Đang tải... (xem toàn văn)
Kết quả của các phương pháp kiểm nghiệm thuốc trong các trung tâm kiểm nghiệm có vai trò rất quan trọng. Vì chỉ có những sản phẩm thuốc, lô thuốc, mẫu thuốc đạt tiêu chuẩn đã đặt ra mới được phép lưu hành trên thị trường để phục vụ cho mục đích điều trị. Mặt khác, kết quả kiểm nghiệm còn là sự so sánh sự khác nhau giữa các lô thuốc, các mẫu thuốc và đánh giá độ chính xác của quy trình kiểm nghiệm. Do đó, cần xây dựng một phương pháp kiểm nghiệm thuốc tiêm đơn giản và có độ chính xác cao.
MỤC LỤC DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 2.1 Thuốc tiêm Vitamin C 100g/2ml (5%)………………………………………….2 Hình 3.1 Biên lấy mẫu……………………………………………………………… Hình 3.2 Sơ đồ định lượng thuốc tiêm Vitamin C……………………………………….12 Hình 3.3 Sơ đồ chuẩn k dung dịch KIO3 0,1N………………………………………13 Hình 3.4 Sơ đồ xác định hàm lượng tạp chất acid oxalic……………………………… 15 ĐẶT VẤN ĐỀ Ngày nay, đời sống xã hội xuất ngày nhiều bệnh (khiếm khuyết cấu tạo răng), miệng (chảy máu lợi), da (không lành vết thương, chảy máu da),… mà nguyên nhân thiếu hụt Vitamin C Trên thị trường nay, Vitamin C đa dạng: viên sủi, viên nang, dung dịch bôi da, thuốc tiêm Trong đó, thuốc tiêm dạng có nhiều ưu điểm nhất: đưa vào thể lượng thuốc xác, lớn; tránh bất lợi xảy dùng thuốc theo đường uống; cho tác dụng nhanh; tính khả dụng cao đạt hiệu mong muốn điều tri, trường hợp bệnh nặng, cấp cứu,… nên xem biện pháp thông dụng hữu hiệu để điều trị bệnh thiếu hụt Vitamin C gây Thuốc tiêm chế phẩm vô khuẩn, thường sử dụng trường hợp quan trọng Vì thuốc hấp thu hoàn toàn, tác dụng nhanh nên có sai số nồng độ, hàm lượng vượt xa liều định ghi nhãn dẫn đến tai biến Do đó, yêu cầu chất lượng thuốc tiêm cao nghiêm ngặt hàng đầu so với dạng thuốc khác Kết phương pháp kiểm nghiệm thuốc trung tâm kiểm nghiệm có vai trò quan trọng Vì có sản phẩm thuốc, lô thuốc, mẫu thuốc đạt tiêu chuẩn đặt phép lưu hành thị trường để phục vụ cho mục đích điều trị Mặt khác, kết kiểm nghiệm so sánh khác lô thuốc, mẫu thuốc đánh giá độ xác quy trình kiểm nghiệm Do đó, cần xây dựng phương pháp kiểm nghiệm thuốc tiêm đơn giản có độ xác cao Vì tất lý trên, thực tiểu luận: “Nghiên cứu phương pháp kiểm nghiệm thuốc tiêm Vitamin C” TỔNG QUAN TÀI LIỆU Vitamin C Acid ascorbic gọi Vitamin C, có tất tế bào sống động vật thực vật Nó có nhiều hoa tươi chanh, cam, quýt, dâu, dưa hấu…, rau xanh bắp cải, xà lách, rau muống,… Trong thức ăn nguồn động vật, hàm lượng acid ascorbic thấp có nhiều gan, thận Vitamin C tồn tự nhiên hai dạng phổ biến acid ascorbic acid dehydroascorbic Vitamin C có cấu tạo gần giống glucide Nó có khả oxy hóa thuận nghịch Hai dạng khử oxy hóa Vitamin C biến đổi cho phản ứng sinh học thể thực vật, động vật, hai có tác động sinh học tác dụng giống Thuốc tiêm Vitamin C 2.1 Sản phẩm thuốc tiêm vitamin C 100mg/2ml (5%) Thuốc tiêm vitamin C 100mg/2ml (5%) bào chế từ nguyên liệu acid ascorbic dạng dung dịch vô khuẩn đóng thành ống, ống tích 2ml Hình 2.1 Thuốc tiêm Vitamin C 100g/2ml (5%) 2.2 Tính chất vật lý Theo IUPAC: - Tên thông thường : acid ascorbic, vitamin C Công thức phân tử: C6H8O6 - 2.3 