Nghiên cứu xây dựng phương pháp định tính, định lượng các hoạt chất chính trong dược liệu hà thủ ô đỏ Fallopia multiflora Thunb.. Xây dựng được phương pháp định tính ba hợp chất 2,3,5,
Trang 1Nghiên cứu xây dựng phương pháp định tính, định lượng các hoạt chất chính trong dược liệu
hà thủ ô đỏ Fallopia multiflora (Thunb.)
Haraldson Nguyễn Thị Hà Ly
Trường Đại học Khoa học Tự nhiên Luận văn ThS Chuyên ngành: Hóa phân tích; Mã số 60 44 01 18
Người hướng dẫn: TS Phương Thiện Thương, PGS.TS Tạ Thị Thảo
Năm bảo vệ: 2013
Abstract Xây dựng được phương pháp định tính ba hợp chất
2,3,5,4′-tetrahydroxystilben-2-O-β-D-glucosid (THSG), resveratrol (RV) và emodin (EM) trong dược liệu hà thủ ô đỏ Xây dựng được phương pháp định lượng hai hợp chất THSG và EM trong dược liệu hà thủ ô đỏ Đánh giá hàm lƣợng THSG và EM trong một số mẫu hà thủ ô đỏ thu hái tại các vùng khác nhau và trong sản phẩm chế biến từ
hà thủ ô đỏ
Keywords Hóa phân tích; Phương pháp định tính; Phương pháp định lượng; Dược liệu
Trang 211
MỞ ĐẦU
Từ ngàn xưa, ông cha ta đã biết sử dụng nguồn cây cỏ phong phú xung quanh để làm thuốc trị bệnh, bồi bổ cơ thể, tăng cường sức khỏe Các dược liệu quý
đã được ghi chép thành các bài thuốc cổ truyền với nhiều tác dụng quý báu Một trong số các dược liệu quý đó là hà thủ ô đỏ Trong một số tài liệu ghi chép còn lưu giữ, hà thủ ô đỏ được coi như vị thuốc trường sinh, có khả năng làm người già thành trẻ, tóc bạc lại đen Theo quan điểm của y học cổ truyền, hà thủ ô đỏ có nhiều tác dụng quý như bổ huyết, điều hoà khí huyết, bổ gan thận, mạnh gân cốt, nhuận tràng, giúp ích cho sự tiêu hoá Y học hiện đại còn phát hiện hà thủ ô đỏ có tác dụng làm giảm lượng đường trong máu, có tác dụng tốt đối với các trường hợp suy nhược thần kinh và bệnh về thần kinh, làm tăng hoạt động của tim, làm tăng sự co bóp của ruột, có tác dụng chống viêm Do đó, hà thủ ô đỏ được sử dụng rộng rãi để làm thuốc phục vụ đời sống con người từ xưa đến nay
Tuy nhiên, hiện nay trên thị trường, vị thuốc quý này đang bị giả mạo bằng một số loại rễ củ như: hà thủ ô trắng, củ nâu, củ cọc hoặc tình trạng người sử dụng mua phải dược liệu rác đã bị chiết hết các hoạt chất, gây ảnh hưởng đến sức khoẻ người bệnh và quyền lợi người tiêu dùng Vì vậy, việc nghiên cứu đánh giá chất lượng, tiêu chuẩn hoá dược liệu hà thủ ô đỏ là vấn đề hết sức cần thiết
Ở Việt Nam, qui định chính thống việc kiểm tra chất lượng dược liệu hà thủ
ô đỏ còn rất sơ sài Chuyên luận hà thủ ô đỏ trong Dược Điển Việt Nam IV (2009)
chỉ quy định hàm lượng chất chiết được trong etanol 30%, tiêu chí đánh giá này không phản ánh được chính xác chất lượng dược liệu hà thủ ô đỏ Trên thế giới đã
có rất nhiều công trình nghiên cứu về phương pháp phân tích định tính, định lượng dược liệu hà thủ ô đỏ Trong đó, phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) thường được sử dụng nhất bởi độ nhạy tốt, phù hợp với đối tượng phân tích là dược liệu và giá thành không quá cao Dược Điển Trung Quốc (2010) có sử dụng phương
pháp này để định lượng hai thành phần emodin và
2,3,5,4′-tetrahydroxystilben-2-O-β-D-glucosid trong dược liệu hà thủ ô đỏ, là tiêu chí đánh giá chất lượng dược liệu
hà thủ ô đỏ
Trang 312
Trong phạm vi luận văn thạc sĩ “Nghiên cứu xây dựng phương pháp định
