NGHIÊN CỨU ĐA DẠNG THÀNH PHẦN LOÀI CỦA NẤM RỄ NỘI CỘNG SINH (ARBUSCULAR MYCORRHIZA)TRONG ĐẤT TRỒNG NGÔ

Nấm rễ nội cộng sinh (AMF Arbuscular Mycorrhizal Fungi) là một nhóm nấm có lợi trong đất và sống cộng sinh trong rễ của thực vật bậc cao. Đây là quần hợp nấm thực vật được biết nhiều nhất và đóng vai trò quan trọng trong quá trình phát triển của thực vật cũng như hệ sinh thái. AMF được phát hiện từ ít nhất 400 triệu năm trước, có vai trò rất quan trọng đối với sự phát triển, sinh sản của cả thực vật và nấm. Đây được xem là nhóm vi sinh vật chủ yếu tồn tại ở rễ và đất của cây trồng, được tìm thấy trong hầu hết các sinh cảnh trên toàn thế giới và trong khoảng 90% các loài thực vật 74. Mặc dù là nội cộng sinh bắt buộc nhưng mối quan hệ giữa nấm và thực vật được được coi là mối quan hệ “Hội sinh”, do nó mang lại lợi ích cho cả vật chủ và nấm. Trước hết, nấm nhận được các sản phẩm quang hợp từ thực vật bằng cách sống cố định trong rễ của chúng và sau đó phát triển mạng lưới hệ sợi nấm trong vùng bầu rễ để tạo thuận lợi cho việc hấp thụ các chất dinh dưỡng và cung cấp các chất có lợi khác cho vật chủ, cạnh tranh với các vi khuẩn trong đất khác, đồng thời giúp thực vật tăng khả năng lấy nước và chất dinh dưỡng như phốt pho, lưu huỳnh, nitơ và các vi chất dinh dưỡng từ các sợi nấm tạo ra ngoài vùng rễ. Ngoài ra, sự cộng sinh của nấm đã được chứng minh là giúp cho cây trồng có khả năng chống chịu được sự khô hạn hay đề kháng với một số tác nhân gây bệnh

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN - LƯU THỊ DUNG NGHIÊN CỨU ĐA DẠNG THÀNH PHẦN LOÀI CỦA NẤM RỄ NỘI CỘNG SINH (ARBUSCULAR MYCORRHIZA) TRONG ĐẤT TRỒNG NGÔ LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Hà Nội – 2018 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN - LƯU THỊ DUNG NGHIÊN CỨU ĐA DẠNG THÀNH PHẦN LOÀI CỦA NẤM RỄ NỘI CỘNG SINH (ARBUSCULAR MYCORRHIZA) TRONG ĐẤT TRỒNG NGÔ Chuyên ngành: Vi sinh vật học Mã số: 60420107 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: TS LÊ THỊ HOÀNG YẾN TS MAI THỊ ĐÀM LINH Hà Nội - 2018 LỜI CẢM ƠN Tôi xin phép gửi lời cảm ơn sâu sắc tới Ban giám hiệu, Phòng Đào tạo Sau đại học, Bộ môn Vi sinh học, Khoa Sinh học, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội tạo điều kiện giúp đỡ tơi hồn thành Luận án Tơi xin phép gửi lời cảm ơn sâu sắc tới Đại học Quốc gia Hà Nội, đơn vị hỗ trợ kinh phí cho nghiên cứu từ đề tài QG 16.35 để thực nghiên cứu Luận văn Tôi xin phép gửi lời cảm ơn sâu sắc tới Viện Vi sinh vật Công nghệ sinh học - Đại học Quốc gia Hà Nội, đơn thị thực nghiên cứu cung cấp sở vật chất để tơi hồn thành kết nghiên cứu trình bày Luận văn Tơi xin trân trọng cảm ơn TS Lê Thị Hoàng Yến, Viện Vi sinh vật Công nghệ Sinh học - Đại học Quốc gia Hà Nội, giáo viên hướng dẫn tận tình hướng dẫn, bảo tạo điều kiện cho tơi hồn thành Luận văn Tơi xin trân trọng cảm ơn TS Mai Thị Đàm Linh, Bộ môn Vi sinh vật, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội, giáo viên hướng dẫn tận tình hướng dẫn, bảo tạo điều kiện cho tơi hồn thành Luận văn Tơi xin trân trọng cảm ơn tồn cán Viện Vi Sinh vật Công nghệ Sinh học - Đại học Quốc gia Hà Nội tạo điều kiện giúp đỡ tơi suốt q trình thực nghiên cứu Tôi xin trân trọng cảm ơn thầy, cô giáo Bộ môn Vi sinh vật, Khoa Sinh học, Trường Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội tận tình dạy dỗ giúp đỡ tạo điều kiện cho tơi suốt q trình học tập, nghiên cứu Tơi xin phép gửi lời cảm ơn tới Khoa Kiểm định Vắc xin Vi rút, Viện Kiểm định Quốc gia Vắc xin Sinh phẩm y tế, Bộ y tế, nơi công tác tạo điều kiện cho tơi để tơi hồn thành Luận văn Tơi xin chân thành