Nghiên cứu đặc điểm thực vật, sơ bộ xác định thành phần hóa học của một số loài thạch tùng thu hái ở tam đảo, vĩnh phúc

BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI - - VŨ THU THỦY Mã sinh viên: 1201605 NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT, SƠ BỘ XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA MỘT LOÀI THẠCH TÙNG THU HÁI Ở TAM ĐẢO, VĨNH PHÚC KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƢỢC SỸ HÀ NỘI – 2017 BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI VŨ THU THỦY Mã sinh viên: 1201605 NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT, SƠ BỘ XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA MỘT LOÀI THẠCH TÙNG THU HÁI Ở TAM ĐẢO, VĨNH PHÚC KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƢỢC SỸ Người hướng dẫn: PGS.TS Nguyễn Viết Thân DS Nguyễn Quang Hiệu Nơi thực hiện: Bộ môn Dƣợc liệu HÀ NỘI – 2017 LỜI CÁM ƠN Trong trình thực đề tài này, em nhận đƣợc nhiều quan tâm, giúp đỡ nhƣ động viên quý báu từ thầy giáo, cô giáo, gia đình bạn bè Với lòng kính trọng biết ơn sâu sắc mình, em xin phép gửi lời cám ơn chân thành tới PGS TS Nguyễn Viết Thân ngƣời thầy trực tiếp hƣớng dẫn, bảo tận tình tạo điều kiện giúp em hoàn thành khóa luận Em xin phép gửi lời cám ơn chân thành sâu sắc tới DS Nguyễn Quang Hiệu tận tình hƣớng dẫn, quan tâm tạo điều kiện giúp đỡ em suốt trình hoàn thành khóa luận Em xin gửi lời cám ơn chân thành sâu sắc tới: DS Nguyễn Thanh Tùng, ThS Nguyễn Thị Thu Huyền, thầy cô giáo giảng viên anh chị kỹ thuật viên môn Dƣợc Liệu tận tình giúp đỡ, động viên tạo điều kiện cho em suốt trình làm khóa luận Em xin gửi lời cảm ơn tới thầy giáo, cô giáo giảng viên trƣờng đại học Dƣợc Hà Nội tận tình bảo, giảng dạy, dìu dắt truyền nhiệt huyết cho em suốt năm học vừa qua Cuối cùng, em xin gửi lời cám ơn chân thành tới gia đình bạn bè động viên giúp đỡ em suốt trình học tập Sinh viên Vũ Thu Thủy MỤC LỤC DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH ĐẶT VẤN ĐỀ CHƢƠNG TỔNG QUAN 1.1 Đặc điểm chung họ Thạch tùng (Lycopodiaceae) 1.2 Tổng quan chi Huperzia Bernh 1.2.1 Vị trí phân loại chi Huperzia Bernh 1.2.2 Đặc điểm thực vật chi Huperzia Bernh 1.2.3 Đặc điểm phân bố chi Huperzia Bernh 1.2.4 Một số loài thuộc chi Huperzia Bernh 1.2.5 Thành phần hóa học chi Huperzia Bernh 1.2.6 Công dụng tác dụng sinh học loài thuộc chi Huperzia Bernh 10 1.2.7 Một số nghiên cứu chi Huperzia Bernh Việt Nam 12 CHƢƠNG 2: NGUYÊN LIỆU, THIẾT BỊ, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 14 2.1 Nguyên liệu, thiết bị nghiên cứu 14 2.1.1 Nguyên liệu nghiên cứu 14 2.1.2 Thiết bị nghiên cứu 14 2.2 Nội dung nghiên cứu 14 2.2.1 Nghiên cứu đặc điểm thực vật 14 2.2.2 Nghiên cứu thành phần hóa học 15 2.3 Phƣơng pháp nghiên cứu 15 2.3.1 Nghiên cứu đặc điểm thực vật 15 2.3.2 Nghiên cứu thành phần hóa học 16 CHƢƠNG THỰC NGHIỆM, KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 