Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống
1
/ 17 trang
THÔNG TIN TÀI LIỆU
Thông tin cơ bản
Định dạng
Số trang
17
Dung lượng
1,31 MB
Nội dung
TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM TP.HCM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC & KTMT BỘ MÔN: CÔNG NGHỆ ENZYME BÀI TIỂU LUẬN Đề tài CẢITIẾNNHỮNGPHẨMCHẤTCỦABÁNHMÌKHƠNGCHỨAGLUTENBẰNGCÁCHSỬDỤNGPROTEASETHUĐƯỢCTỪASPERGILLUSORYZAE Công nghệ enzyme GVHD: ThS Đào Thị Mỹ Linh Mục lục Công nghệ enzyme GVHD: ThS Đào Thị Mỹ Linh BẢNG PHÂN CÔNG CÔNG VIỆC ST MSSV T HỌ TÊN NHIỆM VỤ THỜI GIAN 2008110015 Phạm Thị Thúy An Dịch: tổng quan, giới Tuần 11 xong 2008110108 Huỳnh Huy Hoàng thiệu, tổng hợp word Dịch: vật liệu phương Tuần 10 xong 2008110368 Châu Thanh Xuân pháp Dịch: kết bàn Tuần 10 xong luận, tổng hợp word Công nghệ enzyme GVHD: ThS Đào Thị Mỹ Linh CẢITIẾNNHỮNGPHẨMCHẤTCỦABÁNHMÌKHƠNGCHỨAGLUTENBẰNGCÁCHSỬDỤNGPROTEASETHUĐƯỢCTỪASPERGILLUSORYZAE TỔNG QUAN Từ góc độ dinh dưỡng, bột gạo loại bột có giá trị phù hợp cho việc chế biến thực phẩm cho người bị dị ứng lúa mì Tuy nhiên, bánhmì làm từ bột gạo khó nướng thiếu gluten Chúng thấy trước lên men bột gạo, sửdụngAspergillusoryzae tạo điều kiện cho lên men tốt bột gạo khơng có glutenBánhmì phồng lên cải thiện đáng kể với khoảng thời gian dài trước lên men 550C Khối lượng ổ cụ thể (SLV) mà khơng có chất làm đặc polymer sau trình lên men 12h khoảng (2,98 ml/g) cao 2,2 lần so với sau (1,36 ml/g) Một thử nghiệm enzyme bột hoạt động protease giai đoạn trước trình lên men tăng 0,38-1,44 U/ml hoạt động tương quan với bánhmì phồng lên Hơn nữa, protease thương mại từ A oryzae cho kết tương tự với SLV đủ 3,03 ml/g Phân tích lưu biến cho thấy bột xử lý protease có độ nhớt bột tăng giảm khả phân giải bột tập hợp bột hạt sau tách phần protein lưu trữ Những kết cải thiện SLV chủ yếu A oryzae sinh protease làm ảnh hưởng đến lưu biến bột qua cải thiện độ phồng, lưu giữ khí trước nướng GIỚI THIỆU Lúa (Oryza sativa L.) khơngchứagluten protein, bột gạo loại bột ngũ cốc thích hợp cho người dân bị bệnh loét dày Bệnh celiac bệnh tự miễn ruột kích hoạt việc uống loại thực phẩm có chứa glutenchẳng hạn lúa mì, lúa mạch đen lúa mạch (Fasano Catassi, 2001) Các mạng gluten lúa mì xây dựngtừ gliadins glutenins, chịu trách nhiệm cho sức trương nở bột (Hoseney,1994), cung cấp bột với viscoelastic độc Công nghệ enzyme GVHD: ThS Đào Thị Mỹ Linh đáo khả giữ khí q trình lên men sản xuất nấm men Vì vậy, gluten thành phần bản, chịu trách nhiệm chất lượng cấu trúc tổng thể bánhmì Sản xuất bánhmìgluten đòi hỏi công nghệ khác Nếu bột gạo nhào trộn với nước có tính lưu động cao bột lúa mì độ nhớt cao Phương pháp sửdụng cho phát triển sản phẩm lên men từ bột khôngchứa gluten, đặc biệt bánh mì, bổ sung chất polyme kẹo cao su Xanthan hydroxypropylmethylcellulose (HMPC) để giống thuộc tính glutencách so sánh khối lượng cụ thể bánhmì ( Ahlborn et al, 