cảm ơn bạn bè đồng nghiệp động viên, hỗ trợ, dõi theo bước tiến chia sẻ với mặt sống công việc Sau cùng, xin bày tỏ lòng biết ơn vơ hạn tới bố mẹ gia đình ln bên cạnh, ủng hộ đồng hành cho ngày hôm Hà Nội, ngày 02 tháng năm 2018 Học viên Lưu Thị Dung MỤC LỤC MỞ ĐẦU CHƯƠNG - TỔNG QUAN 1.1 Nấm rễ nội cộng sinh 1.2 Lịch sử nghiên cứu .3 1.3 Phương pháp phân loại nấm rễ nội cộng sinh .4 1.3.1 Phân lập bào tử nấm rễ nội cộng sinh 1.3.2 Phân loại .5 1.4 Vai trò nấm rễ nội cộng sinh thực vật .10 1.4.1 Khả huy động nước chất dinh dưỡng 10 1.4.2 Thu nhận hợp chất cacbon cộng sinh Mycorrhiza .10 1.4.3 Tăng sức chống chịu trồng điều kiện bất lợi môi trường 11 1.4.4 Giúp chống chịu với bệnh hại .11 1.4.5 Hấp thu lân 12 1.5 Tình hình nghiên cứu AMF giới 12 1.6 Tình hình nghiên cứu Việt Nam 16 1.7 Đặc điểm tự nhiên địa điểm nghiên cứu .18 1.7.1 Đặc điểm tự nhiên Duy Tiên – Hà Nam 18 1.7.2 Đặc điểm tự nhiên Thường Tín - Hà Nội 19 CHƯƠNG - NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 21 2.1 Đối tượng nghiên cứu 21 2.2 Địa điểm thời gian nghiên cứu .21 2.3 Vật liệu trang thiết bị .21 2.3.1 Nguyên vật liệu 21 2.3.2 Dụng cụ .22 2.4 Phương pháp .22 2.4.1 Lấy mẫu đất .22 2.4.2 Phân lập AMF 22 2.4.3 Tiệt trùng bào tử AMF 23 2.4.4 Phân loại nấm rễ nội cộng sinh 24 CHƯƠNG - KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 28 3.1 Phân lập AMF từ mẫu đất thu thập .28 3.2 Phân loại AMF phương pháp hình thái học 29 3.3 Đánh giá đa dạng thành phần loài AMF vùng sinh thái nghiên cứu mối tương quan điều kiện môi trường sống tới đa dạng thành phần loài chủng nấm rễ nội cộng sinh đất trồng ngô 45 3.3.1 Dựa vào thành phần loài 45 3.3.2 Dựa vào tần suất xuất 46 3.3.3 Dựa vào mật độ loài 51 3.4 Lựa chọn số AMF có độ đa dạng cao để phân loại chúng kỹ thuật sinh học phân tử 52 KẾT LUẬN 55 TÀI LIỆU THAM KHẢO .56 DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT - ADN (Acid deoxiribonucleic): Axit deoxiribonucleotit - ARN (Acid ribonucleic): Axit ribonucleotit - AMF(Arbuscular Mycorrhizal Fungi): Nấm rễ nội cộng sinh - BP (Base pair): Cặp bazơ - dNTP ( Deoxynucleotide Triphosphates): Nucleotide - PCR (Polymerase Chain Reaction): Phản ứng khuếch đại DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Phân loại AMF hình thái học Bảng 2.1 Danh sánh mẫu đất nghiên cứu 21 Bảng 2.2.Thành phần phản ứng PCR 25 Bảng 2.3 Chu kỳ nhiệt phản ứng PCR 26 Bảng 3.1 Số lượng bào tử AMF phân lập .28 Bảng 3.2 Tần suất xuất chi AMF 47 Bảng 3.3 Tần suất xuất loài AMF .49 Bảng 3.4 Sự phân bố AMF đất theo mật độ loài (SR) 51 DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Vị trí địa lý Duy Tiên - Hà Nam đồ 19 Hình 1.2 Vị trí địa lý Thường Tín-Hà Nội đồ 20 Hình 3.1 Biểu đồ mật độ bào tử AMF phân lập mẫu Hà Nội Hà Nam 29 Hình 3.2 Hình ảnh bào tử lồi Acaulospora gerdemanii (kích thước bar 100µm) .30 Hình 3.3 Hình ảnh bào tử lồi Acaulospora longula, kích thước bar 30 µm 31 Hình 3.4 Hình ảnh bào tử lồi Acaulospora mellea, kích thước bar 20 µm 31 Hình 3.5 Hình ảnh bào tử lồi Acaulospora morrowiae, kích thước bar 50 µm 32 Hình 3.6 Hình ảnh bào tử lồi Acaulospora rehmii phân lập, kích thước bar 50 µm 32 Hình 3.7 Hình ảnh bào tử lồi Acaulospora sp 1, kích thước bar 30 µm .33 Hình 3.8 Hình ảnh bào tử lồi Acaulospora sp.2, kích thước bar 20 µm 33 Hình 3.9 Hình ảnh bào tử lồi Acaulospora sp.3, kích thước bar 50 µm 34 Hình 3.10 Hình ảnh bào tử lồi Centraspora pellucida, kích thước bar 50µm .34 Hình 3.11 Hình ảnh bào tử lồi Dentiscutata nigra, kích thước bar 50µm 35 Hình 3.12 Hình ảnh bào tử lồi Dentiscutata reticulata, kích thước bar 50µm 35 Hình 3.13 Hình ảnh bào tử