đề cương khóa luận tốt nghiệp qui trình nhân nhanh chuối đỏ dacca banana

đề cương khóa luận tốt nghiệp qui trình nhân nhanh chuối đỏ dacca banana qui trình nhân nhanh chuối đỏ dacca banana khóa luận tốt nghiệp qui trình nhân nhanh chuối đỏ dacca banana Cây chuối đỏ còn có tên khoa học là (Dacca Banana), thuộc chi Musaceae, trên thế giới có khoảng 10 loài. chuối đỏ thích nghi với nhiều loại sinh thái khác nhau như: ôn đới, Địa Trung Hải, cận nhiệt đới, á ôn đới. ở nước ta vùng trồng dâu tây tập trung chủ yếu ở Lâm Đồng. Chuối là một loại thực phẩm, đồng thời cũng là một dược liệu thiên nhiên để hỗ trợ cho nhiều căn bệnh. Trong thời gian gần đây, các nhà khoa học đã bỏ khá nhiều công sức vào nghiên cứu nhằm tạo ra được giống chuối có chất lượng cao, cho năng suất và phẩm chất tốt mà giá thành chấp nhận được để triển khai vào sản xuất ở quy mô thương mại.

TRƯỜNG ĐẠI HỌC PHƯƠNG ĐÔNG

KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC – MÔI TRƯỜNG

MỤC LỤC

Phần 1 MỞ ĐẦU 1

1.1 Đặt vấn đề 1

1.2 Tính cấp thiết của đề tài 2

1.3 Mục đích nghiên cứu 2

1.4 Ý nghĩa của đề tài 3

1.4.1 Ý nghĩa khoa học 3

1.4.2 Ý nghĩa trong thực tiễn 3

Phần 2 TỔNG QUAN NGHIÊN CỨU 4

2.1 Cơ sở khoa học của đề tài 4

2.1.1 Giới thiệu về cây chuối đỏ 4

2.1.1.1 Nguồn gốc và phân loại 4

2.1.1.2 Đặc điểm sinh học của cây chuối 5

2.1.1.3 Giá trị của cây chuối đỏ 6

2.1.2 Phương pháp nhân giống cây chuối đỏ 7

2.1.2.1 Phương pháp nhân giống truyền thống 7

2.1.2.2 Phương pháp nhân giống bằng công nghệ sinh học 7

2.1.3 Những nghiên cứu nhân giống cây chuối đỏ trên thế giới và Việt Nam 8

2.1.3.1 Trên thế giới 8

2.1.3.1 Ở Việt Nam 9

Phần 3 ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 13

3.1 Đối tượng và phạm vi nghiên cứu 13

3.2 Hóa chất và thiết bị sử dụng 13

3.2.1 Hóa chất sử dụng 13

3.2.2 Thiết bị sử dụng 13

3.3 Địa điểm và thời gian tiến hành 14

3.4 Nội dung nghiên cứu 14

3.5 Phương pháp nghiên cứu và các chỉ tiêu theo dõi 14

3.5.1 Ảnh hưởng kết hợp của HgCl 2 + Javen đến khả năng vô trùng tạo vật liệu khởi đầu 14

3.5.2 Ảnh hưởng kết hợp của BA + NAA đến quá trình hình thành cụm chồi từ mảnh củ 15

3.5.3 Ảnh hưởng của BA đến quá trình nhân chồi 16

3.5.4 Ảnh hưởng kết hợp của BA + IAA đến quá trình tái sinh chồi 16

3.5.5 Ảnh hưởng kết hợp của IBA + than hoạt tính đến quá trình tạo rễ cây hoàn chỉnh 17

3.6 Phương pháp xử lý số liệu 17

Phần 4 DỰ KIẾN KẾT QUẢ ĐẠT ĐƯỢC 18

4.1 Ảnh hưởng kết hợp của HgCl 2 + Javen đến khả năng vô trùng tạo vật liệu khởi đầu 18

