Xác định một số mầm bệnh trên cá chình bông (anguilla marmorata) nuôi trong bể

2.2 Một số bệnh thường xuất hiện trên cá chình 2.2.1 Bệnh do ký sinh trùng Bệnh sán lá đơn chủ Trên cá chình ở Đại Tây Dương có tới 63 loài sán lá ký sinh, trong khi đó trên cá chình Thá

CHƯƠNG 1

GIỚI THIỆU1.1 Giới thiệu

Với điều kiện thuận lợi, nằm trong khu vực nhiệt đới gió mùa, và mạng lưới sông ngòi dày đặc, đường bờ biển dài Chính những yếu tố đó đã giúp cho Việt Nam trở thành một trong những nước có ngành thủy sản phát triển, góp phần thúc đẩy sự phát triển của kinh tế nước nhà mà nổi bậc nhất là khu vực Đồng Bằng Sông Cửu Long (ĐBSCL) Theo thống kê sản lượng nuôi trồng thủy sản năm 2010 đạt trên 2,8 triệu tấn, tăng hơn 160 tấn so với năm 2009 (9%) (www.gso.gov.vn)

ĐBSCL có hệ thống sông ngòi chằn chịt, khí hậu ấm áp với chiều dài đường bờ biển là 109 km2 và diện tích mặt nước là 960472 ha, cùng với việc ứng dụng các tiến bộ khoa học kỹ thuật, thâm canh hóa, đa dạng các đối tượng nuôi

đã góp phần tạo điều kiện thuận lợi và nâng cao hiệu quả trong nuôi trồng thủy sản ở khu vực này Bên cạnh các đối tượng chủ lực như cá tra, cá basa, điêu hồng, một số đối tượng mới đã được người dân đưa vào mô hình ao nuôi và thâm canh hóa như cá lóc, rô đồng, thác lác, bống tượng, sặc rằn, chình, được nuôi ngày càng phổ biển góp phần tăng thu nhập cho người nuôi Trong đó cá chình được đánh giá là đối tượng nuôi có nhiều tiềm năng phát triển

Cá chình là thủy động vật có thân hình thon dài, hình trụ ở phần trước và dần dần ép lại dọc theo đuôi, đầu cá thường dài và nhọn Cá chình là loài cá có tính thích ứng rộng với độ mặn, cá có thể sống được ở nước mặn, nước lợ, nước ngọt và có thể nuôi thâm canh trong ao đất, lồng bè (Nguyễn Chung, 2008) Bên cạnh đó, thịt cá chình thơm ngon, có giá trị dinh dưỡng cao, hiện tại giá cá chình trên thị trường dao động từ 280-350 ngàn/kg Tuy giá cá chình cao như vậy nhưng được rất nhiều người ưa chuộng, không chỉ trong nước người dân ở các nước khác như Trung Quốc, Nhật Bản, Malaysia, Indonesia đều rất ưa chuộng cá chình Vì vậy cá chình không những tiêu thụ được trong nước mà còn có thể xuất khẩu (trang tin Dânviệt.vn, số ra ngày 15/5/2011)

Trên thế giới hiện nay, có 4 nước phát triển nghề nuôi cá chình mạnh nhất: Nhật Bản, Đài Loan, Hàn Quốc, Trung Quốc Còn ở nước ta nghề nuôi cá chình

có thể nói mới chỉ là những bước khởi đầu và, mang tính chất tự phát Quy mô nuôi chủ yếu là hộ gia đình và hình thức nuôi bằng lồng vẫn đang chiếm ưu thế, một số tỉnh ở miền Nam có nghề nuôi cá chình phát triển như: Cà Mau, Bạc Liêu, An Giang, Đồng Tháp và một số tỉnh ở miền Trung: Bình Định, Phú Yên, Quảng Trị, Ninh Thuận

Các công trình nghiên cứu về cá chình ở ngoài nước rất nhiều, các tác giả không chỉ nghiên cứu sâu về hình thái, phân loài, phân bố mà còn nghiên cứu về bệnh xuất hiện trên cá chình, một số tác giả tiêu biểu như: Evert and Olga, 1993; Gousset B., 1990; Dou S., T Seikai and K Tsukamoto, 2000; Amoro C., Biosca E.G., 1996 Còn ở trong nước do cá chình là đối tượng mới được chọn nuôi trong những năm gần đây nên các nghiên cứu ở nước ta về cá chình tính cho tới nay mới chỉ cung cấp những số liệu về thành phần loài, phân bố, chưa có công trình nào nghiên cứu sâu về cá chình Những năm gần đây, do nhu cầu tiêu thụ của cá chình và nhu cầu nuôi cá chình tự phát ở nhiều tỉnh, một số tác giả đã biên soạn một số tài liệu hướng dẫn kỹ thuật nuôi cá chình như: Ngô Trọng Lư, 1997; Ngô Trọng Lư và Thái Bá Hồ, 2003; Nguyễn Chung, 2008 Các tài liệu này chủ yếu cũng dựa vào kỹ thuật nuôi cá chình được giới thiệu trong các tài liệu Trung Quốc, Đài Loan, Nhật Bản (www.mekongfish.net.vn) Do đó để có định hướng cho sự phát triển đối tượng này hiệu quả và bền vững hơn thì vấn đề quản lý, chăm sóc sức khỏe cá, thông tin kỹ thuật cũng cần được quan tâm nghiên cứu nhiều hơn Tuy nhiên, song song với việc phát triển nghề nuôi cá chình đã phát sinh các vấn đề cấp thiết như dịch bệnh, con giống, thức ăn, quản lý ao Xuất

phát từ thực tế nói trên đề tài “Xác định một số mầm bệnh trên cá chình bông

(Anguilla marmorata) nuôi trong bể” được thực hiện

1.2 Mục tiêu của đề tài

Kiểm tra nguyên nhân gây ra bệnh trên cá chình bông nuôi trong bể, tạo cơ

sở khoa học để đưa ra các biện pháp quản lý sức khỏe cá chình tốt hơn

1.3 Nội dung của đề tài

- Xác định vi khuẩn tổng cộng trong môi trường nước bể nuôi

- Xác định mầm bệnh, định danh vi khuẩn, ký sinh trùng trên

cá chình nuôi trong bể

- Thực hiện kháng sinh đồ các chủng vi khuẩn phân lập được

CHƯƠNG 2 TỔNG QUAN TÀI LIỆU

2.1 Một vài đặc điểm sinh học của cá chình

2.1.1 Phân loại và phân bố

Giống: Anguilla Loài: Anguilla marmorata Theo các nghiên cứu ở Việt Nam cá chình giống Anguilla chỉ có 4 loài phổ biến nhất ở nước ta: cá chình hoa: A marmorata (Quoy and Gaimard, 1824); cá chình mun: A bicorlo pacifica (Schmidt, 1928), cá chình nhọn: A borneensis (Popta, 1924), cá chình Nhật Bản: A japonica (Tem and Schmidt, 1846)

