Nghiên cứu thành phần hóa học, hoạt tính sinh học và tạo chế phẩm dầu tắm cho trẻ em từ tinh dầu cây đơn kim (tt)

Nghiên cứu thành phần hóa học, hoạt tính sinh học và tạo chế phẩm dầu tắm cho trẻ em từ tinh dầu cây đơn kim (tt)Nghiên cứu thành phần hóa học, hoạt tính sinh học và tạo chế phẩm dầu tắm cho trẻ em từ tinh dầu cây đơn kim (tt)Nghiên cứu thành phần hóa học, hoạt tính sinh học và tạo chế phẩm dầu tắm cho trẻ em từ tinh dầu cây đơn kim (tt)Nghiên cứu thành phần hóa học, hoạt tính sinh học và tạo chế phẩm dầu tắm cho trẻ em từ tinh dầu cây đơn kim (tt)Nghiên cứu thành phần hóa học, hoạt tính sinh học và tạo chế phẩm dầu tắm cho trẻ em từ tinh dầu cây đơn kim (tt)Nghiên cứu thành phần hóa học, hoạt tính sinh học và tạo chế phẩm dầu tắm cho trẻ em từ tinh dầu cây đơn kim (tt)Nghiên cứu thành phần hóa học, hoạt tính sinh học và tạo chế phẩm dầu tắm cho trẻ em từ tinh dầu cây đơn kim (tt)Nghiên cứu thành phần hóa học, hoạt tính sinh học và tạo chế phẩm dầu tắm cho trẻ em từ tinh dầu cây đơn kim (tt)Nghiên cứu thành phần hóa học, hoạt tính sinh học và tạo chế phẩm dầu tắm cho trẻ em từ tinh dầu cây đơn kim (tt)Nghiên cứu thành phần hóa học, hoạt tính sinh học và tạo chế phẩm dầu tắm cho trẻ em từ tinh dầu cây đơn kim (tt)Nghiên cứu thành phần hóa học, hoạt tính sinh học và tạo chế phẩm dầu tắm cho trẻ em từ tinh dầu cây đơn kim (tt)Nghiên cứu thành phần hóa học, hoạt tính sinh học và tạo chế phẩm dầu tắm cho trẻ em từ tinh dầu cây đơn kim (tt)Nghiên cứu thành phần hóa học, hoạt tính sinh học và tạo chế phẩm dầu tắm cho trẻ em từ tinh dầu cây đơn kim (tt)Nghiên cứu thành phần hóa học, hoạt tính sinh học và tạo chế phẩm dầu tắm cho trẻ em từ tinh dầu cây đơn kim (tt)

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC

- -

BÁO CÁO TỔNG KẾT

ĐỀ TÀI KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ CẤP ĐẠI HỌC

NGHIÊN CỨU NÂNG CAO HIỆU QUẢ

CÔNG TÁC QUẢN LÝ MÔI TRƯỜNG BẰNG CÔNG

NGHỆ KHÔNG ĐỐT XỬ LÝ CHẤT THẢI RẮN Y TẾ LÂY NHIỄM TẠI BỆNH VIỆN ĐA KHOA TRUNG ƯƠNG THÁI

NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC, HOẠT TÍNH SINH

HỌC VÀ TẠO CHẾ PHẨM DẦU TẮM CHO TRẺ EM TỪ

TINH DẦU CÂY ĐƠN KIM

Mã số: ĐH2015-TN06-06

Xác nhận của tổ chức chủ trì Chủ nhiệm đề tài

Thái Nguyên, 7/2017

DANH SÁCH NHỮNG THÀNH VIÊN THAM GIA NGHIÊN CỨU ĐỀ TÀI VÀ

ĐƠN VỊ PHỐI HỢP CHÍNH

I Thành viên thực hiện đề tài

- PGS.TS Dương Nghĩa Bang – Khoa Hóa – Trường Đại học Khoa học – Đại học Thái Nguyên

- TS Phạm Thị Thắm – Khoa Hóa học - Trường Đại học Khoa học - Đại học Thái Nguyên

II Đơn vị phối hợp thực hiện

- Viện Hóa học

- Viện Hóa sinh biển

DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT

Half Maximal Inhibitory Concentration

8 MS Mass Spectrocopy (Phổ khối lượng)

(Sắc kí khí)

Electrospray Ionization (Ion hóa hơi mù tia điện)

