Nghiên cứu thành phần flavonoit từ lá cây cỏ lào chromolaena odorata

Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp TRNG I HC S PHM H NI KHOA HO HC *************** NGUYN TH QUYấN NGHIấN CU THNH PHN FLAVONOIT TRONG L CY C LO KHểA LUN TT NGHIP I HC Chuyờn ngnh: Hoỏ hc hu c Ngi hng dn khoa hc TS NGUYN TIN T H NI - 2011 Nguyễn Thị Quyên K33C Khoa Hóa học Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp MC LC Trang LI CM N LI CAM OAN DANH MC CC CH VIT TT PH LC: DANH MC CC HèNH V V BNG BIU M U CHNG 1: TNG QUAN 1.1.c im, tớnh v v cụng dng ca cõy C lo 1.1.1 Thc vt hc 1.1.2 Phõn b, sinh thỏi 10 1.1.3 B phn dựng .10 1.1.4 Tỏc dng dc lý 10 1.1.5 Tớnh v, cụng nng 11 1.1.6 Cụng dng 12 1.1.7 Bi thuc cú C lo .12 1.2 Cỏc nghiờn cu v húa hc v hot tớnh sinh hc ca C lo .12 1.3 Tng quan v flavonoit 14 1.3.1 S lc v lp cht flavonoit 14 1.3.2 Cỏc nhúm flavonoit 16 1.4 Cỏc phng phỏp chit mu thc vt 22 1.4.1 Chn dung mụi chit 22 1.4.2 Quỏ trỡnh chit 24 1.5 Cỏc phng phỏp sc ký phõn lp cỏc hp cht hu c 25 1.5.1 c im chung ca phng phỏp sc ký 25 1.5.2 C s phng phỏp sc ký 26 1.5.3 Phõn loi cỏc phng phỏp sc ký 26 Nguyễn Thị Quyên K33C Khoa Hóa học Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp 1.6 Mt s phng phỏp húa lý xỏc nh cu trỳc ca cỏc hp cht hu c 28 1.6.1 Ph hng ngoi (Infrared spectroscopy, IR) 28 1.6.2 Ph lng (Mass spectroscopy, MS) 28 1.6.3 Ph cng hng t ht nhõn (Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy NMR) 30 1.6.3.1 Ph c ng h ng t h t nhõn m t chi u 30 1.6.3.2 Ph c ng h ng t h t nhõn hai chi u 30 CHNG 2: I TNG V PHNG PHP NGHIấN CU 2.1 Mu thc vt 32 2.2 Phng phỏp phõn lp cỏc hp cht 32 2.2.1 Sc ký lp mng (TLC) 32 2.2.2 Sc ký lp mng iu ch 32 2.2.3 Sc ký ct (CC) 32 2.3 Phng phỏp xỏc nh cu trỳc húa hc cỏc hp cht 33 2.3.1 im núng chy (Mp) 33 2.3.2 Ph lng (ESI- MS) 33 2.3.3 Ph cng hng t ht nhõn (NMR) 33 2.4 Chit phõn on v phõn lp cỏc hp cht 33 CHNG 3: KT QU V THO LUN 35 KT LUN 42 TI LIU THAM KHO 43 Nguyễn Thị Quyên K33C Khoa Hóa học Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp DANH MC CC CH VIT TT 13 C NMR Ph cng hng t ht nhõn cacbon 13 Carbon 13 Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy H NMR Ph cng hng t ht nhõn proton Proton Magnetic Resonance Spectroscopy H-1H COSY H-1H Chemical Shift Correlation Spectroscopy 2D - NMR Ph cng hng t ht nhõn hai chiu Two Dimensional NMR CC Sc ký ct Column Chromatography DEPT Distortionless Enhancement by Polarisation Transfer EI - MS Ph lng va chm electron Electron Impact Mass Spectroscopy FAB MS Ph lng bn phỏ nguyờn t nhanh Fast Atom bombardment Mass Spectrometry HMBC Heteronuclear multiple Bond Connectivity HMQC Heteronuclear multiple Quantum Coherence HR- FAB- MS Ph lng bn phỏ nguyờn t nhanh phõn gii cao High Resolution Fast Atom Bombardment Mass Spectrometry IR Ph hng ngoi Infrared Spectrometry MS Ph lng Mass Spectrometry NOESY Nucler Overhauser Effect Spectrometr TLC Sc ký lp mng Thin layer Chromatography Nguyễn Thị Quyên K33C Khoa Hóa học Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp PH LC DANH MC CC HèNH V V BNG BIU Trang Hỡnh 1.1: Cõy c lo Hỡnh 1.2: Hoa c lo Hỡnh 1.3: Flavan ( 2- phenyl chromen) 16 Hỡnh 1.4: Flavon .16 Hỡnh 1.5: Flavonol 16 Hỡnh 1.6: Flavanon 17 Hỡnh 1.7: Flavanon Chalcol 17 