4.2 Ảnh hưởng kết hợp của BA + NAA đến quá trình hình thành cụm chồi từ mảnh củ 18

4.3 Ảnh hưởng của BA đến quá trình nhân chồi 19

4.4 Ảnh hưởng kết hợp của BA + IAA đến quá trình tái sinh chồi 19

4.5 Ảnh hưởng kết hợp của IBA + than hoạt tính đến quá trình tạo rễ cây hoàn chỉnh 20

Phần 5 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 21

5.1 Kết luận 21

5.2 Kiến nghị 21

TÀI LIỆU THAM KHẢO 22

I.Tài liệu Tiếng Việt 22

II.Tài liệu Tiếng Anh 23

Phần 1

MỞ ĐẦU

1.1 Đặt vấn đề

Cây chuối đỏ còn có tên khoa học là (Dacca Banana), thuộc chi Musaceae,

trên thế giới có khoảng 10 loài chuối đỏ thích nghi với nhiều loại sinh thái khácnhau như: ôn đới, Địa Trung Hải, cận nhiệt đới, á ôn đới ở nước ta vùng trồng dâutây tập trung chủ yếu ở Lâm Đồng

Chuối là một loại thực phẩm, đồng thời cũng là một dược liệu thiên nhiên để

hỗ trợ cho nhiều căn bệnh Trong thời gian gần đây, các nhà khoa học đã bỏ khánhiều công sức vào nghiên cứu nhằm tạo ra được giống chuối có chất lượng cao,cho năng suất và phẩm chất tốt mà giá thành chấp nhận được để triển khai vào sảnxuất ở quy mô thương mại

Vì thế, việc cung cấp cây giống đủ về số lượng, chất lượng là vấn đề khókhăn Để sản phẩm chuối trở thành một mặt hàng có sức cạnh tranh th́ì việc xâydựng những vùng trồng tập trung, quy mô lớn, ứng dụng các tiến bộ kỹ thuật vàosản xuất là cần thiết

Chính vì thế mà việc cung cấp cây giống đủ về số lượng và chất lượng làvấn đề khá cần thiết, và muốn để sản phẩm chuối xuất khẩu của trở thành một mặthàng mạnh có sức cạnh tranh th́ì việc xây dụng những vùng trồng tập trung, nhữngđồn điền lớn ứng dụng các tiến bộ kỹ thuật vào sản xuất mới có thể đáp ứng đượcyêu cầu của thực tế sản xuất

Kỹ thuật nhân giống bằng nuôi cấy mô là phương pháp nhân giống mới, hiệnđại tạo ra số lượng lớn cây con đồng đều, sạch bệnh mà không có phương phápnào có thể thay thế được

Trong quá trình nhân giống chuối, bằng phương pháp nuôi cây mô tế bàothực vật giai đoạn nhân nhanh và ra rễ sẽ quyết định đến sự thành công và hiệu quảcủa quy trình

1.2 Tính cấp thiết của đề tài

Chuối là một loại cây có giá trị kinh tế đang được chú ý phát triển hiện nay.Tuy nhiên trên cây chuối có khá nhiều các loại bệnh do côn trùng như: nhện đỏ,sên, bọ trĩ… hay các bệnh do nấm như: bệnh đốm đen, đốm đỏ, mốc xám, bệnhthối đen rễ, bệnh phấn trắng… và các bệnh do sinh lý gây nên Các bệnh nàythường gây nên những thiệt hại như: làm giảm năng suất và chất lượng của quảchuối

Vì vậy, vấn đề đặt ra hiện nay là cần tạo ra giống chuối đỏ sạch bệnh cónăng xuất và chất lượng tốt Trong những năm gần đây các nhà khoa học trên thếgiới cũng như ở Việt Nam đã tiến hành nhiều nghiên cứu về cây chuối đỏ DươngTấn Nhựt và cộng sự (2004) nghiên cứu Cải tiến hệ thống nhân giống cây chuốibằng nuôi cấy trong túi nilon Nguyễn Trí Minh và cộng sự nghiên cứu sụ ảnhhưởng của cường độ ánh sáng và hàm lượng CO2 lên khả năng sinh trưởng in vitro

và ex vitro cây chuối tây.