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN

TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC

THÔNG TIN KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU

1 Thông tin chung:

- Tên đề tài: Nghiên cứu thành phần hóa học, hoạt tính sinh học và tạo chế phẩm dầu tắm cho trẻ em từ tinh dầu cây đơn kim

- Mã số: ĐH2015 - TN06 - 06

- Chủ nhiệm: TS Phạm Thế Chính

- Tổ chức chủ trì: Trường Đại học Khoa học - Đại học Thái Nguyên

- Thời gian thực hiện: 01/2015 - 12/2016

2 Mục tiêu:

+ Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của tinh dầu cây đơn kim + Tạo chế phẩm dạng dầu tắm cho trẻ em và xây dựng tiêu chuẩn cơ sở cho chế phẩm này

3 Tính mới, tính sáng tạo:

Đề tài đã phân lập được tinh dầu cây đơn kim và xác định được các thành phần hóa học trong tinh dầu cây đơn kim (đơn đất), trong đó đã nhận dạng được trên hai mươi thành phần, hai hợp chất ageratochromene và caryophyllene oxide là hai thành phần chính lớn nhất

Lần đầu tiên đề tài đã phát hiện tinh dầu đơn kim (đơn đất) có hoạt tính ức chế mạnh

dòng vi khuẩn B Subtilis và thể hiện hoạt tính chống oxy hóa Đây là kết quả rất có ý

nghĩa khoa học nhằm tìm kiếm các ứng dụng dược dụng của cây thuốc này

Đề tài đã phát hiện cặn chiết M (diclometan) ức chế mạnh trực khuẩn Staphylococus

arenus và Bacillus subtililis và có thể hiện mạnh hoạt tính chống oxy hóa Ngoài ra, cặn

chiết E (etyl axetat) ức chế trực khuẩn Staphylococus arenus và chống oxy hóa với nồng

Đề tài đã phân lập được ba hợp chất tinh khiết là: 1-allyl-4-metoxybenzen từ cặn

chiết H (n-hexan), stigmasterol từ cặn chiết M (diclometan) và

3-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl) propan-1,2-diol từ cặn chiết E (etyl axetat) bằng sắc ký cột

4 Kết quả nghiên cứu:

Đề tài đã phân lập xác định được 51 thành phần hóa học trong tinh dầu cây đơn đất, trong đó đã nhận dạng được 26 thành phần, hai hợp chất ageratochromene (11,85%) và caryophyllene oxide (11,69%) là hai thành phần chính lớn nhất

Tinh dầu đơn đất có hoạt tính ức chế mạnh dòng vi khuẩn B Subtilis với MIC50 = 17,34g/ml và thể hiện hoạt tính chống oxy hóa với EC50 = 200g/ml

Cặn chiết M (diclometan) ức chế mạnh trực khuẩn Staphylococus arenus với MIC50

= 52,7µg/ml và Bacillus subtililis với MIC50 = 159,1µg/ml, hoạt tính chống oxy hóa ở nồng

độ EC50 = 198,6µg/ml Cặn chiết E (etyl axetat) ức chế trực khuẩn Staphylococus arenus

với MIC50 = 160,0µg/ml và chống oxy hóa với nồng độ EC50 = 145,3 µg/ml

Từ kết quả hoạt tính đề tài đã bào chế thành công được bột tắm dược liệu và đăng ký thành công thương hiệu và bằng sáng chế dạng bột tắm này

Đề tài cũng đã bào chề thành công dạng sữa tắm từ tình dầu cây đơn kim (đơn đất)

có hoạt tính kháng khuẩn mạnh

Đề tài đã phân lập được ba hợp chất tinh khiết là: 1-allyl-4-metoxybenzen từ cặn

chiết H (n-hexan), stigmasterol từ cặn chiết M (diclometan) và

3-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl) propan-1,2-diol từ cặn chiết E (etyl axetat) bằng sắc ký cột

