Câc phuong phâp ché tao HPTRDira vào câc tmh chât vât lÿ, hoâ hoc cüa duoc chât và chât mang, câc HPTR co thé duoc diêu ché theo mot trong câc phirong phâp sau:- Phirong phâp dun chây: â
MUC LUC • • DAT VAN DE P H A N l - TƠNGQUAN 1.1 Thc chong sot rét nhôm sesquiterpenlacton 1.1.1 Artemisinin dân châft 1.1.2 Vài nét vê dihydroartemisinin 1.2 Hê phân tan rân 1.2.1 Dinh nghỵa 1.2.2 Câc phtfcfng phâp ché tao phân tan rân 1.2.3 Câu truc lÿ hôa cüa phân tan rân 1.2.4 Ca chê' làm tâng dô tan toc dô tan cüa phân tan rân 1.2.5 Chat mang dùng phân tan rân 1.3 Vài nét vê p - cyclodextrin 1.3.1 Câ'u truc cüa cyclodextrin 1.3.2 Tmh chat lÿ hôa cüa cyclodextrin 1.3.3 Co ché’làm tâng dô tan cüa cyclodextrin 1.3.4 Üng dung cüa cyclodextrin ngành duoc 1.4 Phirong phâp bào hôa carbonic 10 1.5 Mot sô nghiên cün vê phân tan rân cüa artemisinin dân chat 11 PHÂN - THl/C NGHIÊM VÀ KET QUÂ 2.1 Nguyên lieu mây môc thiet bi 13 2.1.1 Nguyên lieu 13 2.1.2 Mây môc thiet bi 13 2.2 Phirong phâp thirc nghiêm 13 2.2.1 Phirong phâp ché tao phân tân rân chuta dihydroartemisinin 13 2.2.2 Phuong phâp dô hôa tan cüa dihydroartemisinin 15 2.2.3 Théo dôi dô on dinh cüa phân tân rân 17 2.2.4 Phuong phâp bào ché viên nang dihydroartemisinin 17 2.3 Két quâ bàn luân 18 2.3.1 Duông chuân biëu diên moi tuong quan giûa nông dô DHA 18 mât dô quang cüa dung dich 2.3.2 Khâo sât khâ nâng hôa tan cüa DHA nguyên lieu 19 2.3.3 Khâo sât rmrc dô toc dô hôa tan cüa DHA HPTR vôti (3-cyd 20 HP-(3-cyd ché bàng câc PP khâc 2.3.4 So sânh chon nhüng HPTR câi thiên dô tan cüa DHA 28 tôt nhât ûng dung vào dang thuôc viên 2.3.5 Dô on dinh cüa DHA HPTR 30 2.3.6 Üng dung HPTR vào dang thuôc 33 PHÂN - KÉT LUÂN VÀ DE XUAT 39 TÀI LIEU THAM KHÀO QUY UÔC VIÉT TÂT AM Artemether ART Artemisinin C Nơng dơ r^max Nơng dơ dỵnh CTPT Cơng thrïc phân tir Cyd Cyclodextrin DHA Dihydroartemisinin DT, TDT Dô tan, toc dô tan HHVL Hôn hop vât lÿ HP-|3- Cyd Hydroxypropyl-(3- cyclodextrin HPTR Hờ phõn tan rn KLPT Khụl lirỗmg phân tu KST Kf sinh trùng K'ITP Kfch thuôc tiëu phân LD50 Liêu gây chét trung binh PEG Polyethylen glycol PP Phuong phâp SKD Sinh khâ dung SR Sot rét Thôi gian T° Nhiêt dô DAT VAN DE Nuôc ta mot nuôc nhiêt dôi nên câc bênh xâ hôi bênh truyên nhiêm khâ phô bien, dô bênh sot rét kf sinh trùng (KST) Plasmodium gây qua vât chû trung gian muôi Anopheles vân dang mot nhüng bênh tỵ le tir vong cao Hcrn 40% dân so thé gioi cô nguy co màc sot rét, hàng nàm tir 300 - 500 triêu ngirdi màc 1,5-2,7 triêu ngirdi chét [18], [36] Ô Viêt Nam, theo thông kê cüa Bô y té dén nam 2001 vân gàn 260.000 ngirài mâc sot rét, gàn 69.000 ngirôi mang KST hon 90 ngirdi chét sot rét [18] Mot nhỵrng ngun nhân gây tỵnh trang su khâng lai câc thc chông sot rét cüa Plasmodium falciparum (là KST chiém tÿ le lôn, cô noi tir 70-80%) Chrnh vi vây, viêc nghiên cüu tỵm thc mơi hiêu lue cao dâ dang vân dê duoc câc nhà nghiên ciru y duoc rât quan tâm Artemisinin câc dân chât: artesunat, dihydroartemisinin (DHA), artemether duoc sü dung làm thuôc chông sôt rét rât cô hiêu quâ, tâc dung tôt vôi câ nhtfng chüng dâ khâng lai câc thuôc kinh diën nhu cloroquin, mefloquin Dihydroartemisinin mot dân chât bân acetal cüa artemisinin cô hiêu lue diêu tri cao, liêu dùng thâp, cât sơt nhanh, tỵ le tâi phât thâp, dê dùng, an toàn giâ thâp hon câc dân chât khâc [17], [25] Tuy vây, DHA rât ft tan nuôc dàu, gây khô khan cho viêc bào ché dang thuôc cô sinh khâ dung cao Dâ mot sơ cơng trỵnh nghiên cüu ché tao phân tân rân cüa DHA vôi mot sô chât mang thân nuôc nhàm làm tâng dô tan cüa DHA cho két quâ tôt [11], [13], [14], [15], [20], [36] Tuy nhiên khâ nàng làm tâng dô tan cüa duoc chât phân tân rân khơng chỵ phu thc vào bân chât tỵ le chât mang mà côn phu thuôc vào phuong phâp ché tao