Nghiên cứu bào chế viên nén acyclovir tác dụng kéo dài

Ngày nay, vôi su phât triën và tien bô cüa ngành sân xuât duç/c pham, bên canh câc dang thuôc quy uôc, câc dang bào ché hiên dai cüng ngày duçfc chu trong nghiên cüru.Thuôc tâc dung kéo

BOY TE TRÜÔNG BAI HOC DÜOC HÀ NOI

-B D C S Ô B O e g

-PHAM HOANG DIEU LINH

NGHIÊN CtJtJ BÀO CHÊ VIÊN NÉN

ACYCLOVIR TAC DUNG KÉO DÀI

(KHOÂ LUÂN TÔT NGHIÊP DlTOC SŸ KHOÂ 2002 - 20(17)

l ü i 'v

v M -1 0 -ftrj

Nguiri hirông dân : TS PHAM THIMINH HUÊ

DS NGUYÊN THACH TÙNG Noi lliuc hie» : BÔ MÔN BÀO CIIK

Thôi gian thirc hiên : 02/2007 - 05/2007

HA NÔI, THANG 05 NÂM 2007

LOI CÂM ON

Trong suot thài gian làm khoâ luân, em ââ nhân âuçfc rat nhiêu su quan tâm, huông dân giûp ââ em hoàn thành khoâ luân này Vôi long kinh trong và biét an sâu sâc, em xin bày to ldi câm on tâi:

TS Pharn Thi Minh Hue

Cuoi cùng, em xin güi ldi câm an âac biêt tâi gia âinh, ban bè, nhûng nguâi

ââ khuyen khich, âông viên, giûp ââ em rat nhiêu vê mât tinh thân trong suot khoâng thài gian vùa qua.

Hà Nôi, thâng 5 nâm 2007

Sinh viên Pham Hoàng Dieu Linh

MUC LUC

Trang

DAT VAN DE 1

PHÀNI: TÔNG QUAN 2

1.1 Dai cirong vê thuô'c TDKD 2

1.1.1 Khâi niêm thuô'c TDKD 2

1.1.2 Phân loai thuoc TDKD 2

1.1.3 Üu nhiroc diëm cüa thuô'c TDKD 3

1.1.4 Câu tao cüa câc hê thuoc TDKD dùng qua diicmg uong và ccf chê' giâi phong dirofc chat 3

1.2 Vài nét vê Acyclovir 4

1.2.1 Công thûc hoâ hoc 4

1.2.2 Tmh chât 4

1.2.3 Tac dung duoc lÿ 4

1.2.4 Diïoc dông hoc 5

1.2.5 Chî dinh và diêu tri 5

1.2.6 Chong chî dinh 6

1.2.7 Thân trong 6

1.2.8 Tac dung không mong muon 6

1.2.9 Liêu luong và câch dùng 6

1.2.10 Tuong tac thuoc 6

1.2.11 Môt sô' ché pham ACV trên thi truomg 7

1.2.12 Mot sô' nghiên cüu vê bào ché ACV TDKD 7

1.2.13 Câc phuong phâp dinh lirçmg ACV 9

PHÀNII: THÜC NGHIÊM VÀ KÊT QUÂ

2.1 Nguyên lieu và phuotog phâp thuc nghiêm 13

2.1.1 Nguyên lieu và phirong tien nghiên ctiu 13

2.1.2 Phuorng phâp nghiên curu 14

2.2 Két quâ thuc nghiêm và nhân xét 17

2.2.1 Xây dung duômg chuân ACV 17

2.2.2 Khâo sât lua chon tâ duac dé xây dung công thûc bào ché viên nén ACV TDKD 12h 19

2.2.3 Thiét ké thi nghiêm và tôi tfu hoâ công thûc 25

2.2.4 Khâo sât và xây dung mot sô chî tiêu chat hïçmg cho viên nén ACV TDKD 35

PHÀN III: KET LUÂN VÀ DE XUAT 40 TÀI LIEU THAM KHÂO

DAT VAN DETrong nhüng nâm gân dây, mot van dê durac câ thé giôi dâc biêt quan tâm, dô là nan ô nhiêm môi trucmg Hâu quâ cüa viêc môi tnrcmg sông cüa con nguài bi ô nhiêm là vô cùng nghiêm trong, trong dô cô viêc câc vi sinh vât gây bênh cô diêu kiên phât triën thuân lçfi, do dô dân dén tî le nguài bi mâc câc bênh do virus cô xu huông tâng cao, ành huông dén suie khoè cüng nhu chât luçmg cuôc sông cüa con nguài.

