Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống
1
/ 35 trang
THÔNG TIN TÀI LIỆU
Thông tin cơ bản
Định dạng
Số trang
35
Dung lượng
920,83 KB
Nội dung
I HC THI NGUYấN TRNG I HC S PHM I HC THI NGUYấN TRNG I HC S PHM NGUYN TH LUYN PHT TRIN H THNG TI SINH CY U XANH (VIGNA RADIATA (L.) WILCZEK) PHC V CHN DềNG CHU HN V CHUYN GEN LUN VN THC S SINH HC NGUYN TH LUYN PHT TRIN H THNG TI SINH CY U XANH (VIGNA RADIATA (L.) WILCZEK) PHC V CHN DềNG CHU HN V CHUYN GEN Chuyờn ngnh: Di truyn hc Mó s: 60.42.70 LUN VN THC S SINH HC Ngi hng dn khoa hc: PGS.TS Chu Hong Mu THI NGUYấN 2009 THI NGUYấN 2009 S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn Cụng trỡnh c hon thnh ti: THAI NGUYEN UNIVESSITY THE COLLEGE OF EDUCATION - TRNG I HC S PHM - I HC THI NGUYấN Ngi hng dn khoa hc: PGS.TS CHU HONG MU SUMMARY OF MASTER ESSAY FOR EDUCATION SCIENCE NGUYEN THI LUYEN Phn bin DEVELOPMENT OF REGENERATION ON MUNG BEAN Phn bin TOCHOOSE THE DROUGHT RESISTANT STRAIN AND TRANSGENATION Specialyty: GENETICS Code: 60.42.70 Lun s c bo v trc Hi ng chm lun Hp ti: Trng i hc S phm - HTN Ngy thỏng nm 2009 Teacher: Prof.PhD CHU HOANG MAU Cú th tỡm hiu lun ti th vin i hc Thỏi Nguyờn THAI NGUYEN 2009 S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn I HC THI NGUYấN TRNG I HC S PHM NGUYN TH LUYN PHT TRIN H THNG TI SINH CY U XANH (VIGNA RADIATA (L.) WILCZEK) PHC V CHN DềNG CHU HN V CHUYN GEN Chuyờn ngnh: Di truyn hc Mó s : 60.42.70 TểM TT LUN VN THC S SINH HC Thỏi nguyờn - 2009 S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn Li cm n Tụi xin by t lũng bit n PGS.TS Chu Hong Mu ó tn tỡnh hng dn, ch bo v to mi iu kin giỳp tụi hon thnh cụng trỡnh nghiờn cu ny Li cam oan Tụi xin chõn thnh cm n Ban lónh o Trng i hc S phm - i Tụi xin cam oan õy l cụng trỡnh nghiờn cu ca riờng tụi Cỏc s liu, kt qu nghiờn cu lun l trung thc v cha c cụng b hc Thỏi Nguyờn, Ban ch nhim khoa Sinh K thut Nụng nghip v cỏc thy cụ giỏo, cỏn b ca Khoa ó quan tõm giỳp tụi sut quỏ trỡnh hc v hon thnh lun Tụi xin cm n TS Nguyn Th Tõm, v cỏc ch Vi Kiu Liờn v Nguyn Th Thy (Phũng thớ nghim Cụng ngh t bo), xin cm Tỏc gi lun n B mụn h thng canh tỏc - Vin Ngụ Trung ng ó cung cp cỏc ging u xanh lm vt liu cho cỏc thớ nghim ca ti Nguyn Th Luyn Tỏc gi lun Nguyn Th Luyn i S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn ii http://www.lrc-tnu.edu.vn S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn MC LC Trang 2.2 Phng phỏp nghiờn cu 19 2.2.1 Nhúm phng phỏp nuụi cy in vitro 20 22 22 22 23 23 Li cam oan i Li cm n ii Mc lc iii Nhng ch vit tt vi 2.2.2 Phng phỏp ỏnh giỏ kh nng chu mt nc ca mụ so 2.2.2.1 Phng phỏp x lý mụ so bng thi khụ 2.2.2.2 Chn lc mụ so sng sút sau x lý bng thi khụ v tỏi sinh cõy 2.2.2.3 To cõy hon chnh t mụ so chn lc 2.2.2.4 Phng phỏp cõy Danh mc cỏc bng vii 2.2.3 Phng phỏp to a chi t mt lỏ mm 24 Danh mc cỏc hỡnh viii 2.2.4 Phng phỏp x lý kt qu v tớnh toỏn s liu 24 M u Chng Kt qu v tho lun 26 Chng Tng quan ti liu 3.1 H thng tỏi sinh cõy u xanh t mụ so 26 1.1 S lc v cõy u xanh 1.1.1 Ngun gc v phõn loi 1.1.2 Tỡnh hỡnh sn xut u xanh trờn th gii v Vit Nam 3 3.1.1 nh hng nng cỏc cht n kt qu kh trựng ht 26 1.2 ng dng cụng ngh t bo thc vt ci tin ging cõy trng 1.2.1 C s khoa hc ca nuụi cy mụ t bo thc vt 1.2.1.1 C s t bo hc ca k thut nuụi cy mụ t bo thc vt 1.2.1.2 nh hng ca cỏc cht iu tit sinh trng n quỏ trỡnh nuụi cy mụ t bo thc vt 7 3.1.2 nh hng ca cỏc cht 2.4D, BAP,GA3, NAA n kh nng to mụ so v tỏi sinh cõy t mụ so 3.1.2.1 nh hng ca nng 2,4 D n kh nng to mụ so t phụi u xanh 3.1.2.2 nh hng ca BAP n kh nng tỏi sinh cõy t mụ so phụi u xanh 3.1.2.3 nh hng ca GA3 n kh nng kộo di chi ca u xanh 3.1.2.4 nh hng ca -NAA n kh nng r v to cõy hon chnh 26 26 31 34 35 3.1.3 Nhn xột v mụi trng nuụi cy mụ cõy u xanh 37 1.2.2 H thng nuụi cy chn dũng 10 1.2.3 Phng thc chn dũng 12 3.2 mt nc v kh nng chu mt nc ca mụ so phụi u xanh cỏc ging nghiờn cu 37 1.2.4 Tỏi sinh cõy 13 3.2.1.Mc mt nc ca mụ so phụi u xanh ca cỏc ging nghiờn cu 37 3.2.2 Kh nng chu mt nc ca mụ so phụi u xanh sau x lý bng thi khụ 39 3.2.3 Nhn xột v kh nng chu mt nc ca mụ so sau x lý bng thi khụ ca cỏc ging u xanh nghiờn cu 42 43 1.3 Nghiờn cu chn ging cõy trng bng k thut chn dũng soma v h thng tỏi sinh thc vt v cõy u xanh 1.3.1 Nghiờn cu chn ging cõy trng bng k thut chn dũng t bo soma 1.3.2 Nghiờn cu h thng tỏi sinh thc vt v cõy u xanh 15 15 16 Chng Vt liu v phng phỏp nghiờn cu 18 3.3 Kt qu tỏi sinh cõy u xanh t mt lỏ mm 2.1 Vt liu nghiờn cu 18 3.3.1.Mụi trng ny mm ca ht 43 2.1.1.Vt liu thc vt 18 3.3.2 Mụi trng to a chi 43 2.1.2 Hoỏ cht v thit b 19 3.3.3 Mụi trng kộo di chi 45 iii S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn iv http://www.lrc-tnu.edu.vn S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn NHNG CH VIT TT 3.3.4 Mụi trng r 46 3.3.5 Ra cõy v ch chm súc 46 3.3.6 Nhn xột v mụi trng tỏi sinh t mt lỏ mm 47 Kt lun v ngh 48 Cụng trỡnh cụng b liờn quan n lun 49 Ti liu tham kho 50 v S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn 2,4D 2,4-Dichlorphenoxyacetic acid (Axit 2,4-Dichlorphenoxyacetic) ADN Axit deoxyribonucleic (Deoxiribonucleic acid) ASTT ỏp sut thm thu BAP - Benzyl Amino Purin cs Cng s vms n v mụ so MS Murashige Skoog -NAA Naphthyl acetic acid (Axit naphthyl acetic) IAA Axit ò indol axetic vi http://www.lrc-tnu.edu.vn S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn DANH MC CC BNG DANH MC CC HèNH Bng 2.1 Tờn bng Trang c im cỏc ging u xanh nghiờn cu 18 Hỡnh 2.1 S thớ nghim tng quỏt 3.1 nh mụ so phụi u xanh nuụi cy trờn mụi trng cú b sung 2,4D 31 3.2 Hỡnh nh tỏi sinh u xanh trờn mụi trng b sung 3mg/l BAP 34 3.3 Hỡnh nh kộo di chi u xanh trờn mụi trng b sung GA3 35 3.4 Hỡnh nh cõy u xanh r trờn mụi trng b sung 0,3mg/l -NAA 36 3.5 mt nc ca mụ so phụi u xanh sau x lý bng thi khụ 38 33 3.6 T l sng sút (%) ca mụ so phụi u xanh sau thi khụ v nuụi phc hi trờn mụi trng tỏi sinh 40 36 3.7 Kh nng tỏi sinh cõy ca cỏc mụ so phụi u xanh sng sút sau x lý bng thi khụ 41 3.8 Tỏi sinh mụ so sau x lý bng thi khụ 42 3.9 Ht u xanh ny mm sau ngy (A, B), ht u xanh c tỏch to a chi (C, D) 43 Hỡnh nh to a chi t mt lỏ mm 45 3.1 Kh nng to mụ so ca cỏc ging u xanh (%) 27 3.2 Hỡnh dng mụ so ca cỏc ging u xanh 28 3.3 Tc sinh trng mụ so ca cỏc ging u xanh 3.4 nh hng ca nng BAP n kh nng tỏi sinh cõy t mụ so phụi u xanh (%) 3.5 nh hng ca BAP n kh nng to chi u xanh 3.6 nh hng c -NAA ti kh nng r ca cõy tỏi sinh t mụ so phụi u xanh 3.7 mt nc ca mụ so phụi u xanh sau x lý