tính, định lượng các hoạt chất chính trong dược liệu hà thủ ô đỏ Fallopia
multiflora (Thunb.) Haraldson” chúng tôi tiến hành khảo sát các điều kiện HPLC
thích hợp để định tính, định lượng các hoạt chất chính trong dược liệu hà thủ ô đỏ Sau đó, áp dụng phương pháp này để đánh giá chất lượng dược liệu hà thủ ô đỏ và các sản phẩm chế biến từ hà thủ ô đỏ Kết quả của nghiên cứu này nhằm gợi ý cho việc nâng cấp chuyên luận dược liệu hà thủ ô đỏ trong Dược Điển Việt Nam IV
Mục tiêu nghiên cứu:
Xây dựng được phương pháp định tính ba hợp chất
2,3,5,4′-tetrahydroxystilben-2-O-β-D-glucosid (THSG), resveratrol (RV) và emodin (EM) trong dược liệu hà thủ ô đỏ
Xây dựng được phương pháp định lượng hai hợp chất THSG và EM trong dược liệu hà thủ ô đỏ
Đánh giá hàm lượng THSG và EM trong một số mẫu hà thủ ô đỏ thu hái tại các vùng khác nhau và trong sản phẩm chế biến từ hà thủ ô đỏ
Trang 476
Tài liệu tham khảo
Tiếng Việt
1 Bộ Y tế (2009), Dược Điển Việt Nam IV, Nhà xuất bản Y học, Hà Nội, trang 772
– 773
2 Bộ Y tế (2011), Dược liệu học, tập 1, Nhà xuất bản Y học, Hà Nội, trang 75 – 76
3 Đỗ Huy Bích và cộng sự (2003), Cây thuốc và động vật làm thuốc ở Việt Nam, tập I, II, NXB
KHKT, Hà Nội, trang 884 – 887
4 Võ Văn Chi (1997), Từ điển cây thuốc Việt Nam, NXB Y học, Hà Nội
5 Trần Tứ Hiếu, Từ Vọng Nghi, Nguyễn Xuân Trung, Nguyễn Văn Ri (2003), Các
phương pháp phân tích công cụ, NXB Đại Học Quốc Gia Hà Nội
6 Phạm Thanh Huyền (2013), Nghiên cứu trồng 3 cây thuốc bản địa: Ngũ gia bì
gai, Sì to, Hà thủ ô đỏ trong cộng đồng các dân tộc vùng cao ở một số xã
thuộc huyện Sa Pa, tỉnh Lào Cai, Viện Dƣợc liệu, Bộ Y tế
7 Nguyễn Thị Ngọc Lan (2012), Phân lập một số chất dùng làm chất đối chiếu
phục vụ công tác tiêu chuẩn hóa và kiểm tra chất lượng dược liệu, Đề tài cấp
cơ sở, Viện Dƣợc liệu, Bộ Y tế
8 Đỗ Tất Lợi (2006), Những cây thuốc và vị thuốc Việt Nam, Nhà xuất bản Y học,
Hà Nội, trang 833 – 835
9 Phạm Luận (2000), Giáo trình, Cơ sở lý thuyết sắc ký lỏng hiệu năng cao, Đại
Học Khoa Học Tự Nhiên-ĐHQGHN
10 Nguyễn Văn Ri (2009), Các phương pháp tách, Đại học Khoa học Tự Nhiên –
ĐHQGHN
11 Viện Dƣợc liệu (2008), Chiết xuất dược liệu, NXB Khoa học và Kỹ thuật, Hà
Nội, trang 11-29, 39-49, 66-76
Tiếng Anh
12 Chen L.L., Huang X.J., Li M.M., Ou G.M., Zhao B.X., Chen M.F (2012),
“Polygonflavanol A, a novel flavonostilbene glycoside from the roots of
Polygonum multiflorum”, Phytochemistry Letters, 5, 756 – 760
13 Chu X., Sun A., Liu R (2005), “Preparative isolation and purification of five
Trang 577
compounds from the Chinese medicinal herb Polygonum cuspidatum Sieb et
Zucc by high-speed counter-current chromatography”, Journal of
Chromatography A, 1097, 33–39
14 Craig Z and Anna P (2011), “The photostability and photostabilizationof
trans-resveratrol”, Cosmetics & Toiletries magazine, Vol 126, No 9
15 Han D.Q., Zhao J., Xu J., Peng H.S., Chen X.J and Li S.P (2013), “Quality
evaluation of Polygonum multiflorum in China based on HPLC analysis of hydrophilic bioactive compounds and chemometrics”, Journal of
Pharmaceutical and Biomedical analysis, 72, 223 – 230
16 Feng Y et al (2010), “Emodin, a Natural Product, Selectively Inhibits 11β-Hydroxysteroid Dehydrogenase Type 1 and Ameliorates Metabolic Disorder
