Lựa chọn các cây thuốc thuộc họ ô rô ( acanthaceae ) có khả năng kháng nấm

Mât khâc cüng do diêu kiên dia lÿ, khi hâu mà thiên nhiên dâ ban tâng cho dât nuôc ta mot hê thong thuc vât khâ da dang và phong phü, trong do dâ cô môt sô cây thuôc duoc nguôi dân sur d

BOY TE TRITÔNG DAI HOC Dl/OC HÀ NÔI

KHOA LUÂN TÔT NGHIÊP DlTOC SŸ DAI HOC KHÔA1998-2003

Giâo viên hirdng dân : && Ql^u^ln Çfhi Sinh

Nüi thuc hiên : Bô mon Thuc vât trudng âai hoc Duoc H à Nôi Thôfi gian thuc hiên : 03/20003 - 05/2003.

Hà Nôi : Thâng 6! 2003

ÆÔ’3 VcÂ/U O’Qi

æift 6à// /ss tàng âiêi û/t c/uîti f/tà/t/t tu} £âu tôt:

TS NGUYÉN THISINH

sTrf fâ/r ft/i/t /tffiïfff/ t/tî/t, ff/uf.z (Tr? enà eA l eut f/n/ts/ q/rri

£m eûfi# æùt cfiân f/tà /t/i edwt rf/t:

TS CAO VÂN THU - Bô mon Công nghiêp Duoc.

GV NGUYÉN LE PHI - Bô mon Vi sinh.

&àfts/ £/uwi ifiê ea£ f/ftft/ eâ ÿûa&, fc// f/u iâl luêsi ff/i /u% /nrht ÇTfuûï (ZJâl eûftg, ///tt/fra/ty faàri (Tà £a& tn ç / iteeu feiêsi f/u/â/i /{)/ ç/ûp e/a

//rtà/t f/tàstA k/tsw/ li/â /i to i nçA /êp f/à //.

^/)û f//f)S gûasi eri Z/t/// v/ï frit/// (Tf) eàsi ita /t e/tê nési fe/ffhf// t/iê /rtf/f/f

&//&/ ////fti/f/ c^ftt râ f nÂâft (Za&e edœ f/ /<uêri rifiâti æé£, &&p //,

fc/ws/ Sf/tî/i eua em sT/fï)i- fa&àn f/t/êtt S/û/t • • 9

r5//f seifi cAâsi f/tà u /t cdwi rfff.

Hà nôi, thâng 6 nam 2003

Sinh viên

NGUYÉN VÂNBÂO

2.2.1 Dânh giâ sa bô tâc dung khâng nâm dang dich ép và dang

2.2.2 Thâm dô hoat tmh khâng nâm à dang cao long cüa mot so

cây cô tâc dung

CHÜ GIÂI CHÜVIÊT TÂT

D A T V M D E

Nuôc ta nàm trong vùng khi hâu nhiêt dôi giô mùa, vôi dâc diëm nông

âm và mua nhiêu vê mùa hè, lanh và khô vê mùa dông Dây là mot diêu kiên thuân loi cho su phât triën cüa nâm Bên canh do côn do câc yéu tô khâc nhu

sü dung khâng sinh pho rông kéo dài, lam dung corticoid, chiêu xa, do nhiêm HIV dân dên ti le mâc bênh nâm ngày môt gia tâng Tuy nhiên viêc nghiên ciru câc thuôc môi de chûa nâm vân tiên triën rât châm Mât khâc cüng do diêu kiên dia lÿ, khi hâu mà thiên nhiên dâ ban tâng cho dât nuôc ta mot hê thong thuc vât khâ da dang và phong phü, trong do dâ cô môt sô cây thuôc duoc nguôi dân sur dung dë chûa nâm và dâ duoc ghi nhân trong nhiêu sâch, bâo nhu: ♦ Bach hac (Rhinacanthus nasutus (L.) Kurz Acanthaceae)

♦ Riêng nép (Alpinia galanga (L.) Willd Zingiberaceae)

♦ Du du (Carica papaya L Caricaceae)

♦ Toi (Allium sativum L Alliaceae)

♦ Luu (Punica granatum L Punicaceae)

Dë cô nhutig nghiên cuu cô tmh hê thong gôp phàn bo sung thêm vào kho tàng câc cây thuôc cô tâc dung chông nâm chüng tôi dâ tiên hành nghiên

ciru lua chon câc cây thuôc ho O rô (Acanthaceae) vôi câc mue tiêu sau:

+ Lua chon câc cây thuôc trong ho O rô du doân cô tâc dung khângnâm

+ Dânh giâ hoat tmh khâng nâm cüa mot sô cây trong ho à câc dang

bào chê khâc nhau

+ So sânh khâ nâng khâng nâm cüa mot sô cây cô hoat tmh cao vôi Ketoconazol, là loai thuôc khâng nâm duoc luu hành rông râi trên thi truông