Công thức cấu tạo: - Nhiệt độ phân hủy: 193oC - Khả hòa tan nước cao - Dung dịch trong, không màu vàng nhạt - Dung dịch nước 5% có pH = Tính chất hóa học Tính chất Vitamin C tan nước, dễ bị oxy hóa, đun nóng bị phân hủy khoảng 400C Thuốc tiêm Vitamin C dạng dung dịch vô khuẩn nguyên liệu acid ascorbic nên mang tất tính chất nguyên liệu acid ascorbic Thuốc tiêm Vitamin C: - Dễ dàng bị oxy hóa cho acid dehydroascorbic - Hydroxyl hóa - Tạo điều kiện dễ dàng cho chuyển prolin, lysin sang hydroxyprolin - hydroxylysin tổng hợp collagen Giúp chuyển acid folic thành folinic tổng hợp camitin Tham gia xúc tác oxy hóa thuốc qua microsom gan Giúp dopamin hydroxyl thành nor-adrenalin Giúp dễ hấp thu sắt khử Fe3+ thành Fe2+ dày sau ruột Ở mô, Vitamin C giúp tổng hợp collagen, proteoglycan phần hữu khác xương, nội mô mao mạch - Trong thiên nhiên Vitamin C có mặt Vitamin P 2.4 Thành phần Mỗi ống thuốc 2ml có thành phần gồm: - Vitamin C: 100mg vừa hoạt chất vừa chất chống oxy hóa - Tá dược : + Natrihydrocarbon: điều chỉnh pH sản phẩm vùng cần thiết 5,0 – 7,0 + Natri dithionit: đệm pH + Cồn benzylic: chất bảo quản + Nước cất pha thêm: sử dụng làm dung môi hòa tan chất 2.5 Công dụng - Điều trị bệnh Scorbut chứng sốt huyết thiếu Vitamin C, giúp thể chống lại bệnh nhiễm khuẩn, cảm cúm - Tăng sức đề kháng cho thể nhiễm khuẩn, nhiễm độc Phương pháp kiểm nghiệm 3.1 Phương pháp lấy mẫu 3.1.1 Địa điểm lấy mẫu Công ty Cổ phần Dược – Vật tư Y tế Đắk Lắk, số 9, đường Hùng Vương, thành phố Buôn Ma Thuột, tỉnh Đắk Lắk 3.1.2 Kiểm tra sơ lô hàng - Kiểm tra tính đồng lô hàng - Xem xét giấy tờ kèm theo - Đối chiếu với nhãn mác bao bì - Để riêng sản phẩm không nguyên vẹn phân số sản phẩm lại - thành lô hàng đồng Lô hàng bảo quản nhà kho, không bị ẩm ướt, hư hỏng Biên lấy mẫu MẪU BIÊN BẢN LẤY MẪU (Ban hành kèm theo Thông tư số 60/2011/TT-BNNPTNT Ngày 09 tháng năm 2011 Bộ trưởng Bộ Nông nghiệp Phát triển nông thôn) CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập – Tự – Hạnh phúc ., ngày tháng năm 20 BIÊN BẢN LẤY MẪU Số 1.Tên tổ chức lấy mẫu: Địa điểm lấy mẫu: Người lấy mẫu: (Họ tên, chức danh, đơn vị): Đại diện Cơ quan Hải quan cửa nhập: (Họ tên, chức vụ, đơn vị) Theo quy định pháp luật kiểm tra chất lượng muối nhập tiến hành lấy mẫu đại diện lô hàng nhập sau: Ngày sản ST Tên hàng Tên sở địa Đơn vị Lượng xuất, số lô Ghi T hóa, mã HS NSX, NK tính mẫu (nếu có) Tình trạng mẫu: Mẫu chung chia làm 03 phần: 01 mẫu thử nghiệm; 01 mẫu lưu quan kiểm tra 01mẫu lưu sở lấy mẫu Các phần mẫu dán số hiệu niêm phong Hải quan số: có chứng kiến bên Biên lập thành 03 có giá trị nhau, bên thông qua, 01 gửi Cơ quan kiểm tra, 01 gửi tổ chức thử nghiệm mẫu, 01 người nhập giữ./ Đại diện quan Hải quan cửa nhập Người lấy mẫu Hình 3.1 Biên lấy mẫu 3.1.3 Vị trí lấy mẫu Trong lô hàng thuốc tiêm Vitamin C, phân lô: A001, A002, A003, A004, A005 thành 15 mẫu nhỏ (mỗi lô phân làm mẫu nhỏ) có số thứ tự từ – 15 Vị trí lấy mẫu ngẫu nhiên đại diện cho lô hàng thuốc tiêm Vitamin C tiến hành kiểm tra tất tiêu lô hàng 3.1.4 Dụng cụ lấy mẫu - Túi đựng mẫu PE hay lọ thủy tinh nút mài, khô mùi lạ - Bao