Giáo trình ký sinh trùng thực hành phần 2

LỜI GIỚI THIỆU Page 151 of 218 Bài 29 NHỮNG VẬT THỂ CĨ THỂ TÌM THẤY TRONG PHÂN TẾ BÀO THỰC VẬT CĨ TINH BỘT – Kích thước: 50 – 100µm – Hình tròn hay bầu dục, đường viền xung quanh méo mó, khơng phẳng – Bên hạt tinh bột ñứng sát file://C:\Windows\Temp\nbgaubudjw\Kysinhtrung_bk.htm 30/09/2009 LỜI GIỚI THIỆU Page 152 of 218 SỢI THỊT ðà TIÊU HĨA – Kích thước: 100 – 120µm – Hình bầu dục hình chữ nhật với cạnh tròn – Trong suốt có sọc ngang BỌT KHƠNG KHÍ, GIỌT DẦU – Hình tròn – Kích thước: to, nhỏ khác – Vỏ giả, bên rỗng file://C:\Windows\Temp\nbgaubudjw\Kysinhtrung_bk.htm 30/09/2009 LỜI GIỚI THIỆU file://C:\Windows\Temp\nbgaubudjw\Kysinhtrung_bk.htm Page 153 of 218 30/09/2009 LỜI GIỚI THIỆU Page 154 of 218 Bài 30 HÌNH THỂ KÝ SINH TRÙNG SỐT RÉT Ở NGƯỜI ðẠI CƯƠNG Ký sinh trùng sốt rét (KST SR) thuộc giới ñơn bào, lớp bào tử trùng, họ Plasmodidae, giống Plasmodium ðây loại KST sống máu có khả phát triển nhanh, gây bệnh sốt rét cho người tạo thành file://C:\Windows\Temp\nbgaubudjw\Kysinhtrung_bk.htm 30/09/2009 LỜI GIỚI THIỆU Page 155 of 218 vụ dịch lớn nguy hiểm – Ký sinh trùng sốt rét có chu kỳ phát triển tương đối phức tạp hình thể đa dạng nên việc phát phòng trị bệnh gặp nhiều khó khăn – Có loại Plasmodium có khả gây bệnh cho người, Việt Nam có ba loại với tỷ lệ gây nhiễm sau: HÌNH THỂ KÝ SINH TRÙNG SỐT RÉT Ở MÁU NGOẠI VI 2.1 Hình thể chung loại KST SR – Hình thể ký sinh trùng sốt rét phức tạp ña dạng – Trên tiêu máu có mang KST SR sau nhuộm Giemsa hay Wright, ta thấy: + Nhân bắt màu đỏ thẫm đến đỏ tím + Tế bào chất bắt màu xanh nhạt đến xanh tím + Phần không bắt màu không bào + Các hạt sắc tố: ñen, nâu ñen, nâu ánh vàng + Các hạt ñặc hiệu ñỏ nâu, hồng nhạt – Tùy theo hình thái kết hợp yếu tố trên, người ta chia thể loại ký sinh trùng sốt rét sau: + Thể tư dưỡng trẻ (thể nhẫn) (Early Trophozoite) + Thể tư dưỡng già (Late Trophozoite) + Thể phân liệt (Schizont) + Thể giao bào (Gametocyte) Plasmodium falciparum file://C:\Windows\Temp\nbgaubudjw\Kysinhtrung_bk.htm 30/09/2009 LỜI GIỚI THIỆU file://C:\Windows\Temp\nbgaubudjw\Kysinhtrung_bk.htm Page 156 of 218 30/09/2009 LỜI GIỚI THIỆU file://C:\Windows\Temp\nbgaubudjw\Kysinhtrung_bk.htm Page 157 of 218 30/09/2009 LỜI GIỚI THIỆU Page 158 of 218 ðặc ñiểm Hồng cầu bị ký sinh Sự diện thể Tư dưỡng trẻ ( Thể nhẫn ) Early Trophozoite Tư dưỡng già LateTrophozoite Thể phân liệt Schizonts Thể giao bào Gametocyte – Tương ñối bình thường – Một hồng cầu có từ → KST Thường thấy thể nhẫn thể giao bào phết máu ngoại vi, thể tư dưỡng già phân liệt gặp sốt rét ác tính – Có hình nhẫn – Tế bào chất (TBC) mảnh, màu xanh da trời, bao quanh không bào lớn – Nhân ñỏ, nằm bờ tế bào chất – ðôi thấy thể nhẫn nhân – Có thể thấy tượng đa nhiễm: nhiều nhẫn hồng cầu – Thỉnh thoảng gặp thể kết dính ngoại vi: KST bị dẹp, dính vào thành hồng cầu, khơng nhìn thấy khơng bào, nhân chấm đỏ, nằm vạch ngắn – Có dạng amíp – Tế bào chất dày có hạt sắc tố nâu đen – Nhân to – ðơi có đốm Maurer: hạt to nhỏ khơng đều, nằm rãi rác hồng cầu nhiễm thể – Có hình tròn, hình trứng khơng – Tế bào chất đặc hơn, chiếm gần hết hồng cầu – Nhân chia : 16 → 32 mảnh trùng, xếp không ñều – Hạt sắc tố nâu ñen thô tụ lại – Khi thể phân liệt phát triển ñầy đủ, mảnh trùng có vòng TBC bao quanh – Hình thoi, bầu dục (non) hình trái chuối, thận (già) + Giao bào đực : * Hình thận, đầu tròn * Nhân dạng hạt ăn màu ñỏ không giới hạn rõ * Hạt sắc tố màu nâu đen thơ nằm rải rác TBC màu tím cà + Giao bào cái: * Hình chuối hay lưỡi liềm * Nhân màu ñỏ tập trung giữa, chung quanh hạt sắc tố nâu ñen, TBC màu xanh file://C:\Windows\Temp\nbgaubudjw\Kysinhtrung_bk.htm 30/09/2009 LỜI GIỚI THIỆU ðặc ñiểm Hồng cầu bị ký sinh Sự diện thể Page 159 of 218 Plasmodium vivax – Phình to, nhạt màu, méo mó – Bình thường có KST, hồng cầu có đến KST – Thường thấy tất thể file://C:\Windows\Temp\nbgaubudjw\Kysinhtrung_bk.htm 30/09/2009 LỜI GIỚI THIỆU Page 160 of 218 Tư dưỡng trẻ ( Thể nhẫn ) Early Trophozoite – Có hình nhẫn – TBC mảnh màu xanh nhạt, có khơng bào to, tròn – Có nhân nhỏ bắt màu ñỏ Tư dưỡng già Late Trophozoite – Có dạng amíp – TBC nhăn nheo có nhiều dạng giả túc, không bào bị cắt thành nhiều khơng bào nhỏ, có hạt sắc tố vàng nâu to, nhỏ khơng – Nhân to xốp – Có hạt Schuffner màu hồng ñỏ phân bố ñều màng hồng cầu – Hồng cầu bị ký sinh to lên Thể phân liệt Schizont – Có hình tròn – Tế bào chất chiếm toàn hồng cầu – Nhân chia : 16 → 24 mảnh trùng, xếp khơng – Hạt sắc tố nâu ñen tập trung TBC Thể giao bào Gametocyte Giao bào ñực : – Hình cầu, chiếm gần hết thể tích hồng cầu – TBC màu xanh xám – Nhân to, màu hồng nhạt, thường – Các hạt sắc tố vàng nâu xen lẫn hạt Schuffner hồng ñỏ TBC Giao bào cái: – Hình cầu – TBC xanh đậm – Nhân nhỏ gọn có màu đỏ đậm, thường nằm rìa TBC – Các hạt sắc tố vàng nâu xen lẫn hạt Schuffner hồng ñỏ TBC file://C:\Windows\Temp\nbgaubudjw\Kysinhtrung_bk.htm 30/09/2009 LỜI GIỚI THIỆU Page 204 of 218 – Nigrospora sp – Scopulariopsis sp – Monospora sp 2.2 Nhóm vi nấm hoại sinh dựa đặc tính hình thể bào đài – Aspergillus sp – Cladosporium sp (Hormodendrum) – Paecilomyces sp – Penicillium sp – Trichoderma 2.3 Nhóm vi nấm hoại sinh dựa đặc tính hình thể phong bào đài – Absidia sp – Mucor sp – Rhizopus sp – Syncephalastrum sp 2.4 Nhóm vi nấm hoại sinh dựa đặc tính hình thể thân sợi nấm – Aureobasidium pullulans – Geotrichum sp – Rhodotorula sp – Streptomyces sp ðẶC ðIỂM CÁC LOẠI VI NẤM HOẠI SINH 3.1 Alternaria sp a) Khuẩn lạc nấm – Mọc nhanh – Mặt khóm phẳng nhung – Màu xanh ñến nâu đen – Sắc tố phía sau đen b) Hình thể quan sát kính hiển vi – Sợi tơ nấm phân vách, màu nâu đen – Bào đài khơng phân nhánh – Bào tử màu đen, có nhiều vách ngăn 3.2 Cephalosporium sp a) Khuẩn lạc nấm – Mọc nhanh – Mặt khóm nhăn, có lơng tơ – Màu trắng xám hồng file://C:\Windows\Temp\nbgaubudjw\Kysinhtrung_bk.htm 30/09/2009 LỜI GIỚI THIỆU Page 205 of 218 – Khơng sắc tố b) Hình thể quan sát kính hiển vi – Sợi tơ nấm phân vách – Bào đài phân nhánh khơng phân nhánh – Bào tử hình bầu dục, dài, đơi phân vách 2–3 tế bào – Bào tử thường ñứng thành chùm ñầu bào ñài 3.3 Curvularia sp a) Khuẩn lạc nấm – Mọc nhanh – Mặt khóm bơng – Màu nâu sẫm đến đen b) Hình thể quan sát kính hiển vi – Sợi tơ nấm phân vách, màu nâu đen – Bào đài khơng phân nhánh – Bào tử to, vách dày màu đen, có nhiều vách ngăn, cong 3.4 Fusarium sp a) Khuẩn lạc nấm – Mọc nhanh – Mặt khóm bơng – Màu trắng, hồng hay màu xanh nhạt b) Hình thể quan sát kính hiển vi – Sợi tơ nấm phân vách – Bào ñài ngắn, dài, phân nhánh khơng phân nhánh – Bào tử có nhiều vách ngăn, hình trái chuối hay hình lưỡi liềm – Các bào tử đơi đứng thành chùm đầu bào đài – ðơi bào tử tròn hay hình bầu dục ñầu bào ñài 3.5 Helminthosporium sp a) Khuẩn lạc nấm – Mọc nhanh – Mặt khóm bơng file://C:\Windows\Temp\nbgaubudjw\Kysinhtrung_bk.htm 30/09/2009 LỜI GIỚI THIỆU Page 206 of 218 – Màu xám b) Hình thể quan sát kính hiển vi – Sợi tơ nấm phân vách, màu ñen – Bào đài phân nhánh khơng phân nhánh, đơi có nút – Bào tử phân vách, bầu dục, vách dày 3.6 Nigrospora sp a) Khuẩn lạc nấm – Mọc nhanh – Mặt khóm len bơng – Màu trắng đến xám b) Hình thể quan sát kính hiển vi – Sợi tơ nấm phân vách – Bào ñài khơng phân nhánh, phình – Bào tử hình cầu đen, sinh từ đầu phình bào đài 3.7 Scopulariopsis sp Hình 37.6 Hình thể cấu tạo nấm Nigrospora sp a) Khuẩn lạc nấm – Mọc nhanh – Mặt khúm bột – Màu trắng hồng b) Hình thể quan sát kính hiển vi – Sợi tơ nấm phân vách – Bào ñài phân nhánh khơng phân nhánh – Bào tử hình trái