Vỵ vây, chüng tơi tién hành nghiên cüu so sânh câc phuong phâp ché tao phân tân rân cüa DHA vôi mue tiêu: * So sânh ânh huông cüa câc phuong phâp ché tao phân tân rân cüa DHA dén mire dơ toc dơ hồ tan cüa DHA * Chon duoc phuong phâp tôt nhât dé ché tao phân tân rân cüa DHA irng dung vào dang thuôc viên PHAN - TONGQUAN 1.1 Thuoc chong sot rét nhôm sesquiterpenlacton Thanh hao hoa vàng (Artemisia annua L Asterceae) thuoc dâ duoc sü dung 2000 nàm y hoc co truyèn phuong Dông dé chüa bênh sot rét (SR) Nàm 1972, câc nhà khoa hoc Trung Quoc dâ chiét tù mot chat co tac dung tôt lên KST sot rét dàt tên Quinghaosu hay Artemisinin (ART) [36], [46] Véi cloroquin thuoc chong SR cơng hiêu nhâ't vào thâp kỵ 60-70 thï ART câc dân chat cüa no nhu: Artesunat, DHA, Artemether, Arteether dâ trô thành mot nhûng thuoc chong sot rét công dung nhât vào thâp kï 90 xa hcfn nüa 1.1.1 Artemisinin dân chat Vào nàm 1979, ngucfi ta dâ xâc dinh duoc câu truc sesquiterpenlacton vôi câu peroxyd nôi phân tü cüa ART Chmh câu peroxyd quyét dinh hoat tmh sinh hoc cüa ART câc dân chat Nhô vào nhom chûc ceton phân tu, nguôi ta dâ tong hop câc dân chat ban acetal cüa ART nhu: acid artesunic, DHA Câc dân chât dêu cô hoat tmh chong SR manh hon ART [25], [36] 1.1.2 Vài nét vê dihydroartemisinin ÇH3 H i R R -O Artemisinin -OH Dihydroartemisinin -OCH Artemether -o c 2h Arteether -OCOCH2CH2COOH Acid artesunic * Ban tong hop Viờc ban tong hỗfp DHA duỗfc thuc hiên dira nguyên tâc dùng NaBH4 khir hoâ ART môi trucmg methanol nhiêt dô 0- 5°C [17], [27], [29] ÇHs NaBH4/CHsOH -^ C Artemisinin Dihydroartemisinin * Câu truc hô hoc tỵnh chat * Tên khoa hoc: (3R,5aS,6R,8aS,9R,10S,12R,12aR)-Decahydro-3,6,9trimethyl- 3,12- epoxy- 12H- pyrano- [4,3-j]- 1,2 benzodioxepin- 10- ol * Công thuc phân tir: C15H240 * Khôi luỗmg phõn tu: 284 * Nhiờt dụ nụng chõy: 145-150! (Dung di ;h 1,0026% CHC13) * Nàng suât quay eue [ a]D20 không màu, không mùi, vi dàng, * Tfnh chât: DHA nhung ti rat ft tan nuôc dàu, tan tôt ethanol 95°, tan duoc câc dung môi nhu ether, cloroform Trong môi trucmg kiêm manh acid manh, DHA bi phân huÿ nhung vûng môi trucmg trung tmh Cl0 mot trung tâm bât dôi tao hai dông phân quang hoc oc p Bang phuang phâp nhiëu xa tia X, nguôi ta dâ chimg minh thé ràn DHA ton tai dang P nhung dung dich no hôn hop cüa hai dang a P [27], [29], [31] ♦ Tâc dung co ché tâc dung Trong co thé, DHA dang chun hô hoat tmh cüa artemether, arteether, acid artesunic thâm chf câ ART dô acid artesunic chuyën thành DHA nhanh nhât vơi tỵ lê lơn nhât nên dirac xem nhu tiên thuôc cüa DHA [27] DHA cô tac dung lên câc chüng Plasmodium, kë câ chüng dâ khâng cloroquin Nguôi ta cho ràng cô hiên tuong khâng chéo nhung thuc té lâm sàng chua phât hiên duoc hiên tuong KST khâng DHA Thü nghiêm in vitro, DHA tâc dung manh hon ART không 14 lân thâm chf manh hon cloroquin Thü nghiêm in vivo chuôt cho thây DHA manh hon ART tù 5-7 lân [27], [31], [36] Khi so sânh hiêu quâ diêu tri cüa DHA piperaquin, câc nhà nghiên cüu cüa hâng Cotec nhân thây: vôi liêu 480 mg, gian cât sôt cûa DHA ngân hon, gian sach KST mâu kéo dài hon khoâng 1,6 lân dàc biêt tỵ lê tâi phât 0% so vơi piperaquin 60,7% dùng 1500 mg piperaquin phosphat So sânh vôi câc thuôc nhôm, câc tâc giâ nhân xét ràng DHA dơc tmh tỵ lê tâi phât thâp hon [27] Co ché tâc dung: Do càu peroxyd nôi phân tù quyê't dinh tâc dung sinh hoc cüa nhôm nên DHA ART dêu tâc dông lên KST sôt rét qua hai giai doan: + Phâ vô càu peroxyd tao gôc tu do, sau dô gôc tu tao thành chiu tâc dông cüa Fe2+ Hem, xâm nhâp vào hông càu bi nhiêm gâp 300 hông càu lành + Gôc tu tao thành së alkyl hô nhỵrng phân tü protein càn cho su phât triën cüa KST sơt rét Su hoat hô DHA bôi Fe2+và Hem giâi thfch tmh chon loc cûa phân tü hoat chât