Nghiên cứu định lượng đồng phân atenolol trong chế phẩm bằng sắc ký lỏng hiệu năng cao

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI NGUYỄN THỊ THU HIỀN NGHIÊN CỨU ĐỊNH LƯỢNG ĐỒNG PHÂN ATENOLOL TRONG CHẾ PHẨM BẰNG SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC HÀ NỘI 2012 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI NGUYỄN THỊ THU HIỀN NGHIÊN CỨU ĐỊNH LƯỢNG ĐỒNG PHÂN ATENOLOL TRONG CHẾ PHẨM BẰNG SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC CHUYÊN NGÀNH KIỂM NGHIỆM THUỐC - ĐỘC CHẤT MÃ SỐ 60 73 15 Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Nguyễn Thị Kiều Anh ThS Tạ Mạnh Hùng HÀ NỘI 2012 LỜI CẢM ƠN Trong trình thực đề tài luận văn này, nhận hướng dẫn giúp đỡ tận tình mặt từ thầy cơ, bạn bè Nhân dịp này, tơi xin bày tỏ lòng kính trọng biết ơn sâu sắc tới : PGS.TS Nguyễn Thị Kiều Anh ThS Tạ Mạnh Hùng Là người thầy dành cho giúp đỡ quý báu Tơi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc giúp đỡ nhiệt tình Thầy giáo, anh chị kỹ thuật viên Phòng thí nghiệm trung tâm – Đại học Dược Hà Nội trung tâm tương đương sinh học – Viện kiểm nghiệm thuốc Trung Ương, thầy cô Ban giám hiệu, Phòng đào tào tồn thể thầy cơ, cán trường đại học Dược Hà Nội tạo điều kiện giúp đỡ tơi hồn thành luận văn Tơi xin cảm ơn gia đình bạn bè động viên, hỗ trợ tơi suốt q trình học tập thực luận văn Hà Nội, tháng 09 năm 2012 Học viên Nguyễn Thị Thu Hiền MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN DANH MỤC CHỮ CÁI VIẾT TẮT, BẢNG BIỂU, HÌNH VẼ, SƠ ĐỒ ĐẶT VẤN ĐỀ PHẦN 1.TỔNG QUAN 1.1.VÀI NÉT VỀ ATENOLOL 1.1.1 Công thức cấu tạo tính chất vật lý 1.1.2 Tác dụng dược lý atenolol 1.1.3 Phương pháp định tính, định lượng atenolol chế phẩm 1.1.3.1 Định tính 1.1.3.2 Định lượng 1.2 VÀI NÉT VỀ SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO 1.2.1 Khái niệm 1.2.2 Nguyên tắc trình sắc ký 1.2.3 Cấu tạo máy HPLC 1.2.4 Các thơng số đặc trưng q trình sắc ký 1.2.5 Ứng dụng HPLC 1.2.5.1 Định tính 1.2.5.2 Định lượng……………………………………………………………… 1.3 TÁCH, PHÂN TÍCH ĐỒNG PHÂN QUANG HỌC BẰNG PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ VÀ ĐIỆN DI MAO QUẢN 11 1.3.1 Đồng phân quang học 11 1.3.2 Tác nhân chọn lọc hoạt quang 11 1.3.3 Một số ứng dụng phân tích đồng phân quang học HPLC 14 1.3.4 Ứng dụng CE phân tích đồng phân quang học 16 1.4 MỘT SỐ NGHIÊN CỨU PHÂN TÍCH ĐỒNG PHÂN QUANG HỌC CỦA ATENOLOL 16 1.4.1 Phương pháp HPLC 16 1.4.2 Phương pháp CE 17 PHẦN ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 18 2.1 NGUYÊN VẬT LIỆU, THIẾT BỊ 18 2.1.1 Hóa chất 18 2.1.2 Dụng cụ, thiết bị 18 2.1.3 Đối tượng nghiên cứu 19 2.2 NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 19 2.2.1 Khảo sát lựa chọn điều kiện phân tích 19 2.2.2 Thẩm định phương pháp phân tích 20 2.2.3 Ứng dụng 22 2.3 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 22 2.3.1 Khảo sát điều kiện sắc ký 22 2.3.1.1 Các yếu tố ảnh hưởng cần khảo sát 22 2.3.1.2 Xác định điều kiện tách đồng phân quang học atenolol 24 2.3.1.3 