Xây dựng phương pháp định tính một số hoạt chất bằng thiết bị đo phổ raman cầm tay

BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI BÙI THỊ TÂM MÃ SINH VIÊN: 1201522 XÂY DỰNG PHƢƠNG PHÁP ĐỊNH TÍNH MỘT SỐ HOẠT CHẤT BẰNG THIẾT BỊ ĐO PHỔ RAMAN CẦM TAY KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƢỢC SĨ HÀ NỘI – 2017 BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI BÙI THỊ TÂM MÃ SINH VIÊN: 1201522 XÂY DỰNG PHƢƠNG PHÁP ĐỊNH TÍNH MỘT SỐ HOẠT CHẤT BẰNG THIẾT BỊ ĐO PHỔ RAMAN CẦM TAY KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƢỢC SĨ Người hướng dẫn: Ths Đặng Thị Ngọc Lan Nơi thực hiện: Bộ môn Hóa phân tích Độc chất – Trƣờng Đại học Dƣợc Hà Nội Khoa kiểm nghiệm nguyên liệu – Viện Kiểm nghiệm thuốc Trung ƣơng HÀ NỘI – 2017 LỜI CẢM ƠN Với lòng biết ơn sâu sắc, xin gửi lời cảm ơn chân thành đến ThS Đặng Thị Ngọc Lan trực tiếp hướng dẫn, giúp đỡ, bảo tận tình để hoàn thành khóa luận Tôi xin chân thành cảm ơn cán Khoa Kiểm nghiệm nguyên liệu - Viện Kiểm nghiệm thuốc Trung ương hướng dẫn tận tình thời gian làm thực nghiệm, hoàn chỉnh nghiên cứu tốt Tôi xin cảm ơn thầy cô Bộ môn Hóa phân tích Độc chất tạo điều kiện cung cấp cho tài liệu, trang thiết bị cần thiết để hoàn thành khóa luận Tôi xin cảm ơn Ban giám hiệu, phòng ban, thầy cô giáo cán nhân viên Trường Đại học Dược Hà Nội - người dạy bảo trang bị cho kiến thức khoa học tảng suốt thời gian học mái trường Cuối cùng, xin gửi lời cảm ơn thân thương đến gia đình, bạn bè bên động viên, giúp đỡ trình học tập hoàn thiện khóa luận Hà Nội, ngày 17 tháng năm 2017 Sinh viên Bùi Thị Tâm MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ ĐẶT VẤN ĐỀ CHƢƠNG TỔNG QUAN .2 1.1 Tổng quan thuốc giả, thuốc chất lượng 1.1.1 Định nghĩa .2 1.1.2 Tình hình thuốc giả, thuốc chất lượng giới Việt Nam 1.1.3 Các phương pháp phát thuốc giả, thuốc chất lượng 1.2 Phương pháp quang phổ Raman 1.2.1 Lịch sử phát triển 1.2.2 Nguyên lý 1.2.3 Thiết bị 1.2.4 Ứng dụng 10 1.2.5 Tình hình nghiên cứu phổ Raman ngành Dược Việt Nam… 12 1.3 Tổng quan dược chất nghiên cứu .12 1.3.1 Isoniazid 12 1.3.2 Ethambutol hydroclorid 12 1.3.3 Lamivudin .13 1.3.4 Ibuprofen .13 1.3.5 Sildenafil citrat 13 1.3.6 Tình hình nghiên cứu thuốc giả dược chất .14 CHƢƠNG ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16 2.1 Nguyên vật liệu, thiết bị 16 2.1.1 Nguyên vật liệu 16 2.1.2 Thiết bị .17 2.2 Nội dung nghiên cứu 18 2.3 Phương pháp thực nghiệm 19 2.3.1 Chế tạo viên mô hình .19 2.3.2 Xây dựng quy trình định tính dược chất 19 2.3.2.1 Nguyên tắc 19 2.3.2.2 Xây dựng quy trình phân tích 20 2.3.3 Thẩm định quy trình phân tích 20 2.3.3.1 Độ đặc hiệu 20 2.3.3.2 Độ lặp lại 21 2.3.3.3 Giới hạn phát 21 2.3.4 Ứng dụng phân tích số chế phẩm thị trường 22 2.3.5 Phương pháp xử lý số liệu 22 CHƢƠNG THỰC NGHIỆM, KẾT QUẢ, BÀN LUẬN 23 3.1 Chế tạo viên mô hình 23 3.2 Xây dựng quy trình định tính dược chất 25 3.2.1 Lựa chọn điều kiện phân tích 25 3.2.1.1 Khảo sát công suất nguồn 26 3.2.1.2 Lựa chọn dải đo 26 3.2.2 Quy trình phân tích chung 34 3.3 Thẩm định quy trình phân tích .34 3.3.1 Độ đặc hiệu độ lặp lại 34 3.3.2 Giới hạn phát 36 3.4 Ứng dụng phân tích số chế phẩm thị trường 39 3.5 Bàn luận 43 3.5.1 Xây dựng viên mô hình 43 3.5.2 Quy trình phân tích xây dựng ứng dụng phân tích số chế phẩm thị trường 43 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 