Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hóa học và tác dụng sinh học củ trà hoa vàng ở thái nguyên

BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI NGUYỄN THỊ HÀ LY MÃ SINH VIÊN: 1101318 NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT, THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ TÁC DỤNG SINH HỌC CỦA TRÀ HOA VÀNG Ở THÁI NGUYÊN KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ HÀ NỘI – 2016 BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI NGUYỄN THỊ HÀ LY MÃ SINH VIÊN: 1101318 NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT, THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ TÁC DỤNG SINH HỌC CỦA TRÀ HOA VÀNG Ở THÁI NGUYÊN KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người hướng dẫn: TS Hoàng Quỳnh Hoa DS Ngô Thị Thảo Nơi thực hiện: Bộ môn Thực Vật – Trường Đại học Dược Hà Nội HÀ NỘI – 2016 LỜI CẢM ƠN Với lòng biết ơn kính trọng sâu sắc, xin gửi lời cảm ơn tới TS Hoàng Quỳnh Hoa- Bộ môn Thực Vật, Trường Đại học Dược Hà Nội DS Ngô Thị Thảo- người thầy truyền cho tình yêu khoa học, dìu dắt từ ngày đầu làm nghiên cứu khoa học, người trực tiếp hướng dẫn tận tình bảo, giúp đỡ hoàn thành khóa luận Tôi xin gửi lời cảm ơn tới: - PGS TS Nguyễn Thị Kiều Anh – Phòng Quản lý khoa học, Trường Đại học Dược Hà Nội, DS Phạm Thị Linh Giang DS Nguyễn Thị Thùy Linh, người nhiệt tình hướng dẫn, giúp đỡ, giải đáp thắc mắc, khó khăn mà gặp phải trình thực khóa luận - Các thầy cô giáo chị kỹ thuật viên môn Thực Vật giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi cho suốt trình nghiên cứu thực nghiệm - Ban Giám Hiệu, phòng ban, thầy cô giáo, cán nhân viên trường Đại học Dược Hà Nội, người dạy bảo giúp đỡ suốt năm học - Các bạn sinh viên khóa 66 nghiên cứu làm đề tài môn Thực vật giúp đỡ, động viên thời gian nghiên cứu khoa học môn Cuối cùng, xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới gia đình bạn bè khích lệ, giúp đỡ cổ vũ suốt thời gian qua Hà Nội, ngày 12 tháng năm 2016 Sinh viên Nguyễn Thị Hà Ly MỤC LỤC DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT DANG MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH Trang ĐẶT VẤN ĐỀ Chương TỔNG QUAN 1.1 Vị trí phân loại đặc điểm thực vật chi Camellia L 1.1.1 Vị trí phân loại chi Camellia L .2 1.1.2 Đặc điểm thực vật chi Camellia L 1.1.3 Phân bố .2 1.1.4 Một số loài Trà hoa vàng Việt Nam 1.2 Thành phần hóa học .4 1.2.1 Nhóm alcaloid Camellia L 1.2.2 Nhóm tanin (các polyphenol) Camellia L 1.2.3 Nhóm tinh dầu Camellia L 1.3 Về tác dụng sinh học .6 1.3.1 Tác dụng chống oxy hóa 1.3.2 