lồi Dentiscutata sp., kích thước 50 µm 36 Hình 3.14 Hình ảnh bào tử lồi Glomus ambisporum, kích thước bar 50 µm .37 Hình 3.15 Hình ảnh bào tử lồi Glomus multicaule, kích thước bar 50 µm 37 Hình 3.16 Hình ảnh bào tử lồi Glomus intraradice, kích thước bar 50µm 38 Hình 3.17 Hình ảnh bào tử lồi Gigasspora albida, kích thước 50µm 38 Hình 3.18 Hình ảnh bào tử lồi Gigasspora decipiens, kích thước bar 50µm 39 Hình 3.19 Hình ảnh bào tử lồi Gigasspora gigantean, kích thước 100 µm 39 Hình 3.20 Hình ảnh bào tử lồi Gigasspora margarita, kích thước bar 50 µm 40 Hình 3.21 Hình ảnh bào tử lồi Racocetra gregari, kích thước bar 50µm 41 Hình 3.22 Hình ảnh bào tử lồi Rhizophagus clarus, kích thước bar 50µm 41 Hình 3.23 Hình ảnh bào tử lồi Rhizophagus sp., kích thước bar 50µm .42 Hình 3.24 Hình ảnh bào tử lồi Septoglomus constrictum, kích thước bar 50 µm 42 Hình 3.25 Hình ảnh bào tử lồi New Genus sp., kích thước bar 50µm 43 Hình 3.26 Hình ảnh bào tử lồi New Genus sp., kích thước bar 50µm 44 Hình 3.27 Hình ảnh bào tử lồi New Genus sp., kích thước bar 50µm 44 Hình 3.28 Tần số xuất chi AMF .47 Hình 3.29 Tần suất xuất lồi AMF 50 Hình 3.30 Mật độ loài AMF 52 Hình 3.31 Cây chủng loại phát sinh chủng AMF nghiên cứu loài có mối quan hệ họ hàng gần dựa vào phân tích trình tự 18S 53 Hình 3.29 Biểu đồ tần suất xuất loài AMF Nhận xét: Qua bảng 3.3 hình 3.29 cho thấy mẫu đất trồng ngô Hà Nội có 16 lồi phát hiện, số có lồi Gigaspora decipiens, Gigaspora gigantean, Glomus multicaule Acaulospora mellea loài chiếm ưu thế, tần suất xuất là: 14,3 %; 12,4 %; 10,5 % 10,5 % Còn đất trồng ngơ Hà Nam, phát 18 lồi, lồi Gigaspora decipiens Gigaspora gigantean loài chiếm ưu thế, tần suất xuất là: 18,8 % 12,8% (Bảng 3.3 Hình 3.29) Như vậy, thấy loài thuộc chi Acaulospora, Gigaspora Glomus loài AMF chiếm ưu Kết qủa phân tích đa dạng AMF tương đồng so với nghiên cứu trước Trần Thị Như Hằng cs (2012) Nguyễn Thị Kim Liên cs (2012) cho chi thường gặp đất trồng cà chua, mía cam Việt Nam [5,7] 52 1.14.3 Dựa vào mật độ loài Để đánh giá mức độ đa dạng AMF đất trồng ngô, nghiên cứu đề cập đến đa dạng mật độ lồi AMF đất trồng ngô Hà Nội Hà Nam Kết trình bày Bảng 3.4 Hình 3.30 Bảng 3.4 Sự phân bố AMF đất theo mật độ loài (SR) Loài AMF xuất STT Mẫu Hà Nội Hà Nam Giá trị SR Hà Hà Nội Nam N01 10 10 12 13 20 21 22 25 26 10 N02 18 13 20 21 22 26 N03 16 13 15 N04 11 12 10 N05 11 10 12 13 15 17 19 20 21 22 24 25 26 10 12 13 14 19 20 21 22 26 12 13 14 20 21 22 24 N06 17 13 14 21 10 12 13 14 17 10 N07 11 20 13 10 12 13 14 17 24 10 N08 10 11 17 18 19 23 10 13 26 14 17 7 N09 11 17 18 21 12 13 19 26 10 N10 10 20 13 14 26 11 N11 16 14 12 13 14 12 N12 10 17 23 12 13 17 26 13 N13 21 23 10 12 13 24 26 14 N14 14 23 12 13 14 26 15 N15 17 23 12 13 14 17 19 26 53 Hình 3.30 Biểu đồ mật độ loài AMF Nhận xét: Sự phân bố mật độ bào tử (SD) mật độ loài (RS) 15 loài AMF 15 mẫu đất trồng ngô Hà Nội thể bảng cho thấy mật độ bào tử AMF mẫu từ 9,5-102 bào tử/100g đất (trung bình 45.63 bào tử/100g) Mật độ lồi thay đổi từ 1-7 lồi/mẫu (trung bình 3,6 lồi) Trong phân bố mật độ bào tử (SD) mật độ loài (RS) 18 lồi AMF 15 mẫu đất trồng ngơ Hà Nam thể bảng cho thấy mật độ bào tử AMF mẫu từ 110-304 bào tử/100g đất (trung bình 165.72 bào tử/100g) Mật độ lồi thay đổi từ 6-15 lồi/mẫu (trung bình 8,73 lồi) Kết cho thấy có tương quan mật độ bào tử số lượng loài xuất mẫu Các mẫu có số lượng bào tử nhiều đồng thời số lượng lồi nấm mẫu đất lớn Kết tương đồng với nghiên cứu Zhao cộng (2003) nghiên cứu đa dạng AMF rừng mưa nhiệt đới Xishuangbanna [80] 1.15 Lựa chọn số AMF có độ đa dạng cao để phân loại chúng kỹ thuật sinh học phân