17 3.1 Nghiên cứu đặc điểm thực vật 17 3.1.1 Mô tả đặc điểm hình thái thực vật 17 3.1.2 Giám định tên khoa học 17 3.1.2 Nghiên cứu đặc điểm vi phẫu 18 3.1.3 Nghiên cứu đặc điểm bột dƣợc liệu 20 3.2 Định tính sơ nhóm chất phản ứng hóa học 21 3.2.1 Định tính glycosid tim 21 3.2.2 Định tính alcaloid 22 3.2.3 Định tính saponin 23 3.2.4 Định tính anthranoid 23 3.2.5 Định tính flavonoid 24 3.2.6 Định tính coumarin 25 3.2.7 Định tính tanin 26 3.2.8 Định tính chất béo 26 3.2.9 Định tính steroid 27 3.2.10 Định tính carotenoid 27 3.2.11 Định tính acid hữu 27 3.2.12 Định tính đƣờng khử 27 3.2.13 Định tính acid amin 27 3.2.14 Định tính polysaccharid 27 3.3 Định tính sắc ký lớp mỏng 29 3.3.1 Dịch chiết methanol 29 3.3.2 Dịch chiết alcaloid toàn phần 35 3.4 Bàn luận 41 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 44 KẾT LUẬN 44 ĐỀ XUẤT 44 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT NXB: Nhà xuất AchE: Enzyme acetylcholinesterase PƢ: Phản ứng TT: Thuốc thử Dd: Dung dịch Rf: Retention factor (Hệ số lƣu) UV: Ultra Violet (Cực tím, tử ngoại) DANH MỤC CÁC BẢNG STT Tên bảng Trang Bảng 3.1: Kết định tính nhóm chất Thạch tùng sóng phản ứng hóa học 28 DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ Tên hình vẽ, đồ thị STT Trang Hình 3.1: Cây Thạch tùng sóng [Huperzia carinata (Desv ex Poir.) Trevis.] 18 Hình 3.2: Vi phẫu thân Thạch tùng sóng [Huperzia carinata (Desv ex Poir.) Trevis.] 19 Hình 3.3: Vi phẫu Thạch tùng sóng [Huperzia carinata (Desv ex Poir.) Trevis.] 20 Hình 3.4: Một số đặc điểm bột Thạch tùng sóng [Huperzia carinata (Desv ex Poir.) Trevis.] 21 Hình 3.5: Sắc ký đồ dịch chiết methanol loài Thạch tùng sóng [Huperzia carinata (Desv ex Poir.) Trevis.] triển khai với hệ dung môi II [Toluen -Ethyl acetat - Acid formic (5:4:1)] quan sát chụp ảnh ở: a Ánh sáng thƣờng trƣớc phun thuốc thử 30 b Ánh sáng UV254nm c Ánh sáng UV366nm d Ánh sáng thƣờng sau phun thuốc thử Vanilin 2,5%/ H2SO4 đ Hình 3.6: Đồ thị, sắc ký đồ, bảng biểu diễn kết sắc ký dịch chiết methanol loài Thạch tùng sóng [Huperzia carinata (Desv ex Poir.) Trevis.] triển khai với hệ dung môi II [Toluen - Ethyl 31 acetat - Acid formic (5:4:1)] quan sát chụp ảnh ánh sáng thƣờng trƣớc phun thuốc thử Hình 3.7: Đồ thị, sắc ký đồ, bảng biểu diễn kết sắc ký dịch chiết methanol loài Thạch tùng sóng [Huperzia carinata (Desv ex Poir.) Trevis.] triển khai với hệ dung môi II [Toluen - Ethyl 32 acetat - Acid formic (5:4:1)] quan sát chụp ảnh ánh sáng UV254nm Hình 3.8: Đồ thị, sắc ký đồ, bảng biểu diễn kết sắc ký dịch chiết methanol loài Thạch tùng sóng [Huperzia carinata (Desv ex Poir.) Trevis.] triển khai với hệ dung môi II [Toluen - Ethyl 33 acetat - Acid formic (5:4:1)] quan sát chụp ảnh ánh sáng UV366nm Hình 3.9: Đồ thị, sắc ký đồ, bảng biểu diễn kết sắc ký dịch chiết methanol loài Thạch tùng sóng [Huperzia carinata (Desv ex Poir.) Trevis.] triển