Kết quả phần khảo sát hoạt tính kháng sinh, hoạt tính chống oxy hóa và hoạt tính chống viêm đã khẳng định tinh dầu cây đơn kim (đơn đất) có hoạt tính sinh học mạnh nhất khi thể hiện đầy đủ các hoạt tính được khảo sát, do đó chúng tôi tiến hành tạo sữa tắm từ dịch chiết này. Theo nguyên tắc của sữa tắm, phải là dịch đồng nhất với pH sinh lý, do đó để đảm bảo pH sinh lý chúng tôi đã lựa chọn xà phòng gốc của hãng Unilever Vietnam chuyên dùng để pha các sữa tắm. Ngoài ra, để tinh dầu phân tán đều vào trong sữa tắm,
chúng tôi lựa chọn PEG-400 là chất lỏng tan tốt cả dung môi phân cực và không cực thường được sử dụng làm dung môi cho nhiều loại dược phẩm. Để lựa nồng độ pha hợp lý nhất chúng tôi tiến hành pha hàng loạt các mẫu theo các nồng độ khác nhau: M15 (15 mg/ml); M20 (20 mg/ml); M30 (30 mg/ml); M40 (40 mg/ml); M50 (50 mg/ml); M60 (60 mg/ml); M70 (70 mg/ml) M80 (80 mg/ml), sau đó thử hoạt tính kháng sinh (kháng S. aureus) của mẫu so với mẫu chuẩn là các xà phòng diệt khuẩn có bán trên thị trường, giá
trị diệt khuẩn được so sánh bằng đường kính của vòng kháng khuẩn. Kết quả thử cho thấy, mẫu pha từ nồng độ 50mg/ ml (mẫu M50) thể hiện hoạt tính kháng khuẩn, từ mẫu M60 đến M80 có đường kính kháng khuẩn lớn hơn. Như vậy, để pha sữa tắm hiệu quả phải chọn nồng độ từ M50. Trong các nghiên cứu tiếp theo chúng tôi tiếp tục nghiên cứu nồng độ cặn chiết tối đa để pha được sữa tắm có tính đồng nhất cao nhất, có tính cảm quan tốt nhất và kinh tế nhất.
KẾT LUẬN
Đã phân lập được tinh dầu đơn đất bằng phương pháp chưng cất lôi cuốn hơi nước cải tiến, hiệu suất 0,015% so với mẫu tươi. Tinh dầu có mùi thơm mạnh dễ chịu và đặc trưng của đơn đất có = 0,950, = 1,477. Bằng phương pháp GC/MS đã xác định được 51 thành phần trong tinh dầu thu được, trong đó đã nhận dạng được 26 thành phần, 4 thành phần hóa học chính có hàm lượng từ 7% trở lên, ageratochromene (11,85%) và caryophyllene oxide (11,69%) là hai thành phần chính lớn nhất.
Tinh dầu đơn đất có hoạt tính ức chế mạnh trên dòng vi khuẩn B. Subtilis với giá trị
MIC50 = 17,34g/ml. Tinh dầu thể hiện hoạt tính chống oxy hóa với giá trị EC50 = 200
g/ml.
Đã phân phân lớp được các cặn chiết của cây đơn đất theo độ phân cực tăng dần của dung môi như n-hexan, diclometan và etyl axetat với hiệu suất lần lượt là 0,86%,
0,56% và 0,36 % so với nguyên liệu khô.
Đã khảo sát được hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định của các cặn chiết cây đơn đất, kết quả cho thấy cặn chiết M (diclometan) và cặn chiết E (etyl axetat) có hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định. Trong đó cặn chiết M có khả năng ức chế mạnh trực khuẩn
Staphylococus arenus ở nồng độ MIC50 = 52,7µg/ml và Bacillus subtililis ở nồng độ
MIC50 = 159,1µg/ml. Cặn chiết E có khả năng ức chế đáng lưu ý trực khuẩn
Staphylococus arenus ở nồng độ MIC50 = 160,0µg/ml.
Đã khảo sát được hoạt tính chống oxy hóa của các cặn chiết cây đơn đất, kết quả cho thấy cặn chiết E có khả năng chống oxy hóa với nồng độ MIC50 = 145,3µg/ml, cặn chiết M có khả năng chống oxy hóa ở nồng độ MIC50 = 198,6 µg/ml.
Đã phân lập được ba hợp chất tinh khiết là: 1-allyl-4-metoxybenzen từ cặn chiết H (n-hexan), stigmasterol từ cặn chiết M (diclometan) và 3-(4-hydroxy-3- methoxyphenyl)propan-1,2-diol từ cặn chiết E (etyl axetat) bằng sắc ký cột.Cấu trúc của 1- allyl-4-metoxybenzen, stigmasterol và 3-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl) propan-1,2-diol được chứng minh bằng các phương pháp NMR và MS.
Đã nghiên cứu tạo bột tắm dược liệu từ cây đơn đất theo hai quy trình nghiền Đã nghiên cứu tạo được chế phẩm dầu tắm từ tinh dầu cây đơn đất.
254 4
KIẾN NGHỊ
Tinh dầu đơn đất có hoạt tính ức chế mạnh trên dòng vi khuẩn B. Subtilis và hiện hoạt tính chống oxy hóa nên chúng tôi sẽ tiếp tục nghiên cứu tìm kiếm quy trình pha chế tinh dầu đơn đất vào các loại mỹ phẩm thảo dược để diệt khuẩn và ngăn chặn các quá trình lão hóa da.
Cơ sở dữ liệu về hoạt tính kháng khuẩn và chống oxy hóa của các cặn chiết cây đơn đất ở trên đã được chúng tôi căn cứ khoa học và làm cơ sở để xây dựng tiêu chuẩn cho loại bột tắm thảo dược đã được đăng ký với tên thương hiệu là wedelia tại cục sở hữu trí tuệ. Tuy nhiên đây cũng là cơ sở khoa học để chúng tôi tiếp tục nghiên cứu tìm kiếm các hợp chất mới có hoạt tính sinh học lý thú trong các cặn chiết này, đồng thời tiếp tục nghiên cứu phát triển các cặn chiết này trong các sản phẩm mỹ phẩm dạng kem, xà phòng diệt khuẩn và kem dưỡng da khác. Căn cứ trên các kết quả đã nghiên cứu và kết quả tìm hiểu qua tổng quan tài liệu, chúng tôi tiếp tục xin hỗ trợ kinh phí từ các nguồn khác nhau để nghiên cứu sâu hơn về thành phần hóa học và tìm kiếm các hoạt tính mới từ cây thuốc này như hoạt tính chống ung thư, hoạt tính giảm đường huyết để điều trị bệnh tiểu đường từ cây đơn đất.