Bệnh đốm đen do nấm Phaeoisariopsis personata (giai đoạn vô tính) hay Mycosphaerella berkeleyi (giai đoạn hữu tính) là một trong các bệnh hại lá nguy hiểm nhất đối với cây lạc trên toàn thế giới. Thiệt hại năng suất do bệnh đốm đen trên toàn cầu ước tính gần 3 triệu USD (CABI, 2006). Mức độ thiệt hại năng suất của bệnh đốm đen hại lạc thay đổi theo khu vực và vụ trồng. Tại các khu vực không phòng trừ bằng thuốc trừ nấm, thiệt hại có thể tới 50%. Tại các khu vực, nơi áp dụng biện pháp phòng trừ (chẳng hạn như ở phía Nam Hoa Kỳ) thì thiệt hại năng suất cũng xấp xỉ 10%. Tại vùng nhiệt đới bán khô hạn, nơi hiếm khi sử dụng thuốc trừ nấm thì thiệt hại do bệnh đốm đen thường vượt quá 50% (CABI, 2006). Theo Zhang et al. (2001) và Dwivedi et al. (2003), bệnh đốm đen, đốm nâu và gỉ sắt là ba loại bệnh gây hại nghiêm trọng nhất trên cây lạc và có thể làm giảm năng suất lạc tới 50%. Theo Pensuk (2003), bệnh đốm đen có thể làm giảm tới 80% năng suất của cây lạc. Theo Khedikar (2010), khi cây lạc vừa bị ảnh hưởng của bệnh gỉ sắt và bệnh đốm đen thì năng suất có thể giảm 50 - 70% . Trên đồng ruộng, nấm tạo cả 2 giai đoạn sinh sản vô tính và hữu tính nhưng bào tử phân sinh hình thành từ tàn dư tồn tại trong đất là nguồn bệnh quan trọng nhất. Nhìn chung, nấm P. personata gây bệnh đốm đen hại lạc không truyền qua hạt nhưng được xem là tác nhân truyền qua đất. Khi bắt đầu vụ trồng, bào tử phân sinh nấm từ tàn dư trong đất sẽ nhiễm các lá phía dưới và nhanh chóng phát tán lên các lá phía trên và có thể gây tàn lụi bộ lá nếu điều kiện ngoại cảnh thuận lợi (McDonald et al., 1985). Tác nhân gây bệnh đốm đen là một loài nấm túi thuộc nhóm sinh dưỡng “biotrophe” và quan hệ của nấm với cây lạc tuân theo quan hệ gen đối gen điển hình. Hiện nay đã có một số nghiên cứu trên thế giới về tính kháng của cây lạc đối với nấm gây bệnh đốm đen (Dwivedi et al., 2002; Mace et al., 2006; Mondal and Badigannavar, 2009; Mondal et al., 2009; Mallikarjuna et al., 2012) .
HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM NGÔ THỊ MAI VI NGHIÊN CỨU BỆNH ĐỐM ĐEN (Phaeoisariopsis personata) HẠI LẠC TẠI NGHỆ AN LUẬN ÁN TIẾN SĨ NHÀ XUẤT BẢN ĐẠI HỌC NÔNG NGHIỆP - 2017 PHẦN MỞ ĐẦU 1.1 TÍNH CẤP THIẾT CỦA ĐỀ TÀI Bệnh đốm đen nấm Phaeoisariopsis personata (giai đoạn vô tính) hay Mycosphaerella berkeleyi (giai đoạn hữu tính) bệnh hại nguy hiểm lạc toàn giới Thiệt hại suất bệnh đốm đen toàn cầu ước tính gần triệu USD (CABI, 2006) Mức độ thiệt hại suất bệnh đốm đen hại lạc thay đổi theo khu vực vụ trồng Tại khu vực không phòng trừ thuốc trừ nấm, thiệt hại tới 50% Tại khu vực, nơi áp dụng biện pháp phòng trừ (chẳng hạn phía Nam Hoa Kỳ) thiệt hại suất xấp xỉ 10% Tại vùng nhiệt đới bán khô hạn, nơi sử dụng thuốc trừ nấm thiệt hại bệnh đốm đen thường vượt 50% (CABI, 2006) Theo Zhang et al (2001) Dwivedi et al (2003), bệnh đốm đen, đốm nâu gỉ sắt ba loại bệnh gây hại nghiêm trọng lạc làm giảm suất lạc tới 50% Theo Pensuk (2003), bệnh đốm đen làm giảm tới 80% suất lạc Theo Khedikar (2010), lạc vừa bị ảnh hưởng bệnh gỉ sắt bệnh đốm đen suất giảm 50 - 70% Trên đồng ruộng, nấm tạo giai đoạn sinh sản vô tính hữu tính bào tử phân sinh hình thành từ tàn dư tồn đất nguồn bệnh quan trọng Nhìn chung, nấm P personata gây bệnh đốm đen hại lạc không truyền qua hạt xem tác nhân truyền qua đất Khi bắt đầu vụ trồng, bào tử phân sinh nấm từ tàn dư đất nhiễm phía nhanh chóng phát tán lên phía gây tàn lụi điều kiện ngoại cảnh thuận lợi (McDonald et al., 1985) Tác nhân gây bệnh đốm đen loài nấm túi thuộc nhóm sinh dưỡng “biotrophe” quan hệ nấm với lạc tuân theo quan hệ gen đối gen điển hình Hiện có số nghiên cứu giới tính kháng lạc nấm gây bệnh đốm đen (Dwivedi et al., 2002; Mace et al., 2006; Mondal and Badigannavar, 2009; Mondal et al., 2009; Mallikarjuna et al., 2012) Các chủng nấm khác di