Xuất phát từ yêu cầu thực tiễn trên tôi tiến hành thực hiện đề tài:

“ Nghiên cứu quy trình nhân nhanh giống chuối đỏ (Dacca Banana) bằng

phương pháp invitro”

1.3 Mục đích nghiên cứu

Nghiên cứu được quy trình nhân nhanh và tái sinh cây chuối đỏ (Dacca

Banana) bằng phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật

1.4 Ý nghĩa của đề tài

1.4.1 Ý nghĩa khoa học

- Hoàn thiện quá trình tạo cụm chồi để tạo nguồn nguyên liệu cho giai đoạntái sinh và tạo cây hoàn chỉnh ở cây chuối đỏ

- Cung cấp tài liệu học tập, nghiên cứu cho sinh viên

1.4.2 Ý nghĩa trong thực tiễn

Kết quả nghiên cứu của đề tài nhằm đưa ra quy trình hoàn thiện nhân nhanh

giống chuối đỏ (Dacca Banana) bằng phương pháp in vitro Phục vụ cho việc tạo

cây hoàn chỉnh góp phần cung cấp nguồn nguyên liệu phục vụ cho sản xuất

Phần 2 TỔNG QUAN NGHIÊN CỨU

2.1 Cơ sở khoa học của đề tài

2.1.1 Giới thiệu về cây chuối đỏ

2.1.1.1 Nguồn gốc và phân loại

- Nguồn gốc và phân bố

Chuối phát triển đầu tiên là ở New Ghinea (Simonds, 1966) sau đó chuy ển đếnChâu Á – Thái Bình Dương (từ 4000 năm trước công nguyên) Sự mô tả về chuốimột cách rõ ràng và sớm nhất là do người HyLap cổ xưa thực hiện năm 325 trướccông nguyên trong cuộc hành trình của Alexander đến Ấn Độ (Rcynolds 1927,Kervegant, 1935) Sau đó khoảng 100 năm sau công nguyên, người Ả Rập đãthống trị mảnh đất từ Ấn Độ - Tây Ban Nha (Kinder và Hilgemann, 1974) Chuốilại được quan tâm và phát triển nh ất là chuối ăn tươi và ăn luộc đã được đưa đếnBắc Phi và phát triển rộng ở đây, mặc dù mảnh đất này rất khô cằn (Rcynolds(1927) đã đưa vào những hóa thạch, các bức vẽ trên các hàng động cho rằng chuốicũng đã trồng và phát tri ển được 15 th ế k ỷ ở Châu Phi Trong đó, Đông Phi chủyếu trồng 2 loại chu ối có kiểu gen AA và AAA Vùng gần xích đạo hơn phát triểnchủ yếu chuối ăn luộc mang kiểu gen AAB Vansina 1984, 1990, đã giải thích về

sự xuất hiện hai loài chuối có kiểu gen AAB ở Châu Phi và cả ở Ấn Độ là mộtphần do sự thích nghi về khí hậu song chủ yếu là nhu cầu cấp bách về lương thực ởnhững nước này Đến thế kỷ thứ X do ảnh hưởng của nền văn minh Ả Rập, mốiquan hệ giữa các nước này được mở rộng, thời kỳ này chuối là mặt hàng được traođổi mạnh nhất trên thương trường cả ở những nước xa như Trung Quốc (Davidson,1974) Người ta cho rằng, chuối được di trồng đến Châu Mỹ nhờ người Bồ ĐàoNha từ thế kỷ 14, và sau đó phát triển mạnh vào năm 1607 (Kenvegent, 1935).Trong thời gian gần đây sự thu thập nguồn gen và phổ biến các giống chuối có chất

