TRÖÔØNG ÑAÏI HOÏC NOÂNG LAÂM TP. HOÀ CHÍ MINH KHOA CHAÊN NUOÂI THUÙ Y LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP SÖÛ DUÏNG KYÕ THUAÄT XEÙT NGHIEÄM PEIA ÑEÅ KHAÛO SAÙT HAØM LÖÔÏNG PROGESTERONE ÔÛ BOØ HAÄU BÒ VAØ BOØ LÖÙA CHAÄM ÑOÄNG DUÏC TAÏI XAÕ LAI UYEÂN VAØ XAÕ LAI HÖNG HUYEÄN BEÁN CAÙT TÆNH BÌNH DÖÔNG Ngaønh : Thuù Y Khoaù : 20012006 Lôùp : Thuù Y 18 Sinh vieân thöïc hieän : LÖU XUAÂN KYØ 2006 TRÖÔØNG ÑAÏI HOÏC NOÂNG LAÂM TP. HOÀ CHÍ MINH KHOA CHAÊN NUOÂI THUÙ Y LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP SÖÛ DUÏNG KYÕ THUAÄT XEÙT NGHIEÄM PEIA ÑEÅ KHAÛO SAÙT HAØM LÖÔÏNG PROGESTERONE ÔÛ BOØ HAÄU BÒ VAØ BOØ LÖÙA CHAÄM ÑOÄNG DUÏC TAÏI XAÕ LAI UYEÂN VAØ XAÕ LAI HÖNG HUYEÄN BEÁN CAÙT TÆNH BÌNH DÖÔNG Giaùo vieân höôùng daãn: Sinh vieân thöïc hieän: TS NGUYEÃN VAÊN THAØNH LÖU XUAÂN KYØ 2006 iii XAÙC NHAÄN CUÛA GIAÙO VIEÂN HÖÔÙNG DAÃN Hoï vaø teân sinh vieân thöïc taäp: LÖU XUAÂN KYØ Teân luaän vaên: “Söû duïng kyõ thuaät xeùt nghieäm PEIA ñeå khaûo saùt haøm löôïng progesterone ôû boø haäu bò vaø boø löùa chaäm ñoäng duïc taïi xaõ Lai Uyeân vaø xaõ Lai Höng huyeän Beán Caùt tænh Bình Döông”. Ñaõ hoaøn thaønh luaän vaên theo yeâu caàu cuûa giaùo vieân höôùng daãn vaø caùc yù kieán nhaän xeùt, ñoùng goùp cuûa hoäi ñoàng chaám luaän vaên toát nghieäp khoa ngaøy ....................... Giaùo vieân höôùng daãn TS. NGUYEÃN VAÊN THAØNH iv LÔØI CAÛM ÔN Kính daâng leân cha meï ngöôøi ñaõ sinh thaønh daïy doã vaø laø ñieåm töïa tinh thaàn cho con. Chaân thaønh caûm ôn Ban Giaùm Hieäu, Ban Chuû Nhieäm Khoa Chaên Nuoâi Thuù Y, cuøng toaøn theå quyù thaày coâ tröôøng Ñaïi Hoïc Noâng Laâm thaønh phoá Hoà Chí Minh ñaõ truyeàn ñaït kieán thöùc quyù baùu cho toâi trong suoát thôøi gian hoïc taäp. Chaân thaønh ghi ôn TS. Nguyeãn Vaên Thaønh ñaõ taän tình höôùng daãn, giuùp ñôõ toâi trong suoát thôøi gian thöïc taäp vaø giuùp toâi hoaøn thaønh luaän vaên toát nghieäp. Xin caûm ôn ban laõnh ñaïo cuøng toaøn theå caùc anh chò ôû phoøng kyõ thuaät Chi Cuïc Thuù Y tænh Bình Döông ñaõ taïo ñieàu kieän thuaän lôïi cho toâi thöïc hieän ñeà taøi. Xin caûm ôn caùc thaày coâ, anh chò trong Khoa Coâng Ngheä Sinh Hoïc tröôøng Ñaïi Hoïc Daân Laäp Bình Döông ñaõ giuùp ñôõ toâi thöïc hieän ñeà taøi. v MUÏC LUÏC Trang PHAÀN I. MÔÛ ÑAÀU ................................................................................................... 1 1.1. ÑAËT VAÁN ÑEÀ ................................................................................................ 1 1.2. MUÏC ÑÍCH YEÂU CAÀU .................................................................................. 2 1.2.1. Muïc ñích ...................................................................................................... 2 1.2.2. Yeâu caàu ........................................................................................................ 2 PHAÀN II. TOÅNG QUAN TAØI LIEÄU ..................................................................... 3 2.1. TÌNH HÌNH CHAÊN NUOÂI, VÒ TRÍ HOÄ CHAÊN NUOÂI BOØ ÔÛ BEÁN CAÙT ..... 3 2.1.1. Vò trí ñòa lyù cuûa huyeän Beán Caùt ................................................................... 3 2.1.2. Ñaëc ñieåm khí haäu huyeän Beán Caùt ............................................................... 3 2.2. BIEÁN ÑOÅI CÔ QUAN SINH DUÏC TRONG MOÄT CHU KYØ ÑOÄNG DUÏC KHI KIEÅM TRA BAÈNG SÔØ NAÉN QUA TRÖÏC TRAØNG VAØ QUA AÂM ÑAÏO .......... 4 2.3. CAÙC COÂNG TRÌNH NGHIEÂN CÖÙU VEÀ ROÁI LOAÏN SINH DUÏC VAØ HAØM LÖÔÏNG PROGESTERONE .................................................................................. 5 2.4. CAÙC YEÁU TOÁ TAÙC ÑOÄNG LEÂN SÖÏ SINH SAÛN BOØ CAÙI ........................... 6 2.4.1. Yeáu toá gioáng boø caùi ..................................................................................... 6 2.4.2. Yeáu toá moâi tröôøng ........................................................................................ 7 2.4.3. Moät soá nguyeân nhaân gaây boø caùi khoâng ñoäng duïc ....................................... 8 2.4.3.1. Toàn hoaøng theå ........................................................................................... 8 2.4.3.2. U nang buoàng tröùng .................................................................................. 9 2.4.3.3. Buoàng tröùng bò teo vaø giaûm cô naêng ........................................................ 10 2.4.3.4. Vieâm töû cung vaø vieâm buoàng tröùng .......................................................... 10 2.5. VAI TROØ CUÛA PROGESTERONE, ESTROGEN VAØ PROSTASGLANDINE ............................................................................................................................... 14 vi 2.5.1. Progesterone ................................................................................................ 14 2.5.1.1. Nguoàn goâùc................................................................................................. 14 2.5.1.2. Baûn chaát vaø caáu truùc phaân töû cuûa progesterone ....................................... 14 2.5.1.3. Vaän chuyeån, chuyeån hoùa vaø taùc duïng cuûa progesterone .......................... 15 2.5.2. Estrogen ....................................................................................................... 16 2.5.3. Prostasglandine ............................................................................................ 17 2.6. KYÕ THUAÄT ELISA ........................................................................................ 17 2.6.1. Elisa tröïc tieáp (Direct ELISA) ..................................................................... 18 2.6.2. ELISA giaùn tieáp (Indirect ELISA) ............................................................... 18 2.6.3. Sandwich ELISA .......................................................................................... 18 2.6.4. Phaûn öùng ELISA caïnh tranh: C ELISA ( Competition ELISA) ................. 19 2.6.5. Caùc yeáu toá aûnh höôûng ñeán ñoä nhaïy cuûa phaûn öùng ELISA .......................... 19 2.6.6. Caùc yeáu toá aûnh höôûng ñeán keát quaû cuûa ELISA ........................................... 19 PHAÀN III. NOÄI DUNG VAØ PHÖÔNG PHAÙP KHAÛO SAÙT ................................ 20 3.1. THÔØI GIAN VAØ ÑÒA ÑIEÅM KHAÛO SAÙT ..................................................... 20 3.2. ÑOÁI TÖÔÏNG KHAÛO SAÙT ............................................................................. 20 3.3. NOÄI DUNG KHAÛO SAÙT ................................................................................ 20 3.4. PHÖÔNG PHAÙP TIEÁN HAØNH....................................................................... 20 3.4.1. Boá trí thí nghieäm .......................................................................................... 20 3.4.1.1. Boá trí khaûo saùt theo nhoùm maùu lai HF ..................................................... 20 3.4.1.2. Boá trí khaûo saùt theo caùc löùa ñeû ................................................................ 21 3.4.1.3. Boá trí khaûo saùt theo töøng nhoùm beänh ....................................................... 21 3.4.2. Khaùm qua tröïc traøng .................................................................................... 22 3.4.2.1. Toàn hoaøng theå ........................................................................................... 22 3.4.2.2. Buoàng tröùng keùm phaùt trieån ..................................................................... 22 3.4.2.3. U nang noaõn .............................................................................................. 22 vii 3.4.3. Laáy maùu vaø ly taâm huyeát thanh .................................................................. 22 3.4.3.1. Caùch laáy maùu ............................................................................................ 22 3.4.3.2. Caùch ly taâm maùu ....................................................................................... 22 3.4.3.3. Caùc chæ tieâu khaûo saùt ................................................................................ 23 3.4.4. Kyõ thuaät PEIA ........................................................................................... 23 3.4.4.1. Nhöõng thaønh phaàn coù trong boä kit ............................................................ 23 3.4.4.2. Nhöõng duïng cuï caàn coù .............................................................................. 24 3.4.4.3. Lôøi khuyeân thaän troïng khi duøng ............................................................... 25 3.4.4.4. Chuaån bò xeùt nghieäm ................................................................................ 25 3.4..4.5. Tieán haønh xeùt nghieäm ............................................................................. 25 3.4.4.6. Tính toaùn keát quaû ..................................................................................... 26 3.5. PHÖÔNG PHAÙT XÖÛ LYÙ SOÁ LIEÄU ............................................................... 26 PHAÀN IV. KEÁT QUAÛ THAÛO LUAÄN ................................................................... 27 4.1. HAØM LÖÔÏNG PROGESTERONE ÔÛ BOØ TOÀN HOAØNG THEÅ, U NANG NOAÕN VAØ BUOÀNG TRÖÙNG KEÙM PHAÙT TRIEÅN .............................................. 27 4.2. HAØM LÖÔÏNG PROGESTERONE ÔÛ BOØ TOÀN HOAØNG THEÅ THEO NHOÙM GIOÁNG LAI ........................................................................................................... 30 4.3. HAØM LÖÔÏNG PROGESTERONE BOØ TOÀN HOAØNG THEÅ THEO LÖÙA ÑEÛ ............................................................................................................................... ............................................................................................................................... 31 4.3.1. Haøm löôïng progesterone ôû boø toàn hoaøng theå giöõa caùc löùa ñeû .................... 