tay - Dao, kéo 3.2 Đánh giá cảm quan - Màu sắc: dạng suốt vàng nhạt - Vị: chua Dạng: lỏng đồng 3.3 Đánh giá vật lý 3.3.1 Độ - Có phương pháp: So sánh dung dịch cần kiểm tra độ với hỗn dịch đối chiếu: Độ dung dịch xác định cách so sánh dung dịch với hỗn dịch đối chiếu sau tiến hành thử: cho dung dịch thử hỗn dịch đối chiếu vào ống nghiệm giống (ống nghiệm thủy tinh trung tính, trong, không màu, đáy bằng, có đường kính khoảng 15 - 25mm) Chiều dày lớp dung dịch ống nghiệm 40mm Sau phút pha dung dịch chuẩn đối chiếu: đem so sánh với dung dịch cần thử cách quan sát chất lỏng ống nghiệm từ xuống đen sáng khuyếch tán ban ngày - Soi mắt thường: Bằng cảm quan kiểm tra 100% đơn vị sản phẩm điều kiện ánh sáng ổn định: nguồn ánh sáng từ 2000 lux, soi trắng đen, yêu cầu đặc biệt người soi phải có thị lực tốt không sử dụng kính phóng đại - Kiểm tra kính hiển vi: Đây phương pháp dược điển người Anh, Châu Âu,… đưa Phương pháp xác định trực tiếp xác kích thước hạt cách: lọc cẩn thận dung dịch tiêm màng lọc có kích cỡ lỗ lọc thích hợp sau quan sát kính hiển vi có thước micromet - Sử dụng máy đếm hạt tự động: máy đo trực tiếp dung dịch cần đo (dung dịch cần đo cho vào buồng đo) Các máy đếm điện tử chia thành ba loại theo nguyên tắc áp dụng: + Dựa thay đổi điện dung dịch dẫn điện: Khi có hạt vào buồng đo, hai cực, thể tích hạt choáng phần dung dịch làm cho độ dẫn điện hai điện cực thay đổi, kéo theo cường độ dòng điện thay đổi tỉ lệ với thể tích hạt + Dựa nhiễm xạ tia laser: Loại tiện lợi đo hạt dạng thuốc phun sương, loại bột thuốc hỗn dịch + Dựa chắn sáng: Cho phép đến hạt phân tán chất lỏng hay không khí dựa nguyên tắc khuếch tán ánh sáng chắn tia sáng mà ta xác định kích thước 3.3.2 Độ ẩm Sử dụng phương pháp Karl Fischer: - Nguyên tắc: Dựa độ màu iot Ở nhiệt độ thường, iot kết hợp với nước SO2 thành HI không màu, theo phản ứng: I2 + SO2 + 2H2O ↔ 2HI + H2SO4 Từ màu dung dịch iot, ta tính phần trăm lượng nước có mẫu Phản ứng phản ứng thuận nghịch, muốn cho phản ứng theo chiều, Fischer cho thực phản ứng môi trường có piridin Phương pháp phát tới vết nước (lượng nước nhỏ) sử dụng máy đo tự động xác định độ ẩm hàng loạt công nghiệp - Dụng cụ vật liệu thuốc thử: + Máy đo độ ẩm tự động theo phương pháp Fischer + Cân phân tích + Thuốc thử Fischer: Piridin 10 mol SO2 mol Iot mol Metanol lit 1ml thuốc thử tương đương với 7,2 mg nước - Cách tiến hành: + Nếu dạng lỏng định lượng thẳng + Nếu mẫu thử dạng rắn, đặc chiết xuất n – butanol chuẩn độ dịch chiết + Pha loãng thuốc thử Fischer (thuốc thử Fischer : metanol : n - butanol = 1:3:8 v/v/v) cho vào máy đo với piridin mẫu thử sau trộn lẫn với phận trộn làm phản ứng, có nước mẫu thử, dung dịch nhạt màu đưa vào đo sắc kế kết ghi tự động biểu đồ So sánh với biểu đồ mẫu làm với thuốc thử chứa 0%, 25%, 50%, 75%, 100% nước Chú ý: + Nếu máy đo tự động dùng phương pháp so màu với thang chuẩn + Phương pháp xác với mẫu có hàm lượng nước thấp, định lượng nhanh xác định hàng loạt - Tính kết quả: Kết % máy ghi tự động 3.3.3 Phương pháp kiểm tra pH Có hai phương pháp: - Sử dụng thang đo pH: Dung dịch cần thử + giấy thử (giấy