truyền có phản ứng mẫn cảm khác thuốc hóa học khác tính gây bệnh giống (Adiver et al., 2009) Vì vậy, mức độ đa dạng đặc điểm sinh học di truyền nấm P personata gây bệnh đốm đen hại lạc nói riêng tác nhân gây bệnh nói chung cần phải nghiên cứu để áp dụng hiệu biện pháp phòng chống Tuy nhiên, có nghiên cứu mức độ đa dạng nấm gây bệnh thực Cho tới nay, có nghiên cứu mức độ đa dạng phân tử nấm gây bệnh đốm đen hại lạc Ấn Độ dựa phân tích RAPD (Adiver et al., 2009) phân tích phổ isozyme (Adiver et al., 2008) Tương tự, có nghiên cứu mức độ biến động tính gây bệnh nấm P personata gây bệnh đốm đen (Hossain, 1997; Hossain and Ilag, 2000) Nghê ̣ An là tı̉nh có diê ̣n tı́ch trồ ng la ̣c lớn với gầ n 20000 ha, tâ ̣p trung chủ yế u ở các huyện Quỳnh Lưu, Diễn Châu, Nghi Lô ̣c, Thanh Chương Nam Đàn Cùng với tiề m đấ t đai và điề u kiê ̣n sinh thái phù hơ ̣p nên la ̣c đươ ̣c coi trồng chủ lư ̣c Nghê ̣ An Đặc biê ̣t, la ̣c là những đinh ̣ hướng phát triể n quan trọng của tı̉nh nhằm hướng tới xuấ t khẩ u ổ n đinh ̣ và mang la ̣i nguồ n thu nhâ ̣p lớn cho người dân Tuy nhiên, thực tế sản xuấ t tı̉nh cho thấy tình hı̀nh phát triể n la ̣c còn nhiề u ̣n chế, chưa xứng đáng với tiề m đấ t đai và điề u kiê ̣n sinh thái vùng, suất cũng phẩ m chấ t la ̣c ở còn thấ p và không ổ n định so với tı̉nh khác cả nước Trong đó, viê ̣c áp dụng biện pháp thâm canh làm phát sinh ngày càng nhiề u dich ̣ ̣i nguy hiể m, đă ̣c biê ̣t là loại nấm gây ̣i P personata Tại Nghê ̣ An nói riêng Việt Nam nói chung, bệnh đốm đen hại lạc xuất gây hại phổ biến đồng ruộng Tuy nhiên, nay, chưa có công trình nghiên cứu sâu thực cách hệ thống bệnh Việt Nam Bên ca ̣nh đó, bệnh làm chết nên người dân quan chuyên môn chưa đánh giá tác ̣i của nhóm bê ̣nh ̣i lá đế n suấ t và phẩ m chất la ̣c Chính vı̀ vậy, công tác đạo phòng trừ bê ̣nh chưa phù hợp dẫn đế n sự giảm sút nghiêm tro ̣ng về suấ t cũng phẩ m chấ t la ̣c của vùng Xuất phát từ sở khoa học thực tiễn trên, việc nghiên cứu bệnh đốm đen hại lạc cần thiết Việt Nam Nghiên cứu tập trung vào đánh giá thiệt hại, mức độ đa dạng nấm đánh giá số biện pháp phòng trừ bệnh điều kiện tỉnh Nghệ An Các kết nghiên cứu luận án sở để nghiên cứu ứng dụng biện pháp trừ bệnh đốm đen nhằm phòng chống hiệu phát triển, lây lan bệnh đồng ruộng, góp phần làm tăng suất phẩm chất lạc 1.2 MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU CỦA ĐỀ TÀI Đánh giá thiệt hại, mức độ đa dạng biện pháp phòng trừ nấm P personata gây bệnh đốm đen hại lạc Nghệ An 1.3 ĐỐI TƯỢNG VÀ PHẠM VI NGHIÊN CỨU 1.3.1 Đối tượng nghiên cứu Bệnh đốm đen hại lạc nấm P personata gây 1.3.2 Phạm vi nghiên cứu Đề tài tập trung nghiên cứu đa dạng phân tử, đặc tính sinh học, tính gây bệnh số biên pháp phòng chống nấm P personata 1.3.3 Địa điểm, thời gian nghiên cứu Điều tra, đánh giá tác hại nghiên cứu bệnh đốm đen hại lạc Nghệ An Mẫu bệnh đốm đen thu thập Nghệ An số tỉnh khác Lào Cai, Thanh Hóa, Hà Tĩnh Đồng Nai Đề tài thực từ năm 2012 đến năm 2015 1.4 NHỮNG ĐÓNG GÓP MỚI CỦA ĐỀ TÀI Đề tài đánh giá thiệt hại suất bệnh đốm đen gây lạc đồng ruộng Nghệ An Trên giống lạc L14, bệnh đốm đen làm giảm suất tới 30,24% vụ xuân tới 49,90% vụ thu Bổ sung thông tin phân loại nấm đốm đen hại lạc Nghệ An Trình tự vùng gen ITS 11 mẫu nấm thu thập cho thấy chúng thuộc loài Phaeoisariopsis personata (giai đoạn vô tính) hay Mycosphaerella berkeleyi (giai đoạn hữu tính) Dựa phân tích Rep - PCR chứng tỏ quần thể nấm Nghệ An có mức độ đa dạng thấp mối quan hệ nhóm phả hệ với đặc điểm hình thái, nguồn gốc câc mẫu nấm thu thập Xác định đặc điểm sinh học dịch tễ đặc trưng nấm P personata Nghệ An Trong đó, khám phá khoa học quan trọng xác định dạng sinh sản hữu tính nấm chưa phát thấy điều kiện tự nhiên Nghệ An Kết nghiên cứu luận án chứng tỏ thuốc hoạt chất Carbendazime, dịch chiết thực vật từ cà độc (Datura metel) trầu không (Piper betel) có khả phòng chống hiệu nấm P personata điều kiện phòng thí nghiệm, nhà lưới đồng ruộng Ở đồng ruộng, có hai thời điểm xử lý bệnh đốm đen hiệu nhất, bao gồm phun mọc tuần, tuần mọc tuần tuần 1.5 Ý NGHĨA KHOA HỌC VÀ THỰC TIỄN CỦA ĐỀ TÀI 1.5.1 Ý nghĩa khoa học Kết nghiên cứu đề tài bổ sung, đóng góp liệu khoa học định danh nấm đốm đen giải trình tự vùng ITS Đặc biệt, dựa phân tích Rep - PCR chứng tỏ quần thể nấm Nghệ An có mức độ đa dạng thấp mối quan hệ nhóm phả hệ với đặc điểm hình thái, nguồn gốc câc mẫu nấm thu thập Kết nghiên cứu gợi ý nấm gây bệnh đốm đen hại lạc Nghệ An, biện pháp quản lý bệnh áp dụng đồng loạt toàn tỉnh tạo hiệu phòng chống giống 1.5.2 Ý nghĩa thực tiễn Đề tài xác định đặc điểm sinh học, dịch tễ đặc trưng nấm, đánh giá thiệt hại suất bệnh đốm đen gây lạc nghiên cứu biện pháp phòng trừ bệnh cách hệ thống Kết nghiên cứu đề tài khẳng định tầm quan trọng bệnh đồng thời giải thích gây bệnh nấm P personata hại lạc đồng ruộng, tìm thời điểm xử lý bệnh hiệu quả, từ làm sở cho việc đề xuất áp dụng biện pháp phòng trừ nhằm giảm thiểu thiệt hại bệnh cách hiệu quả, góp phần nâng cao suất phẩm chất lạc PHẦN TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 TÌNH HÌNH SẢN XUẤT LẠC TRÊN THẾ GIỚI VÀ Ở VIỆT NAM 2.1.1 Tình hình sản xuất lạc giới Cây lạc đứng hàng thứ hai sau đậu tương số trồng ngắn ngày lấy dầu thực vật (cả diện tích sản lượng) trồng rộng rãi 100 quốc gia giới Theo số liệu Tổ chức Nông Lương Thế giới (2013), từ năm 2000 đến diện tích, suất sản lượng lạc giới có biến động (bảng 2.1) Diện tích trồng lạc năm 2000 23,3 triệu ha, sau tăng lên đạt cao vào năm 2005 (24,0 triệu ha), đến năm 2010 diện tích trồng lạc giảm xuống 21,4 triệu Tuy diện tích trồng lạc có xu hướng giảm nhẹ suất lạc ngày tăng nhờ áp dụng tiến kỹ thuật vào sản xuất Năm 2000 suất lạc đạt 1,49 tấn/ha, tăng 30,9% so với suất năm 1980 (1,10 tấn/ha) tăng 25,5% so với suất năm 1990 (1,15 tấn/ha) Đến năm 2010, suất lạc giới đạt 1,67 tấn/ha cao vòng 10 năm trở lại Cùng với gia tăng suất, sản lượng lạc giới tăng lên, đạt cao 38,4 triệu (năm 2008), sau giảm xuống với tụt giảm diện tích trồng, sản lượng lạc năm 2010 đạt 35,9 triệu (FAO, 2013) Bảng 2.1 Diện tích, suất sản lượng lạc giới (năm 2000 - 2012) Năm 2000 2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008 2009 2010 Diện tích (triệu ha) 23,3 23,1 23,0 23,1 24,0 24,0 22,5 21,6 24,1 23,7 21,4 Năng suất (tấn/ha) 1,49 1,56 1,44 1,56 1,52 1,57 1,65 1,54 1,60 1,54 1,67 Sản lượng (triệu tấn) 34,7 35,9 33,1 36,1 36,5 37,7 37,0 33,2 38,4 36,4 35,9 Nguồn: FAO (2013) Các nước có sản lượng lạc lớn niên vụ 2011/2012 Trung Quốc, Ấn Độ, Nigeria Mỹ Trong đó, Trung Quốc nước đứng đầu với sản lượng 16,8 triệu tấn, Ấn Độ với sản lượng 5,78 triệu Việt Nam nước đứng thứ 12 với sản lượng 0,47 triệu Trung Quốc có giá trị sản xuất lạc lớn giới đạt gần 7,39 triệu đô la Mỹ (USD), Ấn Độ, Mỹ với số 2,45 1,33 triệu USD (FAO, 2013) 2.1.2 Tình hình sản xuất lạc Việt Nam Sản xuất lạc nước ta phân bố hầu hết vùng sinh thái nông nghiệp với diện tích trồng lạc chiếm khoảng 28% tổng diện tích công nghiệp hàng năm (đay, cói, mía, lạc, đậu tương thuốc lá), tập trung chủ yếu vùng vùng Duyên hải Nam Trung Bộ, vùng Đồng sông Hồng, vùng Trung du Miền núi phía Bắc vùng Bắc Trung Bộ Các vùng khác có diện tích trồng lạc thấp Theo số liệu Tổng cục Thống kê Việt Nam (2013), vòng 10 năm từ 2002-2012, diện tích giảm từ 246,7 nghìn (năm 2002) xuống 220,5 nghìn (năm 2012) sản xuất lạc Việt Nam có bước chuyển biến tích cực suất, tăng từ 1,62 tấn/ha (năm 2002) lên 2,13 tấn/ha (năm 2012) Sản lượng tăng từ 400,4 nghìn (năm 2002) lên 470,6 nghìn (năm 2012) Năm 2012, suất lạc bình quân nước đạt cao 2,13 tấn/ha Sản lượng lạc nước đạt cao vào năm 2008 với 530,2 nghìn (bảng 2.2) Bảng 2.2 Diện tích, suất