32 4.3.2. Haøm löôïng progesterone ôû boø toàn hoaøng theå theo löùa ñeû vaø boø tô 33 4.4. HAØM LÖÔÏNG PROGESTERONE ÔÛ BOØ U NANG NOAÕN THEO NHOÙM GIOÁNG LAI HF ..................................................................................................... 34 4.5. HAØM LÖÔÏNG PROGESTERONE ÔÛ BOØ U NANG NOAÕN THEO LÖÙA ÑEÛ ............................................................................................................................... 35 viii 4.5.1. Haøm löôïng progesterone ôû boø u nang noaõn giöõa caùc löùa ñeû ....................... 35 4.5.2. Haøm löôïng progesterone ôû boø u nang noaõn theo löùa ñeû vaø boø tô ............... 37 4.6. HAØM LÖÔÏNG PROGESTERONE ÔÛ BOØ BUOÀNG TRÖÙNG KEÙM PHAÙT TRIEÅN THEO NHOÙM GIOÁNG LAI HF ................................................................ 38 4.7. HAØM LÖÔÏNG PROGESTERONE ÔÛ BOØ BUOÀNG TRÖÙNG KEÙM PHAÙT TRIEÅN THEO LÖÙA ÑEÛ ......................................................................................... 40 4.7.2. Haøm löôïng progesterone ôû boø buoàng tröùng keùm phaùt trieån theo löùa ñeû vaø boø tô ............................................................................................................................ 41 PHAÀN V. KEÁT LUAÄN VAØ ÑEÀ NGHÒ .................................................................. 43 5.1. KEÁT LUAÄN ..................................................................................................... 43 5.2. ÑEÀ NGHÒ ........................................................................................................ 43 ix DANH SAÙCH CAÙC BAÛNG Trang Baûng 2.1. Soá löôïng boø söõa qua caùc naêm cuûa tænh bình döông ............................... 3 Baûng 2.2. Bieán ñoåi cô quan sinh duïc trong moät chu kyø ñoäng duïc khi kieåm tra baèng sôø naén qua tröïc traøng vaø qua aâm ñaïo .................................................................... 4 Baûng 2.3. Caùc yeáu toá taùc ñoäng leân söï sinh saûn boø caùi........................................... 6 Baûng 3.1. Soá maãu maùu thí nghieäm treân töøng nhoùm gioáng .................................... 21 Baûng 3.2. Soá maãu maùu thí nghieäm theo caùc löùa ñeû .............................................. 21 Baûng 3.3. Soá maãu maùu thí nghieäm theo tình traïng chaäm ñoäng duïc ...................... 21 Baûng 4.1. Haøm löôïng progesterone ôû boø toàn hoaøng theå, u nang noaõn vaø buoàng tröùng keùm phaùt trieån .............................................................................................. 27 Baûng 4.2. Haøm löôïng progesterone ôû boø toàn hoaøng theå theo nhoùm gioáng lai HF 30 Baûng 4.3. Haøm löôïng progesterone ôû boø toàn hoaøng theå giöõa caùc löùa ñeû.............. 32 Baûng 4.4. Haøm löôïng progesterone ôû boø toàn hoaøng theå theo löùa ñeû vaø boø tô 33 Baûng 4.5. Haøm löôïng progesterone ôû boø u nang noaõn theo nhoùm lai HF ............. 34 Baûng 4.6. Haøm löôïng progesterone ôû boø u nang noaõn giöõa caùc löùa ñeû ................ 36 Baûng 4.7. Haøm löôïng progesterone ôû boø u nang noaõn theo löùa ñeû vaø boø tô ......... 37 Baûng 4.8. Haøm löôïng progesterone ôû boø buoàng tröùng keùm phaùt trieån theo nhoùm gioáng lai HF ........................................................................................................... 38 Baûng 4.9. Haøm löôïng progesterone ôû boø buoàng tröùng keùm phaùt trieån giöõa caùc löùa ñeû ........................................................................................................................... 40 Baûng 4.10. Haøm löôïng progesterone ôû boø buoàng tröùng keùm phaùt trieån cuûa boø löùa, boø tô ....................................................................................................................... 41 x DANH SAÙCH CAÙC HÌNH Trang Hình 2.1. Caáu truùc Prostaglandin ........................................................................... 17 Hình 3.1. Laøm phaûn öùng Elisa ............................................................................... 23 Hình 3.2. Ñoïc phaûn öùng Elisa ................................................................................ 23 Hình 3.3. Boä kít PEIA........................................................................................... 24 Hình 3.4. Pippet ..................................................................................................... 25 Hình 3.5. Maùy laéc .................................................................................................. 25 xi DANH SAÙCH CAÙC BIEÅU ÑOÀ Trang Bieåu ñoà 4.1. Haøm löôïng progesterone ôû boø u nang noaõn ...................................... 27 Bieåu ñoà 4.2. Haøm löôïng progesterone ôû boø buoàng tröùng keùm phaùt trieån ............. 28 Bieåu ñoà 4.3. Haøm löôïng progesterone ôû boø toàn hoaøng theå ................................... 29 Bieåu ñoà 4.4. Haøm löôïng progesterone ôû boø toàn hoaøng theå, u nang noaõn vaø buoàng tröùng keùm phaùt trieån ............................................................................................. 30 Bieåu ñoà 4.5. Haøm löôïng progesterone ôû boø toàn hoaøng theå theo nhoùm gioáng lai . 31 Bieåu ñoà 4.6. Haøm löôïng progesterone ôû boø toàn hoaøng theå theo löùa ñeû ................ Bieåu ñoà 4.7. Haøm löôïng progesterone ôû boø u nang noaõn theo nhoùm lai HF......... Bieåu ñoà 4.8. Haøm löôïng progesterone ôû boø u nang noaõn theo löùa ñeû .................. Bieåu ñoà 4.9. Haøm löôïng progesterone ôû boø buoàng tröùng keùm phaùt trieån theo nhoùm gioáng lai HF ........................................................................................................... Bieåu ñoà 4.10. Haøm löôïng progesterone ôû boø buoàng tröùng keùm phaùt trieån theo löùa ñeû ........................................................................................................................... xii DANH SAÙCH CAÙC TÖØ VIEÁT TAÉT PEIA: Progesterone enzyme immunoassay PGF2α: Prostaglandin F2α FSH: Follicule stimulating hormone LH: Luteinising hormone hCG: Human chorionic gonadotropin ELISA: Enzyme linked immuno sorbent assay xiii TOÙM TAÉT LUAÄN VAÊN Ñeà taøi ñöôïc thöïc hieän töø 07042006 ñeán 07082006 taïi xaõ Lai Uyeân vaø xaõ Lai Höng huyeän Beán Caùt tænh Bình Döông. Noäi dung ñeà taøi: “Söû duïng kyõ thuaät xeùt nghieäm PEIA ñeå khaûo saùt haøm löôïng progesterone ôû boø haäu bò vaø boø löùa chaäm ñoäng duïc taïi xaõ Lai Uyeân vaø xaõ Lai Höng huyeän Beán Caùt tænh Bình Döông”. Qua thôøi gian ñieàu tra, khaûo saùt ôû 105 con boø chuùng toâi ghi nhaän 30 boø bò chaäm ñoäng duïc vôùi tyû leä 28,57%. Trong ñoù toàn hoaøng theå chieám tyû leä 4,76%, buoàng tröùng keùm phaùt trieån vôùi tyû leä laø 6,67%, u nang noaõn vôùi tyû leä 17,14%. Vieäc söû duïng kyõ thuaät PEIA ñeå chaån ñoaùn boø chaäm ñoäng duïc nhaèm naâng cao hieäu quaû sinh saûn cuûa boø söõa. Khaûo saùt 30 boø bò chaäm ñoäng duïc, tieán haønh laáy 90 maãu maùu xeùt nghieäm haøm löôïng progesterone nhö sau: Haøm löôïng progesterone trung bình ôû boø bò toàn hoaøng theå bieán ñoäng töø 7,53ngml ñeán 11,12ngml, ôû boø coù buoàng tröùng keùm phaùt trieån töø 0,26ngml ñeán 0,64ngml, ôû boø bò u nang noaõn töø 1,15ngml ñeán 1,26ngml. 1. Haøm löôïng progesterone trung bình ôû boø u nang noaõn theo nhoùm gioáng lai HF töø 0,35ngml ñeán 2,11ngml. 2. Haøm löôïng progesterone trung bình ôû boø u nang noaõn theo löùa ñeû töø 0,46ngml ñeán 2,1ngml. 3. Haøm löôïng progesterone trung bình ôû boø tô vaø boø löùa bò u nang noaõn töø 0,48ngml ñeán 1,3ngml. 4. Haøm löôïng progesterone trung bình ôû boø buoàng tröùng keùm phaùt trieån theo nhoùm gioáng lai HF töø 0,15ngml ñeán 0,71ngml. 5. Haøm löôïng progesterone trung bình ôû boø buoàng tröùng keùm phaùt trieån theo löùa ñeû töø 0,15ngml ñeán 0,95ngml. xiv 6. Haøm löôïng progesterone trung bình ôû boø tô vaø boø löùa coù buoàng tröùng keùm phaùt trieån töø 0,48ngml ñeán 0,74ngml. 7. Haøm löôïng progesterone trung bình ôû boø toàn hoaøng theå theo nhoùm gioáng lai HF töø 2,9ngml ñeán 11,65ngml. 8. Haøm löôïng progesterone trung bình ôû boø toàn hoaøng theå theo löùa ñeû töø 4,8ngml ñeán 20ngml. 9. Haøm löôïng progesterone trung bình ôû boø tô vaø boø luùa bò toàn hoaøng theå töø 6,75ngml ñeán 2,73ngml. Söû duïng kyõ thuaät xeùt nghieäm PEIA khaûo saùt haøm löôïng progesterone giuùp chaån ñoaùn chính xaùc caùc tröôøng hôïp chaäm ñoäng duïc treân boø. 1 PHAÀN I. MÔÛ ÑAÀU 1.1. ÑAËT VAÁN ÑEÀ Trong nhöõng naêm ñoåi môùi neàn kinh teá, ñaøn boø nöôùc ta ngaøy moät phaùt trieån. Caû nöôùc coù haøng vaïn boø söõa, nhieàu boø thòt cao saûn, ñaøn boø noäi lai Sind ñang chieám tyû leä khaù lôùn ôû nhieàu tænh vaø ñòa phöông. Chaên nuoâi boø ñaõ mang laïi thu nhaäp ñaùng keå cho nhieàu gia ñình noâng daân vaø trang traïi. Nhaø nöôùc coù chính saùch ñaàu tö hoaëc giuùp ñôõ tín duïng, gieo tinh mieãn phí, taêng cöôøng coâng taùc quaûn lyù gioáng ñeå ñaåy maïnh neàn chaên nuoâi boø söõa nhaèm taêng saûn löôïng söõa ñöôïc saûn xuaát trong nöôùc giaûm thieåu nhaäp khaåu. Song song, vôùi vieäc phaùt trieån taêng ñaøn boø söõa, vieäc taêng chaát löôïng con gioáng thì nhöõng vaán ñeà veà nuoâi döôõng chaêm soùc, phoøng trò beänh cuõng caàn ñöôïc quan taâm. Nhöõng nguyeân nhaân laøm cho saûn löôïng söõa thaáp, thôøi gian khai thaùc cuûa boø meï ngaén, hieäu quaû kinh teá thaáp… coù theå keå ñeán laø beänh voâ sinh nhö: u nang noaõn, toàn hoaøng theå, buoàng tröùng keùm phaùt trieån. Boø ñeán tuoåi phaùt duïc vaø boø sau khi ñeû treân 4 thaùng vaãn khoâng ñoäng duïc, phoái gioáng nhieàu laàn khoâng ñaäu thai. Vieäc xaùc ñònh haøm löôïng hormone trong cô theå gia suùc laøm caên cöù ñeå caûi thieän khaû naêng saûn xuaát vaø sinh saûn ñöôïc nhieàu nöôùc quan taâm hôn. Tröôùc ñaây, ngöôøi ta thöôøng söû duïng caùc chöông trình choïn loïc vaø nhaân