2005), (Gallagher cộng sự, 2004) HMPC sửdụng mức độ > 2% dùng bột gạo để làm bánhmì (Gujral Rosell , 2004, Gujral cộng sự, 2003), giảm sửdụng cần thiết cho giảm đáng kể chi phí sản xuất bánhmì bột gạo Q trình lên men vi khuẩn enzym vi khuẩn sửdụng để cải thiện bánhmìkhơngglutenkhông cần bổ sung chất làm đặc polymer Điều ghi nhận vi khuẩn axit lactic có tác dụng có lợi đặc điểm hóa lý lưu biến gluten sourdoughs (Moore cộng sự, 2007; Schober cộng sự, 2007) Các enzyme chế biến bột gạo bánhmìkhơnggluten nghiên cứu nâng cao hiệu suất bánh mì, thúc đẩy mối liên kết protein với transglutaminase ( Gujral Rosell, 2004; Renzetti et al, 2008 ) dùngprotease thủy phân protein ( Renzetti Arendt , 2009) Nhiều nỗ lực, chẳng hạn mô tả trên, thực để cải thiện việc sản xuất bánhmìkhơng gluten, hầu hết phương pháp tiếp cận giai đoạn nghiên cứu thường sản xuất bánhmìkhơng đủ độ phồng Gần đây, cảitiến độc đáo bánhmìkhơnggluten báo cáo việc bổ sung glutathione cho bột gạo, chứng minh tạo bánhmì phồng to hơn, tức 2,4 lần so với điều khiển ( Yano, 2010 ) Aspergillusoryzae loại nấm sửdụng rộng rãi truyền thống Các ngành công nghiệp Nhật Bản, chẳng hạn sản xuất rượu gạo, nước tương, miso (đậu tương dán) Các enzym thủy phân tiết A oryzae, chẳng hạn amylase protease, sửdụng để làm giảm vật Công nghệ enzyme GVHD: ThS Đào Thị Mỹ Linh liệu, tạo hương vị màu sắc (Hara et al., 1992) Tuy nhiên, nghiên cứu tác động A oryzae hay enzym thuộc tính bột bột gluten báo cáo Trong nghiên cứu này, thấy A oryzaesửdụngchất phụ gia để làm bánhmìkhơnggluten mà khơngdùng polymer cho thấy việc xử lý Protease làm thay đổi tính lưu biến bột Hình Ảnh hưởng nhiệt độ ủ đến khối lượng ổ cụ thể Lát bánhmì khối lượng ổ bánhmì nướng khơngchứagluten thể trình lên men đập ủ 35, 45, 55, 650C 12 h với A oryzae Thanh lỗi lỗi tiêu chuẩn cho ba thí nghiệm độc lập Các chữ a, b cho thấy khác biệt đáng kể (5%) VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 3.1 Bột gạo Giống lúa Koshihikari, trồng cánh đồng thí nghiệm Viện Khoa học trồng (Tsukuba, Ibaraki, Nhật Bản ) thu hoạch năm 2010, sửdụng để sản xuất bột nghiên cứu Gạo trắng loại bỏ cám gạo bên (khoảng 10%) rửa nước, khoảng kg mẫu ngâm nước dư ( > 20 l) nhiệt độ phòng ( 250C ) Gạo ngâm để nước phơi mặt đất cáchsửdụng máy phay (SPM-R290, Nishimura Machine Works Co., Ltd.,Osaka, Japan) Công nghệ enzyme GVHD: ThS Đào Thị Mỹ Linh điều kiện ẩm ướt, khơng có nước dư thừa Bột sấy khô qua đêm máy sấy nhiệt độ kiểm sốt 600C Kích thước hạt bột đo cáchsửdụng máy phân tích kích thước hạt ( LS 13 320, Beckman Coulter, Fullerton, Hoa Kỳ) Hàm lượng tinh bột bị hỏng bột gạo xác định theo phương pháp Hiệp hội hóa học ngũ cốc Mỹ ( phương pháp AACC 76e31, 2000) sửdụng xét nghiệm thất thoát tinh bột (Megazyme Quốc tế Ai-len, Ai-len ) Độ ẩm tính tốn giảm khối lượng sau sấy 1350C sửdụng đồng hồ đo độ ẩm (MA35, Sartorius Cơ điện từ Nhật Bản, Tokyo, Nhật Bản) 3.2 Làm