5 Sản phẩm:

5.1 Sản phẩm khoa học:

01 Bằng sáng chế

Phạm Thế Chính, Phạm Thị Thắm (2017), “Bột tắm dược liệu”, Bằng sáng chế số

1-2016-05044 - Cục sở hữu Trí tuệ Việt Nam

Có 03 bài báo đăng trên tạp chí Khoa học

1 Phạm Thế Chính, Phạm Thị Thắm, Dương Nghĩa Bang, Dương Thị Hoạt (2015),

“Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của tinh dầu cây đơn đất (Wedelia

chinensis Merr.)”, Tạp chí hóa học ứng dụng, số 4, 14-17

2 Phạm Thế Chính, Nguyễn Thảo Hiền, Lê Thị Mỹ Linh, Trương Thị Tươi, Phạm Thị Thắm, Đào Phương Lan (2017), “Thành phần hóa học của dịch chiết diclometan cây đơn

đất (Wedelia chinensis Merr.) thu hái tại Thái Bình”, Tạp chí hóa học ứng dụng, số 3,

17-20

3 Phạm Thế Chính (2017), “Bước đầu về thành phần hóa học của cặn chiết etyl axetat cây

đơn đất (Wedelia chinensis Merr.)”, Tạp chí hóa học ứng dụng, số 3, 29-31

5.2 Sản phẩm chuyển giao khoa học và công nghệ

02 Hợp đồng chuyển giao công nghệ

1 Hợp đồng chuyển giao công nghệ về quy trình phân lập tinh dầu cây đơn kim và đơn đất cho Công ty TNHH Hoàng Châu, Đoan Phượng, Hà Nội

2 Hợp đồng thương mại hóa sản phẩm bột tắm cho công ty TNHHTM và DV An Đức – Vũ Thư – Thái Bình

5.3 Sản phẩm đào tạo:

* Có 05 đề tài sinh viên NCKH đã nghiệm thu:

1 Dương Thị Hoạt (2015), Nghiên cứu thành phần hóa học của tinh dầu cây đơn kim, Đề tài

sinh viên nghiên cứu khoa học, Trường Đại học Khoa học – Đại học Thái Nguyên

2 Nguyễn Thảo Hiền (2016), Nghiên cứu thành phần hóa học của cặn chiết phân cực cây đơn

kim, Đề tài sinh viên nghiên cứu khoa học, Trường Đại học Khoa học – Đại học Thái Nguyên

3 Lê Thị Mỹ Linh (2016), Nghiên cứu thành phần hóa học của cặn chiết phân cực trung bình

của cây đơn kim, Đề tài sinh viên nghiên cứu khoa học, Trường Đại học Khoa học – Đại học

Thái Nguyên

4 Trương Thị Tươi (2016), Nghiên cứu thành phần hóa học của dịch chiết không phân cực cây

đơn kim, Đề tài sinh viên nghiên cứu khoa học, Trường Đại học Khoa học – Đại học Thái

Nguyên

5 Nguyễn Thị Quỳnh Ngân (2017), Nghiên cứu chế tạo chế phẩm sữa tắm từ cây đơn đất (đơn

kim), Đề tài sinh viên nghiên cứu khoa học, Trường Đại học Khoa học – Đại học Thái Nguyên

6 Nguyễn Thảo Hiền, Lê Thị Mỹ Linh, Trương Thị Tươi, Dương Thị Hoạt, Thành phần

hóa học và hoạt tính sinh học của cây đơn kim (đơn đất), Đề tài đạt giải thưởng Eureka,

2016, Tp Hồ Chí Minh (Giải Khuyến khích)

* Có 03 KLTN Đại học đã nghiệm thu:

1 Trương Thị Tươi (2017), Nghiên cứu thành phần hóa học và phân tích cấu trúc của các

hợp chất phân lập từ cặn chiết n-hexan cây đơn kim (đơn đất), Khóa luận tốt nghiệp, Trường Đại học Khoa học – Đại học Thái Nguyên

2 Nguyễn Thảo Hiền (2017), Nghiên cứu thành phần hóa học và phân tích cấu trúc của các

hợp chất phân lập từ cặn chiết etyl axetat cây đơn kim (đơn đất), Khóa luận tốt nghiệp,

Trường Đại học Khoa học – Đại học Thái Nguyên

3 Lê Thị Mỹ Linh (2017), Nghiên cứu thành phần hóa học và phân tích cấu trúc của các hợp

chất phân lập từ cặn chiết diclometan cây đơn kim (đơn đất), Khóa luận tốt nghiệp, Trường

Đại học Khoa học – Đại học Thái Nguyên

6 Phương thức chuyển giao, địa chỉ ứng dụng, tác động và lợi ích mang lại của kết quả nghiên cứu:

Chuyển giao quy trình công nghệ phân tách tinh dầu cho Công ty TNHH Hoàng Châu, Đoan Phượng, Hà Nội