quỳ) giấy thử đổi màu so màu giấy thử với thang đo pH - Đo pH trực tiếp máy: Pha loãng dung dịch cần thử sau đo trực tiếp dung dịch cần thử máy đo pH 3.4 Đánh giá sinh hóa 3.4.1 Định tính hoạt chất acid ascorbic - Mục đích: kiểm tra hoạt chất (acid ascorbic) có chế phẩm không - Phương pháp thực hiện: Phương pháp sắc ký lớp mỏng - Ưu điểm phương pháp: + Kỹ thuật đơn giản, dễ thực hiện, thực phòng thí nghiệm + Thời gian thực nhanh, tối đa vài + Do cách thực đơn giản nên dùng phương pháp sắc ký lớp mỏng 10 để khảo sát hệ dung môi cho phương pháp sắc ký khác Nhìn chung phương pháp sắc ký lớp mỏng phương pháp có tính ứng dụng cao, thông dụng - Nhược điểm phương pháp: + Thành phần pha động dễ thay đổi trình khai triển + Các vết sau khai triển thường bị kéo đuôi + Phương pháp sắc ký lớp mỏng điều chế dùng hỗn hợp cần tách có số lượng ít, vài trăm miligam, mẫu nhiều, vài gam tách sắc ký cột kinh tế Dụng cụ - Hóa chất: - Ống mao quản - Bình chạy sắc ký - Bản mỏng Silicagel GF254 - Cốc thủy tinh 10 ml - Ống hút 10 ml - Cốc đong 200 ml - Thuốc tiêm Vitamin C - Tủ sấy MEMMERT - Đèn tử ngoại CAMAG - Chất chuẩn acid ascorbic (C% = 99,2%) - Ethanol 96% - Nước cất Phương pháp tiến hành: • Chuẩn bị: - Bản mỏng: Silicagel GF254 (chất hấp phụ), dài 15 cm, rộng cm Dùng bút chì gạch nhẹ đường chấm gạch làm đường xuất phát, cách mép 1,5 cm đến cm cách bề mặt dung môi từ 0,8 cm đến cm - Dung môi triển khai: Hệ dung môi triển khai là: Ethanol 96% : Nước Tỷ lệ dung môi theo quy định: 120 : 20 Pha dung môi theo tỷ lệ quy định cho vào bình khai triển, đậy kín nắp để 11 yên nhiệt độ phòng (để bão hòa dung môi với môi trường bình) - Dung dịch thử: Hút ml dung dịch thuốc tiêm ống thuốc cho vào bình định mức 10 ml thêm nước cất vào tới vạch ta dung dịch thử - Dung dịch đối chiếu: Cân 50 mg acid ascorbic chuẩn, thêm nước cất vừa đủ 10 ml để có dung dịch đối chiếu có nồng độ 0,5% (Hàm lượng nguyên liệu acid ascorbic tinh khiết (C%): 99,2%) • Cách tiến hành: - Dùng mao quản chấm riêng biệt lên mỏng μl dung dịch cho vào bình triển khai (đặt mỏng gần thẳng đứng với bình triển khai) đậy kín để yên nhiệt độ không đổi dung môi triển khai mỏng đoạn (khoảng 11 cm đến 12 cm), lấy mỏng khỏi bình đánh dấu mức dung môi làm khô mỏng không khí kiểm tra ánh sáng tử ngoại bước sóng 254 nm Vết sắc ký đồ dung dịch thử phải Rf màu sắc với vết sắc ký dung dịch Vitamin C đối chiếu - Đại lượng đặc trưng cho mức độ di chuyển chất phân tích hệ số di chuyển Rf tính tỷ lệ khoảng cách dịch chuyển chất thử khoảng cách dịch chuyển dung môi: Rf = Trong đó: a: khoảng cách từ điểm xuất phát đến tâm vết mẫu thử (cm) b: khoảng cách từ điểm xuất phát đến mức dung môi đo đường vết (cm) Rf: có giá trị từ 3.4.2 Định lượng hoạt chất acid ascorbic - Mục đích: Kiểm tra xem hàm lượng thuốc tiêm có quy định không Nồng độ hàm lượng thuốc tiêm Vitamin C phải xác Đây yêu cầu riêng thuốc tiêm, mà đặt cho dạng thuốc khác, nhiên với thuốc tiêm nồng độ hàm lượng có ý nghĩa quan trọng: Do thuốc hấp thu hoàn toàn, tác dụng nhanh nên có sai số nồng độ, hàm lượng vượt xa liều định ghi nhãn dẫn đến tai biến 12 Hàm