NGHIÊN CỨU CHIẾT CHLOROPHYLL VÀ CAROTENOID TỪ TẢO CHLORELLA

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP NGHIÊN CỨU CHIẾT CHLOROPHYLL VÀ CAROTENOID TỪ TẢO CHLORELLA Họ tên sinh viên: NGUYỄN THỊ BÔNG Ngành: CÔNG NGHỆ HĨA HỌC Niên khóa: 2008 - 2012 Tháng 08/2012 i NGHIÊN CỨU CHIẾT CHLOROPHYLL VÀ CAROTENOID TỪ TẢO CHLORELLA Tác giả NGUYỄN THỊ BƠNG Khóa luận đệ trình để đáp ứng yêu cầu cấp kỹ sư ngành Công Nghệ Hóa Học Giáo viên hướng dẫn: PGS.TS Trương Vĩnh Tháng năm 2012 ii LỜI CẢM TẠ Tôi xin chân thành cảm ơn thầy PGS.TS Trương Vĩnh, trưởng mơn Cơng nghệ hóa học, người thầy kính u tận tình hướng dẫn, truyền đạt kiến thức quý giá suốt q trình thực hiện, thầy ln nhắc nhở, sửa chữa sai sót khơng ngừng động viên tạo điều kiện cho chúng tơi hồn thành tốt luận văn tốt nghiệp Tôi xin chân thành cảm ơn đến Vũ Ngọc Hà Vi tồn thể q thầy Bộ mơn Cơng nghệ hóa học tận tình hướng dẫn, giúp đỡ, động viên tơi suốt q trình thực đề tài Tơi xin chân thành gửi lời cảm ơn đến thầy Nguyễn Vinh Lang, khoa Khoa học bản, tận tình giúp đỡ, cho phép thực tập khoa để tơi hồn thành khóa luận cách tốt Con xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến ba mẹ nuôi dạy khôn lớn để có thành ngày hơm Tơi xin gửi lời cảm ơn đến bạn sinh viên lớp DH08HH giúp đỡ tơi q trình thực đề tài Thành phố Hồ Chí Minh, tháng 8/2012 Sinh viên thực Nguyễn Thị Bơng iii TĨM TẮT Đề tài “Nghiên cứu chiết chlorophyll carotenoid từ tảo Chlorella” tiến hành phòng thí nghiệm Bộ mơn Cơng nghệ hóa học, trường Đại học Nơng Lâm TP Hồ Chí Minh, thời gian từ tháng 2/2012 đến tháng 8/2012 Phần nghiên cứu đề tài bao gồm thí nghiệm sau: • Khảo sát ẩm độ ngun liệu tảo chlorella sau ly tâm loại bỏ nước tố độ 4000 vòng/phút phút • Khảo sát ảnh hưởng loại dung môi thời gian chiết đến lượng chlorophyll carotenoid thu sau trình chiết • Khảo sát ảnh hưởng tốc độ đồng hóa đến lượng chlorophyll carotenoid thu sau q trình chiết • Nghiên cứu định danh thành phần sắc tố dịch chiết sau trình chiết • Thử nghiêm tách chlorophyll carotenoid sắc ký cột Kết thu sau: • Nguyên liệu tảo chlorella sau ly tâm loại bỏ nước tố độ 4000 vòng/phút phút có độ ẩm 83.21 % • Loại dung mơi tối ưu cho q trình chiết N,N-Dimethylformamide với thời gian chiết tối ưu 180 phút • Tốc độ đồng hóa tốt để thu hàm lượng chlorophyll carotenoid cao 20000 vòng/phút Các số liệu thí nghiệm xử lý phần mềm STATGRAPHICS 7.0 iv ABSTRACT The thesis “Research of the extraction of chlorophyll and carotenoid in chlorella algae” was conducted in the laboratory of Chemical Technology department, Nong Lam University Ho Chi Minh city, from 2/2012 to 8/2012 The thesis includes these experiment: • Studying moisture content of the Chlorella algae after centrifugation in 4000 rpm for minutes • Studying the effect of solvent and time extractive on the amount of chlorophyll and carotenoid obtained after the extraction • Studying the effect of assimilation rate to the amount of chlorophyll and carotenoid obtained after the extraction • Identified the pigment components in the extraction • Separation of chlorophyll and carotenoid by column chromatography The results were as follows: • Ingredients chlorella algae after centrifugation to remove water in 4000 rpm in minutes is 83.21 ± 0.97% moisture • Optimal solvent for the extraction is N, N-dimethylformamide with optimum extraction time at 180 minutes • High – speed blender at 20000rpm to obtain high levels of chlorophyll and carotenoid v MỤC LỤC LỜI CẢM TẠ iii TÓM TẮT .iv ABSTRACT…………………….