bánhmì A.oryzae thương mại, gọi koji (mạch nha lúa), sửdụng phụ gia thực phẩm (Miyako- Koji, Isesou Công ty TNHH, Tokyo, Nhật Bản) Protease thương mại (Protease A), α -amylase ( gọi Biozyme ), sửdụng làm phụ gia thực phẩm nghiên cứu này, tặng Viện Amano Enzyme Bột chuẩn bị với A oryzae trước lên men, sửdụng hỗn hợp 400 g bột gạo nước cho chứa 55% độ ẩm tương đối so với khối lượng ướt bột ban đầu 20 g koji thêm vào hỗn hợp toàn kết hợp sửdụng máy trộn điện cầm tay vòng phút Thùng bột đậy kín để giữ lại độ ẩm bột để qua đêm 55 0C, sau thêm g muối, 10 g đường g men khô vào bột Trộn 15 phút sửdụng máy đánh trứng máy trộn đứng (KSM150GR KitchenAid, St Joseph, MI) tốc độ trung bình (cấp độ 6) Trong xử lý với protease α-amylase, lượng enzyme thích hợp thêm vào 420 g bột (ẩm độ 57% ) phương pháp tương tự mơ tả sửdụng Sau đó, bột đặt vào chảo nướng (190x 90x 90 mm) lên men 380C 50-60 phút, độ ẩm 85%, sau nướng 150 0C 30 phút lò điện (Bistro NER301, Panasonic, Nhật Bản ) Sau bánh nguội, đặt túi nhựa bảo quản nhiệt độ phòng ( 250C) phân tích Khối lượng ổ cụ thể (SLV) tính số ổ/ trọng lượng (ml/g ), đo cáchsửdụng Công nghệ enzyme GVHD: ThS Đào Thị Mỹ Linh phương pháp thay hạt cải dầu ( Curic et al., 2008) Ba ổ bánhmì chuẩn bị cho mẫu giá trị trung bình sai số chuẩn tính tốn Hình Ảnh hưởng thời gian ủ lên mặt cắt ngang bánhmì xử lí với A oryzae 3.3 55oC Xử lý Enzyme Hai mẫu bột mì xử lý với A oryzae (mẫu 5g ) ngưng hoạt động đệm ly trích ( 10 mM đệm acetate, pH 5,0 0,5% NaCl) để nhiệt độ phòng giờ, trộn Lượng enzym thô thucách ly tâm 10.000 vòng 20 phút 4o C Khảo nghiệm α -amylase thực cáchsửdụng kit α-amylase A.oryzae ( Kikkoman Tổng công ty, Noda, Nhật Bản ), theo hướng dẫn Bộ làm việc sau: α- amylase phân cắt liên kết chất 2-chloro-4-nitrophenyl 6azide-6-deoxy-β-maltopentaoside (CNP) sản phẩm phản ứng có chứa CNP cắt để tạo glucose giải phóng CNP tự dư thừa glucoamylase β-glucosidase Phản ứng khởi xướng việc bổ sung enzym thô vô chất trước ủ 370C 10 phút phản ứng kết thúc cách cho thêm natri cacbonat Màu phenolat đo độ hấp thụ 400 nm Một đơn vị hoạt động α-amylase định nghĩa lượng enzyme mà tạo 1micromol CNP phút Công nghệ enzyme GVHD: ThS Đào Thị Mỹ Linh Một khảo nghiệm protease thực cáchsửdụngprotease khảo nghiệm chung (QuantiCleave Protease Khảo nghiệm Kit, Thermo Scientifit, Rockford, IL), theo hướng dẫn với số sửa đổi Khảo nghiệm dựa phương pháp mà axit trinitrobenzensulfoic (TNBSA) phản ứng với peptide amin bị cắt sửdụng casein succinylated có diện protease, tạo màu vàng cam (Hatakeyama et al., 1992) Phản ứng khởi xướng việc bổ sung enzym thô vào chất lên đĩa 96 giếng, ủ 370C, li tâm 800 rpm 20 phút ( Thermomixer nghi; Eppendorf, New York, NY) Chu kỳ ủ tương tự áp dụng sau bổ sung TNBSA đo độ hấp thụcáchsửdụng đầu đọc microplate 405 nm (Benchmark, BioRad, Hercules, CA) Các hoạt độ tính tốn hoạt độ trypsin tương đương, cung cấp protease