Acyclovir là mot dân chât t6ng hap cüa nucleosid cô tâc dung üc ché

manh và chon loc trên câc virus gây bênh à nguài, bao gôm: virus Herpes

simplex loai 1 và loai 2, câc virus Varicella Zoster, Epstein - barr, cytomegalo virus và virus viêm gan B Tuy nhiên, acyclovir cô thài gian bân thài ngân (t 1/2= 2-3h) nên bênh nhân phâi uông thuoc nhiêu làn trong 1 ngày (4-6 làn), gây nhiêu phiên phiïc cho bênh nhân

Ngày nay, vôi su phât triën và tien bô cüa ngành sân xuât duç/c pham, bên canh câc dang thuôc quy uôc, câc dang bào ché hiên dai cüng ngày duçfc chu trong nghiên cüru.Thuôc tâc dung kéo dài ra dcfi nhûng nâm 50 duac coi

là thé hê câc dang thuôc thu* 2 sau câc dang thuôc quy uôc dang duç/c tiép tue phât triën vôi nhiêu triën vong môi Nham khâc phuc nhûng nhuôc diëm cüa acyclovir, giâm sô làn dùng thuôc cho bênh nhân, han ché tâc dung phu cüa thuôc và cô thë kiëm soât toc dô giâi phông duorc chât, chüng tôi tién hành

"Nghiên ctni bào ché viên nén acyclovir tâc dung kéo dài" vôi nhüng mue

PHAN I TÔNG QUAN

1.1 DAI Cl/ONG VÊ THUÔC TÂC DUNG KÉO DÀI [3]

1.1.1 Khâi niêm thuoc TDKD:

Thuoc TDKD là nhûng ché pham cô khâ nâng kéo dài quâ trinh giâi phông và hâp thu duac chât tù dang thuoc nhàm duy tri nông dô duac chât trong mâu trong vùng diêu tri mot thài gian dài vôi mue dfch kéo dài thài gian diêu tri, giâm sô lân dùng thuôc cho nguài bênh, giàm tâc dung không mong muôn, nâng cao hiêu quâ diêu tri cüa thuôc

1.1.2 Phân loai thuôc TDKD:

Hiên nay trong câc tài liêu chuyên mon cô rât nhiêu thuât ngû de chî thuôc TDKD trong dô câch phân biêt cüng chua hoàn toàn thông nhât và rô ràng Théo câc tài liêu chmh thông, cô thé chia ra câc loai sau:

- Thuôc giâi phông kéo dài

- Thuôc giài phông cô kiëm soât

- Thuôc giâi phông theo chuong trinh

- Thuôc giâi phông nhâc lai

- Thuôc giài phông tai dfch

1.1.3 Uu nhtïoc diëm cüa thuôc TDKD

* Uu diëm

- Duy tri nông dô duac chât trong mâu vùng diêu tri, giàm duac dao dông nông dô mâu cüa thuôc (trânh hiên tuong dinh - dây), do dô giâm tâc dung phu cüa thuôc

- Giâm sô làn dùng thuôc, giâm phiên phiic cho nguài bênh, trânh quên thuôc, bô thuôc gôp phân nâng cao hiêu quâ diêu tri cüa thuôc, dâc

biêt à nhûng nguài bênh man tmh.

- Nâng cao sinh khâ dung cûa thuoc do duç/c chât duac hâp thu dêu

dân, triêt dê han.

- Giâm luong thuôc dùng cho câ dot diêu tri nên giâ thành dot diêu tri giâm

* Nhiroc diëm:

- Néu co hiên tuang ngô dôc, tâc dung phu hay không chiu thuoc thr

không thài trù ngay thuoc khôi ca thë duac

- Là nhüng dang bào ché doi hôi kÿ thuât cao Khi uong, quâ trinh giâi

phông duac chât trong duàng tiêu hoâ lai phu thuôc vào nhiêu yéu tô Do dô, néu

cô sai sot trong kÿ thuât bào ché hay nhüng thay doi sinh hoc à câ thë nguài bênh

cô thé dân dén nhüng thât bai trong dâp uïig lâm sàng so vôi ÿ dô thiét ké ban dâu

- Chî cô môt sô ft duac chât ché duac duôi dang TDKD

ché giâi phông ducrc chât.

