Bước đầu nghiên cứu kiểu gen HLA c ở trẻ có mẹ tiền sản giật

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI -*** - HOÀNG THÙY LINH BƯỚC ĐẦU NGHIÊN CỨU KIỂU GEN HLA-C Ở TRẺ CÓ MẸ TIỀN SẢN GIẬT Chuyên ngành : Miễn dịch Mã Số : 60720106 LUẬN VĂN THẠC SĨ Y HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: TS Lê Ngọc Anh TS Nguyễn Mạnh Thắng HÀ NỘI – 2017 LỜI CẢM ƠN Với lòng kính trọng biết ơn sâu sắc, xin chân thành cảm ơn: Ban Giám hiệu, Phòng đào tạo Sau Đại học, Trường Đại học Y Hà Nội tạo điều kiện thuận lợi cho suốt trình học tập làm khóa luận Đặc biệt xin bày tỏ lòng biết ơn tới Tiến sĩ Lê Ngọc Anh, giảng viên Bộ môn Sinh lý bệnh – Miễn dịch, người thầy trực tiếp hướng dẫn tôi, tận tình dạy cho kiến thức, phương pháp luận quý báu để thực đề tài Tôi xin trân trọng cảm ơn Tiến sĩ Nguyễn Mạnh Thắng, giảng viên Bộ môn Phụ Sản, người thầy giúp đỡ, chia sẻ tạo điều kiện thuận lợi cho trình nghiên cứu Tôi xin chân thành cảm ơn: PGS.TS Nguyễn Duy Ánh PGS.TS Nguyễn Thanh Thúy chủ nhiệm đề tài “Ứng dụng kỹ thuật sinh học phân tử tìm mối liên quan kiểu gen KIR người mẹ HLA-C để xác định yếu tố nguy di truyền thai phụ mắc tiền sản giật” tạo điều kiện cho tham gia để tài, cung cấp nguồn kinh phí, nhân lực vật lực để hoàn thành luận văn Tôi xin chân thành cảm ơn: Các thầy, cô anh, chị kỹ thuật viên Bộ môn Sinh lý bệnh – Miễn dịch Trường Đại học Y Hà Nội nhiệt tình giúp đỡ trình học tập thực luận văn Bộ môn Đặc biệt xin bày tỏ cảm ơn với KTV Đỗ Thị Hương, người chị trực tiếp tiến hành thu thập số liệu, thực tiến hành kỹ thuật để hoàn thành luận văn Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn với PGS.TS Nguyễn Duy Ánh-Giám đốc Bệnh viện Phụ sản Hà Nội toàn thể nhân viên bệnh viện đặc biệt anh (chị) khoa Sản bệnh, khoa Đẻ,…đã tạo điều kiện thuận lợi cho trình thu thập số liệu để thực luận văn Cuối xin chân thành cảm ơn: gia đình, người thân bạn bè bên tôi, động viên giúp đỡ vượt qua khó khăn học tập, thực đề tài hoàn thành khóa luận Hà Nội, tháng 09 năm 2017 Hoàng Thùy Linh LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu Các số liệu kết luận văn trung thực chưa công bố công trình nghiên cứu khác Tôi hoàn toàn chịu trách nhiệm với cam đoan Hà Nội, tháng 09 năm 2017 Hoàng Thùy Linh MỤC LỤC DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Asn dNK EVT G-CSF GM-CSF HA HLA KIRs Lys M-CSF MHC NK PCR PlGF Ser sFlt-1 TSG Asparagin Decidual natural killer cell Tế bào diệt tự nhiên màng rụng Extravilious trophoblast Nguyên bào nuôi gai rau Granulocyte colony-stimulating factor Yếu tố kích thích dòng bạch cầu hạt Granulocyte macrophage colonyYếu tố kích thích dòng đại thực stimulating factor bào, bạch cầu hạt Huyết áp Human leukocyte antigen Kháng nguyên bạch cầu người Killer cell immunoglobin-like Thụ thể giống kháng thể tế receptors bào diệt Lysin Macrophage colony-stimulating factor Yếu tố kích thích dòng đại thực bào Major histocompatibility complex Phức hợp hòa hợp mô chủ yếu Natural killer cell Tế bào diệt tự nhiên Polymerase chain reaction Phản ứng khuếch đại chuỗi Placental Growth