Tiếp nối chuyên mục kinh nghiệm thực tập về bệnh lao. Phần 2 chúng tôi sẽ chia sẻ kinh nghiệp làm cách nào khi xét nghiệm để nhận biết bệnh lao và mức độ nguy hiểm của nó ở giai đoạn nào. Ngoài ra chúng tôi còn đưa ra hình ảnh và đặc điểm của vi trùng lao để bạn nhận biết.
XÉT NGHIỆM TRONG CHẨN ĐOÁN LAO I-MỤC TIÊU Nắm xét nghiệm chẩn đoán lao MỘT SỐ TỪ VIẾT TẮT MOTT: Mycobacteria Other Than Tuberculosis (Mycobacteria không lao) AFB:Acid Fast Bacilii PCR : Polymerase Chain Reaction MGIT: Mycobacteriae Growth Indicator Tube MODS: The Microscopic Observation Drug Susceptibility MDRTB: Multi Drug Resistant Tuberculosis PPD:Purified Protein Derivertive ADA: Adenosine Deaminase Activity QFT: Quanti Feron – Tuberculosis TST: Tuberculin Skin Test: Phản ứng lao tố CT: Computer Tomography NAP: Nitro-alpha- Acetyl-amino- beta hydroxy- Propiophenol TCH:Thiophene-2- Carboxylic- Hydrazide acide II-SƠ LƯỢC VỀ VI TRÙNG LAO Bệnh lao có từ lâu đời, chứng xác ướp Ai Cập cổ đại Thời kỳ Hypocrate ( từ kỷ V trước CN) ,đề cập đến lao, “Bệnh phấn trắng” II-SƠ LƯỢC VỀ VI TRÙNG LAO Năm 1882 Robert Koch ,người Đức, tìm nguyên nhân gây bệnh lao loại trực khuẩn phương pháp nhuộm Zeihl Neelsen Gọi tên BACILLUS DE KOCH, viết tắt BK III-ĐẶC ĐIỂM CỦA VI TRÙNG LAO Tồn 3-4 tháng môi trường tự nhiên Tồn 1,5 ánh sáng mặt trời Tồn 2-3 phút tia cực tím Tồn phút cồn 90 độ III-ĐẶC ĐIỂM VI KHUẨN LAO Nhiệt độ 42ºC ngưng phát triển 80ºC chết 10 phút Đun sôi phút tiêu diệt IV-QUI TRÌNH CHẨN ĐOÁN LAO Khám lần I ( XQ, mẩu AFB, HĐ,VS…) CTCLQG AFB (+) AFB(-) thử lạiAFB , cấy kháng sinh có AFB (+) , Cấy (+) không bớt AFB(-) , cấy (-): Hội chẩn, lao AFB(-) V-TIÊU CHUẨN WHO CHẨN ĐOÁN LAO PHỔI LAO PHỔI AFB (+) : Một tiêu chuẩn sau: 1- Có mẫu AFB(+) 2-Có mẫu AFB(+) kèm XQ phổi có tổn thương tiến triển 3-Có mẫu AFB(+) nuôi cấy (+) *Riêng người HIV (+) CẦN CÓ ÍT NHẤT MỘT TIÊU BẢN XN ĐỜM (+) HÌNH TRỰC KHUẨN LAO Vi trùng lao nang lao CÁC XÉT NGHIỆM Chỉ phát AFB (+) có > 5000 vk /ml đờm Soi trực tiếp có độ đặt hiệu cao, độ nhạy thấp (60%) GHI KẾT QUẢ Nhuộm Ziehl-Neelsen/Kinyoun Kết - - âm tính - 1-9 vi trùng/100 vi trường ghi số đếm - 10-99/100 vi trường - 1+ - 1-10/ vi trường - 2+ - > 10/ vi trường - 3+ CÁC XÉT NGHIỆM 3-Cấy tìm AFB - Cấy môi trường Lowenstein Jensen, cho kết từ 6-8 tuần - Cấy Bactec TB 9240: Môi trường Middle brook 7H9 TRỰC KHUẨN LAO Hình ảnh vi khuẩn lao điển hình có dạng sần sùi súp lơ, màu trắng đục, mọc chậm sau tuần Hình ảnh khuẩn lạc vi khuẩn lao điển hình CÁC XÉT