Hỡnh 1.8: Flavanonol 18 Hỡnh 1.9: Taxifolin 18 Hỡnh 1.10: Chalcol 18 Hỡnh 1.11: Auron 19 Hỡnh 1.12: Corepsin 19 Hỡnh 1.13: Sunphurein 19 Hỡnh 1.14: Antoxianidin .20 Hỡnh1.15: Leucoantoxianidin 20 Hỡnh 1.16: (+) Catechin 20 Hỡnh 1.17: (-) Catechin 20 Hỡnh 1.18: 3- phenyl Chromen 21 Hỡnh 1.19: Isoflavon .21 Hỡnh 1.20: Isoflavanon 21 Hỡnh 1.21: Rotenoit 21 Hỡnh 3.1.1.a: Ph ESI MS ca (1) 35 Hỡnh 3.1.1.b: Ph 1H NMR ca (1) .36 Hỡnh 3.1.1.c: Ph 13C NMR ca (1) 37 Hỡnh 3.1.1.d: Ph DEPT ca (1) 37 Nguyễn Thị Quyên K33C Khoa Hóa học Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp Hỡnh 3.1.1.e: Ph HMQC ca (1) 39 Hỡnh 3.1.1.f: Ph HMBC ca (1) 40 Hỡnh3.1.1.g: Cu trỳc húa hc v tng tỏc HMBC chớnh ca (1) 41 Bng 3.1.1: S liu ph 1H- v 13C- NMR ca (1) 38 Nguyễn Thị Quyên K33C Khoa Hóa học Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp M U Tỡm kim v s dng hp lớ, cú hiu qu cỏc ngun ti nguyờn thiờn nhiờn l yờu cu t i vi ngi, c bit l giai on hin nay, yờu cu ú li cng tr nờn cp bỏch Thm thc Vit Nam rt phong phỳ v a dng sinh hc c xp vo bc nht th gii Do Vit Nam nm khu vc nhit i cú khớ hu núng m, m cao trờn 80%, lng ma ln, nhit trung bỡnh khong 15270C ú l iu kin thớch hp cho thc vt phỏt trin Do vy h thc vt Vit Nam vụ cựng phong phỳ, a dng khong 12.000 loi, ú cú ti 4.000 loi c nhõn dõn ta dựng lm tho dc iu ny thc s cú ý ngha quan trng cho s phỏt trin ca ngnh y t, ngnh húa v cỏc ngnh khỏc H thc vt phong phỳ c coi l tin cho s phỏt trin ngnh húa hc cỏc hp cht thiờn nhiờn nc ta T ngn xa, ụng cha ta ó s dng nhiu phng thuc dõn gian t cõy c cha bnh, bi b c th hay to mựi thmnh tớa tụ gii cm, nhõn sõm tng cng sc khỏng, s to mựi thm Cỏc phng thc y hc c truyn ú th hin nhng mt mnh iu tr bnh l ớt c tớnh v tỏc dng ph Do cú nhiu u im nh trờn nờn ngy ngi ngy cng quan tõm n cỏc hp cht cú hot tớnh sinh hc cao thc vt v ng vt V lõu di i vi s phỏt trin ca cỏc dc phm mi thỡ cỏc hp cht cú hot tớnh sinh hc úng vai trũ quan trng, nú l u cho vic tng hp nờn cỏc loi thuc mi cú tỏc dng tt hn Cõy C lo c bit n l mt loi cõy cú mt nhiu bi thuc cha bnh Cõy cú hot tớnh sinh hc cao, cha nhiu thnh phn húa hc v cú nhiu tỏc dng dc lý Vic nghiờn cu, kho sỏt thnh phn húa hc v tỏc dng dc lý ca cõy C lo Vit Nam nhm t c s khoa hc cho vic s dng mt cỏch hp lý, hiu qu cú ý ngha thc tin rt quan trng Nguyễn Thị Quyên K33C Khoa Hóa học Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp s phỏt trin ca nn y hc Vit Nam hin i da trờn phng thuc c truyn Xut phỏt t ý ngha thc tin trờn nờn tụi ú chn ti cho khúa lun tt nghip l: Nghiờn cu thnh phn flavonoit lỏ cõy C lo Vi mc ớch nghiờn cu thnh phn Flavonoit cú cõy C lo v xỏc nh cu trỳc húa hc ca cỏc hp cht c phõn lp T ú to c s cho nhng nghiờn cu tip theo lnh vc tỡm cỏc phng thuc mi cng nh gii thớch c tỏc dng cha bnh ca cỏc cõy thuc c truyn Vit Nam õy l yu t quan trng cú ý ngha thc tin i vi s phỏt trin nn y hc Vit Nam Lun ny trung nghiờn cu thnh phn Flavonoit t cõy C lo bao gm nhng ni dung chớnh l: Nghiờn cu tng quan v thnh phn húa hc v hot tớnh sinh hc cú cõy C lo Tỏch chit cỏc hp cht flavonoit Xỏc nh cu trỳc húa hc ca cỏc hp cht ú phõn lp bng cỏc phng phỏp ph Nguyễn Thị Quyên 10 K33C Khoa Hóa học Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp CHNG 1: TNG QUAN 1.1.c im, tớnh v v cụng dng