bng thi khụ (%) 3.8 T l sng sút (%) ca mụ so phụi u xanh sau thi khụ tun nuụi phc hi 3.9 Kh nng tỏi sinh cõy t mụ so phụi u xanh sng sút sau x lý bng thi khụ 3.10 nh hng ca BAP n kh nng to a chi u xanh 29 32 38 39 41 44 vii S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn 3.10 Tờn hỡnh Trang 19 3.11 Hỡnh nh kộo di chi u xanh trờn mụi trng b sung GA3 46 3.12 Hỡnh nh cõy u xanh r trờn mụi trng b sung 0,3mg/l - NAA 46 3.13 Cõy u xanh tỏi sinh c trng chu 47 viii http://www.lrc-tnu.edu.vn S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn cụng ngh t bo thc vt v xõy dng h thng tỏi sinh phc v chuyn gen M U nhm ci tin, nõng cao kh nng chng chu ca cõy u xanh (Jayanti Sen v T VN Cõy u xanh Vigna radiata (L.) Wilczek l mt loi cõy u quan trng ca nn nụng nghip chõu Cõy u xanh ch yu c trng ly ht ch bin thc n nh giỏ , chố u xanh, dch ct u xanh, bỏnh u xanhKhụng ch c coi nh ngun thc n m ht u xanh cũn c coi Spra Guha Mukherjee (1998) [31], Ignacimuthu v Franklin (1999) [30], Renato v cs (1999, 2001) [41], [42], Mai Trng v cs (2001) [15], Sita v cs (2006) [43], Kaviraj v cs (2006) [33], Sonia v cs (2007) [44] Nhng lý trờn õy l c s chỳng tụi xõy dng ti cho lun nh mt th dc liu cú tỏc dng gii c nhit, bt sng phự, iu ho thc s l: Phỏt trin h thng tỏi sinh cõy u xanh (Vigna radiata (L.) ng tng cha bnh cho ngi Ht u xanh l mt mt hng nụng sn Wilczek) phc v chn dũng chu hn v chuyn gen xut khu cú giỏ tr Ngoi ra, sn phm ph ca cõy u xanh cũn c dựng MC CH NGHIấN CU lm thc n cho gia sỳc Trng cõy u xanh cũn cú tỏc dng chng xúi mũn v - ng dng k thut nuụi cy mụ t bo thc vt vo vic chn dũng t bo chu ci to t Ht u xanh cha khong 25,98% protein, 1,3% lipit, 4,79% cht x, mt nc u xanh 62,12% hydratcacbon (trong ú cú 51,8% tinh bt), cỏc loi vitamin A, B1, B2, C - Xỏc nh h thng tỏi sinh u xanh phc v chuyn gen v mt s nguyờn t khoỏng nh: K, Na, Mg, P, Fe, Ca NI DUNG NGHIấN CU Trờn th gii u xanh c trng nhiu n , Thỏi Lan, Philippin, - Nghiờn cu iu kin kh trựng ht s dng tỏi sinh cõy t mụ so v to Myanma, Bangladesh, Srilanca vi nng sut t 18 20 t/ha a chi t mt lỏ mm Vit Nam nhiu nguyờn nhõn khỏc nờn t trc ti u xanh - Phõn tớch nh hng ca cỏc cht kớch thớch sinh trng n kh nng to mụ c trng cha nhiu, ch yu l xen canh, luõn canh tng v Ch thi so, tỏi sinh cõy t mụ so, kộo di chi, r v to cõy u xanh gian gn õy u xanh mi c quan tõm phỏt trin Chng trỡnh chn to ging u xanh nc ta hin l hng ti mc tiờu to ging u xanh cú tim nng nng sut cao v n nh, sinh trng mnh, thi gian sinh trng ngn, chớn trung, cht lng ht cao, cú kh nng chng chu hn, ỳng, sõu bnh tt v chu thõm canh - ỏnh giỏ kh nng chu mt nc ca mụ so phụi u xanh di tỏc dng ca thi khụ - Kho sỏt mụi trng to a chi t mt lỏ mm, mụi trng kộo di chi, r v to cõy hon chnh Trong cụng tỏc chn ging cõy trng núi chung v chn ging u xanh núi riờng cỏc nh khoa hc ó s dng phng phỏp t bin thc nghim (Chu Hong Mu, 2001) [10] hoc lai ging (Trn ỡnh Long v Lờ Kh Tng, 1998) [8] to ngun bin d lm nguyờn liu cho quỏ trỡnh chn lc Mt cỏc k thut c quan tõm ng dng vo chn ging u xanh l s dng S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn Chng hng xp liờn tc vi to cho hoa cú hỡnh dng co rỳt Hoa u xanh cú TNG QUAN TI LIU mu tớm hoc mu vng nht vi cụng thc hoa l K5C5A10G1 u xanh l loi thc vt t th phn, t l hoa hỡnh thnh qu t 10 25%.Th phn xong 1.1 S LC V CY U XANH trng hoa rng, qu hỡnh thnh v phỏt trin 1.1.1 Ngun gc v phõn loi Cõy u xanh l loi cõy trng cú giỏ tr kinh t cao, cú ngun gc t n v c phõn b rng rói cỏc nc chõu lp Magnoliopsida b Fabales, h u (Fabaceae), chi Vigna Chi Vigna l mt nhng chi ln ca h u, bao gm chi ph l: Vigna, Haydonia, Plectropic, Macrohynchus, Ceratotropic, Lasionspron, Sigmoidotrotopis u xanh theo quan im ly ht bao gm cỏc loi thuc hai chi ph l Vigna v Ceratotropic Chi ph Ceratotropic cũn c gi l nhúm u chõu mang nhng c im in hỡnh th hin mc cao nht cho Vigna Nm 1970, Vercourt ó cụng b s 16 loi ca Ceratotropic ó c thun hoỏ l: u xanh (Vigna radiata (L.) Wilczek), u go (Vigna Umbellata(thumb), u adzukia (Vigna anguilaris (Willd), u vỏn (Vigna aconiti folia (Jacq)), Vigna trilobata (L) Wildzek Thõn u xanh thuc loi thõn tho, mc thng ng hoc hi nghiờng, thõn yu cú lp lụng mn mu nõu sỏng, chiu cao trung bỡnh khong 40 70 cm, ng kớnh trung bỡnh t 12 mm Thõn cõy gm t Thõn phõn cnh mun v cú trung bỡnh t 10 -12 cnh, mt s ging cú t 10 cnh Lỏ thuc loi lỏ kộp mc cỏch, lỏ chột cú ba thu vi cỏc hỡnh dng nh ovan, thuụn di, li mỏc, ch thu Trờn thõn chớnh ca cõy cú t lỏ S lỏ, hỡnh dng lỏ cú th thay i tu theo ging, t trng v thi v Din tớch ca cỏc lỏ tng t cỏc lỏ phớa di lờn cỏc lỏ gia thõn ri gim dn lờn cỏc lỏ phớa ngn Hoa u xanh l hoa lng tớnh mc thnh chựm trờn cỏc trc hoa Mi trc hoa cú th phỏt trin thnh hai hng hoa mc i nhau, cỏc hoa trờn 10 cm, ng kớnh t mm, cú hai gõn ni rừ dc theo hai bờn cnh qu Qu chớn cú mu vng, nõu hoc en Cng nh cỏc b phn khỏc trờn cõy u Cõy u xanh (Vigna radiata (L.) Wilczek) thuc ngnh Magnoliopyta, S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn Qu u xanh thuc loi qu giỏp, hỡnh tr, dng trũn, hi dp, di t http://www.lrc-tnu.edu.vn xanh (thõn, cnh, cung, lỏ) trờn v qu u xanh thng bao ph mt lp lụng di khong 0,3 0,4 mm Nhng ging thuc nhúm khỏng virus gõy bnh khm vng v bnh sõu c qu thỡ mt lụng khỏ dy, mu trng Mi cõy cú t 35 qu, mi qu cú t 15 ht Ht u xanh cú hỡnh dng khỏ phong phỳ nh hỡnh tr, hỡnh tr hi cnh, ovan, trũn, thoi, tam giỏc Mu v ht cú th l xanh lc, xanh m (xanh sỏng), xanh ti (nõu), vng rm Rut ht cú mu trng, vng hay xanh nht lng 1000 ht cú th dao ng t 25 70g R u xanh thuc loi r cc bao gm r cỏi v r con, r cỏi sõu khong 20 30 cm, cú sõu ti 70 100 cm c bit r u xanh cú kh nng sng cng sinh vi vi khun c nh m Rhizobium nờn t cỏc k nhỏnh r, nht l sỏt r cỏi hỡnh thnh cỏc nt sn Cỏc nt sn cú kh nng c nh Nit thng cú kớch thc mm, cú mu , hng hay nõu Nt sn hn, dng que, rut mu xanh hay en u khụng cú hot tớnh Hn ch ca b r cõy u xanh l d b thi gp ỳng 1.1.2 Tỡnh hỡnh sn xut u xanh trờn th gii v Vit Nam Theo kt qu iu tra catrung tõm nghiờn cu v phỏt trin rau qu chõu (AVRCD), hng nm trờn th gii cú khong 20 nc sn xut u xanh, ú Thỏi Lan, n , Trung Quc, Pakistan, Philippin, Srilanca c coi l nhng trng im v din tớch, nng sut v sn lng u xanh Trong nhng S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn nm 1950 Trung Quc l nc sn xut u xanh, vi din tớch gieo trng l sinh trng ca cõy Tp quỏn canh tỏc õy n gin, ớt thõm canh, nng sut 1,64 triu v sn lng l 800.000 tn, nhiờn nng sut cũn thp v ch thp