đề cương khóa luận tốt nghiệp qui trình nhân nhanh chuối đỏ dacca banana qui trình nhân nhanh chuối đỏ dacca banana khóa luận tốt nghiệp qui trình nhân nhanh chuối đỏ dacca banana Cây chuối đỏ còn có tên khoa học là (Dacca Banana), thuộc chi Musaceae, trên thế giới có khoảng 10 loài. chuối đỏ thích nghi với nhiều loại sinh thái khác nhau như: ôn đới, Địa Trung Hải, cận nhiệt đới, á ôn đới. ở nước ta vùng trồng dâu tây tập trung chủ yếu ở Lâm Đồng. Chuối là một loại thực phẩm, đồng thời cũng là một dược liệu thiên nhiên để hỗ trợ cho nhiều căn bệnh. Trong thời gian gần đây, các nhà khoa học đã bỏ khá nhiều công sức vào nghiên cứu nhằm tạo ra được giống chuối có chất lượng cao, cho năng suất và phẩm chất tốt mà giá thành chấp nhận được để triển khai vào sản xuất ở quy mô thương mại.
TRƯỜNG ĐẠI HỌC PHƯƠNG ĐÔNG KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC – MÔI TRƯỜNG o O o CHUYÊN ĐỀ TỐT NGHIỆP NGÀNH: CÔNG NGHỆ SINH HỌC ĐỀ TÀI: Nghiên cứu quy trình nhân nhanh giống chuối đỏ (Dacca Banana) phương pháp in vitro Giảng viên hướng dẫn : TS Đồng Thị Kim Cúc Sinh viên thực : Nguyễn Hoàng Anh MSSV : 513301002 Hà Nội - 2017 MỤC LỤC Phần MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Tính cấp thiết đề tài 1.3 Mục đích nghiên cứu .2 1.4 Ý nghĩa đề tài 1.4.1 Ý nghĩa khoa học 1.4.2 Ý nghĩa thực tiễn Phần TỔNG QUAN NGHIÊN CỨU 2.1 Cơ sở khoa học đề tài .4 2.1.1 Giới thiệu chuối đỏ 2.1.1.1 Nguồn gốc phân loại 2.1.1.2 Đặc điểm sinh học chuối 2.1.1.3 Giá trị chuối đỏ 2.1.2 Phương pháp nhân giống chuối đỏ 2.1.2.1 Phương pháp nhân giống truyền thống 2.1.2.2 Phương pháp nhân giống công nghệ sinh học 2.1.3 Những nghiên cứu nhân giống chuối đỏ giới Việt Nam 2.1.3.1 Trên giới 2.1.3.1 Ở Việt Nam Phần ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .13 3.1 Đối tượng phạm vi nghiên cứu 13 3.2 Hóa chất thiết bị sử dụng 13 3.2.1 Hóa chất sử dụng .13 3.2.2 Thiết bị sử dụng 13 3.3 Địa điểm thời gian tiến hành .14 3.4 Nội dung nghiên cứu 14 3.5 Phương pháp nghiên cứu tiêu theo dõi 14 3.5.1 Ảnh hưởng kết hợp HgCl2 + Javen đến khả vô trùng tạo vật liệu khởi đầu .14 3.5.2 Ảnh hưởng kết hợp BA + NAA đến trình hình thành cụm chồi từ mảnh củ .15 3.5.3 Ảnh hưởng BA đến trình nhân chồi .16 3.5.4 Ảnh hưởng kết hợp BA + IAA đến trình tái sinh chồi .16 3.5.5 Ảnh hưởng kết hợp IBA + than hoạt tính đến trình tạo rễ hoàn chỉnh 17 3.6 Phương pháp xử lý số liệu 17 Phần DỰ KIẾN KẾT QUẢ ĐẠT ĐƯỢC .18 4.1 Ảnh hưởng kết hợp HgCl2 + Javen đến khả vô trùng tạo vật liệu khởi đầu 18 4.2 Ảnh hưởng kết hợp BA + NAA đến trình hình thành cụm chồi từ mảnh củ 18 4.3 Ảnh hưởng BA đến trình nhân chồi 19 4.4 Ảnh hưởng kết hợp BA + IAA đến trình tái sinh chồi .19 4.5 Ảnh hưởng kết hợp IBA + than hoạt tính đến trình tạo rễ hoàn chỉnh 20 Phần KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 21 5.1 Kết luận 21 5.2 Kiến nghị 21 TÀI LIỆU THAM KHẢO 22 I.Tài liệu Tiếng Việt 22 II.Tài liệu Tiếng Anh 23 Phần MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề Cây