khai với hệ dung môi II [Toluen 34 - Ethyl acetat - Acid formic (5:4:1)] quan sát chụp ảnh ánh sáng thƣờng sau phun thuốc thử Vanilin 2,5%/ H2SO4 Hình 3.10: Sơ đồ chiết xuất alcaloid toàn phần từ mẫu nghiên 10 cứu 36 Hình 3.11: Sắc ký đồ dịch chiết alcaloid toàn phần loài Thạch tùng sóng [Huperzia carinata (Desv ex Poir.) Trevis.] triển khai với hệ dung môi VI [Cloroform - Methanol - Acid formic 11 (9,5:2:2)] quan sát chụp ảnh ở: 37 a Ánh sáng UV254nm b Ánh sáng UV366nm c Ánh sáng thƣờng sau phun thuốc thử Dragendorff Hình 3.12: Đồ thị, sắc ký đồ, bảng biểu diễn kết sắc ký dịch chiết alcaloid toàn phần loài Thạch tùng sóng [Huperzia carinata 12 (Desv ex Poir.) Trevis.] triển khai với hệ dung môi VI [Cloroform - Methanol - Acid formic (9,5:2:2)] quan sát chụp ảnh ánh sáng UV254nm Hình 3.13: Đồ thị, sắc ký đồ, bảng biểu diễn kết sắc ký dịch 38  Kết Bằng thực nghiệm triển khai sắc ký lớp mỏng với bốn hệ dung môi trên, hệ dung môi VI có khả tách tốt dịch chiết alcaloid toàn phần loài Thạch tùng sóng nghiên cứu, đƣợc trình bày hình 3.10 Sắc ký đồ đƣợc phân tích sử dụng phần mềm VisionCATS qua thu đƣợc đồ thị, bảng số liệu biểu diễn giá trị Rf, chiều cao, diện tích, tỷ lệ phần trăm chiều cao diện tích peak, trình bày hình 3.11, 3.12 3.13 Hình 3.11 Sắc ký đồ dịch chiết alcaloid toàn phần loài Thạch tùng sóng [Huperzia carinata (Desv ex Poir.) Trevis.] triển khai với hệ dung môi VI [Cloroform - Methanol - Acid formic (9,5:2:2)] quan sát chụp ảnh ở: a Ánh sáng UV254nm b Ánh sáng UV366nm c Ánh sáng thƣờng sau phun thuốc thử Dragendorff 37 Peak Bắt đầu (Start) Rf H 0,035 0,0000 0,340 0,0403 0,424 0,0326 0,481 0,0268 0,597 0,0288 0,674 0,0418 0,767 0,0291 0,868 0,0000 Rf 0,053 0,363 0,449 0,514 0,626 0,713 0,814 0,893 Cực đại (Max) H % 0,0133 1,83 0,0653 9,00 0,0519 7,15 0,0510 7,02 0,1158 15,95 0,1244 17,15 0,1190 16,39 0,0352 4,86 Kết thúc (End) Rf H 0,067 0,0000 0,377 0,0389 0,469 0,0249 0,524 0,0386 0,657 0,0622 0,753 0,0388 0,845 0,0266 0,914 0,0000 Diện tích (Area) A % 0,0002 0,82 0,0019 6,37 0,0019 6,22 0,0018 5,98 0,0046 15,27 0,0068 22,45 0,0058 19,18 0,0007 2,31 Hình 3.12: Đồ thị, sắc ký đồ, bảng biểu diễn kết sắc ký dịch chiết alcaloid toàn phần loài Thạch tùng sóng [Huperzia carinata (Desv ex Poir.) Trevis.] triển khai với hệ dung môi VI [Cloroform - Methanol - Acid formic (9,5:2:2)] quan sát chụp ảnh ánh sáng UV254nm 38 Peak Bắt đầu (Start) Rf H Cực đại (Max) Rf H Kết thúc (End) % Rf H Cả vùng (Area) A % 0,077 0,0000 0,117 0,4169 56,63 0,150 0,0019 0,0101 47,51 0,189 0,0000 0,228 0,0285 3,87 0,253 0,0123 0,290 0,0857 11,64 0,320 0,0174 0,0026 12,43 0,348 0,0045 0,393 0,1379 18,73 0,420 0,0177 0,0045 21,11 0,841 0,0027 0,877 0,0233 3,16 0,253 0,0123 0,0010 0,923 0,0082 0,0011 4,51 5,19 Màu sắc vết Xanh lam đậm Xanh lam nhạt Xanh lam Xanh lam Xanh lam nhạt Hình 3.13: Đồ thị, sắc ký đồ, bảng biểu diễn