Factor Yếu tố tăng trưởng rau thai Serin soluble Fms-like tyrosine kinase-1 Thụ thể yếu tố phát triển nội mạc hòa tan Tiền sản giật DANH MỤC BẢNG DANH MỤC BIỂU ĐỒ DANH MỤC HÌNH ĐẶT VẤN ĐỀ Tiền sản giật (TSG) năm tai biến sản khoa, chiếm 2-8% biến chứng thời kỳ mang thai yếu tố gây bệnh tật tử vong mẹ toàn giới [1], [2] Bệnh khởi phát giai đoạn sớm nhiên triệu chứng lâm sàng lại biểu muộn, đặc trưng với hai triệu chứng tăng huyết áp protein niệu xuất sau tuần 20 thai kỳ [3] Các giả thuyết bệnh nguyên gần tập trung vào nguyên nhân gốc rễ giảm tưới máu rau thai thiếu sót xâm lấn nguyên bào nuôi sửa đổi động mạch xoắn trình hình thành rau thai [4] Quá trình kiểm soát quần thể tế bào diệt tự nhiên màng rụng mẹ (decidual natural killer cell – dNK) Một yếu tố điều hòa hoạt động dNK kết hợp thụ thể giống kháng thể tế bào diệt (Killer cell immunoglobin-like receptors (KIRs)) tế bào dNK mẹ kháng nguyên bạch cầu người (human leukocyte antigen (HLA)) bật HLA-C biểu nguyên bào nuôi thai [5], [6], [7], [8], [9] HLA-C thuộc HLA lớp I, loại HLA có tính đa hình biểu lộ nguyên bào nuôi trung tâm tương tác nguyên bào nuôi – màng rụng [10], [11] HLA-C chia thành hai nhóm HLA-C1 HLA-C2 dựa tương tác với KIR khác xét cấu trúc phân tử chúng khác acid amin 77 80 vùng α1 (HLA-C1 Ser77Asn80 HLA-C2Asn77Lys80) chuỗi nặng phân tử HLA Locus KIRs có tính đa hình thái gồm nhiều gen khác xếp thành hai haplotype A B có vai trò khác bệnh sinh tiền sản giật [12] Nhiều nghiên cứu thấy rằng, tùy thuộc vào HLA-C1 hay C2 thai nhi tương tác với KIR A hay B mẹ mà có vai trò bảo vệ hay phát sinh tiền sản giật [5], [13], [14], [15], [16] Các quần thể người khác biểu tần số KIR HLA-C khác ý nghĩa tương tác KIR HLA-C khác Các nghiên cứu Hiby (2004) [5], Nakimuli (2015) [17] cho thấy tương tác KIR AA mẹ HLA-C2 tăng có ý nghĩa nhóm tiền sản giật, nghiên cứu Long W (2015) [14] lại không thấy điều Nghiên cứu thai phụ người châu Âu thai kỳ mà nguyên bào nuôi biểu HLA-C2 gen KIR quan trọng mang tính “bảo vệ” cho thai kỳ thành công gen nằm vùng telomer B haplotype B, vùng chứa gen “hoạt hoá” KIR2DS1 [5], [18] Tuy nhiên nghiên cứu quần thể người châu Phi Nakimuli lại cho thấy gen bảo vệ KIR2DS5 KIR2DL1 vùng centromer KIR B [17] Tại Việt Nam vấn đề tương tác mẹ - thai KIR – HLA-C vấn đề chưa có nghiên cứu đề cập đến, với mục đích tìm hiểu sâu vấn đề chế bệnh sinh tiền sản giật ý nghĩa cụ thể tương tác quần thể người Việt tiến hành đề tài “Bước đầu nghiên cứu kiểu gen HLA-C trẻ có mẹ tiền sản giật” với mục tiêu: Mô tả kiểu gen HLA-C1 HLA-C2 trẻ có mẹ bình thường trẻ có mẹ tiền sản giật Xác định mối liên quan kiểu gen HLA-C trẻ số đặc điểm lâm sàng cận lâm sàng mẹ tiền sản giật 10 CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan 1.1.1 Định nghĩa tiền sản giật Theo Hiệp hội quốc tế nghiên cứu tăng huyết áp thai kỳ TSG xác định huyết áp thấp 140/90 mmHg hai lần đo liên tiếp cách phối hợp với protein niệu 0,3g mẫu nước tiểu 24h (hoặc >30mg/mmol tỷ lệ protein/creatinin), tình trạng xuất không rõ nguyên nhân sau tuần 20 thai kỳ người phụ nữ có huyết áp bình