lượng thuốc tiêm Vitamin C phải đạt 95% - 105% so với lượng ghi nhãn - Phương pháp thực hiện: Phương pháp định lượng thể tích - Ưu điểm phương pháp: + Kết nhanh, xác + Đơn giản, dễ thực - Nhược điểm phương pháp: + Kết phương pháp phụ thuộc nhiều vào người kiểm nghiệm Dụng cụ - Hoá chất: - Thuốc tiêm Vitamin C - Dung dịch natri thiosulfat 0,1N - Dung dịch kali iodat 0,1N - Dung dịch formaldehyd 1% - Dung dịch acid hydrocloric 2% - Dung dịch kali iodide 10% - Dung dịch hồ tinh bột - Pipet 1ml, 4ml, 25ml - Buret 25ml - Các dụng cụ thuỷ tinh thông thường Phương pháp tiến hành - Chuẩn độ Vitamin C dung dịch kali iodat 0,1N - Lấy xác lượng chế phẩm tương ứng khoảng 200 - 250mg acid ascorbic, thêm 0,25ml dung dịch formaldehyde 1%, 4ml dung dịch acid hydrochloric 2%, 0,5ml dung dịch kali iodide 10% tạo thành dung dịch không màu, sau chuẩn độ dung dịch kali iodat 0.1N xuất màu xanh lam nhạt bền vững Lấy xác – ml chế phẩm Dung dịch màu xanh lam nhạt Hình 3.2 Sơ đồ định lượng thuốc tiêm Vitamin C 1ml dung dịch kali iodat 0,1N tương đương với 8.806 mg C6H8O6 Hàm lượng acid ascorbic chế phẩm tính theo công thức: X(mg)= 13 Trong đó: n: thể tích dung dịch chuẩn độ KIO3 0,1N (ml) k : hệ số hiệu chỉnh dung dịch KIO3 0,1N v: thể tích dung dịch thuốc tiêm Vitamin C (ml) - Chuẩn độ hệ số k dung dịch kali iodat 0.1N dung dịch natri thiosulfat 0.1N Hình 3.3 Sơ đồ chuẩn k dung dịch KIO3 0,1N 1ml dung dịch Na2S2O3 0,1N tương đương với 3.566 mg KIO3 Hệ số k dung dịch kali iodat 0,1N tính theo công thức sau: K= Trong đó: V0: thể tích dung dịch chuẩn độ Na2S2O3 0,1N (ml) 14 K0 = 1: hệ số hiệu chỉnh dung dịch Na2S2O3 0,1N V = 25ml: thể tích dung dịch KIO3 3.4.3 Kiểm tra hàm lượng tạp chất acid oxalic - Mục đích: Kiểm tra xem hàm lượng tạp chất acid oxalic thuốc tiêm Vitamin C có đạt yêu cầu không Trong trình điều chế thuốc tiêm Vitamin C sinh sản phẩm phụ acid oxalic Sản phẩm phụ xem tạp chất nguy hiểm thể bệnh nhân, acid oxalic dễ dàng kết hợp với kim loại canxi, sắt, natri, magie kali (thành phần dinh dưỡng quan trọng) thể để tạo thành tinh thể muối oxalat tương ứng, chúng chất kích thích ruột rối loạn liên quan tới thận (sỏi thận), bệnh gout, thấp khớp dẫn đến thiếu hụt chất dinh dưỡng Tuy nhiên, loại bỏ hoàn toàn sản phẩm phụ thuốc tiêm Vitamin C mà chấp nhận mức thích hợp Do đó, việc kiểm tra tạp chất acid oxalic thuốc tiêm khâu thiếu khâu kiểm nghiệm thuốc tiêm Vitamin C Hàm lượng acid oxalic thuốc tiêm Vitamin C: ≤ 0,3% - Phương pháp thực hiện: Phương pháp so sánh màu sắc dung dịch chuẩn thuốc tiêm Vitamin C - Ưu điểm phương pháp: + Nhanh chóng, đơn giản - + Dễ thực Nhược điểm phương pháp: + Kết mang tính tương đối + Độ xác không cao Dụng cụ - Hóa chất: - Ống nghiệm - Cân phân tích - Thuốc tiêm Vitamin C - Nước cất - Dung dịch natrihydroxyd 10% - Dung dịch acid acetic 2M - Dung dịch calciclorid 10% 15 - Acid oxalic Phương pháp tiến hành - Dung dịch thử: Lấy xác thể tích chế phẩm có chứa 250 mg acid ascorbic (5ml) trung hòa dung dịch natrihydroxyd 10% + 1ml dung dịch acid - acetic 2M + 0,5ml dung dịch calci clorid 10% Dung dịch so sánh: Hòa tan 70mg acid