Nghiên cứu tuyển chọn các chủng vi nấm trichoderma có khả năng kháng nấm gây bệnh trên cây cải bẹ xanh (brassica juncea) tại thành phố đà nẵng

ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM KHOA SINH - MÔI TRƢỜNG TRƢƠNG THỊ HUYỀN NGHIÊN CỨU TUYỂN CHỌN CÁC CHỦNG VI NẤM TRICHODERMA CÓ KHẢ NĂNG KHÁNG NẤM GÂY BỆNH TRÊN CÂY CẢI BẸ XANH (BRASSICA JUNCEA) TẠI THÀNH PHỐ ĐÀ NẴNG KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐÀ NẴNG, ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM KHOA SINH - MÔI TRƢỜNG TRƢƠNG THỊ HUYỀN NGHIÊN CỨU TUYỂN CHỌN CÁC CHỦNG VI NẤM TRICHODERMA CÓ KHẢ NĂNG KHÁNG NẤM GÂY BỆNH TRÊN CÂY CẢI BẸ XANH (BRASSICA JUNCEA) TẠI THÀNH PHỐ ĐÀ NẴNG N n SƢ PHẠM SINH HỌC N ƣời ƣớng dẫn TS ĐỖ THU HÀ NIÊN KHÓA 2012 – 2016 MỤC LỤC MỞ ĐẦU 1 TÍNH CẤP THIẾT CỦA ĐỀ TÀI MỤC TIÊU ĐỀ TÀI Ý NGHĨA CỦA ĐỀ TÀI 3.1 Ý NGHĨA KHOA HỌC 3.2 Ý NGHĨA THỰC TIỄN CHƢƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 KHÁI QUÁT VỀ NẤM TRICHODERMA 1.1.1 Vị trí chi Trichoderma hệ thống phân loại 1.1.2 Đặc điểm hình thái, sinh trƣởng nấm Trichoderma 1.1.3 Cơ chế đối kháng nấm Trichoderma 1.1.4 Tình hình nghiên cứu nấm Trichoderma giới Việt Nam 1.1.5 Ứng dụng nấm Trichoderma lĩnh vực bảo vệ thực vật cải thiện suất trồng 1.2 KHÁI QUÁT VỀ BỆNH THỐI CỔ RỄ TRÊN CÂY CẢI BẸ XANH (BRASSICA JUNCEA) DO NẤM FUSARIUM 11 1.3 TỔNG QUAN VỀ CÂY CẢI BẸ XANH (BRASSICA JUNCEA) 12 1.4 SƠ LƢỢC VỀ VỊ TRÍ ĐỊA LÝ VÀ ĐIỀU KIỆN TỰ NHIÊN, KINH TẾ XÃ HỘI XÃ HÒA PHONG, HUYỆN HÒA VANG, TP ĐÀ NẴNG 13 1.4.1 Vị trí địa lý, điều kiện tự nhiên 13 1.4.2 Điều kiện kinh tế xã hội 13 CHƢƠNG ĐỐI TƢỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 14 2.1 ĐỐI TƢỢNG NGHIÊN CỨU 14 2.2 NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 14 2.3 ĐỊA ĐIỂM, PHẠM VI VÀ THỜI GIAN NGHIÊN CỨU 14 2.3.1 Địa điểm thu mẫu thực địa 14 2.3.2 Địa điểm nghiên cứu phịng thí nghiệm 15 2.3.3 Phạm vi nghiên cứu 15 2.4.2 Phƣơng pháp nghiên cứu phịng thí nghiệm 16 2.4.3 Phƣơng pháp lây bệnh nhân tạo xác định chủng nấm gây bệnh 21 2.4.4 Đánh giá hiệu phòng trừ nấm Fusarium chế phẩm nấm Trichoderma thu đƣợc 22 2.4.5 Phƣơng pháp xử lí số liệu 24 CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ BIỆN LUẬN 25 3.1 PHÂN LẬP VÀ XÁC ĐỊNH CHỦNG VI NẤM GÂY BỆNH THỐI CỔ RỄ TRÊN CÂY CẢI BẸ XANH (BRASSICA JUNCEA) 25 3.1.1 Phân lập chủng vi nấm gây bệnh cải bẹ xanh 25 3.2.2 Tuyển chọn chủng nấm Trichoderma có khả đối kháng mạnh với chủng nấm bệnh Fusarium – TL1 (gây bệnh thối cổ rễ) 34 3.3 KẾT QUẢ LÊN MEN XỐP CÁC CHỦNG NẤM TRICHODERMA CÓ KHẢ NĂNG ĐỐI KHÁNG MẠNH VỚI CHỦNG NẤM BỆNH FUSARIUM – TL1 39 3.4 KẾT QUẢ KIỂM TRA KHẢ NĂNG ĐỐI KHÁNG CỦA CHẾ PHẨM NẤM TRICHODERMA ĐỐI VỚI CHỦNG NẤM BỆNH FUSARIUM – TL1 41 3.4.1 Kết kiểm tra khả đối kháng chế phẩm nấm Trichoderma nấm bệnh Fusarium – TL1 đĩa petri 41 3.4.2 Kết kiểm tra khả đối kháng chế phẩm nấm Trichoderma với chủng nấm Fusarium – TL1 gây bệnh thối cổ rễ cải bẹ xanh (Brassica juncea) 43 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 50 KẾT LUẬN 50 KIẾN NGHỊ 50 DANH MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO LỜI CAM ĐOAN Tơi cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng Các số liệu, kết nêu khóa luận trung thực chưa cơng bố cơng trình khác Tác iả luận văn TRƢƠNG THỊ HUYỀN LỜI CẢM ƠN Em xin trân trọng bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến cô giáo hướng dẫn TS Đỗ Thu Hà tận tình hướng dẫn truyền đạt nhiều kiến thức, kinh nghiệm quý báu cho em trình thực khóa luận Em xin chân thành cảm ơn thầy cô khoa Sinh – Môi trường – Đại học Sư Phạm – Đại học Đà Nẵng tận tình giảng dạy, truyển đạt kiến thức cho em năm học Cuối cùng, em xin gửi lời cảm ơn đến gia đình, bạn bè ln giúp đỡ, động viên em suốt thời gian làm khóa luận Xin chân thành cảm ơn! Trƣơn T ị Huyền DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT CFU : Colony Foming Unit (Đơn vị hình thành khuẩn lạc) CT : Cơng thức ĐBSCL : Đồng sông Cửu Long ĐHQG – HCM : Đại học Quốc Gia – Hồ Chí Minh ĐHSP : Đại học Sƣ phạm NB : Nấm bệnh NXB : Nhà xuất KL : Khuẩn lạc TB : Trung bình TP : Thành phố SL : Số lƣợng Slc : Số lƣợng chủng S – MT : Sinh – Môi trƣờng VSV : Vi sinh vật DANH MỤC CÁC BẢNG Số hiệu Tên bảng bảng 2.1 Thành phần môi trƣờng lên men xốp Trang 20 Đặc điểm biểu bệnh, hình thái KL, bào tử 3.1 cuống sinh bào tử chủng nấm Fusarium – TL1 25 gây bệnh thối cổ rễ cải bẹ xanh 3.2 3.3 Đƣờng kính nấm bệnh Fusarium – TL1 môi trƣờng MT Czapeck, MT PDA MT giá đỗ Lây nhiễm chủng nấm bệnh Fusarium – TL1 phân lập lên rau cải 27 28 Sự diện chủng nấm Trichoderma 3.4 mẫu trồng rau thơn Túy Loan, xã Hịa Phong, 30 huyện Hịa Vang, TP Đà Nẵng 3.5 3.6 3.7 3.8 3.9 3.10 Sự phát triển chủng nấm Trichoerma sau ngày nuôi cấy môi trƣờng giá đỗ Kết theo dõi mức đối kháng chủng nấm Trichoderma nấm bệnh Fusarium - TL Kết đối kháng chủng nấm Trichoderma nấm bệnh Fusarium – TL1 So sánh số lƣợng bào tử thu đƣợc công thức lên men tạo chế phẩm nấm Trichoderma Đƣờng kính khuẩn lạc nấm bệnh Fusarium – TL1 sau rắc chế phẩm nấm Trichoderma Số lƣợng mắc bệnh chết công thức sau lây nhiễm nấm bệnh 30 34 34 40 41 45 DANH MỤC CÁC HÌNH Số hiệu hình 2.1 2.2 2.3 Tên hình Cách cấy nấm Trichoderma nấm bệnh đĩa petri Sơ đồ quy trình lên men xốp tạo chế phẩm Trichoderma Cách cấy nấm bệnh rắc chế phẩm Trichoderma đĩa petri Trang 19 21 22 2.4 Mơ hình bố trí thí nghiệm giai đoạn 24 2.5 Mơ hình bố trí thí nghiệm giai đoạn 24 3.1 Bệnh thối cổ rễ cải bẹ xanh chủng nấm Fusarium – TL1 25 Hình ảnh khuẩn lạc, cuống bào tử bào tử chủng 3.2 nấm bệnh Fusarium – TL1 sau ngày nuôi cấy 27 môi trƣờng PDA 3.3 3.4 3.5 3.6 3.7 Các triệu chứng bệnh lây nhiễm nấm Fusarium – TL1 rau cải sau ngày Sinh khối dịch bào tử nấm Fusarium – TL1 để lây bệnh nhân tạo sau ngày nuôi cấy Hình ảnh KL chủng nấm Trichoderma thuộc nhóm sau ngày nuôi cấy môi trƣờng giá đỗ Hình ảnh KL số chủng nấm Trichoderma thuộc nhóm sau ngày nuôi cấy môi trƣờng giá đỗ Biểu đồ mức độ đối kháng chủng nấm Trichoderma với nấm bệnh Fusarium 29 29 33 33 36 Khả đối kháng số chủng nấm 3.8 Trichoderma nấm Fusarium – TL1 sau 10 37 ngày nuôi cấy 3.9 3.10 3.11 3.12 3.13 3.14 3.15 3.16 Cuống sinh bào tử, bào tử ống giống chủng Tri.01, Tri.06 Cuống sinh bào tử, bào tử ống giống chủng Tri.09, Tri.11 Chế phẩm Trichoderma dạng bột sản xuất phƣơng pháp lên men xốp theo công thức Khả đối kháng chế phẩm nấm Trichoderma nấm bệnh Fusarium – TL1 Rau cải sau 20 ngày trồng thùng xốp cơng thức thí nghiệm TP.Đà Nẵng Hình ảnh cải bẹ xanh CT3 bị thối nấm Fusarium sau 10 ngày chủng bệnh Hình ảnh thân cải bẹ xanh CT3 bị thối nấm Fusarium sau 10 ngày chủng bệnh Cây cải bẹ xanh sau 10 ngày chủng nấm bệnh công thức thí nghiệm 38 39 40 43 44 46 46 47 43 10 Hình 3.12 Khả đối kháng chế phẩm nấm Trichoderma nấm bệnh Fusarium – TL1 Qua kết bảng 3.9 hình 3.12 cho thấy: ngày thứ 2, nấm Fusarium – TL1 phát triển bình thƣờng Sang ngày thứ 4, sau rắc chế phẩm Trichoderma, nấm Trichoderma chế phẩm bắt đầu phát triển đan xen vào nấm bệnh, thể tính đối kháng nấm Fusarium – TL1 bị phát triển chậm lại Ngày thứ 6, nấm Fusarium – TL1 không phát triển thêm đƣợc nữa, bào tử nấm Trichoderma mọc khắp đĩa Ngày thứ 8, bào tử nấm Trichoderma mọc mạnh, kí sinh lên nấm bệnh nhiều hơn, diện tích nấm bệnh bị thu hẹp dần Đến ngày thứ 10, bào tử nấm Trichoderma mọc mạnh, phủ khắp đĩa thạch, hiệu suất ức chế nấm bệnh sau 10 ngày 81,54% Qua kết đối kháng chế phẩm nấm Trichoderma nấm Fusarium – TL1 cho thấy chế phẩm nấm Trichoderma có khả ức chế mạnh, làm cho nấm bệnh không phát triển đƣợc 3.4 Kết kiểm tra k ả năn đối k án Trichoderma với c ủn nấm Fusarium – TL c ế p ẩm nấm ây bện t ối cổ rễ cải bẹ xan (Brassica juncea) Chúng tiến hành thử nghiệm khả đối kháng chế phẩm nấm Trichoderma giống cải bẹ xanh mỡ VN 034 Đất trồng đất thịt nhẹ đƣợc lấy vƣờn rau Túy Loan, TP Đà nẵng Hạt giống cải bẹ xanh mỡ VN 034, sản phẩm công ty TNHH Nguồn cội Chỉ 44 tiêu theo dõi ghi nhận số bị bệnh thối cổ rễ, mức độ bị tổn thƣơng lá, thân sau lây nhiễm nấm bệnh sau 10 ngày Tiến hành thí nghiệm lây bệnh nhân tạo cải bẹ xanh (Brassica juncea) với công thức nhƣ sau:  CT1: Cây cải bẹ xanh + Đất + Môi trƣờng lên men xốp  CT2: Cây cải bẹ xanh + Đất + Chế phẩm Trichoderma  CT3: Cây cải bẹ xanh + Đất + Môi trƣờng lên men xốp + Nấm bệnh  CT4: Cây cải bẹ xanh + Đất + Chế phẩm Trichoderma + Nấm bệnh  CT5: Cây cải bẹ xanh + Đất + Chế phẩm Trichoderma thị trƣờng + Nấm bệnh Giai đoạn 1: Sự sinh trƣởng cải bẹ xanh 20 ngày tuổi CT chƣa lây nhiễm nấm bệnh thể qua hình 3.13 45 CT1 CT2 CT3 CT4 CT5 Hình 3.13 Rau cải sau 20 ngày tuổi trồng thùng xốp công thức thí nghiệm TP.