Bài giảng miễn dịch kháng thể

CHỈÏC NÀNG KHẠN G THÃØ Mở đầu Sỉû kãút håüp âàûc hiãûu våïi khạng ngun l mäüt nhỉỵng chỉïc nàng ca khạng thãø Chỉïc nàng ca khạng thãø (Ig) cọ liãn quan chàût ch våïi cáúu trục, cáúu trục khạng thãø quy âënh: Âoản Fab: ( Fragment antigen binding) Cọ chỉïc nàng kãút håüp âàûc hiãûu våïi khạng ngun (KN), lm báút hoảt nọ, m cạc kãút qu l-họa â âỉåüc nghiãn cỉïu v ỉïng dủng nhiãưu k thût miãùn dëch Âoản Fc: ( Fragment crystallizable) Näúi âoản Fab våïi nhau, cọ chỉïc nàng kãút håüp våïi cạc thủ thãø trãn bãư màût tãú bo (hồûc phán tỉí), khåíi âäüng cạc cå chãú hoảt họa: Bảch cáưu, bäø thãø Nhỉ váûy, khạng thãø cọ chỉïc nàng hoảt họa hãû miãùn dëch khäng âàûc hiãûu I.CHỈÏC NÀNG NHÁÛN BIÃÚT V KÃÚT HÅÜP KN ( ca Fab) 1.1Âải cỉång: Nhỉỵng khại niãûm 1.1.1.Ba âàûc ca phn ỉïn g kãút håüp KNKT +Sỉû kãút håüp l thûn nghëch Khäng phi l phn ỉïng họa hc, váûy sau kãút håüp v phán ly cáúu trục họa hc ca KN hồûc KT háưu khäng thay âäøi +Sỉû kãút håüp l âàûc hiãûu KT KN no tảo chè kãút håüp âàûc hiãûu våïi khạn g ngun áúy Tênh cháút ny âỉåüc ỉïn g dủn g räün g ri âãø phạt hiãûn v âënh lỉåün g nhiãưu cháút nãúu ngỉåìi ta tảo âỉåüc KT chäún g cháút âọ +Phn ỉïn g tảo nhiãût : Nhiãût gii phọng tỉì 2,0-4,0 Kcal/mol Cạc KT gi l "lảnh" cọ thãø gii phọng 30-40 Kcal/mol, kãút håüp ráút úu våïi KN åí 37oC KT nọng (nhỉ KT chäúng Rh) thç ta nhiãût kẹm (2-10 Kcal/mol) nhỉng lải phn ỉïng våïi KN åí nhiãût âäü 37 1.1.2.Paratop v epitop -Paratop: L vë trê trãn bãư màût KT s trỉûc tiãúp kãút håüp våïi mäüt vëtrê nháút âënh trãn bãư màût KN (gi l epitop) Paratop nàòm åí âáưu tỉû ca Fab (âáưu ca Fab näúi våïi Fc), thüc g thay âäøi ca chùi nàûn g v chùi nhẻ (VH v VL) Cáúu trục Paratop: Paratop khäng phi l mäüt âoản peptit liãn tủc, di,m chè l mäüt (hồûc mäüt säú) axit amin nàòm cạch qung Âọ l nhỉỵng" âiãøm" m paratop tiãúp xục våïi epitop Thäng thỉåìng cọ tỉì 3-6" âiãøm" váûy 1.1.3.Cạc lỉûc liãn kãút giỉỵa KN-KT (epitop v paratop) Lỉûc hụt ténh âiãûn : Âỉåüc thỉûc hiãûn giỉỵa mäüt nhọm chỉïa chỉïc mang âiãûn ca paratop våïi mäüt nhọm mang âiãûn khạc dáúu ca epitop Vê dủ: Giỉỵa - COO- v - NH3+ lỉûc ny cần mäüt khong cạch thêch håüp giỉỵa nhọm âãø âảt trë säú täúi âa Nọ t lãû nghëch våïi bçnh phỉång khong cạch (d), vç váûy nãúu khong cạch tàng lãn thç lỉûc gim âi ráút nhanh Nọ t lãû nghëch våïi bçnh phỉång khong cạch (d), vç váûy nãúu khong cạch tàng lãn thç lỉûc gim âi ráút nhanh Lỉûc ca cáưu näúi hydro: Tảo giỉỵa ngun tỉí H+ (trãn phán tỉí KN hồûc KT ) thỉûc cháút âáy cn g l lỉûc hụt ténh âiãûn , nãn cn g phủ thüc vo khon g cạc h Lỉûc liãn kãút k Mäüt nhọm k nỉåïnỉåï c nàòcm: â gáưn, thç chụng s liãn kãút sau lai trỉì cạc phán tỉí nỉåïc åí giỉỵa chụng ngỉåìi ta cho ràòng lỉûc ny chi phäúi 50% lỉûc liãn kãút KN-KT näúi chung Lỉûc Van der Walls: Do sỉû chuøn âäüng ca cạ c âiãûn tỉí lm cho phán tỉí tråí thnh cọ cỉûc,v hụt phán tỉí bãn cảnh nãúu tiãúp cáûn våïi lỉûc khạc dáúu ca phán tỉí ny Khong cạch cọ vai tr hãút sỉïc to låïn, vç lỉûc ny tè lãû nghëch våïi d - Cạc lỉûc nọi trãn nãúu riãng r thç hon ton khäng â mảnh âãø chäúng lải va chảm chuøn âäüng nhiãût (Brown) Âãø liãn kãút âỉåüc KN-KT, cạc lỉûc phi phäúi håüp - Cáúu hçnh ca paratop phi ph håüp cao âäü våïi epitop cho cạc lỉûc âọ âäưn g thåìi xút hiãûn Kon g cạc h bãn phi thêch håüp âãø cạc lỉûc âọ cn g âảt giạ trë cao Âọ l bn cháút ca khại niãûm vãư âàûc hiãûu KN-KT v ại giỉỵa chụn g 1.1.4 Tênh tảp loải ca KT mäüt khạn g huút Máùn cm cho váût bàòn g mäüt protein tinh khiãút (vê dủ: ovalbumin cọ 10 epitop, hồûc thyroglobulin cọ 40 epitop) ta thu âỉåüc khạn g huút chỉïa cạc KT "cn g chäún g lải mäüt KN'' Do váûy gi l khạn g huút âån âàûc hiãûu Tuy nhiãn häùn håüp KT khạn g huút ny váùn tảp vãư âàûc hiãûu vç: - Chụng cọ cạc paratop khạc nhau, chè ph håüp våïi mäüt epitop nháút âënh ca khạng ngun Khi cạc epitop âỉåüc giåïi thiãûu trãn bãư màût âải thỉûc bo, thç cạc clon khạc ca hãû lympho s sn xút cạc KT chäúng lải cạc epitop tỉång ỉïng Do váûy, âån âàûc hiãûu nọi trãn cọ tảp loải âa clon -Ngay mäüt táûp håüp cạc KT cng chäúng mäüt epitop váùn cọ sỉû tảp loải Khi gáy máùn cm liãn tủc bàòng mäüt KN nháút chè mang mäüt epitop nháút (hapten) thç cng vãư sau, ta cng thu âỉåüc KT cọ âàûc hiãûu (ại tênh) cao hån trỉåïc Tuy váûy häùn håüp KT ny váùn cn tảp loải vãư mỉïc âäü âàûc hiãûu, vç váùn cạc clon limpho bo khạc sn xút -Nãúu tạc h mäüt tãú bo tảo KT riãng r (thüc mäüt clon) räưi cho nhán lãn, sau lai ghẹp våïi tãú bo u, thç clon ny s sn xút cạc phán tỉí KT giäún g hon ton vãư cáúu trục phán tỉí, paratop, v cọ cn g mỉïc âäü âàûc hiãûu Âọ l KT âån âàûc hiãûu âån clon, khäng cọ âiãưu kiãûn tỉû nhiãn d.Phn ỉïn g cäú âënh ( tiãu thủ) bäø thãø Khi träün KN våïi KT, nhiãưu trỉåìn g håüp ta khäng quan sạt tháúy ta (hồûc ngỉng kãút ), cọ thãø näưn g âäü ca chụn g quạ tháúp , hồûc KT thüc loải khäng gáy ta Tuy váûy , nãúu cọ màût bäø thãø, bäø thãø s bë hoảt