KST tâng lên mot môi truông Giâ thiét duoc khâng dinh in vitro in vivo bôi thuc té câc chât bây gôc tu câc chelat sât làm giâm hoat tmh cüa thuôc [27], [36] ♦ Dtrac dông hoc * Trên dông vât thf nghiêm: Nghiên cüu hâ'p thu, phân bô, chuyën hoâ thâi trir cüa DHA bàng phuong phâp dânh dâu trilium cht cho thây: nơng dơ dỵnh (Cmax) dat duoc sau uông giô giâm côn 1/2 sau dô giô Sau 24 giô, thuôc thâi trù 67,5% luong ban dâu chü yéu qua phân nuôc tiëu (82,7%) Nghiên cüu thô cho thây tï lê lien két thuoc vdi protein huyét tuong khoõng 50% vợ võy co thộ phụi hỗfp cõc thuoc khâc mà không sa làm tâng doc tmh cûa DHA tranh châ'p lien két vdi protein huyét tuong [30], [31] * Duoc dông hoc ngudi: Sau uông viên nén DHA vdi liêu 1,1 mg/kg 2,2mg/kg, Cmaxdat duoc sau 1,33 gid tuong lỵng vdi nơng dơ DHA huyét tuong 0,13 jig/ml 0,71 |Lig/ml, t1/2làn luot cho hai nhom liêu 1,63 1,57 gid Thuoc thâi trù chü yéu qua phân nudc tiëu ô dang ban dàu Trong uông ART vdi liêu 15mg/kg, Cmax dat duoc sau 1,5 gid 0,09 |ng/ml Nhu vây, SKD theo dudng uông cûa ART chỵ bang không 1,62-10,8% so vơi DHA [27] ♦ Tac dung phu dơc tỵnh Nơi chung, DHA hàu nhu không co tac dung phu dôc tmh LD50 cûa DHA chuôt 834,5mg/kg Cho chuôt uong lien tue 15 ngày vdi liêu 60mg/kg cüng chua phât hiên duoc dâu hiêu bât thudng, mà chỵ sau cho ng liêu 180mg/kg (tüc gâp 100 liêu diêu tri d ngudi) mdi co hiên tuong giâm cân chân àn, câc hang so sinh lÿ khâc nàm gidi han binh thudng Két qua nghiên crïu cüng cho thây DHA không gây dôt bien gen [25], [30] Cüng nhu ART dân chat khâc, DHA gây dôc vdi thai chuôt Tuy nhiên, két quâ chua duoc chüng minh ngudi Mac dù vây cân hét süc thân dùng thuoc cho phu nü co thai, dâc biêt d thâng dâu thai kÿ [29] Vdi nhüng uu diëm nhu trên, DHA dâ thu hüt duoc su chü ÿ cüa nhiêu nhà nghiên cüu 1.2 Hê phân tan rân (Solid dispersion system) 1.2.1 Dinh nghỵa: Hê phân tan rân (HPTR) môt pha rân mot hay nhiêu duoc chât duoc phân tân mot hay nhiêu chat mang (carriers) hôc cơt (matrix), tro vê mât tâc dung duoc lÿ, duoc diêu ché bâng phuong phâp thỵch hop [6], [12] 1.2.2 Câc phuong phâp ché tao HPTR Dira vào câc tmh chât vât lÿ, hoâ hoc cüa duoc chât chât mang, câc HPTR co thé duoc diêu ché theo mot câc phirong phâp sau: - Phirong phâp dun chây: âp dung duoc chât bén vôi nhiêt chât mang co nhiêt dô nông chây thâp nhu PEG hoàc ure [12] - Phuong phâp dung môi: âp dung duoc chât chât mang không bén vôi nhiêt tan mot hay hai dung môi khâc [11], [12] - Phuong phâp nghiên: âp dung khơng thé dun chây hồc khơng chon duoc dung mơi dé hồ tan duoc chât chât mang [12], [15] - Phuong phâp bâo hoà carbonic: âp dung nhu phuong phâp dung môi, nhung loai dung mơi bàng câch suc C02 bâo hồ sê thu duoc mot két tüa dông nhât, dem sây khô, nghiên rây lây hat cô kich thuôc thich hop [32], [37], [39], [40], [45] 1.2.3 Câu truc lÿ hoâ cüa HPTR Dua vào tUüng tâc giûa duoc chât chât mang, ngudi ta dua câu truc [6], [11], [12] ♦ Hôn hop Eutecti don giân ♦ Câc dung dich ran ♦ Câc dung dich hôn dich kiëu thuÿ tinh ♦ Câc két tüa vô dinh hinh chât mang két tinh ♦ Tao thành hop chât hồc phuc chât mơi ♦ Phirc hop giûa duoc chât chât mang 1.2.4 Co ché làm tâng dô tan- toc dô tan (DT-TDT) cüa HPTR Hê phân tân rân làm tàng mue dô, toc dô tan cüa duoc chât ft tan do: + Giâm kich thuôc cüa tiëu phõn duỗfc chõt [12] + Lm thay doi trang thõi kột tinh cỹa duỗfc chõt hoc chuyởn tuf dang kột tinh sang dang vơ dinh hỵnh dê tan [13] + Làm thay rỵoi tâng tmh thâm cûa duofc chât dơi vơi mơi trtfơng hồ tan sur mât cüa câc chât mang thân nuôc, dàc biêt cô mât chât diên hoat [5], [33] + Làm giâm nng luỗmg cỷa quõ trợnh ho tan [12] + Do tao phiỵc dê tan [46] 1.2.5 Chât mang dùng HPTR * Yờu cu: Khụng dục, tro vờ mõt duỗfc lÿ, dê tan nc hồc thân nc, nhiêt dô nông chây thâp, bên vê nhiêt dông hoc lÿ hô tmh, khâ nàng làm tâng dơ tan cüa duoc chât ft tan Chât mang phâi thfch hop vôi PP ché tao, phù hop vôi dang bào ché du dinh tao duoc HPTR cô dô on dinh cao q trỵnh bâo qn * Mot sơ chât mang thuông dùng: acid citric succinic, acid mât, sterol dân chât, câc loai duông: manitol, sorbitol ure, chât diên hoat (Tweens, natri laurylsulfat), câc PEG, PVP dàc biêt (3- Cyd câc dân chât thé [15], [41] 1.3 Vài nét vë (3-cyclodextrin ( (3-cyd) Cyclodextrin nhûng sân phâm tu nhiên duofc diêu ché bàng phuong phâp tâc dông enzym lên tinh bot Hon 100 nàm truôc, Willers dâ phân lâp duoc Cyd tù môi trudng ni Bacillus amylobacter, sau dơ Schardinger tỵm duofc câu truc xâc dinh duoc tmh chât hoâ hoc cüa Cyd Hiên nay, Cyd duofc ùng dung rông râi câc iïnh vue: duoc phâm, mÿ phàm, thuc phâm nông nghiêp [42] 1.3.1 Câu truc cüa Cyd Ba sân phâm chmh duofc sân xuât công nghiêp là: a-cyd (cyclohexaamyloseC) (3-cyd (cycloheptaamylose) y-cyd (cyclooxaamylose) gôm tuong ùng 6,7, don vi glucopyranose liên két bâng câc dây nôi a-1, Bâng 6: Mire dơ hồ tan cüa DHA HPTR vôi HP- P- cyd câc tï lê khâc ché bàng PP dung môi % DHA hồ tan Thơi gian (phüt) DHA Tÿ lê 1: 15 Tÿ lê 1:5 Tÿ lê 1: 10 nguyên lieu 62,5 10 52,8 53,6 11,1 17,8 73,4 20 61,7 65,2 24,0 75,3 84,3 30 66,2 26,4 85,7 83,0 40 72,5 30,3 87,5 50 74,2 84,9 33,3 87,8 75,6 85,2 60 100 Thài gian (phüt) —♦—Tÿ lê 1: —“—Tÿ lê 1: 10 —a—Tÿ lê 1: 15 x DHÀ nguyên lieu Hinh Dô thi biëu diên toc dô hôa tan cüa DHA ché bàng PP dung môi vôi HP-P-cyd câc ty lê khâc Tù két quâ trên, cô thë rut nhân xét: Vôi PP ché tao HPTR cüa DHA chât mang HP- P-cyd thỵ DT TDT cüa DHA dèu tâng cao hon DHA nguyên lieu tâng theo tỵ lê chât mang Sau 60 phüt, luỗfng DHA ho tan dat tụi 87,8% tự hờ 1: 15, tâng 2,6 so vôi DHA nguyên lieu, cô thë HP- Pcyd HPTR cô vai trô làm giâm KTTP làm tâng tmh thâm cüa phân tü duoc chât 25 ♦ HPTR cüa DHA: HP- P-cyd ché bàng câc PP khâc Do HP- P-cyd cô dâc tỵnh hüt âm manh, nghiên rât dmh chày coi nên duoc chât chât mang sê không dông nhât khơ làm khơ ché phâm, vỵ vây chüng tơi không dùng PP nghiên dë ché tao HPTR cüa DHA vơi HP- P-cyd Vơi PP bâo hồ khf C02 thỵ suc khf bâo hồ, HPTR rât nhiêu bot xôp ô trang thai nhôt, quânh dmh nên rât khô bôc hoi dung môi dén can Mac dù chüng dâ thü gian suc khâ dài nhung dung môi vân không bay hoi hét, rât khô viêc làm khô HPTR ton khf C02 Hon nüa, HPTR cüa DHA vôi P-cyd ché bâng PP bâo hôa khf C02 két q rât tơt (toc dơ hồ tan tâng 2,9 lân so vôi DHA nguyên liêu); HP- P-cyd lai dât gàn gâp dôi P-cyd nên chüng không nghiên cüu HPTR cüa DHA vôi HP- p-cyd câc tỵ lê cao hon Trong dơ PP dơng khô duoc biêt dén nhiêu khâ nâng tao ché phâm cô KTTP nhô dô xôp cao, làm tâng DT cûa duoc chât nên chüng dâ âp dung PP dông khô vào HPTR cüa DHA nhâm câi thiên thë chât cüa HPTR tâng DT, TDT cüa DHA ♦ Üng dung PP dông khô dë diêu ché HPTR cüa DHA vôi chât mang P-cyd HP-P-cyd o tÿ lê 1: Tién hành khâo sât DT, TDT cûa DHA HPTR ché bàng PP dông khô ô tÿ lê 1: 5, thu duoc két quâ nhu ghi bâng hinh Bâng Mire dơ hồ tan cüa DHA HPTR voi Cyd o tï lê 1: ché bàng câc PP khâc Thôi gian (phüt) DHA: Pcyd (PPDM1) 10 20 30 40 50 60 21,5 32,1 46,7 52,0 63,0 67,1 % DHA hoà tan DHA: HP- DHA DHA: DHA: P- DHA: Pnguyên P-cyd cyd cyd ( Suc HP-P-cyd lieu (PPDK1) C02 lgicf (PP DK2) (PPDM2) + PPDK) 52,8 67,5 65,8 68,6 11,1 17,8 64,8 73,7 69,5 78,8 24,0 66,2 70,4 79,3 84,9 26,4 72,5 84,1 75,5 89,9 30,3 74,2 76,2 85,7 91,1 33,3 75,6 77,5 86,7 91,7 26 Tùf két quâ bâng hỵnh thé rut nhân xét: Khi ché HPTR cûa DHA bàng PP dông khô thi DT TDT cüa DHA dêu tàng hon so vôi PP dung môi thông thuông, kë câ vôi chat mang P-cyd hay HP- P-cyd, vf du ô 1: cüa DHA P-cyd ché bàng PP dông khô sau 60 phüt dâ 91% DHA duoc