Trong đó cá chình hoa: A marmorata (Quoy and Gaimard, 1824) còn được

gọi là cá chình bông có tên tiếng anh là Giant mottled eel Cá có màu xám tro ở mặt lưng, vàng nhạt ở mặt bụng, vây lưng màu sẫm Rìa vây lưng, vây hậu môn, cùng với vây đuôi có màu đen Ở Viêt Nam cá chình bông phân bố nhiều ở đầm Châu Trúc (Bình Định), sông Bồ, sông Hương và đầm Cầu Hai tỉnh Thừa Thiên Huế, huyện Ddarkrong tỉnh Quảng Trị, trên thế giới phân bố ở Nhật Bản, Triết Giang (Trung Quốc), Indonesia, Australia, Borneo (Indonesia)

Cá chình mun: A bicorlo pacifica (Schmidt, 1928) còn được gọi là cá chình

nhốt , cá có màu xám ở lưng, màu trắng ngã vàng ở phía bụng và nhạt dần đi từ hàm tới hậu môn Ranh giới giữa hai màu phía lưng và phía bụng rõ ràng Ở nước ta cá chình mun phân bố ở: xã Phong Sơn, huyện Phong Điền, xã Bố Đỏ huyện A Lưới, huyện Phú Lộc, huyện Nam Đông (Thừa Thiên Thuế), đầm Trâu Trúc (Bình Định), sông Trà Khúc (Quang Ngãi) trên thế giới phân bố ở Australia, Borneo (Indonesia), Phillippine, Sumatra (Indonesia)

Cá chình nhọn: A borneensis (Popta, 1924), cá có màu xám tro ở mặt lưng,

vàng nhạt ở mặt bụng, không có vân chấm hoa, vây lưng và vây hậu môn có màu đen sẫm nhưng phía trước vây hậu môn màu sáng Thường xuất hiện nhiều ở vùng Borneo, Sumata (Indonesia), ở Việt Nam cá có ở vùng đầm Châu Trúc - Bình Định

Cá chình Nhật Bản: A japonica (Tem and Schmidt, 1846) có tên tiếng anh

là Japanese eel Cá có màu nâu ánh xanh, vây lưng lùi về phía sau và liên tục với vây đuôi và vây hậu môn, chiều dài thân gấp từ 16 - 18,5 lần chiều cao thân, 9 -

10 lần chiều dài đầu Chiều dài đầu gấp 10 - 11 lần đường kính mắt, 7 - 8 lần khoảng cách giữa hai ổ mắt Trên thế giới phân bố nhiều ở Nhật Bản, Trung Quốc, ở Việt Nam vào năm 1935, ở Thanh Trì (sông Hồng) bắt được vài cá thể

cá chình Nhật Bản, ở vịnh Bắc Bộ và các vùng viên biển cũng có nhưng rất ít

Hình 2.1: Một số hình ảnh cá chình ở Việt Nam (A) Cá chình bông (A

marmorata), (B) Cá chình Nhật Bản (A japonica), (C) Cá chình mun (A bicorlo pacifica), (D) Cá chình nhọn (A borneensis).

Chú ý: Hình được lấy từ trang Google.com

Cá chình là loài có tốc độ tăng trưởng nhanh trong điều kiện khí hậu nhiệt đới với nhiệt độ thích hợp từ 23-28oC Biên độ dao động nhiệt độ nước trong ngày thay đổi đột ngột 3-5oC có thể làm cá bị chết do sốc nhiệt (Bùi Quan Tề, 2002).

Cá chình là loài cá có phạm vi thích nhiệt rộng Nhiệt độ từ 1 - 38oC cá đều

có thể sống được, nhưng trên 12oC cá mới bắt đầu bắt mồi Theo Lin (1991) (trích dẫn bởi Chu Văn Công, 2005) cá chình chỉ sinh trưởng và phát triển bình thường khi nhiệt độ dao động trong khoảng 13 - 30oC Nhiệt dộ cực thuận cho

sự phát triển của cá chình khoảng 25-27oC, ngưỡng dưới nhiệt độ của cá chình là 1-2oC và ngưỡng trên nhiệt độ là 38oC

Theo Ngô Trọng Lư (2002), hàm lượng oxy hoà tan trong nước yêu cầu trên 2 ppm, 5 ppm là thích hợp cho sinh trưởng, nếu vượt quá 12 ppm sẽ có ảnh hưởng không tốt, cá dễ sinh ra bệnh bọt khí

Ánh sáng

Cá sợ ánh sáng mạnh và thích bóng tối nên ban ngày chui rúc ẩn mình trong hang, dưới đáy sông, suối, ao đầm nước ngọt nơi có ánh sáng yếu, tối bò ra săn mồi và di chuyển đi nơi khác Giai đoạn cá bột thân trong suốt, với ánh sáng yếu

có tính hướng quang và tùy theo sự tăng trưởng lớn lên của cá, tính hướng quang cũng giảm dần và mất đi Cá bột hoạt động nhiều về đêm, ban ngày nằm dưới đáy và tối thì ngoi lên theo chiều thẳng đứng trôi nổi tìm thức ăn (Nguyễn Chung, 2008)

pH

Nguồn nước có chất lượng tốt, thích hợp cho nuôi thủy sản là không có mầm bệnh hay các hóa chất độc hại và đảm bảo pH từ 7-8 Nếu nước có pH quá thấp hay quá cao đều không thể dùng để nuôi cá chính được vì khi pH tăng thì tính độc của NH3 tăng, ngược lại khi pH giảm làm cho tính độc của H2S tăng Hai loại khí này đều gây độc cho cá Giá trị pH từ 6,5-9 là thích hợp cho đối tượng các thủy sản (Trương Quốc Phú, 2006)

Độ mặn

Ngô Trọng Lư (2002), cho rằng cá chình là loài có tính thích ứng rộng với

độ mặn và có thể sống được ở nước ngọt, lợ, mặn Cá chình là loài rộng muối và chúng có khả năng thích ứng rất tốt với sự thay đổi độ mặn đột ngột nhờ có cơ quan điều hòa áp suất thẩm thấu (Lin, 1991 được trích dẫn bởi Chu Văn Công, 2005)