…………………………………………… ………iv MỤC LỤC v DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT .ixi DANH SÁCH CÁC BẢNG ix DANH SÁCH CÁC HÌNH xi DANH SÁCH PHỤ LỤC xiii Chương 1: MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích đề tài: 1.3 Nội dung đề tài: 1.4 Yêu cầu: Chương 2: TỔNG QUAN 2.1 Lịch sử nghiên cứu tảo lục Chlorella 2.1.1 Phân loại 2.1.2 Hình thái đặc điểm sinh học ngành tảo lục 2.2 Sơ lược chlorophyll 10 2.2.1 Khái niệm 10 2.2.2 Cấu tạo phân loại 10 2.2.3 Tính chất chlorophyll 11 vi 2.3 Sơ lược carotenoid 14 2.3.1 Lịch sử khái niệm carotenoid 14 2.3.2 Phân loại carotenoid 14 2.3.3 Tính chất carotenoid 16 2.4 Tách chiết tinh chế chlorophyll carotenoid 17 2.5 Phương pháp phân tích, đo đạt tiêu 18 Chương : VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 23 3.1 Thời gian địa điểm tiến hành thí nghiệm 23 3.2 Vật liệu, hóa chất thiết bị 233 3.2.1 Nguyên liệu: 23 3.2.2 Hóa chất: 23 3.2.3 Thiết bị: 24 3.3 Quy trình thực 24 3.4 Phương pháp thí nghiệm: 26 3.4.1 Thí nghiệm 1: Khảo sát hàm lượng nước có nguyên liệu tảo tươi sau li tâm 26 3.4.2 Thí nghiệm 2: Khảo sát ảnh hưởng loại dung môi thời gian chiết đến trình chiết chlorophyll carotenoid từ tảo Chlorella 27 3.4.3 Thí nghiệm 3: Xác định tốc độ đồng hóa tối ưu cho q trình chiết sắc tố 28 3.4.4 Thí nghiệm 4: Định danh chlorophyll carotenoid phương pháp sắc ký mỏng .30 3.4.5 Thí nghiệm 5: thử nghiệm tách chlorophyll carotenoid từ tảo chlorella phương pháp sắc ký cột: 33 vii Chương 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 34 4.1 Ẩm độ nguyên liệu: 34 4.2 Thí nghiệm 2: Ảnh hưởng loại dung môi thời gian ngâm chiết đến hàm lượng chlorophyll carotenoid trích ly 35 4.3 Thí nghiệm 3: Ảnh hưởng tốc độ đồng hóa đền khả chiết sắc tố 40 4.4 Thí nghiệm 4: Thử nghiệm định danh sắc tố tảo phương pháp sắc ký mỏng 44 4.5 Thí nghiệm 5: Thử nghiệm tách chlorophyll carotenoid sắc ký cột 46 Chương 5:KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 48 5.1 Kết luận 48 5.2 Đề nghị Error! Bookmark not defined TÀI LIỆU THAM KHẢO 50 PHỤ LỤC 52 viii DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT Chl.a: Chlorophyll a Chl.b: Chlorophyll b Ca: Carotenoid [Chl.a]: Nồng độ chlorophyll a dịch chiết [Chl.b]: Nồng độ chlorophyll b dịch chiết [Ca]: Nồng độ carotenoid dịch chiết N,N-DMF: N,N- Dimethylformamide ANOVA: Analysis of Variance TN: Thí nghiệm DMSO: Dimethyl sulfoxide ix DANH SÁCH CÁC BẢNG Bảng 2.1: Thành phần hóa học chứa tảo Chlorella Bảng 2.2: Thành phần aminoacid (%) Chlorella Bảng 2.3: So sáng đặc trưng kỹ thuật sắc ký 21 Bảng 4.1: Độ ẩm nguyên liệu Error! Bookmark not defined Bảng 4.2: Kết đo độ hấp thu bước sóng khác Error! Bookmark not defined Bảng 4.3: Kết tính tốn nồng độ chlorophyll carotenoid có dịch chiết Error! Bookmark not defined Bảng 4.4: Lượng chlorophyll a, chlorophyll b, carotenoid gam tảo khô Error! Bookmark not defined Bảng 4.5: Kết đo độ hấp thu bước sóng khác 41 Bảng 4.6: Kết tính tốn cho hàm lượng chlorophyll carotenoid có dịch chiết 42 Bảng 4.7: Kết khối lượng sắc tố tính theo 1gam tảo khơ…………………… 44 Bảng 4.7: Giá trị Rf 45 Bảng 4.8: Kết theo thứ tự giải ly cột………………………… …………… 46 Bảng 4.9: Kết thể tích sắc tố giải ly……….