hồ tan, cüng dô ché bàng PP dung môi chỵ dat mûc 67% - Khi chüng tơi thü tién hành suc C02 bâo hồ mot giơ dơi vôi HPTR cüa DHA P-cyd, sau dô dùng PP dơng khơ thi toc dơ hồ tan cüa DHA lai giâm hon chỵ dùng PP dơng khơ mà khơng suc bâo hồ Dieu thë suc C02 mot giơ mà tỵ lê chât mang lai ft nên duoc chât chât mang bi phân tan làm giâm trang thâi két tinh, dô làm dông khô thi dô tan cüa DHA tàng ft hon - Thuc nghiêm cüng cho thây, vôi chât mang HP- P- cyd sân phâm dông khô cô thë chât dep, trâng xôp nhe côn vôi P- cyd thi HPTR bâm dfnh câ ô dây lo dông khô thành lo, nhung TDT cüa DHA cô P- cyd lai cao hon cô HP-P- cyd /sa o J3 < S Q PPDM1 Suc C02 lgiô + PPDK PPDM2 PPDK1 PP DK2 DHA ngun lieu PPDM2 Hỵnh Dơ thi so sânh toc dô hôa tan cüa DHA HPTR vôi chât mang P- cyd HP- P- cyd o tÿ lê 1: chê bàng câc PP khâc 27 * Khâo sât DT, TDT cüa DHA HPTR vôi chât mang PEG 6000, ché bâng PP dung môi ô câc tï lê khâc Tién hành ché tao HPTR cüa DHA vơi PEG 6000 bàng PP dung mơi câc tỵ le 1: 5, 1: 10 1: 15 chüng dâ thu duoc két quâ tuong tu phù hop vôi nhüng tài lieu truôc dâ nghiên cüu Cu thë là: müc dô toc dô tan cüa DHA HPTR vôi PEG 6000 déu cao hon so vôi DHA ngun lieu không tàng tỵ lê chat mang thi DT, TDT cüa DHA tâng lên, dièu thë tỵ lê PEG tâng thi müc dô phân tân cüa DHA tàng lên phân DHA ton tai dang dung dich rân tâng [11], [13], [15] * Khâo sât DT, TDT cüa DHA HPTR vôi chât mang PEG 6000 pcyd ché bâng PP dun chây câc tï lê khâc Tién hành khâo sât thuc nghiêm vôi tâc giâ khâc, chüng thây: - DT TDT cüa DHA HPTR tâng dang kë so vôi nguyên lieu, dàc biêt phôi hop dông chât mang P-cyd PEG thi khâ nàng hoà tan cüa DHA tâng hon nüa Müc dô tan cüa DHA HPTR thành phân tỵ lê DHA: pcyd: PEG = 1: 10: 20 dat 71,8% tỵ lê 1: 15: 30 dat 78,5% sau 60 phüt, hoà tan cao hon không 10% so vơi chỵ dùng PEG nhung vân thâp hon thành phànDHA: P-cyd (1: 10) - Tuy nhiên nhô viêc phôi hop thêm PEG vào nên cô thë diêu chê HPTR bàng PP dun chây PP don giân, dê thuc hiên, không cân thiét bi phüc tap Mac dù vây, khâ nàng üng dung HPTR cüa DHA diêu ché theo PP vào dang thc viên së khơ vi tỵ lê duoc chât chât mang rât cao, không phù hop viên cô luỗmg duoc chõt lụn [11] 2.3.4 So sõnh v chon nhüng HPTR dơ hồ tan cûa DHA cao dë urng dung vào dang thuoc viên Tù nhüng két q khâo sât dâ trỵnh bày trên, chüng tơi chon duoc sau: + DHA: P-cyd = 1:5 diêu ché bàng PP dông khô + DHA: P-cyd =1:15 diêu ché bàng PP nghiên suc C02bâo hồ + DHA: P-cyd =1:15 diêu ché bàng PP suc C02bâo hoà + DHA: HP-P-cyd =1:15 diêu ché bàng PP dung môi nhüng cô khâ nàng câi thiên DT TDT cûa DHA tôt nhât (nhu sô lieu ghi bâng 8) dë nghiên cüu üng dung vào dang thuôc viên cô sinh khâ dung cao 28 Bâng 8: Mite dơ hồ tan cûa DHA câc HPTR dâ chon Thôi gian (phüt) 10 20 30 40 50 60 % DHA hoà tan DHA: HPDHA: (3-cyd DHA: (3- cyd (3-cyd= 1: =1:5 = 1: 15 (PP (PPDK) nghiên cô C02) 15 (PPDM) 62,5 68,6 75,3 86,8 73,4 78,8 92,4 84,3 84,9 85,7 93,1 89,9 87,5 93,8 91,1 93,7 87,8 91,7 DHA: P-cyd DHA =1: 15 (PP nguyên lieu suc C02) 68,2 11,1 17,8 84,0 24,0 91,5 26,4 95,1 95,7 30,3 33,3 96,8 - Vôi HPTR cüa DHA: (3-cyd =1:5 (PP dơng khơ), màc dù toc dơ hồ tan cùa DHA tàng khâ cao, song PP ché tao dôi hôi thiét bi phüc tap gian dài, sân phâm tao hüt âm rat manh nên không thfch hop vôi diêu kiên thuc té de ûng dung vào dang thuôc viên - Vôi HPTR cüa DHA: HP- (3-cyd = 1: 15 (PP dung môi), màc dù cô khâ nàng câi thiên DT TDT cûa DHA tuong dôi tơt nhung tỵ lê chât mang HP- (3cyd cao, giâ thành khâ dàt hüt âm manh nên quâ trỵnh bơc hoi dung mơi mât nhiêu thơi gian, HPTR tao cüng cô tmh hüt âm manh sê không ben q trỵnh bâo qn nên chüng tơi khơng lua chon de ûng dung vào dang thuôc viên Do dô, chüng dâ chon phân tân rân cüa DHA chât mang (3- cyd ô tï lê 1: 15, ché