FBMạnhĐức phản ứng chéo đầy đủ

PHN NG chéo đầy đủ Đặt vấn đề - Tầm quan trọng máu - Hòa hợp nhóm máu hệ ABO: Phản ứng chéo nhiệt độ phòng TN (22C) - Hòa hợp hệ nhóm máu khác: Phản ứng chéo nhiệt độ 37C nghiệm pháp kháng globulin - Nghiệm pháp Coombs nghiệm pháp sử dụng thuốc thử kháng globulin ngời (huyết Coombs) để xác định có mặt kháng thể miễn dịch (kháng thể thiếu) đợc cảm nhiễm tế bào hồng cầu Cơ chế sinh kháng thể bất th ờng Thiếu máu tan máu trẻ sơ sinh bất đồng nhóm máu hệ Rh Hàng rào thai HC mẹ Rh (D) âm HC Rh (D) d ơng Kháng thể D Cơ chế tơng tự truyền máu không hòa hợp NCM BN Phản ứng kháng nguyên - kháng thể KT KT đủ đủ (IgM) (IgM) KN + KT đặc hiệu cho p/ ngng kết KT thiếu (IgG) KN + KT đặc hiệu không cho p/ ngng kết Nguyên lý kỹ thuật Kháng thể đủ (IgM): KN + KT đặc hiệu => Phản ứng ngng kết Kháng thể thiếu (IgG): KN + KT đặc hiệu => Không ngng kết Kháng globulin ngời làm cầu nối => Cho phản ứng ngng kết Kháng globulin ng ời Dụng cụ thuốc thử A Dụng cụ TTB: Ly tâm ống thẳng Tủ lạnh bảo quản thuốc thử Quầy lạnh sâu để bảo quản mẫu huyết Bình cách thuỷ 37C (hoặc tủ ấm bình giữ nhiệt) Kính hiển vi Tủ sấy dụng cụ Bút chì kính, bút Giấy đo pH Bông thấm Cốc mỏ thuỷ tinh Bình đựng nớc muối Nhiệt kế Pipet Pasteur ống nghiệm tan máu thuỷ tinh Giá đựng ống nghiệm để tiến hành kỹ thuật Lam kính B Thuốc thử: Thuốc thử kháng globulin ngời anti D Nớc muối 0,9% AntiIgG Anti C3b Polyspecific Gồm Anti-IgG Anti-C3b Anti-C3d Các loại thuốc thử kháng globulin ngời Tiến hành kỹ thuật Chuẩn bị: Rửa hồng cầu nhóm O hồng cầu ngời cho lần nớc muối 0,9% Pha thành dung dịch hồng cầu 5% Ly tâm mẫu máu không chống đông BN tách huyết để làm phản ứng chéo Chuẩn bị hồng cầu chứng (Hồng cầu O đợc cảm nhiễm với kháng thể D) Tiến hành kỹ thuật Các bớc tiến hành kỹ thuật Bớc 1: Nhỏ giọt huyết bệnh nhân Bớc 3: Trộn Bớc 2: Thêm giọt hồng cầu ngời cho 5% Bớc 4: Ly tâm (1000 v/ph/15 -30 giây Bớc 5: Đọc ghi lại kết Các mức độ ngng kết Ngng Không ngng kết kết Tiến hành kỹ thuật Bớc 6: ủ tiếp 37C / 30 phút Bớc 7: Ly tâm 1000 v/ph/15 -30 giây Bớc 8: Đọc, ghi kết Bớc 9: Rửa HC lần nớc muối 0,9% Bớc 10: Thêm giọt kháng globulin Bớc 11: Ly tâm (1000 v/ph/ 15 -30 giây Bớc 12: Đọc ghi kết Bớc 13: Nếu KQ âm tính thêm giọt HC chứng Ghi chú: Bớc thêm giọt đệm Liss vào ống nghiệm trớc ủ thời gian ủ 15 phút Tiến hành kỹ thuật Bớc 14: Ly tâm 1000 v/ph/15 -30 giây Bớc 15: Đọc, ghi lại kết - KQ phải dơng tính - Nếu KQ âm tính phải làm lại thử nghiệm NK Không Không NK NK Nhận định kết THANK YOU! ...Đặt vấn đề - Tầm quan trọng máu - Hòa hợp nhóm máu hệ ABO: Phản ứng chéo nhiệt độ phòng TN (22C) - Hòa hợp hệ nhóm máu khác: Phản ứng chéo nhiệt độ 37C nghiệm pháp kháng globulin - Nghiệm pháp... hợp NCM BN Phản ứng kháng nguyên - kháng thể KT KT đủ đủ (IgM) (IgM) KN + KT đặc hiệu cho p/ ngng kết KT thiếu (IgG) KN + KT đặc hiệu không cho p/ ngng kết Nguyên lý kỹ thuật Kháng thể đủ (IgM):... thể đủ (IgM): KN + KT đặc hiệu => Phản ứng ngng kết Kháng thể thiếu (IgG): KN + KT đặc hiệu => Không ngng kết Kháng globulin ngời làm cầu nối => Cho phản ứng ngng kết Kháng globulin ng ời Dụng