tử Trong số 11 chi AMF phát từ hai địa điểm nghiên cứu, Acaulospora Gingaspora, hai chi có TSXH cao hai địa điểm nghiên 54 cứu, 12,4% 32,4% Hà Nội 37,6% 29,9% Hà Nam Các chủng 03 chủng SP2, SP18, SP19 chủng thuộc chi Acaulospora Gingaspora dựa vào phân tích hình thái học Chúng lựa chọn tiến hành phân tích phương pháp sinh học phân tử vào phân tích trình tự gen ARN 18S đoạn AML1/AML2 Kết trình bày đây: 0.01 Glomus_intraradices_FJ009604 94 Funneliformis_mosseae_FR750227 91 81 74 72 Glomus_macrocarpum_FR772325.1 Acaulospora_spinos Z14004 Acaulospora laevis Y17633 Acaulospora_cavernata AJ306442 Acaulospora mellea FJ009670.1 94 Acaulospora_lacunosa FR719957 63 64 SP2 Acaulospora V3 KC182581 74 Acaulospora_longula AJ306439 57 52 Acaulospora_brasilien FN825899 Gigaspora margarita AJ852604 SP18 52 100 SP19 Diversispora_epigaea X86687 Paraglomus_occultum_KP144314.1 Hình 3.31 Cây chủng loại phát sinh chủng AMF nghiên cứu lồi có mối quan hệ họ hàng gần dựa vào phân tích trình tự 18S Giá trị Bootstrap value > 50% thể Bar 0.01 Phân tích trình tự gen dựa vào phân tích trình tự đoạn 18S SP2 nằm nhánh với Acaulospora V3 Acaulospora longula với giá trị bootstrap 57-74% Như thấy có phù hợp phân loại dựa vào phân tích hình thái phân tích trình tự 18S chủng SP2 thuộc lồi Acaulospora longula Kết phù hợp với kết phân tích hình thái học Phân tích chủng loại phát sinh cho thấy SP18, SP19 có họ hàng gần gũi với với Gingaspora marganita SP18 SP19 nằm nhánh nhỏ 55 với giá trị Bootstrap 100%; nhánh nhỏ nằm cụm với G marganita, giá trị bootstrap 52% Có thể kết luận SP18, SP19 thuộc Gingaspora marganita loài gần gũi với chúng Dựa vào kết phân tích hình thái phân tích sinh học phân tử kết luận SP19 thuộc lồi G gigantea SP18 thuộc loài G margarita 56 KẾT LUẬN Đã phân lập 3179 bào tử AMF từ 15 mẫu đất trồng ngô Hà Nội 15 mẫu đất trồng ngô Hà Nam Trên 100g đất phân lập Hà Nội có từ 9,33-102 bào tử AMF, mẫu Hà Nam 110,66-304 bào tử Có tương đồng đa dạng sinh học hai địa điểm nghiên cứu số lượng chi, loài, đa dạng sinh học tần số xuất AMF: Đã phát 11 chi, 26 loài AMF từ hai địa điểm nghiên cứu: Hà Nội (8 chi, 14 loài); Hà Nam (8 chi, 18 loài, chi có hình thái khác với mơ tả trước, nghi ngờ lồi mới) Acaulospora Gigaspora hai chi có tần suất xuất cao (12,4% 37,6%) (35 35%) mẫu đất cát Hà Nội Hà Nam Đã thành công việc phân loại AMF dựa vào phân tích trình tự 18S (đoạn AML1/MML2) chủng đại diện cho chi có chi có tần số xuất cao: SP2 thuộc loài Acaulospora longula, SP18 thuộc loài Gingaspora margarita SP19 thuộc loài Gingaspora gingatae 57 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Nguyễn Sỹ Giao (1976), “Ảnh hưởng rễ nấm sinh trưởng phát triển non thông nhựa”, Tạp chí Lâm nghiệp, 25(12), tr 21-36 Nguyễn Sỹ Giao, Nguyễn Thị Nhâm (1977), “Bước đầu nghiên cứu ứng dụng số loại nấm cộng sinh chủng để tạo rễ nấm thông nhựa (Pinus Merkussi), Kỉ yếu khoa học 1976-1977 Viện Khoa học Lâm nghiệp Việt Nam, tr 98-103 Nguyễn Sỹ Giao, Nguyễn Thị Nhâm (1980), “Nghiên cứu bệnh vàng còi Thơng nhựa, dựa vào qui luật cộng sinh với nấm”, Kỉ yếu Khoa học 19701980 Viện Khoa học Lâm nghiệp Việt Nam, tr 216-224 Nguyễn Hồng Hà, Trịnh Thị Thu Hà, Nguyến Thị Hồng Hải, Nguyễn Ngọc Cường, Trần Ngọc Ninh (2003), “Thu thập bào tử nấm cộng sinh vùng rễ dược liệu”, Hội nghị Công nghệ Sinh học toàn quốc, Hà Nội, tr 238-240 Trần Thị Như Hằng, Trần Thị Hồng Hà, Nguyễn Đình Luyện, Postakatalin, Lê Mai Hương (2012), “Phân lập, nhân nuôi lưu giữ định tên số nấm rễ nội cộng sinh lúa cà chua Bắc Việt Nam”, Tạp chí Khoa học Cơng nghệ, 50(4) 521-527 Nguyễn Viết Hiệp (2008), “Phân bố nấm rễ cộng