chuẩn kit Trong nghiên cứu này, đơn vị hoạt động protease mẫu định nghĩa hoạt động 1mg trypsin tương đương Hoạt động cellulase xylanase đo theo hướng dẫn sửdụngbảngchất có chứa azurine cellulose liên kết chéo azurine arabinoxylan liên kết chéo (Megazyme quốc tế, Ai-len) Công nghệ enzyme GVHD: ThS Đào Thị Mỹ Linh Hình Bên trái bánhmìkhơng có gluten xử lý với α- amylase, bên phải bánhmìkhơng có gluten xử lý với protease 3.4 Phân tích lưu biến Phần cặn bột gạo phát dựa độ đục Một gam bột gạo ngâm 50 ml nước cất có/ khơng có Protease A (1 U), trước niêm phong ủ 15 550C Dịch huyền phù đặt trục lăn đo để quan sát trực tiếp Dịch huyền phù pha loãng 10 lần nước cất cho vào cuvette để đo độ đục Độ hấp thụ đo liên tục bước sóng 600 nm Phân tích tính quán bột thực cáchsửdụng gel kiểm tra tính để xác định chất lượng gạo, với số thay đổi (Cagampang et al., 1973) Một khối lượng tương tự bột có/ khơng có Protease A đặt vào ống 20x200 mm Các ống đặt theo chiều ngang giấy có kẻ dòng, chia vạch theo cm Chiều dài bột đo từ đáy ống nghiệm lên phía miệng sau 30 phút Mỗi lượt kiểm tra tiến hành trùng lặp Lượng gelatine hóa xác định cáchsửdụng máy nhớt phân tích nhanh (RVA ) (Model 3D; Newport Scientific, Warriewood, Australia) với quy mô phương pháp nhỏ, 3,5 g dịch bột gạo 25 ml nước cất Công nghệ enzyme GVHD: ThS Đào Thị Mỹ Linh ( Toyoshima cộng sự, 1997) có/ khơng có protease A (1 U ) đặt thùng chứa mẫu để phân tích RVA để 15 550C niêm phong Tính chất nhiệt độ đặc trưng RVA sau: giữ 50 0C 70 s, làm nóng 930C phút, giữ 93 0C phút, làm mát 500C phút, giữ 500C vòng phút Tốc độ khuấy 960 rpm 10 giây để đồng 3.5 mẫu, 160 rpm Điện di gel polyacrylamide Natri dodecylsulfate (SDS-PAGE) quan sát kính hiển vi bột SDS-PAGE thực gel chuẩn bị với 3% acrylamide 13% gel acrylamide tách Protein nhuộm màu xanh với Coomassie R-250 (CBB) Để xác định thành phần bột hạt tinh bột protein lưu trữ, bột nhuộm với CBB đặt kính trượt, trước quan sát thực cáchsửdụng kính hiển vi kỹ thuật số (VHX-2000 với ống kính VHZ100R/Z100W; Tổng cơng ty Keyence, Osaka, Nhật Bản) Công nghệ enzyme GVHD: ThS Đào Thị Mỹ Linh Hình Hình bột trình lên men; A, C bánhmì bị xẹp xuống lỗ khí lớn; hình B, D bánh phồng lên lỗ khí nhỏ ( có sửdụng protease) Phân tích thống kê 3.6 Nhiều mẫu so sánh sửdụng Excel, sai số mức ý nghĩa 5% KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 4.1 Hiệu suất sử A oryzae để lên men bột mì Trong nghiên cứu để làm bánh mì, bột gạo nghiền mịn điều kiện ẩm ướt (8,8% độ ẩm, hàm lượng amylose 16,8%, 1,8% hàm lượng tinh bột bị hư hỏng 20.5µ hạt có kích thước trung bình) Ảnh hưởng nhiệt độ bánhmì trước lên men với A oryzaeis thể hình SLV bánhmìkhơng có gluten phụ thuộc vào nhiệt độ lên men nồng độ SLV cao 2,98 ml /g, thu 55 độ C 12g Bánhmì làm 350C, hàm lượng glutenthu 2,65 ml/g, bột bị bao phủ toàn nấm, nhiệt độ thích hợp cho phát triển chúng Ngược lại, SLV thấp hàm lượng thu 