phản ứng chéo đầy đủ

PHN NG chéo đầy đủ Đặt vấn đề - Tầm quan trọng máu - Hòa hợp nhóm máu hệ ABO: Phản ứng chéo nhiệt độ phòng TN (22 C) - Hòa hợp hệ nhóm máu khác: Phản ứng chéo nhiệt độ 37 C nghiệm pháp kháng globulin - Nghiệm pháp Coombs nghiệm pháp sử dụng thuốc thử kháng globulin người (huyết Coombs) để xác định có mặt kháng thể miễn dịch (kháng thể thiếu) cảm nhiễm tế bào hồng cầu Cơ chế sinh kháng thể bất thường Thiếu máu tan máu trẻ sơ sinh bất đồng nhóm máu hệ Rh Hàng rào thai HC mẹ Rh (D) âm HC Rh (D) dương Kháng thể D Cơ chế tương tự truyền máu không hòa hợp NCM BN Phản ứng kháng nguyên - kháng thể KT KTđủđủ(IgM) (IgM) KN + KT đặc hiệu cho p/ư ngưng kết KT thiếu (IgG) KN + KT đặc hiệu không cho p/ư ngưng kết Nguyên lý kỹ thuật Kháng thể đủ (IgM): KN + KT đặc hiệu => Phản ứng ngưng kết Kháng thể thiếu (IgG): KN + KT đặc hiệu => Không ngưng kết Kháng globulin người làm cầu nối => Cho phản ứng ngưng kết Kháng globulin người Dụng cụ thuốc thử A Dụng cụ TTB: Ly tâm ống thẳng Tủ lạnh bảo quản thuốc thử Quầy lạnh sâu để bảo quản mẫu huyết Bình cách thuỷ 37 C (hoặc tủ ấm bình giữ nhiệt) Kính hiển vi Tủ sấy dụng cụ Bút chì kính, bút Giấy đo pH Bông thấm Cốc mỏ thuỷ tinh Bình đựng nước muối Nhiệt kế Pipet Pasteur ống nghiệm tan máu thuỷ tinh Giá đựng ống nghiệm để tiến hành kỹ thuật Lam kính B Thuốc thử: Thuốc thử kháng globulin người anti D Nước muối 0,9% AntiIgG Anti C3b Polyspecific Các loại thuốc thử kháng globulin người Gồm Anti-IgG Anti-C3b Anti-C3d Tiến hành kỹ thuật Chuẩn bị: Rửa hồng cầu nhóm O hồng cầu người cho lần nước muối 0,9% Pha thành dung dịch hồng cầu 5% Ly tâm mẫu máu không chống đông BN tách huyết để làm phản ứng chéo Chuẩn bị hồng cầu chứng (Hồng cầu O cảm nhiễm với kháng thể D) Tiến hành kỹ thuật Các bước tiến hành kỹ thuật Bước 1: Nhỏ giọt huyết bệnh nhân Bước 3: Trộn Bước 2: Thêm giọt hồng cầu người cho 5% Bước 4: Ly tâm (1000 v/ph/15 -30 giây Bước 5: Đọc ghi lại kết Các mức độ ngưng kết Ngưng kết Không ngưng kết Tiến hành kỹ thuật Bước 6: ủ tiếp 37C / 30 phút Bước 7: Ly tâm 1000 v/ph/15 -30 giây Bước 8: Đọc, ghi kết Bước 9: Rửa HC lần nước muối 0,9% Bước 10: Thêm giọt kháng globulin Bước 11: Ly tâm (1000 v/ph/ 15 -30 giây Bước 12: Đọc ghi kết Bước 13: Nếu KQ âm tính thêm giọt HC chứng Ghi chú: Bước thêm giọt đệm Liss vào ống nghiệm trước ủ thời gian ủ 15 phút Tiến hành kỹ thuật Bước 14: Ly tâm 1000 v/ph/15 -30 giây Bước 15: Đọc, ghi lại kết - KQ phải dương tính - Nếu KQ âm tính phải làm lại thử nghiệm NK Không Không NK NK Nhận định kết THANK YOU! [...]... Đọc, ghi kết quả Bước 9: Rửa HC 3 lần bằng nước muối 0,9% Bước 10: Thêm 2 giọt kháng globulin Bước 11: Ly tâm (1000 v/ph/ 15 -30 giây Bước 12: Đọc và ghi kết quả Bước 13: Nếu KQ âm tính thêm 1 giọt HC chứng Ghi chú: Bước 6 nếu thêm 2 giọt đệm Liss vào ống nghiệm trước khi ủ thì thời gian ủ chỉ còn 15 phút Tiến hành kỹ thuật Bước 14: Ly tâm 1000 v/ph/15 -30 giây Bước 15: Đọc, ghi lại kết quả - KQ phải