oxalic nước lấy 5ml dung dịch thu - + 1ml dung dịch acid acetic 2M + 0,5ml dung dịch calci clorid 10% Để yên so sánh dung dịch thử với dung dịch đối chiếu Lấy xác ml chế phẩm Hình 3.4 Sơ đồ xác định hàm lượng tạp chất acid oxalic 3.4.4 Kiểm tra độ vô khuẩn - Mục đích: kiểm tra xem thuốc tiêm có đạt yêu cầu độ vô khuẩn không, nhằm phát có mặt vi khuẩn, nấm mốc nấm men thuốc Đây yêu cầu đặc trưng thuốc tiêm Vì da niêm mạc hàng rào bảo vệ chống lại xâm nhập vi khuẩn tác nhân có hại khác bị vô hiệu hóa nơi tiêm Do đó, thuốc tiêm phải tuyệt đối vô khuẩn không mang tác nhân có hại có liên quan - Phương pháp thực hiện: phương pháp cấy trực tiếp - Ưu điểm phương pháp: + Cho biết số lượng VSV + Loại bỏ sai số chất vẩn + Kết phản ánh với sinh khối - Nhược điểm phương pháp: + Dễ nhầm lẫn, độ xác không cao + Không thích hợp cho huyền phù VSV có mật độ thấp Dụng cụ - Hóa chất: - Thuốc tiêm Vitamin C - Môi trường Fluid Thioglycolate - Môi trường Casein soya bean digest broth 16 • - Ống nghiệm có nắp Bình cầu Cốc đong Pipet Giấy lọc Cồn 960, 700 Tủ ấm MEMMERT BE 500 Tủ sấy MEMMERT Nồi hấp HYDROCLATVE MC10 Buồng cấy vô trùng BIO CLEAN BLENCH Phương pháp tiến hành: Chuẩn bị thử: Phòng thí nghiệm: Lau bàn, tường, giá trị để dụng cụ sàn nhà cồn 70 0, bật đèn tử ngoại 2h trước làm Chú ý: Về vệ sinh cá nhân, trước làm thí nghiệm phải rửa tay xà phòng tới khuỷu tay, thay quần áo, đội mũ che kín tóc, đeo trang, sát trùng lại tay cồn 700 bắt đầu làm thí nghiệm - Dụng cụ: + Đèn cồn, gòn + Bơm tiêm 10ml, kẹp, dao cưa, ống nghiệm có nắp, bình cầu (được đậy kín bọc giấy thiếc) phải sấy tủ sấy trước đem dùng nhiệt độ - 1700C giờ) Mẫu thử: + Kiểm tra kỹ ống thuốc tiêm, đảm bảo sản phẩm nằm lô, nguyên vẹn, đảm bảo không bị nứt vỡ rò rỉ,… Dùng cồn 70 để sát trùng phía sản phẩm đưa vào buồng cấy + Vào số ghi mã số, số lô sản xuất, tên thuốc, ngày thử, người thử,… để tiện - theo dõi Môi trường: + Môi trường thioglycolat để phát vi khuẩn hiếu khí kỵ khí + Môi trường Casein soya bean digest broth để phát vi khuẩn hiếu khí nấm mốc + Sắp xếp môi trường tìm vi khuẩn hiếu khí, kỵ khí, nấm mốc kiểm tra tủ ấm 370C/24h vào giá, đánh số ống tháo giấy bọc đầu môi trường + Tất dụng cụ môi trường để phòng vô trùng trước bật đèn tử ngoại để khử trùng phía ngoài, trừ mẫu thử 17 + Cân 1,2 g môi trường Fluid Thioglycolat, thêm nước cất vào vừa đủ 40ml khuấy cho tan hết cho vào ống nghiệm có nắp (2 ống nghiệm: ống 15ml, ống nghiệm làm mẫu trắng 10ml) + Cân 1,2 g môi trường Casein soya bean digest broth, thêm nước cất vừa đủ 40ml khuấy cho tan hết cho vào bình cầu (2 bình cầu: bình 15ml, bình làm mẫu trắng 10 ml) STT Thể tích đơn vị mẫu thử (ml) Thể tích mẫu thử cần Thể tích môi trường lấy để cấy vào ống tối thiểu cần lấy (ml) môi trường (ml) Dưới Toàn đơn vị đóng gói 15 1–5 ½ đơn vị đóng gói 15 – 20 20 20 – 100 40 100 – 500 10 80 + Lượng thuốc cấy vào không vượt 1/10 thể tích môi trường để tránh làm loãng chất dinh dưỡng + Cho môi trường vừa pha vào nồi hấp tiệt trùng 1210C thời gian khoảng đưa vào buồng cấy (đã lau cồn 960) - • Tiến hành thử: Lau tiệt khuẩn ống tiêm cồn 70 (thực lần: trước sau đưa vào - buồng cấy) Dùng bơm (hoặc pipet) lấy chế phẩm cấy vào môi trường loại môi trường theo tỉ lệ: - + 15ml môi trường Fluid Thioglycolat: 1ml thuốc tiêm Vitamin C + 15ml môi trường Casein soya bean digest broth: 1ml thuốc tiêm Vitamin C Lắc nhẹ cho ủ loại môi trường cấy thuốc tiêm với mẫu trắng 300C – 350C (môi trường Fluid Thioglycolat) 200C – 250C (môi trường Casein soya bean digest broth) Thường xuyên theo dõi môi trường cấy, thời gian 14 ngày 18 19 KẾT LUẬN Vitamin C chất thiết yếu cần cho thể Vitamin C thực hai chức đồng yếu tố (cofactor) enzym thúc đẩy phản ứng sinh hóa chống oxy hóa Chính vai trò quan trọng này, người ta nghiên cứu thuốc tiêm Vitamin C để tiêm trực tiếp vào thể nhằm tăng cường sức khỏe, phòng điều trị số bệnh đời sống ngày Để đảm bảo an toàn cho người sử dụng thuốc biện pháp kiểm nghiệm thuốc phải tiến hành thường xuyên với tất loại thuốc lưu hành thị trường Quy trình kiểm nghiệm phải thực cách nghiêm ngặt tổ chức uy tín, có đầy đủ trang thiết bị đại đội ngũ chuyên viên có trình độ cao Việc kiểm nghiệm gồm có việc lấy mẫu thuốc, kiểm nghiệm, xác định chất lượng thuốc nguyên phụ liệu làm thuốc tất sở từ khâu sản xuất, xuất nhập khẩu, bảo quản, lưu thông, phân phối thuốc phạm vi nước, đánh giá tương đương sinh học - sinh khả dụng độ an toàn thuốc Việc kiểm nghiệm dược phấm nói chung thuốc tiêm vitamin C nói riêng giúp kịp thời phát thuốc không đạt chất lượng, thuốc giả lưu hành thị trường để người người bệnh dùng thuốc an toàn, nâng cao chất lượng thuốc, phục vụ công tác bảo vệ chăm sóc nâng cao sức khỏe nhân dân 20 TÀI LIỆU THAM KHẢO Trần Tích (2007), Kiểm nghiệm thuốc, Nhà xuất giáo dục, Hà Nội Lê Thanh Mai (2005), Các phương pháp phân tích ngành công nghệ lên men, Nhà xuất khoa học kỹ thuật, Hà Nội Phạm Xuân Vượng (2007), Giáo trình Kiểm tra chất lượng thực phẩm, Nhà xuất Hà Nội http://ketoanthienung.vn/mau-bien-ban-kiem-nghiem-vat-tu-cong-cu-san-pham- hang-hoa.htm http://tailieu.vn/doc/kiem-nghiem-thuoc-part-1-974908.html http://123doc.org/document/1117048-nghien-cuu-phuong-phap-kiem-nghiem- thuoc-tiem-vitamin-c.htm 21 [...]... toàn sản phẩm phụ này trong thuốc tiêm Vitamin C mà chỉ có thể chấp nhận nó ở một mức thích hợp Do đó, việc kiểm tra tạp chất acid oxalic trong thuốc tiêm là một khâu không thể thiếu được của khâu kiểm nghiệm thuốc tiêm Vitamin C Hàm lượng acid oxalic trong thuốc tiêm Vitamin C: ≤ 0,3% - Phương pháp thực hiện: Phương pháp so sánh màu sắc của dung dịch chuẩn và thuốc tiêm Vitamin C - Ưu điểm của phương... môi trường đã cấy, thời gian ít nhất là 14 ngày 18 19 KẾT LUẬN Vitamin C là chất thiết yếu cần cho cơ thể Vitamin C thực hiện hai chức năng chính là đồng yếu tố (cofactor) của các enzym thúc đẩy các phản ứng sinh hóa và chống oxy hóa Chính vì vai trò quan trọng này, hiện nay người ta đã và đang nghiên cứu thuốc tiêm Vitamin C để có thể tiêm trực tiếp vào cơ thể nhằm tăng cường sức khỏe, phòng và điều... cho người sử dụng thuốc thì các biện pháp kiểm nghiệm thuốc phải được tiến hành thường xuyên với tất cả các loại thuốc lưu hành trên thị trường Quy trình kiểm nghiệm