chuối đỏ có tên khoa học (Dacca Banana), thuộc chi Musaceae, giới có khoảng 10 loài chuối đỏ thích nghi với nhiều loại sinh thái khác như: ôn đới, Địa Trung Hải, cận nhiệt đới, ôn đới nước ta vùng trồng dâu tây tập trung chủ yếu Lâm Đồng Chuối loại thực phẩm, đồng thời dược liệu thiên nhiên để hỗ trợ cho nhiều bệnh Trong thời gian gần đây, nhà khoa học bỏ nhiều công sức vào nghiên cứu nhằm tạo giống chuối có chất lượng cao, cho suất phẩm chất tốt mà giá thành chấp nhận để triển khai vào sản xuất quy mô thương mại Vì thế, việc cung cấp giống đủ số lượng, chất lượng vấn đề khó khăn Để sản phẩm chuối trở thành mặt hàng có sức cạnh tranh th́ì việc xây dựng vùng trồng tập trung, quy mô lớn, ứng dụng tiến kỹ thuật vào sản xuất cần thiết Chính mà việc cung cấp giống đủ số lượng chất lượng vấn đề cần thiết, muốn để sản phẩm chuối xuất trở thành mặt hàng mạnh có sức cạnh tranh th́ì việc xây dụng vùng trồng tập trung, đồn điền lớn ứng dụng tiến kỹ thuật vào sản xuất đáp ứng yêu cầu thực tế sản xuất Kỹ thuật nhân giống nuôi cấy mô phương pháp nhân giống mới, đại tạo số lượng lớn đồng đều, bệnh mà phương pháp thay Trong trình nhân giống chuối, phương pháp nuôi mô tế bào thực vật giai đoạn nhân nhanh rễ định đến thành công hiệu quy trình 1.2 Tính cấp thiết đề tài Chuối loại có giá trị kinh tế ý phát triển Tuy nhiên chuối có nhiều loại bệnh côn trùng như: nhện đỏ, sên, bọ trĩ… hay bệnh nấm như: bệnh đốm đen, đốm đỏ, mốc xám, bệnh thối đen rễ, bệnh phấn trắng… bệnh sinh lý gây nên Các bệnh thường gây nên thiệt hại như: làm giảm suất chất lượng chuối Vì vậy, vấn đề đặt cần tạo giống chuối đỏ bệnh có xuất chất lượng tốt Trong năm gần nhà khoa học giới Việt Nam tiến hành nhiều nghiên cứu chuối đỏ Dương Tấn Nhựt cộng (2004) nghiên cứu Cải tiến hệ thống nhân giống chuối nuôi cấy túi nilon Nguyễn Trí Minh cộng nghiên cứu sụ ảnh hưởng cường độ ánh sáng hàm lượng CO lên khả sinh trưởng in vitro ex vitro chuối tây Xuất phát từ yêu cầu thực tiễn tiến hành thực đề tài: “ Nghiên cứu quy trình nhân nhanh giống chuối đỏ (Dacca Banana) phương pháp invitro” 1.3 Mục đích nghiên cứu Nghiên cứu quy trình nhân nhanh tái sinh chuối đỏ (Dacca Banana) phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật 1.4 Ý nghĩa đề tài 1.4.1 Ý nghĩa khoa học - Hoàn thiện trình tạo cụm chồi để tạo nguồn nguyên liệu cho giai đoạn tái sinh tạo hoàn chỉnh chuối đỏ - Cung cấp tài liệu học tập, nghiên cứu cho sinh viên 1.4.2 Ý nghĩa thực tiễn Kết nghiên cứu đề tài nhằm đưa quy trình hoàn thiện nhân nhanh giống chuối đỏ (Dacca Banana) phương pháp in vitro Phục vụ cho việc tạo hoàn chỉnh góp phần cung cấp nguồn nguyên liệu phục vụ cho sản xuất Phần TỔNG QUAN NGHIÊN CỨU 2.1 Cơ sở khoa học đề tài 2.1.1 Giới thiệu chuối đỏ 2.1.1.1 Nguồn gốc phân loại - Nguồn gốc phân bố Chuối phát triển New Ghinea (Simonds, 1966) sau chuy ển đến Châu Á – Thái Bình Dương (từ 4000 năm trước công nguyên) Sự mô tả chuối cách rõ ràng sớm người HyLap cổ xưa thực năm 325 trước công nguyên hành trình