chanh ñầu nhọn – Bào tử mọc từ bào ñài, vách xù xì 3.8 Monospora sp a) Khuẩn lạc nấm – Mọc nhanh – Mặt khóm bơng – Màu trắng b) Hình thể quan sát kính hiển vi – Sợi tơ nấm phân vách – Bào ñài dài, ngắn, khơng phân nhánh – Bào tử hình cầu, vách dày, mọc từ bào ñài ngắn sát với sợi tơ nấm file://C:\Windows\Temp\nbgaubudjw\Kysinhtrung_bk.htm 30/09/2009 LỜI GIỚI THIỆU Page 207 of 218 3.9 Aspergillus fumigatus a) Khuẩn lạc nấm – Mọc nhanh – Mặt khóm phẳng nhung, bột – Màu xám xanh ñến xanh sẫm – Sắc tố phía sau đen b) Hình thể quan sát kính hiển vi – Sợi tơ nấm phân vách, phân nhánh – Bào đài dài, đầu bào đài phình to thành bầu – Phủ ñầy hay hàng tiểu bào ñài – Từ tiểu bào ñài sinh bào tử xếp thành chuỗi dài 3.10 Aspergillus niger a) Khuẩn lạc nấm – Mọc nhanh – Mặt khóm phẳng len – Màu trắng đến vàng, già có màu nâu sẫm đen b) Hình thể quan sát kính hiển vi – Sợi tơ nấm phân vách, phân nhánh – Bào đài dài, đầu bào đài phình to thành bầu – Phủ ñầy hay hàng tiểu bào ñài – Từ tiểu bào ñài sinh bào tử xếp thành chuỗi dài 3.11 Aspergillus flavus a) Khuẩn lạc nấm – Mọc nhanh – Mặt khóm lúc ñầu có màu vàng sau ñổi sang màu xanh b) Hình thể quan sát kính hiển vi – Sợi tơ nấm phân vách, phân nhánh – Bào ñài dài, ñầu bào ñài phình to thành bầu – Phủ ñầy hay hàng tiểu bào ñài – Từ tiểu bào ñài sinh bào tử xếp thành chuỗi 3.12 Cladosporium sp (Hormodendrum) a) Khuẩn lạc nấm – Mọc nhanh – Mặt khóm phẳng nhơ lên file://C:\Windows\Temp\nbgaubudjw\Kysinhtrung_bk.htm 30/09/2009 LỜI GIỚI THIỆU Page 208 of 218 – Màu xanh ñến ñen – Mặt trái xanh đến đen b) Hình thể quan sát kính hiển vi – Sợi tơ nấm phân vách, phân nhánh – Bào ñài phân nhánh – Bào tử hình bầu dục tạo thành chuỗi (sợi tơ nấm, bào ñài, bào tử: màu nâu) 3.13 Paecilomyces sp a) Khuẩn lạc nấm – Mọc nhanh – Mặt khóm phẳng bột đến nhung – Màu vàng nâu, xám, xanh tím hay trắng b) Hình thể quan sát kính hiển vi – Sợi tơ nấm phân vách, phân nhánh – Bào đài phân nhánh – Tiểu bào đài có hình thon dài sinh bào tử bầu dục, vách nhẵn, xếp thành chuỗi 3.14 Penicillium sp a) Khuẩn lạc nấm – Mọc nhanh – Mặt khóm phẳng bột – Màu trắng xanh đến xanh da trời có màu khác b) Hình thể quan sát kính hiển vi – Sợi tơ nấm phân vách, phân nhánh – Bào đài phân nhánh, tiểu bào đài xếp hình bàn tay hay chồi – Từ tiểu bào ñài sinh bào tử tròn xếp thành chuỗi 3.15 Trichoderma sp a) Khuẩn lạc nấm – Mọc nhanh – Mặt khóm len – Màu trắng ñến xanh – Sắc tố màu đỏ đậm đến nâu sậm b) Hình thể quan sát kính hiển vi – Sợi tơ nấm phân vách, phân