t khong 488 kg/ S sn xut u xanh ca Trung Quc suy gim qua - Vựng ng bng, Trung du Bc b bao gm cỏc tnh H Tõy, Vnh Phỳc, Phỳ nhng nm 1960 v nhng nm 1970 Sau ú chớnh ph Trung Quc ó cú Th, Bc Ninh, Bc Giang, H Ni, Hi Dng, Hng Yờn, Hi Phũng, H nhng thay i v chớnh sỏch nụng nghip liờn quan n sn xut u xanh, ỏp Nam, Ninh Bỡnh, Thỏi Bỡnh v Thanh Hoỏ u xanh vựng ny c gieo dng khoa hc k thut tiờn tin vo sn xut nờn sn xut u xanh li trng t thỏng n thỏng hng nm, trung thi v: v xuõn, v hố, v c phc hi vo nhng nm 1980 v n nm 2000, din tớch trng l 772000 thu ụng Hng nm xu hng thõm canh tng v, tng nng sut vỡ cú h triu ha, sn lng t 891000 triu tn v nng sut bỡnh quõn t 1154 kg / thng ti tiờu khỏ hon chnh v u t khỏ nờn nng sut u xanh vựng ny Trong ú nm 1995 giỏ tr xut khu u xanh t mc 104 triu USD (72% cao, vic tip nhn mụ hỡnh u xanh cao sn kh thi hn õy l nhng iu tng giỏ tr xut khu nụng nghip) v nm 1999 t mc rt cao ti 109 triu kin c bn phỏt trin sn xut USD (93%) - Vựng Duyờn hi Trung B v Tõy Nguyờn õy l vựng cú din tớch v sn Srilanca, tỡnh hỡnh sn xut u xanh t nm 1997 n nm 2001 cú xu lng gieo trng u xanh ln Do khụng chu nh hng ca khớ hu ụng hng gim: v din tớch trng t 16.636 (1997) xung 10.976 (2001), sn lnh, ma, khụ phõn b rừ rt nờn thun li trng quanh nm Hng lng t 15.000 triu tn (1997) xung 10.072 triu tn (2001), v tng nhp nm u xanh c gieo trng t v, vi phng thc trng thun l ch khu t 2091 triu tn (1997) lờn 8916 triu tn (2001) yu Hn ch ln nht õy l thi im thu hoch v hố thu thng gp ma Mc dự din tớch gieo trng v sn lng u xanh hng nm Srilanca bóo nờn tht thoỏt nhiu v nng sut v sn lng khỏ ln song cha ỏp ng c nhu cu tiờu th ln nc Do ú - Vựng ụng Nam b õy l vựng sn xut u cú quy mụ ln chim 26% lng u xanh nhp khu cú xu th tng nhanh t nm 2000, 2001 Cỏc ging din tớch gieo trng c nc Tuy nhiờn, khụng cú thõm canh v vic s dng u xanh c gieo trng ph bin nh Harsha nng sut trung bỡnh 1200 kg/ha, cỏc ging u xanh nng sut thp nờn nng sut trung bỡnh ca vựng ny cũn MI-5 nng sut trung bỡnh 1500 kg/ha, Ari nng sut trung bỡnh 1700 kg/ha thp Vit Nam, cõy u xanhc gieo trng nhiu a phng trờn c Mt s ging u xanh c trng ph bin hin nh: X044, nc Cn c vo c im a hỡnh, iu kin khớ hu cú th phõn chia cỏc VC2768A nng sut v hố thu khong 2000 kg/ha, cú th trng v/ nm, cõy vựng trng cõy u xanh nh sau: thp,cng, chu ma v chng tt X044 ang c trng nhiu vựng - Vựng nỳi phớa Bc bao gm cỏc tnh Sn La, Lai Chõu, Ho Bỡnh, Cao Bng, ng bng v trung du Bc b; V123 nng sut t 1800 2000 kg/ha, thõm Bc Kn, Thỏi Nguyờn, Tuyờn Quang v Qung Ninh Thi v gieo trng t canh cú th t 2000 - 7000 kg/ha, cú th trng v /nm; T135 nng sut t thỏng 4,5 thu hoch thỏng 7,8 l thi im cú khớ hu númg m thun li cho 2900 kg/ha trng cỏc tnh phớa Bc; V91-15 nng sut t 1200 1400 kg/ha cõy cng, ớt , ớt nhim bnh vng lỏ, trng c trờn nhiu loi t cỏc tnh S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn VC6372; VC2768A, t l mụ so t cao nht l 99% s dng 2,4D vi 10mg/l i vi ging u xanh VN93-1; VN99-3; VC1973A; VC3902A; nng 10mg/l VC6148;VC6372; VC2768A, cỏc mụ so ú bú cht cũn nng 2,4D cao hn 10mg/l mụ so sn sựi nhng khụng bú cht i vi ging u xanh X06 nng 2,4D t mg/l 11mg/l cỏc mụ so cú hỡnh dng sn sựi v Bng 3.1 Kh nng to mụ so ca cỏc ging u xanh (%) Cụng thc bú cht, cũn nng 2,4D cao hn 11mg/l thỡ cỏc mụ so ú khụng bú cht Nng 2.4D VN 93-1 VN 99-3 VC 1973A X 06 VC 3902A VC 6148 VC 6372 VC 2768A li Nng 2,4D t mg/l 7mg/l tt c cỏc ging u xanh u cú hỡnh dng nhn (mg/l) 85,17 86,50 80,15 81,05 87,15 82,05 87,05 81,15 86,09 86,29 83,25 81,15 86,90 83,50 86,90 81,25 Bng 3.2 Hỡnh dng mụ so ca cỏc ging u xanh Nng Cụng thc 2,4D 86,34 87,30 86,32 86,35 87,30 87,10 87,10 85,35 89,21 87,20 86,30 87,50 87,90 87,50 87,60 84,50 92,72 91,02 87,15 89,55 90,20 88,55 90,25 89,55 95,23 91,20 93,10 94,10 91,90 94,20 91,05 90,10 96,37 93,07 97,05 95,05 94,07 94,50 92,10 92,05 10 99,14 98,10 99,20 97,50 98,50 97,10 99,50 11 94,14 97,23 96,23 100,00 96,03 96,00 10 12 94,04 92,05 84,10 84,10 92,15 84,10 11 13 82,03 80,80 79,50 79,50 82,50 79,30 VN 93-1 VN 99-3 VC 1973A X 06 VC3902A VC 6148 Nhn Nhn Nhn Nhn Nhn Nhn Nhn Nhn Nhn Nhn Nhn Nhn Nhn Nhn Nhn Nhn Nhn Nhn Nhn Nhn Nhn Nhn Nhn Nhn 95,50 Nhn Nhn Nhn Nhn Nhn Nhn Nhn Nhn 96,03 92,00 Nhn Nhn Nhn Nhn Nhn Nhn Nhn Nhn 90,15 85,10 Sn sựi Sn sựi Sn sựi Sn sựi Sn sựi Sn sựi Sn sựi Sn sựi 83,50 83,50 Sn sựi Sn sựi Sn sựi Sn sựi Sn sựi Sn sựi Sn sựi Sn sựi mụi trng cú nng mg/l mg/l 2,4D t l to mụ so thp 10 Sn sựi Sn sựi Sn sựi Sn sựi Sn sựi Sn sựi Sn sựi Sn sựi S dng 2,4D cao hn 10mg/l v kh nng to mụ so phụi u xanh ca 11 Sn sựi Sn sựi Sn sựi Sn sựi Sn sựi Sn sựi Sn sựi Sn sựi ging trờn u gim 10 12 Sn sựi Sn sựi Sn sựi Sn sựi Sn sựi Sn sựi Sn sựi Sn sựi 11 13 Sn sựi Sn sựi Sn sựi Sn sựi Sn sựi Sn sựi Sn sựi Sn sựi c im hỡnh thỏi ca mụ so cỏc ging u xanh c trỡnh by bng VC 6372 VC 2768A mg/l 3.2 Kt qu bng 3.2 cho thy, trờn cỏc loi mụi trng cú b sung 2,4D vi nng khỏc v ging u xanh khỏc nhau, hỡnh dng mụ so cng khỏc sau 10 ngy nuụi cy mụi trng cú nng 8mg/l 13mg/l 2,4D cỏc mụ so u cú hỡnh dng sn sựi, nhng nng 2,4D t 8mg/l - 27 S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn 28 S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn Kt qu theo dừi tc sinh trng ca mụ so c trỡnh by bng 3.3 Bng 3.3 Tc sinh trng mụ so ca cỏc ging u xanh (vms) thc 2.4-D (mg/) 2,4D cao hn 10mg/l v kớch thc mụ so phụi u xanh ca ging ú bt u gim dn (1 n v mụ so (vms) cú kớch thc khong mm2) Cụng ln nht s dng 2,4D vi nng 10mg/l mụi trng cú nng Nh vy mụi trng b sung nng 2,4D 11mg/l thớch hp nht vi VN 93-1 VN 99-3 VC 1973A X 06 VC 3902A VC 6148 VC 6372 VC 2768A 2,700,10 2,630,15 2,53 0,15 2,500,26 2,60 0,25 2,650,50 2,580,15 2,600,50 2,600,36 2,670,35 2,66 0,25 2,630,40 2,60 0,10 2,70 0,15 2,750,10 2,60 0,15 ging u xanh X06 v nng 2,4D cao hn 10 mg/l i vi ging u xanh cũn li, vỡ nng ú t l to mụ so, hỡnh dng cng nh kớch thc mụ so l tt nht Nng 2,4D cao hn t l to mụ so v kớch thc mụ u gim Sau mt thi gian nuụi cy ngn, cỏc mụ so ny u vng v 2,730,21 2,630,51 2,83 0,21 2,700,21 2,75 0,25 2,78 0,25 2,700,25 2,80 0,35 3,030,72 3,200,53 3,00 0,35 3,100,35 3,15 0,15 3,05 0,45 3,150,40 3,10 0,52 3,200,20 3,270,25 3,37 0,15 3,270,25 3,37 0,35 3,38 0,25 3,480,15 3,27 0,25 bo xy nhanh, s nh hng cho s bit hoỏ c quan khú khn nờn cỏc 3,300,10 3,300,10 3,40 0,15 3,450,15 3,40 0,15 3,45 0,35 3,550,25 3,44 0,32 mụ so to d b bin dng Hn na nng cỏc cht sinh trng quỏ 3,370,15 3,600,50 3,50 0,10 3,530,40 3,55 0,42 3,50 0,20 3,600,20 3,52 0,21 