thường trước biến hoàn toàn sau sinh tuần [3] Hiện nước ta theo chuẩn Quốc gia dịch vụ chăm sóc sức khỏe sinh sản 2009 [19], TSG phân loại sau: Bảng 1.1 Phân loại tiền sản giật Triệu chứng Huyết áp tâm trương Protein niệu Nhức đầu Rối loạn thị giác: mờ mắt, nhìn đôi Đau thượng vị Tăng phản xạ Thiểu niệu Phù phổi Xét nghiệm hóa sinh Tiền sản giật nhẹ ≥ 90 - 110mmHg Vết, + ++ Không Không Tiền sản giật nặng ≥ 110mmHg +++ nhiều Có Có Không Không Không Không Bình thường Có Có Có Có Ure, SGOT, SGPT, acid uric, bilirubin chất tăng cao máu, tiểu cầu protein huyết toàn phần giảm Theo ACOG 2013, triệu chứng thiểu niệu không kèm thay đổi số hóa sinh, thai chậm phát triển tử cung số lượng protein niệu không sử dụng phân loại TSG nặng [20] 1.1.2 Các 10 yếu tố nguy chế bệnh sinh 40 King A., Burrows T D., Hiby S E., et al (2000) Surface expression of HLA-C antigen by human extravillous trophoblast Placenta, 21 (4), 376-387 41 Apps R., Murphy S P., Fernando R., et al (2009) Human leucocyte antigen (HLA) expression of primary trophoblast cells and placental cell lines, determined using single antigen beads to characterize allotype specificities of anti-HLA antibodies Immunology, 127 (1), 26-39 42 Undlien D E., Lie B A Thorsby E (2001) HLA complex genes in type diabetes and other autoimmune diseases Which genes are involved? Trends in Genetics, 17 (2), 93-100 43 Nguyễn Ngọc Lanh Văn Đình Hoa (2014) Miễn dịch học, Nhà xuất Y học, Hà Nội 44 Turner S., Ellexson M E., Hickman H D., et al (1998) Sequence-based typing provides a new look at HLA-C diversity J Immunol, 161 (3), 1406-1413 45 Kostyu D D., Hannick L I., Traweek J L., et al (1997) HLA class I polymorphism: structure and function and still questions Hum Immunol, 57 (1), 1-18 46 Robinson J., Mistry K., McWilliam H., et al (2010) IPD—the Immuno Polymorphism Database Nucleic Acids Research, 38 (Database issue), D863-D869 47 DORAK M T (2011) C1 and C2 Epitopes Acting as Ligands for Natural Killer Cell Killer-Ig-like-Receptors (KIRs), , 48 Apps R., Gardner L., Hiby S E., et al (2008) Conformation of human leucocyte antigen-C molecules at the surface of human trophoblast cells Immunology, 124 (3), 322-328 74 49 Lanier L L (1998) NK cell receptors Annu Rev Immunol, 16, 359-393 50 Vacca P., Mingari M C Moretta L (2013) Natural killer cells in human pregnancy J Reprod Immunol, 97 (1), 14-19 51 King A., Loke Y W Chaouat G (1997) NK cells and reproduction Immunology Today, 18 (2), 64-66 52 Bashirova A A., Martin M P., McVicar D W., et al (2006) The killer immunoglobulin-like receptor gene cluster: tuning the genome for defense Annu Rev Genomics Hum Genet, 7, 277-300 53 Uhrberg M., Valiante N M., Shum B P., et al (1997) Human diversity in killer cell inhibitory receptor genes Immunity, (6), 753-763 54 Bashirova A A., Thomas R Carrington M (2011) HLA/KIR restraint of HIV: surviving the fittest Annu Rev Immunol, 29, 295-317 55 Vilches C Parham P (2002) KIR: diverse, rapidly evolving receptors of innate and adaptive immunity Annu Rev Immunol, 20, 217-251 56 Trowsdale J (2001) Genetic