báo cáo tiểu luận virus gumboro

báo cáo tiểu luận virus gumboro báo cáo tiểu luận virus gumboro báo cáo tiểu luận virus gumboro báo cáo tiểu luận virus gumboro báo cáo tiểu luận virus gumboro báo cáo tiểu luận virus gumboro báo cáo tiểu luận virus gumboro báo cáo tiểu luận virus gumboro báo cáo tiểu luận virus gumboro báo cáo tiểu luận virus gumboro

ĐẠIHỌC NÔNG LÂM TPHCM Khoa Chăn nuôi thú y VI SINH THÚ Y Báo cáo Virus Gumboro (IBDV) GVHD: TS Trần Thị Bích Liên DANH SÁCH NHÓM Họ tên Trần Hoàng Duy Mai Văn Tuấn Phạm Trọng Nghĩa MSSV 14112045 14112353 14112199 Lớp DH14TYB DH14TYA DH14TYA I II III Lịch sử tình hình bệnh Lịch sử tình hình bệnh giới − Bệnh Cosgrove phát năm 1962 trại gà làng Gumboro, bang Delaware, Mỹ Sau công bố Mỹ, bệnh phát Châu Âu, Châu Á, Chây Phi, Nam Mỹ trở thành vấn đề lớn giới − Tại Châu Âu, người ta phát bệnh bệnh Gumboro sớm Ở nước Anh vào năm 1962 Năm 1966 bệnh phát Ý Năm 1967 phát Đức… − Tại châu Á năm 1966 phát bệnh Gumboro Isreel, đến năm 1973, bệnh bắt đầu xuất đàn gà công nghiệp Thái Lan − Năm 1986, người ta đồng thời phát virus Gumboro có độc lực cao nhiều quóc gia châu Âu : Hà Lan, Anh, Pháp, Tây Ban Nha Các tác giả cho virus Gumboro có độc lực mạnh từ ổ dichjlan truyền thành vùng dịch − Tại Châu Phi, năm 1986 bệnh Gumboro xảy quanh năm Nigieria − Năm 1991, Ai Cập, Malaysia, Kenia, Singapore, nhà nghiên cứu công bố dịch phân lập virus cường độc Tình hình bệnh Việt Nam − Ở nước ta, từ thức phát vào đầu năm 1980 đến nay, bệnh xảy ngày trầm trọng toàn diện toàn quốc, gây thiệt hại lớn cho ngành chăn nuôi gia cầm − Đến có nhiều nghiên cứu bệnh Gumboro Việt Nam, bẹnh tiếp tục xảy chưa khống chế cách triệt để mối đe dọa lớn Giới thiệu − Bệnh gumboro virus Gumboro gây − Virus Gumboro hay gọi Infectious Bursal Disease Virus (IBDV) − Đây RNA virus thuộc họ Birnaviridae, giống Avibinavirus, Loài Infectious bursal disease virus Cấu trúc phân tử virus Gumboro − Virus IBDV bao gồm hệ thống gen chứa sợi RNA phân bố phân đoạn khác phân đoạn A phân đoạn B − Phân đoạn B có độ dài khoảng 2800 nucleotide, chứa cấu trúc gen mã hóa cho tổng hợp protein VP1 VP1 có hoạt tính sinh học chịu trách nhiệm enzyme RNA-polymerase virus Enzyme có vai trò xúc tác trình tổng hợp nguyên liệu RNA , vật liệu di truyền virus − Phân đoạn A hệ gen có độ dài 3200 nucleotide bao gồm phận gen tổng hợp Bộ phận thứ cấu trúc đơn gen mã hóa cho tiền protein có phân tử lượng 108kDa trình phân cắt thành protein cấu trúc có tên gọi VP1, VP2, VP4 Bộ phận thứ mã hóa cho loại protein khác có tên gọi VP5 − Protein VP2 VP3 protein cấu trúc , cấu tạo nên thành phần virus (capsid) Trong cấu trúc capsid, VP2 trình diện lên bề mặt, thành phần protein bề mặt, VP3 lặn sâu vào bên VP4 protase-một loại enzyme có chức phân cắt protein có vai trò cắt rời chuỗi polypeptide toàn phân đoạn A tổng hợp gọi protein chung hay protein đa phần Protein tổng hợp toàn cấu trúc đa gen phân đoạn A − Protein VP2 chứng minh đoạn protein có tính chất kháng nguyên tính