họa , gàõn vo phỉïc hãû KN-KT, váûy lỉåün g bäø thãø tỉû s hao hủt âi Qua âọ, ta phạn đâ oạn âỉåüc â xáøy sỉû kãút håüp KN-KT e.Miãùn dëch âạn h dáúu : Nãúu KN hay KT âỉåüc gàõn cạc cháút âãø "âạn h dáúïu "cho dãù phạt hiãûn , thç phn ỉïn g kãút håüp KN-KTs tàng âäü nhảy lãn ráút nhiãưu láưn Cäú nhiãn, cháút âạn h dáúu khäng âỉåüc lm biãún KN, KT, khäng dãù bong Hiãûn nay, ngỉåìi ta âạn h dáúu KT bàòn g cháút phạt hun h quang (phạt hiãûn bàòn g kênh hiãøn vi dn g tia tỉí ), hồûc dn g enzym (phạt hiãûn bàòn g cå cháút thêch håüp ), hồûc dn g âäưn g vë phọn g xả (phạt hiãûn bàòn g mạy hồûc nh tỉång n h ) Miãùn dëch gàõn enzym (ELISA) Enzyme linked immunosorbent assay Cn g theo ngun l trãn, cháút phạt hun h quang âỉåüc thay bàòn g enzym cọ hoảt cao (vê dủ peroxydaza), phạt hiãûn bàòn g cå cháút âàûc hiãûu , thỉåìn g cho mu , hồûc dãù phạt hiãûn sn pháøm bàòn g mäüt phn ỉïn g lãn mu Ỉu âiãøm l nhảy hån nhiãưu láưn so våïi k thût hun h quang v cọ thãø phạt hiãûn KN dản g phán tỉí, khäng cáưn gàõn våïi tãú bo Cạc h tiãún hn h: Ph KN lãn âạy äún g nghiãûm (bàòn g cháút cao phán tỉí âãø gàõn chàût ) sau âọ ph tiãúp huút nghi ngåì cọ KT âàûc hiãûu lãn räưi rỉía b KT thỉìa ; ph tiãúp KT âạn h dáúu (enzym) räưi rỉía tiãúp , cúi cn g ph cå cháút lãn Enzym nãúu cn lải (do KT âạn h dáúu âỉåüc kãút håüp s biãún cå cháút thn h mäüt cháút cọ mu (hồûc cho phn ỉïn g mu ) f Miãùn dëch phọn g xả (RIA: Radio - Immunoassay): L cho kãút qu nhảy nháút , dỉûa theo ngun l cản h tranh Cn ráút nhiãưu k thût khạc cn g cọ sỉí dủn g ngun l kãút håüp âàûc hiãûu giỉỵa KN v KT (củ thãø l giỉỵa Fab cọ paratop kãút håüp âỉåüc våïi epitop ca KN) 2.CHỈÏC NÀNG HOẢT HỌA HÃÛ MIÃÙN DËCH KHÄNG ÂÀÛC HIÃÛU     Âáy l chỉïc nàng ca âoản Fc Thäng thỉåìn g, hãû miãùn dëch khäng âàûc hiãûu cọ thãø hoảt họa m khäng cáưn khạn g thãø Sinh váût chỉa tiãún họa âãún mỉïc tảo KT âàûc hiãûu váùn cọ thãø tỉû bo vãû trỉåïc cạc úu täú gáy bãûn h Nhỉng khạn g thãø âàûc hiãûu xút hiãûn ,thç l tạc nhán quan trn g báûc nháút hỉåïn g cạc biãûn phạp khäng âàûc hiãûu vo nåi KN táûp trung m viãûc táûp trung KN cn g KT (âoản Fab) gáy 2.1.Chỉïc nàng hoảt họa bảc h cáưu Trỉåïc âáy cạc bảc h cáưu âỉåüc xãúp vo hãû huút hc , r rn g âãø cho håüp l v ph håüp våïi chỉïc nàng ch úu ca chụn g, ngỉåìi ta phi xãúp bảc h cáưu vo hãû miãùn dëch Nhiãưu loải bảc h cáưu cọ thủ thãø våïi Fc ca khạn g thãø Vê dủ: Bảc h cáưu âån nhán, âải thỉûc bo : Cọ thủ thãø cho IgG1, IgG3, IgE