ca cõy C lo 1.1.1 Thc vt hc Cõy C lo cũn cú tờn l Yn Bch, C hụi, C Vit Minh, Cõy Cng Sn, Cõy Ba Bp, Cõy phõn xanh, C Nht Tờn khoa hc : Chromolaena odorata (L) King &Robinson hoc Eupatorium odorata L, thuc h Cỳc (Asteraceae) C lo l loi cõy tho mc thnh bi, thõn hỡnh tr thng cao ti 2m hay hn, cú nhiu cnh Cnh nm ngang,cú lụng mn Lỏ mc i, lỳc non hớnh tam giỏc, di 5-10 cm, rng 3-6 cm; trng thnh, lỏ bin dng thnh hỡnh qu trỏm lch u lỏ nhn, cú mộp rng ca tha, cú lụng tha v ngn c hai mt lỏ v ngn cnh V lỏ v cnh non cú mựi thm hc Hỡnh 1.1: Cõy C lo Hỡnh1.2: Hoa C Lo Cm hoa xp thnh ngự kộp, mi cm hoa cú bao chung nhiu lỏ bc xp - hng Cm hoa u hỡnh tr di -11 mm, ng kớnh - mm Hoa nhiu, lỳc mi n hoa mu xanh tớm nht, sau trng Qu b hỡnh thoi, cnh, u cú tỳm lụng nờn cú th phỏt tỏn i rt xa nh giú Nguyễn Thị Quyên 11 K33C Khoa Hóa học Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp Mựa hoa vo cui ụng u xuõn (thỏng 11- 12 dng lch) [15] 1.1.2 Phõn b, sinh thỏi Cõy cú ngun gc o Angti c truyn bỏ vo nc ta gp nhiu vựng trung du, nỳi thp, ngoi thnh H Ni cng thy nhng bi ln C lo mc ven ng C lo mc rt khe, sinh sn vụ tớnh rt mnh, phỏt trin nhanh ma Ngn non, cnh gi b tri lỏ,cm xung t ch mt tun sau l mc r trng Cht cõy sỏt gc cng õm chi mnh [15] 1.1.3 B phn dựng Ton cõy, ch yu l lỏ ( Herbaseu Folium Chromolaerea ) Thu hỏi lỏ v tũan cõy quanh nm Thng dựng ti 1.1.4 Tỏc dng dc lý a Tỏc dng khỏng khun: Nc sc C lo cú tỏc dng c ch vi khun gõy m trờn vt thng v c ch trc khun l Shigella Tỏc gi Irobi ó chng minh dch chit t lỏ c lo cú tỏc dng khỏng khun mnh i vi hai chng Pseudomonas aeruginosa and Streptococcus faecali.[17] Guatemala, da trờn cụng dng cha bnh lu ca cõy c lo dõn gian, tỏc gi Caceres v cng s ó dựng dch chit 50% cn th nghim trờn chng khun lu Neisseria gonorrhoeae phõn lp t bnh nhõn b lu Kt qu cho thy dch chit lỏ c lo cú tỏc dng c ch mnh vi ng kớnh vũng vụ khun l 11 mm.[18] Dch chit cn t lỏ c lo cng th hin hot tớnh khỏng nm rừ rt trờn cỏc chng Microsporum gypseum, Trichophyton mentagrophytes v Trichophyton rubrum vi giỏ tr MIC t 62,5 n 500 g/ml Cỏc tỏc gi cng ó ch rng cỏc liu ung dch chit lỏ c lo hon ton khụng gõy c cho chut nht thớ nghim [19] Nhúm tỏc gi Owoyele cng ó nghiờn cu tỏc dng chng viờm ca c lo trờn ng Nguyễn Thị Quyên 12 K33C Khoa Hóa học Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp CHNG I TNG V PHNG PHP NGHIấN CU 2.1 Mu thc vt Mu cõy c lo C odorata c thu hỏi ti H Ni vo thỏng 2/2010 v c TS Trn Huy Thỏi, Vin Sinh thỏi v Ti nguyờn Sinh vt, Vin Khoa hc v Cụng ngh Vit Nam Nam giỏm nh Mu tiờu bn c lu gi ti Vin Hoỏ sinh bin, Vin Khoa hc v Cụng ngh Vit Nam 2.2 Phng phỏp phõn lp cỏc hp cht 2.2.1 Sc ký lp mng (TLC) Sc ký lp mng c thc hin trờn bn mng sn DCAlufolien 60 F254 (Merck 1,05715), RP18 F254s (Merck) Phỏt hin cht bng ốn t ngoi hai bc súng 254 nm v 368 nm hoc dựng thuc th l dung dch H2SO4 10% c phun u lờn bn mng, sy khụ ri h núng trờn bp in t t n hin mu 2.2.2 Sc ký lp mng iu ch Sc ký lp mng iu ch thc hin trờn bn mng sn Silica gel 60G F254 (Merck, ký hiu 105875), phỏt hin vt cht bng ốn t ngoi hai bc súng 254 nm v 368 nm, hoc ct rỡa bn mng phun thuc th l dung dch H2SO4 10%, h núng phỏt hin vt cht, ghộp li bn mng nh c xỏc nh vựng cht, sau ú co lp Silica gel cú cht, gii hp ph bng dung