Việc sử dụng các chế phẩm sinh học cho cây trồng có vai trò rất quan trọng trong nông nghiệpViệc sử dụng các chế phẩm sinh học cho cây trồng có vai trò rất quan trọng trong nông nghiệpViệc sử dụng các chế phẩm sinh học cho cây trồng có vai trò rất quan trọng trong nông nghiệpViệc sử dụng các chế phẩm sinh học cho cây trồng có vai trò rất quan trọng trong nông nghiệpViệc sử dụng các chế phẩm sinh học cho cây trồng có vai trò rất quan trọng trong nông nghiệpViệc sử dụng các chế phẩm sinh học cho cây trồng có vai trò rất quan trọng trong nông nghiệp
STUDIES ON SHELF-LIFE OF STREPTOMYCES SPP IN DIFFERENT CARRIER MATERIALS THÀNH VIÊN NHĨM • • • • Huỳnh Bích Tuyền 1513905 Nguyễn Võ Minh Trung 1513740 Phạm Thị Mai Linh 1511776 Võ Thị Xuân Hường 1511433 NỘI DUNG • • • • • Mục tiêu nghiên cứu Giới thiệu Streptomyces Phương pháp tiến hành Kết nghiên cứu Kết luận MỤC ĐÍCH NGHIÊN CỨU • Việc sử dụng chế phẩm sinh học cho trồng có vai trị quan trọng nơng nghiệp • u cầu: Thời gian lưu trữ lâu Khơng hoạt tính → Lựa chọn chất mang tối ưu cho chế phẩm STREPTOMYCES • Thuộc họ Actinomycetales • Là vi khuẩn Gram dương, thường sống đất thảm thực vật mục nát S violaceusniger STREPTOMYCES • Có khả điều hịa sinh học vùng đất quanh rễ thực vật (rhizosphere): Có thể cư trú bề mặt rễ Tiết kháng sinh Tổng hợp enzyme ngoại bào Làm giảm nồng độ phytotoxin (độc tố thực vật) (Tokala et al., 2002) CHẤT MANG • Chất mang hợp chất hữu không hữu tự nhiên tổng hợp có tác dụng làm nơi trú ngụ bảo vệ vi sinh vật chuyên tính chế phẩm từ lúc sản xuất đến lúc sử dụng •Các loại chất mang: than bùn, đất sét, talc, vermiculit, •Talc khống vật magie hydrat silicat có cơng thức hóa học là H2Mg3(SiO3)4 hay Mg3Si4O10(OH)2 Talc sử dụng rộng rãi dạng bở rời gọi là bột talc •Vermiculite hợp chất magiê nhơm khống silicat ngậm nước , chứa phần mica Vermicullite Than non Bột talc Than nâu PHƯƠNG PHÁP TIẾN HÀNH • Thử nghiệm vật liệu mang khác • Giữ giống vật liệu talc • Kiểm tra mật độ vi sinh vật mơi trường lỏng THỬ NGHIỆM • Đối tượng: Streptomyces exfoliatus S violaceusniger • Điều kiện ni cấy: môi trường Nutrient broth 48h nhiệt độ phịng (28±2độ C) • Chất mang: Talc, than bùn, xơ dừa, mùn cưa, vermiculite than nâu THỬ NGHIỆM • Kiểm tra mật độ ban đầu chủng Streptomyces • Kiểm tra mật độ sau 10 ngày hết 30 ngày • Phương pháp xác định: phương pháp gián tiếp môi trường thạch chứa dịch chiết nấm men • Sơ đồ khối: 10g CMC (Cacboxymethyl xenlulose) 1kg chất mang Trộn Chỉnh pH pH=7 15g calcium carbonat Khử trùng 400ml huyền phù chứa 7x cfu/ml Trộn Đóng gói -30 phút -2 ngày liên tục -Điều kiện vô trùng -100g/túi -28 -30 ngày TẠO CHẾ PHẨM TỪ CHẤT MANG TALC • Chủng Streptomyces ni mơi trường Nutrient broth máy lắc vịng với tốc độ 150 vòng/ phút nhiệt độ 28±2 độ C 72h • Thêm 400ml dịch huyền phù vào 1kg Talc có bổ sung 15g calcium carbonat 10g CMC • Sấy khơ tới độ ẩm 20% bao gói MƠI TRƯỜNG LỎNG • mơi trường lỏng: Mơi trường Nutrient broth mơi trường Nutrient broth có bổ sung glycerol (19:1) • Chứa mơi trường erlen có nút bơng (1/3 thể tích erlen) • Khử trùng nhiệt độ 121 độ C 15 phút • Kiểm tra mật độ vi khuẩn ngày 27 ngày 20 độ C Bảng 1: So sánh sức sống chế phẩm Streptomyces sp vật liệu mang khác Population of S.violaceusniger (10 cfu/g) at various days after inoculation (DAI)* 26.67 26 26.33 26.33 26 27.33 25.33 26.66 27 25.33 26 23.34 24 25.67 22 Population of S.exfoliatus (108 cfu / g) at various days after inoculation (DAI)* Mean Mean 10 20 30 24.33 26.08 28.33 29.67 28 25.33 27.83 20.67 23.84 27.67 25.33 23 21.33 24.33 22.67 24.92 28.33 28.67 26 23 26.50 22 25.25 28 29.33 26.34 23.67 26.84 19.67 23.25 27.67 26.33 24 21.34 24.84 26.67 26.33 25.67 26.22 23 24.00 19.33 21.45 Talc Lignite Vermiculite Peat soil Saw dust Decomposed coir pith Mean 10 20 30 23.67 27 27.83 26.67 27.67 24.33 25.28 CD: critical difference biểu thị khác có nghĩa giá trị Với bảng ngày carrier có CD=0.69 Các carrier ngày có CD=0.56 Các carrier khác ngày có CD=1.39 20 22.45 24.50 Bảng 2: Quần thể Streptomyces.sp qua thời kì khác mơi trường lỏng Day after inoculation (DAI)* Series number * Trung bình lần lặp Nutrient broth* Số cfu/ml (x10^9) Nutrient broth+Glycerol* S.violaceusniger S.exfoliatus S.violaceusniger S.exfoliatus 10.34 11 13.67 14.33 8.66 13.33 14 12 6.67 7.34 12 12.33 17 4.33 5.33 11.66 12 22 2.33 10.33 11.67 27 0.66 1.33 10.66 11 C.D.(P=0.05) 0.35 0.38 0.72 0.76 Biểu đồ độ giảm S.violaceusniger môi trường lỏng có khơng có glycerol Số cfu/ml (x10^9) 16 13.67 14 12 10.34 10 13.33 12 11.66 10.33 6.67 4.33 2.33 2 10.66 0.66 12 17 22 Ngày xét S violaceusniger S violaceusniger bổ sung glycerol 27 Biểu đồ độ giảm S.exofoliatus mơi trường lỏng có khơng có glycerol 16 14.33 14 14 12.33 12 Số cfu/ml (x10^9) 1211 10 11.67 8.66 7.34 5.33 1.33 2 11 12 17 Ngày xét S exfoliatus S exfoliatus bổ sung glycerol 22 27 KẾT LUẬN • Talc làm chất mang thích hợp cho chế phẩm Streptomyces sp Đặc biệt có ý nghĩa làm phân bón nơng nghiệp • Cách thức glycerol làm tăng khả sống xạ khuẩn điều kiện thường chưa thật rõ ràng Có thể xạ khuẩn sử dụng nguồn glycerol nguồn carbon thay mơi trường hết dinh dưỡng, nhờ cạnh tranh tổn thất Điều cần nghiên cứu thêm để ứng dụng bảo quản chế phẩm dạng lỏng TÀI LIỆU THAM KHẢO • M.Deivamani and M.Muthamilan, Studies on shelf-life of Streptomyces spp in different carrier materials, IJPPHT/7.1/16-20 ... ĐÍCH NGHIÊN CỨU • Việc sử dụng chế phẩm sinh học cho trồng có vai trị quan trọng nơng nghiệp • u cầu: Thời gian lưu trữ lâu Khơng hoạt tính → Lựa chọn chất mang tối ưu cho chế phẩm STREPTOMYCES... thích hợp cho chế phẩm Streptomyces sp Đặc biệt có ý nghĩa làm phân bón nơng nghiệp • Cách thức glycerol làm tăng khả sống xạ khuẩn điều kiện thường chưa thật rõ ràng Có thể xạ khuẩn sử dụng nguồn... mang hợp chất hữu không hữu tự nhiên tổng hợp có tác dụng làm nơi trú ngụ bảo vệ vi sinh vật chuyên tính chế phẩm từ lúc sản xuất đến lúc sử dụng ? ?Các loại chất mang: than bùn, đất sét, talc,