Oxy

Lượng tiêu hao oxy của cá chình lớn hơn các loài sống đáy khác mặc dù da

cá, bong bóng, khoang miệng, ruột và vây cá đều có chức năng hô hấp phụ nhưng cá không sử dụng khi còn ở trong nước Cá thích nơi có dòng chảy và tùy loài mà thích với dòng chảy mạnh hay nhẹ Khi hàm lượng oxy trong nước dưới

4 mg/l thì cá nổi đầu Sau khi ăn no lượng tiêu hao oxy cũng tăng gấp đôi, cá càng lớn tiêu hao oxy càng nhiều Lượng tiêu hao oxy còn tùy thuộc vào nhiệt độ nước và trọng lượng cá (Nguyễn Chung, 2008)

Đạm

Nitrogen trong nước tồn tại dưới 4 dạng chính : NH3, NH4+, NO2-, NO3- Trong đó, NH3 và nitritelà yếu tố nguy hiểm gây độc đối với động vật thủy sản Lượng NO2- cho phép đối với các ao nuôi từ 0,01 - 1,7 ppm và với NH3 là dưới 0,2 ppm (Trương Quốc Phú, 2006)

Đạm NH4 trong nước rất cần thiết cho sự phát triển của động thực vật thủy sinh tạo nguồn thức ăn tự nhiên trong thủy vực Hàm lượng thích hợp trong khoảng 0,2 - 2 ppm (Nguyễn Văn Thường, 2006)

NO3- trong thủy vực là dạng đạm được thực vật hấp thu dễ nhất và không độc đối với thủy sinh vật, hàm lượng NO3- thích hợp cho các ao nuôi giao động

từ 0,1 - 1 ppm

2.1.3 Đặc điểm hình thái

Theo Nguyễn Chung (2008) mô tả cá chình là thủy động vật có thân hình thon dài, hình trụ ở phần trước và dần dần ép lại dọc theo đuôi Đầu cá thường dài và nhọn Miệng ở phía trước rộng và to, há hốc và kết thúc gần rìa của mắt Hàm dưới vượt xa hơn hàm trên, răng hàm trên và hàm dưới mở rộng vào trong

và không phân chia rõ ràng Lỗ mang nhỏ nằm ở phía dưới góc vây ngực

Mắt phát triển hoàn chỉnh, khá nhỏ ở những con cái và con chưa trưởng thành, lớn hơn ở những con đực trưởng thành Gờ thịt ở cả môi trên và môi dưới phát triển hoàn hảo Mũi hình tròn có 2 lỗ, lỗ mũi đằng trước hình ống ở gần rìa đầu của mõm trước và nằm ở phía trước miệng, lỗ mũi đằng sau là 1 dạng mở đơn giản nằm từ trước tới giữa mắt Vây lưng và vây hậu môn tiếp tục kéo dài tới vây đuôi, vây lưng bắt đầu sau vây ngực và nằm trước hay trên hậu môn, vây ngực phát triển tốt

Vẩy cá rất nhỏ hình oval bao lấy da và dấu dưới da, sắp sếp như 1 chiếc vỏ đang, các đường bên hong hoàn chỉnh Cá chình sống ngoài tự nhiên thân có màu khác nhau từ màu hơi vàng xanh tới màu nâu hay đen, lốm đốm hay có vẻ bề ngoài như cẩm thạch, lưng màu đen tro và bụng màu trắng nhạt Da cá chình có

biểu bì với chức năng làm giảm bớt lực cản của nước, giúp tăng tốc độ khi săn mồi hoặc chạy trốn kẻ thù.

2.1.4 Tập tính cư trú

Theo Nguyễn Chung (2008) ghi nhận cá chình là loài cá có tính thích ứng rộng với độ mặn, cá có thể sống được ở nước mặn, nước lợ, nước ngọt Cá thích bóng tối, sợ ánh sáng nên ban ngày chui rúc trong hang, dưới đáy ao, nơi có ánh sáng yếu, tối bò ra kiếm mồi, di chuyển đi nơi khác

Da và ruột cá có khả năng hô hấp, dưới 15oC chỉ cần giữ cho da cá ẩm ướt

là có thể sống được khá lâu Trời mưa cá hoạt động rất khỏe bò trườn khắp ao

Cá chình là loài cá có phạm vi thích nhiệt rộng Nhiệt độ từ 1 - 38oC cá đều

có thể sống được, nhưng trên 12oC cá mới bắt đầu mồi Nhiệt độ sinh trưởng là

13 - 30oC thích hợp nhất là 25 - 27oC Hàm lượng oxy hòa tan trong nước yêu cầu phải trên 2 mg/1, 5 mg/l là thích hợp cho sinh trưởng, vượt quá 12 mg/l dễ sinh ra bệnh bọt khí

Ngoài mang là cơ quan hô hấp chính thì cá chình còn có các cơ quan hô hấp phụ như: da cá, bong bóng, khoang miệng, ruột, giúp cho cá chình có thể sống lâu trên cạn Khi nhiệt độ trong nước dưới 15oC cá chình dùng da (da phải ẩm ướt) để duy trì sự sống

2.1.5 Tập tính ăn và sinh trưởng

Theo Ngô Trọng Lư và Thái Bá Hồ (2003), dạ dày của cá chình có dạng hình túi lớn hình chữ Y, thành dạ dày rất dày, ruột ngắn, đoạn cuối ruột gần như hơi cong Bong bóng tương đối nhỏ, có một ngăn Gan to bằng 1,5 lần trọng lượng cơ thể Cá ăn mạnh ở nhiệt độ nước 25 - 27oC, mùa xuân khi nhiệt độ lên khoảng 10oC trở lên thì cá bắt đầu ăn mồi

Cá chình là loại cá ăn tạp, trong tự nhiên thức ăn của cá là tôm, cá con, động vật đáy nhỏ và côn trùng thủy sinh Khi còn nhỏ thức ăn chính của cá là động vật phù du, giun ít tơ Lượng mồi ăn hằng ngày chiếm 10 - 12% trọng lượng cơ thể Cá có thể cho ăn bằng thức ăn tổng hợp gồm bắp, cám gạo, bột cá, vitamim, các chất vô cơ Sau 2 năm nuôi, cá đạt kích cỡ 50 - 200g Nếu thức ăn tốt sau 1 năm nuôi kể từ lúc vớt ngoài tự nhiên có thể đạt cỡ 4 - 6 con/kg