lượng ngày một lan rộng, hơn nữa chuối đã được đưa ra thị trường làm mặt hàngxuất khẩu chính, điều này đã gây ra sự chú ý đầu tư c ủa các nhà khoa học về năngsuất và chất lượng của các giống chuối ngày này Chuối đã được phát triển rộngkhắp trên thế giới, không chỉ nó quan trọng do việc xuất kh ẩu mà còn ở sự đa dạng

về hình dáng và chủng loại Như vậy, chuối trồng đã có 1 quá trình phát triển lịch

sử lâu dài, đầu tiên là những cây hoang dại rải rác ở New Ghinea, sau đó đượcthuần hóa và lan rộng, nhờ dân chúng và các nhà thám hiểm, các cuộc chinh chiến ,

Ở Châu Á chuối đã xuất hiện từ 4000 năm trước công nguyên Chính vì vậy, có thểnói chuối có nguồn gốc từ Châu Á, điều này không những thể hiện ở sự phát triểnmạnh của chuối ăn tươi và chuối ăn luộc do thích hợp khí hậu mà còn ở sự đa dạngcác chủng loại chuối: ở Philippin có 80 loài, Malaysia 32 loài, New Ghinea 54 loài,

Ấn Độ 57 loại …

- Phân loại chuối

Cây chuối có tên khoa học là Musa sp, họ Musaceae, thuộc bộ Scitamincae gồm

2 loài Ensete và Musa Chuối ăn được thuộc chi Eumusa có ngu ồn g ốc t ừ 2 loàichuối dại: Musa acuminata và Musa balbisiana Sự phân loại các giống thuộc chiEumusa đã được đề cập đến bởi công trình phân loại của Kurz (1865), sau đó làhọc giả Chesmen (1945) và g ần đây nhất là học giả Simmonds và Slepherd(1955) Theo các tác giả nghiên cứu về cây chuối (mà đại diện là Simmonds,(1966), họ phân loại chủ yếu dựa vào nhiễm sắc thể, theo hệ thông phân loai naychi Eumusa có số ́ ̣ ̀ nhiêm săc thể cơ sở là 11, có 9 - 10 loai và có đên 131 giông

2.1.1.2 Đặc điểm sinh học của cây chuối đỏ

Chuối đỏ còn được gọi là chuối đỏ Dacca, loại chuối vỏ đỏ này được tìmthấy ở Úc Chúng nhỏ hơn và có vỏ dày hơn so với các loại thông thường Tuynhiên thịt chuối lại mềm và ngọt hơn Chuối có vỏ màu đỏ đậm hoặc hơi tím Thịtchuối có màu trắng kem cho đến màu hồng với hương vị chuối nhẹ nhàng quyện

lẫn vị của quả mâm xôi đầy hấp dẫn Nhưng nhìn chung, hương vị tổng thế quả nóvẫn mang đặc trưng của một quả chuối thông thường Giống có nguồn gốc từ Úc.Nhưng chuối đỏ có khả năng thích hợp với điều kiện khí hậu nhiệt đới tốt Sinhtrưởng tương đương với các loại chuối nội địa Cây trưởng thành cao từ 4-6m tùyvào điều kiện trồng Giống chuối đỏ đặc trưng thân có màu đỏ rất dễ phân biệt.Buồng chuối khi trổ trái sẽ có màu tím đỏ khá giống với giống chuối lửa VNnhưng có nhiều trái và vị chuối ngon hơn Tùy vào điều kiện trồng đất đai, khí hậu

mà trái có màu hơi tím đỏ, hoặc ngã sang đỏ nhiều hơn Nên một số nơi còn gọi làchuối tím Chuối thích hợp với những nơi đất có độ ẩm cao Nhưng không chịuđược ngập úng Có khả năng sinh trưởng tốt trong điều kiện ánh sáng 70% Khichuối ra khoảng 2 nãi thì nên bẻ bắp chuối đi Thời gian bẻ vào buổi trưa để tránhcây mất nhựa