Xử lý mẫu nghiên cứu 24 2.3.2 Thẩm định phương pháp phân tích 25 2.3.2.1 Độ phù hợp hệ thống 25 2.3.2.2 Tính chọn lọc 25 2.3.2.3 Khoảng nồng độ tuyến tính 25 2.3.2.4 Độ xác phương pháp 26 2.3.2.5 Độ phương pháp 26 2.3.3 Định lượng đồng thời đồng phân quang học (R), (S)-atenolol mẫu thử 26 2.3.4 Xử lý thống kê 26 PHẦN KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 27 3.1.1 Khảo sát điều kiện sắc ký với cột Ultron ES-OVM 27 3.1.2 Khảo sát điều kiện sắc ký với cột Chiralcel AGP 29 3.1.3 Khảo sát điều kiện sắc ký với cột Astec cyclobond I 2000 33 3.1.4 Khảo sát điều kiện sắc ký với cột Chirex 3022 36 3.1.4.1 Lựa chọn thành phần, tỷ lệ pha động 36 3.1.4.2 Khảo sát lựa chọn tốc độ dòng 41 3.1.4.3 Khảo sát lựa chọn nồng độ chất phân tích thể tích tiêm mẫu 41 3.1.4.4 Xác định bước sóng phân tích 41 3.1.5 Lựa chọn điều kiện sắc ký 42 3.2 Thẩm định phương pháp phân tích 42 3.2.1 Xác định hàm lượng (R)- (S)-atenolol chuẩn atenolol racemic 42 3.2.2 Độ phù hợp hệ thống sắc ký 43 3.2.3 Tính chọn lọc-đặc hiệu 45 3.2.4 Khoảng nồng độ tuyến tính 48 3.2.5 Độ lặp lại tái lặp 50 3.2.6 Độ 53 3.3 Ứng dụng định lượng đồng phân quang học atenolol chế phẩm 56 Phần BÀN LUẬN 57 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 60 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT CE (capillary electrophoresis) Điện di mao quản HPLC (high performance liquid chromatography) Sắc ký lỏng hiệu cao CSP (Chiral stationary phase) α1-AGP Pha tĩnh chọn lọc hoạt quang α1-acid glycoprotein HSA (Human serum albumin) Albumin huyết người BSA (Bovine serum albumin) Albumin huyết bò CD Cyclodextrin SĐK Số đăng ký STT Số thứ tự S Diện tích pic PĐ Pha động DAD (diode array detector) Detector mảng diod LC/MS (liquid chromatography/mass Sắc ký lỏng khối phổ spectrometry) TLC (thin layer chromatography) Sắc ký lớp mỏng SFC (super – critical fluid chromatograyphy) Sắc ký lỏng siêu tới hạn GC (Gas chromatography) Sắc ký khí TT Thuốc thử KLTB Khối lượng trung bình KL Khối lượng MeCN Acetonitril DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ Hình 1.1 1.2 Nội dung Công thức cấu tạo atenolol Đồ thị biểu diễn mối tương quan diện tích pic nồng độ Trang 10 Mơ hình tương tác ba điểm Sắc ký đồ mẫu chuẩn atenolol sử dụng cột Ultron ES – OVM với PĐ 1.1 Sắc ký đồ mẫu chuẩn atenolol sử dụng cột Ultron ES – OVM với PĐ 1.2 12 28 Sắc ký đồ mẫu chuẩn atenolol sử dụng cột Ultron ES – OVM với PĐ 1.3 Sắc ký đồ mẫu chuẩn atenolol sử dụng cột Ultron ESOVM với PĐ 1.4 28 Sắc ký đồ mẫu chuẩn atenolol sử dụng cột Chiral AGP với PĐ 2.1 Sắc ký đồ mẫu chuẩn atenolol sử dụng cột Chiral AGP với PĐ 2.2 Sắc ký đồ mẫu chuẩn atenolol sử dụng cột Chiral AGP với PĐ 2.3 Sắc ký đồ mẫu chuẩn atenolol sử dụng cột Chiral AGP với PĐ 2.4 30 3.9 Sắc ký đồ mẫu chuẩn atenolol sử dụng cột Chiral AGP với PĐ 2.5 32 3.10 Sắc ký đồ mẫu chuẩn atenolol sử dụng cột Astec cyclobond I 2000 với PĐ 3.1 Sắc ký đồ mẫu chuẩn atenolol sử dụng cột Astec cyclobond I 2000 với PĐ 3.2 Sắc ký đồ mẫu chuẩn atenolol sử dụng cột Astec cyclobond I 2000 với PĐ 3.3 35 Sắc ký đồ mẫu chuẩn atenolol sử dụng cột Chirex 3022 với PĐ 4.1 Sắc ký đồ mẫu chuẩn atenolol sử dụng cột Chirex 3022 37 1.3 3.1 3.2 3.3 3.4 3.5 3.6 3.7 3.8 3.11 3.12 3.13 3.14 28 29 31 31 32 35 36 38 với PĐ 4.2 3.15 3.16 3.17 3.18 3.19 3.20 3.21 3.23 Sắc ký đồ mẫu chuẩn atenolol sử dụng cột Chirex 3022 với PĐ 4.3 Sắc ký đồ mẫu chuẩn atenolol sử dụng cột Chirex 3022 với PĐ 4.4 38 Sắc ký đồ mẫu chuẩn atenolol sử dụng cột Chirex 3022 với PĐ 4.5 Sắc ký đồ mẫu chuẩn atenolol sử dụng cột Chirex 3022 với PĐ 4.6 Sắc ký đồ đánh giá tính chọn lọc –đặc hiệu phương pháp 39 Kết chồng phổ UV pic sắc ký đồ mẫu chuẩn atenolol racemic Đồ thị biểu diễn tương quan diện tích pic nồng độ (S)-atenolol Đồ thị biểu diễn tương quan diện tích pic nồng độ (R)-atenolol 47 39 40 46 49 49 DANH MỤC CÁC BẢNG BIỂU Bảng Nội dung Trang 3.1 Kết sắc ký mẫu chuẩn racemic chuẩn đơn thành phần 43 3.2 Kết hàm lượng (R)- (S)-atenolol chuẩn racemic 43 (µg/mg) 3.3 Kết đánh giá độ phù hợp hệ thống sắc ký 44 3.4 Nồng độ diện tích pic tương ứng (S)-atenolol (R)- 48 atenolol 3.5 Kết định lượng (R)-atenolol (S)-atenolol (trong 51 ngày) 3.6 Kết định lượng (R)-atenolol (S)-atenolol (khác 52 ngày) 3.7 Kết đánh giá thống kê độ lặp lại phương pháp phân 53 tích 3.8 Kết định lượng (S)-atenolol (R)-atenolol thẩm định 54 độ 3.9 Kết khảo sát độ với (S)-atenolol 54 3.10 Kết khảo sát độ với (R)-atenolol 55 3.11 Kết định tính, định lượng atenolol số thuốc thị trường 56 Tiến hành sắc ký theo điều kiện chọn trên, tìm độ thu hồi chất chuẩn Kết xác định độ phương pháp S-atenolol R-atenolol trình bày bảng 3.9 3.10 Bảng 3.8 Kết định lượng (S)-atenolol (R)-atenolol thẩm định độ KL cân (mg) (S)-atenolol 52,1 (R)-atenolol Nồng độ Diện tích pic Nồng độ Diện tích pic (µg/mL) (mAU.s) (µg/mL) (mAU.s) 25,358 1822,371 26,706 1925,734 Trung bình 1815,553 1923,810 1831,782 1919,725 1823,235 1923,090 Bảng 3.9 Kết khảo sát độ với (S)-atenolol Khối lượng Nồng độ (S)- Diện tích pic Lượng (S)- atenolol (S)-atenolol atenolol (µg) vào (mg) (µg/mL) (mAU.s) tìm lại 40,2 19,566 1386,809 19,288 98,6 41,5 20,199 1443,685 20,079 99,4 41,1 20,004 1439,905 20,027 100,1 50,6 24,628 1764,902 24,547 99,7 52,9 25,748 1833,735 25,504 99,1 49,5 24,093 1735,933 24,144 100,2 61,4 29,885 2169,625 30,176 101,0 59,8 29,106 2059,085 28,639 98,4 62,6 30,469 2215,920 30,820 101,2 STT chuẩn thêm Trung bình 54 % tìm lại 99,7 RSD % 0,98 Bảng 3.10 Kết khảo sát độ với (R)-atenolol Khối lượng Nồng độ (R)- Diện tích pic Lượng (R)- atenolol (R)-atenolol atenolol (µg) vào (mg) (µg/mL) (mAU.s) tìm lại 40,2 20,606 1470,118 20,416 99,1 41,5 21,273 1520,525 21,116 99,3 41,1 21,068 1509,920 20,969 99,5 50,6 25,937 1833,792 25,466 98,2 52,9 27,116 1915,891 26,606 98,1 49,5 25,374 1842,834 25,592 100,9 61,4 31,473 2262,837 31,424 99,8 59,8 30,653 2172,737 30,173 98,4 62,6 32,089 2294,845 31,869 99,3 STT chuẩn thêm % tìm lại Trung bình 99,2 RSD % 0,88 Nhận xét: Kết cho thấy phương pháp có độ cao với tỉ lệ tìm lại từ 98,1% đến 101,0% đáp ứng yêu cầu độ phương pháp Nhận xét chung: Phương pháp thẩm định có tính đặc hiệu, độ đúng, độ xác cao khoảng nồng độ tuyến tính với hệ số tương quan r 0,9998 đáp ứng yêu cầu thẩm định phương pháp phân tích Các pic (S) – atenolol (R) – atenolol tách rời với Rs >2 Phương pháp ứng dụng để định tính định lượng đồng thời đồng phân atenolol chế phẩm thuốc 3.3 Ứng dụng định lượng đồng phân quang học atenolol chế phẩm 55 Bằng phương pháp xây dựng trên, tiến hành định tính định lượng đồng phân atenolol số chế phẩm thuốc lưu hành thị trường dạng thuốc viên nén Chuẩn bị mẫu: - Mẫu chuẩn: Dung dịch chuẩn atenolol racemic có nồng độ khoàng 0,05 mg/ml - Mẫu thử: Từ chế phẩm viên nén thị trường, pha mẫu thử có nồng độ atenolol tương đương mẫu chuẩn Tiến hành sắc ký mẫu theo điều kiện lựa chọn Mỗi mẫu thử tiến hành lần, lấy kết trung bình Kết trình bày bảng 3.11 Bảng 3.11 Kết định tính, định lượng atenolol số thuốc thị trường Hàm lượng (mg/viên) % so STT Chế phẩm Thành phần Atenolol Atenolol racemic, Stada 50 50 mg Tenormin 50 Atenolol racemic, với (S)-atenolol (R)-atenolol 24,30 ± 0,27 25,02 ± 0,32 98,6 24,87 ± 0,20 25,42 ± 0,26 100,6 23,50 ± 0,33 24,06 ± 0,25 95,1 23,00 ± 0,32 22,96 ± 0,36 91,9 nhãn 50 mg Tenorca 50 Atenolol racemic, 50 mg Teginol 50 Atenolol racemic, 50 mg Kết bảng 3.8 cho thấy thuốc đem định lượng đạt yêu cầu hàm lượng (90% - 110%) chứa atenolol dạng racemic 56 PHẦN BÀN LUẬN Về phương pháp sử dụng HPLC Trong phân tích, CE HPLC phương pháp thường sử dụng để tách đồng phân quang học Trên giới có số nghiên cứu tách đồng phân atenolol như: tách đồng phân atenolol điện di mao quản dùng chất chọn lọc carboxymethyl-β-cyclodextrin [25], HPLC detector UV dùng chất chọn lọc 2,3,4,6tetra-O-acetyl-b-D-glycopyranosyl isothiocyanate [15], HPLC detector UV dùng cột sắc ký hoạt quang Chiracel OD (250 x 4.6 mm, 10 µm) [16], HPLC detector UV dùng cột sắc ký hoạt quang Chiracel AGP (150 x 4.0 mm, µm) [11]… Sử dụng thiết bị CE chưa thơng dụng sở kiểm nghiệm Việt Nam Vì chúng tơi lựa chọn phương pháp có tính khả thi cao, ứng dụng rộng rãi thực tế kiểm nghiệm Việt Nam phương pháp sử dụng HPLC detetor UV với cột sắc ký hoạt quang Trong phương pháp sử dụng HPLC, sử dụng chất chọn lọc đồng phân cho vào pha động tạo dẫn xuất không đối quang với chất phân tích, nhiên phương pháp khơng ổn định, khó tìm chất chọn lọc đồng phân thích hợp Phương pháp dùng cột pha tĩnh gắn chất chọn lọc đối quang để tách hỗn hợp racemic mà nghiên cứu vừa đơn giản lại hiệu quả, thuận tiện phân tích nhiều chế phẩm chứa atenolol Trong nghiên cứu trước có khảo sát việc sử dụng số cột sắc ký hoạt quang [11],[16], nhiên dựa thực tế hóa chất thiết bị phòng thí nghiệm nên chúng tơi tiến hành khảo sát thêm số cột sắc ký khác để có sở dễ dàng việc chọn lựa loại cột phân tích tiến hành Chúng tơi lựa chọn cột sắc ký hoạt quang khác để tiến hành nghiên cứu tồn diện từ xây dựng quy