chất bảo vệ virus, Vp2 đại diện cho tính chất độc lực tính gây bệnh virus − VP3 thành phần protein làm khung cấu tạo nên capsid có tính kháng nguyên., kích thích thể sản sinh kháng thể kết tủa mà virus IBDV thuộc serotype kích thích sản sinh VP3 dễ dàng cho phản ứng chéo có tác dụng nhận biết virus IBDV với virus họ khác IV Đặc điểm hình thái phân loại a) Đặc điểm hình thái − Virus Gumboro có dạng hình khối, gồm 20 mặt đều, đường kính khoảng 50-60nm Một tế bào bị nhiễm chúng chưa hay vài tập hợp virus chúng xếp đặn cạnh nhau, giống tổ ong nguyên sinh chất tế bào − Virus Gumboro không cso vỏ bọc mà dạng virus trần, bao gồm lõi chứa sợi RNA Bao quanh hệ gen RNA lớp vỏ protein (capsid) Virus Gumboro gồm 32 đơn vị hình thái, đơn vị hình thái gọi capsomer, hợp thành vỏ bọc capsid bao lấy RNA bên b) Các type, chủng virus Gumboro − Virus Gumboro có serotype Serotype gây bệnh gà Tùy vào mức độ độc lực, người ta chia thành nhóm nhóm − + + + + V − − − − VI cường độc, nhóm cổ điển, nhóm biến đổi nhóm nhược độc chủng serotype có mức độ kháng nguyên không đồng Một số chủng virus Gumboro sử dụng giới chủng cường độc thuộc type bao gồm : Chủng CVL 52/70 sử dụng làm chủng cường độc chuẩn theo đề nghị tổ chức dịch tễ thú y giới (OIE) Chủng ST-C, D78, IM, 2512, MC, MT… phân lập Mỹ trở nên chủng cường độc chuẩn Gumboro Chủng LVN Lukert, chủng VNJO Pháp sử dụng làm vaccine vô hoạt Các chủng nhược độc thuộc type bao gồm chủng SAL, BB, Lukert dùng để chế vaccine Gumboro nhược độc Cơ chế phân tử trình nhân lên virus Sau virus được thụ thể bề mặt màng tế bào tiếp nhận virus thực trình xâm nhập sâu Tiếp theo virus lột vỏ capsid để giải phóng hệ gen RNA Quá trình thực virus chép thông tin tổng hợp VP1, VP1 có giá trị làm enzyme xúc tác cho trình Tiếp theo tổng hợp loại protein chung từ phân đoạn A RNA hệ gen virus Protein gọi tiền protein có phân tử lượng 108 kDa Trong giai đoạn , protein chung phân cắt thành hai loại protein khác Một loại VP2a , loại thứ VP3 VP4 Giai đoạn gọi giai đoạn phân cắt Tieos theo, VP2a cắt tiếp thành VP2b có phân tử lượng nhỏ Nuôi cấy a) Nuôi cấy phôi gà − Phôi gà 10-11 ngày, tiêm bệnh phẩm chứa virus vào màng xoang niệu, xoang niệu mô, vào túi long đỏ Trong phương pháp tiêm vào màng niệu tốt Sau tiêm, phôi chết từ ngày thứ 3-5, bệnh tích chủ yếu sung huyết, xuất huyết màng niệu, màng dày lên, phôi bị sung huyết, thùy thủng vùng bụng, có điểm xuất huyết da, da đùi, đầu bên sườn phôi, gan sung có điểm xuất huyết hoại tử b) Nuôi cấy môi trường tế bào Bao gồm tế bào có nguồn gốc từ phôi tế bào phôi gà, tế bào phôi gà tây, tế bào phôi vịt tế bào thận thỏ, thận khỉ… virus không thích ứng nuôi cấy vào môi trường tế bào, mà pahir qua vài đợt chuyển tiếp đời virus thích ứng gây bệnh tích cho tế bào cấy chuyển liên tiếp nhiều đợt qua môi trường tế bào độc lực virus giảm dần sử dụng giống virus làm vaccine Nuôi cấy gà thí nghiệm − Dùng gà 3-6 tuần tuổi để nuôi cấy virus, chọn gà chưa tiêm phòng Gumboro kiểm tra huyết gà kháng