Cá sinh trưởng chậm, nhất là cỡ từ 300g trở nên tốc độ sinh trưởng chỉ bằng 1/10 tốc độ sinh trưởng của giai đoạn cá có trọng lượng 70 - 100g Khi còn nhỏ tốc độ sinh trưởng của cá trong đàn tương đương nhau, nhưng khi đạt chiều dài hơn 40 cm con đực lớn chậm hơn con cái

2.1.6 Tập tính sinh sản

Cá chình là loài cá di cư, cá mẹ đẻ ở biển sâu, cá con sau khi nở trôi dạt vào

bờ biển, cửa sông, vùng nước ngọt kiếm mồi và lớn lên Khi trưởng thành, cá lại

di cư ra biển sâu để đẻ trứng, tuổi thành thục của cá cái là 4 - 5 tuổi, cá đực 3 - 4 tuổi Một con cá cái có thể đẻ khoảng 7 - 13 triệu trứng, trứng cá trôi nổi (có kích thước khoảng 1mm) trong nước sau khoảng 10 ngày thì nở, cá bột mới nở có chiều dài thân 6 mm có xu hướng bơi dần lên tầng trên Cá con mới lớn có hình

lá liễu, sau 1 năm mới trôi dạt vào cửa sông Trải qua nhiều biến thái hình thành

cá chình hương màu trắng, cá ngược dòng sắc tố đen tăng dần thành màu đen Việc sinh sản nhân tạo cá chình đến nay chưa có nước nào nghiên cứu thành công Tất cả cá giống đều dựa vào việc khai thác từ tự nhiên ngoài cửa sông hoặc ven biển Ở nước ta cá chình phân bố nhiều từ Quảng Bình vào đến Bình Ðịnh, đặc biệt là vùng hồ Châu Trúc ở Bình Ðịnh có cá chình phân bố, hàng năm cung cấp một lượng cá giống quý cho nhân dân trong vùng để nuôi (Ngô Trong Lư và Thái Bá Hồ, 2003)

2.2 Một số bệnh thường xuất hiện trên cá chình

2.2.1 Bệnh do ký sinh trùng

Bệnh sán lá đơn chủ

Trên cá chình ở Đại Tây Dương có tới 63 loài sán lá ký sinh, trong khi đó trên cá chình Thái Bình Dương chỉ có 29 loài sán lá ký sinh Sán lá đơn chủ

Pseudodactylogyrus bini, P anguillae được xem là những mầm bệnh nguy hiểm

của cá chình, đặc biệt là cá chình ở Thái Bình Dương Hai loài ký sinh trùng này không gây bệnh trên cá chình sống ngoài tự nhiên Ở cá chình nuôi, loài

Pseudodactylogyrus spp ký sinh trên mang, điều kiện thích hợp sẽ lây nhiễm và

gây bệnh nghiêm trọng Tuy nhiên, có thể sử dụng thuốc để phòng trị ký sinh trùng này (www.mekongfish.net.vn)

Dactylogyrus (sán 16 móc), thường ký sinh trên da và mang nhưng chủ yếu

là ở mang Khi bị ký sinh, da và mang cá tiết ra nhiều dịch nhờn ảnh hưởng đến

hô hấp của cá Tổ chức da và mang bị viêm loét tạo điều kiện cho vi khuẩn, nấm

và một số sinh vật xâm nhập gây bệnh Để phòng bệnh ta phải vệ sinh bể thật kỹ, cho ăn đầy đủ giúp cá khỏe mạnh mau lớn vượt qua giai đoạn nhiễm bệnh Khi

cá bị bệnh tắm cá bằng nước muối 3% trong 5 - 15 phút hay dùng formol 150 -

200 ppm tắm cá trong 30 - 60 phút Sử dụng KMnO4 với liều lượng 0.5 - 1mg/l hoặc H2O2 100 - 150 mg/L Thay nước cho cá và xử lý hóa chất một lần nữa nếu

cá chưa hết bệnh (Nguyễn Chung, 2008)

Bệnh trùng bánh xe

Thường gây bệnh trên cá là các loài thuộc giống Trichodina, bệnh phát triển

quanh năm nhưng bùng phát mạnh và gây thành dịch vào mùa mưa làm cá chết

hàng loạt Theo Ruangpan (1988) có 60 loài Trichodina ký sinh trên cá, tỷ lệ

nhiễm 90 - 100% gây hại cho cá mọi lứa tuổi nhất là cá hương và cá giống Cá mắc bệnh thì có các dấu hiệu sau màu sắc cá nhợt nhạt, thân cá có nhiều nhớt màu trắng đục, đuôi, vây bị xơ mòn, bơi lội không định hướng, thân cọ vào cây

cỏ, thành bể như bị ngứa, thường ký sinh ở da, mang, mũi (trích bởi Woo, 2006)

Để cá không bị mắc bệnh ta cần giữ môi trường nước sạch, tăng cường sức

đề kháng bằng cách tăng cường vitamin C Trị bệnh, tắm cá bằng nước muối 3% trong 15 phút hay CuSO4 3 - 5 ppm trong 10 - 15 phút hoặc phun thẳng xuống ao 0,5 - 0,7 ppm (Nguyễn Chung, 2008)

Bệnh do sán lá đơn chủ Gyrodactylus sp

Sán lá đơn chủ Gyrodactylus sp được tìm thấy trên nhiều loài cá chình như

Anguilla japonica, Anguilla anguilla, Anguilla marmorata Sán lá đơn chủ Gyrodactylus sp ký sinh trên da và mang với số lượng nhiều làm cho tổ chức ký

sinh tiết ra một chất dịch trắng Cá ít hoạt động hoặc hoạt động không bình thường, một số cá nằm ở đáy ao, bể, một số nổi lên mặt nước đớp không khí Cá

bị nhiễm Gyrodactylus khả năng bắt mồi giảm, hô hấp khó khăn và gầy yếu

(Nguyễn Chung, 2008)

Bệnh do nhóm giun tròn (Nematoda)

Giun ký sinh chủ yếu ở cá chình và một số loài cá nước ngọt, ký sinh dưới

da, vẩy, gan…của nhiều loài cá nước ngọt với tỷ lệ nhiễm khá cao, có khi lên tới

80 - 90% Cường độ nhiễm 30 - 40 trùng/cá Cá càng lớn tỷ lệ nhiễm và cường

độ nhiễm càng cao Khi bị nhiễm bệnh cá có màu sắc da nhợt nhạt, di chuyển chậm, giảm sinh trưởng Phòng bệnh chủ yếu là tiêu diệt ký chủ trung gian hoặc cắt đứt vòng đời (Woo, 2006)