sản lượng lạc Việt Nam (năm 2002 - 2012) Năm 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008 2009 2010 2011 2012 Diện tích (1.000 ha) 246,7 243,8 263,7 269,6 246,7 254,5 255,3 245,0 231,4 223,8 220,5 Năng suất Sản lượng (tấn/ha) (1.000 tấn) 1,62 400,4 1,67 406,2 1,78 469,0 1,81 489,3 1,87 462,5 2,00 510,0 2,08 530,2 2,09 510,9 2,11 487,2 2,08 465,9 2,13 470,6 Nguồn: Tổng cục Thống kê (2013) 2.2 NGHIÊN CỨU VỀ BỆNH ĐỐM ĐEN HẠI LẠC 2.2.1 Phân bố tầm quan trọng bệnh đốm đen hại lạc 2.2.1.1 Phân bố bệnh đốm đen hại lạc Nấm gây bệnh đốm đen hại lạc phổ biến vùng trồng lạc có khí hậu nhiệt đới cận nhiệt đới (McDonald et al., 1985; CABI, 2006) Bệnh đốm đen hại lạc phân bố rộng khắp vùng trồng lạc thuộc châu Á, châu Mỹ châu Phi (hình 2.1) Hình 2.1 Bản đồ phân bố giới nấm P personata gây bệnh đốm đen hại lạc Nguồn: Plantwise (2014) Ở Việt Nam, bệnh gỉ sắt P arachidis bệnh đốm đen P personata hại bệnh hại lạc, phân bố khắp vùng trồng lạc nước (Mehan and Hong, 1994) 2.2.1.2 Tầm quan trọng bệnh đốm đen hại lạc Lạc trồng có nhiều ý nghĩa vùng nhiệt đới, nhiệt đới Tuy nhiên, điều kiện môi trường áp lực bệnh hại, suất trung bình thường thấp tấn/ha Bệnh hại chủ yếu ảnh hưởng đến suất lạc bao gồm bệnh gỉ sắt (P arachidis) bệnh đốm đen (P personata), năm gây thiệt hại tới 467 triệu USD đến 599 triệu USD (FAO, 2007) Bệnh đốm lạc gồm bệnh đốm nâu nấm Cercospora arachidicola bệnh đốm đen nấm P personata gây Đây bệnh hại quan trọng nguyên nhân làm giảm sút suất lạc toàn giới Ngoài việc trực tiếp làm giảm suất lạc, bệnh làm giảm kích thước, trọng lượng chất lượng hạt (McDonald et al., 1985) Năng suất lạc giảm liên quan chặt chẽ với số vết bệnh kích thước vết bệnh (Gorbet et al., 1982) Theo Kannaiyan et al (1992), nấm gây bệnh đốm lạc Cercospora spp làm giảm suất lạc từ 32 đến 68% Tác giả Subrahmanyam et al (1995) cho biết, Nam Phi, bệnh đốm đen gây thiệt hại suất lạc từ 20% - 100% Tại châu Mỹ, ruộng không phun thuốc bảo vệ thực vật (BVTV) bệnh giảm 50 - 60% suất (Melouk and Shokes, 1995; Godoy et al., 2001) Kể ruộng có phun thuốc BVTV thiệt hại suất bệnh đốm đen gây lên tới 10% (Gibbons, 1979) Theo Zhang et al (2001), bệnh đốm đen, đốm nâu, gỉ sắt xuất gây hại phổ biến tất vùng trồng lạc giới Khi nhiễm nhẹ ảnh hưởng đến suất, nhiên số nơi bệnh nặng thiệt hại suất lên tới 50% Theo Dwivedi et al (2002), đốm nâu, đốm đen gỉ sắt ba bệnh hại quan trọng lạc Chúng gây thiệt hại 50% suất lạc vùng nhiệt đới bán khô hạn Theo Pande et al (2002), bệnh đốm đen gỉ sắt gây hại lạc làm giảm tới 70% suất Theo Pensuk et al (2003), bệnh đốm đen gỉ sắt bệnh gây hại nghiêm trọng lạc bệnh đốm đen gây thiệt hại lên tới 80% suất Theo số liệu Trung tâm Sinh học Nông nghiệp Quốc tế, tính toàn giới, bệnh đốm nâu đốm đen làm giảm suất lạc từ 10 - 80%, số thay đổi tùy theo vùng mùa vụ khác Thiệt hại suất bệnh đốm đen toàn cầu ước tính gần triệu USD (CABI, 2006) Bệnh đốm đen gây thiệt hại suất lạc từ 40% - 60% Ghana 60% Uganda (Mugisha et al., 2005; Yussif, 2010) Theo Lukose et al (2008), bệnh đốm lạc nấm C arachidicola Cercosporidium personatum gây làm giảm suất lạc đến 60% Theo Khedikar et al (2010), lạc vừa bị ảnh hưởng bệnh gỉ sắt bệnh đốm đen suất giảm 50 - 70% Ở Pakistan, tỷ lệ nhiễm bệnh đốm đen lên đến 87,2% thiệt hại suất lên đến 70% (Ijaz, 2011) Ở Bangladesh, bệnh đốm lạc nấm C arachidicola C personatum làm giảm suất lạc từ 30 - 48% (Hasan et al., 2016) Tác giả Subrahmanyam et al (1995) sử dụng thang phân cấp bệnh từ - để đánh giá, xác định sàng lọc dòng lạc mang gen kháng bệnh đốm đen (hình 2.2) Hình 2.2 Sơ đồ phân cấp bệnh đốm đen hại lạc (P personata) Nguồn: Subrahmanyam et al (1995) chiet tuoi ngoai dong ruong tai huyen Nghi Loc, tinh Nghe An vu xuan 2014 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HLPT NS GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 