Alexander đến Ấn Độ (Rcynolds 1927, Kervegant, 1935) Sau khoảng 100 năm sau công nguyên, người Ả Rập thống trị mảnh đất từ Ấn Độ - Tây Ban Nha (Kinder Hilgemann, 1974) Chuối lại quan tâm phát triển nh ất chuối ăn tươi ăn luộc đưa đến Bắc Phi phát triển rộng đây, mảnh đất khô cằn (Rcynolds (1927) đưa vào hóa thạch, vẽ hàng động cho chuối trồng phát tri ển 15 th ế k ỷ Châu Phi Trong đó, Đông Phi chủ yếu trồng loại chu ối có kiểu gen AA AAA Vùng gần xích đạo phát triển chủ yếu chuối ăn luộc mang kiểu gen AAB Vansina 1984, 1990, giải thích xuất hai loài chuối có kiểu gen AAB Châu Phi Ấn Độ phần thích nghi khí hậu song chủ yếu nhu cầu cấp bách lương thực nước Đến kỷ thứ X ảnh hưởng văn minh Ả Rập, mối quan hệ nước mở rộng, thời kỳ chuối mặt hàng trao đổi mạnh thương trường nước xa Trung Quốc (Davidson, 1974) Người ta cho rằng, chuối di trồng đến Châu Mỹ nhờ người Bồ Đào Nha từ kỷ 14, sau phát triển mạnh vào năm 1607 (Kenvegent, 1935) Trong thời gian gần thu thập nguồn gen phổ biến giống chuối có chất lượng ngày lan rộng, chuối đưa thị trường làm mặt hàng xuất chính, điều gây ý đầu tư c nhà khoa học suất chất lượng giống chuối ngày Chuối phát triển rộng khắp giới, không quan trọng việc xuất kh ẩu mà đa dạng hình dáng chủng loại Như vậy, chuối trồng có trình phát triển lịch sử lâu dài, hoang dại rải rác New Ghinea, sau hóa lan rộng, nhờ dân chúng nhà thám hiểm, chinh chiến , Ở Châu Á chuối xuất từ 4000 năm trước công nguyên Chính vậy, nói chuối có nguồn gốc từ Châu Á, điều thể phát triển mạnh chuối ăn tươi chuối ăn luộc thích hợp khí hậu mà đa dạng chủng loại chuối: Philippin có 80 loài, Malaysia 32 loài, New Ghinea 54 loài, Ấn Độ 57 loại … - Phân loại chuối Cây chuối có tên khoa học Musa sp, họ Musaceae, thuộc Scitamincae gồm loài Ensete Musa Chuối ăn thuộc chi Eumusa có ngu ồn g ốc t loài chuối dại: Musa acuminata Musa balbisiana Sự phân loại giống thuộc chi Eumusa đề cập đến công trình phân loại Kurz (1865), sau học giả Chesmen (1945) g ần học giả Simmonds Slepherd (1955) Theo tác giả nghiên cứu chuối (mà đại diện Simmonds, (1966), họ phân loại chủ yếu dựa vào nhiễm sắc thể, theo hệ thông phân loai chi Eumusa có số ́ ̣ ̀ nhiêm săc thể sở là 11, có - 10 loai và có đên 131 giông 2.1.1.2 Đặc điểm sinh học chuối đỏ Chuối đỏ gọi chuối đỏ Dacca, loại chuối vỏ đỏ tìm thấy Úc Chúng nhỏ có vỏ dày so với loại thông thường Tuy nhiên thịt chuối lại mềm Chuối có vỏ màu đỏ đậm tím Thịt chuối có màu trắng kem màu hồng với hương vị chuối nhẹ nhàng quyện lẫn vị mâm xôi đầy hấp dẫn Nhưng nhìn chung, hương vị tổng mang đặc trưng chuối thông thường Giống có nguồn gốc từ Úc Nhưng chuối đỏ có khả thích hợp với điều kiện khí hậu nhiệt đới tốt Sinh trưởng tương đương với loại chuối nội địa Cây trưởng thành cao từ 4-6m tùy vào điều kiện trồng Giống chuối đỏ đặc trưng thân có màu đỏ dễ phân biệt Buồng chuối trổ trái có màu tím đỏ giống với giống chuối lửa VN có nhiều trái vị chuối ngon Tùy vào điều kiện trồng đất đai, khí hậu mà trái có màu tím đỏ, ngã