2.2.2 Bệnh do vi khuẩn

Bệnh đốm đỏ

Bệnh đốm đỏ (red spot disease) hay còn được gọi “Sekiten-byo” do vi

khuẩn Pseudomonas spp gây nên, bệnh này được phát hiện đầu tiên trên cá chình Nhật Bản (Anguilla japonica) còn được gọi là “Winter disease syndrome”,

vào khoảng năm 1981 bệnh này cũng được tìm thấy ở Scotland trên cá chình Châu Âu Đây là vi khuẩn Gram -, có hình que, di động, phát triển trên môi trường đơn giản và thiếu khí Cần cẩn thận khi tiếp xúc với vi khuẩn này vì nó có thể gây bệnh cho người (Inglis et al, 1993)

Cá mắc bệnh thường xuất hiện xuất huyết từng đốm đỏ trên da, xung quanh

miệng, nắp mang và phía mặt bụng, cơ thể bị tuột nhớt, Pseudomonas spp xâm

nhập vô cơ thể qua các tổn thương ở mang và da Bệnh thường xuất hiện khi cá

bị stress và điều kiện quản lý không phù hợp Ta có thể phòng bệnh bằng cách cung cấp nguồn nước tốt, giảm mật độ nuôi hoặc tấm KMnO4 (Từ Thanh Dung, 2011)

Bệnh do nhóm vi khuẩn Streptococcosis

Trên cá chình Nhật Bản và cá hồi vân ở các nước Australia, Israel, Italy,

thường xuất hiện một loại bệnh do vi khuẩn thuộc nhóm Streptococcosis là tác

nhân chính gây ra và bệnh này còn được gọi với cái tên “pop-eye” Đây là loài

vi khuẩn Gram + , không sinh bào tử, hình cầu hoặc oval, không di động, phát triển tốt trong môi trường máu và TSA Nó phát triển tốt nhất ở nhiệt độ từ 25 -

30oC trong vòng 24 - 36 giờ (Austin and Austin, 1993)

Cá bị bệnh thường có các biểu hiện như mắt cá bị xuất huyết, lồi, thân sẫm màu, bơi lội không định hướng, các cơ quan như thận, gan, lá lách bị viêm, sưng, xoang bụng có dịch Môi trường nuôi không thuận lợi, thời tiết nóng, lạnh bắt thường đều không tốt cho cá giống và cá trưởng thành, cá dễ mắt bệnh này nhất

là cá dưới 5 tháng tuổi Vì thế ta phải quản lý môi trường nuôi thật tốt, xử lý môi trường bằng hóa chất diệt khuẩn Trị bệnh dùng kháng sinh Penicilin V, Bactrim Navet Estc (Nguyễn Chung, 2008)

Bệnh do vi khuẩn Edwardsiella tarda

Bệnh do vi khuẩn Edwardsiella tarda là một trong những mối đe dọa

nghiêm trọng đối với nghề nuôi trồng thủy sản ở Nhật Bản (còn có tên gọi là

Paracolabacterium anguillimortiferum) Bệnh gây thiệt hại lớn đối với nghề

nuôi cá chình ở Nhật và Đài Loan Đối với cá chình ở Nhật Bản thì bệnh thường xuất hiện vào mùa hè, còn ở Đài Loan thì bệnh thường xảy ra vào khoảng nhiệt

độ 10 – 18oC Đây là loài vi khuẩn có dạng hình que, Gram -, không sinh bào tử,

hiếu khí, phát triển trên môi trường TSA sau 48 giờ ở nhiệt độ 28oC Khi vi khuẩn xâm nhập vào cơ thể, cá sẽ xuất hiện các vết thương nhỏ trên da (phía mặt lưng), da bị mất sắc tố Bên trong cơ của cá xuất hiện các khối u rỗng, kèm theo các tổn thương trên và dưới lớp biểu bì, khi ấn vào sẽ phát ra khí có mùa hôi, các vết thương này sẽ gây ra hoại tử các vùng xung quanh Đối với con người vi khuẩn có khả năng gây bệnh vì thế ta phải thận trọng khi tiếp xúc với nó (Noga, 2010).

Chất lượng nước trong môi trường nuôi xấu, nuôi với mật độ dày cùng với nhiệt độ cao (30oC) sẽ tạo điều kiện thuận lợi cho vi khuẩn gây bệnh Tuy nhiên bệnh cũng xuất hiện khi nhiệt độ nước thấp hơn và dao động bất thường Vì thế

ta phải cải tiến chất lượng nước, giảm mật độ nuôi, khi cá bệnh có thể sử dụng oxytetracycline trộn vào thức ăn để trị cho cá Ở Nhật và Đài Loan có sử dụng vaccine để phòng bệnh cho cá Nhưng vaccine này chưa được bán ra ngoài thị trường (Từ Thanh Dung, 2011)

Bệnh do vi khuẩn Aeromonads

Nhóm vi khuẩn chủ yếu gây bệnh thuộc giống Aeromonads gồm có 3 loài

A hydrophila, A caviae, A sobria Đây là loại vi khuẩn có mặt trong môi trường

nước, đặt biệt khi trong nước có nhiều chất hữu cơ, khi cá bị sốc do môi trường, hoặc bị tổn thương vi khuẩn sẽ xâm nhập và gây bệnh cho cá Đây là vi khuẩn Gram -, có khuẩn lạc tròn, màu vàng nhạt, nhiêt độ thích hợp từ 28 - 30oC (Austin and Austin, 1993)

Khi cá mắc bệnh có dấu hiệu xuất huyết khắp trên da cá tập trung ở gốc vây, miệng và hậu môn, da bụng sẫm màu, cá mất nhớt, nội tạng xung huyết, xoang bụng chứa dịch, mắt lồi, mờ đục và sưng phù Để giúp cá phòng bệnh ta

có thể tiêu diệt các tác nhân cơ hội như ký sinh trùng, tránh làm xây xát cá, tránh làm ô nhiễm môi trường nuôi, thường xuyên bổ sung Vitamin C để tăng sức đề kháng cho cá Khi cá bị bệnh có thể xử lý bằng thuốc kháng sinh như oxytetracycline (2 - 4g/kg thức ăn), doxycycline (0,5 - 1g/kg thức ăn) (Nguyễn Chung, 2008)

Bệnh trắng đuôi

Vi khuẩn Flavobacterium columnare là vi khuẩn Gram -, gây bệnh nghiêm

trọng trên cá hồi, cá chình Châu Âu, cá chình Nhật Bản Vi khuẩn này có khuẩn lạc dạng rễ, que dài, không phát triển trên môi trường chung TSA và NA mà chỉ phát triển trên môi trường đặc trưng Cytophaga agar (CA), phát triển tốt ở nhiệt

độ 20 – 25oC, có khuẩn lạc màu vàng Các tổn thương ban đầu thường là những chấm nhỏ màu trắng trên vây đuôi và lây lan dần về phía đầu Vây đuôi và vây hậu môn bị ăn mòn nghiêm trọng Khi bệnh tiến triển mạnh, da thường có nhiều

vết loét màu xám trắng Mang cũng bị ảnh hưởng nghiêm trọng, các tia mang bị hoại tử hoặc tưa rách, cá giảm ăn Bên cạnh đó cá bị nhiễm độc tố do vi khuẩn gây ra (Inglis et al, 1993).