46.257 12 12.610 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 30.896 2.0813 4.5 0.0000 1.2450 0.70287 5.6 0.0068 | | | | 26) Hiệu lực ức chế số chế phẩm sinh học đên khả nảy mầm bào tử nấm P personata điều kiện in vitro BALANCED ANOVA FOR VARIATE 12H FILE CP INVI 27/ 1/16 12:40 :PAGE Hieu luc uc che cua mot so che pham sinh hoc den kha nang mam cua bao tu nam P personata dieu kien in vitro VARIATE V003 12H LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 10 27272.7 2727.27 ****** 0.000 * RESIDUAL 22 603113E-02 274142E-03 * TOTAL (CORRECTED) 32 27272.7 852.273 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 24H FILE CP INVI 27/ 1/16 12:40 :PAGE Hieu luc uc che cua mot so che pham sinh hoc den kha nang mam cua bao tu nam P personata dieu kien in vitro VARIATE V004 24H LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 10 27272.7 2727.27 ****** 0.000 * RESIDUAL 22 603113E-02 274142E-03 * TOTAL (CORRECTED) 32 27272.7 852.273 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 48H FILE CP INVI 27/ 1/16 12:40 :PAGE Hieu luc uc che cua mot so che pham sinh hoc den kha nang mam cua bao tu nam P personata dieu kien in vitro VARIATE V005 48H LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 10 10073.8 1007.38 124.81 0.000 * RESIDUAL 22 177.570 8.07138 * TOTAL (CORRECTED) 32 10251.4 320.356 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE CP INVI 27/ 1/16 12:40 :PAGE Hieu luc uc che cua mot so che pham sinh hoc den kha nang mam cua bao tu nam P personata dieu kien in vitro 198 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 12H 24H 48H CT1 100.000 100.000 26.9000 CT2 100.000 100.000 30.6867 CT3 100.000 100.000 38.6700 CT4 100.000 100.000 50.6567 CT5 100.000 100.000 57.8800 CT6 100.000 100.000 29.1833 CT7 100.000 100.000 35.0167 CT8 100.000 100.000 46.0333 CT9 100.000 100.000 56.1800 CT10 100.000 100.000 65.0167 CT11 0.000000 0.000000 0.000000 SE(N= 3) 0.955933E-02 0.955933E-02 1.64026 5%LSD 22DF 0.280361E-01 0.280361E-01 4.81064 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE CP INVI 27/ 1/16 12:40 :PAGE Hieu luc uc che cua mot so che pham sinh hoc den kha nang mam cua bao tu nam P personata dieu kien in vitro F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE 12H 24H 48H GRAND MEAN (N= 33) NO OBS 33 90.909 33 90.909 33 39.657 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 29.194 0.16557E-01 0.0 0.0000 29.194 0.16557E-01 0.0 0.0000 17.898 2.8410 7.2 0.0000 | | | | 27) Ảnh hưởng số chế phẩm sinh học đến khả gây bệnh nấm P personata giống lạc L14 điều kiện in vivo BALANCED ANOVA FOR VARIATE TGUB FILE CPTX 27/ 1/16 12:47 :PAGE Anh huong cua mot so che pham sinh hoc den kha nang gay benh cua nam P personata tren giong lac L14 dieu kien in vivo VARIATE V003 TGUB LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 10 774024 774024E-01 0.66 0.748 * RESIDUAL 22 2.57867 117212 * TOTAL (CORRECTED) 32 3.35269 104772 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SVB FILE CPTX 27/ 1/16 12:47 :PAGE Anh huong cua mot so che pham sinh hoc den kha nang gay benh cua nam P personata tren giong lac L14 dieu kien in vivo VARIATE V004 SVB LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 10 13580.1 1358.01 57.28 0.000 * RESIDUAL 22 521.598 23.7090 - 199 * TOTAL (CORRECTED) 32 14101.7 440.679 BALANCED ANOVA FOR VARIATE ÐKVB FILE CPTX 27/ 1/16 12:47 :PAGE Anh huong cua mot so che pham sinh hoc den kha nang gay benh cua nam P personata tren giong lac L14 dieu kien in vivo VARIATE V005 ÐKVB LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 10 4.38769 438769 11.75 0.000 * RESIDUAL 22 821400 373364E-01 * TOTAL (CORRECTED) 32 5.20909 162784 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE CPTX 27/ 1/16 12:47 :PAGE Anh huong cua mot so che pham sinh