cao c bit cỏc loi mụ so hoc chi c cy chuyn nhiu ln trờn mụi 10 3,490,25 3,700,15 3,60 0,15 3,800,15 3,75 0,15 3,650,45 3,650,45 3,75 0,35 trng luụn trỡ cỏc cht kớch thớch, cỏc mu nuụi cy ny luụn tớch t hm 11 2,900,20 3,100,25 3,00 0,35 3,850,35 2,75 0,25 2,6 0,25 2,850,50 2,95 0,25 10 12 2,700,15 2,800,50 2,65 0,42 3,3 0,20 2,78 0,27 2,58 0,26 2,750,20 2,75 0,26 11 13 2,300,20 2,450,20 2,43 0,25 2,500,27 2,33 0,10 2,50 0,30 2,600,18 2,50 0,25 nhanh b cht Hin tng ny cng thng xuyờn gp nuụi cy mụ thc vt, cú th nng cỏc cht sinh trng quỏ cao, thỡ s phõn chia t lng hoocmon ngoi sinh cao, dn n cỏc t bo v mụ d b c v nhanh cht Cũn nu s dng nng 2,4D thp quỏ trỡnh to mụ so v phỏt trin ca mụ so rt chm Mai trng v cs (2001) ch s dng BAP vi nng 4mg/l sau tun bt u thy s hỡnh thnh cỏc ỏm mụ so [16] Kaviraj v cs (2006) tỏi sinh cõy Bng 3.3 cho thy, sau 10 ngy nuụi cy mụi trng cú nng u xanh hon chnh t mụ so ó s dng 2,4D giai on to mụ so 3mg/l - 10 mg/l 2,4D mụ so ca phụi ging u xanh X06 cú kớch thc vi nng 9mg/l 15mg/l v kt qu thu c vi mụi trng b sung mụ tng dn v t kớch thc ln nht mụi trng cú nng 11mg/l 10mg/l 2,4D to 100% mụ so [34] Kt qu nghiờn cu ca chỳng tụi phự 2,4D S dng 2,4D cao hn 11mg/l kớch thc mụ so ca phụi u xanh hp vi kt qu nhn c ca nhúm Kaviraj v cs (2006) Nh vy mụi X06 bt u gim c bit vi nng 2,4D 13 mg/l, kớch thc mụ so trng b sung 11mg/l 2,4D l mụi trng thớch hp nht cho kh nng to gim mnh (2,5 vms) Cỏc ging VN93-1; VN99-3; VC1973A; VC3902A; mụ so phụi ca ging u xanh X06 v mụi trng b sung 10mg/l 2,4D l VC6148; VC6372; VC2768A, cỏc phụi nuụi cy mụi trng b sung t mụi trng thớch hp nht cho kh nng to mụ so phụi u xanh ca mg/l mg/l kớch thc mụ so tng dn v t cao nht kớch thc 29 S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn 30 S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn ging cũn li, vỡ mụi trng ny t l to mụ so v kớch thc mụ u Bng 3.4 nh hng ca nng BAP n kh nng tỏi sinh cõy t mụ so cao nht phụi u xanh (%) Cụng thc Nng BAP VN 93-1 VN 99-3 VC 1973A X 06 VC 3902A VC 6148 VC 6372 VC 2768A (mg/) Sau 10 ngy B A Hỡnh 3.1 Hỡnh nh mụ so phụi u xanh nuụi cy trờn mụi trng cú b sung 2,4D 60,2 2,5 61,03,5 66,0 2,5 63 4,0 60,01,5 63,0 5,0 65,0 1,5 60,0 4,1 98,6 1,2 88,02,1 77,3 1,1 87,0 2,4 77,52,5 75,8 1,5 82,7 2,5 86,8 2,5 63,31,5 64,02,0 62,0 3,5 63,0 1,5 61,5 1,5 60,5 4,5 61,5 4,0 63,1 2,5 62,0 1,0 66,0 1,0 67 1,8 66,0 3,8 A:Mụ so phụi u xanh trờn mụi trng cú b sung 10mg/l ca ging u xanh VN93-1 Sau 15 ngy B: Mụ so phụi u xanh trờn mụi trng cú b sung 11mg/l ca ging u xanh X06 67 2,1 65,2 1,5 BAP (6 - Benzyl amino purine) l cht kớch thớch sinh trng thuc 99,0 1,0 90,01,9 78,0 1,2 88,0 1,8 78,5 1,5 77,0 1,5 84,7 2,5 87,0 2,5 nhúm cytokinin BAP nh hng rừ rt v rt c trng lờn s phõn hoỏ c 65,52,5 66,02,8 63,0 2,5 64,0 1,5 65,0 1,5 63,0 2,5 63,5 3,0 64,1 1,5 3.1.2.2 nh hng ca BAP n kh nng tỏi sinh cõy t mụ so phụi u xanh 66,03,0 63,53,5 quan ca thc vt, c bit l s phõn hoỏ chi BAP l cht cú hiu qu v s dng rng rói cho cm ng chi cõy h u bao gm c u xanh Bng 3.4 cho thy, di nh hng ca BAP thỡ t l tỏi sinh cõy ca c (Gulati, Jaiwal, 1994) [20] Mụ so thu c ca cỏc ging u xanh c chia thnh nhng mụ nh cú kớch thc khong 3x3 mm, cy lờn mụi trng MS c bn cú cha BAP vi nng khỏc (2mg/l; 3mg/l; 4mg/l) Mi cụng thc c tin hnh trờn 30 mụ so, lp li ln Sau ú theo dừi kh nng tỏi sinh cõy ca mụ so sau 10 v 15 ngy cy chuyn Kt qu nghiờn cu v nh hng ca nng BAP ti kh nng tỏi sinh cõy t mụ so phụi u xanh c th hin bng 3.4 31 S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn ging u xanh khỏ cao sau 10 ngy, ú t l tỏi sinh cõy thp nht trờn mụi trng cú nng BAP mg/l (60% - 66%) v cao nht nng BAP l mg/l (77,3% - 98,6%) B sung nng BAP cao hn (4mg/l) khụng lm tng t l tỏi sinh cõy u xanh m cũn gim t l tỏi sinh (60,5% - 64,0%) Sau 15 ngy t l tỏi sinh cõy tng lờn khụng ỏng k Cỏc ging u xanh khỏc t l tỏi sinh cng khỏc T l tỏi sinh cao nht l ging VN93-1 (98,6% sau 10 ngy, 100% sau 15 ngy), ging VC6148 t l tỏi sinh thp nht (75,8% sau 10 ngy, 77% sau 15 ngy) S 32 S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn khỏc ny cho thy cựng iu kin mụi trng nuụi cy cỏc ging khỏc (kiu di truyn khỏc nhau) kh nng tỏi sinh cng khỏc Kh nng tỏi sinh v s chi/mụ so c dựng ỏnh giỏ nh hng ca BAP n hiu qu tỏi sinh ca cỏc ging u xanh nghiờn cu Kt qu thớ nghim to chi c th hin bng 3.5 Bng 3.5 nh hng ca BAP n kh nng to chi u xanh Nng Cụng thc BAP Hỡnh 3.2 Hỡnh nh tỏi sinh u xanh trờn mụi trng b sung3mg/l BAP S chi / mt mụ so 3.1.2.3 nh hng ca GA3 n kh nng kộo di chi ca u xanh VN 93-1 VN99-3 VC 1973A X 06 VC 3902A VC 6148 VC 6372 VC 2768A (mg/l) 1,230,31 1,660,63 1,660,32 1,66 0,63 1,660,63 1,66 0,32 1,66 0,32 1,660,63 2,330,39 2,560,39 2,700,27 2,660,329 2,660,63 2,75 0,25 2,55 0,25 2.700,32 1,670,29 2,200,35 2,660,32 2,400,32 2,350,15 2,66 0,44 2,50 0,14 2,430,20 GA3 (axit Gibberelic) l cht kớch thớch thuc nhúm Gibberelin, nú tỏc ng lm cho t bo dón v phõn chia, lm tng chiu cao ca cõy Khi chi t chiu cao 2,5 cm c cy chuyn sang mụi trng kộo di chi cú b sung GA3 vi nng : 0,5mg/l; 1mg/l;1,5mg/l; 2mg/l Kt qu cho thy, sau 10 ngy cy chuyn sang mụi trng kộo di chi cú b sung GA3 vi nng khỏc u lm cho chi ca u xanh Sau 10 ngy tỏi sinh, s chi/mụ cao nht t 2,75 chi trờn mụi trng cú b sung 3mg/l BAP Mụi trng b sung nng BAP 2mg/l v mg/l u cho t l to chi thp hn Kt qu cho thy thớ nghim ca chỳng tụi t l tỏi sinh v s lng chi nhiu hn so vi bỏo cỏo ca Mai Trng v cs (2001) [15] T kt qu nghiờn cu trờn chỳng tụi cho rng nng BAP 3mg/l l tt nht cho s tỏi sinh ca ging u xanh nghiờn cu 33 S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn di Nhng cụng thc nng trờn thỡ cụng thc mụi trng b sung GA3 vi nng 1,5mg/l lm cho chi u xanh c kộo di v mp nht, cũn nng GA3 0,5 mg/l v 1mg/l thỡ chi kộo di chm hn Nng GA3 2mg/l chi kộo di nhanh nht nhng cõy yu v sau mt thi gian thỡ b hộo ngn Hin cha thy nghiờn cu no núi v mụi trng kộo di chi u xanh cú s dng GA3, vy, t kt qu thu c trờn chỳng tụi cho rng nng GA3 1,5 mg/l l tt nht cho kộo di chi u xanh http://www.lrc-tnu.edu.vn 34 S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn Bng 3.6 nh hng c -NAA ti kh nng r ca cõy tỏi sinh t mụ so phụi u xanh (t l r ca u xanh = s chi r/ tng sụ chi cy chuyn (%)) Nng Cụng thc VN 93-1 VC 99-3 VC 1973A X 06 Hỡnh 3.3 Hỡnh nh kộo di chi u xanh trờn mụi trng b sung GA3 3.1.2.4 nh hng ca -NAA n kh nng r v to cõy hon chnh VC 3902A VC 6148 VC 6372 VC2768A -NAA Sau tun 0,2 75,674,5 71,03,0 68,74,3 68,74,3 60,54,5 