mụi thớch hp 2.2.3 Sc ký ct (CC) Sc ký ct c tin hnh vi cht hp ph silicagel pha thng v pha o Silicagel pha thng cú c ht l 0.04 0,063 mm (240-430 mesh) Silicagel pha o ODS hoc YMC (30-50 m, FuJisilisa Chemical Ltd) Nguyễn Thị Quyên 35 K33C Khoa Hóa học Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp 2.3 Phng phỏp xỏc nh cu trỳc húa hc cỏc hp cht 2.3.1 im núng chy (Mp) im núng chy c o trờn mỏy Kofler micro hotstage ca Vin Húa sinh bin 2.3.2 Ph lng (ESI MS) Ph lng phun mự in t (Eletron spray Inoization mass spectra) c o trờn mỏy Finnigan Navigator LC/MS/DS mass spectrometer ca Vin Cng ngh sinh hc Hn Quc 2.3.3 Ph cng hng t ht nhõn (NMR) Ph cng hng t nhõn (NMR): 1H-NMR (400 MHz) v 13 C-NMR (100 MHz) c o trờn mỏy Varianunity Ionva-400 instrument, Vin Cụng ngh sinh hc Hn Quc 2.4 Chit phõn on v phõn lp cỏc hp cht Phn lỏ cõy c lo ó phi khụ búng rõm v xay nh (5 kg) c ngõm chit vi metanol (10 L x ln) nhit phũng 24 h Dch chit gom li v cụ cn di ỏp sut gim thu c 500 g cn chit metanol Cn chit ny c ho vi nc (3 L) ri chit phõn on ln lt vi hexan (2L x 3) v etyl axetat (2L x 3) thu c cỏc cn chit hexan (148 g) v etyl axetat tng ng (225 g) Tin hnh sc ký ct vi silicagel i vi cn chit etyl axetat gii bng h dung mụi gradient clorofoc-metanol (100:1 v/v 100% metanol) thu c phõn on ký hiu FA1-FA6 Phõn on FA2 c chy qua ct silicagel vi h dung mụi hexan-axeton (6:1 - 3:1 v/v) thu c phõn on nh FB1-FB5 Kt tinh phõn on FB3 dung mụi axeton-metanol thu c hp cht (15,0 mg) Salvigenin (1): tinh th mu vng, m.p 190-192 oC ESI-MS m/z 329.4 [M + H]+ 1H-NMR (400 MHz, CDCl3): 3,88 (3H, br s, 4'-OMe), 3,91 (3H, br s, 6-OMe), 3,95 (3H, br s, 7-OMe), 6,51(1H, s, H-8), Nguyễn Thị Quyên 36 K33C Khoa Hóa học Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp 6,54(1H, s, H-3), 7,00 (2H, dd, J = 8,8 Hz, H-3', 5'), 7,81 (2H, dd, J = 8,8 Hz, H-2', 6'), 12,7 (5-OH) 13 C-NMR (100 MHz, CDCl3): 163,9 (C-2), 103,9 (C-3), 182,5 (C-4), 153,1 (C-5), 132,5 (C-6), 158,6 (C_7), 90,4 (C-8), 152,9 (C-9), 106,0 (C-10), 123,3 (C-1'), 127,8 (C-2',6'), 114,4 (C-3',5'), 162,5 (C-4'), 60,7 (6-OMe), 56,2 (7OMe), 55,4 (4'-OMe) Nguyễn Thị Quyên 37 K33C Khoa Hóa học Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp CHNG KT QU V THO LUN H p ch t ch y 190-192 0C m nh b c phõn l p d ng tinh th mng vng cú i m núng nh tớnh trờn s c ký l p m ng th y v t ch t h p th UV c súng 254 nm v i sang mu vng hi n mu b ng axit sulfuric 10% ch ng t h p ch t ny l m t flavonoit Ph kh i l ng phun mự i n t c a xu t hi n pic [M + H]+ t i m/z 329.4 ch ng t cú kh i l ng phõn t 328 v cụng th c phõn t C18H16O6 (Hỡnh 3.1.a) Trờn ph c a cú tớn hi u H-NMR c tr ng c a m t h proton A2B2 vũng th m t i H 7,81 (2H, dd, J = 8,8 Hz, H-2',6') v 7,00 (2H, dd, J = 8,8 Hz, H-3',5'), hai tớn hi u singlet t i 6,54 (1H, s, H-3) v 6,51 (1H, s, H-8) v tớn hi u c a nhúm metoxy t i 3,91, 3,95 v 3,88 Ngoi cũn cú m t singlet xu t hi n tr ng th p H 12,7 vựng c tr ng cho tớn hi u c a proton nhúm hydroxy t i vi trớ C-5 xu t hi n liờn k t hydro v i nhúm cacbonyl C-4 (Hỡnh 3.1b) Hỡnh 3.1.a Ph ESI-MS ca Nguyễn Thị Quyên 38 K33C Khoa Hóa học Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp Hỡnh 3.1.b Ph 1H-NMR ca Ph 13 C-NMR v DEPT c a (Hỡnh 3.1c v 3.1d) cho th y s cú m t c a 16 v ch