NGHIỆM Bactec MGIT 960: Môi trường MGIT môi trường Middle brook 7H9 cải tiến thêm vào oleic acid, albumin, dextrose, catalase Cấy MGIT : Cho kết khoãng 10 ngày CÁC XÉT NGHIỆM 4- Phương pháp khuyếch tán Acid Nucleic: - PCR lao - Amplified MTD - Amplicor MTB test - BD Probetec ET CÁC XÉT NGHIỆM 5- Các phương pháp khác - Quanti FERON®-TB:Nguyên lý xét nghiệm định lượng Interferogama tiết Lympho T , sau ủ qua đêm với PPD(Purified Protein Derivative) Tuy nhiên hạn chế xét nghiệm giống test da tiêu chuẩn vàng để chẩn đoán lao tìm ấn, để đối chứng CÁC XÉT NGHIỆM Phương pháp MODS: + Vi khuẩn lao mọc nhanh môi trường lỏng + kính hvi phát sớm chờ đến khúm vi trùng mọc moi trường đặc +INH, RIFA thêm vào nghiệm pháp nhằm phát trực tiếp vi khuẩn lao kháng thuốc… Kết ngày - CÁC XÉT NGHIỆM 6- Gene Xpert: - Là kỷ thuật công nghệ tách, nhân, nhận biết Gene Kỷ thuật cho biết vk có kháng RIFA hay không -kết sau 7-Hain test CÁC XÉT NGHIỆM 8-Huyết chẩn đoán - ICT Tuberculosis : Rapid test TB - Tuberculosis IgA EIA - Pathozyme –TB Complex - Pathozyme Myco IgG - Pathozyme Myco IgA - Pathozyme Myco IgM Sensitivities 16- 57 %, Specificities 62- 100 % BỆNH PHẨM Các mẫu thử lấy để soi; cấy… tìm vi khuẩn lao chứng lao ; tùy trường hợp bệnh lý cụ thể , mẫu thử là: Đàm, máu, dịch màng phổi, dịch màng bụng , dịch khớp, dịch não tủy, dịch rửa phế quản, nước tiểu, tủy xương, mủ, mô bệnh phẩm… Mẫu thử để soi cấy tìm vi khuẩn lao phải đựng dụng cụ vô khuẩn,nhanh chóng đem đến phòng xét nghiệm xử lý Tất mẫu thử không xử lý bảo quản 4ºC-10ºC Có thể lấy dịch dày vào sáng sớm không khạc đàm( trẻ nhỏ), dịch dày cần xử lý giờ, nên cho thêm Sodium carbonate muối đệm để trung hòa bớt acide dịch vị bảo vệ vi khuẩn lao có mẫu thử, lấy dịch rửa phế quản [...]...V-TIÊU CHUẨN CHẨN ĐOÁN LAO PHỔI AFB( -) Thỏa mãn 1trong 2 tiêu chuẩn sau 1/ AFB( -) qua 2 lần khám, mổi lần XN 2 mẫu đờm cách nhau 2 tuần, và có tổn thương nghi lao tiến triển trên XQ, và được hội chẩn BS chuyên khoa lao 2/ AFB( -) nhưng nuôi cấy (+ ) VI- CÁC XÉT NGHIỆM A/XÉT NGHIỆM THƯỜNG QUI B/XÉT NGHIỆM TÌM BẰNG CHỨNG LAO 1-Phản ứng lao tố -Mantoux- IDR a-Định tính b-Định lượng -TST VI-CÁC XÉT NGHIỆM 2- ... Các phương pháp khác - Quanti FERON®-TB:Nguyên lý của xét nghiệm là định lượng Interferogama được tiết ra bởi Lympho T , sau khi ủ qua đêm với PPD(Purified Protein Derivative) Tuy nhiên hạn chế của xét nghiệm này cũng giống như test da là không có tiêu chuẩn vàng để chẩn đoán lao tìm ấn, để đối chứng CÁC XÉT NGHIỆM