and functional relationships between MHC and NK receptor genes Immunity, 15 (3), 363-374 57 Carrington M Norman P (2003) The KIR Gene Cluster, Bethesda, MD: National Library of Medicine (US), National Center for Biotechnology Information 58 Yu H., Pan N., Shen Y., et al (2014) Interaction of parental KIR and fetal HLA-C genotypes with the risk of preeclampsia Hypertens Pregnancy, 33 (4), 402-411 59 Beaman K D., Jaiswal M K., Dambaeva S., et al (2014) Future directions of clinical laboratory evaluation of pregnancy Cell Mol Immunol, 11 (6), 582-588 75 60 Saito S., Kasahara T., Sakakura S., et al (1994) Interleukin-8 production by CD16-CD56bright natural killer cells in the human early pregnancy decidua Biochem Biophys Res Commun, 200 (1), 378-383 61 Hiby S E., Regan L., Lo W., et al (2008) Association of maternal killercell immunoglobulin-like receptors and parental HLA-C genotypes with recurrent miscarriage Human Reproduction, 23 (4), 972-976 62 Dambaeva S V., Lee D H., Sung N., et al (2016) Recurrent Pregnancy Loss in Women with Killer Cell Immunoglobulin-Like Receptor KIR2DS1 is Associated with an Increased HLA-C2 Allelic Frequency American Journal of Reproductive Immunology, 75 (2), 94-103 63 Sibai B M (2003) Diagnosis and management of gestational hypertension and preeclampsia Obstet Gynecol, 102 (1), 181-192 64 Gentle N L., Loubser S., Paximadis M., et al (2017) Killer-cell immunoglobulin-like receptor (KIR) and human leukocyte antigen (HLA) class I genetic diversity in four South African populations Hum Immunol, 78 (7-8), 503-509 65 Gamliel M., Anderson K L., Ebstein R P., et al (2016) Paternal HLA-C and Maternal Killer-Cell Immunoglobulin-Like Receptor Genotypes in the Development of Autism Front Pediatr, 4, 76 66 Alomar S Y., Alkhuriji A., Trayhyrn P., et al (2017) Association of the genetic diversity of killer cell immunoglobulin-like receptor genes and HLA-C ligand in Saudi women with breast cancer Immunogenetics, 69 (2), 69-76 67 Sun C., Sanjeevi S., Luo F., et al (2016) Interactions between maternal killer cell immunoglobulin receptor genes and foetal HLA ligand genes contribute to type diabetes susceptibility in Han Chinese Int J Immunogenet, 43 (3), 125-130 76 68 Kunert K., Seiler M., Mashreghi M F., et al (2008) KIR/HLA Ligand Incompatibility in Kidney Transplantation, 69 Guillaume N., Loiseau P., Gagne K., et al (2016) Natural killer cell licensing after double cord blood transplantation is driven by the selfHLA class I molecules from the dominant cord blood Haematologica, 101 (5), e209 70 Lê Thị Mai (2004) Nghiên cứu tình hình sản phụ bị nhiễm độc thai nghén đẻ Bệnh viện Phụ sản Trung ương năm 2003, Luận văn Tốt nghiệp bác sĩ chuyên khoa cấp II, Đại học Y Hà Nội 71 Phạm Thị Mai Anh (2009) Nghiên cứu thông số Doppler động mạch tử cung thai phụ tiền sản giật, Luận văn Thạc sỹ Y học, Đại học Y Hà Nội 72 Lê Thiện Thái (2011) Nghiên cứu ảnh hưởng bệnh lý tiền sản giật lên thai phụ thai nhi đánh giá hiệu phác đồ điều trị, Luận án Tiến sỹ Y học, Đại học Y Hà Nội 73 Nguyễn Chính Nghĩa