46 KẾT LUẬN 46 KIẾN NGHỊ 46 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT STT Chữ viết tắt Tiếng Anh Atomic Absorption Tiếng Việt AAS CCD CTPT EU European Union FT-IR Fourier Transform – Infrared FT-Raman Fourier Transform – Raman Raman chuyển dạng fourier GC Gas Chromatography Sắc ký khí GC-FID Gas Chromatography – Sắc ký khí với detector ion Flame Ionization Detector hóa lửa GC-MS 10 HD 11 HIV 12 HPLC 13 HPMC 14 Spectroscopy Charge Coupled Device Phổ hấp thụ nguyên tử Thiết bị tích điện kép Công thức phân tử Gas Chromatography – Mass Spectrometry Liên minh châu Âu Hồng ngoại chuyển dạng fourier Sắc ký khí – Khối phổ Hạn dùng Human Immunodeficiency Virus gây suy giảm miễn Virus dịch người High Performance Liquid Chromatography Sắc ký lỏng hiệu cao Hydroxypropyl Methyl Hydroxypropyl Methyl Cellulose Cellulose HQI Hit Quality Index Hệ số tương đồng phổ 15 IR Infrared Hồng ngoại 16 IRMS 17 Kl/kl Khối lượng/khối lượng 18 KLPT Khối lượng phân tử Isotope Ratio Mass Spectrometry Khối phổ đồng vị Liquid Chromatography – 19 LC-DAD-MS Diode Array Detector – Mass Spectrometry 20 LC-MS Liquid Chromatography – Mass Spectrometry Multicollector Inductively 21 MC-ICP-MS Coupled Plasma Mass Spectrometry Sắc ký lỏng với detector mảng diod – Khối phổ Sắc ký lỏng – Khối phổ Khối phổ plasma cảm ứng, thu nhiều lần 22 MS Mass Spectrometry Khối phổ 23 NIR Near infrared Cận hồng ngoại 24 NSAIDs Non-steroidal Anti- Thuốc giảm đau, chống inflammatory Drugs viêm không steroid 25 NSX 26 PDE-5 Phosphodiesterase type 27 PE Polyethylen Ngày sản xuất Enzym phosphodiesterase tuýp Polyvinylpyrrolidon K30 28 PVP – K30 Polyvinylpyrrolidone K30 (Ký hiệu K30 thể khối lượng phân tử độ nhớt) Độ lệch chuẩn tương đối 29 RSD Relative Standard Deviation 30 TLC Thin Layer Chromatography Sắc ký lớp mỏng 31 TLTK 32 UPLC 33 UV Ultra Violet Tử ngoại 34 WHO World Health Organization Tổ chức Y tế giới Tài liệu tham khảo Ultra Performance Liquid Chromatography Sắc ký lỏng siêu hiệu STT DANH MỤC CÁC BẢNG Nội dung Bảng Số lượng nhóm thuốc phát thuốc Trang Bảng 1.1 Bảng 1.2 Bảng 1.3 Bảng 1.4 CTPT KLPT sildenafil sildenafil citrat 14 Bảng 1.5 Một số nghiên cứu thuốc giả dược chất 15 Bảng 2.1 Các chất chuẩn sử dụng nghiên cứu 16 Bảng 2.2 Các nguyên liệu dược chất sử dụng nghiên cứu 16 Bảng 2.3 Các tá dược sử dụng nghiên cứu 17 Bảng 2.4 Ký hiệu viên mô hình xây dựng nghiên cứu 19 10 Bảng 3.1 11 Bảng 3.2 Kết định lượng viên mô hình HPLC 25 12 Bảng 3.3 Kết khảo sát công suất nguồn cho dược chất 26 giả, thuốc chất lượng số mẫu kiểm tra Các phương pháp xây dựng dùng để kiểm tra thuốc giả, thuốc chất lượng Một số dược phẩm bị phát giả mạo phổ Raman Hàm lượng phần trăm dược chất (kl/kl) viên mô hình 11 23 Hệ số HQI so sánh phổ dược chất mẫu 13 Bảng 3.4 viên với phổ chuẩn sildenafil citrat theo vùng phổ 29 chọn Hệ số HQI so sánh phổ dược chất mẫu 14 Bảng 3.5 viên với phổ chuẩn ibuprofen theo vùng phổ 30 chọn Hệ số HQI so sánh phổ dược chất mẫu 15 Bảng 3.6 viên với phổ chuẩn isoniazid theo vùng phổ chọn 30 STT Bảng Nội dung Trang Hệ số HQI so sánh phổ dược chất mẫu 16 Bảng 3.7 viên với phổ chuẩn ethambutol HCl theo vùng 31 phổ chọn Hệ số HQI so sánh phổ dược chất mẫu 17 Bảng 3.8 viên với phổ chuẩn lamivudin theo vùng phổ 32 chọn 18 Bảng 3.9 Kết khảo sát khoảng đo cho dược chất 33 Kết