Nguyên nhân dẫn đến cá bị nhiễm khuẩn Flavobacterium columnare

thường là do cá bị stress, nhiệt độ nước, nuôi ở mật độ cao, cá bị tổn thương, trầy sướt, môi trường nước bị ô nhiễm (hàm lượng oxy ít, hàm lượng NH3 cao) Ta có thể sử dụng BKC (Benzalkonium chloride) 0,3 - 0,6 ml/m3, muối ăn, oxytetracycline 50 - 75 mg/kg/ngày để trị bệnh cho cá Ở Mỹ và Châu Âu đã sử dụng vaccine trên cá hồi và cá nheo Mỹ (Từ Thanh Dung, 2011)

2.3 Tình hình sử dụng thuốc kháng sinh trong thủy sản

Kháng sinh là các chất hữu cơ có cấu tạo hóa học phức tạp, có nguồn gốc sinh học (do xạ khuẩn, vi khuẩn và nấm sinh ra) hay do con người tổng hợp nên,

có tác động một cách chuyên biệt trên một giai đoạn chính yếu của sự biến dưỡng của các vi khuẩn (tác nhân kháng khuẩn), của các nấm (tác nhân kháng nấm), của các virus (tác nhân kháng virus) Thuốc kháng sinh tác động bằng cơ chế như ức chế sự tổng hợp thành tế bào của vi khuẩn (ức chế sự tổng hợp peptidoglycan), ức chế sự tổng hợp cần cho vi khuẩn, ức chế sự tổng hợp hay ức chế chức năng của acid nucleic và ức chế chức năng màng tế bào vi khuẩn (Lê Thị Kim Liên, 2008)

Với nỗ lực tăng nhanh sản lượng thuỷ sản và kim ngạch xuất khẩu, các nước đang phát triển rất chú trọng tới nuôi trồng thuỷ sản đặc biệt là Việt Nam

Ðể đạt được sản lượng và lợi nhuận cao nhất, nhiều người dân hiện đang áp dụng các phương thức nuôi thâm canh Cùng với sự phát triển trên, một tất yếu của sản xuất là nhiều loại thuốc và hóa chất đã được sử dụng nhằm nhiều mục đích như

xử lý nước và các chất lắng đọng, tăng cường năng suất sinh học tự nhiên, thành phần trong thức ăn, kích thích sinh trưởng, quản lý sức khỏe (Dương Võ Mỹ Hạnh, 2008)

Khi bệnh xảy ra trong ao, người dân thường sử dụng các sản phẩm thuốc thú y thủy sản chứa kháng sinh hoặc kháng sinh nguyên liệu để điều trị cho cá Tuy nhiên, theo Lý Thị Phú Nhân (2010) việc sử dụng kháng sinh còn tùy tiện, không đúng về liều lượng và liệu trình điều trị Người dân thường dùng kháng sinh liều thấp để phòng bệnh cho cá Vì vậy hiệu quả điều trị kháng sinh ngày càng giảm và hình thành khả năng kháng thuốc cho vi khuẩn

Với sự phát triển nhanh chóng của nuôi thâm canh cá da trơn ở ĐBSCL dẫn đến việc sử dụng quá nhiều loại kháng sinh trong phòng và trị bệnh vi khuẩn Việc sử dụng hóa chất và kháng sinh không đúng qui định, không kiểm soát có

thể làm tác động đến môi trường, hệ sinh thái của khu vực hoặc để lại dư lượng trong sản phẩm thủy sản và dẫn đến hiện tượng kháng kháng sinh trong các loài

vi khuẩn gây bệnh trên cá (Dung và ctv., 2009)

Những năm gần đây, nhà nước và các cơ quan chức năng ngành thủy sản Việt Nam đã đưa ra và thường xuyên có rà soát, bổ sung các qui định tương đối chặt chẽ về việc sử dụng kháng sinh trong nuôi trồng thủy sản nhằm bảo đảm được an toàn vệ sinh thực phẩm cho người tiêu dùng, ổn định và phát triển xuất khẩu, bảo đảm phát triển nuôi trồng thủy sản bền vững Tuy nhiên việc chấp hành các quy định của nhà nước là chưa được triệt để vì thỉnh thoảng vẫn còn lô hàng thủy sản Việt Nam bị nước nhập khẩu phát hiện nhiễm kháng sinh cấm hoặc vượt quá giới hạn đối với những kháng sinh cho phép sử dụng có giới hạn (Nguyễn Chính, 2005)

Cụ thể như tình hình sử dụng thuốc kháng sinh ở khu vực Châu Đốc, Châu Phú, Thốt Nốt cho thấy có tổng số 21 loài kháng sinh thường được người dân sử dụng, trong đó có các loài được sử dụng nhiều nhất là Flofenicol (tần suất xuất hiện 95%), kế đến là doxycylin (90%), erofloxacine (85%), amoxcilline (70%) Ngoài ra các chất như kanamycine, cefalexcin, colistin, cũng thường được người dân sử dụng (Ngô Minh Dung, 2007)