63,04,0 66,53,5 65,0 2,5 - NAA l cht kớch thớch sinh trng thc vt thuc nhúm auxin, cú 0,3 98,61,4 97,0 1,1 97,0 1,4 97,0 1,4 97,52,5 97,51,5 94,72,5 96,8 2,0 tỏc dng mnh n quỏ trỡnh hỡnh thnh v phỏt trin r thc vt to r 0,4 72,3 2,7 64,0 4,0 64,0 2,5 64,0 2,5 61,01,5 60,52,5 61,54,5 63,1 5,0 cõy tỏi sinh chun b cho khõu tip theo l a ngoi ng rung, chỳng tụi Sau tun ó nghiờn cu mụi trng r cõy u xanh nuụi cy trờn mụi trng MS c 0,2 85,5 1,5 76,03,0 68,74,3 73,53,5 68,01,0 69,01,0 70,01,5 76,0 3,8 bn b sung -NAA vi cỏc nng khỏc Theo dừi kh nng to r ca 0,3 99,0 1,0 98,0 1,9 97,0 1,4 98,0 1,8 98,51,5 98,01,5 94,72,5 97,0 2,5 0,4 65,5 2,5 66,0 2,0 64,0 2,5 64,0 1,5 65,01,5 63,02,5 63,53,0 64,5 1,5 cỏc cõy tỏi sinh sau tun v tun cy chuyn, chỳng tụi thu c kt qu bng 3.6 Bng 3.6 cho thy, b sung -NAA vi cỏc nng t 0,2 mg/l n 0,4 mg/l u giỳp cho cỏc chi to r vi t l cao Song nng -NAA cao thỡ t l to r v chiu di r phỏt trin cng kộm i Mụi trng cú nng - NAA l 0,3 mg/l l mụi trng thớch hp nht cho s r ca u xanh, mụi trng ny t l to r cao nht (t 100%) v chiu di r l cao nht T kt qu thu c cho thy ngoi vic s dng BAP to r u xanh (Mai Trng v cs, 2001) [16] v s dng IAA kt hp vi -NAA (Ignacimuthu v cs,1999) [31], chỳng tụi ch s dng -NAA b sung vo mụi trng kh nng to r vi t l cng cao (100%) Hỡnh 3.4 Hỡnh nh cõy u xanh r trờn mụi trng b sung 0,3mg/l -NAA 35 S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn 36 S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn Bng 3.7. mt nc ca mụ so phụi u xanh sau s lý bng thi 3.1.3 Nhn xột v mụi trng tỏi sinh cy cõy u xanh t mụ so khụ (% lng ti) (1) Mụi trng thớch hp nht cho to mụ so ca phụi u xanh l mụi trng cú b sung 10 mg/l 2,4D i vi cỏc ging VN93-1; VN99-3; Thi gian VC1973A; VC3902A; VC6148; VC6372; VC2768A Cũn ging u xanh thi khụ VN 93- X06 thớch hp vi mụi trng cú nng l 11mg/l 2,4D VN 99-3 VC 1973A X 06 VC 3902A VC 6148 VC 6372 VC 2768A (gi) 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 48,84 50,00 70,60 62,15 50,28 64,18 60,22 57,29 kớch thc chi cao nht trờn mụi trng cú b sung BAP vi nng 3mg/l 65,22 65,86 79,05 73,92 69,86 73,92 72,28 69,26 (3) Mụi trng thớch hp cho to cõy hon chnh l mụi trng cú b sung 0,3 mg/l 85,75 82,38 81,44 82,53 85,38 82,53 76,29 84,26 -NAA, ti mụi trng ny t l to r, s r/cõy v kớch thc r l cao nht 87,79 89,67 83,19 85,99 86,67 85,99 81,68 85,65 3.2 MT NC V KH NNG CHU MT NC CA Mễ SO 11 100,00 100,00 100,00 100,00 100,00 100,00 100,00 100,00 (2) Cỏc mụ so cú ngun gc t phụi u xanh u cú kh nng tỏi sinh cõy cao, kh nng sinh trng ca chi mnh T l tỏi sinh, s chi trung bỡnh v 3.2.1 Mc mt nc ca mụ so phụi u xanh di tỏc ng ca thi khụ chn cỏc dũng t bo cú kh nng chu mt nc, mt s tỏc gi ó tin hnh cho cỏc t bo mụ so b mt nc lý hc bng lung khớ vụ trựng ca bn cy i vi mụ so u xanh, thớ nghim ny chỳng tụi Tỷ lệ n-ớc (%) PHễI CC GING U XANH 120 100 VN 93- 80 VN 99-3 VC 1973A DX 06 VC 3902A VC 6148 60 40 ó x lý mt nc lý hc bng lung khớ vụ trựng cỏc ngng thi gian l 0, 20 3, 5, 7, 9, 11 gi liờn tc, lng nc mụ gim dn ti mc khụng cú VC 6372 VC 2768A th bay hi c na 11 Thời gian thổi khô (giờ) Kt qu xỏc nh kh nng chu mt nc ca mụ so di tỏc ng ca thi khụ i vi cỏc ging VN93-1; VN99-1; VC1973A; X06; VC3902A; VC6148; VC6372; VC2768A cỏc ngng thi gian l 0, 3, 5, 7, 9,11 gi Hỡnh.3.5 mt nc ca mụ so phụi u xanh sau x lý bng thi khụ mt nc ca mụ tng theo thi gian thi khụ tt c cỏc ging Sau gi n gi thi khụ, mc mt nc ging VC1973A l cao nht (70,60 - liờn tc c th hin bng v hỡnh 3.6 79,05% lng ti), sau ú l ging VC6148 (64,18 -73,92 % lng ti, ging VN93- cú mc mt nc thp nht (48,84% - 65,22% lng ti) 37 S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn 38 S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn cỏc ngng thi khụ gi, gi, 11 gi, mt nc ca mụ gim dn Nhỡn chung, tc mt nc gia cỏc ging khụng cú s sai khỏc ỏng Nh vy cựng mt mc mt nc nh nhng kh nng chu ng ca mụ so cú s khỏc rừ rt gia cỏc ging nghiờn cu k Kt qu ca chỳng tụi phự hp vi nhn xột ca cỏc tỏc gi chn dũng 3.2.2 Kh nng chu mt nc ca mụ so phụi u xanh sau x lý bng thi khụ T l sng sút ca mụ so phụi u xanh c ỏnh giỏ sau nuụi phc hi tun Quan sỏt kh nng phc hi mụ so phụi u xanh sau x lớ bng thi khụ c cy lờn mụi trng tỏi sinh chỳng tụi thy, sau 2-3 ngy nhng mụ so sng sút ó hỳt nc v sinh trng bỡnh thng T l sng sút Tỷ lệ sống sót (%) t bo chu thi khụ lỳa, lc [14], [7] 120 100 80 VN 93- VN 99-3 VC 1973A X 06 60 40 20 VC 3902A VC 6148 VC 6372 VC 2768A ca mụ so t l nghch vi thi gian x lớ (bng 3.8 v hỡnh 3.7) 11 Thời gian thổi khô (giờ) Bng 3.8 T l sng sút (%) ca mụ so phụi u xanh sau thi khụ tun Thi gian nuụi phc hi Hỡnh 3.6 T l sng sút (%) ca mụ so phụi u xanh sau thi khụ v nuụi T l sng sút ca mụ so phụi u xanh sau thi khụ tun phc hi trờn mụi trng tỏi sinh thi khụ (gi) VN 93- VN 99-3 VC 1973A X 06 VC 3902A VC 6148 VC 6372 VC 2768A 100,00 100,00 100,00 100,00 100,00 100,00 100,00 100,00 100,00 96,29 85,00 95,00 96,00 92,00 92,40 95,38 100,00 88,00 75.00 91,00 92,00 68,00 85,83 90,20 Kt qu nghiờn cu kh nng tỏi sinh cõy ca ging u xanh nghiờn 96,43 80,00 42,86 64,38 65,38 44,82 76,43 72,18 cu sau tun nuụi cy c trỡnh by bng 3.9 v hỡnh 3.8 Kt qu 88,00 44,00 23,80 50,00 51,00 34,61 66,35 55,78 bng 3.9 v hỡnh 3.8 cho thy, tt c cỏc ging u xanh nghiờn cu u cú 11 00,00 00,00 00,00 00,00 00,00 00,00 00,00 00,00 kh nng tỏi sinh sau tun nuụi cy ngng x lớ bng thi khụ gi, * Kh nng tỏi sinh cõy t mụ so phụi u xanh sng sút sau x lý bng thi khụ tt c ging u xanh u cú kh nng tỏi sinh cao v thi gian x lớ cng Sau 3, 5, 7, 9, 11 gi thi khụ, t l mụ so phụi u xanh sng sút ca cao thỡ t l tỏi sinh cng gim Ging cú t l tỏi sinh cao nht l ging ging VN93- l ln nht v cui cựng l ging VC1973A cú t l mụ so VN93 -1, ging VC1973A cú t l tỏi sinh thp nht cỏc ngng thi sng sút thp nht, sau gi thi khụ ch cũn 23,80 % gian x lý, sau gi x lớ thi khụ t l tỏi sinh ch cũn 10,5% 39 S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn 40 S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn Nh vy kt qu cho thy, hu ht mụ so phụi u xanh ca cỏc ging Bng 3.9 Kh nng tỏi sinh cõy t mụ so phụi u xanh sng sút sau x so vi i chng khụng b x lý (0h) iu ny cú th x lớ mt nc, lý bng thi khụ Thi gian t lờn mụi trng tỏi sinh, cỏc t bo hỳt nc mnh hn, nờn sc sng, sc T l tỏi sinh ca mụ so phụi u xanh sau thi khụ (%) sinh trng v kh nng tỏi sinh cao hn Theo Lờ Trn Bỡnh v cs (1995), thi khụ (gi) qua x lý mt nc 3h sng sút thng cú kh nng tỏi sinh cõy cao hn VN 93- VN 99-3 VC1973A X 06 