Đà Nẵng Qua hình 3.13 cho thấy cải bẹ xanh cơng thức thí nghiệm phát triển tốt, nhanh, khơng có có biểu bị bệnh Giai đoạn 2: sau lây nhiễm nấm bệnh Fusarium – TL1, nấm bệnh đƣợc đƣa vào đất CT3 CT4 Kết nghiên cứu khả đối kháng chế phẩm Trichoderma dạng bột nấm bệnh Fusarium – TL1 cải bẹ xanh sau 10 ngày đƣợc trình bày bảng 3.10 hình 3.14, 3.15 46 Bảng 3.10 Số lượng mắc bệnh chết công thức sau lây nhiễm nấm bệnh Thời gian Chỉ tiêu theo dõi ngày Số xuất vàng 0 0 Số chết 0 0 Số xuất vàng 31 Số chết 0 0 Số công thức 45 45 45 45 45 10 ngày CT1 CT2 CT3 CT4 CT5 Qua bảng 3.10 cho thấy: * Sau ngày lây nhiễm nấm bệnh: - Ở CT3 có xuất vàng chiếm 8,9% Quan sát xung quanh vùng rễ bị vàng dễ dàng nhận thấy đám nấm Fusarium trắng gây bệnh xuất - Cây cải bẹ xanh CT2, CT4 CT5 phát triển nhanh phát triển hai cơng thức (CT1, CT3) đất CT2, CT4 đƣợc xử lý chế phẩm Trichoderma Trong đất CT5 đƣợc xử lý chế phẩm thị trƣờng Chế phẩm nấm Trichoderma bên cạnh tác động qua lại quần nấm đối kháng nấm bệnh, chế phẩm Trichoderma tác động trực tiếp lên phát triển trồng Do hoạt động sống, nấm Trichoderma sản sinh enzim phân hủy glucoza, xenluloza Nhờ enzim mà chất hữa có đất đƣợc phân hủy nhanh hơn, làm tăng chất dinh dƣỡng dƣới dạng dễ hấp thụ cho trồng, tạo điều kiện cho trồng sinh trƣởng phát triển tốt [25] * Sau 10 ngày chủng nấm bệnh: - Ở CT3 số xuất vàng tăng 31/45 chiếm tỉ lệ 68.67% Mức độ tổn thƣơng thân tăng, vết bệnh biểu rõ ràng lá, bị 47 vàng nhiều từ mép đến gân Trên bẹ xuất đám màu xám Những cịn lại khơng phát triển chiều cao, thân nhỏ dễ đổ ngã - Ở CT1 xuất vàng có triệu chứng bệnh thối cổ rễ nấm Fusarium gây nên chiếm tỉ lệ 6,67% , đất trồng có sẵn mầm bệnh - Ở CT2 cải bẹ xanh phát triển bình thƣờng, xanh tốt vƣợt trội - Ở CT4 cải bẹ xanh phát triển bình thƣờng, tốc độ sinh trƣởng tƣơng đƣơng nhƣ CT2 nhƣng có bị nhiễm bệnh chiếm tỉ lệ 2,22% - Ở CT5 cải bẹ xanh phát triển tốt nhiên tốc độ sinh trƣởng không nhanh nhƣ CT2 CT4 có bị nhiễm bệnh chiếm tỉ lệ 4,44% Nấm bệnh Hình 3.14 Hình ảnh rau cải bẹ xanh CT3 bị thối nấm Fusarium sau 10 ngày chủng bệnh Hình 3.15 Hình ảnh thân rau cải bẹ xanh CT3 bị thối nấm Fusarium sau 10 ngày chủng bệnh 48 CT4 CT5 CT3 CT1 CT2 Hình 3.16 Rau cải sau 10 ngày chủng nấm bệnh cơng thức thí nghiệm Qua kết nhiên cứu cho thấy chế phẩm Trichoderma dạng bột đƣợc xử lý đất trƣớc gieo trồng có khả đối kháng với nấm bệnh Fusarium gây bệnh thối cổ rễ cải bẹ xanh tốt Khả đối kháng cho kết tốt giống cải bẹ xanh (Brassica juncea) Qua kết cho thấy chế phẩm Trichoderma ứng dụng để phòng trừ nấm Fusarium gây bệnh thối cổ rễ nhiều loại cải khác 49 Bên cạnh đó, chế phẩm Trichoderma cịn kích thích, tạo điều kiện cho trồng phát triển tốt hơn, nên xử lý đất chế phẩm Trichoderma trƣớc gieo trồng phịng trừ nấm bệnh tăng cƣờng phát triển cho 50 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ KẾT LUẬN Qua kết nghiên cứu, rút số kết luận sau: 1.1 Từ 30 mẫu đất phận rễ, thân, lá, cải bẹ xanh bị bệnh, phân lập xác định đƣợc chủng nấm gây bệnh thối cổ rễ nấm mốc thuộc chi Fusarium, tạm kí hiệu