kết sắc ký dịch chiết alcaloid toàn phần loài Thạch tùng sóng [Huperzia carinata (Desv ex Poir.) Trevis.] triển khai với hệ dung môi VI [Cloroform - Methanol - Acid formic (9,5:2:2)] quan sát chụp ảnh ánh sáng UV366nm 39 Peak Bắt đầu (Start) Rf H Cực đại (Max) Rf H Kết thúc (End) % Rf H Cả vùng (Area) A % Màu sắc vết 0,001 0,0000 0,012 0,0179 3,62 0,029 0,0005 0,0003 1,31 Da cam 0,104 0,0000 0,136 0,0296 5,99 0,151 0,0187 0,0008 4,19 0,197 0,0205 0,239 0,0908 18,41 0,257 0,0352 0,0035 17,58 0,257 0,0352 0,285 0,0830 16,83 0,306 0,0508 0,0030 14,81 0,332 0,0477 0,360 0,1136 23,02 0,394 0,0433 0,0049 24,40 0,545 0,0260 0,602 0,1586 32,13 0,613 0,1392 0,0075 37,71 Da cam nhạt Da cam Da cam Da cam đậm Da cam đậm Hình 3.14: Đồ thị, sắc ký đồ, bảng biểu diễn kết sắc ký dịch chiết alcaloid toàn phần loài Thạch tùng sóng [Huperzia carinata (Desv ex Poir.) Trevis.] triển khai với hệ dung môi VI [Cloroform - Methanol - Acid formic (9,5:2:2)] quan sát chụp ảnh ánh sáng thƣờng sau phun thuốc thử Dragendorff 40 Nhận xét: - Quan sát bước sóng 254 nm: sắc ký đồ phát đƣợc vết Trong đó, vết thứ vết thứ vết thứ có Rf max tƣơng ứng lần lƣợt 0,626; 0,713 0,814 có chiều cao cực đại peak lớn (lần lƣợt 0,1158; 0,1244 0,1190) diện tích peak chiếm tỷ lệ tƣơng đối lớn (lần lƣợt 15,27; 22,45 19,18 %) - Quan sát bước sóng 366 nm: sắc ký đồ phát đƣợc vết Trong đó, nhận thấy vết thứ có Rf max 0,117 hấp thụ UV366nm mạnh nhất, có cƣờng độ cực đại lớn (0,4169) diện tích peak chiếm tỷ lệ tƣơng đối lớn (47,51 %), cho màu xanh lam đậm, nhìn sáng rõ - Quan sát sau phun thuốc thử Dragendorff: sắc ký đồ phát đƣợc vết Trong đó, vết thứ có Rf max 0,602 có chiều cao cực đại peak lớn (0,1586) diện tích peak chiếm tỷ lệ tƣơng đối lớn (37,71 %) 3.4 Bàn luận Nhìn chung, nghiên cứu loài Thạch tùng Việt Nam hạn chế Và chƣa có nghiên cứu đƣợc thực đặc điểm thực vật sơ xác định thành phần hóa học loài Thạch tùng sóng [Huperzia carinata (Desv., Poir.) Trevis] Từ thực tế gợi ý cho nhóm nghiên cứu tiến hành nghiên cứu Thạch tùng sóng với tên đề tài: “Nghiên cứu đặc điểm thực vật sơ xác định thành phần hóa học loài Thạch tùng thu hái Tam Đảo, Vĩnh Phúc“ Về thực vật Đề tài tiến hành thu thập nghiên cứu mẫu Thạch tùng sóng [Huperzia carinata (Desv., Poir.) Trevis] từ thực địa Tam Đảo (Vĩnh Phúc), rừng rậm thƣờng xanh có độ cao từ 700-1000 m 41 Mẫu Thạch tùng sóng đƣợc thu hái đƣợc chụp ảnh mô tả đặc điểm hình thái, nhận thấy phù hợp với đặc điểm ghi tài liệu nƣớc [10], [13], [14] tài liệu nƣớc [38] Để xác định tên khoa học loài Thạch tùng sóng nghiên cứu, dựa tài liệu chuyên khảo phân loại thực vật đƣợc cập nhập đến năm 2012 nhƣ Từ điển thuốc Việt Nam [10], Cây cỏ Việt Nam [13] Danh lục loài thực vật Việt Nam [14] với tƣ vấn TS Nguyễn Quốc Bình (Bảo tàng thiên nhiên Việt Nam - Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam) để đƣa kết luận góp phần khẳng định