Chuyển giao thương mại hóa hóa sản phẩm bột tắm cho Công ty TNHHTM và DV

(ký, họ và tên)

TS Phạm Thế Chính

INFORMATION ON RESEARCH RESULTS

1 General information:

Project title: Study on chemical constituents and bioactivity of Wedelia chinensis

essential oil and preparation of soap from this essential oil

Code number: ĐH2015 - TN06 - 06

Coordinator: Dr Pham The Chinh

Implementing institution: TNU - University of Sciences

Duration: from 01/2015 to 12/2016

2 Objective(s):

Study on chemical composition and bioactivity of Wedelia chinensis essential oil

Study on preparation of soap from this essential oil

3 Creativeness and innovativeness:

The essential oil in Wedelia chinensis was obtained by distillation method Its main

component is ageratochromene and caryophyllene oxide

The essential oil showed strong antioxidant and strong antibacterial activities against

Bacillus subtililis

The dichlomethane (M) extract showed strong antibacterial activity against

Staphylococus arenus and Bacillus subtililis and showed antioxidant activity The ethyl

acetate (E) extract was active only against Staphylococus arenus and showed antioxidant

3-(4-hydroxy-3-methods

4 Research results:

The essential oil in Wedelia chinensis was obtained by distillation method with its yield 0.15% Its main component is ageratochromene (11.85%) and caryophyllene oxide (11.69%)

The essential oil showed strong antioxidant (EC50 = 200g/ml) and strong antibacterial

activities against Bacillus subtililis at MIC50 = 17.34g/ml

The dichlomethane (M) extract showed strong antibacterial activity against

Staphylococus arenus (MIC50 = 52.7µg/ml) and Bacillus subtililis (MIC50 = 159.1µg/ml)

and showed weak antioxidant activity (EC50 = 198,6µg/ml) The ethyl acetate (E) extract

was active only against Staphylococus arenus (MIC50 = 160.0 µg/ml) and showed

antioxidant activity (EC50 = 145.3 µg/ml)

From data of bioactivity of Wedelia chinensis, the “Medical bath powder” and soap

were preparated

1-Allyl-4-methoxybenzene, stigmasterol and

3-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)propane-1,2-diol were isolated for the first time from Wedelia chinensis

Merr of Thai Binh - Vietnam Their structure determined by means of spectroscopic

methods

5 Products:

5.1 Scientific publications:

There are 03 published papers:

1 Pham The Chinh, Pham Thi Tham, Duong Nghia Bang, Duong Thi Hoat (2015), “Study

on chemical composition and bioactivity of Wedelia chinensis essential oil”, Journal of

Chemistry and Application, No 4, 14-17

2 Pham The Chinh, Nguyen Thao Hien, Le Thi My Linh, Truong Thi Tuoi, Pham Thi Tham, Dao Phuong Lan (2017), “Some natural compounds from dichlomethane extract of

Wedelia chinensis Merr Thai Binh”, Journal of Chemistry and Application, No 3, 17-20

3 Pham The Chinh (2017), “Study on chemical composition ethyl acetate extract of

Wedelia chinensis Merr.”, Journal of Chemistry and Application, No 3, 29-31

1 Technology transfer contract: The process extracting essential oil of Wedelia chinensis

Merr., Hoang Chau Co., Ltd, Doan Phuong, Hanoi

2 Technology transfer contract: Commercialization of Medical bath powder, An Duc -

Trading and Service Company Limited - Vu Thu, Thai Binh

5.3 Training results:

* 05 scientific research student:

1 Duong Thi Hoat (2015), Study on chemical composition of Wedelia chinensis essential

oil, Students study topics scientific, Thai Nguyen University of Sciences - Thai Nguyen

University

2 Nguyen Thao Hien (2016), Study on chemical composition of polar extraction of

Wedelia chinensis Students study topics scientific, Thai Nguyen University of Sciences

- Thai Nguyen University

3 Le Thi My Linh (2016), Study on chemical composition of medium-polar extraction of Wedelia chinensis Students study topics scientific, Thai Nguyen University of Sciences

- Thai Nguyen University

4 Truong Thi Tuoi (2016), Study on chemical composition of non-polar extraction of Wedelia chinensis, Students study topics scientific, Thai Nguyen University of Sciences