tao bâng phuong phâp khâc nhau: PP nghiên suc C02bâo hồ PP bâo hoà C02- nhung câi thiên DT, TDT cüa DHA tôt cô ft nhuoc diëm, tù dô üng dung vào dang thuôc viên Câ hai HPTR dâ chon dêu suc C02 bâo hồ, nhu vây cô thé thây vai trô quan cüa C02 bâo hoà viêc làm tâng DT, TDT cûa duoc chât, diën hỵnh khâ nàng câi thiên rô rêt DT, TDT cüa ART [44], [45] dân chât DHA HPTR vôi cyclodextrin 29 2.3.5 Dô on dinh cüa DHA phân tan rân Nhu câc tài lieu dâ nhân dinh, viêc ûng dung P-cyd së bi han ché nhiêu néu nhu phân tan rân tao khơng hôc on dinh Vi vây viêc theo dôi dânh giâ dô on dinh cüa HPTR cân thiét ♦ Dô ôn dinh cüa DHA HPTR sau diêu ché Kiëm tra dô ôn dinh cûa DHA tât cà câc HPTR bàng sàc kÿ lôp mông, tién hành nhu mue 2.2.3 cho thây: không cô vét la sàc kÿ dô, câc vêt thü dêu trùng vơi vêt chn vê vi trï, hỵnh dang, kfch thuôc cuông dô màu sàc nên cô thë so bô két luân DHA không bi biê'n dôi vê mât câu truc hô hoc di tâc dơng cüa dung mơi, nhiêt dơ chât mang q trỵnh ché tao HPTR [2] ♦ Dô ôn dinh cûa DHA HPTR sau gian bâo quân + Két quâ kiém tra bàng sac kÿ lép mông Hê phân tân rân cüa DHA vôi chât mang P- cyd bâo quân diêu kiên phơng thi nghiêm lâo hô cap toc 40° C, dô âm tuong dôi 75% sau gian thâng duoc dânh giâ dô ôn dinh bàng phuong phâp sâc kÿ lôp mông, tién hành nhu mue 2.2.3 Két quâ: Không phât hiên thây vêt la sâc kÿ dơ (hỵnh 9), nhu vây DHA HPTR vôi P-cyd không bi bién dôi câ diêu kiên bâo qn thơi gian theo dơi (hỵnh 9) u > IH VJiU icLw l ^I + Vêt 1: dung dich DHA nguyên liêu n 0 + Vêt 2: dung dich DHA HPTR vôi P-cyd sau thâng bâo qn phơng thi nghiêm • • + Vét 3: dung dich DHA HPTR vôi P-cyd sau thâng bâo quân diêu kiên lâo hoâ câp toc Hinh Sâc kÿ dơ cüa DHA 30 + Khâo sât khâ nàng hồ tan cüa DHA tù HPTR sau gian bâo quân Tién hành khâo sât khâ nàng hoà tan cüa DHA phân tân rân dâ chon sau gian bâo quân, chüng thu duofc két quâ ghi bàng 10 11, minh hoa bàng dô thi hinh 10 11 Bâng 10 Mite dơ hồ tan cüa DHA tù HPTR cüa DHA: P-cyd= 1:15 ché bàng PP nghiên cô suc C 02 sau gian bâo quân Thôi gian (phüt) 10 20 30 40 50 60 HPTR môi diêu ché 75,3 86,8 92,4 93,1 93,8 93,7 % DHA hồ tan HPTR sau thâng ơf PTN 74,2 86,3 90,8 92,4 92,1 91,7 HPTR sau thâng LHCT 73,8 86,1 90,3 91,2 90,4 91,5 Thôi gian (phüt) —♦— Hê môi diêu ché —a— Hê PTN —&— Hê sau LHCT Hinh 10 Dô thi biêu diên toc dơ hồ tan cüa DHA tù phân tân rân DHA: p-cyd =1:15 (PP nghiên cô suc C 02) sau gian bâo quân 31 Bâng 11 Miïc dô hồ tan cüa DHA HPTR vơi P-cyd (1: 15) ché bàng PP bâo hoà C sau thơi gian bâo qn Thơi gian (phüt) % DHA hồ tan HPTR môi diêu HPTR sau thâng HPTR sau thâng ché phong thi nghiêm lâo hoâ cap tôc 68,2 67,3 66,3 84,0 83,5 84,2 91,5 91,0 91,1 95,1 95,2 94,8 95,7 95,6 95,2 96,8 95,9 95,1 10 20 30 40 50 60 100 s es - 80 o 60 -C < a 40 Q SÊ 20 20 40 60 80 Thôi gian (phut) Hê moi diêu ché — Hê PTN Hê sau LHCT Hỵnh 11 Do thi biéu diên toc dơ hồ tan cüa DHA tiï DHA: P-cyd =1: 15 (PP bâo hoà C 2) sau gian bâo quân Két quâ theo dơi cho thây: khâ nàng hồ tan cüa DHA câ hai HPTR bâo quân diêu kiên phong thi nghiêm diêu kiên lâo hoâ cap toc thay doi không dang kë so vôi tir HPTR môi diêu ché, chüng tô HPTR cüa DHA on dinh q trỵnh bâo qn 32 2.3.6 IJng dung HPTR vào dang thuôc Dë duoc dira vào dang thuôc, HPTR phài dâp üng duoc câc yêu càu sau: co khà nàng câi thiên tôt mire dô TDT cüa DHA, dô làm tâng miic dô toc dô hâp thu DHA tir dang thuôc, làm tâng SKD cüa thuôc; phâi phù hop vôi câc yêu càu cüa dang thuôc nhu thë tich da cüa mot viên thuôc, hàm luong duoc chât mot viên; on dinh q trỵnh bâo quân cô tmh kinh té Dura vào nhüng yêu càu câc két quâ thu duoc trên, chüng dâ chon phân tân rân sau dë dua vào dang thuôc viên * DHA: (3-cyd =1:15 ché bâng PP bâo hoà C02 (PP bâo hoà) * DHA: (3-cyd =1:15 ché