Gôm cô 2 hê:

+ Hê côt an mon

- Hê màng bao: + Hê màng bao khuyéch tân

+ Hê màng bao ân mon

Ô dây chî trinh bày vê hê côt

+ Hê côt tro khuyéch tân:

* Nguyên tac câu tao:

Duac chât duac phân tân vào môt côt tra xôp, không tan trong duàng

tiêu hoâ dông vai trô nhu môt bô khung mang thuôc

* Ca ché giâi phông duoc chât:

Sau khi uong thuôc, duac chât khuyéch tân tù côt ra dich tiêu hoâ và

côt duac dào thài nguyên ven ra ngoài

+ Hê côt ân mon:

* Nguyên tâc câu tao: Phôi hop duac chât vôi môt polyme thân nufôc

- Môi truông hoà tan khuéch tan qua lôp gel thâm vào côt hoà tan dirac chât

- Dung dich duac chât khuyéch tan qua lôp gel ra môi truôfng bên ngoài

1.2 VÀINÉT VÊ ACYCLOVIR [5], [6], [10], [18]

1.2.1.Công thufc hoâ hoc

Công thiîc phân tir: ClgH, ,n5o3 Khôi luang phân tuf: 225,2Tên khoa hoc: 2- amino- 9-[(2-hydroxyethoxy)-methyl]-1,9- dihydro-

- 6H- purin- 6- one

1.2.2 Tmh chât

trong dimethyl sulfoxid, rât ft tan trong con, tan trong dung dich acid hay

- Nhiêt dô nông chây là 230 °C và bi phân huÿ

- Acyclovir co hai hâng sô phân ly: pKal= 2,41 ± 0,27 và pK,^ 9,06 ± 0,88

1.2.3.Tâc dung dirac lÿ

Acylovir (ACV) là mot dân chât cüa guanosin co tâc dung ûc ché in vitro và in vivo trên câc nhom virus nhu: Herpes simplex (HSV) loai 1 và loai

hoàc sâp hay chât béo, dong vai trô 1 côt mang thuôc Sau khi uong, côt së hoà

* Co ché giâi phông duoc chât:

- Côt thâm nuôc và hoà tan lôp duac chât à bê mât côt.

- Polyme truang na tao hàng rào gel kiëm soât su giâi phông duac chât

O

- Rât bên vüng, trong môi truôfng kiêm on dinh han trong môi truông acid

2, Varicella-zoster (VZV), Epstein - barr (EBV), và cytomegalovirus (CMV) Trong mâu cây té bào ACV cô tâc dung khâng virus manh nhât vôi HSV-1 sau

dô là HSV-2, VZV, EBV và CMV (theo thu” tu giâm dân vê hiêu lue tâc dung

ûc ché), tâc dung ûc ché cüa ACV doi vôi câc virus trên cô tmh chon loc cao

Acyclovir ûc ché quâ trinh sinh tong hop DNA cüa siêu vi khuân khi chüng xâm nhâp vào té bào, nhô tâc dông cüa câc men do virus sinh ra acyclovir duac chuyën thành acyclovir monophosphat, acyclovir diphosphat roi acyclovir triphosphat - chât cuôi cùng cô tâc dung ûc ché câc men polymerase DNA cüa virus Acylovir triphosphat duac thu nhân vào DNA virus và tâc dông nhu là nhânh cuôi cùng vi trong câu tao cüa nô không cô nhôm 3’ hydroxy, và do vây làm gian doan quâ trinh tong hop DNA cüa virus Acyclovir ûc ché tong hop DNA và su nhân lên cüa virus mà không ânh huang dén chuyën hoâ cüa té bào bînh thuông

1.2.4 Duroc dông hoc

* Sinh khâ dung theo duông uong cüa ACV thâp chî khoàng 20% (15- 30%) Thüc ân không làm ânh huang dén hâp thu cüa thuôc Nông dô dînh trong huyét tuang dat duac sau khi uong là 1,5 - 2 giô, tiêm tînh mach sau 1 giô

* Phân bô: ACV phân bô rông trong dich ca thë và câc ca quan nhu

nâo, phôi, ruôt, gan, lâch, ca, tü cung, niêm mac, dich âm dao, nuôc mât, Liên két vôi protein huyét tuang thâp (9-33%)

* Chuyén hoâ và thâi triï:

- Phân lôn thuôc duac thâi trù qua thân duôi dang không bién doi Chât chuyën hoâ duy nhât cô tâc dung cüa ACV là 9-carboxymethylguanin, chiém khoàng 10-15% liêu dùng

- Thôi gian ban thâi ngàn: t1/2 = 2-3 giô à trè em > 1 tuôi và nguôi lôn,

à trê sa sinh là 4 giô và à bênh nhân suy thân mân tmh là 19,5 giô.

1.2.5 Chî dinh và dieu tri

- Diêu tri khôi dâu và du phông tâi nhiêm HSV-1 và HSV-2 à da và

niêm mac, viêm nâo HSV

- Diêu tri nhiêm HBV câp tmh ô mât và viêm phôi à nguôi lôn.

- Diêu tri khôi dâu và tâi phât Herpes sinh duc.