Fusarium – TL1 1.2 Từ 30 mẫu đất đất trồng rau thôn Túy Loan, xã Hòa Phong, huyện Hòa Vang, TP Đà Nẵng phân lập đƣợc 18 chủng nấm Trichoderma có khả đối kháng với chủng nấm bệnh Fusarium – TL1 gây bệnh thối cổ rễ cải bẹ xanh Tiếp tục chọn chủng nấm Trichoderma (Tri.01, Tri.06, Tri 09, Tri.11) có hiệu đối kháng mạnh (trên 80%) để nhân sinh khối tạo chế phẩm 1.3 Lên men xốp chủng nấm Trichoderma tuyển chọn (Tri.01, Tri.06, Tri 09, Tri.11) môi trƣờng trấu : cám theo công thức thu đƣợc chế phẩm dạng bột Trong đó, chế phẩm thu đƣợc cơng thức cho số lƣợng bào tử nhiều Tiến hành thử nghiệm khả đối kháng chế phẩm với nấm bệnh Fusarium – TL1 phịng thí nghiệm cải bẹ xanh điều kiện tự nhiên cho kết tốt, sở khoa học để ứng dụng vào thực tiễn địa phƣơng KIẾN NGHỊ 2.1 Tiếp tục nghiên cứu điều kiện giữ giống Trichoderma để giữ nguyên hoạt tính thời gian dài 2.2 Tiếp tục thử nghiệm phƣơng pháp lên men tạo chế phẩm Trichoderma khác nhau, kiểm tra thời gian bảo quản chế phẩm… nhằm chọn đƣợc biện pháp lên men tối ƣu 2.3 Thử khả đối kháng Trichoderma nhiều nấm bệnh khác DANH MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng việt [1] Nguyễn Văn Bá, Cao Ngọc Diệp, Nguyễn Văn Thành (2005), Giáo trình nấm học, Đại học Cần Thơ [2] Burgess L.V, Knight T.E, Tesorio L., Phan Thúy Hiền (2009), Cẩm nang chuẩn đoán bệnh Việt Nam, Chuyên khảo ACIAR số 129a, 210pp, ACIAR [3] Tạ Kim Chi (1996), Nghiên cứu số chủng vi nấm diệt côn trùng gây hại Việt Nam khả ứng dụng, luận án PTS, Viện công nghệ sinh học, Trung tâm Khoa Học Tự Nhiên Công nghệ quốc gia, Hà Nội [4] Đỗ Tấn Dũng cs (2001), “Đặc tính sinh học khả phòng chống số bệnh nấm hai rễ trồng cạn nấm đối kháng Trichoderma viride”, Tạp chí bảo vệ Thực vật 4, 12-16 [5] Nguyễn Lân Dũng, Nguyễn Đình Quyến, Phạm Văn Ty (2007), Vi sinh vật, NXB Giáo dục [6] Bùi Xuân Đồng (1982), Nhóm nấm Hyphomycetes Việt Nam, Tập I, NXB Khoa học kỹ thuật, Hà Nội [7] Nguyễn Văn Đĩnh cs (2007), Giáo trình biện pháp sinh học bảo vệ thực vật, NXB Nông nghiệp Hà Nội [8] Êgôrôv, N.X (1993), Thực tập vi sinh vật học (Nguyễn Lân Dũng dịch), NXB Đại học trung tâm chuyên nghiệp Hà Nội [9] Nguyễn Thị Thiên Hằng ( 2012), Nghiên cứu phân bố động thái nấm Trichoderma đất trồng rau, màu thành phố Đà Nẵng, Luận văn tốt nghiệp, Đại học Đà Nẵng [10] Phạm Thanh Hà, Trần Thị Thu Hà (2012), “khả đối kháng nấm Trichoderma với nấm gây bệnh hại trồng Sclerotium rolfsii Sacc điều kiện invitro”, Tạp chí khoa học, Đại học Huế, tập 75A, Số 6, 49-55 [11] Đỗ Tiến Hoàng (2007), Nghiên cứu bệnh héo vàng (Fusarium oxysporum) hại số trồng cạn vụ hè thu năm 2007 vùng Gia Lâm – Hà Nội thử nghiệm chế phẩm sinh học phịng trừ bệnh, khoa Nơng học – ĐH Nông Nghiệp Hà Nội [12] Phạm Thị Ánh Hồng, Đinh Minh Hiệp (2005), Điều tra khảo sát phân bố chủng nấm Trichoderma thành phố Hồ Chí Minh tỉnh Đơng Nam Bộ, Hội nghị tổng kết NCCB KHTN khu vực phía Nam năm 2005 [13] Hứa Võ Thành