Do thôi gian quâ ngân, khoâ luân côn nhiêu vân dê cân phài khào sât song chüng tôi cüng mong muôn duofc gôp mot phàn nhô trong viêc tim kiêm,

bào ton và phât triën nguôn tài nguyên làm thuôc à nuôc ta.

l

Phàn I. T O IV G Q ü M

1.1 Bênh nâm vâ câc thuôc diêu tri: • •

1.1.1 Bênh nâm: Chung ta không thé phü nhân nhüng lçfi fch cüa

nhüng chüng nâm nhô bé dâ dem lai nhiêu lçfi fch cho con nguôi trong câc

ngành công nghiêp rirou, bia, mÿ phâm, thuc phâm và ngay câ trong ngành

duac phâm nhu:

• Saccharomyces cerevisiae, Saccharomyces vini: sir dung trong

công nghiêp ruau, bia, bânh mÿ

• Aspergillus oryzae cô men Amylaze dé làm tuang.

• Pénicillium chrysogenum dùng dé sàn xuât Penicillin G

• Streptomyces griseus dùng dé sân xuât Streptomycin

Bên canh do côn cô rat nhiêu chüng nâm gây bênh cho nguôi, dông vât

và thuc vât nhu mot sô chüng: Microsporum, Trichophyton, Candida,

Aspergillus, Histoplasma, Epidermophyton Dâc biêt là trong vông khoàng

20 nâm trô lai dây bênh nâm cô xu huông ngày càng mot gia tâng Nhüng

bênh này thuông gâp nhiêu à nhüng nguôi cô hê miên dich suy yêu (do ghép

ca quan, hoâ tri lieu ung thu, do nhiêm HIV ) Nguôi duoc diêu tri bâng tâc

nhân khâng khuân cô hoat pho rông hoâc dâ duac dùng câc phuang phâp diêu

tri xâm nhâp (dât ong dân luu hay nhûng dung eu ngoai lai ) Dên nay nhüng

bênh vè nâm cô tî le cao và là nguyên nhân tü vong quan trong trong sô bênh

nhân nhâp viên Tan xuât cüa bênh nâm Candida tâng lên 10 lân so vôi truôc

dây Bênh Aspergillus xâm nhâp à phoi là nguyên nhân chü yêu gây tü vong à

bênh nhân ghép tuÿ Nhiêu truông hop nhiêm nâm ca hôi không thë chuan

doân duac bâng câc phuang phâp nuôi cây mâu thông thuông và chî duoc diêu

tri theo kinh nghiêm à nhüng bênh nhân suy giâm miên dich nghiêm trong Cô

rat nhiêu nguyên nhân dân tôi diêu nay nhung trong dô phâi kë dên mot sô nguyên nhân ca bân nhu:

+ Yéu rô môi truông: nan ô nhiêm môi truông, dân eu dông duc, nhiêt dô, dô dm

+ Do nhüng thay doi tai chînh co thé nguôi bênh: yéu tô sinh lÿ, bênh

lÿ và yéu tô thuôc men:

• Yéu tô sinh lÿ: Khi nguôi phu nu cô thai do su gia tâng hormon, nên dân dén thay d6i môi truông âm dao, công thêm su suy giàm miên dich tam thôi khién vi nâm cô diêu kiên phât triën hon

• Yéu tô bênh lÿ: Mâc mot sô bênh nhu HIV, bênh dâi thâo duông,

suy dinh duông , chüng béo phi, nhüng ton thuong à gan, phoi, hach

• Yéu tô thuôc men: Thât dang buôn bôi tmh trang gia tâng nhiêm bênh nâ'm lai do chmh nhüng su không hiëu biét cüa nguôi dân: Do tînh trang lam dung câc khâng sinh cô pho tâc dung kéo dài làm cho vi khuân thuông trü công sinh cùng vôi vi nâm bi tiêu diêt dân dén làm vô thé cân bàng sinh thai, viêc dùng câc loai corticoid liêu cao kéo dài làm giàm dâp üng miên dich, câc thuôc diêu tri ung thu

Cô rât nhiêu chüng nâm gây bênh trên nguôi [4] nhu Microsporum, Epidermophyton, Trichophyton, Candida, Aspergillus, Histoplasma Tuy nhiên bênh nâm trên niêm mac và bênh nâm ngoài da pho bién thuông do hai chüng Candida và Trichophyton Cüng nhu câc bênh nhiêm khuân bênh nâm

thuông là do nhiêm nâm co hôi Binh thuông chüng nâm cô thë cô mât à moi

noi, moi chô trong nuôc, không khi, trên co thë, trong nôi tâm mac tuy nhiên môi chüng nâm cô môt sô dâc diëm riêng