………………………………… 47 x TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] Nguyễn Thùy Linh Lê Phạm Công Hoang Ảnh hưởng số yếu tố lên trình tách chiết Chlorophyll từ rong mứt [2] Luận văn thạc sĩ hóa học: Nghiên cứu xác định chlorophyll-a phương pháp huynh quang Ứng dụng cho phân tích mẫu nước mặt so sánh với phương pháp trắc quang-Võ Thị Lệ Hiền [3] Nguyễn Kim Phi Phụng, 2007 Các phương pháp cô lập hợp chất hữu [4] Catalina Cubas, M Gloria Lobo, Mónica González, 2007 Optimization of the extraction of chlorophylls in green beans (Phaseolus vulgaris L.) by N,N dimethylformamide using response surface methodology Journal of Food Composition and Analysis 21 (2008)n125 – 133 [5] R.Minocha, G.Martinez, B.Lyons And S.Long, 2009 Development of a standardized methodology for quantifying total chlorophyll and carotenoids from foliage of hardwood and conifer tree species Can J For Res Vol 39 [6] Kuninao Tada, Hitomi Yamaguchi And Shigeru Montani, 2004 Comparison of Chlorophyll a Concentrations Obtained with 90% Acetone and N,N-dimethylformamide Extraction in Coastal Seawater Journal of Oceanography, Vol 60, pp 259 to 261 [7] Robert J Porra.2002.The chequered history of the development and use of simultaneous equations for the accurate determination of chlorophylls a and b Photosynthesis Research 73: 149–156 [8] Lichtenthaler, H.K 1987 Chlorophylls and carotenoids: Pigments of photosynthetic biomembranes Methods Enzymol 148:350-382 [9] Dunn, JL Turnbull, JD Robinson University of Wollongong Comparison of solvent regimes for the extraction of photosynthetic pigments from leaves of higher plants Functional Plant Biology 31, 2004, 195-202 [10] Rami Moran And Dan Porath, 1980 Chlorophyll Determination in Intact Tissues Using N,N Dimethylformamide Plant Physiol (1980) 65, 478-479 50 [11] J.P.Riley and T.R.S.Wilson, 1965 The use of thin-layer chromatography for the separation and identification of phytoplankton pigments [12] Catalina Cubas, M Glorila Lobo, Mónica González, 2007 Optimization of the chlorophylls in green beans (Phaseolus vulgaris L.) by N,N-Dimethylformanmide using response surface methodology 51 PHỤ LỤC Phụ lục 1: kết cho thí nghiệm đo độ ẩm tảo sau ly tâm: Khối Khối lượng ống lượng sau + tảo ban sấy đầu(g) (g) 27,12 29,53 27,53 0,41 27,19 29,52 27,61 0,42 1,91 27,2 28,6345 27,42 0,22 1,215 Khối lượng ống nghiệm (g) Khối lượng tảo (g) Khối lượng nước (g) Phụ lục 2: Bảng AVOVA ảnh hưởng loại dung môi thời gian chiết lên hàm lượng chlorophyll a thu được: Analysis of Variance for TN2.Chla - Type III Sums of Squares -Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -MAIN EFFECTS A:TN2.Thoigian 1393.272 696.636 5.008 0262 B:TN2.Dungmoi 37401.125 37401.125 268.869 0000 INTERACTIONS AB 1731.3604 865.68022 6.223 0140 RESIDUAL 1669.2675 12 139.10563 -TOTAL (CORRECTED) 42195.025 17 -0 missing values have been excluded All F-ratios are based on the residual mean square error 52 Phụ lục 3: Bảng AVOVA ảnh hưởng loại dung môi thời gian chiết lên hàm lượng chlorophyll b thu được: Analysis of Variance for TN2.chlb - Type III Sums of Squares -Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -MAIN EFFECTS A:TN2.Thoigian 2017.185 1008.593 20.595 0001 B:TN2.Dungmoi 13193.918 13193.918 269.417 0000 INTERACTIONS AB 2490.4540 1245.2270 25.427 0000 RESIDUAL 587.66540 12 48.972117 -TOTAL (CORRECTED) 18289.223 17 -0 