VC3902A VC 6148 VC 6372 VC 2768A nguyờn nhõn l quỏ trỡnh x lý ó git cht nhng t bo mn cm, chn 98,6 90,0 78,3 88,0 78,5 77,8 84,7 87,8 nhng t bo cú sc sng v kh nng tỏi sinh cao Hin tng ny cng c 96,4 88,1 85,5 87,8 89,8 95,0 85,6 89,5 phỏt hin x lý mt nc mt s i tng cõy khỏc nh thuc lỏ v 87,2 84,7 66,9 84,4 82,0 83,0 67,7 70,6 mnh lỏ cõy Craterosticgma plantagineum, lc [9], [7] 80,6 79,6 50,1 79,0 74,7 76,0 52,2 50,7 20,0 15,7 10,5 17,3 20,2 16,3 10,7 12,8 Kt qu cỏc thớ nghim ó thu c 289 dũng mụ chu mt nc ca ging uxanh v 715 dũng cõy xanh Thời gian thổi khô (giờ) VC 6372 VC 1973A VN 93- 100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 VC 3902A Tỷ lệ tái sinh %) VN 93- VN 99-3 VC 1973A DX 06 VC 3902A VC 6148 VC 6372 VC 2768A Hỡnh 3.8 Tỏi sinh mụ so sau x lý thi khụ 3.2.3 Nhn xột v kh nng chu mt nc bng x lý thi khụ ca cỏc ging u xanh nghiờn cu (1) C ging u xanh nghiờn cu u cú kh nng chu hn mc mụ so v cú biu hin khỏc gia cỏc ging Hỡnh 3.7 Kh nng tỏi sinh cõy ca cỏc mụ so phụi u xanh sng sút (2) Nhng mụ so sng sút u cú kh nng tỏi sinh thnh cõy hon chnh sau x lý bng thi khụ 41 S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn 42 S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn (3) Kt qu thu c 289 dũng mụ chu mt nc v 715 dũng cõy xanh ca chỳng tụi ó s dng BAP to a chi u xanh Vic s dng nng ging u xanh nghiờn cu õy l ngun vt liu phong phỳ cho chn dũng cỏc cht iu ho sinh trng thớch hp cú ý ngha quan trng i vi tng chu hn cõy u xanh tỏi sinh t mụ so chu mt nc giai on phỏt trin ca cõy, õy l nguyờn tc c bn nuụi cy mụ t 3.3 KT QU TI SINH CY U XANH T MT L MM bo 3.3.1 Mụi trng ny mm ca ht Sau ngy, ht ny mm dựng dao m tỏch ht thnh hai mnh, Ht u xanh ca ging c kh trựng (iu kin kh trựng ging dựng kim nhn gõy tn thng mt lỏ mm, cy cỏc mnh ú mụi nh phn kh trựng ht ca mc 2.2.1) cy trờn mụi trng ny mm, giai trng MS c bn cú b sung BAP vi nng khỏc (1,5mg/l; 2mg/l; on ny ht ch yu s dng cht dinh dng cú sn ht nờn mụi 2,5mg/l; 3mg/l; 3,5mg/l) Mi bỡnh cy 10 15 mnh lỏ mm Mi cụng thc trng cha cn cung cp cht kớch thớch sinh trng c ging u xanh, thớ nghim c tin hnh trờn 30 lỏ mm, lp li ln sau mt ngy nuụi cy ht bt u nt v, ngy ht ny mm hon chnh Kh nng to chi v s chi / mnh lỏ mm c dựng ỏnh giỏ kh nng thớch ng ca ging v nh hng ca cht kớch thớch sinh trng h thng nuụi cy in vitro, kt qu phõn tớch c th hin bng 3.10 Bng 3.10 nh hng ca BAP n kh nng to a chi u xanh A Cụng Nng thc BAP VN 93-1 B C D Hỡnh 3.9 Ht u xanh ny mm sau ngy (A, B), Ht u xanh c S chi / mt lỏ mm VN99-3 VC 1973A X 06 VC 3902A VC 6148 VC 6372 VC 2768A 1,5 1,33 0,329 1,660,639 1,660,329 1,660,639 1,660,639 1,660,329 1,660,329 1,66 0639 2 1,660,639 2,330,329 2,000,577 2,330,329 1,660,329 2,330,086 2,000,57 2,300,639 2,5 1,670,329 2,300,375 2,660,329 2,430,352 2,350,144 2,660,144 2,500,144 2,330,202 2,330,329 2,660,329 3,000,577 2,660,329 2,660,639 3,350,259 3,150,329 3,000,577 3,5 1,330,329 1,670,329 1,330,329 1,570,190 1,660,329 2,330,329 1,480,069 1,330,369 tỏch to a chi (C, D) 3.3.2 Mụi trng to a chi Mụi trng to a chi a s cỏc loi thc vt cn s dng cỏc cht iu ho sinh trng nh IAA, BAP, IBA,Trong quỏ trỡnh thớ nghim 43 S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn T bng 3.10 cho thy s khỏc bit s lng chi t mt lỏ mm mụi trng to a chi b sung BAP vi nng mg/l cho s chi t ti a trờn mt lỏ mm dao ng t 2,33 0,329 n 3,35 0,259 gp tt c 44 S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn ging u xanh: VN93-1; VN99-1; VC1973A; VC3902A; VC6148; VC6372; VC2768A; X06 S lng chi khụng ch ph thuc vo nng BAP m quỏ trỡnh lm thớ nghim m chỳng tụi cũn thy rng, nu gõy tn thng ỳng v trớ, khụng quỏ sõu hay quỏ nụng s to c s chi nhiu nht Cng s dng lỏ mm tỏi sinh v mụi trng tỏi sinh cú b sung BAP nhng nhúm nghiờn cu ca Mai Trng v cs ch thu c s chi ti a l chi/lỏ mm Nh vy cú th kt lun rng gõy tn thng mt lỏ mm Hỡnh 3.11 Hỡnh nh kộo di chi u xanh trờn mụi trng b sung GA3 ỳng v trớ v mụi trng to a chi b sung 3mg/l BAP to c s chi / lỏ mm l cao nht 3.3.4 Mụi trng r H r c hỡnh thnh chuyn cỏc chi sang mụi trng r cú b sung 0,3mg/l NAA, khong 30 ngy, cõy hon chnh vi b r phỏt trin tt t chiu cao cm, cõy c chuyn ngoi nuụi cy cỏc khay Hỡnh 3.10 Hỡnh nh to a chi t mt lỏ mm 3.3.3 Mụi trng kộo di chi Sau khong 10 ngy chi c hỡnh thnh, tỏch riờng tng chi v cy chuyn sang mụi trng kộo di chi cú b sung 1,5 mg/l GA3 v cỏc cht dinh dng khỏc cho chi phỏt trin thun li Sau 10 ngy cy trờn mụi trng kộo di chi, chi u xanh t kớch thc - cm c Hỡnh 3.12 Hỡnh nh cõy u xanh r trờn mụi trng b sung 0,3mg/l -NAA 3.3.5 Ra cõy v ch chm súc Khi cõy ng nghim cú kớch thc - cm vi h r phỏt chuyn sang mụi trng r trin c a ngoi nuụi cy khay (iu kin nuụi cy nh phng phỏp cõy mc 2.2.1) Sau khong 30 ngy cõy u xanh hoa v kt qu 45 S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn 46 S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn KT LUN V NGH Kt lun 1.1 Thm dũ mụi trng nuụi cy mụ so u xanh cho thy: mụi trng cú b sung 11mg/l 2,4D l mụi trng thớch hp cho to mụ so ging u xanh X06 Mụi trng cú b sung 10mg/l 2,4D thớch hp cho to mụ so ging cũn li Nng 3mg/l BAP cho t l tỏi sinh, s chi trung bỡnh, kớch thc trung bỡnh chi l cao nht v mụi trng cú b sung 0,3mg/l -NAA l thớch hp cho to cõy hon chnh B A 1.3 ỏnh giỏ kh nng chu mt nc ca cỏc ging u xanh mc mụ so trờn c s xỏc nh mt nc, kh nng chu mt nc, kh nng sng sút v kh nng tỏi sinh cõy ó cho thy c ging u xanh u cú kh nng chu mt nc mc mụ so ó chn c 289 dũng mụ chu mt nc v 715 dũng cõy xanh tỏi sinh t mụ so chu mt nc 1.3 Thm dũ mụi trng tỏi sinh cõy u xanh t mt lỏ mmcho thy, mụi C D Hỡnh 3.13 Cõy u xanh tỏi sinh c trng khay (A), Cõy u xanh tỏi sinh c trng chu hoa kt qu (B, C, D) trng cú b sung 3mg/l BAP v gõy tn thng ỳng v trớ s to c s chi/ lỏ mm cao Mụi trng cú b sung 1,5 mg/l GA3 l mụi trng tt nht kộo di chi; mụi trng b sung 0,3 mg/l NAA l mụi trng thớch hp cho to r chi u xanh 3.3.6 Nhn xột v mụi trng tỏi sinh t mt lỏ mm (1) Mụi trng b sung 3mg/l BAP v gõy tn thng ỳng v trớ trớ to c s lng chi / lỏ mm l cao nht (2) Mụi trng b sung 1,5 mg/l GA3 sau 10 ngy nuụi cy chi to c 1.4 C ging u xanh u cú kh nng to a chi t mt lỏ mm v tỏi sinh thnh cõy hon chnh, cú kh nng hoa kt qu trng chu ngh 2.1 Tip tc s dng k thut nuụi cy in vitro vo vic chn dũng chu hn chi t kớch thc cy chuyn r tt nht (3) C ging u xanh u cú kh nng to a chi v tỏi sinh thnh cõy hon chnh, cõy tỏi sinh u cú kh nng hoa kt qu trng iu t cỏc ging u xanh nghiờn cu trờn 2.2 Cn cú nhng nghiờn cu chuyn gen thớch