hoc den kha nang gay benh cua nam P personata tren giong lac L14 dieu kien in vivo MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS TGUB SVB ÐKVB CT1 14.1100 84.6700 2.95000 CT2 14.0000 87.0000 2.86000 CT3 14.1100 72.2233 2.44000 CT4 14.3333 51.8900 2.25000 CT5 14.3367 49.2233 2.13000 CT6 14.3367 80.3333 3.00000 CT7 14.0000 63.0000 2.40000 CT8 14.0000 40.6700 2.17000 CT9 14.4433 32.6667 2.20000 CT10 14.1100 34.0000 2.12000 CT11 14.1100 86.1100 3.07000 SE(N= 3) 0.197663 2.81123 0.111559 5%LSD 22DF 0.579716 8.24490 0.327186 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE CPTX 27/ 1/16 12:47 :PAGE Anh huong cua mot so che pham sinh hoc den kha nang gay benh cua nam P personata tren giong lac L14 dieu kien in vivo F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TGUB SVB ÐKVB GRAND MEAN (N= 33) NO OBS 33 14.172 33 61.981 33 2.5082 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.32368 0.34236 2.4 0.7485 20.992 4.8692 7.9 0.0000 0.40347 0.19323 7.7 0.0000 | | | | 28) Hiệu lực phòng trừ bệnh đốm đen số chế phẩm sinh học giống lạc L14 điều kiện nhà lưới BALANCED ANOVA FOR VARIATE 9T FILE CPNLTS 11/ 5/16 21:13 :PAGE Hieu luc phong tru benh dom den cua mot so che pham sinh hoc tren giong lac L14 dieu kien nha luoi VARIATE V003 9T 200 LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 5319.31 886.552 53.43 0.000 * RESIDUAL 14 232.288 16.5920 * TOTAL (CORRECTED) 20 5551.60 277.580 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 12T FILE CPNLTS 11/ 5/16 21:13 :PAGE Hieu luc phong tru benh dom den cua mot so che pham sinh hoc tren giong lac L14 dieu kien nha luoi VARIATE V004 12T LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 7358.97 1226.49 165.99 0.000 * RESIDUAL 14 103.446 7.38898 * TOTAL (CORRECTED) 20 7462.41 373.121 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE CPNLTS 11/ 5/16 21:13 :PAGE Hieu luc phong tru benh dom den cua mot so che pham sinh hoc tren giong lac L14 dieu kien nha luoi MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 9T 12T CT1 30.7933 34.5567 CT2 37.8800 47.3200 CT3 42.4700 49.5833 CT4 37.0667 41.8467 CT5 48.1400 56.4067 CT6 52.0600 60.5000 CT7 0.000000 0.000000 SE(N= 3) 2.35174 1.56939 5%LSD 14DF 7.13334 4.76032 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE CPNLTS 11/ 5/16 21:13 :PAGE Hieu luc phong tru benh dom den cua mot so che pham sinh hoc tren giong lac L14 dieu kien nha luoi F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE 9T 12T GRAND MEAN (N= 21) NO OBS 21 35.487 21 41.459 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 16.661 4.0733 11.5 0.0000 19.316 2.7183 6.6 0.0000 | | | | 29) Ảnh hưởng số chế phẩm sinh học đến hiệu lực phòng trừ bệnh đốm đen giống lạc L14 đồng ruộng huyện Nghi Lộc, tỉnh Nghệ An vụ xuân 2014 BALANCED ANOVA FOR VARIATE HLPT FILE CPSH1 30/10/16 21:28 :PAGE Anh hương cua mot so che pham sinh hoc den hieu luc uc che benh dom den tren going lac L14 ngoai dong ruong tai huyen Nghi Loc, tỉnh Nghe An vu xuan 2014 201 VARIATE V003 HLPT LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 8081.79 1346.97 155.96 0.000 * RESIDUAL 14 120.911 8.63648 * TOTAL (CORRECTED) 20 8202.70 410.135 BALANCED ANOVA FOR VARIATE KL FILE CPSH1 30/10/16 21:28 :PAGE Anh hương cua mot so che pham sinh hoc den hieu luc uc che benh dom den tren going lac L14 ngoai dong ruong tai huyen Nghi Loc, tỉnh Nghe An vu xuan 2014 VARIATE V004 KL LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 12.5741 2.09569 5.04 0.006 * RESIDUAL 14 5.82320 415943 * TOTAL (CORRECTED) 20 18.3973 919866 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE CPSH1 30/10/16 21:28 :PAGE Anh hương cua mot so che pham sinh hoc den hieu luc uc che benh dom den tren going lac L14 ngoai dong ruong tai huyen Nghi Loc, tỉnh Nghe An vu xuan 2014 