missing values have been excluded All F-ratios are based on the residual mean square error Phụ lục 4: Bảng AVOVA ảnh hưởng loại dung môi thời gian chiết lên hàm lượng carotenoid thu được: Analysis of Variance for TN2.Carotenoid - Type III Sums of Squares -Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -MAIN EFFECTS A:TN2.Thoigian 180.0541 90.0271 13.882 0008 B:TN2.Dungmoi 7726.4881 7726.4881 1191.434 0000 INTERACTIONS AB 214.18930 107.09465 16.514 0004 RESIDUAL 77.820400 12 6.4850333 -TOTAL (CORRECTED) 8198.5519 17 -0 missing values have been excluded All F-ratios are based on the residual mean square error 53 Phụ lục 5:Bảng tính giá trị trung bình ảnh hưởng loại dung môi thời gian chiết lên hàm lượng chlorophyll a thu được: Table of Least Squares Means for TN2.Chla -95% Confidence Level Count Average Stnd Error for mean -GRAND MEAN 18 81.90000 2.7799443 75.84146 87.95854 A:TN2.Thoigian 120 78.13167 4.8150048 67.63796 88.62537 180 94.05333 4.8150048 83.55963 104.54704 240 73.51500 4.8150048 63.02130 84.00870 B:TN2.Dungmoi Acetone80% 36.31667 3.9314350 27.74859 44.88474 NN-DMF 127.48333 3.9314350 118.91526 136.05141 AB 120 Acetone80% 31.80000 6.8094451 16.95966 46.64034 120 NN-DMF 124.46333 6.8094451 109.62300 139.30367 180 Acetone80% 36.85000 6.8094451 22.00966 51.69034 180 NN-DMF 151.25667 6.8094451 136.41633 166.09700 240 Acetone80% 40.30000 6.8094451 25.45966 55.14034 240 NN-DMF 106.73000 6.8094451 91.88966 121.57034 Phụ lục 6: Bảng tính giá trị trung bình ảnh hưởng loại dung mơi thời gian chiết lên hàm lượng chlorophyll b thu được: Table of Least Squares Means for TN2.chlb -95% Confidence Level Count Average Stnd Error for mean -GRAND MEAN 18 40.049444 1.6494463 36.454682 43.64421 A:TN2.Thoigian 120 31.430000 2.8569248 25.203688 37.65631 180 54.960000 2.8569248 48.733688 61.18631 240 33.758333 2.8569248 27.532021 39.98465 B:TN2.Dungmoi Acetone80% 12.975556 2.3326693 7.891793 18.05932 NN-DMF 67.123333 2.3326693 62.039571 72.20710 AB 120 Acetone80% 9.756667 4.0403018 951332 18.56200 120 NN-DMF 53.103333 4.0403018 44.297999 61.90867 180 Acetone80% 11.560000 4.0403018 2.754665 20.36533 180 NN-DMF 98.360000 4.0403018 89.554665 107.16533 240 Acetone80% 17.610000 4.0403018 8.804665 26.41533 240 NN-DMF 49.906667 4.0403018 41.101332 58.71200 54 Phụ lục 7: Bảng tính giá trị trung bình ảnh hưởng loại dung môi thời gian chiết lên hàm lượng carotenoid thu được: Table of Least Squares Means for TN2.Carotenoid -95% Confidence Level Count Average Stnd Error for mean -GRAND MEAN 18 37.340556 6002330 36.032423 38.648689 A:TN2.Thoigian 120 34.501667 1.0396340 32.235914 36.767420 180 41.753333 1.0396340 39.487580 44.019086 240 35.766667 1.0396340 33.500914 38.032420 B:TN2.Dungmoi Acetone80% 16.622222 8488576 14.772243 18.472202 NN-DMF 58.058889 8488576 56.208909 59.908868 AB 120 Acetone80% 13.000000 1.4702645 9.795742 16.204258 120 NN-DMF 56.003333 1.4702645 52.799075 59.207592 180 Acetone80% 17.256667 1.4702645 14.052408 20.460925 180 NN-DMF 66.250000 1.4702645 63.045742 69.454258 240 Acetone80% 19.610000 1.4702645 16.405742 22.814258 240 NN-DMF 51.923333 1.4702645 48.719075 55.127592 Phụ lục 8: Bảng trắc nghiệm phân hạng khảo sát ảnh hưởng thời gian chiết đến hàm lượng chlorophyll a thu được: Multiple range analysis for TN2.Chla by TN2.Thoigian Method: 95 Percent LSD Level Count LS