Tác dụng chống ung thư .6 1.4 Một số phương pháp định lượng polyphenol 1.5 Vài nét phương pháp bán định lượng sắc ký lớp mỏng phần mềm VideoScan .8 Chương ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Nguyên liệu, thiết bị 2.1.1 Nguyên liệu .9 2.1.2 Thiết bị 2.1.3 Dung môi, hóa chất 2.2 Nội dung, phương pháp nghiên cứu 10 2.2.1 Nghiên cứu đặc điểm hình thái .10 2.2.2 Nghiên cứu thành phần hóa học 11 2.2.3 Nghiên cứu số tác dụng sinh học 19 Chương KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 23 3.1 Kết nghiên cứu 23 3.1.1 Kết nghiên cứu đặc điểm thực vật 23 3.1.2 Kết nghiên cứu hóa học 27 3.1.3 Kết nghiên cứu tác dụng sinh học in vitro .35 3.2 BÀN LUẬN 36 3.2.1 Về thực vật 36 3.2.2 Về thành phần hóa học 37 3.2.3 Về tác dụng sinh học .39 KẾT LUẬN 40 ĐỀ XUẤT 40 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT VÀ KÝ HIỆU AOAC Association of Official Analytical Chemists - Hiệp hội nhà hoá phân tích thống DPPH 1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl DĐVN Dược điển Việt Nam EGCG Epigalo catechin gallat ELISA Enzyme-Linked Immuno Sorbent Assay - Phương pháp hấp thụ miễn dịch liên kết với enzyme GC Gas Chromatography - Sắc ký khí HPLC High Performance Liquid Chromatography - Sắc ký lỏng hiệu cao HPTLC High Performance Thin Layer Chromatography - Sắc ký lớp mỏng hiệu cao IC50 Inhibit Cellular Proliferation by 50% - Nồng độ ức chế 50% phát triển tế bào IUCN International Union for Conservation of Nature and Natural Resources - Liên minh Quốc tế Bảo tồn Thiên nhiên Tài nguyên Thiên nhiên OD Optical Density - Mật độ quang Rf Retention factor - Hệ số lưu giữ RSB Sulforhodamine B RSD Relative Standard Deviation - Độ lệch chuẩn tương đối TCVN Tiêu chuẩn Việt Nam TLC Thin Layer Chromatography - Sắc ký lớp mỏng VQG Vườn Quốc gia DANH MỤC CÁC BẢNG Trang Bảng 1.1 Danh mục số loài Trà hoa vàng Việt Nam Bảng 2.1 Đặc điểm hình thái mô tả loài chi Camellia sp 10 Bảng 2.2 Xây dựng dãy dung dịch chuẩn acid gallic 16 Bảng 3.1 Kết định tính 27 Bảng 3.2 Giá trị Rf màu sắc vết sắc ký đồ 28 Bảng 3.3 Độ hấp thụ dãy chuẩn 29 Bảng 3.4 Kết khảo sát độ lặp lại phương pháp mẫu nghiên cứu 30 Bảng 3.5 Kết xây dựng đường chuẩn EGCG 32 Bảng 3.6 Kết khảo sát độ lặp lại mẫu Trà hoa vàng Thái Nguyên 33 Bảng 3.7 Kết khảo sát độ phương pháp 34 Bảng 3.8 Kết bán định lượng EGCG 34 Bảng 3.9 Kết thử hoạt tính chống oxy hóa mẫu thử 35 Bảng 3.10 Kết ức chế tế bào ung thư in vitro Trà hoa vàng Thái Nguyên 36 Bảng 3.11 Một số đặc điểm tương đồng hình thái Camellia euphlebia Trà hoa vàng Thái Nguyên 37 DANH MỤC CÁC