Bênh nâm Candida: Candida là môt loai nâm men thuông dang hinh càu, sinh sàn bàng hinh thüc này chôi Dây là môt chüng gây bênh pho bién nhât cho nguôi và gia suc, dâc biêt là Candida albicans, chüng cô thë gây bênh

à câ ngoài da lân nôi tai Tuy nhiên, trong diêu kiên binh thuông chüng sông

hoai sinh [4], à nhüng nguôi binh thuông xét nghiêm co thë thây vi nâm trong

miêng (30%), trong ruôt (38%), âm dao (39%), câc nép gâp hâu mon (46%),

3

phé quàn (17%) Trong mot so diêu kiên nhât dinh, Candida cô thé chuyén tù

dang song hoai sinh sang sông kf sinh và gây bênh

Bênh nâm do Trichophyton: Trichophyton là mot loai vi nâm soi to cô

vâch ngân, phàn lôn sinh bào tir dmh nhô và bào tur dmh lôn Chüng thuông kî

sinh trên toc, long, da nhân, mông tay và mông chân gây lên mot sô bênh tai

câc bô phân này

Bênh do Aspergillus: Ca bân cüng nhu Candida, tuy nhiên trong sô 168

loài thuôc chi Aspergillus cho dên nay nguôi ta môi thông kê duac 7 loài gây

bênh à nguôi, trong sô dô A.fumigatus chiém 90% tong sô câc truông hop

Câc loài Aspergillus dêu chi à dang nâm soi sinh sân bàng hînh thüc vô tînh

và hüu trnh Binh thuông chüng à ngoai cânh Chüng chî xâm nhâp vào ca thé

nguôi khi cô câc diêu kiên nhu nguôi mâc bênh lao, tiêu duông, bông nâng

Nguôi bênh thuông bi nhiêm nâm qua duông hô hâp Chî mot sô rât ît nhüng

nguôi hit phâi bào tü Aspergillus môi phât sinh ra bênh Dâc biêt là nhüng

nguôi dâ cô bênh lÿ sân trong duông hô hâp nhu: lao, viêm phé quàn, giân phé

quàn Loai bênh thuông gâp nhât do Aspergillus gây nên là di üng và câc

biëu hiên nhu chây nuôc mât, nuôc müi, hât xî hai, ngat müi hoâc lên can

hen Ngoài ra, bênh do Aspergillus côn cô biëu hiên à giâc mac, ông tai ngoài

buôu hay u nâm nhung biëu hiên à phoi là phong phü han câ Môt sô truông

hop dâc biêt nâ'm cô thé an sâu vào trong câc phü tang nhu: mâu, nâo, gan,

nâch, thân, tim, xuang, bach huyét, tuyén giâp

Câc nhà vi nâm y hoc chia câc bênh nâm ra làm 3 nhôm chmh:

> Nhôm 1: Bênh vi nâm ngoai biên (Superficiel mycoses): vi nâm gây bênh thuông là Candida albicans, Aspergillus, Micrococcus aureus gây

> Nhôm 2: Bênh nam ngoài da (Dermatophytoses): Vi nam gây bênh thuông là: Microsporum; Epidermophyton và Trichophyton gây câc bênh:

• Bênh choc dâu

• Hâc lào

• Nam ma

• Nâm mông

• Nâm kë

> Nhôm 3: Bênh nâm nôi tang:

Vi nâm gây bênh thuông là: Candida; Histoplasma, Aspergillus; Mucor gây câc bênh:

• Bênh tira à trè em

• Bênh viêm nôi tâm mac

• Dâc biêt là câc chung kÿ sinh trong câc bach câu, trong

câc ca quan cüa gan, lâch, hach, tuyê'n thuong thân, thàn kinh trung irong gây

câc khôi u dân dén ung thiï

1.1.2 Phông và dieu tri bênh do nâm:

De giâm thiëu nguy ca và tî le ngirôfi mâc bênh nâm càn thuc hiên mot

so bien phâp sau:

+ Tâng circmg vê sinh ngân càn nâm xâm nhâp vào ca thé: Dira vào

sinh thâi, nâm cân mot s6 diêu kiên thîch hop vê nhiêt dô, dô âm và thurc an.Thuc hiên vê sinh tôt cô khà nâng ngân càn mot câch hiêu lue su xâm nhâpcüa nâm vào co thé nguci, bao gôm câ vê sinh câ nhân và vê sinh môi truômg sông phài sach sê, thoâng mât

+ Không ché câc ducmg lây lan cüa nâm: thuc hiên câch ly nhüng

nguôi bi bênh nâ'm, tiêt khuân noi à, trang thiet bi dô dùng nguài bi bênh nâm,

xü lÿ câc chât thài bênh viên

+ Chü dông phông bênh bàng câch diêu tri nguôi mâc bênh nâm phât hiên kip thôi và triêt de bao gôm câc bien phâp:

5

- Ngân ngüa su phât triën cüa nâm.