1,64 m /g 45 0C có hương vị chua, khảo sát cho thấy nhiệt độ thuận lợi cho vi khuẩn gây hại khác lactobacillus, A oryzae Ở nhiệt độ cao, tức 650C, bánhmì bị biến dạng sản xuất thời gian nướng với SLV 1,81 ml/g Tóm lại, nhiệt độ dao động khoảng 55 0C thích hợp cho lên men A oryzae dựa hiệu suất SLV cao không bị nhiễm vi sinh vật Sinh khối sợi nấm hoạt động enzyme A oryzae yếu tố quan việc cải thiện cơng thức bánhmì 4.2 Hoạt động enzyme bột gạo Mặt cắt ngang bánhmìkhôngchứagluten chuẩn bị sửdụng lên men với A oryzae 12 h trình bày bảng SLV bánhmìkhơnggluten tăng lên theo thời gian lên men Các SLV thấp 1,36 ml /g 1,27 ml /g sau lên men Sau giờ, bột bánhmì phồng lên với 2,55 ml/g, SLV đạt 2,98 ml/g sau 12h lên men Tỷ lệ bánhmì phồng nở khoảng 2,2 lần so với bánh sau Việc sửdụng bột lên men (ví dụ, 12 h) kết bánhmì phồng tốt Ngược lại, mẫu bánhmì đối chứng, bánhmìkhơng lên men (ví dụ số Cơng nghệ enzyme GVHD: ThS Đào Thị Mỹ Linh h), ủ 550C 12 mà khơng có A oryzae, khơng tăng khí lưu giữ lại bên Sản xuất bánhmì oryzaea -amylase với thể tích lớn độ xốp cao báo cáo trước (Pritchard, 1992 Randez -Gil cộng sự, 1995) Sự diện amylase làm tăng mức độ lên men khử đường bột, thúc đẩy trình lên men nấm men (Goesaertet al., 2006), hoạt động enzyme α-amylase A Oryzae nâng cao chất lượng bánh Tuy nhiên, enzyme khảo nghiệm cho thấy hoạt động α -amylase giảm từ 2,44 U/ml đến 0.46 U/ml suốt trình lên men Có mối liên hệ ngược SLV bánhmìkhơnggluten hoạt động enzyme α-amylase (Hình 2) Việc giảm hoạt động enzyme α -amylase giảm ổn định nhiệt enzyme trình lên men 55 0C 12 (Chang cộng năm 1995; Pritchard, 1992) Ngược lại, hoạt động protease tăng dần khoảng 3,8 lần 12h lên men (1,44 U/ml ) so với ban đầu đạt sau (0,38 U/ml) Ngược lại, hoạt động cellulase xylanase thấp giảm trình lên men, chẳng hạn α-amylase (dữ liệu không hiển thị ) Các hoạt động enzyme nội sinh α-amylase, protease, cellulase, xylanase bột gạo không phát Những quan sát hoạt động protease có tác động tích cực làm bánhmì phồng lên bánh gạo khơng có gluten phân tích gen A oryzae hồn thành 135 gen mã hóa tiết proteinases tìm thấy (Machida et al.,2005) Tinh xác định proteasetừ A oryzae trình lên men cần thiết để hiểu đầy đủ chức chi tiết protease cụ thể 4.3 Tác động enzym thương mại xây dựngbánhmìBánhmì thực với enzym thương mại xác nhận ảnh hưởng hai enzym amylase proteasetừ A oryzae để cải thiện glutenbánhmì Mặt cắt ngang SLV bánhmìgluten thể hình Thử nghiệm làm bánhmìsửdụng enzyme 55 0C 15h cho thấy, protease làm bánhmì phồng tốt khơng có gluten với lương cao SLV ( 3,03 ml/g) điều hoà phân phối khí sửdụng 6.50 U protease 25,8 U α Công nghệ enzyme GVHD: ThS Đào Thị Mỹ Linh -amylase Tuy nhiên, Biozyme sản xuất bánh với lượng thấp SLV ( 2,34 ml/ g) không đồng Công nghệ enzyme GVHD: ThS Đào Thị Mỹ Linh Hình Ảnh hưởng protease lên việc lưu biến bột Sự xuất cặn bột mì nước đáy ống làm đục nước hình A