xác ðịnh hàm lượng một số parabens trong thực phẩm và mỹ phẩm bằng sắc ký lỏng hiệu năng cao (hplc)

Báo cáo môn học Phương pháp phân tích dư lượng độc tố trong sản phẩm nông nghiệp Đề tài XÁC ÐỊNH HÀM LƯỢNG MỘT SỐ PARABENS TRONG THỰC PHẨM VÀ MỸ PHẨM BẰNG SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO HPLC

Báo cáo môn học Phương pháp phân tích dư lượng độc tố trong sản phẩm nông nghiệp

Đề tài

XÁC ÐỊNH HÀM LƯỢNG MỘT SỐ PARABENS

TRONG THỰC PHẨM VÀ MỸ PHẨM BẰNG SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO (HPLC)

Đặt Vấn Đề

chất bảo quản hóa học

sử dụng phổ biến và lâu đời

tính chất kháng khuẩn và kháng nấm

hạn chế sự phân hủy của các hoạt chất

Có liên quan nhất định đến bệnh ung thu vú

có thể gây dị ứng da

làm thúc đẩy quá trình lão hóa da

5 parabens đã bị cấm sử dụng ở Việt Nam

Mặt tích cực Mặt tiêu cực

Với yêu cầu thực tế hiện nay, việc kiểm soát các chất bảo quản parabens là rất cần thiết

ĐẶT VẤN ĐỀ

Chất bảo quản là những hóa chất tự nhiên hay tổng hợp được thêm vào thực

phẩm, dược phẩm, các mẫu phẩm sinh học, v.v để ngăn ngừa hoặc làm chậm lại sự

thối rữa, hư hỏng gây ra bởi sự phát triển của các vi sinh vật, hay các thay đổi không

mong muốn về mặt hóa học của sản phẩm Parabens là tên gọi chung của nhóm chất bảo quản hóa học như thế.

Tiến hành khảo sát các điều kiện HPLC thích hợp để định tính, định lượng 7 chất parabens:

pentylparaben

Paraben là gì?

Về mặt hóa học, parabens là một loạt các este của axit parahydroxybenzoic hay còn được gọi là acid

4-hydroxybenzoic

Este alkyl acid p-hydroxybenzoic còn được gọi là parabens được sử dụng rộng rãi làm chất bảo quản trong các duợc phẩm từ giữa những năm

1920 và được sử dụng rộng rãi trong thực phẩm và mỹ phẩm một thời gian ngắn sau đó

Một số parabens được tìm thấy trong tự nhiên, Trong tự nhiên, Parabens có nguồn gốc từ thực vật Nó được sản sinh từ p-hydroxybenzoic acid lấy từ quả mâm xôi (raspberry) và mâm xôi đen (blackberry) Tuy nhiên tất cả các parabens được sử dụng thương mại đều được sản xuất   tổng hợp Chúng được sản xuất bằng phản ứng este hóa của para-hydroxybenzoic acid và rượu thích hợp

Tính chất vật lý của các parabens

• Ở điều kiện bình thường, 7 parabens nghiên cứu đều là những tinh thể màu trắng

• Methylparaben (MeP), propylparaben (PrP), isopropylparaben(Iso-PrP) tan tốt trong nước, các parabens còn lại khó tan trong nuớc, tan tốt trong dung môi hữu cơ (methanol, ethanol) Nguyên nhân là do theo chiều khối lượng phân tử tăng lên, độ phân cực của các parabens giảm xuống

Phương pháp nghiên cứu

• Xây dựng và chuẩn hóa phương pháp định lượng 7 parabens nêu trên bằng phương pháp sắc ký lỏng kết hợp đầu dò khối phổ ( UPLC-MS/MS )

• Ứng dụng để xác định hàm lượng parabens trên các loại sản phẩm:

mỹ phẩm sử dụng ngoài da: sữa rửa mặt, kem dưỡng da, khăn ướt…

các mẫu thực phẩm chức năng dạng siro, viên nang cứng, viên nang mềm…

Ðại cương về phương pháp sắc ký lỏng

Sắc ký lỏng là quá trình tách xảy ra trên cột tách với pha tĩnh là chất rắn hoặc chất lỏng và pha động là chất lỏng (sắc ký lỏng - rắn, lỏng - lỏng) Mẫu phân tích được chuyển lên cột tách duới dạng dung dịch Khi tiến hành chạy sắc ký, các chất phân tích được phân bố liên tục giữa pha động và pha tĩnh Trong hỗn hợp các chất phân tích, do cấu trúc phân tử và tính chất lí hoá của các chất khác nhau, nên khả năng tương tác của chúng với pha tĩnh và pha động khác nhau, chúng di chuyển với tốc độ khác nhau và tách ra khỏi nhau

Các parabens được tách ra khỏi nền mẫu bằng phương pháp chiết có hỗ trợ vi sóng

Pha dung dịch chuẩn 7 chất parabens trên và bảo quản lạnh

ở 4 ˚C Xác định các thông số cho detector khối phổ

Khảo sát điều kiện đo sắc ký

Tiến hành chạy sắc ký

Các bước tến hành nghiên cứu

Khảo sát điều kiện chiết mẫu:

Đối với các phương pháp sắc ký, nền mẫu và quy trình xử lý mẫu có ảnh hưởng lớn đến kết quả, các giá trị LOD, LOQ của phương pháp, đặc biệt là với các đối tượng mẫu phức tạp như sữa tắm, sữa rửa mặt… Cần xây dựng quy trình xử lý phù hợp:

4

Khảo sát loại dung môi chiết

1

2

3

Khảo sát thành phần dung môi chiết

Khảo sát thời gian rung siêu âm

Khảo sát nhiệt độ rung siêu âm

• Một số nghiên cứu khác về Parabens

• Các tác giả Usama A., Shu Ping Wang, Labat L , Kreuz D.M và Saad B , Chao Han, Ye X., Cristina Moreta , Nieto A , Alcudia Leon M.C đã khảo sát các điều kiện thí nghiệm khác nhau để tiến hành các phương pháp khác nhau như : điện di mao quản (CE), sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) ghép nối detector UV-VIS, sắc ký lỏng khối phổ (LC – MS/MS), sắc ký khí khối phổ (GC-MS) để phân tích định tính & định lượng các hợp

Parabens trong các đối tượng khác nhau như thực phẩm, mỹ phẩm, trong nước, trong dịch huyền phù…

GC-MS

LC-MS/MS

HPLC ghép nối detector UV-VIS

CE

• Tài liệu tham khảo: Luận văn : “ XÁC ÐỊNH HÀM LƯỢNG PARABENS TRONG THỰC PHẨM VÀ MỸ PHẨM BẰNG SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO (HPLC)” của tác giả Lê Thị Xuân ( Đại học khoa học tự nhiên Hà Nội)