sinh Arbuscular mycorhiza fungi đất trồng chè Thái Nguyên”, Khoa học đất, 29, tr 17-23 Nguyễn Thị Kim Liên, Lê Thị Thủy, Nguyễn Viết Hiệp, Nguyễn Huy Hoàng (2012), “Nghiên cứu đa dạng hệ nấm cộng sinh arbuscular mycorrhiza đất rễ cam Quỳ Hợp, Nghệ An” Tạp chí sinh học, 34(4): 441-445 Trần Văn Mão (2004), Sử dụng côn trùng vi sinh vật có ích tập 2, Nhà xuất Nơng Nghiệp, Hà Nội, tr 247-251 Nguyễn Thị Minh (2005), “Phân lập tuyển chọn nấm rễ Arbuscular mycorhizae để xử lý cho trồng”, Khoa học đất, 23, tr 46-52 58 10 Nguyễn Thị Minh (2007), “Ảnh hưởng số loại phân hữu đến thiết lập mối quan hệ cộng sinh nấm rễ Arbuscular mycorhizae, Gigaspora margirita sinh trưởng chủ”, Tạp chí Khoa học đất, 28, tr 27-31 11 Nguyễn Đình Quyến (2004), “Vai trò Mycorrhiza Nơng – Lâm nghiệp đại”, Hội thảo nấm rễ Mycorrhiza, Viện Thổ Nhưỡng Nơng Hóa, Hà Nội 12 Nguyễn Văn Sức, Bùi Quang Xuân, Nguyễn Viết Hiệp (2004), “Nghiên cứu, áp dụng kỹ thuật phát triển cộng sinh Mycorrhiza cho số trồng số vùng sinh thái phục vụ cho sản xuất nông nghiệp bền vững”, Báo cáo kết nghiên cứu 2004, Viện Thổ Nhưỡng Nơng Hóa, Hà Nội 13 Nguyễn Văn Sức, Bùi Quang Xuân, Nguyễn Viết Hiệp, Nguyễn Thị Nga (2005), “Nấm rễ nội cộng sinh (VAM) quần thể vi sinh vật đất trồng bưởi đặc sản Đoan Hùng-Phú Thọ”, Khoa học đất, 23, tr 42-46 14 Nguyễn Văn Sức, Bùi Quang Xuân, Nguyễn Viết Hiệp (2006), “Khả nhân bào tử nhờ ký chủ chủng nấm rễ nội cộng sinh (Vesicular Arbuscular mycorhiza) SHM 4-DH16, SHM 04-DH47 SHM 04-TC 139 phân lập từ đất Việt Nam”, Khoa học đất, 24, tr 33-37 15 Phạm Quang Thu Nguyễn Đức Thắng (1998), “Bước đầu nghiên cứu thành phần lồi nấm ngoại cộng sinh với số lồi Thơng Việt Nam”, Thông tin khoa học Lâm nghiệp 16 Phạm Quang Thu (1999), “Ứng dụng vi sinh vật cộng sinh việc sản xuất vườn”, Khoa học Cơng nghệ Quản lí Kinh tế, Nơng nghiệp Công nghiệp Thực phẩm 17 Phạm Quang Thu (2002), “Sử dụng nấm cộng sinh vi sinh vật phân giải phốt phát để sản xuất Thông nhựa chất lượng cao vườn ươm”, Bản tin trồng triệu rừng 59 18 Nguyễn Hoàng Yến (2007), “Phân bố nấm nội cộng sinh với loài Sao đen (Hoperata Odorata Roxb) tỉnh Đồng Nai”, Luận văn Thạc sỹ Khoa học Lâm nghiệp, Trường Đại học Lâm nghiệp Tiếng Anh 19 Bahadalung N N., Suwanarit A., Dell B., Nopamornbodi O., Thamchaipenet A., Rungchuang J (2005), “Effect of long-term NP-fertilization on abundance and diversity of arbucular mycorrhizal fungi under maize cropping system”, Plant and soil, 270, pp 371-382 20 Bali V., Mammta J., Mukerji T (2002), “Effect of VAM fungi on Fusarium wilt of cotton and jute”, ACOM 1, University of Madras, pp 22 Barea J (1982), “Production of plant growth regulating substances by VAM fungus Glomus mosseae”, Applied and Environmental Microbiology, 43(3), pp 810-813 23 Bever J.D., Morton J.B., Antonovics J., Schultz P A (1996), “Host dependent sporulation and species diversity of arbuscular mycorrhiza fungi in a mown grassland”, J Ecol, 84, pp 71 24 Bolandnazar S., Neyshabouri M R., Aliasgharzad N., Chaparzadeh N., (2007), “Effects of mycorrhizal colonization on growth parameters of onion under irrigation and soil conditions”, Pakistan J Biol Sci., 9, pp 1491-1495 25 Brundrett M (1996), “Working with Mycorrhiza in Forestry and Agriculture”, Canberra, Australia, pp 141-252 26 Brundrett M (2004), “Diversity and classification of mycorrizal associations”, Biol, 79, pp 473-495 27 Daniels B A., Skipper H D (1982), “Methods for recovery and quantitative estimation of propagules from soil”, In: Schenck NC (ed) Methods and principles of mycological research, The American Phytological Society, St Paul, MN, pp 