thẩm định độ đặc hiệu độ lặp lại quy 19 Bảng 3.10 trình phân tích định tính ethambutol HCl 35 ibuprofen thiết bị đo phổ Raman cầm tay Kết thẩm định độ đặc hiệu độ lặp lại quy 20 Bảng 3.11 trình phân tích định tính isoniazid lamivudin 35 thiết bị đo phổ Raman cầm tay Kết thẩm định độ đặc hiệu độ lặp lại quy 21 Bảng 3.12 trình phân tích định tính sildenafil citrat thiết bị 36 đo phổ Raman cầm tay Kết khảo sát giới hạn phát quy trình 22 Bảng 3.13 phân tích định tính dược chất thiết bị đo phổ 37 Raman cầm tay 23 Bảng 3.14 24 Bảng 3.15 Giới hạn phát dược chất Kết phân tích thuốc thị trường thiết bị đo phổ Raman cầm tay 39 39 xiv xv xvi xvii PHỤ LỤC 3: PHỔ RAMAN CHUẨN CỦA CÁC DƯỢC CHẤT ĐO TRÊN THIẾT BỊ CẦM TAY Tên dược chất: Ethambutol hydroclorid Điều kiện đo: thiết bị 2HCl HO mt Laser: 785 nm H N N H Độ phân giải: cm-1 OH Khoảng đo: 176 m-1 – 2000 cm-1 100 Ty le (%) 80 60 40 20 200 400 600 800 1000 1200 1400 1600 1800 2000 -1 Raman shift (cm ) Số sóng (cm-1) 1440 1464 1060 220 1300 1024 1556 1368 968 1168 Tỷ lệ (%) 100,00 87,61 77,15 71,59 56,66 55,79 52,98 52,00 50,91 45,49 xviii Tên dược chất: Ibuprofen Điều kiện đo: thiết bị mt O Laser: 785 nm Độ phân giải: cm-1 OH Khoảng đo: 176 m-1 – 2000 cm-1 100 Ty le (%) 80 60 40 20 200 400 600 800 1000 1200 1400 1600 1800 2000 -1 Raman shift (cm ) Số sóng 1608 (cm-1) 832 1180 1456 1208 1340 1116 744 1284 1008 Tỷ lệ (%) 78,42 74,61 66,11 63,75 48,71 47,98 46,04 43,31 41,60 100,00 xix Tên dược chất: Isoniazid O Điều kiện đo: thiết bị c m tay Laser: 758 nm NH Độ phân giải: cm-1 NH2 N -1 -1 Khoảng đo: 176 m – 2000 cm 100 Ty le (%) 80 60 40 20 200 400 600 800 1000 1200 1400 1600 1800 2000 -1 Raman shift (cm ) Số sóng (cm-1) 1332 1604 1000 1188 1668 1220 888 364 1644 664 Tỷ lệ (%) 100,00 91,27 76,19 52,09 40,19 37,39 29,33 26,65 25,71 25,58 xx Tên dược chất: Lamivudin O Điều kiện đo: thiết bị c m tay O Laser: 758 nm NH2 N HO Độ phân giải: cm-1 N S -1 -1 Khoảng đo: 176 m – 2000 cm 100 Ty le (%) 80 60 40 20 200 400 600 800 1000 1200 1400 1600 1800 2000 -1 Raman shift (cm ) Số sóng (cm-1) 1244 796 780 1288 1612 1520 1204 592 984 464 Tỷ lệ (%) 100,00 80,53 77,11 57,58 53,43 52,36 51,22 48,05 42,96 39,51 xxi Tên dược chất: Sildenafil citrat Điều kiện đo: thiết bị O mt O Laser: 785 nm N Độ phân giải: cm-1 H 3C -1 HN O S CH3 N COOH N HOOC N OH COOH N O CH3 CH3 -1 Khoảng đo: 176 m – 2000 cm 100 Ty le (%) 80 60 40 20 200 400 600 800 1000 1200 1400 1600 1800 2000 -1 Raman shift (cm ) Số sóng (cm-1) 1580 1528 1240 1404 1484 1276 1700 740 928 820 Tỷ lệ (%) 100,00 57,02 52,64 40,91 30,43 26,57 20,14 19,96 19,06 18,95 xxii PHỤ LỤC 4: KẾT QUẢ PHÂN TÍCH MỘT SỐ CHẾ PHẨM TRÊN THỊ TRƯỜNG BẲNG THIẾT BỊ RAMAN CẦM TAY xxiii xxiv xxv xxvi xxvii xxviii ... để bàn thiết bị cầm tay [10], xác định dịch chuyển Raman dược chất sử dụng thiết bị để bàn [9], [11] Đề tài Xây dựng phương pháp định tính số hoạt chất thiết bị đo phổ Raman cầm tay tiếp tục... sát chất lượng thuốc thực dễ dàng hiệu thực đề tài: Xây dựng phương pháp định tính số hoạt chất thiết bị đo phổ Raman cầm tay với mục tiêu sau: Xây dựng thẩm định quy trình phân tích định tính. .. ibuprofen đo máy cầm tay Phổ Raman chất chuẩn viên mô hình isoniazid đo máy cầm tay Phổ Raman chất chuẩn viên mô hình ethambutol HCl đo máy cầm tay Phổ Raman chất chuẩn viên mô hình lamivudin đo máy cầm