Long (2010), sản xuất tử nấm Trichoderma spp Làm thuốc trừ nấm bệnh trồng, Khóa luận tốt nghiệp, Đại học thuật cơng nghiệp TP Hồ Chí Minh [14] Năm 2013, Phạm Thị Lịch, Phạm Thanh Thủy tiến hành nghiên cứu điều kiện nuôi cấy để thu nhận chế phẩm enzyme chitinase thô từ chủng Trichoderma.sp [15] Nguyễn Đức Lƣợng, Phan Thị Huyền, Nguyễn Ánh Tuyết (2003), Thí nghiệm vi sinh vật học, NXB Đại học quốc gia TP Hồ Chí Minh [16] Vũ Triệu Mân, Lê Lƣơng Tề (1998), Giáo trình bệnh nơng nghiệp, NXB Nơng Nghiệp Hà Nội [17] Lƣu Hồng Mẫn Và Takahito Noda (1997), “Nấm Trichoderma nhƣ tác nhân phòng trừ sinh học nấm khô vằn Rhizoctinia solani phân hủy rơm”, Kết nghiên cứu khoa học 1977 – 1997, viện nghiên cứu lúa đồng sông Cửu Long, NXB Nông Nghiệp Thành phố Hồ Chí Minh [18] Nguyễn Sơn Ngân, Đinh Thị Nhàn, Nguyễn Thị Phúc (2013), Nghiên Cứu Sự Sinh Trưởng Và Phát Triển rau cải bẹ xanh, cải bẹ trắng xà lách lô lô đỏ giá thể xơ dừa nhà che phủ công ty cổ phần nông trại thực phẩm miền Đông – tỉnh Bình Dương, Báo cáo thực tập tốt nghiệp, Đại học cơng nghiệp thành phố Hồ Chí Minh [19] Nguyễn Ngọc Phúc (2005), Bước đầu khảo sát mối liên hệ diện Trichoderma yếu tố đất, Khóa luận tốt nghiệp, Đại học Nơng Lâm TP Hồ Chí Minh [20] Huỳnh Văn Phục (2006), Khảo sát tính đối kháng nấm Trichoderma spp nấm Rhizoctonia solani, Fusarium oxysporum gây bệnh bắp lúa, Khóa luận tốt nghiệp, Đại học Nơng Lâm TP Hồ Chí Minh [21] Đỗ Hồnh Qn, Phạm Thị Ánh Hồng (2010), Nghiên cứu khả sinh tổng hợp Cellulase vi nấm Trichoderma, Đại học Khoa học tự nhiên Hà Nội [22] Năm 2014, Trịnh Thị Bé Tiên nghiên cứu phân lập, tuyển chọn ứng dụng số chủng nấm Trichoderma có khả đối kháng với vi nấm gây bệnh héo vàng chuối (Musa Paradislacal.), Khóa luận tốt nghiệp, Đại học Đà Nẵng [23] Nguyễn Ngọc Tú Nguyễn Thị Hƣơng Giang (1997), Bảo vệ trồng chế phẩm vi nấm, nhà xuất nơng nghiệp, thành phố Hồ Chí Minh, tr.111- 153 [24] Nguyễn Ngọc Tú Nguyễn Đăng Hiệp (1998), “Nghiên cứu quy trình sản xuất phân bón vi sinh TRICHO”, Tuyển tập cơng trình nghiên cứu khoa học Viện Sinh Học Nhiệt đới (1993 – 1998), tr 57-63 [25] Nguyễn Thị Thuần, Phan Thị Lài, Nguyễn Văn Tó (2006), “Kết nghiên cứu bƣớc đầu nấm Trichoderma”, Tuyển tập cơng trình nghiên cứu bảo vệ thực vật 1990 – 1995, NXB Hà Nội [26] Nguyễn Văn Thƣờng (2010), Bước đầu khảo sát khả nhân sinh khối đánh giá hiệu phòng trừ bệnh số chủng nấm Trichoderma spp., Khóa luận tốt nghiệp ngành sinh học, ĐHQG TPHCM [27] Trần Thanh Thủy (1998), hướng dẫn thực hành VSV học, Nhà Xuất Bản Giáo Dục Quốc Gia TP Hồ Chí Minh, tr.43 -45 [28] Nguyễn Văn Viên, Nguyễn Thị Tú, Bùi Văn Công (2012), Nghiên cứu sản xuất sử dụng dịch nuôi cấy nấm đối kháng Trichoderma viride phòng trừ số bệnh nấm hại vùng rễ khoai tây, lạc, đậu tƣơng, Tạp chí Khoa học phát triển 2012: tập 95 – 102 [29] Phạm Đức Vƣơng (2009), Chuối – Gía trị dinh dưỡng chữa bệnh, San Jose, CA Tiếng anh [30] Agrios GN (2004), Plant pathology, th edition Elsevier Academic Press Publication [31] Arie Altman (1998), “Agricutural biotechnology”, Marcel Dekker, Inc – New York – Basel Hongkong, p.263 – 275 [32] Askew DJ, Laing MD (1993), “An adapted selective medium for the quantitative isolation of Trichoderma species”, Plant Pathol 42: 686690 [33] Bal, U., Altintas, S (2006), “Applacation of the antagonistic fungus Trichoderma harzianum (TrichoFlow WPTM) to root zone increases yield of bell peppers grown in soil”, Biol Agric & Horic, 24(2): 149163 [34] Bertrand, K.G and Jack, J.P (1998), “Molecular biotechnology principles and application of recombinant DNA”, 2nd edition, ASM Press Washington, D.C.potential for boicontrol Ann Rev Phytopath, 23: 2354 [35] Burgess, L.W and Summerell, B.A (1992), “Mycogeography of Fusarium: survey of Fusarium species in subtropical and semi – arid grasslands soils in Queensland”, Mycological Research 96: 780-784 [36] Chet R.J., and Baker K.F (1980), “The Nature and Practice of Biological Control of plant Pathogens”, Amerian Phythopathological Society St Paul, MN 539 PP [37] Delgado Jarana, J., Pintor Tr, J.A, Benostwez, T (2002), “Aspartyl protease from Trichoderma harzianum CECT2413: cloing and characrerization”, Micro biology 148: 1305 – 1315 [38] Difeases in Viet Nam (2003), Developing Expeertise in the Management of cocoa, Workshop No.1 11-14, Nong Lam University [39] Elad Y, Chet I, Henis Y (1981), “A selective medium for improving qualitavite isolation of Trichoderma spp from soil”, Phytoparasitica 9, 59-67 [40] Elad Y (2000), “Trichoderma harzianum T39 preparation for biocontrol of plant diseases – control of Botrytis cinerea, Sclerotinia sclerotioum and Cladosporium fulvum”, Biacontrol Science and Technology 10: 499 – 507 [41] Emmanuel Bourguignon (2008), Ecology and diversity of indigenous Trichoderma species in vegetable cropping system, A thesis submitted in partial fulilment of the requirement for the Degree of Doctor of Philosphy, Lincoln University, New Zealand [42] Esposito, E and Silva, M.D (1998), “Systematics and enviromental application of the genus Trichoderma 47”, Crical reviews in Microbiology 24 (2): 89-98 [43] George N.Agrios (2000), Plant Pathology, Third edition Academin press [44] Harman, G.E and Kubicek, C.P (ed) (1998), Trichoderma and Gliocladium, Vol I, Basic biology, taxonomy and genetics., p.6-10,6469 [45] Harman, G.E and Kubicek, C.P (ed) (1998), Trichoderma and Gliocladium, Vol II, Enzimes, Biological control and commercial appilcations [46] Harman, G.E (2000), “Myths and dogmas of biocontrol changes in perceptions derived from research on Trichoderma harzianum T-22”, Plant Dis., 84 [47] Hubbard (1983), “An alternative view of certain taxonomic criteria used in the Entomophthorales (Zygomycetes)”, Mycotaxon 13: 191-240 [48] Jayalakshmi S.K, Raju S, Usha Rani S, Benagi V.I., Sreeramulu K (2009), “Trichoderma harzianum L1 as a potential source for lytic enzumes and elicitor of defenses in chickpes (Ciceer arietinum L.) against wilt disease caused by Fusarium oxysporum f Sp Ciceri”, Australian Jounal of Crop Science (1): 44-52 [49] Kim W.G., Cho, E.K and Lee, E.J (1986), “Two strain of collectorichum gloeosporioides Penz causing anthracnose on pepper fruit”, Korean J Plant Pathol, 2, p 107- 113.28 [50] Kim B.S; H.K Park and W.S Lee (1989), “Resistance to anthracnose (collectotrichum spp.) in pepper”, In Tomato and pepper Production in the Tropics., AVRDC, Shanhua, Taiwan, China, p.184-188 [51] Klein D, Eveleigh DE (1998), “Ecology of Trichoderma”, In: Kubicek CP, Harman GE, editiors, Trichoderma and Gliocladium, Vol 1, Basic Biology, Taxonomy and Genetics., London: Taylor and Francis Ltd, p 57-74 [52] Lorito M., Harman G.E., Hayes C.K., Broadway R.M., Tronsmo A., Woo S.L., Di pietro A (1993), “Chitinolytic enzymes produced by Trichoderma harzianmun: antifungal activity of purified endochitinase and chitobiosidase Phytopathology, pp 302- 307 [53] Lorito M., Hayes C.K., Zonia A., Scala F., Del Sorbo G., Woo S.L., Harman G.E (1994), “Potential of genes and gene products from Trichoderma sp And Gliocladium sp for the development of biological pesticides”, Mocecular Biotechnology 2, pp.209 [54] Osiewacz HD (ed) (2002), Molecular biology of fungal development Marcel Dekker, New York [55] Pz, M.J., Baek M.J., Garcowsa, J.M., Kenerley, C.M (2004), “Functional analysis of tvspl, a serine protease – encoding gene in the biocontrol agent Trichoderma vires”, Fungal Genet Biol 41: 336-348 [56] Taylor, A (1986), “Some aspect of the chemistry and biology of the genus hypocrea and IST anmorphs”, Trichoderma and Gliocladium, Proc NS Int Sci 36: 27-58 [57] Vyas, S.C., Vyas.S (1995), “Intergrated control of dry root of soybean”, In: Lyr H, Russell PE and Sisler HD (eds) Modern fungicides and entifungal compounds, Intercapt, Amdover, 565-572 [58] Turner, R.H (1990), Fusarium wilt of banana: some history and current status of the disease, In: Fusarium wilt os banana Ploetz, R.C (Ed) American Phytopathological Society, St.Paul, MN Pp 1-7 [59] Irina S Druzhinina (2011), Trichoderma: the genomics of opportunistic success Pp 749 ... tài: ? ?Nghiên cứu tuyển chọn chủng vi nấm Trichoderma có khả kháng nấm gây bệnh cải bẹ xanh (Brassica juncea) thành phố Đà Nẵng? ?? MỤC TIÊU ĐỀ TÀI Xác định chủng nấm Trichoderma có khả kháng nấm gây. .. BẸ XANH (BRASSICA JUNCEA) 25 3.1.1 Phân lập chủng vi nấm gây bệnh cải bẹ xanh 25 3.2.2 Tuyển chọn chủng nấm Trichoderma có khả đối kháng mạnh với chủng nấm bệnh Fusarium – TL1 (gây bệnh. .. HỌC ĐÀ NẴNG TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM KHOA SINH - MÔI TRƢỜNG TRƢƠNG THỊ HUYỀN NGHIÊN CỨU TUYỂN CHỌN CÁC CHỦNG VI NẤM TRICHODERMA CÓ KHẢ NĂNG KHÁNG NẤM GÂY BỆNH TRÊN CÂY CẢI BẸ XANH (BRASSICA JUNCEA)