29-35 60 28 Dehne J (1982), “Interaction between vesicular-Arbuscular Mycorrhiza Fungi and plant pathogens”, Phytopathology, 72, pp 1115-1118 29 Deressa, T G., Schenk M K., (2008), “Contribution of roots and hyphae to phosphorus uptake of mycorrhizal onion (Allium cepa L.) A mechanistic modeling approach”, Journal of Plant Nutrition and Soil Science, 171, pp 810-820 30 Fa Y W., Zhao Y S (2008), “Biodiversity of Arbuscular Mycorrhiza Fungi in China: a Review”, Advances in Environmental Biology, 2(1), pp 31-39 31 Feldmann F., Boyle C (1998), “Weed-mediated stability of Arbuscular Mycorrisal effectiveness in Maize monocultures”, Journal of Applied Botanu, 73, pp 1-5 32 Friese C F., Koske R E (1991), “The spatial dispersion of spores of vesicular-Arbuscular Mycorrhiza Fungi in a sand dune: Microscale patterns associated with the root architecture of American beachgrass”, Mycological Research, 95(8), pp 952-957 33 Gamper H., Leuchtmann A (2007), “Taxon-specific PCR primers to detect two inconspicuous arbuscular mycorrhizal fungi from temperate agricultural grassland”, Mycorrhiza, 17, pp 145-152 34 Galvan G A., Paradi I., Burger K., Baar J., Kuyper T.W., Scholten O E., Kik C (2009), “Molecular diversity of arbuscular mycorrhizal fungi in onion roots from organic and conventional farming systems in the Netherlands”, Mycorrhiza, 19(5), pp 317-328 35 Gerdemann J W (1968), “Vesicular-arbuscular mycorrhizae and plant growth”, Annual Review of Phytopathology, 6, pp 397- 418 36 Gerdemann J W (1975), “Vesicular-arbuscular mycorrhizae In: The development and function of roots, (Eds JG Torrey and DT Clarkson)” Academic Press, New York, USA, pp 575-591 61 37 Gerdemann J W., Nicolson T H (1963), “Spores of mycorrhizal Endogone species extracted from soil by wet sieving and decanting”, Transaction of the British Mycological Society, 46, pp 235-244 38 Goussous S J., Mohammad M J (2009), “Comparative Effect of Two Arbuscular Mycorrhizae and N and P Fertilizers on Growth and Nutrient Uptake of Onions”, Int J Agric Biol, 11, pp 463-467 39 Guadarrama P., Alvarez Sanchez F J (1999), “Abundance of arbuscular mycorrhizal fungi spores in different environments in a tropical rain forest, Veracruz, Mexico”, Mycorrhiza, 8, pp 267 40 Hajilou M., Abbasdokht M., Amerian M., Gholami A (2010), “Function of biologic fertilizers on growth characteristics, yield and yield components of maize in agriculture ecosystem”, The first national congress of sustainability agriculture and healthy crop production, Iran 41 Hayman D S (1983), “The physiology of vesicular arbuscular endomycorrhizal symbiosis”, Canadian Journal of Botany, 61, pp 944-963 42 Helgason T., Merryweather J W., Denison J., Wilson P., Young J P W., Fitter A H (2002), “Selectivity and functional diversity in arbuscular mycorrhizas of co-occurring fungi and plants from a temperate deciduous woodland”, J Ecol, 90, pp 371-384 43 Jaikoo Lee, Sangsun Lee, Peter J., Young W., (2008), “Improved PCR primers for the detection and identification of arbuscular mycorrhizal fungi”, FEMS Microbiol Ecol, 65, pp 339-349 44 Jaime M D L A., Hsiang T., Mcdonald M R., (2008), “Effects of Glomus intraradices and onion cultivar on Allium white rot development in organic soils in Ontario”, Canadian Journal of Plant Pathology, 30, pp 543-553 45 Jansa J, Mozafar A, Frossard E (2003), “Long-distance transport of P and Zn through the hyphae of an arbuscular mycorrhizal fungus in symbiosis with maize”, Agronomie, 23, pp 481-488 62 46 Kohler J., Hernández J A., Caravaca F., Roldán A., (2008), “Plant - growth promoting rhizobacteria