- Diêu tri thuÿ dâu xuât huyét, thuÿ dâu à nguài suy giâm miën dich, thuÿ

dâu à trè sa sinh.

1.2.6 Chông chî dinh

Chông chî dinh cho nhûng bênh nhân mân câm thuoc

1.2.7 Thân trong

- Thân trong voi bênh nhân suy thân, phu nü co thai, cho con bü

- Tiêm truyên tmh mach châm dë trânh két tüa ACV trong thân

1.2.8 Tâc dung không mong muon

- Co thë gàp buôn non, tiêu chây, non, dau bung, noi ban, câc phân

ûng vê thân kinh nhu chong mât, âo giâc, buôn ngü

- Duàng tiêm truyên tînh mach cô thë gàp câc phân ûng nhu: viêm,

viêm tînh mach à vi tri tiêm.

- Kem bôi: Cô khi gàp câm giâc nông bông à hay nhôi nhe à vi tri bôi

kèm theo ban dô nhe

1.2.9 Liêu lirong và câch dùng

- Nguài lôn: 200 mg/làn, 5 lân trong mot ngày (nguài suy giâm miên

dich dùng 400 mg/làn)

- Trê em duôi 2 tuéi dùng bàng 1/2 liêu cüa nguài lôn, trè em trên 2

tuôi dùng bàng liêu nguài lôn

- Doi vôi nguài suy thân, phài hiêu chînh liêu theo dô thanh thâi creatinin

1.2.10 Tuang tâc thuôc

- Dùng dông thài Zidovudin và ACV cô thë gây trang thâi ngü lim và

la ma

- Probenecid ûc ché canh tranh dào thài ACV qua ong thân nên làm

tàng thài gian bân thâi cüa ACV và giàm thâi trù qua nuôc tiëu

- Interferon làm tàng tâc dung chông virus in vitro cüa ACV Thân

trong vôi nguôi bênh truôc dây dâ cô phân ûng vê thân kinh vôi interferon

- Amphotericin B và ketoconazol làm tàng hiêu lue chông virus cüa ACV

1.2.11 Môt so ché pham AVC trên thi trirông

(1) Acyclovir NocKwoo: viên nén 200mg (Korea Green Pharm)

(2) Acyclovir Stada Tab: viên nén 200mg, 400mg, 800mg (Stada)

(3) Herpevir viên nén 200mg (Sanofi - Sinthelabo)

(4) Zovirax :

+ Viên nén 200mg, 800mg

+ Hôn dich 250mg/5ml, chai 125ml

+ Kem bôi da 5%, ông 2g

+ Thuoc mô tra mât 3% ông 4,5g

+ Lo bot pha dung dich tiêm truyên tînh mach 250mg (5) Acyclovir viên nén 200mg (Cty Traphaco)

Dang kem Avircrem 5% ông 5g (Cty Traphaco)

(6) Viên tâc dung kéo dài Zenvir 600mg

1.2.12 Mot so nghiên curu vê bào ché Acyclovir TDKD

* Viên nén [11]:

Tuncer Degim và công su dâ bào ché viên nén két dmh niêm mac miêng dë diêu tri nhiêm trùng tai miêng do Herpes Simplex gây ra Viên nén duac bào ché voi câc thành phân: Carbopol - 934, Polycarbophil (PC), và Sodium Taurocholat (ST)

Két quâ nghiên curu:

- Dô tan và giâ tri log cüa hê s6 phân bô octanol/ nuôc cüa acyclovir

thay doi theo pH Câc giâ tri này thay doi theo xu hirông giong nhau trong khoàng pH tù 2,2 dén 7,4

- Khâ nâng bâm dmh niêm mac cüa viên tàng khi tàng lirçmg C - 934

và nguofc lai, giàm khi tàng lirçmg PC

- Viêc thêm ST vào cô hiêu quâ làm tàng su hâ'p thu cüa acyclovir qua niêm mac

- Khâ nâng hoà tan dugc chat tir viên nén dirac khâo sât trong môi tnrcfng dich nuôc bot nhân tao dë tim ra công thurc tôi uu giâi phông duac chât theo mô hînh dông hoc bâc O.