trình phân tích, thẩm định phương pháp ứng dụng thực tế với đối tượng mẫu khác Về việc lựa chọn điều kiện phân tích Dựa vào tài liệu tham khảo, thực tế hóa chất-máy móc thiết bị sở, nguyên tắc để lựa chọn cột sắc ký chọn lọc hoạt quang thành phần pha 57 động chọn phương pháp định lượng đồng phân atenolol có tính khả thi cao, hiệu nhanh chóng Về điều kiện sắc ký mà chúng tơi sử dụng q trình nghiên cứu :  Cột sắc ký: Chúng khảo sát số cột sắc ký hoạt quang nghiên cứu trước Chiracel AGP số cột sắc ký hoạt quang khác : cột Ultron ES-OVM, cột Astec cyclobond I 2000, cột Chirex 3022 Kết khảo sát cho thấy sử dụng cột Chirex 3022 để tách định lượng đồng phân quang học atenolol  Pha động: Lựa chọn từ nhiều hệ pha động có thành phần, tỉ lệ khác nhau, chúng tơi tìm hệ pha động thích hợp cho phân tích với cột Chirex 3022 Hexan:1,2dicloromethan:methanol: acid trifluoroacetic = 57,5:35:7,5:0,2 (v/v/v/v)  Tốc độ dòng nồng độ chất phân tích: Chúng tơi tiến hành khảo sát tốc độ dòng từ 0,75 đến 1,25 ml/phút chọn tốc độ dòng thích hợp ml/phút cho thời gian phân tích vừa đủ (khoảng 17 phút) Nồng độ chất phân tích khảo sát 0,05 mg/ml Về thẩm định phương pháp phân tích Chúng tơi tiến hành thẩm định tiêu tính chọn lọc, độ đúng, độ xác, khoảng tuyến tính, kết đạt theo quy định; so với nghiên cứu trước, tiêu khoảng tuyến tính có hệ số tương quan tương đồng (0,9998) [11]; độ xác ngày khác ngày có RSD (với (S)-atenolol) 1,32 % 0,88 % thấp so với nghiên cứu trước (2,53% 0,93% [11]) Trong thẩm định phương pháp phân tích, khơng tiến hành thẩm định tiêu LOD LOQ phương pháp dùng để định tính định lượng chế phẩm có lượng hoạt chất lớn (viên nén chứa atenolol 50mg, 100mg) Trong thẩm định tính chọn lọc, chúng tơi tiến hành tự tạo mẫu giả dược theo công thức nhà sản xuất cung cấp để đánh giá tính đặc hiệu – chọn lọc độ phương pháp phân tích Về ứng dụng phương pháp 58 Các thành phẩm chứa đơn đồng phân atenolol có mặt thị trường nước ngồi có số đăng ký Việt Nam Tiêu chuẩn kiểm nghiệm chế phẩm mà nhà sản xuất đưa đăng ký, chấp nhận chưa thực thuận tiện thực tế sản xuất với quy mô công nghiệp, phải chiết tách lấy lượng hoạt chất lớn để định tính phương pháp riêng lẻ đo góc quay cực riêng, quang phổ tử ngoại hồng ngoại … định lượng lại tiến hành phép thử khác Phương pháp mà đưa giúp định tính định lượng đồng thời đơn đồng phân atenolol cách đơn giản, nhanh chóng, hiệu chi phí khơng cao Dựa vào khả tách đồng phân đối quang atenolol, phương pháp sử dụng việc phát thuốc atenolol đơn thành phần giả với thành phần thực tế hỗn hợp racemic atenolol Phương pháp đóng góp phần vào cơng tác kiểm tra chất lượng thuốc hệ thống kiểm nghiệm, phù hợp xu hướng hội nhập phát triển chung ngành Dược giới 59 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ KẾT LUẬN Qua trình thực đề tài, đưa số kết luận: (1) Đã xây dựng phương pháp tách đồng phân đối quang atenolol nhằm định tính định lượng đồng thời đồng phân quang học R,S-atenolol, cụ thể là: - Đã xây dựng điều