HÌNH Trang Hình 1.1 Công thức cấu tạo số loại catechin Hình 2.1 Sơ đồ bước tiến hành định lượng polyphenol toàn phần 17 Hình 3.1 Hình thái mẫu Trà hoa vàng Thái Nguyên 23 Hình 3.2 Vi phẫu Trà hoa vàng Thái Nguyên 25 Hình 3.3 Vi phẫu thân Trà hoa vàng Thái Nguyên 26 Hình 3.4 Sắc ký đồ chuẩn EGCG mẫu thử màu thuốc thử vanilin - H2SO4 ánh sáng thường 28 Hình 3.5 Hình ảnh quét phổ dung dịch chuẩn acid gallic nồng độ 50 µg/ml 29 Hình 3.6 Đường chuẩn acid gallic 30 Hình 3.7 Kết chồng pic mẫu thử, mẫu chuẩn mẫu trắng 31 Hình 3.8 Sắc ký đồ dãy chuẩn EGCG 32 Hình 3.9 Đường chuẩn EGCG 32 Hình 3.10 Sắc ký đồ khảo sát độ lặp lại mẫu Trà hoa vàng Thái Nguyên 33 Hình 3.11 Sắc ký đồ khảo sát độ phương pháp 33 Hình 3.12 Đồ thị phụ thuộc Tỷ lệ gốc tự bị trung hòa theo nồng độ mẫu thử35 ĐẶT VẤN ĐỀ Chi Trà (Camellia L.) chi lớn họ Chè (Theaceae), tiếng với Trà xanh (C Sinensis (L.) O Ktze) sử dụng sống từ lâu đời vai trò làm thức uống thực phẩm chức làm thuốc với tác dụng sinh học tốt [37] Bên cạnh đó, chi Camellia L có nhiều loài khác có hoạt tính sinh học đáng quan tâm tác dụng chống oxy hóa, tác dụng chống ung thư, tác dụng kháng nấm, kháng virus, v.v [47] Trà hoa vàng nhóm số loài thuộc chi Camellia L với màu vàng đặc trưng hoa Đây nguồn gen vô quý chi Camellia L gặp miền Bắc Việt Nam Nam Trung Quốc [11] Ở Việt Nam, Trà hoa vàng lần người Pháp phát miền Bắc vào năm 1910 [11] Tuy nhiên, năm gần đây, Trà hoa vàng quan tâm nghiên cứu khai thác để sử dụng Mặc dù vậy, nghiên cứu thành phần hóa học tác dụng sinh học loài Trà hoa vàng hạn chế Cho đến nay, nghiên cứu Trà hoa vàng tập trung chủ yếu vào phần thực vật với việc tìm loài Trà hoa vàng Việt Nam Ước tính có khoảng 30 loài Trà hoa vàng công bố có Việt Nam, tập trung chủ yếu miền Bắc (VQG Tam Đảo) số khu vực miền Nam (VQG Cát Tiên, VQG Bù Gia Mập) [31], [32], [34] Tuy nhiên, số khu vực phát có Trà hoa vàng chưa nghiên cứu Ba Chẽ (Quảng Ninh) Yên Ninh (Thái Nguyên), v.v Từ thực tế đó, đề tài “ Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hóa học tác dụng sinh học Trà hoa vàng Thái Nguyên” thực nhằm đạt mục tiêu sau: - Mô tả đặc điểm hình thái cấu tạo giải phẫu Trà hoa vàng Thái Nguyên - Xác định thành phần hóa học mẫu nghiên cứu, định lượng thành phần hóa học mẫu nghiên cứu - Nghiên cứu tác dụng chống oxy hóa tác dụng độc tế bào ung thư in vitro mẫu nghiên cứu Chương TỔNG QUAN 1.1 Vị trí phân loại đặc điểm thực vật chi Camellia L 1.1.1 Vị trí phân loại chi Camellia L Theo hệ thống phân loại Takhtajan công bố năm 2009 [22], chi Trà hoa vàng (Camellia L.) có vị trí