- Két hop viêc chüa bênh vôi vân de phông bênh

- Su dung câc thuôc và hoâ chât chông nâm

1.1.3 Thuôc khâng nâm và cffchetâc dung:

Hiên nay trên thé gioti dâ nghiên cüu và tîm ra nhiêu loai thuôc chông nâm khâc nhau Dua vào vi tri, tac dung cüa thuôc, theo câu truc hoâ hoc , ngucfi ta chia thuôc khâng nâm thành nhiêu nhôm [3]:

+ Dua vào tac dung cüa thuôc nguôi ta chia thuôc tri nâm thành 2nhôm:

• Nhôm 1: Câc thuôc tri nâm bê mât: (CaprylatNa, Econazolnitrat )

• Nhôm 2: Câc thuôc chüa nâm toàn thân: (Ketoconazol; Amphotericin B, Griseofulvin )

+ Theo câu truc hoâ hoc nguôi ta cô thê chia câc thuôc này thành 2nhôm:

• Nhôm 1 : Câc thuôc chông nâm tong hop nhu câc acid béo,câc dân chât acid thom và phénol, câc dân chât cüa Imidazol và Triazol

• Nhôm 2: Câc khâng sinh chông nâm (Amphotericin B;Nystatin )

+ Trên lâm sàng nguôi ta chia làm 3 nhôm chu yêu [1]:

• Câc khâng sinh polyen

• Câc dân châ't azol

• Câc Allylamin và thiocarbamatTheo câc két quâ nghiên cüu cü ché tâc dung cüa câc thuôc khâng nâm lên co thé nâm [1] nhu sau: (Hïnh 1):

• Làm ton hai chüc nâng màng: Amphotericin B, Nystatin

• Üc ché chuyën hoâ: Cis pentacin

Üc ché su tong hop thành té bào: Polyoxin

Üc ché su tong hop Ergosterol: Azol, AllylaminQuâ trïnh phân chia té bào Griseofulvin

Quâ trïnh tong hop protein: BlasticidinTâc dung lên su tong hop acid Nucleic: Trimethoprim

folaàficidin *

ô in efu n g in

Hinh 1 : Vi tri tâc dung cüa môt so thuoc chong nâm.

Nhin chung tât cà câc thuoc tri nâm dêu tuong tâc hoâc ûc ché

Ergosterol chat Sterol chü yéu cüa màng Plasma nâm (Hinh2) Nhûng khâng sinh Polyen do loài Streptomyces sân sinh ra Amphotericin B, Nystatin, Primaricin lien két vôi câc Sterol cüa màng làm tâng tmh thâm cüa màng làm thoât ra nhiêu chat trong bào tuong và gây chét té bào Doi vôi câc chât

azol, no cô tâc dung diêt nâm à nông dô cao nhung lai gây hai cho té bào co

thë Ô nông dô thâp, câc chât này cô tâc dung kïm hâm nâm Câc azol [3] tâc

7

dung chü yéu vào su sinh tong hop Ergosterol, no co tac dung ûc ché câc Enzym gàn à màng té bào nâm là: Câc Cytochrome P450 Oxydase càn thiet cho

su Demethyl hoâ cüa câc 14a- methyl sterol bâng quâ trînh oxydase;

Cytochorom C- oxydase à ty lap thé là ATPase càn cho su hô hâp cüa té bào.

Câc chât Allylamin [1] ûc ché enzym squalenepioxydase dân dén két quà là su thiéu hut ergosterol làm ton hai dén câu truc màng và chirc nâng cüa no

Ketoconazol [3] thuôc nhôm chât azol là thuôc tri nâm co hoat pho rông

và co hoat lue manh dùng de diêu tri môt so bênh nâm bê mât dudng tiêu hoâ

và nâm toàn thân Ngoài ra cèn duoc dùng dé phông bênh nâm à bênh nhân bi

suy giâm miên dich và phông nâm ki sinh

Hïnh 2 Vi tri tâc dung cüa môt sô thuôc ûc ché su tong hop

Ergosterol thuông dùng trong lâm sàng

1.1.4 Câc thuôc khâng nâm tù cây cô

Tir xa xua, nhân dân ta dâ biêt sur dung câc cây thuôc de chüa bênh trong do cô bênh do nâm Theo Vô Vân Chi [7], Pham Hoàng Hô [11], Dô Tât Loi [13] và mot sô tac giâ khâc và tài lieu cüa Viên Duoc Lieu thi Viêt Nam cô khoâng trên 150 loài dâ duoc ghi nhân là cô khâ nâng khâng nâm trong dô cô nhiêu cây dâ xâc dinh duoc hoat chât khâng nâm Câc cây này

chung tâp trung trong mot sô ho chmh duoc trinh bày à bâng sau: (Bâng 1)