in Diet-Induced Obese Mice", British Journal of Pharmacology, 161 (1), 113–
126
17 Gu J., Hasuo W., Takeya H, Akasu M (2005), “Effects of emodin on synaptic transmission in rat hippocampal CA1 pyramidal neurons in
vitro”, Neuropharmacology, 49 (1), 103–111
18 Hong Kong chinese Materia Medica Standards (2009), volum 3, pp 223 – 233
19 Ma J., Qi L.W., Li H.J., Li P (2012), “A segmental monitoring stragety based
on variable wavelength detection for quality control of three Polygonaceae
herbs”, Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 62, 155 – 161
20 Koyama J., Takeuchi A., Morita I., Nishino Y., Shimizu M., Inoue M., Kobayashi N (2009), “Characterization of emodin metabolites in Raji cells by
LC–APCI-MS/MS”, Bioorganic & Medicinal Chemistry, 17, 7493–7499
21 Knauer (2011), “Determination of Phthalates”, Applications Journal, page 32
22 Kim K.W., Ha K.T., Park C.S., Jin U.H., Chang H.W., Lee I.S., Kim C.H
(2007), “Polygonum cuspidatum, compared with Baicalin and Berbrine,
inhibits inducible Nitric Oxide Synthase and Cyclooxygenase-2 Gene
Expression in RAW 264.7 macrophages”, Vascular Pharmacology, 47,
99-107
Trang 678
23 Liang Z., Chen H., Yu Z., Zhao Z (2010), “Comparison of raw and processed
Radix Polygoni Multiflori (Heshouwu) by high performance liquid
chromatography and mass spectrometry”, Liang et al Chinese Medicine, 5
(29)
24 Liang Z., Leung N.N., Chen H and Zhao Z (2012), “Quality evaluation of
various commercial specifications of Polygoni Multiflori Radix and its dregs
by determination of active compounds”, Liang et al Chemistry Central
Journal, 6 (53)
25 Lin S et al (2011), “Antiproliferative and antimetastatic effects of emodin on
human pancreatic cancer”, Oncology Reports, 26 (1), 81–89
26 Lloyd R Snyder, Joseph J Kirkland and John W.Dolan (2010), “Introduction to
Modern Liquid Chromatography”, Third Edition A John Wiley & Sons Inc.,
Chap 4
27 Michael W.Dong (2006), “Modern HPLC for Practicing Scientists”, A John
Wiley & Sons, Inc., Publication, 20 – 25
28 Pharmacopoeia of the People’s Republic of China (2010), pp 348 – 349
29 Sun Y et al (2008), “Chemosensitization by emodin, a plant-derived anti-cancer
agent: mechanism of action”, Cancer Biology & Therapy, 7 (3), 476–478
30 Xu Y.L., Qi Dong, Hu F.Z (2009), “Simultaneous quantitative determination of
eight active components in Polygonum multiflorum Thunb by RP-HPLC”,
Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences, 18, 358 – 361
31 Yu J., Xie J., Mao X.J., Wei H., Zhao S.L., Ma Y.G., Li N., Zhao R.H (2012),
“Comparison of laxative and antioxidant activities of raw, processed and
fermented Polygoni Multiflori Radix”, Chinese Journal of Natural Medicines,
10 (1), 0063-0067
32 Zhu Z.W., Li J., Gao X.M., Kang L.Y., Hu L.M., Zhang B.L., Chang Y.X (2012), “Simultaneous determination of stilbenes, phenolic acids, flavonoids
and anthraquinones in Radix polygoni multiflori by LC–MS/MS”, Journal of
Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 62, 162– 166
Trang 779
33 Wang M., Zhao R., Wang W., Mao X., Yu J (2012), “Lipid regulation effects
of Polygoni Multiflori Radix, its processed products and its major substances
on steatosis human liver cell line L02”, Journal of Ethnopharmacology, 139,
287– 293