Phương pháp MODS: + Vi khuẩn lao mọc nhanh ở môi trường lỏng + kính hvi phát hiện sớm... trùng lao bắt màu đỏ nổi bật trên nền xanh Methylene - Phương pháp nhuộm Fluorchrome: Dùng thuốc nhuộm Auramin- Rhodamine Nhuộm Auramine : vi khuẩn lao có màu vàng sáng trên nền đen và dễ dàng thấy dưới vật kính 25 b-Soi trực tiếp thuần nhất : dùng NaOH làm loãng đờm , quay ly tâm , tìm BK - Soi dưới kính huỳnh quang HÌNH TRỰC KHUẨN LAO Vi trùng lao nang lao CÁC XÉT NGHIỆM Chỉ phát hiện AFB (+ ) khi... trùng mọc trên moi trường đặc +INH, RIFA có thể thêm vào nghiệm pháp này nhằm phát hiện trực tiếp vi khuẩn lao kháng thuốc… Kết quả 9 ngày - CÁC XÉT NGHIỆM 6- Gene Xpert: - Là kỷ thuật 3 công nghệ tách, nhân, và nhận biết Gene Kỷ thuật này còn cho biết vk có kháng RIFA hay không -kết quả sau 2 giờ 7-Hain test CÁC XÉT NGHIỆM 8-Huyết thanh chẩn đoán - ICT Tuberculosis : Rapid test TB - Tuberculosis IgA... đục, mọc chậm sau ít nhất 2 tuần Hình ảnh khuẩn lạc vi khuẩn lao điển hình CÁC XÉT NGHIỆM Bactec MGIT 960: Môi trường MGIT là môi trường Middle brook 7H9 cải tiến thêm vào oleic acid, albumin, dextrose, catalase Cấy MGIT : Cho kết quả khoãng 10 ngày CÁC XÉT NGHIỆM 4- Phương pháp khuyếch tán Acid Nucleic: - PCR lao - Amplified MTD - Amplicor MTB test - BD Probetec ET CÁC XÉT NGHIỆM 5- Các phương pháp... Specificities 62- 100 % BỆNH PHẨM Các mẫu thử được lấy để soi; cấy… tìm vi khuẩn lao hoặc bằng chứng của lao ; tùy trường hợp bệnh lý cụ thể , mẫu thử là: Đàm, máu, dịch màng phổi, dịch màng bụng , dịch khớp, dịch não tủy, dịch rửa phế quản, nước tiểu, tủy xương, mủ, mô bệnh phẩm… Mẫu thử để soi cấy tìm vi khuẩn lao phải được đựng trong dụng cụ vô khuẩn,nhanh chóng đem đến phòng xét nghiệm và xử... hiệu cao, độ nhạy thấp (6 0 %) GHI KẾT QUẢ Nhuộm Ziehl-Neelsen/Kinyoun Kết quả - - 0 âm tính - 1-9 vi trùng/100 vi trường ghi số đếm được - 10-99/100 vi trường - 1+ - 1-10/ vi trường - 2+ - > 10/ vi trường - 3+ CÁC XÉT NGHIỆM 3-Cấy tìm AFB - Cấy môi trường Lowenstein Jensen, cho kết quả từ 6-8 tuần - Cấy Bactec TB 924 0: Môi trường Middle brook 7H9 TRỰC KHUẨN LAO Hình ảnh vi khuẩn lao điển hình có dạng... xử lý ngay Tất cả mẫu thử trên nếu không xử lý ngay thì bảo quản ở 4ºC-10ºC Có thể lấy dịch dạ dày vào sáng sớm nếu không khạc được đàm( nhất là đối với trẻ nh ), dịch dạ dày cần được xử lý trong 4 giờ, nên cho thêm Sodium carbonate hoặc muối đệm để trung hòa bớt acide dịch vị bảo vệ vi khuẩn lao có trong mẫu thử, ngoài ra có thể lấy dịch rửa phế quản