thể Gumboro Gà tiêm virus sau 24-72 virus nhân lên quan Lympho đặc biệt túi Fabricious, làm túi bị viê, sung, tổ chức túi bị phá hủy, biến màu, túi tang kích thocws trọng lượng thu hoạch túi Fabricious vào thời điểm 48-72 sau gây nhiễm thu lượng lượng virus lớn độc lực mạnh − c) Sức đề kháng virus − Virus có sức đề kháng cao tự nhiên ,đặc tính nguyên nhân tồn mầm bệnh trong trại chăn nuôi gà ,nếu thực triệt để công tác vệ sinh tiêu độc sau hết dịch.Virus vô hoạt độ pH =12 pH =2,ở nhiệt độ 56ºC virus bị diệt ,60 ºC 30 phút ,70 ºC virus chét nhanh chóng − Các chất hóa học thông thường diệt virus formalin 0.5% ,pheno l 0.6% ,chloramin 0.5% 10 phút Trong phân rác ,chất độn chuồng chồng gà bị nhiễm ,virus tồn lâu ,đây ngồn tồn trữ virus dẫn đến việc bệnh sảy lưu trữ quanh năm VIII Dịch tễ học VII - Mùa vụ mắc bệnh: bệnh xảy quanh năm tập trung chủ yếu vào trước sau tết âm lịch - Lứa tuổi mắc bệnh: thường xảy gà – tuần tuổi, đặc biệt gà – tuần tuổi dễ mắc bệnh - Bệnh lây lan trực tiếp qua thức ăn, nước uống - Tỷ lệ mắc bệnh lên tới 100%, tỷ lệ chết 30 – 50%, chí lên tới 100% IX TRIỆU CHỨNG LÂM SÀNG VÀ BỆNH TÍCH Triệu chứng lâm sàng - Thời gian gà ủ bệnh Gumboro rất nhanh, khoảng 18 giờ đến 36 giờ và thường thấy triệu chứng lâm sàng sau ngày - Một số dấu hiệu lâm sàng đầu tiên là đàn gà chụm lại với nhau, ngoẹo đầu quay mỏ mổ vào hậu môn Gà rúc mỏ vào cánh mắt lim dim, thể trạng mệt mỏi, ít ăn , uống nhiều nước , lông bẩn, phân loãng có lẫn máu Gà ủ rủ, lông xù , sốt, mất nước, loạng choạng run rẩy, kiệt sức và chết sau vài ngày - Đặc trưng của bệnh là diễn rất nhanh, có thể gây chết ồ ạt từ 5-7 ngày và sau khoảng 10-12 ngày thì bệnh có thể thuyên giảm và đàn gà dần hồi phục Bệnh tích a) Bệnh tích đại thể - Túi Fabricius có những biến đổi ác liệt và đặc trưng nhất Giai đoạn đầu, tú sưng to gấp 2-3 lần so với bình thường, có hiện tượng thẩm dịch nhầy gelatin bao bọc quanh túi , xuất huyết thẩm dịch bên túi Sau 5-6 ngày trọng lượng và kích thước trở lại ban đầu - Ngày thứ trở trọng lượng và kích thước túi lúc này chỉ bằng 1/4 – 1/8 ban đầu Một điển hình khác của bệnh Gumboro là sung huyết và xuất huyết nội cơ, thường thấy ở ngực và đùi có các chấm hoặc mảng xuất huyết - Lách có thể sưng thường có những điểm hoại tử màu ghỉ trải đều bề mặt Dạ dày tuyến và dạ dày có thể bị xuất huyết Tuyến tụy có thể xuất huyết lấm chấm màu ghỉ xám Thận có thể bị sưng nặng, tuyến ức có thể xuất huyết điểm hay mảng  Khi mổ khám gà mắc bệnh: +Gà chết nóng, xác gà to béo bình thường, thịt trắng + Khi bắt gà mổ khám xung quanh hậu môn bẩn + Lột da gà thấy đùi, ngực có vết xuất huyết + Lột da gà thấy nốt đỏ + Lột da gà thấy nốt đỏ c) Bệnh tích vi thể - Xét nghiệm vi thể cho thấy nga sau 24 giờ sau nhiễm, phần lớn tế bào lypho bị phá hủy, số lượng của chúng bắt đầu giảm mạnh - Các vách nang giảm dần rộng ra, nang hẹp lại có hình tròn, hình chữ nhật, hình oval Trung tâm bị hoại tử, rỗng, không hoặc chỉ có vài tế bào lympho vùng ngoại vi của nang, thay vào