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS HLPT KL CT1 37.9033 11.8500 CT2 49.2000 12.9500 CT3 53.1400 13.0700 CT4 43.4233 12.2000 CT5 59.1400 13.3400 CT6 63.5200 13.5700 CT7 0.000000 11.3200 SE(N= 3) 1.69671 0.372354 5%LSD 14DF 5.14650 1.12943 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE CPSH1 30/10/16 21:28 :PAGE Anh hương cua mot so che pham sinh hoc den hieu luc uc che benh dom den tren going lac L14 ngoai dong ruong tai huyen Nghi Loc, tỉnh Nghe An vu xuan 2014 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HLPT KL GRAND MEAN (N= 21) NO OBS 21 43.761 21 12.614 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 20.252 2.9388 6.7 0.0000 0.95910 0.64494 5.1 0.0062 202 | | | | PHỤ LỤC Trình tự đoạn đọc 11 mẫu nấm - 17B4ZAB024 –(441nts) CTTCGGGGGCGACCCCGCCGTCCCGGCGACGGCGCCCCCGGAGGTCATCAAACTCTGC ATCCGTGCGTCGGAGTGGTCAAGTAAATTCCAACAAAACTTTCAACAACGGATCTCTT GGTTCTGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATAAGTAATGTGAATTGCAGAA TTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACATTGCGCCCCGCGGCATTCCGCGGGGCA TGCCTGTTCGAGCGTCATTTCACCGCTCAAGCCTAGCTTGGTATTGGGCGTCGCGGTTC CGCGCGCCTTGAAGTCCCCGGCTGAGCAGTCCGTCTCTAAGCGGCGTGGCATATATTT CGCTGAAGAGTTCGGGCGGCTTTTGGCCGTTAAATCTTTCTCAAGGTTGACCTCGGATC AGGTAGGGATACCCGCTGAACTTAAGCATATCTA - 17B4ZAB025- (493nts) GAAGATTTAACGGCCAAAAGCCGCCCGAACTCTTCAGCGAAATATATGCCACGCCGCT TAGAGACGGACTGCTCAGCCGGGGACTTCAAGGCGCGCGGAACCGCGACGCCCAATA CCAAGCTAGGCTTGAGCGGTGAAATGACGCTCGAACAGGCATGCCCCGCGGAATGCC GCGGGGCGCAATGTGCGTTCAAAGATTCGATGATTCACTGAATTCTGCAATTCACATT ACTTATCGCATTTCGCTGCGTTCTTCATCGATGCCAGAACCAAGAGATCCGTTGTTGAA AGTTTTGTTGGAATTTACTTGACCACTCCGACGCACGGATGCAGAGTTTGATGACCTCC GGGGGCGCCGTCGCCGGGACGGCGGGGTCGCCCCCGAAGCAACAGGGTTGGTTCACA AAGGGTCGGAGGTCGGGCTTGCACCCTCGCTCAGTAATGATCCCTCCGCAGGTTCACC TACGGAGACCTTGTTACGACTTTTACTTCC 203 15.2 - 17B4ZAB026- (478nts) AAAAGCCGCCCGAACTCTTCAGCGAAATATATGCCACGCCGCTTAGAGACGGACTGCT CAGCCGGGGACTTCAAGGCGCGCGGAACCGCGACGCCCAATACCAAGCTAGGCTTGA GCGGTGAAATGACGCTCGAACAGGCATGCCCCGCGGAATGCCGCGGGGCGCAATGTG CGTTCAAAGATTCGATGATTCACTGAATTCTGCAATTCACATTACTTATCGCATTTCGC TGCGTTCTTCATCGATGCCAGAACCAAGAGATCCGTTGTTGAAAGTTTTGTTGGAATTT ACTTGACCACTCCGACGCACGGATGCAGAGTTTGATGACCTCCGGGGGCGCCGTCGCC GGGACGGCGGGGTCGCCCCCGAAGCAACAGGGTTGGTTCACAAAGGGTCGGAGGTCG GGCTTGCACCCTCGCTCAGTAATGATCCCTCCGCAGGTTCACCTACGGAGACCTTGTTA CGACTTTTACTTCC 18.1 - 17B4ZAB027 – (464nts) AAGCCGCCCGAACTCTTCAGCGAAATATATGCCACGCCGCTTAGAGACGGACTGCTCA GCCGGGGACTTCAAGGCGCGCGGAACCGCGACGCCCAATACCAAGCTAGGCTTGAGC GGTGAAATGACGCTCGAACAGGCATGCCCCGCGGAATGCCGCGGGGCGCAATGTGCG TTCAAAGATTCGATGATTCACTGAATTCTGCAATTCACATTACTTATCGCATTTCGCTG CGTTCTTCATCGATGCCAGAACCAAGAGATCCGTTGTTGAAAGTTTTGTTGGAATTTAC TTGACCACTCCGACGCACGGATGCAGAGTTTGATGACCTCCGGGGGCGCCGTCGCCGG GACGGCGGGGTCGCCCCCGAAGCAACAGGGTTGGTTCACAAAGGGTCGGAGGTCGGG CTTGCACCCTCGCTCAGTAATGATCCCTCCGCAGGTTCACCTACGGAGACCTTGTTACG 204 19 - 17B4ZAB028- (466nts) AAAAGCCGCCCGAACTCTTCAGCGAAATATATGCCACGCCGCTTAGAGACGGACTGCT CAGCCGGGGACTTCAAGGCGCGCGGAACCGCGACGCCCAATACCAAGCTAGGCTTGA GCGGTGAAATGACGCTCGAACAGGCATGCCCCGCGGAATGCCGCGGGGCGCAATGTG CGTTCAAAGATTCGATGATTCACTGAATTCTGCAATTCACATTACTTATCGCATTTCGC TGCGTTCTTCATCGATGCCAGAACCAAGAGATCCGTTGTTGAAAGTTTTGTTGGAATTT ACTTGACCACTCCGACGCACGGATGCAGAGTTTGATGACCTCCGGGGGCGCCGTCGCC GGGACGGCGGGGTCGCCCCCGAAGCAACAGGGTTGGTTCACAAAGGGTCGGAGGTCG GGCTTGCACCCTCGCTCAGTAATGATCCCTCCGCAGGTTCACCTACGGAGACCTTGTTA C 21.2 - 17B4ZAB029- (482nts) GGCCAAAAGCCGCCCGAACTCTTCAGCGAAATATATGCCACGCCGCTTAGAGACGGA CTGCTCAGCCGGGGACTTCAAGGCGCGCGGAACCGCGACGCCCAATACCAAGCTAGG CTTGAGCGGTGAAATGACGCTCGAACAGGCATGCCCCGCGGAATGCCGCGGGGCGCA ATGTGCGTTCAAAGATTCGATGATTCACTGAATTCTGCAATTCACATTACTTATCGCAT TTCGCTGCGTTCTTCATCGATGCCAGAACCAAGAGATCCGTTGTTGAAAGTTTTGTTGG AATTTACTTGACCACTCCGACGCACGGATGCAGAGTTTGATGACCTCCGGGGGCGCCG TCGCCGGGACGGCGGGGTCGCCCCCGAAGCAACAGGGTTGGTTCACAAAGGGTCGGA GGTCGGGCTTGCACCCTCGCTCAGTAATGATCCCTCCGCAGGTTCACCTACGGAGACC