Mean Homogeneous Groups 240 73.515000 X 120 78.131667 X 180 94.053333 X contrast difference limits 120 - 180 -15.9217 14.8403 * 120 - 240 4.61667 14.8403 180 - 240 20.5383 14.8403 * * denotes a statistically significant difference 55 Phụ lục 9: Bảng trắc nghiệm phân hạng khảo sát ảnh hưởng loại dung môi đến hàm lượng chlorophyll a thu được: Multiple range analysis for TN2.Chla by TN2.Dungmoi -Method: 95 Percent LSD Level Count LS Mean Homogeneous Groups -Acetone8 36.31667 X NN-DMF 127.48333 X -contrast difference limits Acetone80% - NN-DMF -91.1667 12.1171 * -* denotes a statistically significant difference Phụ lục 10: Bảng trắc nghiệm phân hạng khảo sát ảnh hưởng thời gian chiết đến hàm lượng chlorophyll b thu được: Multiple range analysis for TN2.chlb by TN2.Thoigian Method: 95 Percent LSD Level Count LS Mean Homogeneous Groups 120 31.430000 X 240 33.758333 X 180 54.960000 X contrast difference limits 120 - 180 -23.5300 8.80533 * 120 - 240 -2.32833 8.80533 180 - 240 21.2017 8.80533 * * denotes a statistically significant difference 56 Phụ lục 11: Bảng trắc nghiệm phân hạng khảo sát ảnh hưởng loại dung môi đến hàm lượng chlorophyll b thu được: Multiple range analysis for TN2.chlb by TN2.Dungmoi -Method: 95 Percent LSD Level Count LS Mean Homogeneous Groups -Acetone8 12.975556 X NN-DMF 67.123333 X -contrast difference limits Acetone80% - NN-DMF -54.1478 7.18953 * -* denotes a statistically significant difference Phụ lục 12: Bảng trắc nghiệm phân hạng khảo sát ảnh hưởng loại dung môi đến hàm lượng carotenoid thu được: Multiple range analysis for TN2.Carotenoid by TN2.Dungmoi Method: 95 Percent LSD Level Count LS Mean Homogeneous Groups Acetone8 16.622222 X NN-DMF 58.058889 X contrast difference limits Acetone80% - NN-DMF -41.4367 2.61627 * * denotes a statistically significant difference 57 Phụ lục 13: Bảng trắc nghiệm phân hạng khảo sát ảnh hưởng thời gian chiết đến hàm lượng carotenoid thu được: Multiple range analysis for TN2.Carotenoid by TN2.Thoigian Method: 95 Percent LSD Level Count LS Mean Homogeneous Groups 120 34.501667 X 240 35.766667 X 180 41.753333 X contrast difference limits 120 - 180 -7.25167 5.65676 * 120 - 240 -1.26500 5.65676 180 - 240 5.98667 5.65676 * * denotes a statistically significant difference Phụ lục 14: Bảng AVOVA ảnh hưởng tốc độ đồng hóa lên hàm lượng chlorophyll a thu được: Analysis of Variance for TN3.Chla - Type III Sums of Squares -Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -MAIN EFFECTS A:TN3.tddt 7589.6841 3794.8420 5.261 0479 RESIDUAL 4327.5629 721.26049 -TOTAL (CORRECTED) 11917.247 -0 missing values have been excluded All F-ratios are based on the residual mean square error 58 Phụ lục 15: Bảng AVOVA ảnh hưởng tốc độ đồng hóa lên hàm lượng chlorophyll b thu được: Analysis of Variance for TN3.Chlb - Type III Sums of Squares -Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -MAIN EFFECTS A:TN3.tddt 4746.4755 2373.2377 21.442 0018 RESIDUAL 664.08773 110.68129 -TOTAL (CORRECTED) 5410.5632 -0 missing values have been excluded All F-ratios are based on the residual mean square error Phụ lục 16: Bảng AVOVA đánh giá ảnh hưởng tốc độ đồng hóa lên hàm lượng carotenoid thu được: Analysis of Variance for TN3.Carotenoid - Type III Sums of Squares -Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -MAIN EFFECTS A:TN3.tddt 103.27042 51.635211 