- Thai Nguyen University

5 Nguyen Thi Quynh Ngan (2017), Study on preparation of soap from Wedelia chinensis,

Students study topics scientific, Thai Nguyen University of Sciences - Thai Nguyen University

* 03 under graduation thesis:

1 Nguyen Thao Hien (2017), Study on chemical composition of ethyl acetate extract of

Wedelia chinensis, Under graduation thesis, Thai Nguyen University of Sciences - Thai

Nguyen University

2 Le Thi My Linh (2017), Study on chemical composition of dichlomethane extract of Wedelia chinensis Under graduation thesis ,Thai Nguyen University of Sciences - Thai

Nguyen University

3 Truong Thi Tuoi (2017), Study on chemical composition of n-hexane extract of Wedelia

chinensis, Under graduation thesis, Thai Nguyen University of Sciences - Thai Nguyen

University

6 Transfer alternatives, application institutions, impacts and benefits of reserach results:

+ Technology transfer contract: The process extracting essential oil of Wedelia

chinensis Merr., Hoang Chau Co., Ltd, Doan Phuong, Hanoi

+ Technology transfer contract: Commercialization of Medical bath powder, An

Duc - Trading and Service Company Limited - Vu Thu, Thai Binh

MỞ ĐẦU

Từ xa xưa, con người đã biết sử dụng các loại cây, cỏ để phòng và chữa các loại bệnh khác nhau Nhưng chỉ chữa theo kinh nghiệm có được hoặc do kinh nghiệm của người đi trước để lại mà chưa có hiểu biết về cơ sở khoa học trong cây thuốc Trong đó nhiều cây thuốc quý của dân tộc có mặt trong nhiều bài thuốc quan trọng vẫn chưa được nghiên cứu một cách đầy đủ về thành phần hóa học và hoạt tính sinh học để giải thích cơ

sở khoa học của các bài thuốc đang sử dụng

Đơn đất có tên khoa học là Wedelia chinensis hay còn gọi là cây đơn đất, cây còn

có tên gọi khác là đơn kim hoặc đơn buốt tùy theo từng vùng miền gọi khác nhau và

thường bị nhầm lẫn với sài đất (Wedelia calendulacea), được dùng trong dân gian của

nhiều địa phương ở Việt Nam như một vị thuốc quan trọng trong nhiều bài thuốc quý để chữa các căn bệnh khác nhau [5] Theo đông y, đơn đất có vị đắng, tính bình, có tác dụng thanh nhiệt, giải độc, khu phong, hoạt huyết, tan máu ứ, thường dùng để chữa rất nhiều bệnh như: nhiễm trùng đường hô hấp, viêm họng viêm ruột thừa, viêm gan truyền nhiễm, viêm dạ dày - ruột, tiêu hóa kém, đau nhức xương khớp, sốt rét Nó còn được dùng ngoài chữa rắn cắn, nhọt lở, chấn thương sưng đau [1-5]

Đơn đất (Wedelia chinensis) là loài thực vật mọc hoang dại ở khắp nơi trên đất

nước ta từ miền núi, trung du đến đồng bằng Ngoài ra, đơn đất là loài thực vật có mặt ở nhiều nước trên thế giới như: Ấn độ, Trung Quốc, Nhật Bản, Brazil…vv Đây là loài cây mọc quang năm, sức sinh sản nhanh và được coi như là loài “cỏ dại” [2, 5, 6]

Như vậy, đơn đất là một cây thuốc quý và đến nay chưa có nhiều công bố về thành phần hóa học cũng như tác dụng sinh học của tinh dầu và cây đơn đất ở Việt Nam nên đề

tài: “Nghiên cứu thành phần hóa học, hoạt tính sinh học của và tạo chế phẩm dầu tắm

cho trẻ em từ tinh dầu cây đơn kim (đơn đất)” là có ý nghĩa khoa học và thực tiễn nhằm

làm sáng tỏ các cơ sở khoa học của cây thuốc, phát huy giá trị kinh tế và bảo tồn nguồn gen cây thuốc quý hiếm

Mục tiêu chính của đề tài:

+ Nghiên cứu tách tinh dầu cây đơn đất

+ Nghiên cứu hoạt tính sinh học của tinh dầu cây đơn đất

+ Nghiên cứu tạo cặn chiết cây đơn đất theo độ phân cực tăng dần của dung môi

+ Khảo sát hoạt tính sinh học của các cặn chiết cây đơn đất

+ Nghiên cứu phân lập các thành phần hóa học của cặn chiết cây đơn đất

+ Nghiên cứu tạo bột tắm dược liệu

+ Nghiên cứu tạo dầu tắm từ tinh dầu cây đơn đất

CHƯƠNG 1 TỔNG QUAN

Được trình bày trong 10 trang a4 bao gồm các kết quả về

Khái quát về họ cúc (asteraceae)

Khái quát về chi wedelia

Khái quát về cây đơn đất

Thành phần hóa học của cây đơn đất

Công dụng và các kết quả nghiên cứu hoạt tính sinh học của cây đơn đất

CHƯƠNG 2, THỰC NGHIỆM

Thiết bị và hóa chất

Mẫu thực vật cho nghiên cứu

Nghiên cứu tinh dầu cây đơn kim (đơn đất)

Phân tách các dịch chiết cây đơn đất

Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của cặn chiết cây đơn đất

Nghiên cứu tạo bột tắm dược liệu cây đơn kim (đơn đất)

Nghiên cứu tạo chế phầm dầu tắm từ tinh dầu

CHƯƠNG 3 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN

Như đã trình bày trong tổng quan, cây đơn đất là vị thuốc được sử dụng để điều trị các bệnh liên quan nhiễm trùng, bệnh đường tiêu hóa và bệnh do ký sinh Ngoài ra, lá và thân cây đơn đất được dùng để nấu nước tắm cho trẻ em, trẻ sơ sinh và bà mẹ sau khi sinh tại nhiều tỉnh miền Bắc Việt Nam, làm da trẻ em thơm hơn, trắng hơn, không bị nứt lở và không bị côn trùng đốt, trong đó tác dụng chống hăm da trẻ em đã được nhiều tài liệu đông

y đề cập đến [2, 5, 6] Tuy nhiên, cho đến nay thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của tinh dầu loài này ở Việt Nam còn ít được quan tâm nghiên cứu Hơn nữa để có hiểu biết sâu hơn về cơ sở hóa học và cơ sở dược lý của cây thuốc này sẽ góp phần phát huy giá trị kinh tế của cây thuốc nhằm tìm kiếm các ứng dụng mới của cây thuốc trong đời sống

Do đó đề tài Nghiên cứu thành phần hóa họ, hoạt tính sinh học và tạo chế phẩm dầu

tắm cho trẻ em từ tinh dầu cây đơn kim (đơn đất) (Wedelia chinensis) rất có ý nghĩa khoa

học góp phần vào nghiên cứu ứng dụng theo hướng chuyển giao công nghệ

3.1 NGHIÊN CỨU TINH DẦU CÂY ĐƠN ĐẤT

3.1.1 Phân lập tinh dầu đơn đất

Thành phần hóa học của tinh dầu đơn đất mọc hoang dã tại Đài Loan đã được nhóm nghiên cứu của Lin công bố [17, 18] Theo kết quả nghiên cứu này thì thành phần hóa học của tinh dầu đơn đất rất phức tạp, được cấu thành bởi một số nhóm hợp chất rất phổ biến trong các tinh dầu họ Cúc là: monohydrotecpen (50,6%), secquihydrotecpen (22,5%) và các dẫn xuất

có oxy của secquitecpen (20,3%) Trong đó có ba thành phần hóa học thuộc các nhóm trên

là α-pinen (21,7%), spathulenol (20,3%) và limonene (14,3%) Như vậy, thành phần hóa học của tinh dầu đơn đất Đài Loan đã được nghiên cứu rất chi tiết Đơn đất cũng là loài mọc phổ biến ở Việt Nam [1, 2, 5], là nhóm cây thuốc có tinh dầu nên việc nghiên cứu

thành phần hóa học của tinh dầu cây này rất có ý nghĩa về khoa học và thực tiễn tại Việt Nam Đây là lý do khích lệ nhóm nghiên cứu lựa chọn tinh dầu đơn đất là đối tượng nghiên cứu để phát huy, bảo tồn và tìm kiếm các hoạt chất quý từ cây thuốc này