nhánh file://C:\Windows\Temp\nbgaubudjw\Kysinhtrung_bk.htm 30/09/2009 LỜI GIỚI THIỆU Page 209 of 218 – Bào đài khơng phân nhánh, tiểu bào ñài mọc từ bào ñài hay từ nhánh nấm – Từ tiểu bào ñài mọc bào tử ñứng thành chùm 3.16 Mucor sp a) Khuẩn lạc nấm – Mọc nhanh – Mặt khóm len – Màu trắng đến xám nâu hay vàng b) Hình thể quan sát kính hiển vi – Sợi tơ nấm lớn, khơng phân vách, phân nhánh – Bào đài phình to thành túi, bên có lõi – Chứa nhiều bào tử lớn vách dày, nâu ñen 3.17 Rhizopus sp a) Khuẩn lạc nấm – Mọc nhanh – Mặt khóm len – Màu trắng, xám hay nâu b) Hình thể quan sát kính hiển vi Giống Mucor chân phong bào đài có cấu trúc giống chùm rễ 3.18 Absidia sp a) Khuẩn lạc nấm – Mọc nhanh – Mặt khóm len – Màu trắng ñến xám, nâu hay vàng file://C:\Windows\Temp\nbgaubudjw\Kysinhtrung_bk.htm 30/09/2009 LỜI GIỚI THIỆU Page 210 of 218 b) Hình thể quan sát kính hiển vi Giống Mucor Rhizopus chùm rễ giả nằm chân phong bào ñài 3.19 Syncephalastrum sp a) Khuẩn lạc nấm – Mọc nhanh – Mặt khóm len – Màu trắng đến xám đậm b) Hình thể quan sát kính hiển vi – Sợi tơ nấm lớn, phân nhánh, không phân vách – Phong bào đài phình to thành túi, bên có lõi – Bào tử phong túi nhỏ chứa bào tử xếp đốt ngón tay CÂU HỎI LƯỢNG GIÁ Phân biệt hình thể hiển vi loại vi nấm: Penicillium, Paecilomyces, Trichoderma Phân biệt hình thể vi nấm: Rhizopus, Mucor PHẦN BA file://C:\Windows\Temp\nbgaubudjw\Kysinhtrung_bk.htm 30/09/2009 LỜI GIỚI THIỆU Page 211 of 218 DUNG DỊCH BẢO QUẢN (CỐ ðỊNH PHÂN) 1.1 Formol 10% + Formaldehyd 40% + Nước cất NaCl 0,85% 100ml 1000ml Formol 5% + Formaldehyd 40% + Nước cất NaCl 0,85% 50ml 1000ml 1.2 F2AM (Phenol – Formol – Alcool – Methylene blue) – Dung dịch mẹ (dùng năm): + Xanh Methylene + Cồn ethylic 95O + Phenol ñậm ñặc + Formol + Nước cất – Dung dịch sử dụng: + Dung dịch mẹ + Formol + Phenol + Nước cất 2g 40ml 8ml 10ml 40ml 1ml 10ml 0,1ml 89ml 1.3 Dung dịch MIF (Merthiolate Iodin Formol) MIF cố ñịnh tốt cho loại ñơn bào, gồm dung dịch: – Dung dịch mẹ MIF: + Nước cất 250ml + Dung dịch Merthiolate 1/1000 200ml + Formaldehyd 40% 25ml + Glycerin 5ml – Dung dịch Lugol: + Iod 5ml + Kali Iodua 10ml + Nước cất 100ml Trước dùng, lấy 2,35ml dung dịch MIF ñổ vào 0,15ml dung dịch Lugol (khơng làm ngược lại) file://C:\Windows\Temp\nbgaubudjw\Kysinhtrung_bk.htm 30/09/2009 LỜI GIỚI THIỆU Page 212 of 218 Lượng phân dùng 0,25g 1.4 Dung dịch PVA (Polyvinyl alcohol) Cồn Polyvinyl dùng làm chất định hình, bán dạng bột ðổ từ từ 5g PVA vào dung dịch sau ñây ñể nhiệt ñộ 