bàng PP nghiên cô suc C02bâo hồ (PP nghiên ) • Viên nang DHA 20 mg ché tir DHA: P-cyd =1:15 (PP nghiên) Chüng nhân thây: néu üng dung HPTR cüa DHA vào dang viên nén thi q trỵnh dâp viên, HPTR së chiu ành huông cüa nhiêu yéu tô nhu nhiêt dô, dô âm không khi, lue dâp viên, gian dâp viên; hon nùa HPTR cüa DHA ché tao vôi câc chât mang thân nuôc nên dê hüt âm trô nên bét dmh vi vây rât khô dâp viên nén [1] Ngồi ngi ta dâ chüng minh rang müc dô giâi phông cüa DHA khôi viên nang cao hon so vôi viên nén [13] VI vây, chüng tién hành üng dung cà hai HPTR dâ chon vào dang viên nang cüng nhâm tao dang thuôc cô sinh khâ dung cao bên vüng quâ trinh bâo quân Chüng dâ xây dung cơng thüc dơng nang nhu sau: • Nang sơ 1: DHA ( nguyên lieu) Lactose Magnesi stearat • Nang sô 2: HHVL (DHA: (3-cyd, tÿ lê 1:15) cô chüa Lactose Magnesi stearat • Nang sơ 3: HPTR (PP nghiên) Lactose Magnesi stearat cô chüa 33 20 mg 365 mg 0,5 % 20 mg DHA 165 mg 0,5 % 20 mg DHA 145 mg 0,5 % Dông nang bàng vô nang so 1, thë tfch 0,48 ml Khâo sât khâ nâng giâi phông cüa DHA khôi viên nang, tién hành nhu phuong phâp ghi mue 2.2.2 Két quâ thü nghiêm duoc trỵnh bày bâng 12 hỵnh 12 Két quâ nghiên cüu cho thây: mue dô tơc dơ hồ tan cüa DHA viên nang ché tü HPTR cao hon viên nang ché tü HHVL cao hon rât nhiêu so vôi viên nang ché tü DHA nguyên liêu Mac dù nang hôn hop vât lÿ cô thành phân nhu HPTR nhung müc dô tôc dơ hồ tan hon p-cyd nang HHVL chỵ câi thiên duoc tfnh thâ'm cûa DHA vơi mơi trng hồ tan, HPTR vùa câi thiên tmh tham vüa làm thay doi müc dô phân tan cüa DHA Bâng 12 Mire dơ toc dơ hồ tan cüa DHA tir câc mâu viên nang Thôi gian (phüt) 10 20 30 40 50 60 Nang sô (DHA NL) 10,1 14,5 22,3 25,4 28,8 31,7 % DHA hoà tan Nang sô Nang sô (DHA HHVL) (DHA HPTR) 15,4 60,2 19,7 78,8 30,3 90,3 35,5 91,2 43,6 92,4 51,8 93,0 HPTR 75,3 86,8 92,4 93,1 93,8 93,7 Thôi gian (phut) Nang NL —■— Nang HHVL Nang HPTR —A— HPTR ban dâu Hỵnh 12 Dơ thi biëu diên toc dơ hồ tan cüa DHA tù* câc mâu viên nang 34 Nhân xét: Toc dơ hồ tan cüa DHA khôi viên nang chûa HPTR châm hon HPTR ban dâu ô nhüng phüt dâu tiên nang thuôc cân cô gian de vô nang câc hat nang râ mơi trng hồ tan nhung müc dơ hồ tan thay doi khơng dâng kë sau 60 phüt thi nghiêm 1cm hon hôn hop vât lÿ ♦ Viên nang 20 mg ché tü HPTR voi tÿ lê DHA: p-cyd = 1:15 (phuong phâp bâo hoà C 02) Tiên hành dông nang vôi công thûc sau (tmh cho mot viên): • Viên nang sơ HPTR (Phuong phâp bâo hồ) chûa 20 mg DHA Lactose 125 mg Magnesi stearat 0,5 % Dông nang bàng vô nang sơ 1, thë tỵch 0,48 ml Khào sât khâ nàng giâi phong DHA khôi viên nang, tién hành nhu PP ghi mue 2.2.2 Két quâ duoc trinh bày bâng 13 hinh 13 Bâng 13: Mürc dơ toc dơ hồ tan cüa DHA tù câc mâu viên nang khâc Thôi gian Phân trâm DHA hồ tan (phüt) Nang sơ Nang sơ Nang sô HPTR (DHA NL) (DHA HHVL) (DHA HPTR) ban dâu 10 10,1 15,4 52,6 68,2 20 14,5 19,7 79,5 84,0 30 22,3 30,3 87,6 91,5 40 25,4 35,5 92,1 95,1 50 28,8 43,6 94,3 95,7 31,7 60 51,8 96,1 96,8 Két q thuc nghiêm cho thây: Toc dơ hồ tan DHA khôi viên nang ché tù HPTR châm hon HPTR ban dâu tai nhüng phüt dâu tiên cüa thi nghiêm song mûc dơ hồ tan hàu nhu khơng gỵ thay doi sau 60 phüt thi nghiêm lân hon HHVL Dơ q trỵnh dâp viên tao hat truôc dông nang (do tÿ lê chât mang lôn nên cân phâi tao hat dë thu nhô thë tich) nên cân cô gian dë cho câc hat râ mơi trng hồ tan 35 Thcri gian (phût) ♦ Nang NL - a —Nang HPTR —*—Nang HHVL - X - HPTR ban dâu Hỵnh 13 Do thi biëu diên toc dơ hồ tan cüa DHA khôi câc mâu viên nang khâc ♦ Kêt quâ nghiên ciru dô on djnh cüa viên nang DHA 20 mg chê tir HPTR Viên nang DHA 20 mg ché tir HPTR cûa DHA : P-cyd (1: 15) bàng PP nghiên suc C02 bâo hồ PP bâo hồ C02 duoc theo dơi dơ on dinh sau thâng bâo quân ô nhiêt dô phông sau thâng diêu kiên lâo hô cap