- Công thûc bao gôm: C - 934 (64,4%), PC (34,4%), ST (0,8%) cô toc

dô giâi phông duac chât 9,708mg/h, thài gian giâi phông duac chât kéo dài dén 6h, duac lua chon là công thuc thich hgp nhât cho câc thü nghiêm invivo

- Tâc giâ cüng dâ xây dung duac môt mô hînh dông hoc dë phân tfch,

du doân quâ trînh hâp thu cüa acyclovir trên chô Mô hînh này cô thë duac phât triën dë âp dung mô phông quâ trînh dông hoc cüa thuôc trong ca thë con ngucri

*Viên nang [14]:

J Tu và công su dâ bào ché viên nang ACV giài phông cô kiëm soât qua 3 buôc: Tao hat (công thirc tao hat ACV 100g, PEG 6000 20g), bao hat (công thirc dich bao EC, PVP, dâu thâu dâu, aceton, isopropanol, Mg stearat), dông nang

Qua nghiên cuu khâ nâng giâi phông duac chât vôi câc dich bao cô nông dô EC lân lugt là 10%, 16 %, 24%, két quâ cho thây: tî lê EC trong dich bao tâng lên thî phân tràm giâi phông duac chât giâm

Vôi tÿ lê EC 16% : sau 2h duac chât giâi phông duac 40%, sau 6h giâi phông duçfc 50%, 8h giài phông dugc 75% và sau 12h giài phông duac 95%

* Vi nang [20]:

Cheu ST và công su dâ bào ché vi nang ACV TDKD bàng phircmg phâp bôc hai dung môi tù nhü tuang vôi chât mang là EC, dung môi hoà tan là dicloromethan Tâc giâ dâ nghiên cûu ành huôfng cüa mot sô yéu tô dén khà nâng giâi phông duac chât tù vi nang: dô nhôt cüa EC (45,100cps), tÿ lê CH2C12/EC (15/1, 20/1), tÿ lê EC/ACV (1/1; 2/1) cho két quâ nhu sau:

- Dô nhôt cüa EC tâng :khâ nâng giâi phông dugc chât tâng

- Tÿ lê EC/ACV tâng: khà nâng giâi phông dugc chât giâm

- Tÿ lê CH2C12/EC tâng: khâ nâng giâi phông dugc chât tàng.

* Vi càu noi [19]:

- Supapon Ponsuwanapha dâ nghiên cûu bào ché vi câu noi ACV TDKD bàng phuong phâp boc hoi dung môi tù nhü tuang Polyme kiëm soât giâi phông dugc chât là Eudragit SI 00, hê dung môi pha nôi gôm 3 dung môi vôi tÿ lê ethanol: isopropanol: dicloromethan = 8 : 2: 5 Két quâ nghiên cuu:

+ Khi tâng tÿ lê ACV/Eudragit : kfch thuôc vi câu tâng, hiêu suât tao vi câu giâm, tÿ lê vi câu hoâ tâng, % vi càu noi sau 12h giâm và % dugc chât dugc vi càu hoâ tàng

+ Khâ nâng giâi phông dugc chât tù vi càu dugc nghiên cun trong câc môi trucmg pH = 1,2, pH = 6,8 và pH = 7,2 Két quâ cho thây khà nâng giâi

phông dugc chât tù vi càu phu thuôc vào pH : à pH = 1,2 % dugc chât giâi phông rât thâp, giâ tri này tâng lên à pH 6,8 và cao nhât à pH 7,2 Diêu này

cô thë giâi thich do Eudragit S100 không tan trong môi truômg acid mà tan trong môi trucfng pH > 7

- Lê Hoàng Anh cüng dâ tién hành mot nghiên cùu vê bào ché vi càu noi ACV TDKD bàng phuong phâp bôc hai dung môi tù nhü tuang, ta dugc kéo dài là hôn hgp EC và Eudragit L100 dugc hoà tan trong pha nôi là hôn hgp 2 dung môi ethanol và dicloromethan Chât nhü hoâ dugc dùng dë tao và

on dinh nhü tuang là gôm xanthan Aerosil dugc thêm vào công thûc nhàm mue dfch chông dmh giüa câc vi câu Két quâ nghiên cùu: Tÿ lê EC- Edg

làm châm toc dô giài phông dugc chât và làm tàng câc giâ tri nhu: hiêu suât tao vi càu, tÿ lê ACV dugc vi càu hoâ và % vi câu noi sau 6h [1]

1.2.13 Câc phirong phâp dinh lirçmg ACV trong câc ché pham bào ché:

1.2.13.1 Phirong phâp sac kÿ long hiêu nâng cao (HPLC):

* Paraskevas D Tzanavaras và công sir dâ nghiên cuu dinh lirong dông thcd ACV và tap chfnh cüa nô là guanine trong câc ché pham bào ché [12]

+ Sü dung mây HPLC Hewlett Packard (HP 1100)

+ Côt monolithic RP - 18e (100 mm x 4,6 mm); nhiêt dô côt: 25°C+ Pha dông: acid acetic 0,2% (v/v)