Chưng cất lôi cuốn theo hơi nước là một phương pháp chủ yếu để thu tinh dầu từ thực vật, tuy nhiên với các phương pháp chưng cất lôi cuốn thông thường chỉ thu được các thành phần nhẹ của tinh dầu mà không tận thu triệt để các thành phần nặng khác Ngày nay người ta sử dụng phương pháp cất cuốn hơi nước cải tiến để thu hồi tinh dầu, đây là một phương pháp hiện đại, thuận tiện và cho hiệu suất thu hồi cao Lý do trên chúng tôi lựa chọn phương pháp cất cuốn hơi nước cải tiến để điều chế tinh dầu đơn đất

Hình 3.1 Thiết bị chưng cất tinh dầu cải tiến

Trong thiết bị như trên (hình 3.1) cho phép chúng tôi áp dụng hiệu ứng muối, đun hồi lưu, chiết tinh dầu và cất cuốn hơi nước Cho nguyên liệu đã được chuẩn bị sẵn dung

dịch muối NaCl 15% vào bình cất sao cho dung dịch ngập nguyên liệu, cho dung môi

n-hexan vào bẫy bình nón, đun hồi lưu 4h Khi đun, hỗn hợp hơi dầu - nước theo sinh hàn, ngưng tụ thành dịch dầu - nước, dịch này đi qua lớp dung môi ở bẫy D, tinh dầu tan vào dung môi trong bẫy còn nước thì lắng xuống Với dung dịch muối 15%, làm cho nhiệt độ sôi của dung dịch lên đến 115oC, ở nhiệt độ này tất cả các phần của tinh dầu sẽ bay theo hơi nước Như vậy sau thời gian 4h đun hồi lưu hầu như toàn bộ tinh dầu trong nguyên liệu

đã được chuyển vào dung môi trong bẫy D Tháo dung môi trong bẫy sau đó tiếp tục cất cho đến khi dịch dầu - nước thu được có phản ứng âm tính với thuốc thử Bayer, có nghĩa là tinh dầu đã hoàn toàn ra hết khỏi nguyên liệu Bão hòa dịch dầu nước này bằng NaCl rồi

chiết bằng n-hexan, gộp dung môi chiết này với dung môi vừa lấy ra ở bình nón, làm khô

bằng Na2SO4 khan, tiếp theo loại dung môi ở áp suất thấp thu lấy tinh dầu Kết quả chúng tôi thu được tinh dầu ở dạng lỏng, có màu xanh vàng, hiệu suất thu hồi tinh dầu là 0,015%,

so sánh với kết quả tách tinh dầu của Lin [17, 18] là 0,018% thì hàm lượng tinh dầu đơn đất của Việt Nam mọc ở Thái Bình tương đương như mẫu đơn đất của Đài Loan đã công

bố Quy trình cải tiến này đã góp phần quan trọng trong nghiên cứu chuyển giao công nghệ

cho công ty công nghệ cao Hoàng Châu - Hà Nội để sản xuất tinh dầu cây đơn đất (hợp đồng kèm theo)

3.1.2 Khảo sát thành phần hóa học của tinh dầu đơn đất bằng GC-MS

Ngày nay phương pháp hiện đại nhất để phân tích hàm lượng các thành phần và nhận biết các thành phần trong một hỗn hợp chất lỏng hay chất rắn có nhiệt độ sôi thấp là GC/MS Người ta cho tinh dầu cùng khí mang qua cột sắc kí theo chương trình nhiệt, các thành phần tinh dầu được phân tách trên cột sau đó đưa vào buồng bắn phá khối phổ bằng dòng electron có năng lượng 70eV; ghi phổ khối và so sánh với các phổ khối của các chất chuẩn trong thư viện máy Những thành phần nào có phổ khối trùng lặp trên 90% và phù hợp với quy luật phân rã thì coi là đã nhận biết Số thành phần trong tinh dầu đã được đánh giá bằng số pic cùng với thời gian lưu của nó Hàm lượng của thành phần là % diện tích pic của chúng trên tổng diện tích các pic trong tinh dầu Bằng cách này chúng tôi tiến hành phân tích tinh dầu đơn đất vừa phân tách được HOAT trên máy GC/MS-5980B của hãng Hewlett Packard (USA), trong cùng một điều kiện Kết quả chỉ ra ở hình 3.2 và bảng 3.1

Hình 3.2 Phổ GC của tinh dầu đơn đất HOAT Bảng 3.1 Thành phần hóa học của tinh dầu đơn đất