2.1.1.3 Giá trị của cây chuối đỏ

Chuối đỏ có hàm lượng calo thấp, một quả chỉ chứa khoảng 110 calo vì thếnếu hàng ngày ăn chuối đỏ bạn cũng sẽ không sợ bị tăng cân

Hơn thế, mỗi quả chuối có khoảng 4g chất xơ, đáp ứng được 16% chất xơhàng ngày cho bạn Mỗi người phụ nữ cần khoảng 25g chất xơ mỗi ngày còn namgiới khoảng 38g Chất xơ giúp làm chậm quá trình tiêu hóa, khiến cơ thể no lâuhơn và kiểm soát được cân nặng Ngoài ra, chuối đỏ còn có thể giảm nguy cơ mắcbệnh tim và bệnh tiểu đường type 2

Không những thế, chuối còn giàu Kali, vitamin B6 và Vitamin C, rất tốt cho

cơ thể Tuy nhiên, người ta cũng lưu ý, với những người có tiền sử bệnh thận nênhạn chế ăn chuối đỏ

2.1.2 Phương pháp nhân giống cây chuối đỏ

2.1.2.1 Phương pháp nhân giống truyền thống

Cắt chồi từ cây mẹ

Là phương pháp cắt cành (ngó) từ củ cây mẹ để cho tạo thành những câymới

Ưu điểm: ít tốn thời gian

Nhược điểm: phương pháp này cho hệ số nhân thấp, cây dễ bị thoái hóa, rễcây yếu Phương pháp này không đảm bảo cây sạch bệnh vì bệnh có thể đượctruyền từ cây mẹ sang

2.1.2.2 Phương pháp nhân giống bằng công nghệ sinh học

Nuôi cấy mô (nhân giống in vitro)

Nhân giống in vitro là hình thức sử dụng chồi đỉnh, lá, hoa, cuống lá, đoạn

thân non nuôi dưỡng trong các điều kiện đặc biệt để hình thành một cơ thể mớihoàn chỉnh

Ưu điểm: Hệ số nhân giống cao, đồng đều, sạch bệnh, chủ động trong việcsản xuất cây con phục vụ cho công tác giống

Nhược điểm: Cây con có kích thước nhỏ, xảy ra đột biến biến dị làm xuấthiện những cây không mong muốn, cần trang thiết bị đặc biệt (Võ Quốc Việt và cs,2010)

Ngoài ra, theo Hoàng Ngọc Thuận (2000) việc nuôi cấy in vitro sử dụng

nguồn hydrocacbon nhân tạo do đó mà khả năng tự tổng hợp chất hữu cơ kém,

đồng thời cây nuôi cấy in vitro được nuôi trong bình thủy tinh có độ ẩm bão hòa,

do vậy mà khi trồng cây ra ngoài điều kiện tự nhiên cây thường bị mất nước,không thích nghi được cây dễ bị héo và chết

2.1.3 Những nghiên cứu nhân giống cây chuối đỏ trên thế giới và Việt Nam

2.1.3.1 Trên thế giới

Chuối là đối tượng cây ăn quả có hình thức sinh sản vô tính với phương thứcnhân giống truyền thống là sử dụng chồi nách làm giống trồng những thế hệ kếtiếp Vì vậy, sử dụng kỹ thuật nuôi cấy mô tế bào nhân giống chuối đã được nghiêncứu, ứng dụng từ rất lâu tại nhiều nước trên thế giới như Malaysia, Australia, Pháp,Trung Quốc… và đã góp một phần đáng kể phục vụ ngành sản xuất chuối xuấtkhẩu Theo Reuveni O (1986), kỹ thuật nuôi cấy invitro chuối có một số ưu điểmsau (dẫn theo Hoàng Nghĩa Nhạc)