Bcine i : Tâp hop mot sô ho cây thuôc chmh cô tac dung khâng nâm:

S

Tên ho

Loài dâ dirac sûr dung (hay xâc dinh)

dùng T

(Fabaceae) Bô két Gleditsia fera (Lour) Merr La, quà,

Muông chét Cassia garrettiana Craib Gô, Lâ

9

Dây lim Pongamia pinnata (L.) Merr Cà câyThân mât Milletia ichthyochtona

Cho dè rang cua Phyllanthus urinaria L Toàn cây

Cô sûa lâ to Euphorbia hirta L Toàn cây

Cô sûa lâ nhô Euphorbia thymifolia Burm Toàn câyMàn mây Suregada multiflora (Juss.)

(Benth.) Muell- Arg

Xuong rông ông Euphorbia antiquorum L Nhua cây

3 Ho eue Cô nho nôi Ecliptase prostrata L Toàn cây(Asteraceae Hài nhi eue Kalimeris indica (L.) Sch Toàn cây

) Bach dàu ông Veronia cinerea (L.) Less. Toàn cây

Hoàng hoa Solidago virgaurea L Toàn cây

Ké dâu ngua Xanthium inaequilaterum

DC

Quâ

Bô công anh Taraxancum officinale (L.)

Dô Dinh Huy [12]

Nguyên Dinh Nga [18]

Nguyên Manh Cuông [16]

Tuy nhiên, câc công trînh nghiên cuu này chî ô dang don lè chua cô tmh hê thông(Câc nghiên cüu này thuông không tâp trung theo mot khoâ phân loai hay mot ho nào) Cô rât nhiêu co sô, phuang phâp de phân loai thuc vât nhung trên ca sô phuang phâp sinh hoâ hoc: giài quyét vân dê quan hê ho hàng bâng câc sân phâm hoâ hoc cô trong tùng loài cây Vï du: câc cây ho Cà thuông cô Ancaloid, câc cây ho Trüc dào thuông cô glycozit tra tim, câc cây

ho Hoa môi hay cô tinh dàu Trên thuc té ho Ô rô (Acanthaceae) cô mot sô cây thuôc dâ duac ghi nhân là cô tac dung khâng nâm, trong dô phâi kë dén cây Bach hac (Rhinacanthus nasutus (L.) Kurz ) là mot cây thuôc kinh diën trong diêu tri câc bênh vê nâm nhu hâc lào, lang ben Chmh vî vây, mà chüng tôi lua chon dê tài nghiên cüu tmh khâng nâm cüa mot sô cây thuôc ho Ô rô

dë dânh giâ tâc dung khâng nâm cüa câc cây trong ho này

il

1.2 Ho ô rô (Accmthaceae)

Ho Ô rô (Acanthaceae) thuôc bô hoa môm soi (Scrophulariales) liên bô hoa môi (Lamianae), phân lôp hoa môi (Lamiidae), lôp ngoc lan (Magnoliopsida), ngành ngoc lan (Magnoliophyta) Dây là mot trong nhüng

ho khâ phô bien ô nuôc ta bôi không chî do s ô luong mà côn do co nhiêu tac dung dâ duoc ghi nhân vira làm thuôc vira làm cânh

Théo Nguyën Tien Bân [2]: Trên thé giôi cô khoàng 250 chi/ 2600 loài,

phân bô chü yéu à Châu Phi và Nam Mÿ Tai Viêt Nam cô khoàng 55 chi/ 195

loài phân bô rông khâp câ nuôc

• Dâc diëm chung cüa ho Ô rô [2] thucfng là thân cô dûng hay leo, thân chua chia dot dôi khi là cây bui hoâc gô Lâ don, moc dôi không cô lâ kèm Hoa moc riêng lé hoâc tâp hop thành cum hoa xim hoâc chùm ô kë lâ hay ô ngon Hoa luông trnh không dêu, cô lâ bâc Dài cô 4 - 5 thuÿ, dôi khi tiêu giâm Tràng hop cô 5 thuÿ, thuông chia hai môi nhung môi trên dôi khi không phât triën Tiên khai hoa lop hoâc vân Nhi thuông cô 4 hoâc 2 dmh vào ong tràng Bô nhuy gôm 2 lâ noân, vôi nhuy mành, 2 nüm nhuy, bàu trên 2 ô, môi