hp ci tin cỏc ging u xanh cú cht lng cao v khnng chng chu vi iu kin bt li ca mụi kin trng v chm súc khay trng tt 47 S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn 48 S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn CễNG TRèNH CễNG B LIấN QUAN N LUN VN TI LIU THAM KHO Nguyn Th Luyn, Nguyn V Thanh Thanh, Lũ Mai Thu, Chu Hong Mu Ti liu ting vit (2009), Hon thin h thng tỏi sinh in vitro cõy u xanh (Vigna radiata Lờ Trn Bỡnh, H Hu Nh, Lờ Th Mui (1997), Cụng ngh sinh hc thc (L.) Wilczek) phc v cho chuyn gen Tp Khoa hc&Cụng ngh-i vt ci tin ging cõy trng, Giỏo trỡnh cao hc nụng nghip, Nxb Nụng hc Thỏi Nguyờn, 54(6): 123-128 nghip, H Ni (188 trang) Lờ Trn Bỡnh, Lờ Th Mui (1998), Phõn lp gen v chn dũng chng chu ngoi cnh bt li cõy lỳa, Nxb i hc Quc Gia, H Ni Lờ Trn Bỡnh, Vừ Th Ngc Dip, Lờ Th Mui (1995), Nghiờn cu kh nng chu lnh v chu khụ mụ so lỳa ca cỏc ging lỳa cú ngun gc sinh thỏi khỏc nhau, Tp sinh hc, 17(1), tr 19 55 Bựi Bo Hon (1993), ng dng k thut nuụi cy mụ t bo bo qun, nhõn ging v chn dũng chu lnh khoai lang (Ipomoea batatas L.), Lun thc s sinh hc, Vin Cụng ngh Sinh hc, H Ni Nguyn Hu H v Nguyn Vn Uyn (2005), Nghiờn cu hai kiu tỏi sinh in vitro cõy khoai lang Inpomoea Batatas, Nhng c bn khoa hc s sng ; NXB khoa hc v k thut, 1242 1245 Nguyn Th Thuý Hng, Trn Th Ngc Dip, Nguyn Thu Hin, Chu Hong Mu, Lờ Vn Sn, Chu Hong H (2009), Phỏt trin h thng tỏi sinh in vitro cõy u tng (Glycine max (L.) Merill) phc v chuyn gen Tp Khoa hc&Cụng ngh-i hc Thỏi Nguyờn, 52(4): 82-88 Ngụ Th Liờm (2006),Nghiờn cu s a dng di truyn v kh nng chu hn ca mt s ging lc (Arachis hypogaea L.), Lun thc s sinh hc, trng i hc S phm Thỏi Nguyờn Trn ỡnh Long, Lờ Kh Tng (1998), Cõy u xanh NXB Nụng nghip 49 S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn 50 S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn Nguyn Hong Lc (1992), Chn dũng chu mui NaCl v chu mt nc 17 Nguyn Hi Tut, Ngụ Kim Khụi (1996), X lý thng kờ kt qu nghiờn cu thuc lỏ (Nicotiana tabacum L.), lun ỏn phú tin s sinh hc, Vin Cụng thc nghim nụng lõm ng nghip trờn mỏy vi tớnh, Nxb Nụng Nghip, H ngh Sinh hc, H Ni, 107 trang Ni 10 Chu Hong Mu (2001), S dng phng phỏp t bin thc nghim Ti liu ting anh to cỏc dũng u tng v u xanh t bin t bin thớch hp cho vựng nỳi 18 Abdul B., Frinch R P., Cocking E C (1999), Plant regeneration from ụng bc Vit Nam Lun ỏn tin s Sinh hc Viờn Cụng ngh Sinh hc, H protoplast of wild rice (Oryza rufipogon Griff), Plant cell Rep, 10, pp 200 Ni 203 11 Nguyn Th Phng Nam v cng s (2007), Xõy dng h thng tỏi sinh 19 Adkins S M., Shiraishi T., Kunavuvatchaidach R.,Godwin I D (1995), in vitro cõy ngụ v ng dng nghiờn cu chuyn gen to protein giu st Somaclonal variation in rice drought tolerance and other agronomic nh vi khun Agrobacterium tumefaciens, Nhng c bn khoa characters, Aust J Bot, 4, pp 201 209 hc s sng, NXB Khoa hc v k thut, 887 -89 20 Amutha S., Muruganantham M., and Ganapathi A (2006), Thidiazuron- 12 inh Th Phũng (2001), Nghiờn cu kh nng chu hn v chn dũng induced high-frequency axillary and adventitious shoot regeneration in chu hn lỳa bng cụng ngh t bo thc vt, Lun ỏn Tin s Sinh hc, Vigna radiata (L.) Wilczek In Vitro Cell Dev Biol.-Plant, 42:2630 Vin Cụng ngh Sinh hc, H Ni 21 Bajai S., Rajam H (1996), Spermidine for effcient regeneration, Rice 13 Nguyn Th Thanh v Vừ Phan MiSa (2007), Nghiờn cu xõy dng h thng tỏi sinh in vitro v ng dng chuyn gen h tiờu; Nhng nghiờn cu c bn khoa hc s sng, NXB Khoa hc v k thut, 820 824 Bio Quar, 26, pp 22.Bertin P., Kinet J M Bouharmont J (1995), Heritable chilling tolerance improvement in rice through somaclonal variation and cell line selection, Aust J Bot, 44, pp 91 105 14 Nguyn Th Tõm (2004), Nghiờn cu kh nng chu núng v chn dũng chu núng lỳa bng cụng ngh t bo thc vt, Lun ỏn tin s sinh hc, H 23 Bertin P., Kinet J M Bouharmont J (1997), Somaclonal variation and improvement of chilling tolerance in rice: Chance in chilling induce Ni chlorophyll fluorescence, Crop Sci, 37, pp 1727 1735 15 Phan Hu Tụn (2004), Giỏo trỡnh Cụng ngh sinh hc chn to 24 Biwas G C., Zapata F J.(1993), High frequence plant regeneratin ging cõy trng, Nxb Nụng nghip, H Ni from protoplast of indica rice (Oryza sativa L.) using mantose, J plant 16 Mai Trng, Nguyn Hu H, Lờ Tn c, Nguyn Vn Uyn (2001), H thng tỏi sinh cõy u xanh t cung t ip nuụi cy in vitro Tp sinh hc, 23: 33-35 51 S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn Physiol, 141, pp 475 25 Chandler S F.,Vasil I K.(1984), Selection and characteerrizationlof 52 S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn NaCl tolerance cell from embryogenesis cultures of Pennisetum purpureum explants of green gram (Vigna radiata (L.) Wilczek)- A recalcitrant grain Schum, Plant Sci Lett, 37, pp 157- 164 legume In vitro Cell.Der Biol plant 42: 134 138 26 Collin H A., Dix P.J (1990), Culture systems and selection procedure 35 Mundy J., Chua N H (1988), Abcisis and water stress induce the In: Plant cell line selection VCH Verlagsgesellschaft expression of a novel rice gene, EMBOJ, 8, pp 2279 2286 27 Dix P.J (1986), Plant cell culture technology, Yeoman M.M (eds), 36.Muruganantham M., Amutha S.,Selvaraj N., Vengadesan G., Ganapathi Oxford, Blackwel Scientific Publication, pp 143 201 A (2007), Efficient Agrobacterium- ediated transformation of Vigna 28 Dix P.J.(1990), Plant cell line selection (Procedures and Applications), mungo using immature cotyledonary-node explants and phosphinothricin as VCH Verlagsgllchaft MBH the selection agent In Vitro Cell.Dev.Biol.