gioáng ñeå caûi thieän khaû naêng saûn xuaát cuûa gia suùc. Tuy nhieân, caùc chöông trình naøy thöôøng toán nhieàu thôøi gian vaø tieàn cuûa. Hôn nöõa vieäc öôùc löôïng khaû naêng duy trì cuûa caùc ñaëc ñieåm sinh saûn raát khoù vì heä soá di truyeàn raát thaáp. Chính vì vaäy, caùc nhaø nghieân cöùu gaàn ñaây höôùng nhieàu ñeán caùc bieän phaùp choïn loïc döïa treân söï töông quan giöõa caùc ñaëc ñieåm kinh teá quan troïng vôùi moät soá hoaït chaát trong cô theå gia suùc nhö: hormone, enzyme, caùc chaát trao ñoåi trong quaù trình dinh döôõng,… khoù khaên chính laø chöa coù phöông phaùp xaùc ñònh hormone trong cô theå gia suùc vì haøm löôïng cuûa caùc loaïi hormone naøy trong caùc theå dòch thöôøng raát nhoû, ñôn vò tính 109gram. Ñoøi hoûi phaûi coù thieát bò, kyõ 2 thuaät môùi xaùc ñònh ñöôïc. Moät trong nhöõng kyõ thuaät ñaõ vaø ñang aùp duïng ñeå xaùc ñònh haøm löôïng progesterone laø kyõ thuaät xeùt nghieäm PEIA Xuaát phaùt töø nhöõng thöïc teá treân, ñöôïc söï cho pheùp cuûa Khoa Chaên Nuoâi Thuù Y, Tröôøng ñaïi hoïc Noâng Laâm thaønh phoá Hoà Chí Minh vôùi söï höôùng daãn cuûa tieán só Nguyeãn Vaên Thaønh, chuùng toâi tieán haønh thöïc hieän ñeà taøi: “Söû duïng kyõ thuaät xeùt nghieäm PEIA ñeå khaûo saùt haøm löôïng progesterone ôû boø haäu bò vaø boø löùa chaäm ñoäng duïc taïi xaõ Lai Uyeân vaø xaõ Lai Höng huyeän Beán Caùt tænh Bình Döông” 1.2. MUÏC ÑÍCH YEÂU CAÀU 1.2.1. Muïc ñích Nghieân cöùu haøm löôïng progesterone ñeå tìm hieåu nguyeân nhaân treân boø haäu bò vaø boø löùa sau khi sinh khoâng ñoäng duïc do roái loaïn progesterone. Naâng cao hôn söùc sinh saûn treân boø caùi cho söõa, giuùp giaûm tyû leä loaïi thaûi do voâ sinh. ÖÙng duïng keát quûa xeùt nghieäm PEIA ñeå keát luaän töøng nguyeân nhaân boø chaäm ñoäng duïc. 1.2.2. Yeâu caàu Ñieàu tra caùc hoä chaên nuoâi coù boø tô vaø boø löùa chaäm ñoäng duïc taïi xaõ Lai Uyeân vaø xaõ Lai Höng, huyeän Beán Caùt, tænh Bình Döông. Khaûo saùt soá boø söõa sau khi sinh töø 4 thaùng trôû leân vaø boø tô sau 18 thaùng tuoåi bò roái loaïn ñoäng duïc (chu kyø ñoäng duïc keùo daøi, ñoäng duïc lieân tuïc, khoâng ñoäng duïc, ñoäng duïc aâm thaàm) vaø gieo tinh nhieàu laàn khoâng ñaäu thai. Tieán haønh laáy caùc maãu maùu ñeå kieåm tra haøm löôïng progesterone. Caùc hoaù chaát vaø thieát bò caàn thieát ôû tröôøng Ñaïi Hoïc Bình Döông vaø Chi Cuïc Thuù Y tænh Bình Döông. 3 PHAÀN II. TOÅNG QUAN TAØI LIEÄU 2.1. TÌNH HÌNH CHAÊN NUOÂI VAØ VÒ TRÍ HOÄ CHAÊN NUOÂI BOØ ÔÛ BEÁN CAÙT 2.1.1. Vò trí ñòa lyù cuûa huyeän Beán Caùt Huyeän Beán Caùt naèm ôû phía Taây Baéc cuûa tænh Bình Döông, thuoäc vuøng Ñoâng Nam boä, phía Baéc giaùp vôùi huyeän Daàu Tieáng, phía Nam giaùp vôùi thò xaõ Thuû Daàu Moät phía Ñoâng giaùp vôùi huyeän Phuù Giaùo vaø huyeän Taân Uyeân. Toång dieän tích ñaát 179.178ha, chia ra laøm 15 ñôn vò haønh chính: thò traán Myõ Phöôùc, xaõ Caây Tröôøng, xaõ Tröø Vaên Thoá, xaõ Lai Uyeân, xaõ Taân Höng, xaõ Long Nguyeân, xaõ Höng Hoøa, xaõ Lai Höng, xaõ Chaùnh Phuù Hoøa, xaõ An Ñieàn, xaõ An Taây, xaõ Hoøa Lôïi, xaõ Phuù An, xaõ Taân Ñònh (Baûn ñoà haønh chính huyeän Beán Caùt, 2005). 2.1.2. Ñaëc ñieåm khí haäu huyeän Beán Caùt Naèm trong vuøng nhieät ñôùi gioù muøa vôùi ñaëc ñieåm noùng aåm, möa nhieàu, chia laøm hai muøa möa naéng roõ reät. Muøa möa baét ñaàu töø thaùng 5 vaø keát thuùc thaùng 11, muøa khoâ baét ñaàu thaùng 12 ñeán cuoái thaùng 4 (Cuïc thoáng keâ tænh Bình Döông, 2005). Baûng 2.1. Soá löôïng boø söõa qua caùc naêm cuûa tænh bình döông Huyeän Naêm 2002 2003 2004 2005 Beán Caùt 1363 1472 1753 2096 TX Thuû Daàu Moät 418 518 988 531 Dó An 277 226 229 235 Thuaän An 785 612 772 550 Daàu Tieáng 54 154 183 281 Taân Uyeân 7 79 65 188 Phuù Giaùo 0 0 0 6 Toång 2904 3061 3990 3887 Nguoàn: Sôû Noâng Nghieäp tænh Bình Döông, 2005 4 2.2. BIEÁN ÑOÅI CÔ QUAN SINH DUÏC TRONG MOÄT CHU KYØ ÑOÄNG DUÏC KHI KIEÅM TRA BAÈNG SÔØ NAÉN QUA TRÖÏC TRAØNG VAØ QUA AÂM ÑAÏO Kieåm tra qua tröïc traøng vaø aâm ñaïo, cô quan sinh duïc bieán ñoåi suoát trong moät chu kyø ñoäng duïc ñöôïc trình baøy ôû baûng 2.2. Baûng 2.2. Bieán ñoåi cô quan sinh duïc trong moät chu kyø ñoäng duïc khi kieåm tra baèng sôø naén qua tröïc traøng vaø qua aâm ñaïo Thôøi ñieåm Sôø naén qua tröïc traøng Soi aâm ñaïo Ngaøy 0 Töû cung co boùp, raén, söøng cong roõ. Treân moät buoàng tröùng thaáy moät theå vaøng cuõ, cöùng, treân moät buoàng tröùng thaáy moät nang tröùng 12,5cm Aåm öôùt, coå töû cung môû, coù nieâm dòch ôû ñaùy aâm ñaïo, nieâm maïc maøu nhaït. Ngaøy thöù 1 Töû cung co boùp, treân moät buoàng tröùng thaáy moät theå vaøng cuõ, treân moät buoàng tröùng kia thaáy nang tröùng chín hoaëc moät hoâùc ruïng tröùng. Caùc daáu hieäu ñoäng duïc Ngaøy thöù 2 Töû cung giaûm co boùp roõ raøng, 2 buoàng tröùng nhoû vôùi caùc caáu truùc khoâng theå xaùc ñònh roõ Coøn moät phaàn daáu hieäu ñoäng duïc, doâi khi thaáy caùc veát maùu Ngaøy thöù 3 Töû cung khoâng coøn co boùp, khoâng xaùc ñònh ñöôïc caùc caáu truùc treân 2 buoàng tröùng Coøn moät phaàn hình aûnh cuûa ñoäng duïc Ngaøy thöù 4 Töû cung khoâng co boùp Thôøi kyø yeân tónh, nieâm maïc khoâ. Ngaøy thöù 5 ñeán ngaøy thöù 7 Töû cung khoâng co boùp, moät theå vaøng môùi phaùt trieån vaø ñaït cöïc ñaïi vaøo ngaøy thöù 8 Thôøi kyø yeân tónh, nieâm maïc khoâ Ngaøy thöù 8 ñeán ngaøy thöù 18 Töû cung khoâng co boùp, theå vaøng lôùn vaø coù theå sôø thaáy, ñoâi khi sôø thaáy nang tröùng Thôøi kyø yeân tónh, nieâm maïc khoâ Ngaøy thöù 19 Töû cung baét ñaàu co boùp, treân moät buoàng tröùng thaáy 1 theå vaøng nhoû daàn, treân buoàng tröùng kia thaáy moät nang tröùng ñang phaùt trieån Ñoâi khi coù nieâm dòch Ngaøy thöù 20 Töû cung co boùp, tröông löïc taêng vaø cong, theå vaøng nhoû, nang tröùng coù kích thöôùc trung bình Caùc daáu hieäu ñoäng duïc (Theo Nguyeãn Vaên Thaønh, 2003) 5 2.3. CAÙC COÂNG TRÌNH NGHIEÂN CÖÙU VEÀ ROÁI LOAÏN SINH DUÏC VAØ HAØM LÖÔÏNG PROGESTERONE Theo nghieân cöùu V.V Enchanicop vaø coäng taùc vieân (1970) ñaõ gaây ñoäng duïc haøng loaït ôû boø caùi trong voøng naêm ngaøy baèng caùch tieâm 50mg progesterone sau ñoù 2 ngaøy treân 25003000ñvc huyeát thanh ngöïa chöûa hoaëc tieâm 2000ñvc huyeát thanh ngöïa chöûa (hCG) cho keát quaû ñoäng duïc laø 80%. Hensel vaø coäng taùc vieân (1982) ñaõ nhaän ra nhieät ñoä moâi tröôøng cao coù aûnh höôûng ñeán khaû naêng sinh saûn cuûa nhieàu loaïi gia suùc, tyû leä cheát phoâi taêng khi nhieät ñoä tröïc traøng vöôït quaù 35oC. Cuõng theo Hensel vaø Abiba (1982) cho raèng khoaûng thôøi gian chôø phoái ôû boø keùo daøi khi boø ñang nuoâi con, boø ñöôïc chaêm soùc, nuoâi döôõng keùm, boø giaø, boø ñeû khoù. Hai oâng nhaän thaáy raèng boø ñang nuoâi con thì khoaûng thôøi gian chôø phoái laø 40168 ngaøy. Theo nghieân cöùu cuûa Hensel vaø coäng taùc vieân (1973) cho raèng beänh thieáu dinh döôõng vaø caùc beänh noäi kyù sinh truøng coù lieân quan ñeán beänh thieáu maùu thì seõ laøm giaûm hoàng caàu, daãn ñeán khoâng ñoäng duïc keùo daøi sau khi ñeû. (Trích daãn Nguyeãn Minh Thanh, 2006 ) Theo Leâ Xuaân Cöông (1986), khaåu phaàn thieáu protein seõ öùc cheá chöùc naêng noäi tieát cuûa thuyø tröôùc tuyeán yeân laøm FSH vaø LH tieát ra khoâng ñaày ñuû laøm cho gia suùc caùi khoâng ñoäng duïc hoaëc chaäm ñoäng duïc. Theo Nguyeãn Thanh Döông vaø Hoaøng Kim Giao, Löu Khaùnh (1995) ñaõ ñieàu tra chaäm ñoäng duïc do toàn theå vaøng chieám 25,39% ñoäng duïc aâm thaàm chieám 11,11%, buoàng tröùng keùm phaùt trieån 23,39%; vieâm noäi maïc töû cung 19,04%; vieâm töû cung coù muû 4,67%; u nang buoàng tröùng 6,34%. Theo Nguyeãn Minh Thanh (2005): “Khaûo saùt ñoäng thaùi progesterone baèng kyõ thuaät PEIA vaø öùng duïng chaån ñoaùn chaäm ñoäng chaäm ñoäng duïc treân boø caùi söõa”. Coù nhöõng keát luaän nhö sau: 6 Haøm löôïng progesterone ôû boø toàn hoaøng theå bieán ñoäng töø 32,8ngml ñeán 34ngml; keá ñeán tình traïng u nang noaõn töø 0,11ngml ñeán 0,12ngml, vaø thaáp nhaát laø ôû buoàng tröùng keùm phaùt trieån töø 0,06ngml ñeán 0,07ngml. Nhö vaäy, haøm löôïng progesterone cao seõ giuùp taùc giaû chaån ñoaùn ñöôïc tình traïng toàn hoaøng theå baèng bieän phaùp xeùt nghieäm. Keát quaû ñoäng thaùi progesterone ôû boø toàn hoaøng theå theo nhoùm lai HF vaø löùa ñeû nhö sau: + Theo nhoùm gioáng lai HF töø 22,3ngml ñeán 37ngml, theo caùc löùa ñeû töø 24ngml ñeán 50,4ngml vì vaäy haøm löôïng progesterone ôû boø toàn hoaøng theå raát cao. Ñoäng thaùi progesterone ôû boø u nang noaõn theo nhoùm gioáng lai HF vaø löùa ñeû: nhoùm gioáng lai HF töø 0,08ngml ñeán 0,15ngml, theo löùa ñeû 0.09ngml ñeán 0.17ngml; nhìn chung haøm löôïng progesterone thaáp ôû boø u nang noaõn. Ñoäng thaùi progesterone ôû boø coù buoàng tröùng keùm phaùt trieån theo nhoùm gioâng lai HF vaø löùa ñeû: Haøm löôïng bieán ñoäng thaáp nhaát ôû boø coù buoàng tröùng keùm phaùt trieån laø 0,06ngml ñeán 0,09ngml. 2.4. CAÙC YEÁU TOÁ TAÙC ÑOÄNG LEÂN SÖÏ SINH SAÛN BOØ CAÙI Nguyeân nhaân chính aûnh höôûng tröïc tieáp hoaëc giaùn tieáp ñeán söï sinh saûn cuûa boø caùi ñöôïc trình baøy qua baûng 2.3 Baûng 2.3. Caùc yeáu toá taùc ñoäng leân söï sinh saûn boø caùi Caùc yeáu toá aûnh höôûng Möùc aûnh höôûng 1. Yeáu toá gioáng boø caùi 10% 2. Yeáu toá moâi tröông: khí haäu, beänh taät, quaûn lyù 80% 3. Yeáu toá gioáng boø ñöïc 10% (Theo Chung Anh Duõng, 2002) 7 2.4.1. Yeáu toá gioáng boø caùi Yeáu toá gioáng boø caùi coù aûnh höôûng khoaûng 10% ñeán khaû naêng sinh saûn boø söõa. Vieäc naâng cao khaû naêng sinh saûn baèng caûi tieán gioáng chæ ñaït ñöôïc möùc ñoä nhaát ñònh. Ñaëc bieät khi lai gioáng boø söõa vuøng oân ñôùi vôùi vuøng nhieät ñôùi, con lai coù tyû leä maùu boø oân ñôùi caøng cao thì khaû naêng sinh saûn bò giaûm thaáp. Hôn nöõa caùc gioáng boø ñòa phöông thöôøng coù khaû naêng sinh saûn toát hôn caùc gioáng boø lai hoaëc boø nhaäp do khaû naêng thích nghi vôùi moâi tröôøng ñòa phöông. 