ô cô hai hoâc nhiêu noân dào, rat dâc trung bôi noân cô chân Quà nang tu mô bàng câch co giân tù dînh xuông gôc, hat cô cuông rân, cô phôi lôn và thuông không cô nôi nhü

• Trên thuc té câc cây thuôc ho Ô rô thuông cô hoa dep nên nhiêu loài duoc trong làm cânh Bên canh dô chüng côn cô tâc dung chûa bênh:

+ Cây Ô rô (Acanthus ilicifolius L.), cây Thanh tâo (Justicia gendarusa Burm f.), cây Tuôc sàng (Justicia procumbens L.) duoc dùng de chüa phong thâ'p, tê bai, nhuc môi gân côt

+ Cây Hoa chông (Barleria cristata L.), cây Quâ nô (Ruellia tuberosa L.) dùng làm thuôc chûa càm Mot s ô cây duoc dùng de chüa rân càn nhu: cây Giông xanh (Justicia ventricosa Wall.), Dây bông xanh hay Bông bâo (Thumbergia grandiflora Roxb.) Câc cây Tuôc sàng, Bach hac (Rhinacanthus

nasutus (L.) Kurz) duac dùng làm thuôc tiêu viêm, giâi dôc mun nhot, chua bênh ngoài da.

• Dâ cô mot so công trînh nghiên cüu vê câc cây trong ho này: Theo GS

Vü Vân Chuyén- [9] dâ nghiên cüu tmh khâng khuan cüa:

Ô rô nuôc: Acanthus icifolius L

Thuôrng son: Neuracanthus tetragonostachyus Nees

Thanh tâo: Justicia gendarussa Burm f

Bach hac: Rhinacanthus nasutus (L.) Kurz

Quà no: Ruellia tuberosa L

Chàm: Strobilanthes cusia (Nees) Kuntze

• Vê tac dung khâng nâm: Mot sô cây thuôc trong ho này dâ duoc nhân dân sü dung dé diêu tri bênh do nâm và dâ duoc nghiên cüu và ghi nhân trong nhiêu dê tài, sâch, bâo nhu :

Cây mânh công: Clinacanthus nutans (Burm.f.) Lindau [8] dùng

de tri eczema, hâc lào

Cây Xuân hoa: Pseuderanthemum palatiferum (Nees) Radrk Vô Vân Chi - Tràn Hop [8] Nguyên Thi Thanh Nhài [14]

Cây Bach hac: Rhinacanthus nasutus (L.) Kurz: [7]; [8]; [13]; [20] khâng nâm dùng diêu tri hâc lào, lang ben

Cây Thuông son trâng: Neuracanthus tetragonostachyus Nees: rê tri nâm toc [8]

1Trong sô dô mot sô cây dâ duoc nghiên cuu và thu tâc dung khâng nâm trong thôi gian gàn dây nhu:Khoâ luân tôt nghiêp duoc si nâm 1997 cüa Nguyên Thi Thanh Nhài dâ nghiên cüu và thü tâc dung sinh hoc cüa cây Xuân hoa thây côtâc dung khâng nâm rô rêt.Ô khoâ luân tôt nghiêp duoc si nâm 2000 cüa Dô Dinh Huy dâ thü tâc dung khâng nâm cüa rê, thân, lâ cây Bach hac thây cô tâc dung rô rêt

• De bo sung thêm vào tâc dung chüa bênh cüa cây thuôc trong vuôn nhà chüng tôi dâ tien hành lua chon mot sô cây thuôc trong ho Ô rô và tien hành nghiên cüu tâc dung khâng nâm cüa chüng

13

P h â n I I T H lfC IVGIIIÊM V À E È r ftU À 2.1.Nguyên lieu và phircfng phâp

2.1.1 Nguyên lieu

Chüng tôi dâ lua chon 10 cây thuôc ho Ô rô dé làm nguyên lieu nghiên cuu, bô phân dùng chu yéu là lâ và rê (vô rê), chî co cây Bach hac bô phân sir dung là hoa Câc nguyên lieu này chü yêu do Vudn thuc vât trirông Dai hoc Duoc cung câp; mot sô cây thuôc Vuôn Quôc Gia Ba Vi, vuon thuôc Hà Nôi

và gia dïnh

Danh mue cây duoc trînh bày à bâng 2:

Bans 2 : Danh mue câc cây thuôc âuffe südung nghiên cûu:

Long thü - Duôi tôm:

7 Thuông som trâng

2.1.2 Chûng vi sinh vât kiêm djnh.

Chüng tôi chon hai chüng vi nâm sau:

+ Candida albicans

+ Aspergillus niger

Do bô mon Công Nghiêp Duoc cung câp

2.1.3 Môi truông nuôi cây:

Chüng tôi sir dung môi truôfng Sabouraud [10]:

Nuôc câtvd 11

PH =5,8 _ 6.2 (Diêu chïnh bang HC1 1N và NaOH 1N Môi

truông duoc hâp tiêt trùng à 110°C/30 phüt)

2.1.4 Phuang phâp nghiên cüru:

2.1.4.1 Nghiên cûu dâc diern thuc vât, phân bo và công dung :

Mô tâ cây bâng phuang phâp hïnh thâi so sânh

2.1.4.2 Phuang phâp dieu ché câc dich nguyên lieu:

15

+ Dich ép tuai: Rë, la hay hoa cüa cây sau khi rua sach dé râo nirofc Tién hânh cân mot lucmg qui dinh dùng chây, coi sir dâ tiêt trùng giâ và ép lây dich (vôi rê do khô nên cân bo sung thêm nuôc cât vôi trùng: Dé cho dông nhât, chüng tôi cân 30g rê thêm nuôc cât vô trùng giâ ra, ép diêu chinh tôi ,V=

20 m l)

+ Dich cô câch thuÿ 1/2: De nghiên ciru ành huông cüa nong dô, nhiêt dô lên nâm chüng tôi tién hành cô câch thuÿ côn 1/2 dich ép ban dàu (duoc goi là dich cô 1/2): Lây mot thé tfch dich ép tuoi nhât dinh dem cô câch thuÿ tôi côn 1/2 luçmg dich ban dàu

+ Dich ngâm con (cao long): Duoc lieu tuoi sau khi rüa sach dé râo nuôc, cât nhô, cân, ngâm trong con 70° vôi tî le duoc liêu / dung môi = 1/2 Sau 7 - 1 0 ngày gan ép ta thu duoc toàn bô dich ngâm sau do dem cô câch thuÿ tôi tî le duoc liêu / dung môi = 2/ 1

+ Pha dung dich Ketoconazol 1% : Dùng côn 70° dé pha theo tî lê:

Ketoconazol 1%

Con 70° vùa dü

2.1.4.3 Phitomg phâp thûtâc dung khâng nâm [6;10]:

Chüng tôi sü dung phuong phâp duc lô trên dïa thach:

• Nguyên tâc:

Trên lôp thach dinh duông dâ cây vi nâm kiëm dinh, cho dich thü vào câc

lô thach (dâ duoc duc) Trong thôi gian nuôi cây hoat chât khâng nâm së khuyéch tân trên thach ûc ché su phât triën cüa vi sinh vât kiëm dinh dë tao ra

vông vô khuân Vông vô khuân càng lôn chüng tô hoat tmh càng lôn

• Tién hành:

+ Pha môi truong Sabouraud: Cân Pepton, glucose, thach theo tî lê dâ biét, cho nuôc vào xoong, sau dô cho câc chât trên vào Dun cho tôi sôi, diêu chînh PH bàng dung dich HC11N và dung dich NaOH 1N, sau dô dun sôi tiép

3 phüt Phân vào câc bïnh non môi binh 200ml môi truông, nüt bông tien hành

hâp tiêt trùng à 110°C/ 30 phüt.

+ Chuân bi rîïa thach và thü hoat tmh: Chuan bi câc dïa Pétri rüa sach,

sau do trâng niioc cât de khô, sây tiêt trùng à 150°C/ 2 giô Môi trircmg à bînh

non sau khi hâp tiêt trùng de nhiêt dô giâm xuông con khoàng 50- 60°C duoc phân vào câc dïa Pétri hai lân: Lan 1- Do lôp thach nên khoàng 15ml Sau khi lôp thach nên dông lai tien hành do lân 2 khoàng 25ml Dë khô mât thach, duc

lô (j) 1cm Trên môi dïa duc 4, 5 hoâc 6 lô tuÿ theo yêu câu cüa thi nghiêm

+ Pha dich treo bào tü: Câc chüng vi nâm Candida albicans; Aspergillus niger duoc cây truyên và nuôi duông trong môi truông thich hop Lâ'y 1,5 ml dung dich nuôc muôi sinh lÿ (NaCl 0,9%) vô trùng cho vào ông mâu dùng que dàu bông dâ duoc hâp tiêt trùng phân tân dêu câc baô tü trong ông thach

nghiêng ra, sau dô lâng dêu khâp lên dïa thach dâ duc lô à trên.