Bảc h cáưu âa nhán trung : IgG1, IgG3, IgG4,IgA Bảc h cáưu ỉa bazå : IgE Bảc h cáưu ỉa eosin : cạc IgG Bảc h cáưu K : cạc IgG Lympho bo (T,B) : cạc IgG (IgM,A: åí mäüt säú tãú bo ) Tiãøu cáưu : cạc IgG Hoảt họa bảc h cáưu thỉûc bo (hiãûn tỉåün g opsonin họa ) - Âải thỉûc bo cọ thãø àn v tiãu hy nhiãưu âäúi tỉåün g thỉûc bo khạc nhau, nhỉng KT gàõn Fab vo cạc âäúi tỉåün g âọ (cn Fc gàõn våïi thủ thãø ca âải thỉûc bo ) thç tãú bo ny âỉåüc hoảt họa ráút mản h, tàng cỉåìn g kh nàng bàõt giỉỵ, nút v tiãu hy âäúi tỉåün g (mang KN) Nhỉỵn g k sinh váût bë ph båïi IgE cn g l âäúi tỉåün g háúp dáùn v hoảt họa âải thỉûc bo Cọ thãø hçnh dung khạn g thãø l cáưu näúi phán tỉí giỉỵa cạc tãú bo thỉûc bo våïi âäúi tỉåün g thỉûc bo -Bảc h cáưu âa nhán trung váùn cọ kh nàng bạm v thỉûc bo Nhỉng Fc ca khạn g thãø (v C3b ca bäø thãø) l nhỉỵn g cháút opsonin mản h, tỉïc l cọ kh nàng kêch hoảt sỉû bạm dênh, àn, tiãu hy cạc âäúi tỉåün g thỉûc bo (hiãûn tỉåün g ny trỉåïc âáy gi l sỉû "opsonin họa ") - Bảc h cáưu ỉa eosin cọ thãø tråí thn h tãú bo gáy âäüc nãúu thủ thãø ca ( våïi Fc) âỉåüc Fc gàõn vo Bàòn g cạc h ny ngỉåìi ta tháúy bảc h cáưu ỉa eosin diãût cạc k sinh trn g v áúu trn g ca nọ, sau cạc âäúi tỉåün g ny bë ph båíi KT âàûc hiãûu - Tương tỉû váûy , gáy âäüc ca tãú bo NK tàng lãn v chụn g tråí thn h cọ âënh hỉåïn g cọ màût KT lm cáưu näúi giỉỵa chụn g våïi tãú bo âêch Bàòn g cạc h ny , NK â diãût tãú bo mang vi rụt , tãú bo ung thỉ Hoảt họa tãú bo gáy âäüc: L cạc tãú bo cọ kh nàng tiãút cạc cytokin-toxin gáy âäüc, gáy chãút cho cạc tãú bo mang KN Âäúi tỉåüng ch úu ca chụng l nhỉỵng tãú bo (mang KN) â bë âoản Fab ca KT kãút håüp, cn âoản Fc tỉû cọ vai tr háúp dáùn cạc tãú bo gáy âäüc (väún cọ thủ thãø våïi Fc) Âáy l cạch "gáy âäüc phủ thüc KT" (ADCC: Antibody dependant cellular cytotoxicity) Hoảt họa tãú bo ại kiãưm (bazå) Tãú bo ỉa kiãưm cọ thủ thãø gàõn âỉåüc våïi Fc ca phán tỉí IgE Pháưn Fab ca IgE bë KN kãút håüp s thäng qua thủ thãø nọi trãn, khåíi âäün g mäüt cå chãú gii phọn g cạc hảt chỉïa cạc cháút gáy viãm (tàng tháúm mảc h) mäi trỉåìn g xung quanh, tham gia diãût k sinh váût Khạn g thãø kãút håüp âàûc hiãûu våïi KN, màût khạc , hoảt họa khäng âàûc hiãûu cạc cå chãú dëch thãø v tãú bo , l mäüt nhỉỵn g tạc nhán quan trn g gáy viãm, theo cạc cå chãú: - Sn pháøm C3a C5a gáy tàng tháúm mảc h v háúp dáùn bảc h cáưu âa nhán -Cạc cháút cọ hoảt tỉì tãú bo mast gii phọn g -Cạc xytokin ca bảc h cáưu trung v âải