Phạm Thiện Ngọc (2011) Nghiên cứu nồng độ yếu tố tân tạo mạch máu (PLGF) yếu tố kháng tân tạo mạch máu (sFlt-1) huyết thai phụ có nguy tiền sản giật Y học Việt Nam, 384 (2), 94-104 74 Nguyễn Chính Nghĩa Phạm Thiện Ngọc (2013) Nghiên cứu yếu tố phát triển rau thai (PlGF) thụ thể yếu tố phát triển tế bào nội mạc hòa tan (sFlt-1) huyết thai phụ bình thường thai phụ có nguy tiền sản giật., Luận văn Tiến sỹ Y học, Đại học Y Hà Nội 75 Phạm Phương Hạnh (2014) Nghiên cứu hoạt độ Lactat dehydrogenase huyết thai phụ tiền sản giật Bệnh viện Sản Hà Nội, Luận văn tốt nghiệp bác sĩ chuyên khoa II, Đại học Y Hà Nội 77 76 Nguyễn Duy Ánh Nguyễn Thanh Thúy (2015) Bước đầu xây dựng đường chuẩn sử dụng kỹ thuật Real time PCR để định lượng DNA phôi thai huyết tương thai phụ tiền sản giật Y học Việt Nam, 426, 77 Bộ Y tế (2009) Hướng dẫn quốc gia dịch vụ chăm sóc sức khỏe sinh sản 78 Leonard S., Murrant C., Tayade C., et al (2006) Mechanisms regulating immune cell contributions to spiral artery modification facts and hypotheses a review Placenta, 27 Suppl A, S40-46 79 Chazara O., Xiong S Moffett A (2011) Maternal KIR and fetal HLAC: a fine balance J Leukoc Biol, 90 (4), 703-716 80 Moffett A Loke C (2006) Immunology of placentation in eutherian mammals Nat Rev Immunol, (8), 584-594 81 Dương Thị Cương (2006) Bài giảng sản phụ khoa Đại học Y Hà Nội, Nhà xuất Y học 82 Nguyễn Thị Phượng (2015) Ngiên cứu số đặc điểm huyết học thai phụ tiền sản giật Bệnh viện Phụ sản Trung ương Luận văn Thạc sỹ Y khoa, 83 Nguyễn Thị Khảm (2008) Nghiên cứu số số hóa sinh huyết học sản phụ tiền sản giật Bệnh viện Phụ sản Trung ương từ 7/2006 đến 6/2008 Luận văn tốt nghiệp bác sỹ chuyên khoa II, 84 Ngô Văn Tài (2006) Tiền sản giật - Sản giật, Nhà xuất y học, Hà Nội 85 Saftlas AF O D., Franks Al, and et al (1990) Epidemiology of preeclampsia and eclampsia in the United states, 1979-1986 Am J Obstet Gynecol, 163, 460-465 86 Lunati F D M., Campanini M, (2008) Hypertension in pregnancy Recenti Prog Med., 99(9), 261-275 78 87 Phan Thị Thu Huyền (2008) Nghiên cứu định đình thai nghén thai phụ bị tiền sản giật Bệnh viện Phụ sản Trung ương Luận văn Thạc sỹ Trường Đại học Y Hà Nội., 88 Magee LA v D P (2009) The management of severe hypertension Semin Perinatol, 33(3), 138-142 89 Marik PE (2009) Hypertensive disorders of pregnancy Postgrad Med, 121 (2), 69-76 90 Yavuzcan A (2014) Mean platele Volume, Neutrophil-Lymphocyte Ratio and Platelet-Lymphocyte Ratio in Severe Preeclampsia Ginekol, 85, 197203 91 Abdullahi et al (2014) Red blood cell distribution width is not correlated with preclampsia among pregnant Sudanese women, Diagnostic Pathology 9:29, 92 B Namavar Jahromi S R (2009) Coagulation Factors in Severe Preeclampsia Iranian Red Crescent Medical Journal, 93 Precious Nc Alisi (2014) Some blood cell changes and alteration in renal and hepatic function in pre-eclampsia: A study in Owerri Nigeria International Blood Research & Reviews, 2(3), 132-139 94 Hofmeyr GJ B M (2009) Proteinuris as a predictor of complications of pre-eclampsia BMC Med, (7-11), 95 Lawlor