12.285 0076 RESIDUAL 25.219533 4.2032556 -TOTAL (CORRECTED) 128.48996 -0 missing values have been excluded All F-ratios are based on the residual mean square error 59 Phụ lục 17: Bảng giá trị trung bình ảnh hưởng tốc độ đồng hóa lên hàm lượng chlorophyll a thu được: Table of Least Squares Means for TN3.Chla -95% Confidence Level Count Average Stnd Error for mean -GRAND MEAN 233.66667 8.952098 211.75503 255.57830 A:TN3.tddt 12000 199.63000 15.505488 161.67794 237.58206 16000 230.78333 15.505488 192.83127 268.73540 20000 270.58667 15.505488 232.63460 308.53873 Phụ lục 18: Bảng giá trị trung bình ảnh hưởng tốc độ đồng hóa lên hàm lượng chlorophyll b thu được: Table of Least Squares Means for TN3.Chlb -95% Confidence Level Count Average Stnd Error for mean -GRAND MEAN 138.48667 3.5068392 129.90314 147.07019 A:TN3.tddt 12000 113.90667 6.0740236 99.03956 128.77377 16000 132.39333 6.0740236 117.52623 147.26044 20000 169.16000 6.0740236 154.29289 184.02711 Phụ lục 19: Bảng giá trị trung bình ảnh hưởng tốc độ đồng hóa lên hàm lượng carotenoid thu được: Table of Least Squares Means for TN3.Carotenoid -95% Confidence Level Count Average Stnd Error for mean -GRAND MEAN 65.562222 6833948 63.889509 67.234936 A:TN3.tddt 12000 61.560000 1.1836744 58.662775 64.457225 16000 65.283333 1.1836744 62.386108 68.180558 20000 69.843333 1.1836744 66.946108 72.740558 60 Phụ lục 20: Bảng trắc nghiệm phân hạng khảo sát ảnh hưởng tốc độ đồng hóa lên hàm lượng chlorophyll a thu được: Multiple range analysis for TN3.Chla by TN3.tddt Method: 95 Percent LSD Level Count LS Mean Homogeneous Groups 12000 199.63000 X 16000 230.78333 XX 20000 270.58667 X contrast difference limits 12000 - 16000 -31.1533 53.6723 12000 - 20000 -70.9567 53.6723 * 16000 - 20000 -39.8033 53.6723 * denotes a statistically significant difference Phụ lục 21: Bảng trắc nghiệm phân hạng khảo sát ảnh hưởng tốc độ đồng hóa lên hàm lượng chlorophyll b thu được: Multiple range analysis for TN3.Chlb by TN3.tddt Method: 95 Percent LSD Level Count LS Mean Homogeneous Groups 12000 113.90667 X 16000 132.39333 X 20000 169.16000 X contrast difference limits 12000 - 16000 -18.4867 21.0253 12000 - 20000 -55.2533 21.0253 * 16000 - 20000 -36.7667 21.0253 * * denotes a statistically significant difference 61 Phụ lục 22: Bảng trắc nghiệm phân hạng khảo sát ảnh hưởng tốc độ đồng hóa lên hàm lượng carotenoid thu được: Multiple range analysis for TN3.Carotenoid by TN3.tddt -Method: 95 Percent LSD Level Count LS Mean Homogeneous Groups -12000 61.560000 X 16000 65.283333 X 20000 69.843333 X -contrast difference limits 12000 - 16000 -3.72333 4.09729 12000 - 20000 -8.28333 4.09729 * 16000 - 20000 -4.56000 4.09729 * -* denotes a statistically significant difference 62 Máy đo Quang phổ Máy đồng hóa Cân phân tích số 63 Máy li tâm EBA 20 64 ... hành thí nghiệm 23 3.2 Vật liệu, hóa chất thi t bị 233 3.2.1 Nguyên liệu: 23 3.2.2 Hóa chất: 23 3.2.3 Thi t bị: 24 3.3 Quy trình thực ... sáng, nhiệt độ, pH thay đổi theo ý muốn Vấn đề cần quan tâm suy tàn tảo số nguyên nhân thi u nguồn dưỡng chất, thi u CO2, nhiệt độ cao, pH không ổn định tình trạng nhiễm bẩn từ khơng khí Yếu tố then... pheophorbide - Tác dụng với kim loại: Dưới tác dụng sắt, thi c, đồng, nhơm Mg chlorophyll bị thay cho màu khác nhau:  Với sắt cho màu nâu  Với thi c nhôm cho màu xám  Với kẽm, đồng cho màu xanh