phải được thực hiện một cách nghiêm ngặt bởi các tổ chức uy tín, có đầy đủ trang thiết bị hiện đại cũng như đội ngũ chuyên viên có trình độ cao Việc kiểm nghiệm gồm có việc lấy mẫu thuốc, kiểm nghiệm, xác định chất lượng thuốc và nguyên... đương sinh học - sinh khả dụng và độ an toàn của thuốc Việc kiểm nghiệm dược phấm nói chung và thuốc tiêm vitamin C nói riêng giúp kịp thời phát hiện những thuốc không đạt chất lượng, thuốc giả lưu hành trên thị trường để người người bệnh được dùng thuốc an toàn, nâng cao chất lượng thuốc, phục vụ công tác bảo vệ chăm sóc và nâng cao sức khỏe nhân dân 20 TÀI LIỆU THAM KHẢO 1 Trần Tích (2007), Kiểm nghiệm. .. tạp chất acid oxalic 3.4.4 Kiểm tra độ vô khuẩn - Mục đích: kiểm tra xem thuốc tiêm có đạt yêu cầu về độ vô khuẩn không, nhằm phát hiện sự có mặt của vi khuẩn, nấm mốc và nấm men trong thuốc Đây là yêu cầu đặc trưng nhất của thuốc tiêm Vì da và niêm mạc là hàng rào bảo vệ chống lại sự xâm nhập của vi khuẩn và các tác nhân có hại khác bị vô hiệu hóa nơi tiêm Do đó, thuốc tiêm phải tuyệt đối vô khuẩn... 0,1N (ml) 14 K0 = 1: hệ số hiệu chỉnh của dung dịch Na2S2O3 0,1N V = 25ml: thể tích dung dịch KIO3 3.4.3 Kiểm tra hàm lượng tạp chất acid oxalic - Mục đích: Kiểm tra xem hàm lượng tạp chất acid oxalic trong thuốc tiêm Vitamin C có đạt yêu cầu không Trong quá trình điều chế thuốc tiêm Vitamin C đã sinh ra 1 sản phẩm phụ là acid oxalic Sản phẩm phụ này được xem là tạp chất nguy hiểm đối với cơ thể bệnh... thử: Lau tiệt khuẩn 3 ống tiêm bằng cồn 70 0 (thực hiện 2 lần: trước và sau khi đưa vào - buồng cấy) Dùng bơm (hoặc pipet) lấy chế phẩm cấy vào môi trường 2 loại môi trường theo tỉ lệ: - + 15ml môi trường Fluid Thioglycolat: 1ml thuốc tiêm Vitamin C + 15ml môi trường Casein soya bean digest broth: 1ml thuốc tiêm Vitamin C Lắc nhẹ cho đều ủ 2 loại môi trường đã cấy thuốc tiêm cùng với mẫu trắng của... đến tai biến 12 Hàm lượng của thuốc tiêm Vitamin C phải đạt 95% - 105% so với lượng ghi trên nhãn - Phương pháp thực hiện: Phương pháp định lượng thể tích - Ưu điểm của phương pháp: + Kết quả nhanh, chính xác + Đơn giản, dễ thực hiện - Nhược điểm của phương pháp: + Kết quả của phương pháp này phụ thuộc nhiều vào người kiểm nghiệm Dụng cụ - Hoá chất: - Thuốc tiêm Vitamin C - Dung dịch natri thiosulfat... (cm) Rf: chỉ có giá trị từ 0 1 3.4.2 Định lượng hoạt chất acid ascorbic - Mục đích: Kiểm tra xem hàm lượng của thuốc tiêm có đúng quy định không Nồng độ và hàm lượng của thuốc tiêm Vitamin C phải chính xác Đây không phải là yêu cầu chỉ riêng thuốc tiêm, mà cũng được đặt ra cho các dạng thuốc khác, tuy nhiên với thuốc tiêm thì nồng độ và hàm lượng có ý nghĩa cực kỳ quan trọng: Do thuốc hấp thu hoàn toàn,... thử: Phòng thí nghiệm: Lau bàn, tường, các giá trị để dụng cụ và sàn nhà bằng cồn 70 0, bật đèn tử ngoại 2h trước khi làm Chú ý: Về vệ sinh cá nhân, trước khi làm thí nghiệm phải rửa tay bằng xà phòng tới khuỷu tay, thay quần áo, đội mũ che kín tóc, đeo khẩu trang, sát trùng lại tay bằng cồn 700 khi bắt đầu làm thí nghiệm - Dụng cụ: + Đèn cồn, bông gòn + Bơm tiêm 10ml, kẹp, dao cưa, ống nghiệm có nắp,