-Plant, 43:550557 29 Gulati A and Jaiwal P.K (1993) In vitro selection of salt-resistant 37 Norbor M W (1990), Environmental stress resistance In: Plant Cell Vigna radiata (L.) Wilczek plants by adventitious shoot formation from Line Selection, Weihein, New York, Basel, Cambridge, VCH, pp 167 186 cultured cotyledon explants J Plant Physiol 142: 9910 38 Prem R anand, Ganapathi A., Ramesh V Anbazhagan, Gengadesan G., 30 Gulati A, Jaiwal PK (1994), Plant regeneration from cotyledonary node and Selvaraj N (2001), High frequency plant regeneration via somatic explants of mungbean (Vigna radiata (L.) Wilczek) Plant Cell Rep embryogenesis in cell suspension cultures of cowpea, vigna unguiculata (L.) 13:523527 walp In Vitro Cell Dev Biol-Plant, 36:475-480 31 Ignacimuthu S & Franklin G (1999), Regeneration of plantlets from 39 Poddar K., Vishnoi R K., Kothari S L (1998), Plant regeneration from cotyledon and embryonal axis explants of Vigna mungo L Hepper, Plant embryogenesis callus, Rice Bio quar, 35, pp Cell, Tissue and Organ Culture 55: 7578 40 Raghava R N V., Nabors M V., (1985), Plant negeneration from 32 Jayanti Sen & Spra Guha Mukherjee (1998), In vitro intoduction of tissue cultures of Pokali rice is promoted by optizing callus to medium multiple shoots and plant regeneration in Vigna, In vitro Cell.Dev Biol volume ratio and by a medium conditioning factor produced by plant, 34: 276 280 embryogeneic callus, Cell Tiss Org Cult, 4, pp 241 248 33 K Ramakrishnan ã R Gnanam ã P Sivakumar A Manickam, In vitro 41 Rudrabhatla Sairam, Siva Chennareddy, Madasamy Parani, Shulu Zhang, somatic embryogenesis from cell suspension cultures of cowpea (Vigna Diaa Al-abed, Wissam Abou-Alaiw, and Stephen Goldman (2005), Obpc unguiculata (L.) Walp), Plant Cell Rep (2005) 24: 449461 symposium: Maize 2004 & beyond plant regeneration, gene discovery, and 34 Kaviraj C.P., G Kiran, R.B Venugopan, P.B.Kavi Kishor, Srinath Rao genetic engineering of plants for crop improvement In Vitro Cell Dev (2006), Somatic embryogenesis and plant regeneration from cotyredorary Biol.-Plant, 41:411423 42 Renato A Avenido & Kazumi Hattori (1999), Differences in shoot 53 S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn 54 S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn regeneration response from cotyledonary node explants in Asiatic Vigna species support genomic grouping within subgenus Ceratotropis (Piper) Verdc. Plant Cell, Tissue and Organ Culture 58: 99110 43 Renato A Avenido, Jo Motoda and Kazumi Hattori (2001), Direct shoot regeneration from cotyledonary nodes as a marker for genomic groupings within the Asiatic Vigna (subgenus Ceratotropis {Piper} Verdc.) species Plant Growth Regulation, 35: 5967 44 Sita L Mahala, T Leela, B Kiran Kumar, B Naresh, Prathibha Devi (2006), In vitro plant regeneration from the petioles of primary leaves of mungbean (Vigna radiata L.) Plant Biotechnology, 23: 409411 45 Sonia, Raman Saini, Rana P Singh, Pawan K Jaiwal (2007), Agrobacterium tumefaciens mediated transfer of Phaseolusvulgaris amylase inhibitor-1 gene into mungbean (Vigna radiata (L.)Wilczek) using bar as selectable marker Plant Cell Rep 26:187198 55 S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn [...]... xỏc nh mt nc, kh nng chu mt nc, kh nng sng sút v kh nng tỏi sinh cõy ó cho thy c 8 ging u xanh u cú kh nng chu mt nc mc mụ so ó chn c 289 dũng mụ chu mt nc v 715 dũng cõy xanh tỏi sinh t mụ so chu mt nc 1.3 Thm dũ mụi trng tỏi sinh cõy u xanh t mt lỏ mmcho thy, mụi C D Hỡnh 3.13 Cõy u xanh tỏi sinh c trng trong khay (A), Cõy u xanh tỏi sinh c trng trong chu ra hoa kt qu (B, C, D) trng cú b sung 3mg/l... Anbazhagan, Gengadesan G., 30 Gulati A, Jaiwal PK (1994), Plant regeneration from cotyledonary node and Selvaraj N (2001), High frequency plant regeneration via somatic explants of mungbean (Vigna radiata (L.) Wilczek) Plant Cell Rep embryogenesis in cell suspension cultures of cowpea, vigna unguiculata (L.) 13:523527 walp In Vitro Cell Dev Biol-Plant, 36:475-480 31 Ignacimuthu S & Franklin G (1999), Regeneration... ting vit (2009), Hon thin h thng tỏi sinh in vitro cõy u xanh (Vigna radiata 1 Lờ Trn Bỡnh, H Hu Nh, Lờ Th Mui (1997), Cụng ngh sinh hc thc (L.) Wilczek) phc v cho chuyn gen Tp chớ Khoa hc&Cụng ngh-i vt trong ci tin ging cõy trng, Giỏo trỡnh cao hc nụng nghip, Nxb Nụng hc Thỏi Nguyờn, 54(6): 123-128 nghip, H Ni (188 trang) 2 Lờ Trn Bỡnh, Lờ Th Mui (1998), Phõn lp gen v chn dũng chng chu ngoi cnh bt... cú ngun gc t phụi u xanh u cú kh nng tỏi sinh cõy cao, kh nng sinh trng ca chi mnh T l tỏi sinh, s chi trung bỡnh v 3.2.1 Mc mt nc ca mụ so phụi u xanh di tỏc ng ca thi khụ chn ra cỏc dũng t bo cú kh nng chu mt nc, mt s tỏc gi ó tin hnh cho cỏc t bo mụ so b mt nc lý hc bng lung khớ vụ trựng ca bn cy i vi mụ so u xanh, trong thớ nghim ny chỳng tụi Tỷ lệ mất n-ớc (%) PHễI CC GING U XANH 120 100 VN 93-... búng Trũn Trung bỡnh 8 VC 2768A Nhp ni t Trung tõm Ci tin Rau mu Quc t Xanh nõu búng Trũn Trung bỡnh mm 4 ngy tui t hiu qu tỏi sinh 80% - 100% v tỏi sinh chi trc tip t mt lỏ mm nh l ch th cho h gen ca loi u Vigna chõu (subgenus Ceratotropis) [42], [43] Cỏc kt qu nghiờn cu tỏi sinh cõy u xanh t phụi soma v t mt lỏ mm phc v chuyn gen cng ó c cụng b bi Jayanti Sen v Spra Guha Mukherjee (1998) [32], Ignacimuthu... l 3 mg/l (77,3% - 98,6%) B sung nng BAP cao hn (4mg/l) khụng lm tng t l tỏi sinh cõy u xanh m cũn gim t l tỏi sinh (60,5% - 64,0%) Sau 15 ngy t l tỏi sinh cõy tng lờn khụng ỏng k Cỏc ging u xanh khỏc nhau t l tỏi sinh cng khỏc nhau T l tỏi sinh cao nht l ging VN93-1 (98,6% sau 10 ngy, 100% sau 15 ngy), ging VC6148 t l tỏi sinh thp nht (75,8% sau 10 ngy, 77% sau 15 ngy) S 32 S húa bi Trung tõm Hc liu... axillary and adventitious shoot regeneration in chu hn lỳa bng cụng ngh t bo thc vt, Lun ỏn Tin s Sinh hc, Vigna radiata (L.) Wilczek In Vitro Cell Dev Biol.-Plant, 42:2630 Vin Cụng ngh Sinh hc, H Ni 21 Bajai S., Rajam H (1996), Spermidine for effcient regeneration, Rice 13 Nguyn Th Thanh v Vừ Phan MiSa (2007), Nghiờn cu xõy dng h thng tỏi sinh in vitro v ng dng chuyn gen h tiờu; Nhng vn nghiờn cu... khỏc nhau) kh nng tỏi sinh cng khỏc nhau Kh nng tỏi sinh v s chi/mụ so c dựng ỏnh giỏ nh hng ca BAP n hiu qu tỏi sinh ca cỏc ging u xanh nghiờn cu Kt qu thớ nghim to chi c th hin bng 3.5 Bng 3.5 nh hng ca BAP n kh nng to chi u xanh Nng Cụng thc BAP Hỡnh 3.2 Hỡnh nh tỏi sinh u xanh trờn mụi trng b sung3mg/l BAP S chi / mt mụ so 3.1.2.3 nh hng ca GA3 n kh nng kộo di chi ca u xanh VN 93-1 VN99-3 VC... Kumar, B Naresh, Prathibha Devi (2006), In vitro plant regeneration from the petioles of primary leaves of mungbean (Vigna radiata L.) Plant Biotechnology, 23: 409411 45 Sonia, Raman Saini, Rana P Singh, Pawan K Jaiwal (2007), Agrobacterium tumefaciens mediated transfer of Phaseolusvulgaris amylase inhibitor-1 gene into mungbean (Vigna radiata (L. )Wilczek) using bar as selectable marker Plant Cell Rep... vi khi lng U XANH ti) Kt qu phõn tớch v cỏc c im sinh lý sinh hoỏ cỏc dũng thuc lỏ 1.3.1 Nghiờn cu chn ging cõy trng bng k thut chn dũng t bo soma ny cho thy tớnh chu mt nc c iu khin bi mt nhúm gen Cho n nay k thut nuụi cy mụ t bo thc vt ó c ng dng rng 1.3.2 Nghiờn cu h thng tỏi sinh thc vt v cõy u xanh rói trong lnh vc chn dũng t bo, c bit l chn dũng chng chu stress mụi Trong thc t u xanh c sn xut