đó là các tế bào bắt đầu dị màu, tế bào liên kết võng nội mô - Ở giờ 72-96 hầu 100% các nang đều có biểu hiện bệnh tích vi thể nói Khi các biến đổi viêm sưng mất dần, cũng là lúc xuất hiện quá trình tiêu viêm, lúc này các mô liên kết tăng sinh , xâm lấn vào lòng nang, có xu hướng lấp đầy các lòng nang, làm cho cấu trúc túi trở nên dày, dài ,xơ X Chẩn đoán Ngày nay, với kỹ thuật gen, việc chẩn đoán, điều trị bệnh Gumboro nghiên cứu phát triển rộng rãi Một vài kỹ thuật điển hình sử dụng như:RT-PCR –RFLP, Chuẩn đoán huyết học, Chuẩn đoán Virus học, Phản ứng ngưng kết gián tiếp hồng cầu Phương pháp lấy mẫu : lấy mẫu máu, dịch họng phân cầu -Bệnh phẩm máu cần dùng bơm kim tiêm vô trùng hút từ tĩnh mạch cánh gà cho vào ống nghiệm có nút cao su -Bệnh phẩm dịch họng dùng tăm ngoái vào đường hô hấp sau đựng vào dụng cụ bình thủy tinh vô trung có nút kín - Bệnh phẩm phân cần dùng tăm ngoái vào hậu môn sau ,phân đựng túi polyethylene vô trùng a) Phương pháp RT-PCR: Phương pháp phát gene IBDV mà không cần phải tăng sinh môi trường nuôi cấy trước khuyếch đại RT-PCR tiến hành bước: + B1: Ly trích acid nucleic từ mẫu nghiên cứu + B2: thực phiên mã ngược RNA IBDV thành cDNA + B3: khuyếch đại cDNA thu PCR Chọn mồi oligonucleotide trình tự ngắn bổ sung với trình tự nucleotide đặc hiệu virus Những vùng khác  b) gen khuyếch đại phụ thuộc vào định vị từ primer chọn Sự khuyếch đại gen mã hoá protein vỏ bên (protein capsid outer).so sánh kết với ngân hàng gen công bố dịch kịp thời Phương pháp RFLP: Phân tích RT/PCR-RFLP cho thấy nhạy phương pháp khác bao gồm AC-ELISA Sử dụng RT/PCR RFLP cho phép ta xác định đặc trưng kháng nguyên phụ cho phép phân lập mầm bệnh khác từ virus vaccine (Lin cộng sự, 1993; Liu cộng sự, 1994; Jackwood Jackwood, 1994, 1997; Jackwood Nielsen, 1997) Sau đó, liệu RFLP từ gà nhiễm bệnh đem so sánh với liệu RFLP từ phân loại virus thu thập trước trên1 nhóm gà nhiễm bệnh khác Những phương pháp cho phép không chuẩn đóan diện IBDV gà , mà xác định đặc trưng kiểu kháng nguyên phụ IBVD Có thể xác định virus từ nhóm kháng nguyên phụ 1,2,3,4,5,6 hay nhóm khác Chuẩn đoán huyết học :cơ chế kết hợp kháng nguyên- kháng thể Nguyên lí:Virus Gumboro xâm nhập vào thể kích thích thể sinh kháng thể dịch thể ,kháng thể có máu với lượng tương đối lớn ,do dùng phản ứng huyết học để phát kháng thể có kháng nguyên chuẩn virus Gumboro ngược lại có kháng huyết chuẩn Gumboro phát kháng nguyên c) Chuẩn đoán Virus học Dùng túi Fabricius lách gà mắc bệnh nghiền với nước theo ti lệ 1/5 1/10 ,sử lí kháng sinh ,li tâm ,bỏ cặn dùng nước nhỏ vào miệng ,mắt ,hậu môn cho gà 3-6 tuần tuổi chưa tiêm phòng vaccin Gumboro thấy gà mổ quanh hậu môn ,rùi đến phân trắng, xù lông bỏ ăn , mắc bệnh gà sốt túi Fabricius sưng to.