75OC + Glycerol 1,5ml + Acid acetic băng 5,0ml + Dung dịch Schaudinn (*) 93,5ml (*) Dung dịch Schaudinn gồm: + Dung dịch bão hòa HgCl2 + Cồn phần phần 1.5 Dung dịch SAF (Sodium acetat – acetic acid formol) Bảo quản ñược bào nang thể hoạt ñộng ñơn bào, trứng nang trùng bào tử bào tử Microsporidium Có thể dùng cho tiêu nhuộm vĩnh viễn tập trung + Sodium acetate 1,5g + Acid acetic lạnh 2ml + Formaldehyd 40% 4ml + Nước cất 92ml DUNG DỊCH XÉT NGHIỆM PHÂN TRỰC TIẾP 2.1 NaCl 0,85% – 0,9% + NaCl + Nước cất cho ñủ 8,5g 1000ml 2.2 Lugol 5% Dùng ñể nhuộm trứng, ấu trùng, ñặc biệt bào nang ñơn bào – Dung dịch dự trữ: + Iod 5g + Kali iodua 10g + Nước cất cho ñủ 100ml Pha Iod Kali iodua cho tan, sau cho nước cất vào Hoặc cho Kali iodua vào nước cất, sau cho Iod vào, hòa tan cho hết Kali iodua nước cất vào Lọc vào chai nâu, đậy kín tránh ánh sáng – Dung dịch sử dụng 1% – 2%: + Iod 1g – 2g + Kali iodua 2g – 4g + Nước cất 100ml Hoặc pha 1/4 dung dịch dự trữ với nước cất ñem sử dụng HÓA CHẤT DÙNG TRONG PHƯƠNG PHÁP TẬP TRUNG PHÂN 3.1 Nước muối bão hòa d = 1,15 1,20 + NaCl 25 – 30g file://C:\Windows\Temp\nbgaubudjw\Kysinhtrung_bk.htm 30/09/2009 LỜI GIỚI THIỆU + Nước cất cho ñủ Page 213 of 218 100ml 3.2 ZnSO4 33,1% + ZnSO4 bột + Nước cất 33,1g 100ml 3.3 Formol 10% 3.4 Ether nguyên chất 3.5 Glycerin nguyên chất DUNG DỊCH SÁT TRÙNG 4.1 Phenol 5% 4.2 Formol 4% – 5% 4.3 Nước Javel PHỤ LỤC HÓA CHẤT – THUỐC NHUỘM – MÔI TRƯỜNG TRONG XÉT NGHIỆM NẤM HÓA CHẤT 1.1 Potassium hydroxide (KOH): 10%; 20% + KOH + Glycerin + Nước cất cho ñủ 10g 20g 10ml 100ml 1.2 Dung dịch phẩm xanh Lactophenol Coton Blue (LPCB) + Lactic acid + Phenol + Xanh Cotton + Glycerin + Nước cất 20g 20g 50mg 40g 20ml 1.3 Nước muối sinh lý 8,5% 0,9% + NaCl + Nước cất 8,5 9g 1000ml 1.4 Mực tàu Parker ñen N051 + Mực tàu (Nigrosin bột) + Formol 10 % 10g 100ml MÔI TRƯỜNG 2.1 Thạch Sabouraud (Sabouraud dextrose agar) file://C:\Windows\Temp\nbgaubudjw\Kysinhtrung_bk.htm 30/09/2009 LỜI GIỚI THIỆU Page 214 of 218 + Dextrose 40g + Peptone 10g + Thạch 20g + Nước cất 1000ml Hòa tan tất nước đun sơi, chỉnh pH sau mơi trường đến 5,6 Phân phối mơi trường vào ống nghiệm có nắp vặn, hấp khử trùng 118OC 10 phút Lưu giữ môi trường 4OC – 6OC 2.2 Sabouraud Cycloheximide Chloramphenicol agar (Mycobiotic agar) + Glucose 20g + Peptone 10g + Thạch 20g + Chloramphenicol 50mg + Cycloheximide (Actidione) 500mg + Nước cất 1000ml ðun nóng để hòa tan mơi trường nước, cho thêm Chloramphenicol, Cycloheximide, hấp khử trùng 10 phút – Chloramphenicol 118OC + Chloramphenicol 50mg + Cồn ethylic 95o 10ml Số lượng dùng cho lít mơi trường (0,05mg/ml) thay cho Chloramphenicol bằng: * Streptomycine 40 đơn vị/ml mơi trường * Penicilline 20 đơn vị/ml mơi trường – Cycloheximide + Cycloheximide 500mg + Acetone 10ml Số lượng dùng cho 1000ml mơi trường 2.3 Thạch khoai đường (Potato Dextrose Agar) + Khoai tây tươi bột 200g + Dextrose 10 – 20g + Nước cất 1000ml Hầm khoai tây khoảng giờ, nghiền nát lọc lấy nước, thêm nước cất cho đủ 1000ml, thêm đường 20g thạch, đun sơi trở lại cho tan thạch, phân phối ống nghiệm có nắp vặn, hấp khử trùng 120OC 10 phút, chỉnh pH sau 5,6 2.4 Thạch bột bắp (Corn Meal Agar) + Bột bắp 50g + Thạch 15g + Nước cất 1000ml Hòa tan bột bắp, thạch nước cất đun sơi, thêm 1% Tween 80 phân phối ống nghiệm, ñem hấp khử trùng 120OC 10 phút Ghi chú: ðể phân biệt Trichophyton rubrum Trichophyton mentagrophytes dựa vào thành lập sắc file://C:\Windows\Temp\nbgaubudjw\Kysinhtrung_bk.htm 30/09/2009 LỜI GIỚI THIỆU Page 215 of 218 tố (Trichophyton rubrum sinh sắc tố đỏ), người ta dùng mơi trường thay 1% Tween 80 1% Glucose 2.5 Thạch tim óc hầm (Brain Heart Infusion = BHI) + BHI + Thạch + Nước cất 40g 15g 1000ml Hòa tan tất nước, đun sơi, hấp khử trùng 120OC 15 phút, ñể nguội 40 – 50OC, cho thêm 50ml máu "O", sau phân phối ống nghiệm đĩa 2.6 BHI có Chloramphenicol Cycloheximide + BHI 37g + Cycloheximide 500mg + Chloramphenicol 50mg + Thạch 20g + Nước cất 1000ml ðun nóng để hòa tan BHI, thạch, thêm Chloramphenicol Cycloheximide, hấp khử trùng 118oC 10 phút 2.7 Môi trường cơm (môi trường cháo hoa) + Gạo trắng 8g + Nước cất 25ml Cho gạo trắng nước cất vào ống nghiệm lớn bình Erlenmeyer – đậy nắp Nấu chín Hấp khử trùng 15 – 18 phút ðể nguội Lưu giữ tủ lạnh – 6OC Khi cấy, cho mảng nấm cần định danh vào mơi trường để nhiệt ñộ phòng THUỐC NHUỘM 3.1 Nhuộm PAS + Acid Periodic + Nước cất Pha xong để chai có nút vặn + Basic fuchsin 5g 100ml 0,1g 95O + Cồn ethylic 5ml + Nước cất 95ml Chế nước cất vào rượu cho Basic fuchsin vào ñến tan hết + Hydrosulfite Zn Na 1g + Acid tartarique 5g + Nước cất 100ml + Light green 1g + Acid acetic băng 0,25ml + Cồn ethylic 80O 100ml 3.2 Nhuộm Gram file://C:\Windows\Temp\nbgaubudjw\Kysinhtrung_bk.htm 30/09/2009 LỜI GIỚI THIỆU Page 216 of 218 3.3 Nhuộm kháng acid TÀI LIỆU THAM KHẢO Thực tập Ký sinh trùng Y học 2004 Bộ môn Ký sinh trùng, Trường ðại học Y Hà Nội Thực tập Ký sinh trùng Y học 2004 Bộ môn Ký sinh trùng, Khoa Y, ðại học Y Dược TP Hồ Chí Minh ðỗ Thị