sang đỏ nhiều Nên số nơi gọi chuối tím Chuối thích hợp với nơi đất có độ ẩm cao Nhưng không chịu ngập úng Có khả sinh trưởng tốt điều kiện ánh sáng 70% Khi chuối khoảng nãi nên bẻ bắp chuối Thời gian bẻ vào buổi trưa để tránh nhựa 2.1.1.3 Giá trị chuối đỏ Chuối đỏ có hàm lượng calo thấp, chứa khoảng 110 calo hàng ngày ăn chuối đỏ bạn không sợ bị tăng cân Hơn thế, chuối có khoảng 4g chất xơ, đáp ứng 16% chất xơ hàng ngày cho bạn Mỗi người phụ nữ cần khoảng 25g chất xơ ngày nam giới khoảng 38g Chất xơ giúp làm chậm trình tiêu hóa, khiến thể no lâu kiểm soát cân nặng Ngoài ra, chuối đỏ giảm nguy mắc bệnh tim bệnh tiểu đường type Không thế, chuối giàu Kali, vitamin B6 Vitamin C, tốt cho thể Tuy nhiên, người ta lưu ý, với người có tiền sử bệnh thận nên hạn chế ăn chuối đỏ 10% Còn môi trường rễ tốt MS + 0,2 g/lít than ho ạt tính nhận xét việc đưa chuối invitro vườn ươm vụ hè thu hoàn toàn thuận lợi, tỷ lệ sống đạt 100% giá thể nghiên cứu là: cát, đất thịt nhẹ,đất + cát + phân chuồng [2] Theo kết Viện Nghiên cứu Chuối Quốc tế (The International Network for Improment of Banana and Plantain), việc chuyển chuối non ống nghiệm vườn ươm giai đoạn làm cho chuối thích nghi với môi trường khí hậu khắc nghiệt Quá trình kéo dài khoảng tuần, lúc ống nghiệm, cách mở dần nắp ống nghiệm để ống nghiệm vùng có ánh sáng, nhiệt độ tự nhiên; sau rửa thạch rễ nhúng vào dung dịch thuốc trừ nấm trước cấy đất Người ta sử dụng màng polyetylen trùm lên luống ươm để giữ ẩm, phải ý làm mát mùa hè Giai đoạn đầu, luống ươm phải che 50% ánh sáng Những chuối non nhúng dithane M - 45 0,3% (80% WP), trồng túi plastic x 10 cm Môi trường trồng là: 60 % khoáng bón vermiculite, 30% cát 10% hữu (tính theo thể tích) Sau trồng, bón cho túi 3g phân tổng hợp (14N - 14P - 14K) Thời gian để vườn ươm trước đem đồng ruộng trồng - tháng [30] Theo Đỗ Văn Vịnh cộng (1996), chuối nuôi cấy mô cần đưa luống giâm gồm lớp: lớp đất dày 5cm, lớp phân chu ồng ải tr ộn với đất cát pha tỷ lệ 1:1 dày 7cm, lớp cát vàng 5-7cm; mật độ giâm 300-400 cây/m2 ; thời gian luống giâm 30 ngày Sau đó, chuối đưa bầu đất có kích thước 7-10 x 10-15cm, thời gian bầu đất từ 45-60 ngày, mùa đông rét để lâu Như vậy, tổng thời gian vườn ươm 2,5-3 tháng lâu Cũng đưa thẳng non bầu đất không cần qua luống giâm Đất đóng bầu có thành phần: phân hữu vi sinh + cát + đất phù sa đất pha cát ( tỷ lệ 1:1:1) tốt Theo Phạm Kim Thu Đặng Thị Vân (1997), từ nghiên cứu hoàn thiện quy trình sản xuất giống chuối phương pháp nuôi cấy mô, 11 tác giả kết luận môi trường nuôi cấy MS(1962) có bổ sung ppm Thiamin HCl làm tăng khả tái sinh chồi chuối, giá thể cho tỷ lệ sống cao 1/3 đất + 1/3 phân hữu + 1/3 cát đen thời vụ thích hợp t tháng đến tháng 10 Ứng dụng kết sản xuất hàng triệu giống cung cấp cho tỉnh phía Bắc (Nam Định, Thái Bình …) 12 Phần ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 3.1 Đối tượng phạm vi nghiên cứu - Đối tượng nghiên cứu: Đối tượng sử dụng nghiên cứu chuối đỏ cung cấp Trung Tâm Thực Nghiệm Sinh