thỉûc bo - Cạc phỉïc håüp miãùn dëch hçnh thn h tải chäù, hay làõn g ân g tỉì mäi trỉåìn g dëch thãø - Sỉû háúp dáùn cạc tãú bo viãm tåïi vë trê xáøy sỉû kãút håüp KN-KT (hồûc nåi chụn g làõn g ân g) 2.2.Hoảt họa cå chãú váûn chuøn Ig qua mn g tãú bo : Tãú bo biãøu mä rüt cọ thủ thãø våïi Fc giụp cho cạc IgA åí thãø lỉåỵn g phán (dimere) k hiãûu (IgA)2 cọ thãø gàõn vo Chênh sỉû gàõn kãút ny â hoảt họa mäüt cå chãú váûn chuøn : Thoảt âáưu c IgA lỉåỵn g phán v thủ thãø làûn vo tãú bo dỉåïi dản g mäüt nang nh (khäng bo ), räưi di chuøn xun tãú bo , sang phêa âäúi diãûn , âãø cúi cn g âỉåüc gii phọn g ln g rüt thỉûc hiãûn vai tr bo vãû niãm mảc h rüt Mäüt pháưn thủ thãø cn gàõn vo lỉåỵn g phán (IgA)2 gi l "mn h tiãút " Cn g theo cå chãú trãn, âoản Fc ca IgA thäng qua cạc thủ thãø lm KT ny tiãút nỉåïc bt , sỉỵa , niãm mảc âỉåìn g hä háúp v cạc niãm mảc khạc .IgA từ sữa non qua niêm mạc ruột chế để vào máu thời kỳ trẻ bú mẹ .IgG thông qua Fc qua thai để vào thể thai nhi 2.3.Chức kháng thể phối hợp miễn dòch đặc hiệu không đặc hiệu: Sựï tiãún họa âem lải cho sinh váût kh nàng trỉûc tiãúp loải trỉì KN v tàng cỉåìng sỉû âënh hỉåïng ca MD khäng âàûc hiãûu loải trỉì KN Sỉû xút hiãûn KT cn lm cho phn ỉïng viãm thãm phong phụ vãư cå chãú bãûnh sinh: Mäüt màût khạng thãø kãút håüp âàûc hiãûu våïi KN, màût khạc, hoảt họa khäng âàûc hiãûu cạc cå chãú dëch thãø v tãú bo, l mäüt nhỉỵng tạc nhán quan trng gáy viãm, theo cạc cå chãú:      - Sn pháøm C3a C5a gáy tàng tháúm mảc h v háúp dáùn bảc h cáưu âa nhán -Cạc cháút cọ hoảt tỉì tãú bo mast gii phọn g -Cạc xytokin ca bảc h cáưu trung v âải thỉûc bo - Cạc phỉïc håüp miãùn dëch hçnh thn h tải chäù, hay làõn g ân g tỉì mäi trỉåìn g dëch thãø - Sỉû háúp dáùn cạc tãú bo viãm tåïi vë trê xáøy sỉû kãút håüp KN-KT (hồûc nåi chụn g làõn g ân g) 2.3.hoạt hóa bổ thể ( xem phần bổ thể ) Xin cám ơn ! ... håüp, cn Fab thỉï s kãút håüp våïi epitop cng loải åí phán tỉí KN khạc Ta cọ táûp håüp: - KN - KT - KN - KT - Do váûy, táûp håüp ny cọ âiãưu kiãûn âãø måí räüng theo chiãưu khäng gian, hçnh thnh... thỉìa KN thç táûp håüp s l KN -KT-KN, nhỉng lải thiãúu khạng thãø âãø liãn kãút chụng lải thnh cáúu trục mảng Ngỉåüc lải quạ thỉìa KT ta cọ cạc táûp håüp: KT-KN-KT, nhỉng thiãúu KN, âãø liãn... cạc cå chãú: - Sn pháøm C3a C5a gáy tàng tháúm mảc h v háúp dáùn bảc h cáưu âa nhán -Cạc cháút cọ hoảt tỉì tãú bo mast gii phọn g -Cạc xytokin ca bảc h cáưu trung v âải thỉûc bo - Cạc phỉïc håüp