2.4.2. Yeáu toá moâi tröôøng Caùc yeáu toá moâi tröôøng coù aûnh höôûng 80% ñeán khaû naêng sinh saûn cuûa boø. Vì khaû naêng sinh saûn laø moät tính traïng kieåu hình chòu aûnh höôûng raát lôùn cuûa moâi tröôøng soáng. Trong ñoù, bao goàm raát nhieàu yeáu toá nhö sau: Khí haäu: ñoái vôùi boø, 2 yeáu toá khí haäu coù aûnh höôûng ñeán sinh saûn ñoù laø nhieät ñoä vaø ñoä aåm. Nhieät ñoä cao vaø aåm ñoä cao seõ laøm giaûm khaû naêng saûn xuaát cuûa boø ñaëc bieät laø ñoái vôùi caùc boø coù nguoàn goác oân ñôùi vaø caùc nhoùm boø lai coù maùu oân ñôùi nuoâi taïi vuøng nhieät ñôùi. Vì chuùng chöa thích nghi ñöôïc toát vôùi ñieàu kieän moâi tröôøng. Caùc stress nhieät daãn ñeán tình traïng giaûm haáp thu thöùc aên laøm cho boø haäu bò chaäm ñoäng duïc, keùo daøi thôøi gian khoâng ñoäng duïc sau khi sinh vaø laøm giaûm naêng suaát söõa, khaû naêng sinh saûn cuaû boø bò aûnh höôûng ñaùng keå bôûi stress nhieät. Beänh taät: caùc beänh saûn khoa vaø ñöôøng sinh duïc, caùc beänh truyeàn nhieãm nhö: saûy thai, lao, Leptospirosis… gaây ra tình traïng chaäm sinh vaø voâ sinh. Caùc beänh roái loaïn veà dinh döôõng, maát caân baèng veà noäi tieát, aûnh höôûng xaáu ñeán khaû naêng sinh saûn vaø saûn xuaát. Ñieàu kieän veä sinh keùm vaø tình traïng laây nhieãm caùc nguoàn beänh trong moâi tröôøng cao, ñaëc bieät laø trong thaùng coù thôøi tieát noùng aåm ñaõ aûnh höôûng raát lôùn ñeán söï saûn xuaát vaø sinh saûn ñaøn gia suùc. Taát caû ñieàu naøy laøm trì hoaõn söï phaùt trieån maøng nhau thai, töû cung chaäm hoài phuïc sau khi sinh, vieâm vuù… haäu quaû laø gia 8 suùc coù theå cheát do vieâm töû cung naëng hoaëc vieâm vuù sau khi sinh. Taùc haïi cuûa ñieàu kieän veä sinh keùm leân khaû naêng sinh saûn laø giaûm tyû leä thuï thai ôû laàn phoái gioáâng ñaàu tieân, keùo daøi thôøi gian phoái gioâng sau khi sinh, taêng khoaûng caùch hai löùa ñeû. Haäu quaû cuoái cuøng laø laøm giaûm thôøi gian saûn xuaát treân moät ñôøi boø caùi, giaûm möùc taêng ñaøn sinh hoïc, giaûm soá beâ thay theá, taêng chi phí cho thuù y vaø gieo tinh nhaân taïo, taêng soá boø loaïi thaûi ngoaøi yù muoán. Quaûn lyù cuûa noâng hoä: kieán thöùc cuûa ngöôøi chaên nuoâi, söï thieáu huït kieán thöùc vaø caùc thoâng tin chuyeân ngaønh, thieáu söï trôï giuùp cuûa caùc chuyeân gia thuù y vaø chaên nuoâi. Thieáu söï hôïp taùc chaët cheõ giöõa caùc kyõ thuaät vieân vaø caùc nhaø chaên nuoâi laø nhöõng haïn cheá lôùn nhaát ñoái vôùi khaû naêng sinh saûn cuûa ñaøn boø ñöôïc nuoâi trong caùc hoä chaên nuoâi vôùi söï tích luõy qua nhieàu theá heä, hoï cuõng bieát caùch ñeå nuoâi ñaøn gia suùc moät caùch toát nhaát theo truyeàn thoáng cuûa hoï. Tuy nhieân, nhöõng kinh nghieäm naøy caàn ñöôïc ñieàu chænh vaø boå sung. Hoï caàn ñöôïc giôùi thieäu nhöõng kyõ thuaät môùi giuùp hoï caõi thieän khaû naêng sinh saûn cuûa ñaøn gia suùc. Veä sinh chuoàng traïi: veä sinh chuoàng traïi yeáu keùm laø nguyeân nhaân chính daãn ñeán söùc khoûe cuûa ñaøn gia suùc, deã bò nhieãm beänh, giaûm khaû naêng saûn xuaát vaø sinh saûn laø haäu quaû taát yeáu Yeáu toá ñöïc gioáng: ñoái vôùi boø söõa ña soá ñeàu ñöôïc gieo tinh nhaân taïo. Vì vaäy, aûnh höôûng cuûa boø ñöïc leân khaû naêng sinh saûn cuûa boø caùi ñeàu coù söï can thieäp cuûa con ngöôøi vaø haïn cheá ñöôïc toái ña khaû naêng laây truyeàn beänh tröïc tieáp töø ñöïc gioáng sang boø caùi. 2.4.3. Moät soá nguyeân nhaân gaây boø caùi khoâng ñoäng duïc 2.4.3.1. Toàn hoaøng theå Theo Nguyeãn Höõu Ninh vaø Baïch Ñaêng Phong (1994), sau khi ñeû hoaëc sau khi ñoäng duïc nhöng chöa phoái gioáng hoaøng theå löu laïi quaù thôøi gian bình thöôøng, thì goïi laø toàn hoaøng theå… veà maët caáu truùc cuõng nhö taùc duïng sinh lyù hoaøng theå löu laïi, 9 khoâng khaùc hoaøng theå khi con vaät coù chöûa vaø hoaøng theå cuûa chu kyø ñoäng duïc, vaãn coù tieát ra progesterone laøm öùc cheá phaùt trieån cuûa noaõn baøo vaø con vaät khoâng ñoäng hôùn trôû laïi, trôû thaønh maát khaû naêng sinh saûn. Nguyeân nhaân laø do nuoâi döôõng keùm, thöùc aên ñôn ñieäu, thieáu caùc chaát khoaùng vaø vitamin, thieáu vaän ñoäng beänh naøy thöôøng gaëp ôû nhöõng boø cao saûn, do phaûi tieâu hao nhieàu naêng löôïng nhöng nuoâi döôõng laïi keùm, laøm cho cô naêng buoàng tröùng bò giaûm suùc. Beänh coøn do thöù phaùt töø vieâm töû cung, töû cung tích muû, thai cheát löu,… khoâng ñieàu trò kòp thôøi ñeå moät phaàn nhau thai thoái röõa trong töû cung. Khi khaùm qua tröïc traøng thaáy moät beân buoàng tröùng hoaëc caû hai buoàng tröùng to leân sôø thaáy hoaøng theå to, nhoâ leân khoûi beà maët cuûa buoàng tröùng. Neáu boø caùi khoâng coù mang vaø khoâng ñoäng duïc maø kieåm tra thaáy coù hoaøng theå thì ñoù laø toàn hoaøng theå. 2.4.3.2. U nang buoàng tröùng Theo Nguyeãn Vaên Thaønh (2003), u nang buoàng tröùng chia laøm 2 loaïi: u nang cô naêng vaø u nang thöïc theå. U nang cô naêng: laø nhöõng nang nhoû coù voû moûng, caêng moïng, chöùa nöôùc goàm: + Nang boïc noaõn: ñaây laø nhöõng nang chín khoâng bò vôõ vaøo nhöõng ngaøy quy ñònh neân khoâng thaønh laäp hoaøng theå, maø tieáp lôùn daàn leân. + Nang hoaøng tuyeán thöôøng lôùn hôn nang boïc noaõn coù theå xuaát hieän moät beân hoaëc caû hai beân buoàng tröùng, voû nang raát moõng, trong nang chöùa dòch chaát coù progesterone. + Nang hoaøng theå: thöôøng gaëp trong thôøi kyø mang thai, trong ñoù hoaøng tuyeán hoaït ñoäng maïnh tieát nhieàu progesterone. U nang thöïc theå: coù theå moät beân buoàng tröùng hay caû hai beân buoàng tröùng ña soá laø nhöõng u nang laønh; tuy nhieân ñoâi khi aùc tính. Coù ba loaïi u nang buoàng tröùng thöïc theå 10 + U nang nöôùc buoàng tröùng: thöôøng laø nhöõng nöôùc coù theå coù moät nang raát to, coù nhieàu thuyø, thaønh daøy, trong laø moät thöù nöôùc saùnh ñaëc, lôùp thaønh coù hai lôùp, ngoaøi laø lôùp xô, trong laø lôùp thöôïng bì. + Nang bì: thöôøng laø nhöõng nang khoâng to laém nhöng coù theå gaëp ôû hai buoàng tröùng hai beân. Thaønh nang coù caáu truùc raát gioáng lôùp teá baøo thöôïng bì da. Trong nang thöôøng coù chaát nhaøy nhö baû ñaäu. Beänh naøy thöôøng gaëp ôû boø caùi gaày yeáu vaø suy nhöôïc. Khaùm qua tröïc traøng: moät phaàn hoaëc coù theå toaøn boä, buoàng tröùng loài, loõm, theå tích teo nhoû, coù theå sôø thaáy. Treân buoàng tröùng bò teo vaø chai cöùng, buoàng tröùng nhoû laïi vaø khi khaùm vaøo seõ laøm con vaät ñau ñôùn. 2.4.3.3. Buoàng tröùng bò teo vaø giaûm cô naêng Theo Nguyeãn Höõu Ninh vaø Baïch Ñaêng Phong (1994), do boø sinh ñeû nhieàu laàn, giaø yeáu cuøng vôùi vieäc chaêm soùc, nuoâi döôõng khoâng toát. Khi giao phoái caän huyeát cuõng xaûy ra hieän töôïng giaûm cô naêng vaø teo buoàng tröùng. Khaùm qua tröïc traøng: bieåu hieän cho thaáy buoàng tröùng khoâng thay ñoåi, khoâng thaáy ñöôïc noaõn baøo hoaëc hoaøng theå, coù tröôøng hôïp chæ coù moät beân buoàng tröùng coù hoaøng theå. Buoàng tröùng nhoû laïi chæ baèng haït ñaäu. Neáu kieåm tra nhieàu laàn thaáy buoàng tröùng khoâng thay ñoåi keáât luaän buoàng tröùng ñaõ bò teo. Tröôøng hôïp naøy, boø thöôøng bieåu hieän ñoäng duïc nhöng khoâng ruïng tröùng, chu kyø ñoäng duïc keùo daøi. 2.4.3.4. Vieâm töû cung vaø vieâm buoàng tröùng. Vieâm töû cung thöôøng xuaát hieän treân thuù sau khi sinh. Khi vieâm töû cung seõ toån thöông nieâm maïc. Töø ñoù, gaây aûnh höôûng ñeán söï phaân tieát PGF2α laøm xaùo troän chu kyø ñoäng duïc, laøm giaûm söùc sinh saûn, giaûm soá voøng quay löùa ñeû trong naêm, laøm taêng tình traïng chaäm sinh vaø voâ sinh. 11 Nguyeân nhaân: sau khi sinh töû cung thöôøng bò vieâm do söï can thieäp veà ñeû khoù vaø nhieãm vaät laï vaøo cô theå, saûy thai, soùt nhau, do gieo tinh nhaân taïo khoâng ñuùng kyõ thuaät. Chia laøm ba loaiï vieâm töû cung: vieâm nhôøn, vieâm coù muû, vieâm daïng muû laãn maùu. + Vieâm nhôøn (vieâm töû cung theå cata) Vieâm nhôøn laø daïng vieâm nheï, hieän töôïng vieâm chæ xuaát hieän treân lôùp nieâm maïc vôùi caùc trieäu chöùng: dòch vieâm loûng, nhôøn, coù côïn ñuïc, soát nheï. Neáu ñöôïc ñieàu trò baéng caùch thuïc röõa töû cung, ñaët khaùng sinh vaøo töû cung, keát hôïp chích vitamin C seõ khoûi beänh sau 23 ngaøy. + Vieâm coù muû Daïng vieâm naøy coù theå do haäu quaû cuûa vieäc khoâng ñieàu trò daïng vieâm nhôøn, hoaëc do caùc vi truøng sinh muû taán coâng vaøo töû cung nhö Staphilococcus, E. coli laø caùc vi khuaån chính gaây beänh vôùi caùc trieäu chöùng soát, dòch vieâm coù laãn muû, muøi tanh, thoái, ñieàu trò chaâïm daãn ñeán haäu quaû: töû cung bò toån thöông naëng, gaây nhieãm truøng maùu (Nguyeãn Vaên Thaønh 2003) Vieâm buoàng tröùng Beänh keá phaùt cuûa vieâm töû cung, vieâm oáng daãn hoaëc vieâm phuùc maïc, nhöõng vi khuaån gaây vieâm thöôøng gaëp laø: tuï caàu khuaån, lieân caàu khuaån vôùi trieäu chöùng boø khoâng ñoäng duïc, buoàng tröùng vieâm söng, coù muû. ÔÛ giai ñoaïn ñaàu boø raát ñau ñôùn,… Neáu chæ vieâm moät beân buoàng tröùng, boø vaãn coù daáu hieäu ñoäng duïc vaø phoái gioáng ñöôïc nhöng tyû leä thuï thai thaáp. (Trònh Quang Phong, 2004) Theo Löu Vaên Taân (1994), tyû leä maùu boø Haø Lan coù aûnh höôûng ñeán khaû naêng sinh saûn cuûa boø söõa treân boø lai F1HF, F2HF, thì söï hoaït ñoäng trôû laïi cuûa buoàng tröùng vaø ñoäng duïc laïi sau khi ñeû ñeàu sôùm hôn so vôùi boø lai F3HF, F4HF. Yeáu toá naøy aûnh höôûng khoaûng 10% ñeán khaû naêng sinh saûn boø söõa. Vieäc naâng cao khaû naêng sinh saûn baèng caûi tieán gioáng chæ ñaït möùc ñoä nhaát ñònh. 12 Yeáu toá moâi tröôøng: theo Löu Vaên Taân vaø coäng taùc vieân (1994) thì muøa vuï coù aûnh höôûng ñeán khaû naêng sinh saûn cuûa boø lai höôùng söõa. Trong muøa möa söï hoaït ñoäng trôû laïi cuûa buoàng tröùng vaø boø ñoäng duïc laïi trong thôøi kyø sau ñeû sôùm hôn so vôùi muøa khoâ. Theo Pant (1998), nhieät ñoä cao vaø aåm ñoä cao seõ laøm giaûm khaû naêng saûn xuaát cuûa boø, ñaëc bieät laø vôùi caùc gioáng boø coù nguoàn goác