Nhân được số lượng lớn giống từ cây ban đầu đã xác định tính trạng Chất lượng cây giống hoàn toàn sạch bệnh, tránh được những sâu hại lây nhiễmqua nguồn đất (tuyến trùng) Vì vậy, tiết kiệm được chi phí hóa chất cho xử lý đất

Cây nuôi cấy mô có thể trồng một vụ với mức độ thâm canh cao, thời gian sinhtrưởng ngắn, có thể điều khiển được thời gian thu hoạch

- Tỷ lệ cây sống cao trên điều kiện đồng ruộng(>98%), khả năng sinh trưởngnhanh hơn cây có nguồn gốc từ chồi nách

- Cây giống invitro phát triển đồng đều, ra hoa đồng loạt và thời gian thuhoạch ngắn So với cây giống từ chồi nách, cây nuôi cấy mô có giá thành rẻ, dễ vậnchuyển, dễ nhân giống

- Tiện lợi cho việc trao đổi nguồn gen quốc tế Theo Viện Nghiên cứu ChuốiQuốc tế đặt tại Đài Loan thì nhân gi ống chuối bằng nuôi cấy mô gồm 4 giai đoạnsau: giai đoạn ban đầu nuôi c ấy, giai đoạn nhân nhanh, giai đoạn ra rễ và giai đoạnchuển cây ra nhà kính Rodriguez-Enriquez và cộng sự(1987) cho biết từ một chồichuối ban đầu qua cầy chuyển liên tiếp có thể sinh sản và duy trì được 3 năm trongống nghiệm Weathers và cộng sự (1988) đã đề xuất phương pháp nuôi cấy môchuối cải tiến trong hệ phun mù Các mô hoặc tế bào chuối nuôi c ấy đ ược đ ặttrên giấy lọc bằng vật liệu trơ sinh học, vô trùng và được phun dung dịch dinh

dưỡng qua hệ thống phun mù để vừa điều chỉnh độ ẩm vừa cung cấp dinh dưỡngcho cây Kết quả cho thấy, chuối non mọc tốt hơn, các mô hoặc tế bào chuối táisinh cao hơn 4-6 tuần, số lượng chồi lớn hơn 3-20 lần, chu kỳ nhân ngắn hơn 20-50% và chất lượng cây tốt hơn so với đối chứng (nghiên cứu trên môi trường agarthường) Năm 1991, trường Đai học Quảng Tây (Trung Quốc) đã giới thiệu kỹthuật đưa cây chuối nuôi cấy mô ra vườn ươm như sau: khi cây trong ống nghiệmcao 8-10cm, phơi ống nghiệm 2 ngày dưới ánh sáng tự nhiên, mỗi ngày 10 giờ, sau

đó lấy ra rửa sạch rễ đem trồng trong bầu đất có đục lỗ kích thước 12-14 x 13cm Thành phần hỗn hợp trong bầu là đất bùn khô đập nhỏ + cát + đất tro của cỏrác (tỷ lệ 3:1:1) Môi trường trồng tốt nhất là trong nhà có che Polyetylen, mỗingày tưới 3-6 lần để duy trì độ ẩm đạt 80%, c ần chú ý tránh mưa to và ánh sángquá mạnh Khi cây đạt 5-8 lá thì trồng ra ruộng sản xuất Theo Kawit- Wanichkul

11-và cộng sự (1993) cho rằng môi trường tốt nhất để nhân giống chuối nuôi cấy mô

là môi trường MS có bổ sung 15% nước dừa, 1g/lít than hoạt tính và 10mg/lítBAP, pH 5,6 và nồng độ agar là 0,5% Mô phân sinh chuối sẽ phát triển thành câycon trong 2 tháng Và ông cũng cho rằng hỗn hợp bụi xơ dừa + cát + phân +compost + đất (tỉ lệ 1:1:1:0,5:0,5) là môi tr ường tốt nhất cho cây chuối nuôi cấy

mô bén rễ, cứng cây, các tác giả cũng kết luận thời gian để vườn ươm tốt nhấ là 7tuần, nếu để quá lâu khi đưa cây ra ngoài đồng ruộng cây sẽ mọc chậm Hiện nay,Đài Loan đã áp dụng các phương pháp nuôi cấy mô tế bào để nhân nhanh cácgiống chuối với quy mô lớn và còn giúp cho việc duy trì và b ảo quản các giốngchuối rất thuận lợi Ngoài Đài Loan, chuối nuôi cấy mô cũng được phát triển mạnh