DA M S., Nitsch D and et al, (2005) Association between childhood and adulthood socioeconomic position and pregnancy induced hypertension: results from the Aberdeen children of the 1950s cohort study J Epidemiol Community Health, 59(1), 49-55 96 Fisher K A., Luger A., Spargo B H., et al (1981) Hypertension in pregnancy: clinical-pathological correlations and remote prognosis Medicine (Baltimore), 60 (4), 267-276 79 97 Haram K., E Svendsen, and U Abildgaard, (2009) The HELLP syndrome: Clinical issues and management A Review BMC Pregnancy and Childbirth, 9, 98 Phan Trường Duyệt cộng (5/2000) Một số thay đổi sinh hóa nhiễm độc thai nghén Tạp chí Thông tin Y dược, 36-40 99 Studd JWW et al (1990) Serum protein changes in preeclampsia – eclampsia syndrome British J Obstet Gynecol, 77 (796-801), 100 Boyington J C., Motyka S A., Schuck P., et al (2000) Crystal structure of an NK cell immunoglobulin-like receptor in complex with its class I MHC ligand Nature, 405 (6786), 537-543 101 Trịnh Văn Bảo (2008) Di truyền Y học, Nhà xuất Y học, Hà Nội 102 Parham P Guethlein L A (2010) Pregnancy immunogenetics: NK cell education in the womb? The Journal of Clinical Investigation, 120 (11), 3801-3804 103 Yawata M., Yawata N., McQueen K L., et al (2002) Predominance of group A KIR haplotypes in Japanese associated with diverse NK cell repertoires of KIR expression Immunogenetics, 54 (8), 543-550 104 Roberts J M (1999) Objective evidence of endothelial dysfunction in preeclampsia Am J Kidney Dis, 33 (5), 992-997 105 Roberts J M., Taylor R N., Musci T J., et al (1989) Preeclampsia: an endothelial cell disorder Am J Obstet Gynecol, 161 (5), 1200-1204 80 PHỤ LỤC BỆNH ÁN NGHIÊN CỨU Bệnh án số:…….… I II Hành Họ tên trẻ:…………………………………………………… Ngày sinh: … ……………………………………………… Tuổi … Tuổi thai sinh:…….Tuổi thai tham gia nghiên cứu:… Phương pháp sinh:  Đẻ thường Đẻ mổ Cân nặng trẻ sinh:…………………………………………………… Họ tên mẹ:……………… Tuổi:………………… Nghề nghiệp: Mang thai lần: PARA (trước sinh)  Thời điểm xuất tiền sản giật:……………………………………… Chuyên môn Đặc điểm trẻ (tích √ vào  có) Cân nặng sinh: Chiều cao sinh: Apgar phút sau sinh: Bệnh bẩm sinh:  Có Cụ thể:  Không Đặc điểm phát triển thể chất:  Bình thường  Chậm Cụ thể: Đặc điểm phát triển tâm thần:  Bình thường  Chậm Cụ thể: Đặc điểm phát triển vận động:  Bình thường  Chậm Cụ thể: 81 Đặc điểm mẹ (tích √ vào  có) • Huyết áp (mmHg):…………………………………………………… • Phù  • Đau đầu  • Nhìn mờ  • Hoa mắt, chóng mặt  • Đau thượng vị  • Protein niệu (>300mg/l/24h)  • Hồng cầu (T/L):……………………………………………………… Hemoglobin (g/L):…………………………………………………… Bạch cầu (G/L):…………………………………………………… • Tiểu cầu (G/L):…………………………………………………… • AST (U/L):…………………………………………………………… • ALT (U/L):…………………………………………………………… • Ure (mmol/l):………………………………………………………… • Creatinin (μmol/l):…………………………………………………… • Acid uric (μmol/l):…………………………………………………… Xác định đặc điểm gen HLA-C trẻ (tích √ vào  có) • Tách chiết DNA (OD260/OD280):…………………………………… • HLA-C1C1  HLA-C1C2  HLA-C2C2  • • 82 DANH SÁCH BỆNH NHÂN NGHIÊN CỨU STT Họ tên BN Địa Mã số bệnh án Nguyễn Thị Hồng