phân loại sau: Ngành: Ngọc lan (Magnoliophyta) Lớp: Ngọc lan (Magnoliopsida) Phân lớp: Sổ (Dilleniidae) Bộ: Trà (Theales) Họ: Trà (Theaceae) 1.1.2 Đặc điểm thực vật chi Camellia L Theo tài liệu Từ điển thực vật thông dụng Võ Văn Chi [7], sách Trà hoa vàng Trần Ninh [11] chi Camellia L có đặc điểm: Cây bụi nhỏ, thường xanh, cành nhẵn hay có lông Lá thường có cuống, đơn, mọc so le, kèm; chóp nhọn, có đầu nhọn kéo dài thành đuôi; gốc hình nêm hẹp, nêm rộng, tròn hay hình tim; mép có cưa nhọn tù Hoa đều, lưỡng tính, kích thước lớn nhỏ, mọc đơn độc nách đầu cành Hoa màu đỏ, trắng vàng Cuống hoa ngắn gần không Lá bắc - 10, mọc xoắn cuống hoa Cánh hoa - 19, hợp phần gốc với vòng nhị Nhị nhiều, dính với phía gốc, vòng nhị phía rời nhau, nhị dài Bầu trên, - ô, vòi nhụy - 5, dạng sợi, rời dính nhau; bầu vòi nhụy nhẵn hay phủ lông mịn Quả nang, hình cầu dẹt hình trứng, khô chẻ ô từ xuống thành 3, hay mảnh; có trụ hay không; vỏ dày hay mỏng, hóa gỗ Hạt đến nhiều hạt ô, hình cầu, nửa cầu hay hình nêm, vỏ hạt màu nâu, nâu hạt dẻ nhạt nâu hồng, phủ lông hay nhẵn 1.1.3 Phân bố Trên giới, chi Camellia L có khoảng 280 loài, phân bố chủ yếu nhiệt đới nhiệt đới, có nguồn gốc khu vực miền đông miền nam châu Á, từ dãy Himalaya phía đông tới Nhật Bản Indonesia Cho tới nay, có nơi giới có loài thuộc chi Đó nước châu Á (Ấn độ, Bangladesh, Đài PHỤ LỤC Danh mục phụ lục Phụ lục Giấy chứng nhận mã số tiêu Phụ lục Giấy Giám định tên khoa học Phụ lục Đặc điểm hình thái số loài Trà hoa vàng Việt Nam Bảng Đặc điểm sinh dưỡng số loài trà hoa vàng Camellia sp Việt Nam Bảng Đặc điểm quan sinh sản số loài trà hoa vàng Camellia sp Việt Nam Phụ lục Sắc ký đồ dãy chuẩn EGCG mẫu nghiên cứu triển khai với pha động Chloroform – aceton – acid formic (5:5:1), soi ánh sáng tử ngoại bước sóng 254nm 366nm Phụ lục Giấy chứng nhận mã số tiêu Phụ lục Giấy giám định tên khoa học Phụ lục Đặc điểm hình thái số loài Trà hoa vàng Việt Nam Bảng Đặc điểm sinh dưỡng số loài trà hoa vàng Camellia sp Việt Nam Tên loài Tên thường gọi Camellia bugiamapensis Trà Bù Orel, Curry, Luu & Gia Mập Q.D Phân bố Cành non Bình Phước Nhẵn Camellia capitata Orel Trà đầu Lâm Đồng Nhẵn Camellia cattienensis Orel Trà Cát Tiên Lâm Đồng Nhẵn Camellia crassiphylla Ninh et Hakoda Camellia cucphuongensis Ninh & Rosmann Camellia Chrysantha (Hu) Tuyama Camellia chrysanthoides Hung T Chang Trà vàng dày Trà mi Cúc Phương Trà hoa vàng Vĩnh Phúc Nhẵn Ninh Bình Nhẵn Quảng Ninh Nhẵn Quảng Ninh Nhẵn Cuống Phiến Gốc Số cặp gân bên - 1,5 cm, nhẵn Dài 18 - 27,5 cm, rộng 12 - 14 cm Tròn / tù - 11 - 