tớn hi u g m nhúm metoxy, nhúm CH v nhúm cacbon b c Hai v ch tớn hi u t i C 127,8 v 114,4 cú c ng r t l n ch ng t pớc ch p c a cỏc tớn hi u C-2'-6', v C-3'-5' Ph HMQC cho phộp xỏc õy l nh cỏc tớn hi u proton v i v trớ cỏcbon t ng ng (Hỡnh 1e) Nh v y, v i cỏc d ki n ph trờn cho phộp xỏc nh h p ch t l m t flavone cú ba nhúm th metoxy Hai tớn hi u singlet t i 6,54 v 6,51 c xỏc nh t ng ng l H-3 v H-8 d a vo cỏc t ng tỏc trờn ph HMBC Ngoi tra, v trớ chớnh xỏc c a cỏc nhúm methoxy c ng c xỏc nh t i C-6, C-7 v C-4' d a vo ph HMBC (Hỡnh 3.1g) Nguyễn Thị Quyên 39 K33C Khoa Hóa học Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp Hỡnh 3.1.c Ph 13C-NMR ca Hỡnh 3.1.d Ph DEPT ca Nguyễn Thị Quyên 40 K33C Khoa Hóa học Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp Bng 3.1 S liu ph 1H- v 13C-NMR ca TT H (J=Hz) ca C ca C * - 163,9 163,1 6,54 (1H, s) 103,9 102,9 - 182,5 181,5 - 153,1 152,0 - 132,5 132,0 - 158,6 158,1 6,51 (1H, s) 90,4 91,8 - 152,9 151,7 10 - 106,0 104,9 1' - 123,3 122,5 2', 6' 7,81 (2H, dd, 8,8) 127,8 127,5 3', 5' 7,00 (2H, dd, 8,8) 114,4 114,0 - 162,5 161,9 6-OMe 3,91 (3H, br s) 60,7 60,6 7-OMe 3,95 (3H, br s) 56,2 56,2 4'-OMe 3,88 (3H, br s) 55,4 55,5 - - 4' 5-OH 12,7 (1H, s) * S liu theo ti liu tham kho [28] Nguyễn Thị Quyên 41 K33C Khoa Hóa học Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp Hỡnh 3.1.e Ph HMQC ca Nguyễn Thị Quyên 42 K33C Khoa Hóa học Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp Hỡnh 3.1.f Ph HMBC ca Nguyễn Thị Quyên 43 K33C Khoa Hóa học Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp Cỏc s liu ph thu c ca hon ton trựng khp vi s liu ó cụng b trc ú ca hp cht 5-hydroxy-4',6,7-trimetoxyflavone (Bng 3.1.1) Nh vy hp cht c xỏc nh l 5-hydroxy-4',6,7trimetoxyflavone, hay tờn khỏc l salvigenin [28] Hp cht ny c bit n l mt hp cht cú tỏc dng gim huyt ỏp v gión mch rt hiu qu [29] 3' MeO 5' 6' 10 MeO 1' O OMe 4' 2' OH O Hỡnh 3.1.g Cu trỳc húa hc v tng tỏc HMBC chớnh ca Nguyễn Thị Quyên 44 K33C Khoa Hóa học Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp KT LUN Thc hin khúa lun tt nghip vi ti: Nghiờn cu thnh phn flavonoit lỏ cõy c lo bng cỏc phng phỏp ph hin i gm ph lng ESI-MS, ph cng hng t nhõn v chiu em ó phõn lp c v xỏc nh cu trỳc hp cht flavonoit t lỏ cõy c lo: 5-hydroxy4',6,7-trimetoxyflavone (salvigenin) Cõy c lo l mt cõy mc hoang rt ph bin nc ta ng thi li cú nhiu nghiờn cu ó ch nhng tỏc dng dc lý rt lý thỳ ca cõy ny Kt qu nghiờn cu trờn õy bc u ó úng gúp thờm vo vic lm sỏng t thnh phn húa hc ca cõy c lo (Chromolaena odorata) Nguyễn Thị Quyên 45 K33C Khoa Hóa học Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp TI LIU THAM KHO [1] Metwally AM, Ekejiuba EC Methoxylated flavonols and flavanones from Eupatorium odoratum Planta Med 1981 Aug;42(8):403-5 [2] Suksamrarn A, Chotipong A, Suavansri T, Boongird S, Timsuksai P, Vimuttipong S, Chuaynugul A Antimycobacterial activity and cytotoxicity of flavonoids from the flowers of Chromolaena odorata Arch Pharm Res 2004 May;27(5):507-11 [3] Ohtsuki, Takashi; Hiraka, Takahito; Kikuchi, Hiroyuki; Koyano, Takashi; Kowithayakorn, Thaworn; Sakai, Toshiyuki; Ishibashi, Masami Flavonoids from Eupatorium enhancing activity odoratum with death receptor promoter Heterocycles (2009), 77(2), 