H Hà Nội 15004911 Trịnh Thị Thu T Hà Nội 17034941 Nguyễn Thị Phương T Hà Nội 16235369 Nguyễn Thị Kim C Thái Bình 17039448 Nguyễn Lệ T Hà Nội 15083331 Hà Thị T Hà Nam 13011297 Bùi Thanh H Hải Phòng 15071762 Chu Anh T Hà Nội 17047940 Nguyễn Thùy L Hà Nội 17047237 10 Nguyễn Thị Hải L Hà Nội 11096921 11 Nguyễn Thị Minh H Hà Nội 60503446 12 Trần Thị M Thanh Hóa 17035857 13 Phạm Việt T Hà Nội 16154369 14 Bùi Thị Thu P Thanh Hóa 13002299 15 Lại Thị Thùy L Thái Bình 17012689 16 Lương Ngọc T Hà Nội 13090986 17 Nguyễn Thị O Hà Nội 17050430 18 Nguyễn Thị H Hà Nội 12083486 19 Nguyễn Phương T Hà Nội 15004809 20 Nguyễn Thị T Hà Nội 16128107 21 Nguyễn Như K Hà Nội 12123156 22 Mai Thị H Hà Nội 13040701 23 Nguyễn Thị T Hà Nội 17063775 24 Văn Thị Minh H Hà Nội 16211113 25 Nguyễn Thị Thu H Hà Nội 15048071 26 Trịnh Thị C Hà Nội 16008057 27 Vũ Thị Diệu L Hà Nội 16012445 28 Lê Ngọc L Hà Nội 14075879 29 Đào Thị Hồng L Hà Nội 16088449 83 30 Trần Thị D Thanh Hóa 14064184 31 Lục Việt H Thanh Hóa 13069711 32 Lê Thùy L Hà Nội 15063826 33 Nguyễn Thị Minh H Hà Nội 14122976 34 Tạ Thị T Hà Nội 9063372 35 Vũ Thị N Hà Nội 11046380 36 Trần Thị B Hà Nội 16016110 37 Phạm Thị L Hà Nội 17087000 38 Nguyễn Thu T Hà Nội 17034836 39 Nguyễn Thị N Hà Nội 12142761 40 Đặng Thị Phương D Hà Nội 17069375 41 Cao Thị H Hà Nội 17076284 42 Trần Thị Phương T Hà Nội 17075789 43 Nguyễn Thị Thu T Hà Nội 17685474 44 Hoàng Kiều L Hà Nội 10103929 45 Vi Thị Thanh Q Hà Nội 17054226 46 Bùi Phương H Hà Nội 10022873 47 Cao Thị N Hà Nội 17055992 48 Lê Thị D Hà Nội 14147043 49 Hà Thị H Hà Nội 17062866 50 Hoàng Thị Vân A Hà Nội 17078051 51 Nguyễn Thùy L Hà Nội 17077471 52 Đỗ Thị H Hà Nội 16032034 53 Phạm Thị L Hà Nội 12004442 54 Nguyễn Minh T Hà Nội 17005948 55 Nguyễn Ngọc C Hà Nội 17252348 56 Nguyễn Thị Thu H Hà Nội 16115207 57 Nguyễn Ngọc T Hà Nội 13086188 58 Lê Thị H Hà Nội 17076345 59 Lê Bảo N Hà Nội 17060510 60 Nguyễn Thị T Hà Nội 7113240 84 61 Trần Lệ H Hà Nội 14054059 62 Đào Quỳnh T Hà Nội 16104877 63 Nguyễn Thị Ánh T Phú Thọ 14040800 64 Đặng Thị C Hà Nội 16152897 65 Lưu Hải Y Nghệ An 17047994 66 Vũ Thị T Bắc Ninh 16139912 67 Đoàn Thúy H Hà Nội 17035616 68 Nguyễn Thanh X Hà Nội 15084163 69 Bùi Thu H Hà Nội 60407609 70 Nguyễn Thanh H Vĩnh Phúc 14082929 71 Trần Thị Kim T Vĩnh Phúc 14057935 72 Nguyễn Thị N Hà Nội 17050293 73 Trần Thị A Hà Nội 50900385 74 Hoàng Thị H Hà Nội 11032766 75 Nguyễn Thi D Hà Nội 10172049 76 Nguyễn Thị Thanh T Hà Nội 15068653 77 Đào Diệu H Hà Nội 17052462 78 Nguyễn Hồng T Hà Nội 17165487 79 Hứa Thị Hà D Tuyên Quang 17079512 80 Vũ Thị N Hà Nội 13121506 81 Phạm Thị H Hưng Yên 14096059 82 Nguyễn Thị Kim T Hà Nội 10033057 83 Nguyễn Thị S Hà Nội 17066387 84 Bùi Thanh H Hà Nội 16133590 85 Nguyễn Vũ Vân K Hà Nội 12016972 86 Nguyễn Thị T Hà Nội 16153713 87 Nguyễn Thị H Hà Nội 17969897 88 Ngô Thị K Hòa Bình 17145896 89 Phạm Thu H Hà Nội 17066066 90 Lưu Hồng M Hà Nội 16140954 91 Nguyễn Thị H Hà Nội 17076509 85 92 Trần Thị Thanh B Hà Nội 16140021 93 Nguyễn Thị H Hà Nội 17078749 94 Nguyễn Thị Hồng H Hà Nội 17145872 95 Hà Thị Thanh H Hà Nội 13063703 96 