Học Nông Nghiệp Công Nghệ Cao - Viện Di Truyền Nông Nghiệp - Phạm vi nghiên cứu: Đối tượng nghiên cứu phạm vi phòng thí nghiệm 3.2 Hóa chất thiết bị sử dụng 3.2.1 Hóa chất sử dụng - Hóa chất sử dụng muối khoáng đa lượng, vi lượng, vitamin thành phần môi trường MS - Các chất kích thích sinh trưởng: 2,4-D (Bio science), kinetin (Wako), BA (Duchefa), NAA (Trung quốc), IBA (Duchefa); chất bổ xung như: inositol (Bio science) 3.2.2 Thiết bị sử dụng - Các thiết bị dùng cho nghiên cứu: Cân điện tử (Olhous- Vietlabcu) (Mỹ), nồi hấp khử trùng ALP (Nhật bản), tủ sấy (Memmenrt) (Đức), tủ cấy vô trùng cấp II (Airtech) (Hàn Quốc), máy chuẩn pH (Hanna HI2210) (Đức), Lò vi sóng Sanyo (Nhật bản)… - Ngoài có trang thiết bị khác phòng thí nghiệm Khoa Công nghệ Sinh học Công nghệ Thực phẩm, Trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên 3.3 Địa điểm thời gian tiến hành 13 - Địa điểm: thí nghiệm tiến hành phòng thí nghiệm nuôi cấy mô tế bào thực vật, Trung Tâm Thực Nghiệm Sinh Học Nông Nghiệp Công Nghệ Cao Viện Di Truyền Nông Nghiệp Thời gian tiến hành: thí nghiệm tiến hành từ tháng 12/2016 đến tháng 5/2017 3.4 Nội dung nghiên cứu 3.4.1 Nội dung 1: Ảnh hưởng kết hợp HgCl & Javen đến khả vô trùng tạo vật liệu khởi đầu 3.4.2 Nội dung 2: Ảnh hưởng kết hợp BA + NAA đến trình hình thành cụm chồi từ mảnh củ 3.4.3 Nội dung 3: Ảnh hưởng BA đến trình nhân chồi 3.4.4 Nội dung 4: Ảnh hưởng kết hợp BA + IAA đến trình tái sinh chồi 3.4.5 Nội dung 5: Ảnh hưởng IBA đến trình tạo rễ tạo hoàn chỉnh 3.5 Phương pháp nghiên cứu tiêu theo dõi 3.5.1 Ảnh hưởng kết hợp HgCl2 & Javen đến khả vô trùng tạo vật liệu khởi đầu 14 Thí nghiệm 1: Ảnh hưởng kết hợp HgCl2 + Javen đến khả vô trùng tạo vật liệu khởi đầu Công Thức Thí Nghiệm CT1 CT2 CT3 CT4 JAVEN(%) 5 5 Thời Gian (phút) HgCL2(%) Thời Gian (phút) 0.1 0.1 0.1 0.1 12 Chỉ tiêu theo dõi: tỷ lệ mẫu sống, mẫu nhiễm mẫu chết 3.5.2 Ảnh hưởng kết hợp BA+ NAA đến trình hình thành cụm chồi từ mảnh củ Thí nghiệm 2: Ảnh hưởng kết hợp BA+ NAA đến trình hình thành cụm chồi từ mảnh củ Công thức 1: Môi trường MS + BA 2mg/l + NAA 0,1mg/l Công thức 2: Môi trường MS + BA 3mg/l + NAA 0,2mg/l Công thức 3: Môi trường MS + BA 5mg/l + NAA 0,3mg/l Công thức 4: Môi trường MS + BA 7mg/l + NAA 0,5 mg/l Công thức 5: Môi trường MS + BA 9mg/l + NAA 1,0mg/l Bố trí thí nghiệm: thí nghiệm bố trí theo kiểu ngẫu nhiên hoàn toàn, có công thức, công thức nhắc lại lần, cấy 30 mẫu cho công thức Chỉ tiêu theo dõi: số cụm chồi tạo thành, chất lượng chồi Tổng số chồi tạo thành Số chồi tạo thành (%) = Tổng số mẫu vào 15 × 100% 3.5.3 Ảnh hưởng BA đến trình nhân chồi Thí nghiệm 4: Ảnh hưởng BA đến trình nhân chồi Công thức 1: Môi trường MS + BA 0,5mg/l Công thức 2: Môi trường MS + BA 1mg/l Công thức 3: Môi trường MS + BA 1,5mg/l Công thức 4: Môi trường MS + BA 3mg/l Công thức 5: Môi trường MS + BA 5mg/l Bố trí thí nghiệm: thí nghiệm bố trí theo kiểu ngẫu nhiên hoàn toàn, có công thức, công thức nhắc lại lần, cấy 30 mẫu cho công thức Chỉ tiêu theo