toc (nhiêt dô 40°C, dô âm tuong dôi 75%), không nhân thây cô biëu hiên chûng tô DHA dâ bi phân h hôc giâm hàm luong Két q duoc trỵnh bày bâng 14: Bâng 14 Theo dôi dô on dinh cüa viên nang DHA sau gian bâo quân Viên bâo qn Viên bâo qn Chỵ tiêu PP Viên môi ché tao thâng t° phông thâng diêu kiên theo dơi lâo hô cap toc Khơng cô vêt la Không cô vêt la Sàc kÿ lôp mông Không cô vêt la Khôi luong trung binh viên 385 ±0,18 385 ±0,12 385 ± 0,9 (mg) Không thay doi Không thay doi Vô nang dêu, bôt so vôi viên nang Hinh thuc viên thuôc nang so vôi viên nang môi ché tao môi ché tao khô toi, trâng 36 Tién hành khâo sât dơ hồ tan sau gian dë on dinh cüa mâu viên nang bào ché tir HPTR dâ chon, két quâ duoc trïnh bày bâng 15 hinh 15 Bâng 15 Mü’c dơ hồ tan cüa DHA khơi viên nang sau gian bâo quân Thôi gian (phüt) 10 20 30 40 50 60 Phân tràm DHA hoà tan Viên nang sô Viên nang sô Viên dë Viên dê Viên dë Viên dë Viên môi thâng thâng ô dk Viên môi thâng thâng dk lâo hô ché tao nhiêt dơ lâo hô cap ché tao nhiêt dơ cap tơc phơng phơng tôc 51,2 51,0 59,5 58,1 52,6 60,2 78,3 76,8 79,5 78,1 78,8 77,3 84,1 85,8 89,2 87,6 90,3 89,1 90,6 91,5 89,7 92,1 91,2 90,1 92,8 94,3 93,2 91,8 90,8 92,4 95,2 95,4 92,4 92,0 96,1 93,0 s03 -C < a Q «s +—Nang mơi ché tao— Nang PTN Nang sau LHCT Nang môi ché tao ■*—Nang PTN— Nang sau LHCT Hinh 15 Dơ thi bieu diên tơc dơ hồ tan cüa DHA khôi viên nang sau gian bâo quân Thuc nghiêm cho thây: sau bâo quân diêu kiên phong thi nghiêm diêu kiên lâo hoâ cap toc gian khâ dài, mire dô toc dơ hồ tan cüa DHA câ mâu viên nang giâm không dâng kë Vi vây, chüng so bô két luân: viên nang DHA diêu ché tù HPTR on dinh gian theo dôi nhiêt dô phong diêu kiên lâo hô cap toc Vơi tÿ lê DHA: P-cyd =1:15 thi viên nang sô chüa HPTR ché bâng PP bâo hoà C02 làm tâng dô tan cûa DHA tôt hon nang sô chûa HPTR ché bàng PP nghiên cô suc C02bâo hồ câ mơi ché tao sau gian bâo quân 38 PHAN - KÊT LUÂN VÀ DÊ XUÂT • Két luân: Tù nhüng két quâ nghiên cüu vê phân tân rân cüa DHA üng dung vào dang thuôc viên, chüng rüt mot so két luân sau: 1) Phôi hop DHA vôi câc chât mang thân nuôc nhu”PEG, HP- P-cyd, Pcyd hôn hop vât lÿ hay HPTR, müc dô tôc dơ hồ tan cüa DHA dêu tàng dâng kë so vôi dang nguyên lieu, dô duoc chât phân tân rân tan tôt hon nhiêu so vôi hôn hop vât lÿ 2) Dô tan toc dô tan cüa DHA tàng tâng tÿ lê chât mang phân tân rân 3) Phuong phâp ché tao phân tân rân khâc cüng ânh huông khâc dén khâ nàng hoà tan cüa DHA Phuong phâp nghiên suc C02 bâo hồ, phuong phâp bâo hồ C02 phuong phâp dơng khơ nhüng phuong phâp làm tâng müc dô tôc dô hồ tan cüa DHA tơt nhât 4) Dâ lua chon duoc phân tân rân: + DHA : P - cyd = 1: 15, diêu ché bâng phuong phâp nghiên suc C02 bâo hồ + DHA : P - cyd = 1: 15, diêu ché bâng phuong phâp bâo hoà C02 nhüng on dinh, làm tâng dô tan tôc dô tan cüa DHA tôt thfch hop dë üng dung vào dang viên nang DHA 5) Viên nang DHA bào ché tù phân tân rân khâ nàng hồ tan tơt hon viên nang DHA nguyên lieu tù 2,1- 2,3 sau 60 phüt thi nghiêm Trong viên nang chüa phân tân rân cô tÿ lê DHA : P- cyd = : 15, phuong phâp bâo hoà C02 làm tâng dô tan tôc dô tan cûa DHA tôt hon phuong phâp nghiên suc C02 bâo hồ 39 ... tan cüa Cyd [33], [42] Câu tao phân tü dâ mang lai cho Cyd tmh chât cüa mot chât diên hoat Cyclodextrin gôm hai phân: phân thân dâu bên liên két vôi phân tü tao phüc phân thân nc bên ngồi Do vây:... duoc su chü ÿ cüa nhiêu nhà nghiên cüu 1.2 Hê phân tan rân (Solid dispersion system) 1.2.1 Dinh nghỵa: Hê phân tan rân (HPTR) môt pha rân mot hay nhiêu duoc chât duoc phân tân mot hay nhiêu chat... dơ dỵnh CTPT Cơng thrïc phân tir Cyd Cyclodextrin DHA Dihydroartemisinin DT, TDT Dô tan, toc dô tan HHVL Hôn hop vât lÿ HP-|3- Cyd Hydroxypropyl-(3- cyclodextrin HPTR Hê phân tan ràn KLPT Khôl