tên khoa học loài nghiên cứu là: Huperzia carinata (Desv., Poir.) Trevis., họ Thông đất (Lycopodiaceae) Tính đến Việt Nam chƣa có tác giả có công trình nghiên cứu loài Huperzia carinata (Desv., Poir.) Trevis., họ Thông đất (Lycopodiaceae) Đây đóng góp hoàn toàn đề tài nhằm tạo sở liệu cho nghiên cứu sau ứng dụng loài hiệu Những kết nghiên cứu đặc điểm vi phẫu thân, lá, đặc điểm bột dƣợc liệu góp phần xây dựng sở liệu, nhận biết tiêu chuẩn hóa dƣợc liệu Về thành phần hóa học - Định tính sơ nhóm chất có dƣợc liệu phản ứng hóa học Từ kết định tính, ta sơ xác định nhóm chất có thân, loài Thạch tùng sóng nghiên cứu là: alcaloid, saponin, flavonoid, glycosid tim, tanin, đƣờng khử, acid amin, polysaccharid, steroid Trong đó, alcaloid thành phần hóa học Kết định tính sơ sở để tìm hệ dung môi khai triển phù hợp sắc kí lớp mỏng để góp phần xây dựng sở liệu kiểm nghiệm Thạch tùng sóng 42 - Sắc ký lớp mỏng Sắc kí lớp mỏng dịch chiết methanol loài Thạch tùng sóng nghiên cứu thực nghiệm triển khai sắc ký lớp mỏng với bốn hệ dung môi I, II, III, IV, hệ II [Toluen -Ethyl acetat - Acid formic (5:4:1)] đƣợc nhận thấy có khả phân tách tốt Nhìn vào kết sắc ký đồ, biểu đồ bảng biểu diễn kết sắc ký nhận thấy sắc ký đồ vết thứ ánh sáng UV254nm vết thứ ánh sáng thƣờng sau phun thuốc thử; vết thứ ánh sáng thƣờng trƣớc phun thuốc thử vết thứ ánh sáng UV 254nm; vết thứ ánh sáng thƣờng trƣớc phun thuốc thử vết thứ ánh sáng UV254nm vết thứ ánh sáng UV366nm Sắc kí lớp mỏng dịch chiết alcaloid toàn phần loài Thạch tùng sóng nghiên cứu thực nghiệm triển khai sắc ký lớp mỏng với bốn hệ dung môi V, VI, VII, VIII, hệ VI [Clorofotm - Methanol - Acid formic (9,5:2:2)] đƣợc nhận thấy có khả phân tách tốt Đây lần nghiên cứu loài Thạch tùng sóng đƣợc thực Việt Nam Kết nghiên cứu góp phần xây dựng sở liệu kiểm nghiệm dƣợc liệu Thạch tùng sóng, qua đó, đóng góp vào sở liệu nghiên cứu loài Huperzia Việt Nam, giúp sử dụng loài Thạch tùng sóng nói riêng loài Huperzia, họ Thông đất (Lycopodiaceae) hiệu 43 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT KẾT LUẬN Sau thời gian nghiên cứu, đề tài thu đƣợc số kết nhƣ sau: Về thực vật - Đã mô tả đặc điểm hình thái Thạch tùng sóng, họ Thông đất (Lycopodiaceae) thu hái Tam Đảo (Vĩnh Phúc) - Đã giám định đƣợc tên khoa học loài nghiên cứu là: Huperzia carinata (Desv ex Poir.) Trevis thuộc họ Thông đất (Lycopodiaceae) - Đã xác định đƣợc đặc điểm bột thân, loài nghiên cứu - Đã xác định đƣợc đặc điểm vi phẫu thân, loài nghiên cứu Về thành phần hóa học - Đã định tính sơ nhóm chất Thạch tùng sóng phản ứng hóa học cho thấy có chứa alcaloid, saponin, flavonoid, glycosid tim, tanin, acid amin, polysaccharid, đƣờng khử, steroid Trong đó, alcaloid thành phần hóa học - Đã triển khai sắc ký lớp mỏng dịch chiết methanol Thạch tùng sóng, lựa chọn đƣợc hệ dung môi thích hợp để triển khai sắc ký - Đã chiết xuất đƣợc hỗn hợp