dõi: Số chồi tạo thành, chất lượng chồi Số chồi tạo thành (%) = Tổng số chồi tạo thành Tổng số mẫu ban đầu × 100% 3.5.4 Ảnh hưởng kết hợp BA + IAA đến trình tái sinh chồi Thí nghiệm 3: Ảnh hưởng kết hợp BA + IAA đến trình tái sinh chồi Công thức 1: Môi trường MS + BA 1mg/l + IAA 0,1 mg/l Công thức 2: Môi trường MS + BA 4mg/l + IAA 0,1 mg/l Công thức 3: Môi trường MS + BA 6mg/l + IAA 0,1mg/l Công thức 4: Môi trường MS + BA 8mg/l + IAA 0,1 mg/l Công thức 5: Môi trường MS + BA 10mg/l + IAA 0,1 mg/l Bố trí thí nghiệm: thí nghiệm bố trí theo kiểu ngẫu nhiên hoàn toàn, có công thức, công thức nhắc lại lần, cấy 30 mẫu cho công thức Chỉ tiêu theo dõi: số chồi tạo thành, chất lượng chồi Tổng số chồi tạo thành Số chồi tạo thành (%) = Tổng số mẫu ban đầu × 100% 3.5.5 Ảnh hưởng kết hợp IBA + than hoạt tính đến trình tạo rễ tạo hoàn chỉnh 16 Thí nghiệm 4: Ảnh hưởng kết hợp IBA + than hoạt tính đến trình tạo rễ tạo hoàn chỉnh Công thức 1: Môi trường MS + IBA 0,1mg/l + 2g/l than hoạt tính Công thức 2: Môi trường MS + IBA 0,3mg/l + 2g/l than hoạt tính Công thức 3: Môi trường MS + IBA 0,5mg/l + 2g/l than hoạt tính Công thức 4: Môi trường MS + IBA 1mg/l + 2g/l than hoạt tính Bố trí thí nghiệm: Thí nghiệm bố trí theo kiểu ngẫu nhiên hoàn toàn, có công thức, công thức nhắc lại lần, cấy 30 mẫu cho công thức Chỉ tiêu theo dõi: Số chồi rễ, số rễ, độ dài rễ Số chồi rễ (%) = Tổng số chồi rễ Tổng số chồi nuôi cấy × 100% 3.6 Phương pháp xử lí số liệu Các số liệu thu thập thống kê xử lý theo phương pháp thống kê toán học phần mềm Excel phần mềm IRRISTART 4.0 17 Phần DỰ KIẾN KẾT QUẢ ĐẠT ĐƯỢC 4.1 Ảnh hưởng kết hợp HgCl2 & Javen đến khả vô trùng tạo vật liệu khởi đầu HgCl2(%) Thời Gian Javen(%) 0.1 0.1 0.1 0.1 5-3 7-5 9-7 12-9 5 5 Tỷ lệ mẫu Tỷ lệ mẫu sống chết 4.2 Kết nghiên cứu ảnh hưởng kết hợp BA+ NAA đến trình hình thành cụm chồi từ mảnh củ Bảng 4.2.1: Kết nghiên cứu ảnh hưởng kết hợp BA+ NAA đến trình hình thành cụm chồi từ mảnh củ Hóa chất (mg/l) BA NAA 0,1 0,2 0,3 0,5 1,0 CV% LSD05 Số lượng mẫu Tỷ lệ tạo chồi (%) Số cụm chồi Chất lượng chồi 4.3 Kết nghiên cứu ảnh hưởng BA đến trình nhân chồi 18 Bảng 4.3.1 Kết nghiên cứu ảnh hưởng BA đến trình nhân chồi Nồng độ BA Số chồi (mg/l) Tỷ lệ mẫu tạo Số chồi hình Chất lượng chồi (%) thành chồi 0,5 1,0 1,5 3,0 5,0 CV% LSD05 4.4 Kết nghiên cứu ảnh hưởng kết hợp BA + IAA đến trình tái sinh chồi tách từ cụm chồi Bảng 4.4.1 Kết nghiên cứu ảnh hưởng kết hợp BA + IAA đến trình tái sinh chồi tách từ cụm chồi Hóa chất (mg/l) Số lượng mẫu Tỷ lệ tạo chồi (%) Số cụm chồi Chất lượng chồi BA IAA 0,1 0,1 0,1 0,1 10 0,1 CV% LSD05 4.5 Kết nghiên cứu ảnh hưởng kết hợp IBA+than hoạt tính đến trình tạo rễ tạo hoàn chỉnh 19 Bảng 4.5.1 Kết nghiên cứu ảnh hưởng kết hợp IBA +than hoạt tính đến trình tạo rễ tạo hoàn chỉnh Hóa Chất (mg/l) Than IBA Hoạt Tính 0,1 0.3 0.5 2 Số lượng mẫu Tỷ lệ tạo rễ (%) CV% LSD05 20 Số rễ thu Chiều dài rễ Phần KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 Kết luận 5.2 Kiến nghị 21 TÀI LIỆU