Độ đục nước đo OD λ = 600 nm 4.4 Tính chất lưu biến bột gạo Công nghệ enzyme GVHD: ThS Đào Thị Mỹ Linh Đầu tiên, nghiên cứu tác động protease tạo khí q trình lên men (Hình 4) So sánh mẫu đối chứng với bột gạo sửdụngprotease A 550C 15h, cho thấy bột gạo sửdụngprotease tạo khí nhiều Mẫu đối chứng khơng tạo bọt khí khơng thể giữ lại khí q trình lên men, tương tự báo cáo trước (Yano, 2010 ) Do đó, u cầu cho việc tăng lượng SLV bột gạo tăng việc giữ khí q trình lên men Phân tích xem nguyên nhân giữ khí lại bột gạo nước Kiểm tra tốc độ lắng bột gạo sửdụngprotease cho thấy độ đục tương đối đạt 55% 1h Điều cho thấy việc sửdụng bột gạo có kích thước lớn lên men hiệu 4.5 Protein cấu trúc hạt bột gạo Glutein thành phần nội nhũ gạo, gồm hai thành phần chuỗi polypeptide chuỗi liên kết liên kết disulfide Chúng khẳng định việc giảm hàm lượng glutein bột gạo có sửdụngprotease phương pháp SDS-PAGE, glutein bị thủy phân tồn Phân tích cấu trúc vi thể cho thấy protein lưu trữ màu phản ứng với chất CBB Phân tích cho thấy protease bị liên kết chặt với tinh bột làm giảm phần tính thủy phân tình bột Phương pháp sửdụngprotease với hàm lượng thích hợp để tăng hiệu suất, cải thiện hiệu suất làm bánhmì Trước Schober cảitiến viêc tăng hiệu suất chất lượng sản xuất bánhmìsửdụng bột chua, acide lactic vi khuẩn tiết Cơng nghệ enzyme GVHD: ThS Đào Thị Mỹ Linh Hình Ảnh hưởng protein gạo Tấm bảng A kết SDS-PAGE protein gạo từ mẫu bột đối chứng khơng có protease trương lên bột có chứaproteaseNhững mũi tên biểu thị chuỗi poly glutein Hình B thị hình ảnh hiển vi tinh bột nhuộm màu mẫu KẾT LUẬN Kết cho thấy việc tăng SLV bánhmìkhơnggluten hoạt độ protease A oryzaeSựcải thiện liên quan đến tính chất việc xử lý bột, đặc biệt độ nhớt cao hơn, bột đóng cặn chậm Tính lưu biến bột gạo làm thuận lợi cho q trình cân khí lên men mà gây kết tụ protein tinh bột - protein bị biến tính bao phủ quanh hạt tinh bột Kết thí nghiệm phương pháp cho việc sản xuất bánhmìkhơng có gluten Tài liệu tham khảo Shigeki Hamada, Keitaro Suzuki, Noriaki Aoki 1, Yasuhiro Suzuki, Improvements in the qualities of gluten-free bread after using a protease obtained from Aspergillus oryzae, National Agriculture and Food Research Organization (NARO), Institute of Crop Science, 2-1-18 Kannondai, Tsukuba, Ibaraki 305-8518, Japan ... nghệ enzyme GVHD: ThS Đào Thị Mỹ Linh CẢI TIẾN NHỮNG PHẨM CHẤT CỦA BÁNH MÌ KHƠNG CHỨA GLUTEN BẰNG CÁCH SỬ DỤNG PROTEASE THU ĐƯỢC TỪ ASPERGILLUS ORYZAE TỔNG QUAN Từ góc độ dinh dưỡng, bột gạo loại... protease từ A oryzae để cải thiện gluten bánh mì Mặt cắt ngang SLV bánh mì gluten thể hình Thử nghiệm làm bánh mì sử dụng enzyme 55 0C 15h cho thấy, protease làm bánh mì phồng tốt khơng có gluten. .. Phương pháp sử dụng protease với hàm lượng thích hợp để tăng hiệu suất, cải thiện hiệu suất làm bánh mì Trước Schober cải tiến viêc tăng hiệu suất chất lượng sản xuất bánh mì sử dụng bột chua,