kiện sắc ký sau: + Pha động: Hexan:1,2 dicloromethan:methanol: acid trifluoroacetic tỷ lệ 57,5:35:7,5:0,2 (v/v/v/v) + Cột Chirex 3022 ((S)-ICA and (R)-NEA ((S)-indoline-2-carboxylic acid and (R)-1-(α-naphtyl)ethylamine)) kích thước 4,0 x 250 mm; 5µm + Tốc độ dòng: ml/phút + Bước sóng: 229 nm + Thể tích tiêm mẫu: 20 µl + Nồng độ chất phân tích: 0,05mg/ml (racemic) Với điều kiện sắc ký tương đối đơn giản, dễ dàng triển khai đơn vị kiểm nghiệm thuốc, đồng phân atenolol tách khỏi thành phần khác với thời gian lưu khoảng 15 17 phút - Đã tiến hành thẩm định phương pháp phân tích cho kết đáp ứng qui định với: + Độ thích hợp hệ thống đạt yêu cầu thẩm định phương pháp phân tích đồng phân đối quang với hệ số phân giải đồng phân cao (Rs > 2) + Tính chọn lọc cao, có khả tách rời (S)-atenolol khỏi đối quang (R)atenolol + Có mối tương quan tuyến tính chặt chẽ diện tích pic nồng độ đồng phân quang học atenolol khoảng nồng độ khảo sát từ 0,01 đến 0,5 mg/ml, với hệ số tương quan r > 0,999 (đối với đồng phân R, SAtenolol) + Độ xác (độ lặp lại ngày, khác ngày) đạt yêu cầu với RSD 98,0 đến < 101,0% (2) Đã sử dụng phương pháp xây dựng để định tính, định lượng đồng phân atenolol số chế phẩm thuốc viên nén lưu hành thị trường cho kết định lượng tương đồng với hàm lượng công bố sản phẩm Đồng thời phương pháp tách riêng hai đồng phân atenolol cho phép phân biệt chế phẩm chứa atenolol racemic hay chế phẩm chứa đơn đồng phân atenolol ĐỀ XUẤT - Áp dụng phương pháp để định tính, định lượng đồng phân quang học atenolol nguyên liệu, chế phẩm (dung dịch tiêm, viên nén, bột đông khô…) nhằm kiểm soát chất lượng thuốc lưu hành Việt Nam đặc biệt giúp xác định rõ chế phẩm chứa atenolol dạng racemic hay đơn thành phần - Là sở để Hội đồng Dược Điển cân nhắc việc đưa phương pháp định tính định lượng đồng thời đồng phân quang học atenolol vào chuyên luận atenolol Dược Điển Việt Nam năm tới 61 TÀI LIỆU THAM KHẢO TÀI LIỆU TIẾNG VIỆT Bộ Y tế (2009), Dược điển Việt Nam IV, NXB Y học Bộ Y tế (2009), Dược thư Quốc gia Việt Nam, Nhà xuất Y học Bộ Y tế (2007), Hóa hữu tập I, NXB Y học, tr 56-66 Phan Thị Đào Hạnh (2011), Nghiên cứu phương pháp phân tích đồng phân đối quang amodipin HPLC, Khóa luận tốt nghiệp dược sĩ, Trường đại học Dược Hà Nội Quách Ngọc Luyến (2011), Xây dựng phương pháp phân tích đồng phân đối quang ofloxacin sắc ký lỏng hiệu cao, Luận văn thạc sĩ dược học, Trường đại học Dược Hà Nội TÀI LIỆU TIẾNG ANH Astec (2002), Cyclobond Handbook, sixth edition, Advanced Separation Technologies, Inc Agilent Technologies (2008), Ultron ES-OVM :Datasheet Agilent Technologies (2008), Ultron ES-OVM : Method development Protocol Bhaskara B.L., et al (2011), “A facile and Rapid HPLC Method for the Determination of Atenolol in Pharmaceutical Formulations”, Asian Journal of Applied Sciences, Vol (3), pp 306-313 10 Chrom Tech (2007), Separation of chiral compounds on Chiral–AGP, ChiralHSA, Chiral-CBH, second edition 11 Eaga M.C, et al (2010), “New chiral