ở Úc, Philippines, Costarica…

2.1.3.2 Ở Việt Nam

Các nghiên cứu về nhân giống chuối trước đây chỉ chú trọng các biện pháp

kỹ thuật nhân bằng củ và tách chồi Những kỹ thuật này hiện còn đ ược áp d ụng

khá phổ biến ở nhiều vùng miền và nhất là quy mô sản xuất nhỏ Kỹ thuật nhângiống vô tính chuối bằng phương pháp invitro ở n ước ta cũng thu được một số kếtquả sau: Quy trình nhân giống chuối in vitro đầu tiên ở nước ta do tác gi ả Nguy ễnVăn Uyển đề xuất năm 1985, bao gồm 6 công đoạn chính sau: đưa mẫu vào nuôicấy; tạo và nhân nhanh chồi chuối; tạo rễ cây; ươm chuối trong vườn ươm; bầuchuối và trồng ra ruộng sản xuất

Đoàn Thị Ái Thuyền và cộng sự (1993) đã đưa ra quy trình nhân giốngchuối bằng phương pháp nuôi cấy mô bao gồm 5 công đoạn chính sau: đưa mẫuvào nuôi cấy→tạo và nhân nhanh chồi chuối→tạo rễ cây→ươm chuối trong vườnươm→bầu chuối và trồng ra sản xuất Và cũng cho biết cây chuối nuôi cấy mô ởvườn ươm 60-70 ngày (luống ươm 30-40 ngày và bầu đất 30 ngày) thì được xuấtvườn, khi đó cây cao 40-40cm Đỗ Năng Vịnh và cộng sự (1994) cho biết, tỷ lệ táisinh phụ thuộc vào giống chuối, các chất bổ sung vào môi trường nuôi cấy và daođộng từ 68,42 - 92,31% Hệ số của chuối tiêu cao nhất khi bổ sung BAP từ 7 – 9mg/lít Nước dừa không biểu hiện ảnh hưởng đến chuối tiêu nhưng có ảnh hưởngtốt tới hệ số nhân của chuối rừng ở lượng 10% khi có mặt BAP với lượng 7 mg/lít

Tác giả Đỗ Năng Vịnh (1996) còn cho biết môi trường MS chứa thiaminHCL 2 mg/lít, nước dừa 10% và BAP 5 mg/lít là thích hợp nhất Thời gian cấychuyển chồi tối ưu là 4 tuần, mật độ 5 cụm chồi/bình (mỗi cụm 2 - 3 chồi) sẽ cho

hệ số nhân từ 2,5 - 3,0 lần/tháng

Theo Nguyễn Quang Thạch, Nguyễn Thị Nhẫn và Hoàng Thị Nga (1995)cho biết hoàn toàn có thể sử dụng phương pháp invitro để nhân nhanh cây chuối,vật liệu nuôi cấy tốt nhất cho mục đích nhân nhanh là các mô chồi đỉnh và chuối cóthể sử dụng kỹ thuật bóc bẹ không cần khử trùng, môi trường thích hợp cho quátrình khởi động phát sinh chồi ban đầu là môi trường MS + (5-7)ppm BA, môitrường nhân nhanh tương tự như môi trường khởi động nhưng sau nhiều lần cấychuyển cần giảm hàm lượng BA thậm trí tới 0 ppm và có th ể b ổ sung n ước dừa