THAM KHẢO I Tài liệu Tiếng Việt Hoàng Nghĩa Nhạc, Nghiên cứu tượng biến dị nuôi cấy invitro chuối phục vụ công tác giống địa bàn tỉnh Nghệ An, luận văn thạc sĩ Nông nghiệp, trường Đại học Nông nghiệp Hà Nội_2004 Nguyễn Quang Thạch, Nguyễn Thị Nhẫn, Nguyễn Thị Kim Thanh, Mai Thị Tân, Nguyễn Thị Lý Anh, Hoàng Minh Tấn, nghiên cứu xây dựng quy trình vi nhân giống số trồng có giá trị kinh tế, tuyển tập quy trình nghiên cứu khoa học kỹ thuật Nông nghiệp 1956_1996, nhà xuất Nông nghiệp Hà Nội _1996 Phạm Thị Kim Thu Đặng Thị Vân, “Nghiên cứu hoàn thiện quy trình sản xuất cấy giống chuối phương pháp nuôi cấy in vitro”, kết nghiên cứu khoa học Rau 1990_1994, nhà xuất Nông nghiệp Hà Nội _1995 Trần Thế Tục, Cao Anh Long, Phạm Văn Côn, Hoàng Ngọc Thuận, Đoàn Thế Lư (1988), giáo trình ăn quả, nhà xuất Nông nghiệp Hà Nội Đoàn Thị Ái Thuyền, Nguyễn Thị Quỳnh, Trần Văn Minh, Nguyễn Đức Minh Hùng, Nguyễn Văn Uyển (1993), “Nhân Giống chuối phương pháp cấy mô, Nuôi cấy mô thực vật phục vụ công tác giống trồng”, NXB Nông nghiệp, TP Hồ Chí Minh, tr.68 - 72 Đỗ Văn Vịnh, Lê Huy Hàm, Nguyễn Bình Phú, Đỗ Văn Cát (1944), số yếu tố ảnh hưởng tới hệ số nhân chồi chuối phương pháp nuôi mô, Tạp chí Nông nghiệp Công nghiệp thực phẩm Đỗ Năng Vịnh cộng (1996), Báo cáo nghiệm thu đề KC - 08 - 13, Chương trình công nghệ sinh học KC 08 giai đoạn 1991 -1995, Khu vực miền núi phía Bắc, Viện Di truyền Nông nghiệp, Hà Nội, tr.6-7, 15, 52 22 Nguyễn Khắc Thái Sơn (2001), “Nghiên cứu hiệu ứng dụng kỹ thuật thủy canh vào giai đoạn vườn ươm để sản xuất giống chuối dứa cấy mô”, Luận Án Tiến Sỹ, Trường Đại Học Nông ngiệp I, tr 68 - 75 Jiang Qing Hai (2004), Hỏi đáp kỹ thuật trồng hoa cảnh nhà (Trần Văn Mão dịch), NXB Nông nghiệp, Hà Nội 10 Trần Kông Tấu (1993), Bài giảng vật lý thổ nhưỡng, Ha Noi University Viet Nam - Holland cooperation project VH3 11 Nguyễn Vi (2003), Độ phì nhiêu thực tế, NXB Nghệ An 12 Báo Thanh Niên 2009 Chuối La Ba http://www.thanhnien.com.vn/News/Pages/200907/20090215001423.aspx 13 Phượng V.N , P.Đ Trí, T.X.Du & N.V.Uyển 2000 Nhân giống vô tính xoan Ấn Độ (Azadirachta indica A Juss.) nuôi cấy mô Tạp chí Sinh học 22 (2), 34-39 14 Phượng V.N , Đ.T.A Thuyền, L.V Dũng, T.X.Du & N.V.Uyển 2001 Quy trình ươm hông (Paulownia fortunei) giai đoạn sau ống nghiệm Trong cuốn: Công nghệ Sinh học Nông nghiệp Sinh thái Bền vững Viện Sinh học Nhiệt đới NXB Nông nghiệp 69-75 15 Quỳnh N.T., N.T.Thảo, H.H Đức, N.Đ Sỹ, V.N Phượng 2007 Sự tăng trưởng lan (Dendrobium Burana Fancy) tre tầm vông (Thyrsostachys siamensis Gamble) hệ thống nuôi cấy in vitro quang tự dưỡng Trong cuốn: Hội nghị khoa học - Công nghệ sinh học thực vật công tác nhân giống tạo giống hoa Viện Khoa học Công nghệ Việt Nam & UBND Tỉnh Lâm Đồng, NXB Nông nghiệp 309-316 II Tài liệu Tiếng Anh 16 Kewit - Wanichkul; Benchamas-Silayoi; Chalongchai - Babpraserth (1993), Evaluation and comparative study of potential of banana varieties from tisue culture propagation, in several location of Thailand, Bangkok (Thailand), 147 leaves 23 17 Rodriguez Enriquez, MJ; Lorenzo-Martin, JR; Garcia-Rodreguez, -A (1998), “Significance of the physiological history of the explant in the vegetative propagation of banana shoot tips”, Acta - Horticulturae, No.212, vol.I, p.61 - 68 18 Taiwan banana Reseach Institute, Plant Tissue Culture Couurse, Chiuju, Pingtung, Taiwan 904 Repulic of China, P.3 - 9,19 - 20, 119 19 Weathers, - PJ; Cheethern, - RD; Giles, - KL (1998), “Dramatic in shoot number ad lengths for Musa, Cordyline and Nephrolepis using nutrient mists”, “Acta-Horticulture, Symposium on High Technology in Protected by salinity and cation activity ratios in root zone”, Jornal of horticultural science, 71 (1), p 12931298 20 Davidson, 1974), Afica in history Paladir, sr Albans P.366 21 Kinder Hilgemann, (1974), Atlas of wored History.No1.From The Benginning to the Eve of the French Revolution Pengurra, Hurmands Worth.P.299 22 Namaganda, -J.M.C (1994), “ Initiation and quantification of in vitro production of banana shoot proliferation culture”, Afican Crop Science Conference proceedings (Uganda), V 1(1), p 35 - 36, 713 - 718 23 Persley, G.J and De Longhe, E Acds 1978 Banana plantain Breeding Strategies ACIAR proceedings No 21 ACIAR Cainbera 24 Taiwan banana Reseach Institute, Plant Tissue Culture Couurse, Chiuju, Pingtung, Taiwan 904 Repulic of China, P.3 - 9,19 - 20, 119 25 Vansina (1984), Western Bantu Expansion Journal of African History, 25 129 26 Hwang, S.C., Chen, C.L., Lin, J.C and Lin, H.L 1984 Cultivation of banana using plantlets from meristem culture HortScience 19, 231-233 27 Lee S.W 2003 Micropropagation of Cavendish Banana in Taiwan http://www.agnet.org/library/tb/163a/ Taiwan Banana Research Institute, P.O Box 18, Chiuju, Pingtung, Taiwan 90403, ROC, 2003-11-01, 9pp 24 28 Murashige T., & F Skoog, 1962 A revised medium for rapide growth and bioassays with tobacco tissue cultures Physiol Plant 15, 473-497 29 Nhut D.T., L.T.A Hong, H Watanabe, M Goi, M Tanaka 2002 Growth of banana plantlets cultured in vitro under red and blue light- emitting diode (LED) irradiation source ISHS Acta Horticulturae 575: International Symposium on Tropical and Subtropical Fruits 30 Ma, S.S and Shii, C.T 1972 In vitro formation of adventitious buds in banana shoot apex following decapitation Journal of Chinese Society of Horticultural Science 18, 135-42 25 ... Nguyễn Quang Thạch, Nguyễn Thị Nhẫn Hoàng Thị Nga (1995) cho biết hoàn toàn sử dụng phương pháp invitro để nhân nhanh chuối, vật liệu nuôi cấy tốt cho mục đích nhân nhanh mô chồi đỉnh chuối sử dụng... Nông nghiệp Hà Nội_2004 Nguyễn Quang Thạch, Nguyễn Thị Nhẫn, Nguyễn Thị Kim Thanh, Mai Thị Tân, Nguyễn Thị Lý Anh, Hoàng Minh Tấn, nghiên cứu xây dựng quy trình vi nhân giống số trồng có giá trị... thực đề tài: “ Nghiên cứu quy trình nhân nhanh giống chuối đỏ (Dacca Banana) phương pháp invitro” 1.3 Mục đích nghiên cứu Nghiên cứu quy trình nhân nhanh tái sinh chuối đỏ (Dacca Banana) phương