reverse phase HPLC method for determination of atenolol enantiomers in pharmaceutical formulations”, International Journal of Pharmaceutical Sciences Review and Research, Vol.4 (1), pp 22-26 12 Internaional Conference on Harmonisation (1996), Validation of Analytical Procedures Methodology 13 Huber L (2007), Validation and Qualification in Analytical Laboratories, second edition, Informa Healthcare USA, Inc 14 McCoy R (1994), “Pharmacodynamics of racemic and S(-)-atenolol in humans”, Journal of Clinical Pharmacology, Vol 34 (8), pp.816-822 15 Li X., et al (2000), “Reversed-phase high-performance liquid chromatographic analysis of atenolol enantiomers in rat hepatic microsome after chiral derivatization with 2,3,4,6-tetra-O-acetyl-b-D-glycopyranosyl isothiocyanate”, J Chromatogr B,Vol 742, pp 433 –439 16.Santoro M.I, Cho H.S (2000), “Enantiomeric separation and quantitative determination of atenolol in tablets by chiral high-performance liquid chromatography”, Drug development industrial pharmacy, Vol 26(10), pp 1107-1110 17 Sigma-Aldrich Biotechnology (2011), Astec Cylobond : Bonded Cyclodextrinbased Chiral HPLC Phases, USA 18 Sigma-Aldrich Biotechnology (2011), Operating Guidelines for ChromTech CHIRAL-AGP, CHIRAL-HSA, and CHIRAL-CBH HPLC Columns, USA 19 Stoschitzky K., et al (1998), “Racemic beta-blockers – fixed combinations of different drugs”, Journal of Clinical and Basic Cardiology, Vol 1(1), pp 15-19 20 Stoschitzky K., et al (1993), “Stereoselective features of (R)- and (S)-atenolol: Clinical pharmacological, pharmacokinetic, and radioligand binding studies”, Chirality, Vol 5(1), pp 15–19 21 Subramanian G (2001), Chiral separation techniques : A practical approach second, completely revised and updated edition, WILEY-VCH, Germany 22 Phenomenex (2011), Chirex chiral Columns 23 Phenomenex (2011), HPLC appication, ID No 13824 25 Wei Y., Lin X (2005), “Chiral Separation of Some β-blockers Using Electrophoresis with Dual Cyclodextrin Systems”, Canadian Journal of Analytical Sciences and Spectroscopy, Vol 50(3), pp 135-140 PHỤ LỤC Phụ lục : Sắc ký đồ mẫu thử từ chế phẩm atenolol Stada 50 Phụ lục : Sắc ký đồ mẫu thử từ chế phẩm Tenormin 50 Phụ lục : Sắc ký đồ mẫu thử từ chế phẩm Tenorca 50 Phụ lục : Sắc ký đồ mẫu thử từ chế phẩm Teginol 50 Phụ lục Phụ lục Phụ lục Phụ lục ... tài Nghiên cứu định lượng đồng phân atenolol chế phẩm sắc ký lỏng hiệu cao để thực mục tiêu sau : - Xây dựng thẩm định phương pháp định lượng đồng thời đồng phân quang học atenolol chế phẩm sắc. .. pháp định lượng định lượng atenolol dạng racemic, chưa định tính định lượng đồng thời đồng phân atenolol 1.2 VÀI NÉT VỀ SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO 1.2.1 Khái niệm HPLC kỹ thuật tách, chất phân. .. BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI NGUYỄN THỊ THU HIỀN NGHIÊN CỨU ĐỊNH LƯỢNG ĐỒNG PHÂN ATENOLOL TRONG CHẾ PHẨM BẰNG SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC CHUYÊN NGÀNH KIỂM NGHIỆM