Bên cạnh đó, trong ương cá tra người dân cũng dùng thuốc hay hóa chất với nhiều chủng loại khác nhau Cụ thể, qua khảo sát tại Cao Lãnh và Hồng Ngự Tỉnh Đồng Tháp ghi nhận được có tổng cộng gồm 155 loại, với 132 loại thuộc vùng Hồng Ngự (85,2%) và 66 loại (42,6%) thuộc vùng Cao Lãnh bao gồm 5 nhóm Trong đó, cơ cấu các nhóm thuốc không đồng đều, tỷ lệ thuốc kháng sinh nguyên liệu và thuốc có nguồn gốc kháng sinh chiếm đa số với 23 loại kháng sinh là nguyên liệu gốc và 27 loại có chứa thành phần phối chế chuyên dùng như kháng sinh Kết quả này cho thấy tỷ lệ thuốc kháng sinh chiếm số lượng lớn (40,65%) trong cơ cấu thuốc Số hóa chất được dùng là 16 loại (10,3%), chế phẩm sinh học là 7 loại (4,52%), vitamin và premix có số lượng 4 loại (3,23%)

và nhóm một số chất còn lại với 5 loại (2,58%) Ngoài ra, có nhiều loại thuốc được dùng có tên gọi không rõ ràng (12% hộ nuôi), 6 loại đã được quy định giới hạn sử dụng tối đa: ampicillin, tetracillin, oxytetracillin, amoxicillin, cloxacillin, sulfonamide; 1 loại bị cấm hoàn toàn: chloramphenicol đều có xuất hiện trong danh mục sử dụng ở vùng Hồng Ngự Mức độ đầu tư cho khoảng chi phí thuốc

và hóa chất phòng trị bệnh khá cao, đa phần các hộ đều không nhớ hết những loại đã sử dụng và số lần phải dùng để điều trị trong năm, ước lượng chiếm từ 8 - 31% (trung bình 15,7%) tổng chi phí vụ ương (Nguyễn Ngọc Hải, 2004)

Ngoài ra, từ kết quả khảo sát của Nguyễn Chính (2005) ở An Giang và Cần Thơ, cho thấy có 394 loại thuốc, hóa chất do 75 nhà sản xuất được kinh doanh trong khu vực Trong đó có 16% sản phẩm kháng sinh phối trộn từ 3 kháng sinh trở lên, vi phạm quy định về phối trộn kháng sinh: theo quyết định 07/2005 của

Bộ Thủy Sản Thuốc hóa chất nguyên liệu được bán lẻ công khai mà không cần toa nhãn cho người sử dụng Đối với nhóm kháng sinh, các nhà sản xuất đưa ra những khuyến cáo chưa tưng thủ đúng quy định cũng như thời gian ngưng sử dụng trước khi thu hoạch Bên cạnh đó, việc người nuôi chủ yếu dựa vào kinh nghiệm và tự pha trộn, không nhận thức được tính kết hợp hay đối kháng của thuốc cũng như hậu quả và những vấn đề liên quan đến sức khỏe con người, vật nuôi và an toàn vệ sinh thực phẩm của việc sử dụng thuốc (Nguyễn Thị Phương Nga, 2004)

Như vậy với sự phát triển nhanh chóng của nghề nuôi trồng thủy sản dẫn đến tình hình sử dụng thuốc kháng sinh và hóa chất cũng gia tăng Việc người dân thường xuyên tự ý sử dụng thuốc kháng sinh sẽ làm tăng khả năng kháng thuốc đối vi khuẩn gây bệnh trên tôm, cá Sử dụng thuốc kháng sinh không theo nguyên tắc sẽ dẫn đến hậu quả nghiêm trong như tồn lưu thuốc kháng sinh trong sản phẩm thủy sản, môi trường, gây hiệu quả nghiêm trọng đến sức khỏe con người, tôn kém trong việc điều trị bệnh do vi khuẩn kháng lại thuốc, dẫn đến khó điều trị bệnh về sau Vì thế để hạn chế các tác hại trên ta phải sử dụng thuốc kháng sinh hợp lý, đúng lúc, đúng bệnh, đúng liều lượng

CHƯƠNG 3 VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

3.1 Thời gian thực hiện đề tài

Từ tháng 8/2012 đến tháng 5/2012

3.2 Địa điểm thu mẫu và nghiên cứu

Đề tài sẽ tiến hành thu mẫu ở 2 địa điểm: trại cá thủy sản - khoa Thủy Sản - trường đại học Cần Thơ; huyện Thới Lai - quận Ô Môn - thành phố Cần Thơ và sau đó sẽ phân tích mẫu tại bộ môn Sinh Học và Bệnh thủy sản của Khoa Thủy sản, trường Đại học Cần Thơ

3.3 Vật liệu nghiên cứu

3.3.1 Dụng cụ: chủ yếu dùng trong nghiên cứu này là tủ sấy, tủ ấm, tủ lạnh, tủ

cấy, máy Autoclave, bộ tiểu phẫu, lame, lamen, kính hiển vi, kính nhìn nổi, ống nhỏ giọt nhựa, khay nhựa, đĩa Petri, cốc thủy tinh, giấy vệ sinh, viết lông dầu,

viết chì, bình xịt cồn, ống nghiệm, que cấy, đèn cồn, bật lửa, micropipet, hộp đầu col, cân điện tử, chai thủy tinh, que trãi thủy tinh, pipet (1ml, 5ml), hộp đựng

mẫu nước, thùng giữ lạnh, găng tay và các vật liệu khác

3.3.2 Hóa chất và môi trường

Hóa chất: nước muối sinh lý 0.85%, nước cất, cồn tuyệt đối, cồn 70%, bộ hóa

chất nhuộm Gram, dung dịch H2O2, que thử oxidase, parafin, glucose, bộ kít API 20E (BIOMÉRIEUX)

Môi trường: tryptic soy agar (TSA), Nutrient agar (NA), oxidation-fermentation

(OF), Pseudomonas aeromonas selective agar base (GSP), Mueller hinton agar (MHA), Brain heart infusion broth (BHIB)

3.4 Phương pháp nghiên cứu

Các phương pháp được trích từ “Tài liệu thực tập giáo trình bệnh học thủy sản”

3.4.1 Phương pháp thu mẫu

Thu mẫu cá chình phải còn sống Thu ngẫu nhiên cá chình bệnh và cá chình khỏe, số lượng bể 12, số lượng mẫu từ 4 - 5 con/bể

Chú ý:phương pháp nuôi ở 2 địa điểm thu mẫu.