alcaloid toàn phần, triển khai sắc ký lớp mỏng lựa chọn đƣợc hệ dung môi thích hợp để triển khai sắc ký Có vết alcaloid phun thuốc thử màu ĐỀ XUẤT Tiếp tục nghiên cứu thành phần hóa học loài Thạch tùng sóng [Huperzia carinata (Desv ex Poir.) Trevis.] Phân lập đánh giá tác dụng hỗ trợ điều trị bệnh Alzheimer alcaloid 44 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt: Lê Đình Bích - Trần Văn Ơn (2007), Thực vật học, tr.204 Đỗ Huy Bích cộng (2011), Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam, Tập I, tr.896,897, NXB Khoa học kỹ thuật Bộ môn Dƣợc liệu (2005), Thực tập Dược liệu, Phần vi học, tr.33-44, Trƣờng Đại học Dƣợc Hà Nội Bộ môn Dƣợc liệu (2006), Thực tập Dược liệu, Phần hóa học, tr.9-31, Trƣờng Đại học Dƣợc Hà Nội Bộ môn Thực vật (1997), Thực vật dược - Phân loại thực vật, Trƣờng Đại học Dƣợc Hà Nội Bộ môn Thực vật (2004), Thực tập thực vật nhận biết thuốc, Trƣờng Đại học Dƣợc Hà Nội Bộ Y tế (2007), Dược liệu học, Tập 2, NXB Y học, Hà Nội Bộ Y tế (2007), Dược liệu học, Tập 1, NXB Y học, Hà Nội Võ Văn Chi (2003), T n thực vật th ng d ng, tr.957, NXB khoa học Kỹ thuật Hà Nội 10 Võ Văn Chi (2012), T n thuốc Việt Nam (Bộ mới), Tập II, tr.565,813, NXB Y học 11 Võ Văn Chi - Trần Hợp (1999), Cây cỏ có ích Việt Nam, Tập I, tr.55,56, NXB Giáo dục 12 Nguyễn Văn Đàn - Nguyễn Viết Tựu (1990), Phương pháp nghiên cứu hóa học thuốc, tr.60-68, NXB Y học, TP.Hồ Chí Minh 13 Phạm Hoàng Hộ (1999), Cây cỏ Việt Nam, Tập 1, tr 22-26, NXB Trẻ 14 Phan Kế Lộc (2001), Danh l c loài thực vật Việt Nam, Tập I, tr 951953, NXB Nông nghiệp, Hà Nội 15 Trần Công Luận cộng (2011), Nghiên cứu thành phần hóa học tác d ng sinh học số loài Huperzia thu hái tỉnh Lâm Đồng (quanh Lang Biang) 16 Nguyễn Viết Thân (2003), Ki m nghiệm dược liệu phương pháp hi n vi, Tập I, tr.21, NXB Khoa học kỹ thuật Hà Nội 17 Viện Dƣợc liệu (2008), Kỹ thuật chiết xuất dược liệu, tr 10-18, NXB Khoa học kỹ thuật Tiếng Anh: 18 Chuong N.N et al (2014), "Anti-Cholinesterase Activity of Lycopodium Alkaloids from Vietnamese Huperzia squarrosa (Forst.) Trevis", Molecules, 19(11), pp 19172-19179 19 Ferreira A et al (2014), "Huperzine A from Huperzia serrata: a review of its sources, chemistry, pharmacology and toxicology", Phytochemistry Reviews, pp 1-35 20 Li J et al (2008), "Huperzine A for Alzheimer's disease", Cochrane Database of Systematic Reviews, 2008(2), pp 1-36 21 Liu J.S et al (1986), "The structures of huperzine A and B, two new alkaloids exhibiting marked anticholinesterase activity", Revue canadienne de chemie, 64(4), pp 837-839 22 Luo H et al (2010), "Comparison of 454-ESTs from Huperzia serrata and Phlegmariurus carinatus reveals putative genes involved in lycopodium alkaloid biosynthesis and developmental regulation", BMC plant biology, 10(1), PP- 23 Ma X and Gang D.R (2004), "The Lycopodium alkaloids", Natural Product Reports, 21, pp 752-772 