and arbuscular mycorrhizal fungi modify alleviation biochemical mechanisms in water-stressed plants”, Funct Plant Biol, 35, pp 141-151 47 LloydbMacgilp S A., Chambers S M., Dodd J C., Fitter A H., Walker C., Young J P W (1996), “Diversity of the ribosomal internal transcribed spacers within and among isolates of Glomus mosseae and related mycorrhizal fungi”, New Phytol, 133, pp 103-111 48 Mengel K., Kirby E A (2001), Principles of Plant Nutrition, 5th Ed, Kluwer Academic Publishers, London 49 MacMahon, Warner (1984), Dispersal of mycorrhizal fungi: Processes and agents, In: S.E Williams and M.F, Allen, Editors 50 Mobasser H., Tavassoli A (2013), “Study on vesicular arbuscular mycorrhizal (VAM) fungi symbiosis with maize root and it effect on yield component, yield and protein content of maize in water deficit condition”, Journal of Novel Applied Science, 2(10), pp 456-460 51 Morton J B (1988) “Taxonomy of mycorrhizal fungi: Classification nonmenclature and identification”, Mycotaxon, 32, pp 276-324 52 Morton J B., Benny G L (1990), “Revised classification of Arbuscular Mycorrhiza Fungi (Zygomycetes): A new order Glomales, two new suborders, Glominae and Gigasporinae, and two new families, Acaulosporaceae and Gigasporaceae, with an emendation of Glomacease”, Mycotaxon, 37, pp 471491 53 Moss E B (1959), “Observation on the extramatrical mycelium of vesiculararbuscular endophyte”, Transactions of the British Mycological Society, 42, pp 439- 418 54 Mosse B., Hepper C M (1975), “Vesicular-arbuscular infections in root organ cultures”, Physiological Plant Pathology, 5, pp 215-223 63 55 Newsham K., Fitter A H., Watkinsont A R (1995), “Arbuscular mycorrhiza protect an annual grass from root pathogenic fungi in the field”, Journal of Ecology, 83, pp 991-1000 56 Redecker D (2000), “Specific PCR primers to identify arbuscular mycorrhizal fungi within colonized roots”, Mycorrhiza, 10, pp 73-80 57 Robert M A (2001), “Water relations, drought and vesicular arbuscular mycorrhizal symbiosis , Mycorrhiza, 11, pp 3-42 58 Sajedi N., Madani H (2006), “Interaction effect of drought stress, Zinc and mycorrhiza on yield, yield components and harvest index of maize”, Journal of Agriculture Science, 2(7), pp 271-283 59 Salem S F., Dobolyi C., Helyes L., Pék Z., Dimény J (2003), “Side-effect of benomyl and captan on arbuscular mycorrhiza formation in tomato plant”, In 8th IS on Processing Tomato, 613, pp 243-246 60 Sasvárí Z., Hornok L., Posta K (2011), “The community structure of arbuscular mycorrhizal fungi in roots of maize grown in 50 year monoculture”, Biol fertile soil, 47, pp 167-176 61 Schonbeck F., Dehne H (1989), “VA-Mycorrhiza and plant health in “Interrelationships between microorganisms and plants in soil”, Czechoslovak Academy of Sciences, Praha, pp 83-93 62 Schenck N C., Perez Y (1990), Manual for the identification of VA mycorrhizal fungi, 3rd edn, Synergistic Publications, Gainesville, FL 63 Schußler A., Schwarzott D., Walker C (2001), “A new fungal phylum, the Glomeromycota: phylogeny and evolution”, Mycol Res, 105, pp 1413-1421 64 Schuybert A., Hayman D S (1978), “Plant growth responses to vesicular – asbuscular mycorrhizae: XVI Effectiveness of different endophytes at different levels of soil phosphate”, New Phytologist, 103, pp 79-80 64 65 Schwarzott D., Walker C., Schußler A (2001), “Glomusthelargest genus of the arbuscular mycorrhizal fungi (Glomales), is nonmonophyletic”, Mol Phylogenet Evol, 21, pp 190-197 66 Shipra Singh., Anita Pandey., Bhaskar Chaurasia., Lok Man S., Palni (2008), “Diversity of Arbuscular Mycorrhiza