+ D2 chuân: pha dung dich ACV chuân cô nông dô 1000mg/l

pha dung dich guanine chuân cô nông dô 100mg/l+ D2 thü: tfnh toân pha dung dich cô nông dô tuang üng vôi dung dich chuân+ Detector quang pho DAD buôc sông 254nm

+ Toc dô dông: 2,0ml/phüt

- Tien hành: phuong phâp sac kÿ pha dâo:

+ Mue dfch: dinh lugng ACV trong ché pham

+ Mây HPLC Agilent 1100 (Dire)

+ Côt: 5(j.m Hypersi]|ODS~Q^25cm x4,6 mm)

+ Pha dông: Hôn hgp acetonitril 20 mM - dêm ammonium acetat (pH 4,5) theo tî lê 40: 60

+ D2 pha loâng: Trôn acetonitril vôi nuôc theo tî lê 40:60

+ D2 chuân và dung dich thü: cô nông dô 198 |ug/ml, trong quâ trînh

pha dêu dugc diêu chînh thë tfch bàng dung dich pha loâng à trên.

+ Detector UV buôc sông 250 nm

+ Toc dô dông: 0,8 ml/ phüt

4- Thë tfch tiêm: 20 jllI.

Két quâ: Sü dung côt ODS pha dâo cho thôi gian luu cüa ACV khoàng

3 phüt và tong thôi gian phân tfch ft hem 5 phüt

1.2.13.2 Phtfong phâp quang pho

* M.Sultan dâ tién hành dinh lugng ACV trong câc ché pham bào ché bàng phuong phâp quang pho hàp thu khâ kién (VIS): [21]

Tién hành:

- Thuoc thü: + 3 - methylbenzothiazolin - 2- one hydrazone (MBTH)

+ Dung dich FeCl3.6H20

- Dung dich chuân: Hoà tan 25mg ACV chuân bàng nuôc cât, cho vào bînh dinh mire 50ml, diêu chînh thë tfch dén vach bàng nuôc cât

- Xây dung duông cong dinh lugng (duông chuân cüa dung dich ACV): Lây 1ml dung dich MBTH cho vào 1 loat câc bînh dinh mure 10ml Mot thë tfch dâ dugc tfnh toân truôc cüa dung dich ACV chuân dugc thêm vào câc bïnh dë dugc nông dô nàm trong khoàng 20-200|ng/ml, sau dô cho thêm lml FeCl3 vào Dung dich dugc lâc dêu và siêu âm trong 20 phüt Diêu chînh

thë tfch dén vach dinh mure bàng nuôc cât Dem do dô hâp thu à buôc sông

616nm, mâu tràng là mâu chüra câc thuôc thü không cô ACV Tù két quâ thu dugc, vê duông cong dinh lugng biëu thi môi quan hê giûa dô hâp thu và nông

dô ACV, hoàc suy ra phuong trinh hôi quy

- Pha dung dich thü: cân 10 viên, dem nghiên Cân 1 lugng bôt tuong üng vôi 25mg ACV, cho vào binh dinh mire 50ml, lâc, dem siêu âm trong 15 phüt Diêu chînh thë tfch dén vach bàng nuôc cât, lâc, dem loc, sau dô tién

hành nhu dâ trinh bày à phân xây dung duông chuân.

* P.Ugandhi và công su dâ sü dung phuong phâp quang pho hâp thu

UV dë dinh lugng ACV trong viên nén: [24]

Mue dfch cüa nghiên cuu là cài tién tfnh don giân, nhanh, chfnh xâc và tin cây cüa phuong phâp quang pho trong xâc dinh hàm lugng ACV bàng

phuong phâp quang pho hâp thu tù ngoai (UV) Cuc dai hâp thu cüa ACV trong môi truôfng nuôc cât là 253nm và tai dâ)7 no tuân theo dinh luât Beer ô khoàng nông dô 2-20|ng/ml.

Sü dung mây quang pho UV-1700 Shimadza vôi cuvet 1cm dugc sü dung dë do dung dich chuân cô nong dô 100|ag/ml dugc pha trong nuôc cât Dung dich thü dugc tién hành nhu sau: cân 20 viên ACV, nghiên, cân 1 lugng bôt tuong üng lOmg ACV cho vào binh dinh mire 100ml, lâc, siêu âm 20 phüt, diêu chînh thë tich dén vach bàng nuôc cât

Dë xây dung duôfng chuân cüa ACV trong môi truôfng nuôc cât: pha 1 dây dung dich cô nông dô tir 2-20 |a.g/ml tù dung dich chuân, dem do dô hâp

thu à buôc sông 253nm Tù két quâ thu dugc vê dugc duông chuân và rut ra

dugc phuong trînh hôi quy Tuong tu tién hành vôi dung dich thü

Phuong phâp này dugc cho là don giân hôn câ

PHAN 2:

THlTC NGHIÊM VÀ KET QUÂ

2.1 NGUYÊN LIÊU VÀ PHUONG PHÀP THUC NGHIÊM 2.1.1 Nguyên liêu và phuong tien nghiên curu

* Nguon goc và tiêu chuan chât Iiïçmg cüa câc nguyên liêu

* Phuong tien nghiên curu

- Mây dâp viên ERWEKA (Dure)

- Mây do LGVV ERWEKA

- Mây trâc nghiêm hoà tan Vankel Varian 7010 (Mÿ)

- Mây quang ph6 UV- VIS Hitachi (Nhât)

- Cân xâc dinh dô âm Satorius MA 30 (Dire)

- MâyHPCL Thermo Finnigan (Mÿ)

- Mây nhào trôn và mây xât hat lâc ERWEKA

- Mây xâc dinh dô bd, dô mài mon Pharmatest PTE 20E

2.1.2 Phirong phâp nghiên cini 2.1.2.1 Phirong phâp bào che viên nén ACV TDKD

Viên nén ACV TDKD duac bào ché bàng phirong phâp xât hat irort:

- ACV và ta duac duac cân theo công thurc, nghiên min, trôn dêu theo nguyên tàc trôn bôt kép

- Xât hat qua rây 1mm Sây se à 50°C trong khoâng 10 phüt.

- Sua hat qua rây 0,8mm Sây à 50°C dén dô àm cüa hat không quâ 3%.

- Trôn ta duac trcfn voi tÿ le: Mg stearat 0,5%

- Dâp viên voi bô chày coi (|) = 12mm Khôi luang viên 500mg, hàm luang ACV 200mg Môi me dâp 150 viên

2.1.2.2 Phirong phâp xây dumg diràng chuan ACV

* Xây dirng dirèng chuân bàng phirong phâp do quang

- Ducmg chuan ACV duçfc xây dung trong môi trucmg nuôc cât

- Câch tien hành:

Cân chmh xâc lOOmg ACV, hoà tan bàng nuac cât cho vào binh dinh mure 100ml, thêm nuôc cât dên vach, làc kÿ Sau do pha loâng bàng nuac cât thu duac câc dung dich cô nông dô lân lugt là 4, 6, 8, 10, 12 (ag/ml R6i dem

do quang à buorc song 252nm.

Tir két quâ thu duac, xây dung phuong trinh hôi quy thuc nghiêm, vê

* Xây dung dirông chuân bàng phirong phâp sac kÿ long hiêu

nâng cao (HPLC)

- Duàng chuân ACV duac xây dung bàng phuong phâp HPLC voi câc diêu kiên sau:

+ Pha dông: dung dich acid acetic 0,02M

+ Côt: C18 ( 250mm x 4,6mm ), duông kmh hat: 5|j,m, nhiêt dô côt: 25°C

+ Toc dô dông: l,5ml/phüt.

+ Detetor UV, buôc sông 254nm

+ The tich tiêm mâu: lOjul

+ Dung dich thu: cân chmh xâc lOOmg ACV, hoà tan trong 10ml NaOH 0,1N cho vào bînh dinh mue 100ml, thêm nirôc cât dén vach, làc kÿ

10,20,50, 100,150 fxg/ml

Két quà thu duçfc tùf câc sâc kÿ dô, xây dung phuüng trînh hôi quy thuc nghiêm, vê dé thi biëu thi su tuong quan giûa diên tich pic và nông dô duoc chât

2.I.2.3 Câc phirong phâp dânh giâ viên nén ACV TDKD

* Phirong phâp dânh giâ khâ nàng giâi phông ACV tir viên nén TDKD

- Sir dung mây trâc nghiêm hoà tan Vankel 7010 (Mÿ) de dânh giâ

%ACV giâi phong tùT viên nén sau nhüng khoâng thori gian nhât dinh, vôi

câc thông s6:

+ Toc dô khuây: 100 ± 1 vong/phüt

- Câc buôc tien hành:

+ Khi mây dâ dat câc thông sô yêu càu: cho viên nén vào môi truefng hoà tan trong côc

+ Sau nhüng khoâng thoi gian nhâ't dinh: 1 giôr, 2 giôf, 3 gid, 4 giôr, 5 giô, 6gicf, 7 giôf, 8 gid hüt 10ml môi trucmg hoà tan, loc qua giây loc Bô sung 10ml môi truômg vào

+ Mâu rut ra duofe do quang à buôc sông 252 nm, su dung mâu trâng

là nuefe cât, mâu chuân là dung dich ACV trong nuée co nông dô 10 ng/ml

* Phirong phâp âânh giâ LGVV

Sir dung mây do dô cung ERWEKA Thir 10 viên, lây giâ tri trung binh

* Phucrng phâp dânh giâ dô dong deu khôi luotig [2]