TTGTTACGACTTTTACTTCC 205 21 - 17B4ZAB030-(473nts) AACGGCCAAAAGCCGCCCGAACTCTTCAGCGAAATATATGCCACGCCGCTTAGAGAC GGACTGCTCAGCCGGGGACTTCAAGGCGCGCGGAACCGCGACGCCCAATACCAAGCT AGGCTTGAGCGGTGAAATGACGCTCGAACAGGCATGCCCCGCGGAATGCCGCGGGGC GCAATGTGCGTTCAAAGATTCGATGATTCACTGAATTCTGCAATTCACATTACTTATCG CATTTCGCTGCGTTCTTCATCGATGCCAGAACCAAGAGATCCGTTGTTGAAAGTTTTGT TGGAATTTACTTGACCACTCCGACGCACGGATGCAGAGTTTGATGACCTCCGGGGGCG CCGTCGCCGGGACGGCGGGGTCGCCCCCGAAGCAACAGGGTTGGTTCACAAAGGGTC GGAGGTCGGGCTTGCACCCTCGCTCAGTAATGATCCCTCCGCAGGTTCACCTACGGAG ACCTTGTTACT 23 - 17B4ZAB031-(483nts) AGGGTGCAAGCCCGACCTCCGACCCTTTGTGAACCAACCCTGTTGCTTCGGGGGCGAC CCCGCCGTCCCGGCGACGGCGCCCCCGGAGGTCATCAAACTCTGCATCCGTGCGTCGG AGTGGTCAAGTAAATTCCAACAAAACTTTCAACAACGGATCTCTTGGTTCTGGCATCG ATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATAAGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCAT CGAATCTTTGAACGCACATTGCGCCCCGCGGCATTCCGCGGGGCATGCCTGTTCGAGC GTCATTTCACCGCTCAAGCCTAGCTTGGTATTGGGCGTCGCGGTTCCGCGCGCCTTGAA GTCCCCGGCTGAGCAGTCCGTCTCTAAGCGGCGTGGCATATATTTCGCTGAAGAGTTC GGGCGGCTTTTGGCCGTTAAATCTTTCTCAAGGTTGACCTCGGATCAGGTAGGGATAC CCGCTGAACTTAAGCATATCAT 206 23.2 - 17B4ZAB032-(493nts) GAGCGAGGGTGCAAGCCCGACCTCCGACCCTTTGTGAACCAACCCTGTTGCTTCGGGG GCGACCCCGCCGTCCCGGCGACGGCGCCCCCGGAGGTCATCAAACTCTGCATCCGTGC GTCGGAGTGGTCAAGTAAATTCCAACAAAACTTTCAACAACGGATCTCTTGGTTCTGG CATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATAAGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGA ATCATCGAATCTTTGAACGCACATTGCGCCCCGCGGCATTCCGCGGGGCATGCCTGTT CGAGCGTCATTTCACCGCTCAAGCCTAGCTTGGTATTGGGCGTCGCGGTTCCGCGCGC CTTGAAGTCCCCGGCTGAGCAGTCCGTCTCTAAGCGGCGTGGCATATATTTCGCTGAA GAGTTCGGGCGGCTTTTGGCCGTTAAATCTTTCTCAAGGTTGACCTCGGATCAGGTAG GGATACCCGCTGAACTTAAGCATATCAAAA 29.1 - 17B4ZAB034- (496nts) CATTACTGAGCGAGGGTGCAAGCCCGACCTCCGACCCTTTGTGAACCAACCCTGTTGC TTCGGGGGCGACCCCGCCGTCCCGGCGACGGCGCCCCCGGAGGTCATCAAACTCTGCA TCCGTGCGTCGGAGTGGTCAAGTAAATTCCAACAAAACTTTCAACAACGGATCTCTTG GTTCTGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATAAGTAATGTGAATTGCAGAATT CAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACATTGCGCCCCGCGGCATTCCGCGGGGCATG CCTGTTCGAGCGTCATTTCACCGCTCAAGCCTAGCTTGGTATTGGGCGTCGCGGTTCCG CGCGCCTTGAAGTCCCCGGCTGAGCAGTCCGTCTCTAAGCGGCGTGGCATATATTTCG CTGAAGAGTTCGGGCGGCTTTTGGCCGTTAAATCTTTCTCAAGGTTGACCTCGGATCAG GTAGGGATACCCGCTGAACTTAAGCATACA 207 30.2 - 17B4ZAB035-(468nts) GACCCTTTGTGAACCAACCCTGTTGCTTCGGGGGCGACCCCGCCGTCCCGGCGACGGC GCCCCCGGAGGTCATCAAACTCTGCATCCGTGCGTCGGAGTGGTCAAGTAAATTCCAA CAAAACTTTCAACAACGGATCTCTTGGTTCTGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATG CGATAAGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACATTG CGCCCCGCGGCATTCCGCGGGGCATGCCTGTTCGAGCGTCATTTCACCGCTCAAGCCT AGCTTGGTATTGGGCGTCGCGGTTCCGCGCGCCTTGAAGTCCCCGGCTGAGCAGTCCG TCTCTAAGCGGCGTGGCATATATTTCGCTGAAGAGTTCGGGCGGCTTTTGGCCGTTAA ATCTTTCTCAAGGTTGACCTCGGATCAGGTAGGGATACCCGCTGAACTTAAGCATATC ATAA 208 PHỤ LỤC Chuỗi gần gũi ngân hàng gen - 17B4ZAB024 – (441nts) 9– 17B4ZAB025–(493nts) 15.2– 17B4ZAB026- (478nts) 209 18.1– 17B4ZAB027–(464nts) 19– 17B4ZAB028–(466nts) 21.2– 17B4ZAB029–(482nts) 210 21 – 17B4ZAB030–(473nts) 23– 17B4ZAB031–(486nts) 23.2– 17B4ZAB032–(493nts) 211 29.1– 17B4ZAB034–(496nts) 30.2– 17B4ZAB035–(468nts) 212 ... (2013) 2.2 NGHIÊN CỨU VỀ BỆNH ĐỐM ĐEN HẠI LẠC 2.2.1 Phân bố tầm quan trọng bệnh đốm đen hại lạc 2.2.1.1 Phân bố bệnh đốm đen hại lạc Nấm gây bệnh đốm đen hại lạc phổ biến vùng trồng lạc có khí... Ở Việt Nam, bệnh gỉ sắt P arachidis bệnh đốm đen P personata hại bệnh hại lạc, phân bố khắp vùng trồng lạc nước (Mehan and Hong, 1994) 2.2.1.2 Tầm quan trọng bệnh đốm đen hại lạc Lạc trồng có... Đánh giá thiệt hại, mức độ đa dạng biện pháp phòng trừ nấm P personata gây bệnh đốm đen hại lạc Nghệ An 1.3 ĐỐI TƯỢNG VÀ PHẠM VI NGHIÊN CỨU 1.3.1 Đối tượng nghiên cứu Bệnh đốm đen hại lạc nấm P personata