1379-1388 [4] K Srinivasa Rao, Pradeep Kumar Chaudhury and Anshuman Pradhan Evaluation of anti-oxidant activities and total phenolic content of Chromolaena odorata Food and Chemical Toxicology, 48, Issue 2, 729-732 [5] Toan-Thang PHAN, Lingzhi WANG, Patrick SEE, Renee Jacqueline GRAYER, Sui-Yung CHAN and Seng Teik LEE Phenolic Compounds of Chromolaena odorata Protect Cultured Skin Cells from Oxidative Damage: Implication for Cutaneous Wound Healing Biological & Pharmaceutical Bulletin Vol 24 (2001) , No 12 1373 [6] Phan Toan Thang, See Patrick, Lee Seng Teik, Chan Sui Yung Anti-oxidant effects of the extracts from the leaves of Chromolaena odorata on human dermal fibroblasts and epidermal keratinocytes against hydrogen peroxide and hypoxanthinexanthine oxidase induced damage Burns, 27, Issue , Pages 319-327, 2001 [7] Pisutthanan N, Liawruangrath B, Liawruangrath S, Baramee A, Apisariyakul A, Korth J, Bremner JB Constituents of the essential oil from Nguyễn Thị Quyên 46 K33C Khoa Hóa học Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp aerial parts of Chromolaena odorata from Thailand Nat Prod Res 2006 May 20;20(6):636-40 [8] Ling B, Zhang M, Kong C, Pang X, Liang G Chemical composition of volatile oil from Chromolaena odorata and its effect on plant, fungi and insect growth Ying Yong Sheng Tai Xue Bao 2003 May; 14 (5): 744 - [9] Ferdinand Bohlmann, Naleen Borthakur, Robert M King, Harold Robinson Further prostaglandin-like fatty acids from Chromolaena morii Phytochemistry, 21, Issue 1, 1982, 125 - 127 [10] Dat NT, Lee K, Hong YS, Kim YH, Minh CV, Lee JJ A peroxisome proliferator-activated receptor-gamma agonist and other constituents from Chromolaena odorata Planta Med 2009 Jun;75(8):803-7 [11] Suksamrarn A, Chotipong A, Suavansri T, Boongird S, Timsuksai P, Vimuttipong S, Chuaynugul A Antimycobacterial activity and cytotoxicity of flavonoids from the flowers of Chromolaena odorata Arch Pharm Res 2004 May; 27(5): 507 - 11 [12] Hidalgo Boez D, de los Reos C, Crescente O, Caserta A Antibacterial and chemical evaluation of Chromolaena moritziana J Ethnopharmacol 1998 Jan; 59 (3): 203 - [13] Owoyele VB, Adediji JO, Soladoye AO Anti-inflammatory activity of aqueous leaf extract of Chromolaena odorata Inflammopharmacology 2005; 13 (5 - 6): 479 - 84 [14] Hung TM, Cuong TD, Dang NH, Zhu S, Long PQ, Komatsu K, Min BS Flavonoid glycosides from Chromolaena odorata leaves and their in vitro cytotoxic activity Chem Pharm Bull (Tokyo) 2011;59(1):129-31 [15] Vừ Vn Chi, 1999 T in cõy thuc Vit Nam NXB Y hc, H Ni, Tr.297 Nguyễn Thị Quyên 47 K33C Khoa Hóa học Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp [16] Bỏo cỏo ti hp tỏc Ngh nh th Vit Nam - Hn Quc 2003 2006: Nghiờn cu húa hc theo nh hng hot tớnh sinh hc cỏc cõy thuc dõn tc Vit Nam nhm to sn phm cú giỏ tr cao phc v cho cuc sng. [17] O.N.Irobi, Activities of Chromolaena odorata (Compositae) leg extract against Pseudomonas aeruginosa and Streptococcus faecali Journal of Ethnopharmacology 1992; 37: 81-83 [18] Cacares A, Menondez H, Mendez E, Cohobon E, Samayia BE, Jauregui E, Prealta E, Carrilo G Antigonorrhoeal activity of plants used in Guatemala for the treatment of sexually transmitted diseases, Journal of Ethnopharmacology 