1,5 cm, lông mịn màu trắng cm, nhẵn, bị che phần gốc 1,7 – 2,5 cm, nhẵn Dài 24 - 27 cm, rộng 10 - 12 cm, mặt có lông Hình tim / tù 14-16 Dài 8,5 - cm, rộng 3,5-3,6 cm Có tai 15-18 Dài 17,3 - 25,1 cm, rộng 9,1- 13 cm Tròn / tim nông 8- Dài - 12 cm, rộng 2,5-4,5 cm Tròn / nêm 7-9 rộng Dài 14 - 16,5 cm, rộng - cm Dài 11 - 14,5 cm, rộng - 4,5 cm Hình nêm / tim 8-9 Hình nêm 10 - 11 0,6 - 0,7 cm, nhẵn 0,6 - 0,8 cm, nhẵn Camellia dalatensis V.D.Luong, Ninh & Hakoda Camellia dilinhensis Tran & Luong Camellia dongnaiensis Orel Camellia dormoyana (Pierre) Sealy Camellia euphlebia Merr ex Sealy Trà mi Đà Lạt Trà mi Di Linh Trà hoa vàng Đồng Nai Trà vàng Đo môi Trà gân Camellia flava (Pitard) Sealy Camellia fleuryi (A Chev.) Sealy Camellia gilberti (A.Chev.) Sealy Chè sốp Trà vàng Ginbéc Camellia hakodae Ninh, Trà vàng Lâm Đồng Lông dày 0,7 -1,2 cm, có lông Dài 40 - 45 cm, rộng - 11 cm Lâm Đồng Nhẵn 1,4 - 1,9 cm Dài 16,0 - 24,5 cm, rộng 5,5 - 9,5 cm Hình nêm - 14 Lâm Đồng Nhẵn - 1,5 cm Dài 44 cm, rộng 14 cm Tròn 22 Tròn 10 Hơi tù - 13 Tròn - 15 Nghệ An, Nhẵn Đồng Nai Bắc Giang, Nhẵn Quảng Ninh 0,4 - 1,0 cm 0,9 - 1,3 cm Ninh Bình Nhẵn 0,2 - 0,5 cm, có lông Vĩnh Phúc, Khánh Hòa Nhẵn 0,7 -1,0 cm, nhẵn Có Vĩnh Phúc, lông 0,3 - 0,8 cm, Quảng Ninh tận có lông , Phú Thọ Vĩnh Phúc Nhẵn 0,8 -1,5 cm, Dài 11-10 cm, rộng 4-8 cm Dài - 15 cm, rộng - cm Dài - 12 cm, rộng 2,5 -5,5, gân mặt có lông Dài - 11 cm, rộng 3,5 - 3,7 cm Hình nêm 6-7 / nêm rộng Dài - 11,5 cm, rộng - 4,8 cm, mặt Hình nêm có lông dọc gân 6-7 Dài 23,5 - 29 cm, 12 - 16 Hình nêm Tr Camellia hirsuta Hakoda et Ninh Hakoda Trà vàng nhiều lông Vĩnh Phúc, Thái Nguyên nhẵn rộng - 11,5 cm / tròn Lông dày 0,4 - 0,8 cm, có lông dày Dài 16 - 17,5 cm, rộng 4,7 - 5,5 cm Hình nêm / tim nông 10 - 13 Dài 18 cm, rộng 3-4 cm Trái tim 20 - 23 Dài 22,0 - 27,5 cm, rộng 9,0-11,0 cm Tù - 10 Dài 16 - 20 cm, rộng 5-9cm Tù / tròn 16 - 18 Tròn 10 - 14 Tù 24 Hình nêm 10 - 12 Camellia inusitata Orel, Curry & Luu Trà mi cành dẹt Lâm Đồng Nhẵn 0,6 - 0,8 cm, bị che phần gốc Camellia luteocerata Orel Trà hoa vàng trắng Lâm Đồng Nhẵn - cm, nhẵn Camellia luteopallida Luong, T.Q.T Nguyen & Luu Camellia ninhii Luong & Le Camellia oconoriana Orel, Curry & Luu Camellia petelotii (Merr.) Sealy Trà âucon- nơ Trà vàng Pêtêlô Camellia phanii Hakoda et Ninh Trà vàng Phan Camellia sonthaiensis Trà Sơn Đăk Nông Nhẵn Lâm Đồng Có lông Lâm Đồng Nhẵn Vĩnh Phúc Nhẵn Vĩnh Phúc, Thái Nguyên Khánh Hòa 0,5 - cm, nhẵn, phần bị che gốc 0,4 - 0,7 cm, có lông - 2,5 cm, xoắn, nhẵn 1,3 - cm, nhẵn Dài 14 - 20 cm, rộng - cm