Nguyễn Thị P Hà Nội 17098878 97 Nguyễn Thị A Hà Nội 17096886 98 Nguyễn Thị T Hà Nội 17075614 99 Nguyễn Thị M Bắc Ninh 17000514 100 Trần Thị H Hà Nội 16001662 Xác nhận Ban Giám đốc Bệnh viện Phụ sản Hà Nội 86 PHỤ LỤC SỰ ĐỒNG Ý THAM GIA NGHIÊN CỨU CỦA BỆNH NHÂN ***************** Mở đầu : Chị mời vào nghiên cứu tiến hành nhóm nghiên cứu thuộc Trường Đại học Y Hà nội Chị mời thân chị người có nguy tiền sản giật, tình trạng bệnh lý nghiêm trọng xảy giai đoạn mang thai mà ta tiên lượng sớm nguy phòng, điều trị hay làm giảm bớt tác hại nguy hiểm tiền sản giật Mục đích: Phát xác định kiểu gen HLA-C, kỹ thuật sinh học phân tử không xâm phạm PCR dùng để đánh giá nguy tiền sản giật từ giúp nâng cao chất lượng chăm sóc sinh sản Qui trình thực hiện: Nếu chị đồng ý định tham gia phải trả lời số câu hỏi ngắn trình bệnh lý Sau anh chị đồng ý lấy - ml máu chị để làm xét nghiệm Sau lưu lại hồ sơ theo dõi đợi đến đẻ tiến hành lấy - ml máu cuống rốn ca đẻ Những nguy bất lợi chị tham gia nghiên cứu: − Có thể chị cảm thấy khó chịu trả lời câu hỏi riêng tư câu hỏi, nhiên đảm bảo câu trả lời chị không nói cho không lưu lại hồ sơ − Chúng đảm bảo nguyên tắc vô trùng lấy máu làm thủ thuật (nếu cần) Chị cảm thấy đau chỗ chọc kim Tuy nhiên, phiền toái không đáng kể hết ngày Những lợi ích nhận chị tham gia vào nghiên cứu: Việc trả lời câu hỏi lấy máu phân tích chị giúp tư vấn phát sớm nguy tiền sản giật giúp cho chị sinh lành lặn, khoẻ mạnh, giảm thiểu tác hại tiền sản giật Chi phí trình xét nghiệm: Các anh chị chịu chi phí trình nghiên cứu làm xét nghiệm 87 Đảm bảo riêng tư bí mật: Mỗi bệnh nhân có mã số bệnh án riêng mà không ghi tên vào câu hỏi Chúng đảm bảo giữ bí mật cho chị vấn đề liên quan đến sống riêng tư Các cán nghiên cứu, bao gồm người vấn người lấy máu, hướng dẫn để giữ bí mật cho c Sự tình nguyện tham gia rút lui khỏi nghiên cứu: Sự tham gia chị vào nghiên cứu tự nguyện, không ép buộc Nếu lý mà chị không muốn tiếp tục tham gia chị có quyền tự rút khỏi nghiên cứu lúc bồi thường Liên hệ với người điều tra: Trong trường hợp có tổn thương hay có phản ứng có hại liên quan đến nghiên cứu hay có câu hỏi xin liên hệ với theo địa chỉ: BS Hoàng Thùy Linh Bộ môn Miễn dịch - Sinh lý bệnh Trường Đại học Y Hà Nội Email: linh.ht2891@gmail.com 10 Cuối cùng, sau đọc kỹ thông tin trên, xin tự nguyện đồng ý tham gia nghiên cứu xin tuân thủ qui định nghiên cứu Hà Nội, ngày tháng năm 2017 NGƯỜI ĐỒNG Ý THAM GIA NGHIÊN CỨU (Ký ghi rõ họ tên) 88 ... Bư c đầu nghiên c u kiểu gen HLA- C trẻ c mẹ tiền sản giật với m c tiêu: Mô tả kiểu gen HLA- C1 HLA- C2 trẻ c mẹ bình thường trẻ c mẹ tiền sản giật X c định mối liên quan kiểu gen HLA- C trẻ số... hóa gen MHC lần phát biểu lộ màng tế bào bạch c u C c MHC lớp I bao gồm: gen c điển (lớp Ia) c HLA- A, -B, -C gen không c điển (lớp Ib) c HLA- E, -F, -G MHC lớp gồm locus gen HLA- DP (c gen A HLA- DPA1,... loại HLA- C [15], [47] Cw*0102 Cw*0103 Cw*0104 Cw*0105 Cw*0302 Cw*0303 Cw*0304 Cw*0305 Cw*0306 Cw*0308 Cw*0309 Cw*0310 Cw*0311 Cw*0312 Cw*0313 Cw*0314 Cw*0701 HLA- C1 77Ser80Asn Cw*0702 Cw*0703 Cw*0704