24 Ma X et al (2005), "Is There a Better Source of Huperzine A than Huperzia serrata? Huperzine A Content of Huperziaceae Species in China", J Agrie Food Chem, 53, pp 1393-1398 25 Ma X et al (2006), "A survey of potential huperzine A natural resources in China: The Huperziaceae", Journal ofEthnopharmacology, 104, pp 54-67 26 Ma X et al (2007), "Huperzine A from Huperzia species - An ethnopharmacological review", Journal of Ethnopharmacology, 113, pp 1534 27 Maridass M and Raju G (2009), "Investigation of phytochemical and antimicrobial activity of Huperzia species", Pharmacologyonline, 3, pp 688692 28 Ollgaard B (1987), "A revised classification of the Lycopodiaceae s lat ", Opera Botanica, 92, pp 153-178 29 Ortega M.G et al (2004), "Anticholinesterase activity in an alkaloid extract of Huperzia saururus", Phytomedicine, 11(6), pp 539-543 30 Shi H et al (2005), "A new serratane-type triterpene from Lycopodium phlegmaria", Natural Product Research, 19(8), pp 777-781 31 Vincent SJF.T.M et al (2013), "Taxonomy and classification", Mycoheterotrophy, Springer, tr 19-101 32 Wikstrom N and Kenrick P (2000), "Relationships of Lycopodium and Lycopodiella based on combined plastid rbcL gene and tmL intron sequence data", Systematic Botany, 25(3), pp 495-510 33 Xu S.S et al (1995), "Efficacy of tablet huperzine-A on memory, cognition, and behavior in Alzheimer's disease", Zhongguo Yao Li Xue Bao, 16(5), pp 391-5 34 Yang Y et al (2016), "Chemical Constituents of Plants from Genus Phlegmariurus", Chem, Biodiversity, 13, pp 269-274 35 Yumkham S.D and Singh P.K (2012), "A Novel Way for Propagation of Huperzia squarrosa (G Forst.) Trevis", Notulae Scientia Biologicae, 4(4), pp 27 36 Yumkham S.D and Singh P.K (2013), "Study on uses and trading of Huperzia squarrosa (G Forst.) Trevis (Lycopodiaceae) in Manipur, India", Ethnobotany Research & Applications, 11, pp 153-163 37 Zhengyi W et al (2013), ''Flora of China'', Vol 1, Science Press (Beijing), pp 21-28 Website: 38 http://www.theplantlist.org 39 http://www.yhocbandia.vn PHỤ LỤC Phụ lục 1: Kết xác định tên khoa học mẫu nghiên cứu Phụ lục 2: Tiêu Thạch tùng sóng lƣu trữ Phụ lục 3: Giấy xác nhận mã số tiêu Thạch tùng sóng lƣu trữ ...BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI VŨ THU THỦY Mã sinh viên: 1201605 NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT, SƠ BỘ XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA MỘT LOÀI THẠCH TÙNG THU HÁI Ở TAM ĐẢO, VĨNH PHÚC KHÓA... Thạch tùng sóng với tên gọi Nghiên cứu đặc điểm thực vật, sơ xác định thành phần hóa học loài Thạch tùng thu hái Tam Đảo, Vĩnh Phúc nhằm mục đích góp phần xây dựng sở liệu cho việc kiểm nghiệm,... (Lycopodiaceae) Vĩnh Phúc Trong số đó, chƣa có tác giả công bố nghiên cứu đặc điểm thực vật, sơ xác định thành phần hóa học loài Thạch tùng sóng Chúng tiến hành thực đề tài loài Thạch tùng sóng với