Tại trại cá: gồm 6 bể (thể tích lần lượt mỗi bể 2m3), 3 bể cá nhỏ mật độ 200 con/bể, 3 bể cá lớn mật độ 40 con/bể Cho ăn thức ăn nhân tạo và nước được lọc bằng hệ thống lọc tuần hoàn

Tại Thới Lai: có 2 nghiệm thức: một nghiệm thức là thức ăn, một nghiệm thức là mật độ Bể đất lót bạt thể tích 0,7 m3/bể , hệ thống lọc tuần hoàn 2 tuần thay nước 1 lần, cho cá ăn 2 lần/ngày

3.4.2 Tính vi khuẩn tổng cộng trong nước

Cách thu và bảo quản mẫu nước

Ghi các thông tin lên chai: thời gian, địa điểm, ký hiệu bể khi thu mẫu

Cách thu mẫu

Thu mẫu nước là phải thu mẫu sao cho mẫu có tính đại diện cho khối nước cần kiểm tra Tùy theo kích thước và hình dạng bể, khi thu mẫu ta chọn vài địa điểm khác nhau trong bể: góc bể, đáy bể, giữa bể, nơi cấp và thoát nước (độ sâu cách mặt nước 20 - 30 cm) Mỗi chỗ thu 100 ml cho vào chung 1 chai đã tuyệt trùng, trộn đều

Cách bảo quản và vận chuyển

Chai mẫu nước phải cần giữ lạnh 4 - 5oC bằng nước đá trong thời gian vận chuyển về phòng thí nghiệm và được phân tích ngay trong ngày khoảng 3 - 5h sau khi thu mẫu

Phương pháp phân tích mẫu

Lắc trộn đều mẫu nước khoảng 5 - 7 giây Dùng pipet lấy 1ml nước mẫu cho vào ống nghiệm chứa 9ml NaCl 0,85% thứ nhất (nồng độ 10-1, 10-2, 10-3 ) Mỗi chuyển mẫu qua ống nghiệm mới cần lắc đều và thay đầu col Sau đó dùng pipet vô trùng lấy 0,1 ml mẫu nước ở mỗi nồng độ pha loãng cho vào đĩa môi trường NA hoặc TSA và lập lại 2 lần Dùng que trãi thủy tinh vô trùng trãi đều dung dịch trên bề mặt môi trường và đánh dấu độ pha loãng trên đĩa Ủ mẫu nước ở 18 - 24h, ở nhiệt độ 30oC và đọc kết quả

Cách tính và ghi nhận kết quả

Sau 18 - 24h đếm số khuẩn lạc trên đĩa Chọn các đĩa có số khuẩn lạc trong khoảng 20 - 200 khuẩn lạc/đĩa để đếm Nếu số khuẩn lạc quá nhiều thì chia đĩa ra làm 4 phần, đếm số khuẩn lạc trên cùng 1 phần rồi nhân cho 4 thì được tổng số khuẩn lạc trên 1 đĩa

Đặt cá lên khay và quan sát các dấu hiệu bên ngoài Ghi nhận tình trạng màu sắc ở bên ngoài cơ thể cá.

Da: Dùng lame cạo nhẹ lớp nhớt trên thân cá từ nắp mang đến đuôi, phần bụng nếu được Đậy lamen lại và dùng ống hút nhỏ vào 1 ít nước muối sinh lý

để tiêu bản không bị khô, quan sát dưới vật kính 10X

Mang: Dùng nhíp nâng và dùng kéo cắt rời nắp mang Cắt rời 4 cung mang

ra, cho vào đĩa petri chứa nước muối sinh lý, quan sát dưới kính nhìn nổi xem có

ký sinh trùng lớn không, sau đó cắt 1 cung mang ra và dùng lamen cạo lớp nhớt trên 2 mặt của cung mang Ép tiêu bản bằng lamen, dùng ống hút nhỏ 1 ít nước muối sinh lý để tiêu bản không bị khô và quan sát dưới kính hiển vi ở vật kính 10X và 40X để tìm nhóm ký sinh trùng nhỏ

Thao tác kiểm tra các cơ quan bên trong của cá

Đặt cá nằm lên khay, tiến hành mổ cá như sau: để cá trong khay ngửa bụng

cá lên trên và dùng kéo nhọn chọc nhẹ vào da bụng mềm ở phía sau lỗ hậu môn cắt một đường ngang vừa phải, tiếp tục cắt vòng qua lỗ hậu môn, cắt tiếp đường dọc theo cơ thể tới phần dưới mang

Chú ý: Thận trọng khi đưa kéo cắt, tránh làm thủng các cơn quan bên trong.

Kiểm tra ký sinh trùng

Túi mật: Cẩn thận tách túi mật ra khỏi cơ quan gan, dạ dày Dùng ống tiêm hút và nhỏ một giọt dịch mật lên lame rồi đậy lại bằng lamen, nếu túi mật quá nhỏ thì ta để cả túi lên lame rồi dùng kim mủi dáo kéo ra cho dịch mật chảy ra sau đó dùng lamen đậy lại, quan sát ký sinh trùng ở vật kính 10 - 40X

Ruột: Phết mẫu nhớt ruột: cắt đoạn ruột sau, đặc lên lame, mổ và cạo mặt trong ruột bằng lamen, rồi đậy lamen lại làm tiêu bản Quan sát ở vật kính 10X, 40X Mổ hết ruột để tìm ký sinh trùng kích thước lớn: đưa phần ruột đã mổ vào đĩa petri chứa nước muối sinh lý, khuấy nhẹ nhẹ rồi đặc đĩa vào quan sát ký sinh trùng dưới kính nhìn nổi Để phần ruột đã mổ vào đĩa petri chứa nước muối sinh

lý Khuấy thật mạnh cho các chất trong ruột hòa tan với nước muối Sau đó nhỏ lên lame và quan sát tìm ký sinh trùng.

Gan: sau khi mổ thì quan sát xem trong gan có bào nang, sán hay không, nếu có thi ta lấy bào nang, sán để lên lame và quan sát dưới kính hiển vi

Thận: cắt thận trên và thận dưới ra bỏ vào một hộp lồng đựng nước muối

sinh lý Quan sát dưới kính soi nổi tìm giun tròn hay bào nang khác Cắt một mẫu thận nhỏ đặt lên giấy thấm để giấy hút phần máu dính trên thận, sau đó phết mẫu thận lên lame sạch và quan sát dưới kính hiển vi quang học

Đối với nội ký sinh trùng có kích thước lớn, nhìn thấy bằng mắt thường và cường độ bắt gặp cũng cao như giun tròn, sán song chủ thì đếm ký sinh trùng trên một cơ quan hoặc trên bộ phận cơ quan như gan, ruột, dạ dày, mật.

Đối với ký sinh trùng nhỏ, chỉ nhìn thấy bằng dụng cụ quang học thì đếm số trùng có trên một lame, nếu số trùng quá nhiều thì đếm số trùng trong một thị trường

3.4.4 Phân lập và định danh vi khuẩn

Phân lập, nuôi cấy

Tỉ lệ nhiễm = x 100

Số mẫu nhiễm KSTTổng số mẫu đã kiễm tra

Cường độ nhiễm =

Số trùngCon cá

Cường độ nhiễm =

Số trùng

Cơ quan

Cường độ nhiễm =

Số trùngLame/thị trường