Đến ngày thứ 3-4 túi to gấp lần bình thường Phương pháp có độ xác ,nhưng thời gian lâu nên áp dụng triệu chứng bệnh ,bệnh tích không đủ kết luận bệnh công bố dịch V) Tạo miễn dịch cho gà phòng bệnh Gumboro 1)Miễn dịch thụ động - Muốn tạo miễn dịch cho gà phải tiến hành tiêm ngừa Gumboro cho gà mẹ, kháng thể truyền qua trứng bảo hộ gà khỏi bệnh Gumboro Thông thường sức khỏe gà mẹ ổn định tiêm phòng tốt, hàm lượng kháng thể thụ động cao, bảo hộ gà đến tuần Song nghiên cứu gần cho thấy kháng thể truyền từ gà mẹ sang gà không ổn định, lúc cao, lúc thấp, không đồng đàn gà, đa số trường hợp bảo hộ gà không 20 ngày Chính tạo miễn dịch không ổn định gà mẹ gây nhiều khó khăn cho việc xác định lịch tiêm chủng, khó vào kết xét nghiệm kháng thể mẹ truyền số mẫu gà để xác định lịch chủng ngừa cho đàn gà 2) Miễn dịch chủ động -Do virus nhiễm qua đường tiêu hóa, việc tạo miễn dịch chỗ đường tiêu hóa cách cho uống vaccin quan trọng - Hiện vaccin phòng bệnh Gumboro chia làm nhóm: +Nhóm vaccin chết Gồm Gumboriffa, Cevac IBDK an toàn, nhiên thời gian từ chủng đến lúc bảo hộ cho gà phải tuần, khuyến cáo dùng cho gà mẹ dùng cho gà phải kết hợp với vaccin sống + Nhóm vaccin sống nhược độc Đây loại vaccin sống làm giảm độc cách cấy chuyển nhiều đời liên tục qua động vật, phôi môi trường tế bào không cảm thụ, dẫn đến biến đổi sinh học đặc biệt chủng Sự biến đổi phải đảm bảo nguyên tắc độc lực virus bị giảm giữ nguyên vẹn tính kháng nguyên VIII) PHÒNG VÀ ĐIỀU TRỊ Phòng bệnh: Dùng vắc xin phòng bệnh Gumboro biện pháp hiệu kinh tế sử dụng cách: nhỏ mắt, nhỏ mũi từ 1-2 giọt (theo hướng dẫn nhà sản xuất) Kết hợp vệ sinh, khử trùng tiêu độ chuồng trại môi trường chăn nuôi, thường xuyên bổ sung chất dinh dưỡng loại vitamin vào thức ăn, nước uống để nâng cao sức đề kháng cho đàn gà Điều trị Không có thuốc đặc trị Khi bệnh phát cần thực bước sau để hạn chế tỉ lệ chết, giúp mắc bệnh mau hồi phục: + Cách ly bệnh khỏi đàn + Khi có dịch bệnh dùng phun thuốc sát trùng Ngày thứ 1: Cần phải nhớ rằng, bệnh GUMBORO xảy ra, gà chết chủ yếu nguyên nhân: chết khát, sốt, cân điện giải, xuất huyết, kiệt sức, ngộ độc, giảm sức đ ề kháng Những nguyên nhân hỗ trợ cách cho gà uống MARPHA SOL cần uống gà tạm thời dừng chết, trường hợp gà mệt không uống nướccần dùng xilanh khoảng 20ml, đầu có gắn đoạn dây truyền khoảng 7c m 3h bơm lầnnhững bị liệt sau bơm 12 lần đứng dậy lại đượ c Một ngày bơm 3-4 lần giải pháp tốt Ngày thứ 2: + Cung cấp vitamin B-COMPLEX gram/lít nước, kết hợp vitamin C: gram/ lít nước - Cung cấp chất điện giải: ĐIỆN GIẢI-GLUCO-K-C gram/ lít nước ĐIỆN GIẢI-C: gram/ lít nước - Cung cấp lượng MARPHASOL-THAO DƯỢC: + Phòng ngừa stress: gram/ lít nước, cho gà uống liên tục khỏi bệnh + Điều trị nước, chất điện giải: 10 gram/ lít nước 10 gram/ kg thức ăn Dùng liên tục - ngày  Tiêm phòng vacxin cho gà • Đối với gà chăn thả: + Do kháng thể mẹ truyền + Gà nhiễm bệnh sau nở Lịch chủng ngừa sau: Lần 1: Lúc ngày tuổi, liều vaccin sống trung bình Lần 2: Lúc 14 ngày tuổi, liều vaccin sống trung bình • Đối với gà công nghiệp: Lần 1: Lúc ngày tuổi, liều vaccin sống trung bình Lần 2: Lúc 11 ngày tuổi, liều vaccin sống trung bình kết hợp 1/2 liều vaccin chết Lần 3: Lúc 21 ngày tuổi, liều vaccin sống trung bình