oân ñôùi nuoâi taïi vuøng nhieät ñôùi vì boø chöa thích nghi ñöôïc toát vôùi moâi tröôøng. Caùc nghieân cöùu trong chuoàng nuoâi kieåm ñöôïc nhieät ñoä vaø ñaõ xaùc ñònh nhieät ñoä cao tôùi haïn ñoái vôùi caùc ñaëc ñieåm sinh saûn cuûa boø bieán ñoäng töø 2427oC (Chung Anh Duõng, 2002). Theo Hensel vaø coäng taùc vieân (1982), nhieät ñoä moâi tröôøng cao coù aûnh höôûng ñeán khaû naêng sinh saûn cuûa nhieàu loaïi gia suùc, tyû leä thuï thai giaûm, tyû leä cheát phoâi taêng, khi nhieät ñoä tröïc traøng vöôït quaù 35oC (Tröông Nguyeãn Huy Cöôøng, 2002). Caùc stress nhieät daãn ñeán tình traïng giaûm khaû naêng haáp thu thöùc aên, laøm cho boø haäu bò chaäm thaønh thuïc, keùo daøi thôøi gian khoâng ñoäng duïc sau khi sinh laøm giaûm naêng suaát söõa. Khaû naêng sinh saûn boø söõa bò aûnh höôûng ñaùng keå bôûi stress nhieät. Theo Pant (1998) trong moät nghieân cöùu treân ñaøn boø lang traéng ñen cuûa Ñan Maïch taïi traïi boø ôû Baghdad cho thaáy tyû leä boø ñeû thaáp hôn 30% khi ñöôïc gieo tinh trong nhöõng thaùng noùng vaø hôn 50% trong nhöõng thaùng laïnh. Khi nhieät ñoä muøa heø >40oC ñaõ laøm gia taêng khoaûng caùch löùa ñeû, thuï thai; khoaûng caùch töø khi phoái laàn ñaàu ñeán khi thuï thai, giaûm tyû leä thuï thai (Chung Anh Duõng, 2002). Yeáu toá dinh döôõng: Theo Pandel (1990) cho raèng thieáu dinh döôõng laøm giaûm tyû leä coù chöûa vaø keùo daøi thôøi kyø voâ sinh sau khi ñeû cuûa boø thòt vaø boø söõa lai Haø Lan (Tröông Huy Cöôøng, 2003). Theo Leâ Xuaân Cöông (1986), nhöõng gia suùc caùi quaù maäp thì söï hình thaønh teá baøo tröùng vaãn tieáp tuïc nhöng quaù trình ruïng tröùng khoâng thöïc hieän ñöôïc bôûi vì buoàng tröùng bò boïc bôûi lôùp môõ daày ñaëc. Cho neân thuù bieåu hieän ñoäng duïc nhöng 13 tröùng khoâng ruïng hoaëc phoái nhieàu laàn khoâng ñaäu thai. Cuõng theo oâng khaåu phaàn nhieàu protein seõ öùc cheá chöùc naêng noäi tieát cuûa thuyø tröôùc tuyeán yeân laøm FSH vaø LH tieát ra khoâng ñaày ñuû laøm cho gia suùc caùi ñoäng duïc hoaëc chaäm ñoäng duïc. Thieáu Mangan gaây chaäm ñoäng duïc, giaûm tyû leä sinh saûn vì Mangan raát caàn thieát cho saûn xuaát Hormone sinh duïc naõo thuyø ( nhaát laø LH). Thieáu keõm seõ daãn ñeán chaäm sinh saûn vaø keõm goùp phaàn kích thích sinh saûn cuûa caùc kích duïc toá thuyø tröôùc tuyeán yeân (Tröông Nguyeãn Huy Cöôøng, 2002). Theo Wright vaø coäng taùc vieân (1992), chöùng minh raèng theå traïng cuûa boø luùc ñeû coù töông quan nghòch vôùi thôøi gian voâ sinh sau khi ñeû. Theo Jolly Etal (1995), cho raèng thieáu dinh döôõng ôû möùc ñoä vöøa phaûi luùc tröôùc hay sau khi ñeû coù theå caûn trôû cô cheá thaønh thuïc cuûa caùc bao noaõn. Coøn thieáu traàm troïng hôn coù aûnh höôûng ñeán cô cheá ñieàu khieån kích thöôùc cuûa caùc bao noaõn troäi vaø traïng thaùi phaùt trieån cuõng nhö thoaùi hoaù cuûa chuùng (Tröông Nguyeãn Huy Cöôøng, 2002). Ngoaøi ra caùc yeáu toá veà beänh, veä sinh chuoàng traïi vaø caùc yeáu toá khaùc cuõng goùp phaàn khoâng nhoû ñeán khaû naêng sinh saûn cuûa boø caùi Theo Cao Thanh Phuù (2003), nhöõng beänh truyeàn nhieãm nhö saãy thai, Leptospira… gaây ra tính traïng voâ sinh ôû traâu boø; Nhöõng beänh roái loaïn dinh döôõng, trao ñoåi chaát, noäi ngoaïi kyù sinh ñeàu coù aûnh höôûng xaáu ñeán khaû naêng sinh saûn. Theo Chung Anh Duõng (2002), ñieàu kieän veä sinh keùm vaø tình traïng laây nhieãm caùc nguoàn beänh trong moâi tröôøng cao, ñaëc bieät laø trong thaùng coù thôøi tieát noùng aåm, aûnh höôûng raát lôùn ñeán söï saûn xuaát vaø sinh saûn ñaøn gia suùc taát caû nhöõng ñieàu naøy laøm trì hoaõn vieäc mang thai, töû cung chaäm hoài phuïc sau khi sinh, vieâm vuù haäu quaû laø gia suùc coù theå cheát. Taùc haïi ñieàu kieän veä sinh keùm leân khaû naêng sinh saûn: giaûm tyû leä thuï thai ôû laàn phoái gioáng ñaàu tieân keùo daøi thôøi gian phoái gioáng sau khi sinh, taêng khoaûng caùch 2 löùa ñeû. Haäu quaû cuoái cuøng laø giaûm khaû naêng saûn xuaát treân moät ñôøi boø caùi, laøm 14 giaûm möùc taêng ñaøn sinh hoïc, giaûm soá beâ thay theá; taêng chi phí cho thuù y vaø gieo tinh nhaân taïo, taêng soá boø loaïi thaûi ngoaøi yù muoán. Caùc beänh veà roái loaïn kích thích toá raát quan troïng trong sinh saûn boø caùi. 2.5. VAI TROØ CUÛA PROGESTERONE, PROSTASGLANDINE VAØ ESTROGEN 2.5.1. Progesterone 2.5.1.1. Nguoàn goâùc Progesterone ñöôïc hoaøng theå tieát ra töøng giai ñoaïn moät cuûa chu kyø sinh duïc vaø töø nhau thai trong thôøi kyø coù mang. Ngoaøi hoaøng theå, nhau thai, voû thöôïng thaän cuõng saûn xuaát ra progesterone, ly trích töø dòch hoaøn seõ ñöôïc löôïng nhoû Progesterone laø kích thích toá caàn thieát cho vieäc duy trì söï mang thai. Chuùng hoaït ñoäng baèng caùch thay ñoåi khaû naêng thaåm thaáu ion xuyeân qua maøng teá baøo cô töû cung, laøm taêng xu theá nghó ngôi cuûa maøng vaø laøm giaûm söï daãn truyeàn teá baøo, khaû naêng kích thích. 2.5.1.2. Baûn chaát vaø caáu truùc phaân töû cuûa progesterone Progesterone laø moät steroid vôùi 21 Carbon, coù coâng thöùc phaân töû laø C21H30O2. Progesterone khoâng tan trong nöôùc, tan trong coàn, ethe, H2SO4, tan ít trong daàu (Nguyeãn Phöôùc Töôøng vaø Traàn Dieãm Uyeân, 2000). Cho progesterone vaøo hoãn hôïp acid acetic ñaëc – acid phosphoride 88% thì coù huyønh quang maøu vaøng. Ñun noùng progesterone vaø dinitro 2,4 phenylhydrazine trong coàn vôùi söï coù maët cuûa HCl thì xuaát hieän keát tuûa ñoû naâu cuûa bis dinitrophenylhyrazoneprogesterone. 15 2.5.1.3. Vaän chuyeån, chuyeån hoùa vaø taùc duïng cuûa progesterone Vaän chuyeån vaø chuyeån hoùa + Progesterone ñöôïc vaän chuyeån trong maùu baèng caùch gaén vôùi albumine huyeát töông vaø globuline ñaëc hieäu. Progesterone gaén vaøo thuï theå trong baøo töông, sau ñoù hoãn hôïp thuï theå progesterone gaén vaøo DNA, khôi maøu toång hôïp mRNA vaø protein môùi. Moâ ñích cuûa progesterone laø töû cung, nhuõ tuyeán vaø naõo. + Progesterone ñöôïc vaän chuyeån trong tuaàn hoaøn maùu, chuyeån hoùa ôû gan thaønh pregnanediol, keát hôïp vôùi acid glucuronic vaø ñöôïc loaïi thaûi qua nöôùc tieåu. Taùc duïng cuûa progesterone + Taùc duïng leân töû cung: Kích thích söï phaùt trieån cuûa nieâm maïc töû cung, aâm ñaïo, laøm phaùt trieån hôn nöõa löôùi mao maïch töû cung, tích luõy nhieàu glycogen ôû nieâm maïc. Taùc duïng naøy coù yù nghóa quan troïng ñeå chuaån bò cho nieâm maïc töû cung ôû traïng thaùi saün saøng ñoùn tröùng ñaõ thuï tinh veà laøm toå. ÖÙc cheá tuyeán yeân giaûm phaân tieát FSH vaø LH neân khoâng coù noaõn chín vaø ruïng, khoâng coù bieåu hieän ñoäng duïc trong thôøi gian mang thai. ÖÙc cheá söï co thaét cuûa töû cung neân ngaên caûn vieäc ñaåy tröùng ñaõ thuï tinh ra ngoaøi vaø taïo moâi tröôøng oån ñònh cho baøo thai phaùt trieån. + Taùc duïng leân coå töû cung: Kích thích teá baøo tuyeán nieâm maïc baøi tieát moät lôùp dòch quaùnh daøy. + Taùc duïng leân voøi fallope: Kích thích teá baøo nieâm maïc voøi fallope baøi tieát dòch chöùa chaát dinh döôõng ñeå nuoâi döôõng tröùng ñaõ thuï tinh, thöïc hieän quaù trình phaân chia trong khi di chuyeån ñeán töû cung. + Taùc duïng leân nhuõ tuyeán: Kích thích teá baøo nang tuyeán taêng sinh, to leân vaø trôû neân coù khaû naêng baøi tieát. + Taùc duïng leân söï caân baèng ñieän giaûi: Cuõng nhö hoaït ñoäng cuûa caùc steroid khaùc, progesterone vôùi haøm löôïng cao coù theå laøm taêng söï taùi haáp thu Na+, Cl – vaø nöôùc ôû oáng löôïn xa. 16 + Aûnh höôûng thaân nhieät: Progesterone laøm taêng nhieät ñoä cô theå töø 0.3 0.5oC, cô cheá laøm taêng nhieät ñoä cuûa progesterone vaãn coøn chöa roõ. Tuy nhieân, coù yù kieán cho raèng progesterone taùc duïng leân trung taâm ñieàu hoøa nhieät ôû vuøng döôùi ñoài. Ñieàu hoøa vaø baøi tieát: Söï baøi tieát progesterone chòu aûnh höôûng ñieàu khieån tröïc tieáp cuûa hormone LH do tuyeán yeân baøi tieát. Neáu haøm löôïng LH taêng cao trong maùu hoaøng theå seõ ñöôïc nuoâi döôõng vaø baøi tieát nhieàu progesterone. Ngöôïc laïi, neáu tuyeán yeân baøi tieát ít LH, hoaøng theå seõ bò thoaùi hoùa vaø progesterone seõ ñöôïc baøi tieát ít. Toùm laïi, progesterone coù taùc duïng ñaëc bieät quan troïng, noù laøm cho quaù trình mang thai xaûy ra bình thöôøng. Vì nhöõng taùc duïng treân, ngöôøi ta goïi progesterone laø hormone döôõng thai. Vì lyù do naøo ñoù maø haøm löôïng progesterone giaûm ñi thì söï phaùt trieån baøo thai seõ bò aûnh höôûng. Trong vaán ñeà kieåm soaùt sinh saûn ôû thuù caùi, progesterone ñöôïc coi laø chæ tieâu caàn ñöôïc kieåm tra, chuû yeáu laø tính oån ñònh veà haøm löôïng, phaûn aùnh ñöôïc giai ñoaïn cuûa chu kyø ñoäng duïc vaø söï oån ñònh cuûa baøo thai (Snoi vaø ctv (1998), trích daãn Leâ Huøng Hieäp (2004). 2.5.2. Estrogen Noaõn toá ñöôïc tieát ra töø buoàng tröùng vaø nhau thai, caáu truùc hoaù hoïc steroid laø hormone giôùi tính gaây ñoäng duïc phaùt trieån cô quan sinh duïc nhö kích thích nieâm maïc töû cung, caùc sôïi cô töû cung phaùt trieån, taêng ñoä lôùn, ñoä daøi vaø soá löôïng laøm töû cung to leân kích thích cheá tieát nieâm maïc coå töû cung laøm coå töû cung môû, kích thích phaùt trieån bieåu moâ aâm ñaïo, aâm hoä. Kích thích phaùt trieån sinh duïc thöù caáp cuûa con caùi gaây höng phaán vaø gaây ñoäng duïc, noaõn toá coøn tham gia giöõ nöôùc, giöõ Na gaây phuø, giöõ Ca ôû xöông vaø kích thích toång hôïp protein laøm phaùt trieån vuøng moâng, chaäu, hoâng (trích daãn Tröông Nguyeãn Huy Cöôøng, 2002). 