Fungi associated with the rhizosphere of tea growing in natural and cultivated ecosites”, Canadian Journal of Microbiology, 39(6), pp 567-575 67 Smith S E., Read D J (2008), Mycorrhizal Symbiosis, 3rd Edition, Academic Press, London 68 Song, Y Y., Zeng, R S., Xu, J F., Li, J., Shen, X., Yihdego, W G (2010), “Interplant communication of tomato plants through underground common mycorrhizal networks”, PLoS ONE, 5(10 ), pp 13324 69 Ted S J (2000), The instant expert guide to Mycorrhiza: The conection for functional enocosystems 70 Tommerup I C (1992), “Method for study of the population biology of vescular Arbuscular Mycorrhiza Fungi”, In Method in MicrobiologyTechniques for the study of mycorrhiza”, Acedemic press, London, 24, pp 23-51 71 Trappe J M., Schenck N C (1982), ‘‘Taxonomy of the fungi forming endomycorrhizae In: Methods and Principles of Micorrhizal Research (N C Schenck, ed.)”, The American Phytopathological Society, St Paul, pp 1-9 72 Vamerali T., Saccomani M., Mosca S., Guarise N., Ganis A (2003), “A comparison of root characteristics in relation to nutrient and water stress in two maize hybrids plant and soil”, 25, pp 57- 167 73 Vancura V., Kunc F (1989), “Interrelationships between microorganisms and plants in soil”, Publishing House of the Czechoslovak academy of sciences, Praha 65 74 Walker C (1987), “Current concepts in the taxonomy of the Endogonaceae In Sylvia, D.M., Hung, L.L & Graham, J.H (eds.), Mycorrhizae in the next decade”, IFAS, Gainesville, Florida, pp 300-302 75 Walker C., Vestberg M (1998), “Synonymy amongst the arbuscular mycorrhizal fungi: Glomus claroideum, G maculosum, G multisubstenum and G fistulosum”, Ann Bot, 82, pp 601-624 76 Walker C., Blaszkowski J., Schwarzott D., Schußler A (2004), “Gerdemannia gen nov., a genus separated from Glomus, and Gerdemanniaceae fam nov., a new family in the Glomeromycota”, Mycol Res, 108, pp 707-718 77 Wang Y.Y., Vestberg M., Walker C., Hurme T., Zhang X., Lindstrom K (2008), “Diversity and infectivity of arbuscular mycorrhizal fungi in agricultural soils of the Sichuan Province of mainland China”, Mycorrhiza, 18, pp 59-68 78 White T J, (1990), “Amplification and direct sequencing of fungal ribosomal RNA gens for phylogentics In: Innis MA, Gelfand DH, Sninsky JJ, White TJ(eds) PCR Protocols:a Guide to Methods and Applications”, Academic Press, New York, pp.315-322 79 Zajicek, J M., Hetrick, B A D., Owensby, C E (1986), “The influence of soil depth on mycorrhizal colonisation of forbes in the tallgrass prarie”, Mycologi, 78, 316-320 80 Zhao Z W., Wang, G H., Yang L (2003), “Biodiversity of arbuscular mycorrhizal fungi in tropical rain forests of Xishuangbanna, southwest China”, Fungal Diversity, 13, pp 233 81 Zhang Y., Yao Q., Li J., Hu Y L Chen J Z (2014), “Growth response and nutrient uptake of Eriobotrya japonica plants inoculated with three isolates of arbuscular mycorrhizal fungi under water stress condition”, J Plant Nutr, 37, pp 690-703 82 (https://invam.wvu.edu/) 66 ... Nghiên cứu đa dạng thành phần loài nấm rễ nội cộng sinh (Arbuscular Mycorrhiza) đất trồng ngô tiến hành với mục tiêu nghiên cứu sau: Phân lập, phân loại chủng nấm rễ nội cộng sinh từ đất trồng. .. trồng ngô Hà Nội Hà Nam Đánh giá đa dạng thành phần loài AMF vùng sinh thái nghiên cứu mối tương quan điều kiện môi trường sống tới đa dạng thành phần loài chủng nấm rễ nội cộng sinh đất trồng ngô. .. nhiên, đa dạng nấm AMF đất trồng ngô Việt Nam mối tương quan điều kiện môi trường sống tới đa dạng thành phần loài chủng nấm rễ nội cộng sinh đất trồng ngơ chưa nghiên cứu nhiều Việc nghiên có