1995; 48: 85-88 [19] Ngono Ngane A, Ebelle Etame R, Ndifor F, Biyiti L, Amxam Zollo PH, Bouchet P Antifungal activity of Chromolaena odorata (L) King & Robinson (Asteraceae) of Cameroon Chemotherapy 2006; 52 : 103 - [20] Akah PA Mechanism of hemostatic activity of Eupatorium Int J Crude Res 1990; 28: 253 -238 [21] Triratana T, Suwannuraks R, Naengchomnong W.Effect of on the blood coagulation J Med Assoc Thailand 1991; 74: 283 - 289 [22] Phan Toan Thang, Hughes MA, Cherry GVV.Effect of an aqueos extract from the leaves of Chromolaena odorata on human Keratinocytes and on their migration in an in vitro model reepithelialization Wound Rep Reg 2001; 9: 305 - 313 [23] Phan Toan Thang, Hughes MA, Cherry GW Enhanced proliferation of fibroblast and endothelial cells treated with an extract of the leaves Chromolaena odorata (Eupolin): a herbal remedy for treating wound Plant Reconstr Surg 1998; 101: 756 - 765 [24] Hayerman A.E./ Butler I.G., Assay of condenesed tanin or flavonoid oligomers and related flavonoit in plant, Meth, Enz, 234, pp249 (1994) Nguyễn Thị Quyên 48 K33C Khoa Hóa học Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp [25] Ternai b., Markham K.R., C13 - NMR of flavonoids- 1- flavones and flavonols, Tetrehedron 32, pp565 (1976) [26] Mabry F.J., Markman R.B., Thomas M.B., The syrematic indentification of flavonoids, springer Verlag- Berlin - Heidelbeag- New York, (1970) [27] Harbon J.B., The flavonoids advance in research since 1986, Chaprman& Hall, (1998) [28] Agrawal PK Carbon-13 NMR of flavonoids, 1989 Elsevier, Netherlands, tr 133-134 [29] Uydes-Dogan BS, Takir S, Ozdemir O, Kolak U, Topcu G, Ulubelen A The comparison of the relaxant effects of two methoxylated flavones in rat aortic rings Vascular Pharmacology 43(4): 220-6 Nguyễn Thị Quyên 49 K33C Khoa Hóa học [...]... ca flavonoit t n nh cao v dn n s hỡnh thnh cỏc nhúm flavonoit mi nh: Neoflavonoid, Auron, Chromanoeumaran S tin húa ca flavonoit liờn quan n quỏ trỡnh tin húa thc vt T cỏc loi cú g s khai n cỏc loi cõy bi ó phỏt trin dn n ba s thay i quan trng v mt cu trỳc ca flavonoit: - S bin mt Proantoxianidin trong lỏ - S mt 3 nhúm OH trong vũng benzen - S thay th Flavonol (Quercetin) bi Flavon (Luteonin) Cỏc... S) Trong khi cỏc dn xut 6-Hydroxy tng ng li phõn b rng trong phõn lp Cỳc l phõn lp ó phỏt trin hn so vi cỏc phõn lp trờn v mt tin húa thc vt Cho n nay cú hn 4000 flavonoit c tỡm thy t thc vt: Ban u chỳng c phỏt hin vi vai trũ l cỏc sc t ca thc vt vo mựa thu khi cỏc loi hoa, lỏ cõy dn chuyn sang mu vng, da cam, Cỏc flavonoit cng c tỡm thy trong rau, qu, qu hch, ht, c, gia v, thõn cõy, cỏc loi hoa cng... flavonol rt ph bin trong t nhiờn, v trớ v s lng cỏc nhúm hydroxy liờn kt vi cỏc nguyờn t Cacbon ca khung to nờn cỏc cht khỏc nhau Trong thc vt, cỏc flavon v flavonol thng khụng tn ti di dng t do m thng di dng glicozit 1.3.2.2 Flavanon (dihydroflavon) Cỏc flavanon cú cụng thc cu to chung nh sau: OR O RO O Hỡnh1.6: Flavanon Cỏc flavanon nm trong cõn bng h bin vi cỏc Chalcon do vũng dihydropyron ca flavanon... loi cỏc phng phỏp sc ký Trong phng phỏp sc ký pha ng l cỏc lu th (cỏc cht trng thỏi khớ hay lng), cũn pha tnh cú th l cỏc cht trng thỏi lng hoc rn Da vo trng thỏi tp hp ca pha ng, ngi