17 2.5.3. Prostasglandine Prostaglandin: ñöôïc phaùt hieän laàn ñaàu tieân vaøo naêm 1930. Tinh dòch töôi laøm taêng söï co boùp cuûa cô daï con. Naêm 1935 Euler ñaët cho noù caùi teân nhö theá vì oâng cho raèng noù laø saûn phaåm cuûa tuyeán tieàn lieät, caùi teân Prostaglandin vaãn giöõ cho ñeán nay. Prostaglandin goàm 14 daãn chaát cuûa 1 acid beùo, acid prostagnoic ñöôïc chia laøm 4 loaïi A, B, E. Treân thöïc teá Prostaglandin ñöôïc taïo ra ôû haàu heát caùc moâ, treân maøng teá baøo töø caùc acid beùo. Nguoàn: www.humans.be bioch20%eicosanoides.html 2.6. KYÕ THUAÄT ELISA Ñaây laø kyõ thuaät khaù nhaïy vaø ñôn giaûn, cho pheùp xaùc ñònh khaùng nguyeân hoaëc khaùng theå ôû noàng ñoä raát thaáp (0,1ngml). So vôùi caùc kyõ thuaät khaùc thì kyõ thuaät naøy reû tieàn, an toaøn hôn maø vaãn ñaûm baûo ñoä chính xaùc Elisa ñöôïc duøng ñeå chaån ñoaùn nhieàu taùc nhaân gaây beänh nhö virus, vi khuaån, naám, kyù sinh, haøm löôïng progesterone trong maùu. Nguyeân taéc cuõa kyõ thuaät naøy döïa treân söï gaén keát ñaëc hieäu giöõa khaùng nguyeân naø khaùng theå; trong ñoù khaùng theå ñöôïc gaén vôùi moät enzyme khi cho theâm moät cô chaát Hình 2.1. Caáu truùc Prostaglandin 18 thích hôïp (thöôøng laø nitrophenol phosphate) vaùo phaûn öùng enzyme seõ thuyû phaân cô chaát thaønh moät chaát coù maøu. Söï xuaát hieän maøu chöùng toû ñaõ xaûy ra phaûn öùng ñaëc hieäu giöõa khaùng theå vôùi khaùng nguyeân hay khaùng nguyeân caàn phaùt hieän. Phaân loaïi ELISA: (Chemicon International) 2.6.1. ELISA tröïc tieáp (Direct ELISA) Cho khaùng nguyeân vaøo ñóa ELISA, ñem uû caùc ñóa chöùa khaùng nguyeân. Sau ñoù ñem röûa, theâm khaùng theå coù enzyme vaøo. Tieáp tuïc röûa roài uû ôû 37oC, theâm cô chaát vaøo, uû ôû 37oC. Ñoïc keát quaû 2.6.2. ELISA giaùn tieáp (Indirect ELISA) Cho khaùng nguyeân vaøo ñóa, ñem uû, roài röûa. Theâm khaùng theå vaøo tieáp tuïc uû, roài röûa. Boå xung khaùng theå coù gaén enzyme, uû roài ñem röûa. Teâm cô chaát taïo maøu vaøo, uû. Ñoïc keát quaû 2.6.3. Sandwich ELISA Sandwich ELISA coù theå chia laøm hai heä thoáng: Sandwich ELISA tröïc tieáp: cho khaùng theå vaøo moãi ñóa ELISA, ñem uû roài röûa. Theâm khaùng nguyeân vaøo, uû roài röûa. Boå sung khaùng theå coù gaén enzyme vaøo, uû roài röûa. Theâm cô chaát taïo maøu vaøo, uû. Ñoïc keát quaû. Sandwich ELISA giaùn tieáp: cho khaùng theå thöù nhaát vaøo gieáng ELISA, uû roài röûa. Theâm khaùng nguyeân vaøo, uû roài röûa. Theâm khaùng theå thöù hai vaøo, uû roài röûa. Boå sung khaùng theå thöù hai coù gaén enzyme vaøo, uû roài röûa. Theâm cô chaát taïo maøu vaøo. (Nguyeãn Ñình Tröôøng, 2005) 2.6.4. Phaûn öùng ELISA caïnh tranh: C ELISA (Competition ELISA) Tröôøng hôïp moät: cho khaùng nguyeân vaøo , uû roài röûa. Boå xung khaùng nguyeân, theâm khaùng theå coù gaén enzyme vao, uû, röûa. Boå sung cô chaát taïo maøu vaøo, uû. Ñoïc keát quaû. (Khoâng maøu 100% caïnh tranh). 19 Tröôøng hôïp hai: cho khaùng nguyeân vaøo, uû, röûa. Khoâng boå sung khaùng nguyeân maø theâm khaùng theå coù gaén enzyme vaøo, uû, röûa. Boå sung cô chaát taïo maøu vaø uû. Ñoïc keát quaû (maøu) khoâng caïnh tranh. Tuyø theo ñoä ñaäm, nhaït cuûa maøu maø ta coù tyû leä möùc ñoä caïnh tranh khaùc nhau. Töø ñoù keát luaän möùc ñoä nhieãm beänh. 2.6.5. Caùc yeáu toá aûnh höôûng ñeán ñoä nhaïy cuûa phaûn öùng ELISA Soá löôïng cuûa kyõ thuaät: thöù I ñöôïc gaén vaøo ñaùy gieáng AÙi löïc cuûa khaùng theå thöù I ñoái vôùi khaùng nguyeân Hoaït tính chuyeân bieät cuûa khaùng theå thöù II. 2.6.6. Caùc yeáu toá aûnh höôûng ñeán keát quaû cuûa ELISA Khi caùc ñoái chöùng aâm cho keát quaû döông hoaëc ñoái vôùi maãu thì phaûi kieåm tra laïi taát caû caùc hoaù chaát bao goàm: haïn söû duïng, noàng ñoä, ñieàu kieän baûo quaûn,… Khi maøu xuaát hieän quaù thaáp ñoái vôùi ñoái chöùng döông vaø caû maãu kieåm tra thì phaûi kieåm tra laïi khaùng theå ñöôïc gaén enzyme vaø noàng ñoä cuûa chaát taïo maøu. Neáu coù taïo maøu vôùi maãu maø khoâng taïo maøu vôùi ñoái chöùng döông thì coù theå kieåm tra laïi nguoàn goác ñoái chöùng, haïn söû duïng vaø ñieàu kieän baûo quaûn. Khi chaïy laïi moät thöû nghieäm trong ñieàu kieän ñang gaëp söï coá thì chæ neân thay ñoåi moät yeáu toá thí nghieäm. (Nguyeãn Ñình Tröôøng, 2005) 20 PHAÀN III. NOÄI DUNG VAØ PHÖÔNG PHAÙP KHAÛO SAÙT 3.1. THÔØI GIAN VAØ ÑÒA ÑIEÅM KHAÛO SAÙT Thôøi gian töø: 07042006 ñeán ngaøy 07082006. Ñòa ñieåm khaûo saùt: caùc hoä noâng daân nuoâi boø ôû xaõ Lai Uyeân vaø Lai Höng huyeän Beán Caùt tænh Bình Döông. Ñeà taøi thöïc hieän laáy maãu maùu treân boø caùi chaäm ñoäng duïc vaø boø löùa chaäm phaùt duïc taïi xaõ Lai Uyeân vaø Lai Höng huyeän Beán Caùt, tænh Bình Döông. Maãu maùu ñöôïc ly taâm taïi phoøng thí nghieäm hoaù tröôøng Ñaïi Hoïc Bình Döông, thöïc hieän phaûn öùng PEIA taïi chi cuïc thuù y tænh Bình Döông. 3.2. ÑOÁI TÖÔÏNG KHAÛO SAÙT Khaûo saùt treân boø trôû ngaïi sinh saûn theo caùc nhoùm gioáng F1HF, F2HF, F3HF. Ñoái töôïng khaûo saùt theo nhoùm löùa ñeû: boø tô, boø löùa 1, boø löùa 2, boø löùa 3, boø löùa 4. Khaûo saùt soá boø söõa sau khi sinh töø 4 thaùng trôû leân vaø boø tô sau 18 thaùng tuoåi bò roái loaïn ñoäng duïc (chu kyø ñoäng duïc keùo daøi, ñoäng duïc lieân tuïc, khoâng ñoäng duïc, ñoäng duïc aâm thaàm) vaø gieo tinh nhieàu laàn khoâng ñaäu thai. 3.3. NOÄI DUNG KHAÛO SAÙT Ñoái vôùi boø tô treân 18 thaùng tuoåi vaø boø löùa treân 3 thaùng sau khi sinh maø khoâng ñoäng duïc. Xaùc ñònh haøm löôïng progesterone trong huyeát thanh baèng kyõ thuaät PEIA. 3.4. PHÖÔNG PHAÙP TIEÁN HAØNH Taát caû caùc boø thí nghieäm ñeàu ñöôïc ñaùnh soá, theo doõi vaø ghi cheùp ñaày ñuû, bao goàm: soá hieäu boø, ngaøy sinh, tình traïng sinh saûn, ngaøy ñoäng duïc, ngaøy phoái gioáng, ngaøy laáy maãu. Thöïc hieän khaûo saùt ôû 30 boø caùi theo nhoùm maùu lai vaø caùc löùa ñeû nhö sau: 21 3.4.1. Boá trí thí nghieäm 3.4.1.1. Boá trí khaûo saùt theo nhoùm maùu lai HF Laáy 90 maãu maùu theo caùc nhoùm maùu lai HF ñöôïc trình baøy ôû baûng 3.1. Baûng 3.1. Soá maãu maùu thí nghieäm treân töøng nhoùm gioáng STT Nhoùm lai HF Soá boø khaûo saùt (con) Soá maãu maùu (maãu) 1 F1HF 6 18 2 F2HF 22 66 3 F3HF 2 6 Toång 30 90 3.4.1.2. Boá trí khaûo saùt theo caùc löùa ñeû Laáy 90 maãu maùu theo löùa ñeû, soá maãu ñöôïc trình baøy ôû baûng 3.2. Baûng 3.2. Soá maãu maùu thí nghieäm theo caùc löùa ñeû STT Löùa ñeû Soá boø khaûo saùt (con) Soá maãu maùu (maãu) 1 Boø tô 7 21 2 Löùa 1 7 21 3 Löùa 2 7 21 4 Löùa 3 4 12 5 Löùa 4 5 15 Toång 30 90 3.4.1.3. Boá trí khaûo saùt theo töøng nhoùm beänh 22 Thöïc hieän ôû 90 maãu maùu ñöôïc phaân theo töøng nhoùm beänh ñöôïc trình baøy ôû baûng 3.3. Baûng 3.3. Soá maãu maùu thí nghieäm theo tình traïng chaäm ñoäng duïc STT Tình traïng chaäm ñoäng duïc Soá löôïng (con) Laàn laáy maùu Laàn 1 Laàn 2 Laàn 3 1 U nang noaõn 18 18 18 18 2 Buoàng tröùng keùm phaùt trieån 7 7 7 7 3 Toàn hoaøng theå 5 5 5 5 Toång 30 30 30 30 3.4.2. Khaùm qua tröïc traøng 3.4.2.1. Toàn hoaøng theå: khaùm qua tröïc traøng thaáy moät beân buoàng tröùng hoaëc caû hai beân buoàng tröùng to leân, sôø thaáy hoaøng theå to, nhoâ leân khoûi beà maët cuûa buoàng tröùng. Neáu con vaät khoâng coù chöõa vaø khoâng ñoäng duïc maø kieãm tra thaáy coù hoaøng theå thì ñoù laø toàn hoaøng theå. 3.4.2.2. Buoàng tröùng keùm phaùt trieån: khaùm qua tröïc traøng bieåu hieän cho thaáy buoàng tröùng khoâng coù thay ñoåi, khoâng khaùm ñöôïc noaõn baøo hoaëc hoaøng theå. Coù tröôøng hôïp chæ coù moät beân buoàng tröùng coù hoaøng theå. Buoàng tröùng nhoû laïi chæ baèng haït ñaäu (ñaäu Cove). Neáu kieåm tra nhieàu laàn thaáy buoàng tröùng khoâng thay ñoåi thì coù theå keát luaän buoàng tröùng ñaõ bò teo. Tröøông hôïp naøy boø thöôøng bieåu hieän ñoäng duïc khoâng roõ hoaëc coù ñoäng duïc nhöng khoâng ruïng tröùng, chu kyø ñoäng duïc keùo daøi. 3.4.2.3. U nang noaõn: khaùm qua tröïc traøng moät phaàn hoaëc coù theå toaøn boä buoàng tröùng loài loõm, theå tích teo nhoû, coù theå sôø thaáy buoàng tröùng bò teo vaø chai cöùng, buoàng tröùng nhoû laïi vaø khi khaùm seõ laøm con vaät ñau ñôùn (Ngoâ Troïng Hieáu, 2005). 3.4.3. Laáy maùu vaø ly taâm huyeát thanh 23 3.4.3.1. Caùch laáy maùu Coá ñònh boø sao cho boø khoâng gaây nguy hieåm cho ngöôøi laáy maùu Ñeo gaêng tay voâ truøng Xaùc ñònh tónh maïch co
TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP HỒ CHÍ MINH KHOA CHĂN NUÔI - THÚ Y LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP SỬ DỤNG KỸ THUẬT XÉT NGHIỆM P-EIA ĐỂ KHẢO SÁT HÀM LƯNG PROGESTERONE Ở BÒ HẬU BỊ VÀ BÒ LỨA CHẬM ĐỘNG DỤC TẠI XÃ LAI UYÊN VÀ XÃ LAI HƯNG HUYỆN BẾN CÁT TỈNH BÌNH DƯƠNG Ngành Khoá Lớp Sinh viên thực -2006- : Thú Y : 2001-2006 : Thú Y 18 : LƯU XUÂN KỲ TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP HỒ CHÍ MINH KHOA CHĂN NUÔI - THÚ Y LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP SỬ DỤNG KỸ THUẬT XÉT NGHIỆM P-EIA ĐỂ KHẢO SÁT HÀM LƯNG PROGESTERONE Ở BÒ HẬU BỊ VÀ BÒ LỨA CHẬM ĐỘNG DỤC TẠI XÃ LAI UYÊN VÀ XÃ LAI HƯNG HUYỆN BẾN CÁT TỈNH BÌNH DƯƠNG Giáo viên hướng dẫn: TS NGUYỄN VĂN THÀNH Sinh viên thực hiện: LƯU XUÂN KỲ -2006- XÁC NHẬN CỦA GIÁO VIÊN HƯỚNG DẪN Họ tên sinh viên thực tập: LƯU XUÂN KỲ Tên luận văn: “Sử dụng kỹ thuật xét nghiệm P-EIA để khảo sát hàm lượng progesterone bò hậu bò bò lứa chậm động dục xã Lai Uyên xã Lai Hưng huyện Bến Cát tỉnh Bình Dương” Đã hoàn thành luận văn theo yêu cầu giáo viên hướng dẫn ý kiến nhận xét, đóng góp hội đồng chấm luận văn tốt nghiệp khoa ngày Giáo viên hướng dẫn TS NGUYỄN VĂN THÀNH iii LỜI CẢM ƠN Kính dâng lên cha mẹ người sinh thành dạy dỗ điểm tựa tinh thần cho Chân thành cảm ơn Ban Giám Hiệu, Ban Chủ Nhiệm Khoa Chăn Nuôi Thú Y, toàn thể quý thầy cô trường Đại Học Nông Lâm thành phố Hồ Chí Minh truyền đạt kiến thức quý báu cho suốt thời gian học tập Chân thành ghi ơn TS Nguyễn Văn Thành tận tình hướng dẫn, giúp đỡ suốt thời gian thực tập giúp hoàn thành luận văn tốt nghiệp Xin cảm ơn ban lãnh đạo toàn thể anh chò phòng kỹ thuật Chi Cục Thú Y tỉnh Bình Dương tạo điều kiện thuận lợi cho thực đề tài Xin cảm ơn thầy cô, anh chò Khoa Công Nghệ Sinh Học trường Đại Học Dân Lập Bình Dương giúp đỡ thực đề tài iv MỤC LỤC Trang PHẦN I MỞ ĐẦU 1.1 ĐẶT VẤN ĐỀ 1.2 MỤC ĐÍCH YÊU CẦU 1.2.1 Mục đích 1.2.2 Yêu cầu PHẦN II TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 TÌNH HÌNH CHĂN NUÔI, VỊ TRÍ HỘ CHĂN NUÔI BÒ Ở BẾN CÁT 2.1.1 Vò trí đòa lý huyện Bến Cát 2.1.2 Đặc điểm khí hậu huyện Bến Cát 2.2 BIẾN ĐỔI CƠ QUAN SINH DỤC TRONG MỘT CHU KỲ ĐỘNG DỤC KHI KIỂM TRA BẰNG SỜ NẮN QUA TRỰC TRÀNG VÀ QUA ÂM ĐẠO 2.3 CÁC CÔNG TRÌNH NGHIÊN CỨU VỀ RỐI LOẠN SINH DỤC VÀ HÀM LƯNG PROGESTERONE 2.4 CÁC YẾU TỐ TÁC ĐỘNG LÊN SỰ SINH SẢN BÒ CÁI 2.4.1 Yếu tố giống bò 2.4.2 Yeáu tố môi trường 2.4.3 Một số nguyên nhân gây bò không động dục 2.4.3.1 Tồn hoàng thể 2.4.3.2 U nang buồng trứng 2.4.3.3 Buồng trứng bò teo giảm 10 2.4.3.4 Viêm tử cung viêm buồng trứng 10 2.5 VAI TRÒ CỦA PROGESTERONE, ESTROGEN VÀ PROSTASGLANDINE 14 v 2.5.1 Progesterone 14 2.5.1.1 Nguồn gôùc 14 2.5.1.2 Bản chất cấu trúc phân tử progesterone 14 2.5.1.3 Vận chuyển, chuyển hóa tác dụng progesterone 15 2.5.2 Estrogen 16 2.5.3 Prostasglandine 17 2.6 KỸ THUẬT ELISA 17 2.6.1 Elisa trực tiếp (Direct ELISA) 18 2.6.2 ELISA giaùn tieáp (Indirect ELISA) 18 2.6.3 Sandwich ELISA 18 2.6.4 Phản ứng ELISA caïnh tranh: C- ELISA ( Competition ELISA) 19 2.6.5 Các yếu tố ảnh hưởng đến độ nhạy phản ứng ELISA 19 2.6.6 Các yếu tố ảnh hưởng đến kết ELISA 19 PHẦN III NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP KHẢO SÁT 20 3.1 THỜI GIAN VÀ ĐỊA ĐIỂM KHẢO SÁT 20 3.2 ĐỐI TƯNG KHẢO SÁT 20 3.3 NỘI DUNG KHẢO SÁT 20 3.4 PHƯƠNG PHÁP TIẾN HÀNH 20 3.4.1 Bố trí thí nghiệm 20 3.4.1.1 Bố trí khảo sát theo nhóm máu lai HF 20 3.4.1.2 Bố trí khảo sát theo lứa đẻ 21 3.4.1.3 Bố trí khảo sát theo nhóm bệnh 21 3.4.2 Khám qua trực tràng 22 3.4.2.1 Tồn hoàng thể 22 3.4.2.2 Buồng trứng phát triển 22 3.4.2.3 U nang noaõn 22 vi 3.4.3 Lấy máu ly tâm huyết 22 3.4.3.1 Caùch lấy máu 22 3.4.3.2 Cách ly tâm máu 22 3.4.3.3 Các tiêu khảo sát 23 3.4.4 Kyõ thuaät P-EIA 23 3.4.4.1 Những thành phần có boä kit 23 3.4.4.2 Những dụng cụ cần có 24 3.4.4.3 Lời khuyên thận trọng dùng 25 3.4.4.4 Chuẩn bò xét nghiệm 25 3.4 4.5 Tiến hành xét nghiệm 25 3.4.4.6 Tính toán kết 26 3.5 PHƯƠNG PHÁT XỬ LÝ SỐ LIEÄU 26 PHẦN IV KẾT QUẢ THẢO LUẬN 27 4.1 HÀM LƯNG PROGESTERONE Ở BÒ TỒN HOÀNG THỂ, U NANG NOÃN VÀ BUỒNG TRỨNG KÉM PHÁT TRIỂN 27 4.2 HÀM LƯNG PROGESTERONE Ở BÒ TỒN HOÀNG THỂ THEO NHÓM GIỐNG LAI 30 4.3 HÀM LƯNG PROGESTERONE BÒ TỒN HOÀNG THỂ THEO LỨA ĐẺ 31 4.3.1 Hàm lượng progesterone bò tồn hoàng thể lứa đẻ 32 4.3.2 Hàm lượng progesterone bò tồn hoàng thể theo lứa đẻ bò tơ 33 4.4 HÀM LƯNG PROGESTERONE Ở BÒ U NANG NOÃN THEO NHÓM GIỐNG LAI HF 34 4.5 HÀM LƯNG PROGESTERONE Ở BÒ U NANG NOÃN THEO LỨA ĐẺ 35 vii 4.5.1 Hàm lượng progesterone bò u nang noãn lứa đẻ 35 4.5.2 Hàm lượng progesterone bò u nang noãn theo lứa đẻ bò tơ 37 4.6 HÀM LƯNG PROGESTERONE Ở BÒ BUỒNG TRỨNG KÉM PHÁT TRIỂN THEO NHÓM GIỐNG LAI HF 38 4.7 HÀM LƯNG PROGESTERONE Ở BÒ BUỒNG TRỨNG KÉM PHÁT TRIỂN THEO LỨA ĐẺ 40 4.7.2 Hàm lượng progesterone bò buồng trứng phát triển theo lứa đẻ bò tơ 41 PHẦN V KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 43 5.1 KẾT LUẬN 43 5.2 ĐỀ NGHỊ 43 viii DANH SÁCH CÁC BẢNG Trang Bảng 2.1 Số lượng bò sữa qua năm tỉnh bình dương Bảng 2.2 Biến đổi quan sinh dục chu kỳ động dục kiểm tra sờ nắn qua trực tràng qua âm đạo Bảng 2.3 Các yếu tố tác động lên sinh sản bò Bảng 3.1 Số mẫu máu thí nghiệm nhóm giống 21 Bảng 3.2 Số mẫu máu thí nghiệm theo lứa đẻ 21 Bảng 3.3 Số mẫu máu thí nghiệm theo tình trạng chậm động dục 21 Bảng 4.1 Hàm lượng progesterone bò tồn hoàng thể, u nang noãn buồng trứng phát triển 27 Bảng 4.2 Hàm lượng progesterone bò tồn hoàng thể theo nhóm giống lai HF 30 Bảng 4.3 Hàm lượng progesterone bò tồn hoàng thể lứa đẻ 32 Bảng 4.4 Hàm lượng progesterone bò tồn hoàng thể theo lứa đẻ bò tơ 33 Bảng 4.5 Hàm lượng progesterone bò u nang noãn theo nhóm lai HF 34 Bảng 4.6 Hàm lượng progesterone bò u nang noãn lứa đẻ 36 Bảng 4.7 Hàm lượng progesterone bò u nang noãn theo lứa đẻ bò tơ 37 Bảng 4.8 Hàm lượng progesterone bò buồng trứng phát triển theo nhóm giống lai HF 38 Bảng 4.9 Hàm lượng progesterone bò buồng trứng phát triển lứa đẻ 40 Bảng 4.10 Hàm lượng progesterone bò buồng trứng phát triển bò lứa, bò tơ 41 ix DANH SAÙCH CAÙC HÌNH Trang Hình 2.1 Cấu trúc Prostaglandin 17 Hình 3.1 Làm phản ứng Elisa 23 Hình 3.2 Đọc phản ứng Elisa 23 Hình 3.3 Bộ kít P-EIA 24 Hình 3.4 Pippet 25 Hình 3.5 Máy laéc 25 x 33 động sau: lấy máu lần thứ cho thấy hàm lượng progesterone cao nhóm bò lai F2HF 11,65ng/ml thấp bò lai F3HF 9ng/ml Lấy máu lần thứ hai hàm lượng progesterone cao nhóm bò lai F2HF 10,55ng/ml thấp bò F3HF 8,12ng/ml Lấy máu lần thứ ba hàm lượng progesterone cao nhóm bò lai F3HF 9ng/ml thấp bò F2HF 7,16ng/ml Qua kết khảo sát bò chậm động dục xếp theo nhóm giống lai HF có bò F2HF F3HF tồn hoàng thể 4.3 HÀM LƯNG PROGESTERONE Ở BÒ TỒN HOÀNG THỂ THEO LỨA ĐẺ 4.3.1 Hàm lượng progesterone bò tồn hoàng thể lứa đẻ Kết khảo sát bò tồn hoàng thể theo lứa đẻ: bò lứa 1, bò lứa 2, bò lứa trình bày qua bảng 4.3 biểu đồ 4.6 Bảng 4.3 Hàm lượng progesterone bò tồn hoàng thể lứa đẻ S Lứa đẻ TT Lứa Lứa Lứa Trung bình Hàm lượng progesterone (ng/ml) Lấy máu lần Lấy máu lần Lấy máu lần 20 17 14,5 10 8,5 4,85 8,2 4,8 12,73±6,36 11,17±5,06 8,05±5,59 Hàm lượng Progesterone (ng/ml) 34 25 20 20 17 15 14,5 10 10 8,2 8,5 4,85 4,8 Lần Lứa Lần Lứa Lần Lứa Biểu đồ 4.6 Hàm lượng progesterone bò tồn hoàng thể lứa đẻ Từ bảng 4.3 biểu đồ 4.6 cho thấy lấy máu lần thứ bò lứa có hàm lượng progesterone 20ng/ml, lần thứ hai 17ng/ml, lần thứ ba giảm 14,5ng/ml Bò lứa lấy máu lần thứ có hàm lượng progesterone 10ng/ml, lấy máu lần thứ hai có hàm lượng progesterone la 8,5ng/ml, lấy máu lần thứ ba có hàm lượng progesterone 4,85ng/ml Bò lứa lấy máu lần thứ có hàm lượng progesterone 8,2ng/ml, lấy máu lần thứ hai có hàm lượng progesterone la 8ng/ml, lấy máu lần thứ ba có hàm lượng progesterone 4,8ng/ml Chúng chúng nhận thấy lần lấy máu có hàm lượng progesterone biến động sau: - Lấy máu lần thứ hàm lượng progesterone cao lứa 20ng/ml, thấp lứa 8,2ng/ml - Lấy máu lần thứ hai hàm lượng progesterone cao lứa 17ng/ml, thấp lứa 8ng/ml - Lấy máu lần thứ ba hàm lượng progesterone cao lứa 14,5ng/ml, thấp lứa 4,8ng/ml 35 Qua bảng 4.3 biểu đồ 4.6 hàm lượng progesterone bò lứa 1, lứa 2, lứa bò tồn hoàng thể 4.3.2 Hàm lượng progesterone bò tồn hoàng thể bò lứa bò tơ Kết khảo sát bò tồn hoàng thể theo lứa đẻ bò tơ trình bày qua bảng 4.4 biểu đồ 4.7 Bảng 4.4 Hàm lượng progesterone bò tồn hoàng thể bò lứa bò tơ Hàm lượng progesterone (ng/ml) Lần Laàn Laàn 8,7±0,42 8,41±0,41 6,75±3,18 12,73±6,36 11,17±5,06 8,05±5,59 Lứa đẻ Hàm lượng Progesterone (ng/ml) Bò tơ Bò lứa 14 12,73 12 10 8,7 11,17 8,41 8,05 6,75 Lần Bò tơ Lần Lần Bò lứa Biểu đồ 4.7 Hàm lượng progesterone bò tồn hoàng thể bò lứa bò tơ Từ bảng 4.4 biểu đồ 4.7 cho thấy lấy máu bò tơ lần thứ có hàm lượng progesterone trung bình 8,7ng/ml, lần thứ hai 8,41ng/ml lần thứ ba 6,75ng/ml.Bò lứa lây máu lần thứ có hàm lượng progesterone trung bình 12,73ng/ml, lần thứ hai la 11,17øng/ml, lần thứ ba giảm 8,05ng/ml 36 4.4 HÀM LƯNG PROGESTERONE Ở BÒ U NANG NOÃN THEO NHÓM LAI HF Kết khảo sát bò u nang noãn theo nhóm giống lai F1 HF, 12 F2 HF, F3 HF trình bày qua bảng 4.5 biểu đồ 4.8 Bảng 4.5 Hàm lượng progesterone bò u nang noãn theo nhóm lai HF Giống Hàm lượng progesterone (ng/ml) lai HF Lấy máu lần Lấy máu lần Lấy máu lần F1HF 2,11±1,63 1,28±0,42 1,4±1,14 F2HF 0,93±0,54 1,18±0,74 1,05±0,99 F3HF 0,85 0,35 1,09 Hàm lương Progesterone (ng/ml) S TT 2,5 2,11 1,5 0,5 1,28 0,93 1,18 0,85 1,4 1,09 1,05 0,35 Laàn Laàn F1HF F2HF Lần F3HF Biểu đồ 4.8 Hàm lượng progesterone bò u nang noãn theo nhóm lai HF Qua bảng 4.5 biểu đồ 4.8 lấy máu lần thứ bò F1HF có hàm lượng progesterone trung bình 2,11ng/ml, lần thứ hai giảm 1,28ng/ml, lần thứ ba tiếp tục giảm 1,4ng/ml Lấy máu lần thứ bò F2HF có hàm lượng progesterone 0,93ng/ml, lần thứ hai tăng lên 1,18ng/ml, lần thứ ba 1,05ng/ml Lấy máu lần thứ bò F3HF có hàm lượng progesterone 0,85ng/ml, lần thứ hai giảm 0,35ng/ml, lần thứ ba tăng lên 1,09ng/ml Chúng nhận thấy hàm lượng progesterone lần lấy máu biến động sau: lấy 37 máu lần thứ cho thấy hàm lượng progesterone cao nhóm bò lai F1HF 2,11 ng/ml thấp bò lai F3HF 0,85ng/ml Lấy máu lần thứ hai hàm lượng progesterone cao nhóm bò lai F1HF 1,28ng/ml thấp bò F3HF 0,35ng/ml Lấy máu lần thứ ba hàm lượng progesterone cao nhóm bò lai F1HF 1,4ng/ml thấp bò F2HF 1,05ng/ml Qua kết khảo sát hàm lượng progesterone bò F1HF, F2HF, F3HF bò u nang noãn ghi nhận 4.5 HÀM LƯNG PROGESTERONE Ở BÒ U NANG NOÃN THEO LỨA ĐẺ 4.5.1 Hàm lượng progesterone bò u nang noãn lứa đẻ Kết khảo sát bò u nang noãn theo lứa đẻ: bò lứa 1, bò lứa 2, bò lứa 3, bò lứa trình bày qua bảng 4.6 biểu đồ 4.9 Bảng 4.6 Hàm lượng progesterone bò u nang noãn lứa đẻ S TT Lứa đẻ Lứa Lứa Lứa Lứa Trung bình Hàm lượng progesterone (ng/ml) Lấy máu Lấy máu Lấy máu lần lần lần 0,92±0,79 0,66±0,40 0,85±0,37 1,15±0,62 1,55±0,65 0,46±0,15 0,88±0,50 1,56±0,76 1,25±0 1,99±1,63 1,25±0,66 2,1±1,46 1,3±1,07 1,2±0,66 1,15±1,01 Hàm lượng Progesterone (ng/ml) 38 2,5 1,56 1,5 2,1 1,99 1,15 0,92 0,88 1,55 1,25 0,66 0,5 1,25 0,85 0,46 Laàn Lứa Lứa Lần Lứa Lần Lứa Biểu đồ 4.9 Hàm lượng progesterone bò u nang noãn lứa đẻ Qua bảng 4.6 biểu đồ 4.9 cho thấy lấy máu bò tơ lần thứ có hàm lượng progesterone trung bình 0,55ng/ml, lần thứ hai 0,48ng/ml lần thứ ba 1,09ng/ml Bò lứa thấy hàm lượng progesterone lấy máu lần thứ 0,92ng/ml, lần thứ hai 0,66ng/ml, lần thứ ba 0,85ng/ml Bò lứa lấy máu lần thứ có hàm lượng progesterone 1,15ng/ml, lấy máu lần thứ hai có hàm lượng progesterone tăng lên 1,55ng/ml, lấy máu lần thứ ba có hàm lượng progesterone giảm 0,46ng/ml Bò lứa lấy máu lần thứ có hàm lượng progesterone 0,88ng/ml, lấy máu lần thứ hai có hàm lượng progesterone tăng lên 1,56ng/ml, lấy máu lần thứ ba có hàm lượng progesterone 1,25ng/ml Bò lứa lấy máu lần thứ có hàm lượng progesterone 1,99ng/ml, lấy máu lần thứ hai có hàm lượng progesterone 1,25ng/ml, lấy máu lần thứ ba có hàm lượng progesterone tăng lên 