Nhuận Glenns Bulmer 1973 Vi nấm học y khoa thực dụng, Y khoa ðại học đường Sài Gòn Bourée P 1989 Ai – demémoire de Parasitologie et de Pathologie tropicale Médécine – Sciences – Flammarion Koneman EW, Allen S D, Janda W M, Schreckenbergerand PC and Winn WC., Jr 1997 Color Atlas and Texbook of Diagnostic Microbiology 5th Edition Lynne S Garcia 1999 Practical guide to diagnostic parasitology American Society for Microbiology, Washington D.C Murray PR, Baron EJ, Jorgensen JH, Pfaller MA and Yolken RH 2003 Manual of Clinical Microbiology 8th Edition American Society for Microbiology, Washington D.C Mougeot G 1995 Conduite des examens en parasitologie Masson, Paris Milan Barcelone Rose NR, Hamilton RG and Detrick B 2002 Manual of Clinical Laboratory Immunology 6th Edition American Society for Microbiology, Washington D.C 10 Wery M 1995 Protozoologie médicale De Boeck Université 11 WHO 2003 Manual of Basic Techniques for a Health Laboratory 2nd Edition file://C:\Windows\Temp\nbgaubudjw\Kysinhtrung_bk.htm 30/09/2009 LỜI GIỚI THIỆU Page 217 of 218 12 Hình ảnh lấy từ INTERNET Chịu trách nhiệm xuất bản: Chủ tịch HðQT kiêm Tổng Giám đốc NGƠ TRẦN ÁI Phó Tổng Giám đốc kiêm Tổng biên tập NGUYỄN QUÝ THAO Chịu trách nhiệm nội dung: Chủ tịch HðQT kiêm Giám đốc Cơng ty CP Sách ðH–DN TRẦN NHẬT TÂN Biên tập nội dung sửa in: NGUYỄN HỒNG ÁNH Biên tập mĩ thuật trình bày bìa: ðINH XUÂN DŨNG Chế bản: TRỊNH THỤC KIM DUNG GIÁO TRÌNH KÝ SINH TRÙNG THỰC HÀNH Mã số: 7K789Y8 – DAI In 1.300 (Qð:79), khổ 19 x 27 cm In Công ty Cổ phần In Phúc Yên file://C:\Windows\Temp\nbgaubudjw\Kysinhtrung_bk.htm 30/09/2009 LỜI GIỚI THIỆU Page 218 of 218 ðịa chỉ: ðường Trần Phú, thị xã Phúc Yên, Vĩnh Phúc Số ðKKH xuất bản: 865 - 2008/CXB/2 - 1917/GD In xong nộp lưu chiểu tháng 12 năm 2008 file://C:\Windows\Temp\nbgaubudjw\Kysinhtrung_bk.htm 30/09/2009 ... file://C:WindowsTemp bgaubudjwKysinhtrung_bk.htm 30/09 /20 09 LỜI GIỚI THIỆU file://C:WindowsTemp bgaubudjwKysinhtrung_bk.htm Page 153 of 21 8 30/09 /20 09 LỜI GIỚI THIỆU Page 154 of 21 8 Bài 30 HÌNH THỂ KÝ SINH TRÙNG SỐT... file://C:WindowsTemp bgaubudjwKysinhtrung_bk.htm 30/09 /20 09 LỜI GIỚI THIỆU Page 161 of 21 8 Plasmodium malariae ðặc ñiểm Hồng cầu bị ký sinh – Hơi teo nhỏ sẫm màu – Một hồng cầu thường có ký sinh trùng Sự diện... file://C:WindowsTemp bgaubudjwKysinhtrung_bk.htm 30/09 /20 09 LỜI GIỚI THIỆU file://C:WindowsTemp bgaubudjwKysinhtrung_bk.htm Page 165 of 21 8 30/09 /20 09 LỜI GIỚI THIỆU Page 166 of 21 8 2. 2 So sánh hình thể