ta chia sc ký thnh hai nhúm ln: sc ký khớ v sc ký lng Da v cỏch tin hnh sc ký, ngi ta chia sc ký ra thnh cỏc phng phỏp sc ký ch yu sau: 1.5.3.1 Sc ký ct (C.C) õy l phng phỏp sc ký ph bin nht, cht hp ph l pha tnh gm cỏc... (Heteronuclear Multiple Quantum Coherence): Cỏc tng tỏc trc tip H-C c xỏc nh nh vo cỏc tng tỏc trờn ph ny Trờn ph, mt trc l ph 1H-NMR cũn trc kia l 13C-NMR Cỏc tng tỏc HMQC nm trờn nh cỏc ụ vuụng trờn ph - Ph 1H-1H COSY (HOMOCOSY) (1H-1H Chemical Shift Correlation Spectroscop): Ph ny biu din cỏc tng tỏc xa H-H, ch yu ca cỏc proton ớnh vi cacbon lin k nhau Chớnh nh ph ny m cỏc phn ca phõn t c ni ghộp li vi nhau... vic s dng cỏc loi ph, ngi ta cũn s dng kt hp vi cỏc chuyn húa húa hc cng nh cỏc phng phỏp phõn tỏch, so sỏnh kt hp khỏc c bit i vi cỏc phõn t nhiu mch di, tớn hiu ph NMR b chng lp nhiu khú xỏc nh chớnh xỏc c chiu di cỏc mch i vi phõn t cú cỏc n v ng thỡ vic xỏc nh chớnh xỏc loi ng cng nh cu hỡnh ng thụng thng phi s dng phng phỏp thy phõn ri xỏc nh bng phng phỏp so sỏnh LC-MS hoc GC- MS vi cỏc ng chun... quỏ trỡnh chit c xỏc nh bng mt vi cỏch khỏc nhau Vớ d: - Khi chit cỏc ancaloit, ta cú th kim tra s xut hin ca hp cht ny bng s to thnh kt ta vi nhng tỏc nhõn c trng nh tỏc nhõn: Ddragendroff v tỏc nhõn Mayer - Cỏc flavonoit thng gp l nhng hp cht mu, vỡ vy khi dch chit chy ra m khụng cú mu s ỏnh du s ra ht nhng cht ny trong cn chit - Khi chit cỏc cht bộo thỡ nng trong cỏc phn ca dch chit ra v s xut hin... hoa Flavonoit l mt nhúm hp cht poliphenol a dng v cu trỳc húa hc v tỏc dng sinh hc Chỳng cú mt hu ht cỏc b phn ca cõy, c bit trong t bo thc vt, l hp cht c cu to gm hai vũng benzen A, B c kt ni bi mt d vũng Cacbon vi khung Cacbon C6-C3-C6 Ti cỏc vũng cú ớnh mt hay nhiu nhúm hydroxy t do hay ó thay th mt phn Vỡ vy, v bn cht chỳng l cỏc poliphenol cú tớnh axit Cỏc poliphenol cú th phn ng ln nhau qua cỏc... Transfer): Ph ny cho ta nhng tớn hiu ph phõn loi cỏc loi cacbon khỏc nhau Trờn cỏc ph DEPT, tớn hiu ca cacbon bc bn bin mt Tớn hiu ph ca CH v CH3 nm v mt phớa v ca CH2 v mt phớa trờn ph DEPT 135o Cũn trờn ph DEPT 90o thỡ ch xut hin tớn hiu ph ca cỏc CH 1.6.3.2 Ph cng hng t ht nhõn hai chiu: õy l cỏc k thut ph hai chiu, cho phộp xỏc nh cỏc tng tỏc ca cỏc ht nhõn t ca phõn t trong khụng gian hai chiu... ng ln nhau qua cỏc nhúm hydroxyl to thnh cỏc phõn t phc tp hn hay cú th liờn kt vi cỏc hp cht khỏc trong cõy nh Oza (dng glicozit) hay (protein) Cỏc flavonloit l dn xut ca 2-phenyl Chroman (flavan) 2' A 1' 8 9 7 O B 3' 4' 2 5' 3 6 10 5 4 6' C Hỡnh 1.3 : Flavan (2-phenyl chromen) Mt s flavonoit cú hat tớnh sinh hc th hin kh nng chng oxi húa 1.3.2 Cỏc nhúm flavonoit [24, 25,26, 27] 1.3.2.1 Flavon v ... .12 1.2 Cỏc nghiờn cu v húa hc v hot tớnh sinh hc ca C lo .12 1.3 Tng quan v flavonoit 14 1.3.1 S lc v lp cht flavonoit 14 1.3.2 Cỏc nhúm flavonoit 16 1.4 Cỏc phng phỏp... ca flavonoit t n nh cao v dn n s hỡnh thnh cỏc nhúm flavonoit mi nh: Neoflavonoid, Auron, Chromanoeumaran S tin húa ca flavonoit liờn quan n quỏ trỡnh tin húa thc vt T cỏc loi cú g s khai n cỏc... cỏc sc t ca thc vt vo thu cỏc loi hoa, lỏ cõy dn chuyn sang mu vng, da cam, Cỏc flavonoit cng c tỡm thy rau, qu, qu hch, ht, c, gia v, thõn cõy, cỏc loi hoa cng nh chố hoc ru vang Chỳng l cỏc