phản ứng chúng mơi trường khơng đồng nhất, lipase thể chức riêng mặt phân pha dầu 13 nước[16] Lipase sử dụng nhiều tổng hợp hoá hữu với vai trò nhóm enzym có khả phân giải hydro từ triacylglyxerol, bề mặt phân pha dầu nước[7] Gần người ta phát lipase từ cải dầu có tính chất xúc tác thuỷ phân triolein nhanh khoảng 70 lần so với thuỷ phân tri-linolein điều kiện khơng có nước, lipase xúc tác este hoá axit oleic butanol[14] Lipase xúc tác phản ứng thuỷ phân dầu khơng tan thành sản phẩm hồ tan; phản ứng xảy theo chiều ngược lại lipase xúc tác để tạo thành acyl glyxerol từ glyxerol axit béo Cơ chế động học xúc tác lipase Theo nghiên cứu lipase có nhóm serin, histidin axit aspastic trung tâm hoạt động Với chất khơng tan nước, hoạt tính lipase đạt cực đại phân tán vào bề mặt phân pha dầu nước Q trình gọi q trình hoạt hố phân pha[24] (hình 3) S Eis* Es* Es*S -Mặt phân pha Sw E E* E*Sw Nước Pw Hình Mơ hình hoạt động lipase chất hồ tan khơng tan 14 nước Sự thay đổi hình thể lipase q trình hoạt động xúc tác Mơ hình Verger đề xuất (1980) Trong đó: E: Lipase hồ tan khơng hoạt động E*: Lipase hồ tan dạng hoạt động Es*: Lipase hoạt động có hấp phụ Eis*: Lipase khơng hoạt động hấp phụ Sw: Cơ chất tan nước S: Cơ chất không tan nước E*Sw Es*S: Phức hợp lipase- chất Khi khơng có mặt nước có nước với lượng nhỏ, phản ứng este hoá phản ứng este ưu tiên Trong trường hợp này, đặc tính tốc độ xúc tác tính đặc hiệu phụ thuộc nhiều vào điều kiện phản ứng chất chất [Paul Woolley & Steffen B Petersen, 1992] Nhiệt độ pH hoạt động lipase Nhiệt độ pH hai yếu tố ảnh hưởng nhiều đến hoạt động tính bền lipase Lipase thu từ nguồn khác chịu ảnh hưởng nhiệt độ pH khác Theo Marija Ablamic Iwanalescie, lipase tổng hợp từ chủng Streptomyces riromus R6554W hoạt động mạnh dải nhiệt độ 5060ºC, pH tối ưu 9,5 điều kiện pH nhiệt độ khơng thích hợp, lipase bị kìm hãm hoạt động giảm tính bền Ủ enzym pH 9,5; nhiệt độ 23ºC sau 24 hoạt độ giảm 5%, pH 10-11 hoạt độ giảm 55% Ở nhiệt độ 30ºC hoạt độ giảm 25%, 90ºC hoạt độ 30% so với hoạt độ lipase 55ºC[17] Lipase từ chủng S.riromus bền nhiệt độ 20-50ºC hoạt 15 tính nhanh vùng nhiệt độ cao 70ºC[17] Lipase từ chủng Penicillium cyclopium có pH tối ưu khoảng 4,5-7,0[10] Lipase từ nấm Pythium ultium có pH hoạt động điều kiện tối ưu 7,5-8,5 Còn lipase từ chủng Rhizopus oryae có pH tối ưu 7,5[6] Đa số lipase hoạt động nhiệt độ 50-60ºC, nhiên có vài chủng hoạt động nhiệt độ thấp Chủng Penicillium cyclopium, Pythium ultium Rhizopus oryae chịu nhiệt kém, bị ức chế nhiệt độ lên tới 50ºC[6] Lipase từ Candida rugosa ổn định mơi trường kiềm pH từ 710 có hoạt độ mạnh pH 8,5 [Sharon cộng sự, 1998] KHẢO SÁT KHẢ NĂNG ỨNG DỤNG LIPASE tõ Candida rugosa  Khảo sát khả thuỷ phân dầu với lipase cố định Trong công nghiệp dược người ta thường sản xuất viên nang có chứa chất béo với số axit 80 – 100 Cũng khấu phần thức ăn kiêng bệnh nhân nhiễm mỡ máu sử dụng loại dầu ăn thực vật thuỷ phân sơ số axit tăng đến 80 – 100 làm giảm hàm lượng mỡ máu  Khảo sát khả sử dụng lipase tan sản xuất phomat Trong trình sản xuất phomat từ sữa tươi, giai đoạn lên men đông tụ phomat người ta sử dụng renin số proteaza axit tính kiềm tính làm tác nhân đơng tụ sữa Trong giai đoạn ủ chín bổ sung lipase nhằm làm tăng hương vị đặc trưng cho phomat 16 ... nên enzyme có tên gọi khác synthetase Lipase xúc tác sinh học Lipase enzym xúc tác thuỷ phân triglyxerit thành di, mono glyxerit glyxerol axit béo nhờ hoạt động bề mặt phân pha dầu nước Lipase. .. lipase từ cải dầu có tính chất xúc tác thuỷ phân triolein nhanh khoảng 70 lần so với thuỷ phân tri-linolein điều kiện khơng có nước, lipase xúc tác este hố axit oleic butanol[14] Lipase xúc tác. .. Thuỷ phân liên kết este glyxerol axit béo Lipase chất xúc tác sinh học sử dụng vào nhiều mục đích khác Trên giới áp dụng thành công lipase từ nguồn khác xúc tác cho thuỷ phân, tổng hợp chất béo trao