Dài 30 - 36,5 cm, rộng - 8,5 cm Dài 13,5 - 17 cm, rộng - cm Nhẵn - 1,2 cm, nhẵn Dài 14,5 - 16 cm, rộng 6,8 - 7,7 cm Hình nêm - 10 Nhẵn - 1,2 cm, Dài 17 - 30 cm, rộng Tù 13 - 18 Luu, Luong, Q.D Nguyen & T.Q.T Nguyen Camellia tamdaoensis Hakoda et Ninh Camellia tienii Ninh, Tr Camellia tonkinensis (Pit.) Cohen-Stuart Thái nhẵn -5,6 cm Trà vàng Tam Đảo Vĩnh Phúc Lông mịn 0,7 - 0,9 cm, nhẵn Dài 14,0 - 15,5 cm, rộng 5,0 - 7,0 cm Hải đường vàng Vĩnh Phúc Nhẵn 0,9 - 1,8 cm, nhẵn Dài 19,8 - 26 cm, rộng 7,2 - 11,3 cm Hòa Bình, Hà Tây Nhẵn 0,3 - 0,5 cm, nhẵn Dài - 13 cm, rộng 2,5 - cm Hình nêm / gần tròn Hình tim, có tai, tai có cưa Tù 7-9 13 - 14 - 10 Bảng Đặc điểm quan sinh sản số loài trà hoa vàng Camellia sp Việt Nam Tên loài Camellia bugiamapensis Orel, Curry, Luu & Q.D Đường kính hoa nở 5-6 cm - 5,5 Camellia capitata Orel cm Camellia cattienensis Orel Camellia crassiphylla Ninh et Hakoda 5,0 - 7,0 cm - 4,3 cm Cuống hoa Lá bắc Đài 0,3 0,5 cm 4, có lông mặt Không có cuống - 10, có lông mặt 2, có lông mịn 1,0 1,2 cm 0,3- 0,5 - 3, có cm lông 5, có lông Tràng Chỉ nhị Bộ nhụy - 11 Nhiều Bầu ô, 100 vòi nhụy -2,5 cm, liền, nhẵn 120 150, cm, - 10 Hạt Bầu ô, - 2,5 vòi nhụy cm rời, có lông 50 - 100, 2,5- 2,5 cm 1,6 - 1,7 cm Quả Chưa thấy Chưa thấy Bầu ô, có Chưa lông thấy Chưa thấy Bầu ô, vòi nhụy rời Dài 2,2 -2,4 cm, -3 mặt, không lông 4,5 4,7 cm 0,5 -0,7 cm, có lông Camellia cucphuongensis Ninh & Rosmann Camellia chrysantha (Hu) Tuyama Camellia chrysanthoides - 3,5 cm, 0,5 cm - 4,5 cm Gần không cuống Camellia - 4,5 dalatensis V.D.Luong, cm Ninh & Hakoda Camellia dilinhensis Tran & Luong 3,5 3,7 cm Camellia dongnaiensis Orel 4,0 - 7,5 cm Camellia dormoyana (Pierre) Sealy 5,5 cm 5-6 2,0 -2,5 cm 0,5 0,7 cm 5 2-3 Không cuống 4, có lông mặt 2,4 cm Bầu - Chưa ô, vòi nhụy thấy rời Chưa thấy 1,8 cm Bầu ô, vòi nhụy rời Chưa thấy Chưa thấy 8-10 1,4 cm Bầu ô, vòi nhụy rời 4,5 5,5 cm Chưa thấy 8-9 Nhiều 350, 0,5- 0,9 cm Bầu ô, có 3,5 - lông, vòi cm nhụy rời 300 500, 1,52,0 cm Bầu - ô 2.5 cm Bầu ô, vòi nhụy dính - 10 11 - 6, có lông 12 mặt Hình nêm, dài 11 mm, có lông Chưa thấy Chưa thấy 3,5 cm Hình bán cầu, Camellia euphlebia Merr ex Sealy Camellia flava (Pitard) Sealy 5,0 - 6,0 cm 4,0 - 5,0 cm 0,5 0,7 5, mặt - 8, có có lông mịn lông 7-9 mặt mịn màu nâu trắng 0,5 -1,0 5-6 cm cm Gần không cuống 8, có lông màu vàng rơm mặt mép Camellia gilberti (A.Chev.) Sealy cm 0,8-1,0 cm - 3, có lông Camellia hakodae 6-8 cm 1,0 - - 6, Camellia fleuryi (A Chev) Sealy nửa Bầu ô, - 3,5 cm Vòi nhụy rời 3,5 - cm 5-6 11- 15 Bầu ô, có lông, vòi - 3,5 - 2,4 cm ngụy rời, cm có lông 9, giống bắc 5, có lông mặt 0,8 - 1,0 cm 0,4 cm 16 - 17, - 4,5 5, mặt có lông 5, mép Bầu ô, vòi nhụy rời Bầu - màu nâu Màu nâu, đường kính 1,5 - cm Dài 1,2 -1,5 cm 2,5 cm Chưa thấy Chưa thấy Chưa thấy 5-6 Dài 2,2 1,2 cm Ninh, Tr Camellia hirsuta Hakoda et Ninh -5 cm mép mặt có lông 0,5 cm - 10, có lông mặt mép Camellia inusitata Orel, Curry & Luu 2,0 - 2,6 cm 1,1 1,3 cm - 2, nhẵn, ban đầu có lông, sau nhẵn Camellia luteocerata Orel 5,6 - 6,5 cm 0,1 0,3 cm Camellia luteopallida Luong, T.Q.T Nguyen & Luu 5-6 cm Gần không - 9, có lông mặt mặt có lông - 6, có lông mặt có lông mặt - 12, có lông mép cm, có lông ô, vòi nhụy cm rời 2,6 cm, có lông dày Bầu ô, có lông, vòi nhụy rời, có lông thưa phần gốc 5, 50 - 70, 0,7 - 1,0 cm 11 -13 1,5 - 2,0 cm 12 - 14, 1,0 - 1,3 có lông cm màu nâu Bầu ô, có lông, vòi nhụy dính gốc 1/3 Bầu ô, lông, vòi nhụy dính 2/3 Bầu ô, vòi nhụy dính cm, có lông 2,5 4,2 cm, mang bắc đài tồn Dài 1,6 – 1,8 cm, màu nâu, nhẵn 3-3,5 cm Chưa thấy Chưa thấy Chưa thấy Chưa thấy Chưa thấy cuống mặt Camellia ninhii Luong - 3,5 cm & Le Camellia oconoriana Orel, Curry & Luu Camellia petelotii (Merr.) Sealy Camellia phanii Hakoda et Ninh Camellia sonthaiensis Luu, Luong, Q.D Nguyen & T.Q.T Nguyen - cm 3,0 4,0 cm - 5-6 1,0 1,2 cm - 10, mép mặt có lông 5, có lông bắc 4,0 - 6,0 cm 1,0 1,5 cm - 6, có lông mép 5, mặt có lông mịn cm Gần không cuống 4-7 cm 2-3 3-4 10-13 mm từ gốc - 11 0,4 - 1,0 cm 300 350, 1,6 1,8 cm 14,cánh có lông mịn màu 2,3 cm trắng mặt 14 - 19, hình có 2,5 cm, lông có lông hai mặt 260, 1,3 - 1,6 5, nhẵn cm nhị vòng - 3,5 cm Bầu - ô, có lông mịn, vòi nhụy rời - 4,5 cm Chưa thấy bầu ô, vòi nhụy rời, không lông 4-5 cm, mang bắc đài Dài cm, có lông bầu ô, vòi nhụy rời 5,5 - cm Dài 1,8 cm, có lông - ô, có lông, vòi nhụy rời - 3,5 cm Chưa thấy Camellia tamdaoensis Hakoda et Ninh Camellia tienii Ninh, Tr Camellia tonkinensis (Pit.) Cohen-Stuart 3,5 - cm 5-6 cm - cm 0,5 0,7 cm 5, có lông mặt mép 0,9 cm 5, có lông mép 5, có lông mép 0,7 cm 5, mặt có lông màu vàng 5, mặt có lông - 12 màu vàng 11 - 12, có lông mặt 14, có lông mặt có lông thưa thớt 1,5 - 1,7 cm, nhị bên có lông gốc 3,3 cm 2,5 cm, có lông - ô, không lông Chưa thấy Chưa thấy bầu - ô, vòi nhụy Chưa rời, không thấy lông Chưa thấy Bầu ô có lông màu vàng nhạt Dày 1mm, khô màu vàng 2,5 - cm Phụ lục Sắc ký đồ dãy chuẩn EGCG mẫu Trà hoa vàng Thái Nguyên khai triển với pha động Chloroform – aceton – acid formic (5:5:1) soi ánh sáng tử ngoại Hình 3.1 Sắc ký đồ ánh sáng UV 245nm Hình 3.2 Sắc ký đồ ánh sáng UV 366 n