+ Nhô vào môi lô duc 0,2 ml dich thü

+ Dât toàn bô câc dïa thach à trên vào trong tü lanh khoàng 30 phüt dë cho dich khuyéch tân dêu ra mât thach Sau dô nuôi cây à nhiêt dô 28- 30°C

và theo dôi thang thôi gian 24h, 48h và 72h, môi mâu nuôi cây cô 3 dïa thach

+ Dânh giâ hoat tmh khâng nâm: Sau 24h, 48h và 72h tien hành quan sât xem cô vong vô khuân hay không Nêu cô do duông kinh vong vô khuân.Câc sô lieu duoc xu lÿ bàng phuang phâp thông kê

2.2 Thuc nghiêm và kêt quà:

2.2.1 Kêt quâ thur sd bô tâc dung khâng nâm cua djch ép và djch cô 1T2 câc mâu nghiên cüru:

Chüng tôi lua chon 10 cây trong ho Ô rô ô danh mue nêu trên dë nghiên cüu Câc mâu này dâ duac GS Vü Vân Chuyén và PGS - TSKH Tràn Công Khânh xâc dinh tên khoa hoc

17

Dânh gia sa bô tâc dung khâng nâm cüa câc loài trên, chüng tôi su dung

lâ, rê (cây Xuân hoa dùng vô rê) và hoa (cây Bach hac) vôi dich ép tuai và thü

sa bô trên chüng nâm Candida aldicans (chüng nâm gây bênh chü yéu à

nguôi) Két quâ ghi nhân bai duông kfnh cüa vông vô khuân sau 24 h, 48h,

72h

2.2.1.1 Cây Cam (Peristrophe roxburghiana Bemck); P.tinctoria

(Roxb):

• Dâc diëm và công dung:

+ Mô tà (Hinh3): Cây thâo sông nhiêu nâm, moc toâ cao 50cm, cành

nhân, cô 4- 6 rânh doc Lâ hinh trûng nhon, mât duôi cô long Cum hoa nhô à

ngon Cô khoâng 10 hoa nâm giùa nhüng lâ bâc con hinh tam giâc nhon Dài

5 dêu nhau Tràng màu tîm hông hay trâng Nhi 2, bàu 2 ô, môi ô 2 noân

+ Nai sông và thu hâi: Cây moc hoang à Lào Cai, Hoà Bînh; mâu thu

hâi duoc lâ'y ô vuôn thuc vât

+ Công dung: - Tri lao phoi khâi huyét, ho, non ra mâu

- Tiêu chây, ly

- Bong gân tu mâu

- Dân gian dùng lâ câm dë nhuôm màu, dô xôi

• Tâc dung khâng nâm: Két quâ thü tâc dung khâng nâm sa bô cüa cây

Cam duoc trïnh bày à bàng 3, (Hînh3):

Bans 3 : Tâc dung khâng nâm cüa dich ép cây Cam:

24h

1 >5,1,6,1,6, 1,8;1,7;1,8

Hoat tmh khâng nâm cô tâc dung ngay sau 24 giô, vôi vông vô khuân rô rêt Sau 48h, 72 giô duông kmh vông vô khuân gân nhu không doi.

Dich ép tuoi và dich cô 1/2 hoat tmh cô su chênhlêch không dâng kë

- Tâc dung khâng nâm cua dich ép rê manh hon dich

ép lâ

2.2.I.2 Cây Chàm mèo (Strobilanthe cusiae L.)

Tên khâc: Thanh dai

• Dâc diëm và công dung:

+ Mô tà (Hinh4): Cây nhô luu niên, cao 40- 80cm (cô khi dén 2m); thân nhân, phân nhânh nhiêu, phinh lên à câc mâu Lâ moc dôi thuông mêm îu, hînh trâi xoan hay bàu duc thon, dài 10-13 cm, gân phu 6- 7 càp, mép cô râng hay khia tai bèo, câc lâ cùng mot dôi thuông không bàng nhau Hoa moc so le hay moc dôi, xêp thành bông iï hoa, câc bông này moc xêp lai thành chuÿ, lâ bâc hînh lâ, nhân; lâ bâc con hînh soi; dài cao 1 cm, câc lâ dài nhon, tràng hoa mâu lam dén tîm, cuông dài 3- 3,5cm, phfa trên loe ra, cô 5 thuÿ bàng nhau, nhi 4; bàu không long Quâ nang dài, không long

Noi sông và thu hâi: Cây moc hoang ô câc thung lüng âm uôt, câc nui

dâ và duoc trong lây cânh lâ de nhuôm màu xanh chàm, cô à hàu hét câc tînh vùng cao à miên Bâc nhu Lào Cai, Lai Châu, Son La

+ Công dung: Khâng nôi tiêt sinh duc phu nü, gây sây thai, gây tâng co bôp tir cung mot câch nhip nhàng

• Tâc dung khâng nâm: Tâc dung khâng nâm cüa cây Chàm mèo duoc trinh bày à bàng 4, (Hînh4):

*

19