2,1ng/ml Chúng chúng nhận thấy lần lấy máu có hàm lượng progesterone biến động sau: - Lấy máu lần thứ hàm lượng progesterone cao lứa 1,99ng/ml, thấp lứa 0,88ng/ml - Lấy máu lần thứ hai hàm lượng progesterone cao lứa 1,56ng/ml, thấp lứa 0,66ng/ml 39 - Lấy máu lần thứ ba hàm lượng progesterone cao lứa 2,1ng/ml, thấp lứa 0,46ng/ml Qua kết khảo sát hàm lượng progesterone ghi nhận bò lứa 1, lứa 2, lứa 3, lứa bò u nang noãn 4.5.2 Hàm lượng progesterone bò u nang noãn bò lứa bò tơ Kết khảo sát bò u nang noãn theo lứa đẻ bò tơ trình bày qua bảng 4.7 biểu đồ 4.10 Bảng 4.7 Hàm lượng progesterone bò u nang noãn bò lứa, bò tơ Hàm lượng progesterone (ng/ml) Lấy máu lần Lấy máu lần Lấy máu lần 0,55 0,48 1,09 1,3±1,07 1,2±0,66 1,15±1,01 Lứa đẻ Hàm lượng Progesterone (ng/ml) Bò tơ Bò lứa 1,4 1,3 1,2 1,2 1,15 1,09 0,8 0,6 0,4 0,48 0,55 0,2 Lần Lần Bò lứa Lần Bò tơ Biểu đồ 4.10 Hàm lượng progesterone bò u nang noãn bò lứa, bò tơ Qua bảng 4.7 biểu đồ 4.10 cho thấy lấy máu bò tơ lần thứ có hàm lượng progesterone trung bình 0,55ng/ml, lần thứ hai 0,48ng/ml lần thứ ba 1,09ng/ml.Bò lứa lây máu lần thứ có hàm lượng progesterone trung bình 1,3ng/ml, lần thứ hai la 1,2øng/ml, lần thứ ba giảm 1,15ng/ml 40 4.6 HÀM LƯNG PROGESTERONE Ở BÒ BUỒNG TRỨNG KÉM PHÁT TRIỂN THEO NHÓM GIỐNG LAI HF Kết khảo sát bò có buồng trứng phát triển theo nhóm giống lai HF gồm bò F1 HF, bò F2 HF trình bày qua bảng 4.8 biểu đồ 4.11 Bảng 4.8 Hàm lượng progesterone bò buồng trứng phát triển theo nhóm giống lai HF Giống Hàm lượng progesterone (ng/ml) TT lai HF Lấy máu lần Lấy máu lần Lấy máu lần F1HF 0,2 0,4 0,15 F2HF 0,71±0,56 0,64±0,28 0,56±0,23 Hàm lượng Progesterone (ng/ml) S 0,8 0,7 0,6 0,5 0,4 0,3 0,2 0,1 0,71 0,64 0,56 0,4 0,2 Lần 0,15 Lần F2HF Lần F1HF Biểu đồ 4.11 Hàm lượng progesterone bò buồng trứng phát triển theo nhóm giống lai HF Qua bảng 4.8 biểu đồ 4.11 lấy máu lần thứ bò F1HF có hàm lượng progesterone 0,2ng/ml, lần thứ hai 0,4ng/ml, lần thứ ba giảm 1,15ng/ml Lấy máu lần thứ bò F2HF có hàm lượng progesterone … trung bình 0,71ng/ml, lần thứ hai giảm 0,64ng/ml, lần thứ ba 0,56ng/ml 41 Chúng nhận thấy hàm lượng progesterone lần lấy máu biến động sau: - Lấy máu lần thứ cho thấy hàm lượng progesterone cao nhóm bò lai F2HF 0,71 ng/ml thấp bò lai F1HF 0,2ng/ml - Lấy máu lần thứ hai hàm lượng progesterone cao nhóm bò lai F2HF 0,64ng/ml thấp bò F1HF 0,4ng/ml - Lấy máu lần thứ ba hàm lượng progesterone cao nhóm bò lai F2HF 0,56ng/ml thấp bò F1HF 0,15ng/ml Qua bảng 4.6 biểu đồ 4.11 nhận thấy hàm lượng progesterone bò buồng trứng phát triển theo nhóm giống F1HF F2HF từ 0,15 ng/ml đến 0,71ng/ml 4.7 HÀM LƯNG PROGESTERONE Ở BÒ BUỒNG TRỨNG KÉM PHÁT TRIỂN THEO LỨA ĐẺ 4.7.1 Hàm lượng progesterone bò buồng trứng phát triển lứa đẻ Kết khảo sát bò buồng trứng phát triển gồm bò lứa 1, bò lứa 2, bò lứa trình bày qua bảng 4.9 biểu đồ 4.12 Bảng 4.9 Hàm lượng progesterone bò buồng trứng phát triển lứa đẻ S TT Lứa đẻ Lứa Lứa Lứa Trung bình Hàm lượng progesterone (ng/ml) Lấy máu lần Lấy máu lần Lấy máu lần 0,6 0,87 0,55 0,2 0,4 0,15 0,7 0,95 0,74 0,5±0,27 0,74±0,3 0,48±0,3 Haøm lượng Progesterone (ng/ml) 42 0,9 0,8 0,7 0,6 0,5 0,4 0,3 0,2 0,1 0,95 0,87 0,7 0,74 0,6 0,55 0,4 0,2 Lần 0,15 Lần Lứa Lứa Lần Lứa Biểu đồ 4.12 Hàm lượng progesterone bò buồng trứng phát triển lứa đẻ Qua bảng 4.9 biểu đồ 4.12 cho thấy lấy máu bò lứa có hàm lượng progesterone lấy máu lần thứ 0,6ng/ml, lần thứ hai 0,87ng/ml, lần thứ ba 0,55ng/ml Bò lứa lấy máu lần thứ có hàm lượng progesterone 0,2ng/ml, lấy máu lần thứ hai có hàm lượng progesterone tăng lên 0,4ng/ml, lấy máu lần thứ ba có hàm lượng progesterone giảm 0,15ng/ml Bò lứa lấy máu lần thứ có hàm lượng progesterone 0,7ng/ml, lấy máu lần thứ hai có hàm lượng progesterone tăng lên 0,95ng/ml, lấy máu lần thứ ba có hàm lượng progesterone 0,74ng/ml Chúng chúng nhận thấy lần lấy máu có hàm lượng progesterone biến động sau: - Lấy máu lần thứ hàm lượng progesterone cao lứa 0,7ng/ml, thấp bò lứa 0,2ng/ml - Lấy máu lần thứ hai hàm lượng progesterone cao lứa 0,95ng/ml, thấp bò lứa 0,4ng/ml 43 - Lấy máu lần thứ ba hàm lượng progesterone cao lứa 0,74ng/ml, thấp lứa 0,15ng/ml 4.7.2 Hàm lượng progesterone bò buồng trứng phát triển bò lứa bò tơ Kết khảo sát bò có buồng trứng phát triển bò lứa va 3ø bò tơ trình bày qua bảng 4.10 biểu đồ 4.13 Bảng 4.10 Hàm lượng progesterone bò buồng trứng phát triển bò lứa, bò tơ Lứa đẻ Hàm lượng Progesterone (ng/ml) Bò tơ Bò lứa 0,9 0,8 0,7 0,6 0,5 0,4 0,3 0,2 0,1 Hàm lượng progesterone (ng/ml) Lần Lần Laàn 0,74±0,72 0,51±0,24 0,52±0,28 0,5±0,27 0,74±0,3 0,48±0,3 0,74 0,74 0,52 0,5 0,51 Lần Lần Bò tơ 0,48 Lần Bò lứa Biểu đồ 4.13 Hàm lượng progesterone bò buồng trứng phát triển bò lứa, bò tơ Qua bảng 4.10 biểu đồ 4.13 cho thấy lấy máu bò tơ lần thứ có hàm lượng progesterone trung bình 0,74ng/ml, lần thứ hai 0,51ng/ml lần thứ ba 0,52ng/ml Bò lứa lây máu lần thứ có hàm lượng progesterone trung bình 0,5ng/ml, lần thứ hai 0,74øng/ml, lần thứ ba giảm 0,48ng/ml 44 PHẦN V KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1 Kết luận Qua tháng khảo sát bò chậm động dục sử dụng kỷ thuật P-IEA xét nghiệm hàm lượng progesterone có kết luận sau: -Sử dụng kỹ thuật xét nghiệm P-IEA vấn đề cần quan tâm, nhằm nâng cao khả sinh sản bò, tăng thời gian sản xuất đời bò cái, tăng mức tăng đàn sinh học, tăng số bê thay thế, giảm chi phí cho thú y gieo tinh nhân tạo, giảm số bò loại thải ý muốn -Kết cho thấy, biện pháp xét nghiệm P-IEA giúp kết luận trường hợp chậm động dục bò như: tồn hoàng thể, buồng trứng phát triển, u nang noãn - Hàm lượng progesterone trung bình bò bò tồn hoàng thể biến động từ 7,53ng/ml đến 11,12ng/ml - Hàm lượng progesterone trung bình bò có buồng trứng phát triển từ 0,26ng/ml đến 0,64ng/m - Hàm lượng progesterone trung bình bò bò u nang noãn từ 1,15ng/ml đến 1,26ng/ml 5.2 Đề nghò - Trong trình thực đề tài huyện Bến Cát tỉnh Bình Dương có đề nghò sau: - Nên tiếp tục sử dụng kỹ thuật P-IEA chẩn đoán bò chậm động dục - Nên phổ biến rộng rải kỹ thuật P-IEA đầu tư trang thiết bò chi cục Thú y tỉnh giúp chẩn đoán bệnh chậm động dục nhanh chống cho Thú y viên -Nên tổ chức hội thảo bệnh sản khoa, quy trình xét nghiệm P-IEA cho người chăn nuôi 45 TÀI LIỆU THAM KHẢO Lê Xuân Cương, 1986 Sách chăn nuôi gia súc Thư viện trường Đại Học Nông Lâm TP HCM Trương Nguyễn Huy Cường, 2002 Khaỏ sát tượng vô sinh, chậm sinh bò sữa huyện Long Thành, tỉnh Đồng Nai Luận văn tốt nghiệp Khoa chăn nuôi thú y Thư viện trường Đại Học Nông Lâm TP HCM Chung Anh Dũng, 2002 Sử dụng kỹ thuật miễn dòch phóng xạ số biện pháp kỹ thuật để nâng cao hiệu gieo tinh nhân tạo cũa bò lai hướng sữa Luận án tiến só nông nghiệp Viện Khoa Học Nông Nghiệp Miền Nam Chung Anh Dũng, 2002 Nghiên cứu động thái progessterone kỹ thuật ELISA để chẩn đoán chậm động dục heo hậu bò biện pháp can thiệp kích thích tố Luận án tiến só nông nghiệp Viện Khoa Học Nông Nghiệp Miền Nam Nguyễn Thanh Dương, Hoàng Kim Giao Lưu Khánh, 1995 Một số biện pháp làm giảm chậm sinh sản bò sữa Hội thảo quốc gia khoa học phát triển công nghệ đến năm 2000 Hội Chăn Nuôi Việt Nam Lê Hùng Hiệp, 2004 Luận văn tốt nghiệp Khoa chăn nuôi thú y Thư viện Trường Đại Học Nông Lâm TP HCM Phan Văn Kiểm, Tăng Xuân Lưu, 2004 Báo cáo khoa học chăn nuôi thú y Thư viện trường Đại Học Nông Lâm TP HCM Võ Văn Mộng, 2006 Sử dụng vòng prid kết hợp PGF2α điều trò bò chậm động dục xã Lai Hưng huyện Bến Cát tỉnh Bình Dương Luận văn tốt nghiệp Khoa chăn nuôi thú y Thư viện trường Đại Học Nông Lâm TP HCM Nguyễn Hữu Ninh , Bạch Đăng Phong, 1994 Bệnh sản khoa gia súc Nhà xuất nông nghiệp 10 Trònh Quang Phong, 2004 Luận văn tốt nghiệp Khoa chăn nuôi thú y Thư viện trường Đại Học Nông Lâm TP HCM 46 11 Cao Thanh Phú, 2003 Nghiên cứu động thái progessterone kỹ thuật PIEA để chẩn đoán điều trò bệnh sinh sản sau sinh bò sữa, liên hiệp hợp tác xã bò sữa Gia Đònh số hộ chăn nuôi xã Tân Thạnh Đông huyện Củ Chi, TPHCM Luận văn tốt nghiệp Thư viện Trường Đại Học Nông Lâm TP HCM 12 Nguyễn Minh Thanh, 2006 Khảo sát động thái progessterone kỹ thuật P-IEA ứng dụng chẩn đoán chậm động dục bò cho sữa Luận văn tốt nghiệp Khoa chăn nuôi thú y Thư viện Trường Đại Học Nông Lâm TP HCM 13 Nguyễn Văn Thành, 2003 Giáo trình sản khoa Thư viện trường Đại Học Nông Lâm TP HCM 14 Huỳnh Minh Trung, 2006 Sử dụng vòng xoắn prid liệu pháp hormone bò sữa chậm động dục trại bò Lai Uyên huyện Bến Cát tỉnh Bình Dương Luận văn tốt nghiệp Khoa chăn nuôi thú y Thư viện trường Đại Học Nông Lâm TP HCM 15 Nguyễn Đình Trường, 2005 Nghiên cứu trạng nhiểm bệnh TSWV (tomato spotted wilt virus) ớt kỹ thuật ELISA Và bước đầu xây dựng phương pháp chẩn đoán kỹ thuật RT_PCR Luận văn tốt nghiệp Khoa công nghệ sinh học Thư viện trường Đại Học Nông Lâm TP HCM 16 www.humans.be/ bioch20%eicosanoides.html 47 PHỤ LỤC Phụ lục 1: Kết progesterone S Hàm lượng Lứa Tình trạng bò TT Giống progesterone (ng/ml) trở ngại sinh sản đẻ Lần Lần Lần3 THT F2HF 8,2 4,8 UN F2HF 1,18 2,15 0,21 KT F2HF 1,8 0,45 0,65 UN F2HF 2,3 0,2 0,45 UN F2HF 0,8 1,7 0,5 UN F2HF 1,25 0,44 0,49 KT F2HF 0,55 0,2 0,17 THT F3HF 8,12 UN F2HF 0,45 0,6 1,2 KT 10 F2HF 0,7 0,95 0,74 UN 11 F2HF 0,52 1,02 1,25 UN 12 F2HF 0,44 1,8 0,54 UN 13 F2HF 0,55 0,48 1,09 UN 14 F2HF 1,27 2,05 3,96 UN 15 F1HF 4,4 1,7 2,5 UN 16 F1HF 2,1 1,65 0,58 KT 17 F1HF 0,2 0,4 0,15 THT 18 F2HF 8,4 8,7 4,5 UN 19 F1HF 0,71 1,31 0,69 KT 20 F2HF 0,6 0,87 0,55 UN 21 F1HF 0,44 1,04 0,45 THT 22 F2HF 20 17 14,5 UN 23 F2HF 0,65 0,48 0,55 UN 24 F3HF 0,85 0,35 1,09 KT 25 F2HF 0,4 0,74 0,82 UN 26 F1HF 2,9 0,7 2,79 THT 27 F2HF 10 8,5 4,85 UN 28 F2HF 0,57 1,1 1,07 UN 29 F2HF 1,23 2,1 1,25 KT 30 F2HF 0,2 0,65 0,45 UN: u nang noãn THT: tồn hoàng thể KT: buồng trứng phát triển ... dụng progesterone 15 2.5.2 Estrogen 16 2.5.3 Prostasglandine 17 2.6 KY THUAÄT ELISA 17 2.6.1 Elisa trực tiếp (Direct ELISA) 18 2.6.2 ELISA gián