Thu vôi 20 viên, dô lêch chuân cho phép là 5%

Không duçfc quâ 2 viên cô dô lêch chuân vuoft quâ giôi han cho phép, không cô viên nào gâp dôi giôi han dô

* Phuong phâp dânh giâ dô bô cüa viên [23]

Lay mot sô luofng viên nén tuofng ûng vôi 6,5g, dem sàng loai bôt dmh

à viên Cân chînh xâc khôi luofng sô viên dâ lâ'y, xong chuyën sô' viên dô vào

trông Cho trông quay 100 làn, lây viên ra, dem rây dë loai bôt bj mât di tir viên trong quâ trînh trông quay, rôi dem cân lai khô'i luofng sô' viên vùfa lâ'y ra

Yêu càu: dô bcf cüa viên không quâ 1,0%

* Phuong phâp dinh luofng

- Xâc dinh hàm luofng ACV trong viên theo 2 phuofng phâp:

+ Phuong phâp do quang: theo BP 2005

+ Phuofng phâp HPLC : theo USP 29

Yêu câu: Hàm luofng ACV trong viên chûa tù 90,0- 110,0% so vôi hàm luofng ghi trên nhân

(a) Dinh Iticfng bàng phucmg phâp do quang:

Lâ'y 20 viên nén ACV dem nghiên trong cô'i sü Cân môt luofng bôt viên tucfng üng vôi 0,1g ACV, cho vào bînh dinh mûc 100ml Thêm 60ml dung dich NaOH 0,1N, dem di siêu âm 15 phüt Diêu chînh thë tfch dê'n vach bàng dung dich NaOH, lâc dêu, loc

Hüt 15ml dung dich loc cho vào bînh dinh mûc 100ml Cho thêm 50ml nuôc và 5,8ml dung dich HC1 2M vào bînh Thêm nuôc vùa dû 100ml

Hüt 5ml dung dich trên cho vào bînh dinh müc 50ml Diêu chînh thë tich dê'n vach bàng dung dich HC1 0,1M Dem dung dich này di do dô hâp thu

+ Diêu kiên sâc kÿ ghi à mue 2.1.2.2.

+ Dung dich chuân: tmh toân cân môt luçfng ACV dé pha voi nuôc dat

duac nông dô 0,lmg/ml

+ Dung dich thu: nghiên 10 viên nén ACV, cân môt luang bôt tuong

ûng voi lOmg ACV, hoà tan trong 10ml NaOH 0,1N, chuyên vào bînh dinh

mure 100ml, diêu chînh bàng nuôc dén vach

Tïnh toân kêt quâ dua vào diên tich pic mâu thur (S^) và mâu chuan (Sc)

2.2 KÊT QUÂ THlTC NGHIÊM VÀ NHÂN XÉT

2.2.1 Xây dimg durcmg chuân ACV

2.2.1.1 Xây dirng dirông chuân ACV trong môi triràng nuofc cât

bàng phuong phâp do quang

- Tien hành nhu dâ mô ta à mue 2.1.2.2.

- Két quâ duac trinh bày à bàng 1 và hinh 2

Ban g 1: Suphu thuôc mât dô quang (D) voi nông dô (C) cüa ACV

trong môi truùng nuâc cât

Hinh 1: Dit&ng chuan cüa dung dich ACV trong môi truùng nuâc cât

dô hàp thu phu thuôc tuyén trnh vào nông dô ACV trong khoâng khâo sât De-vây v

co thé sü dung phuong phâp do quang à X = 252nm vdi câc khoâng nông dô trên

dë dinh luong ACV trong mâu thü và trong môi truàng hoà tan

2.2.I.2 Xây dung dirôrng chuân ACV bàng phirong phâp HPLC

- Tien hành nhu dâ mô tâ à mue 2.1.2.2.

- Két quâ duac trînh bày à bàng 2 và hinh 3.

Bàng 2: Su phu thuôc diên tich pic (Sp) vâi nông dô (C) cüa ACV

Hinh 3: Sac kÿ dô cüa dung dich ACV co C- 100/jg/ml

* Nhân xét: Thcri gian luu cüa ACV là 5,63 phüt.

Giâ tri R2 xâp xî bàng 1, chüng tô diên tfch pic phu thuôc tuyén tfnh vào nong dô ACV trong khoàng khâo sât Do vây, co thë sûr dung

phuofng phâp HPLC dë xâc dinh hàm luofng ACV trong viên

ACV TDKD 12h

Chüng tôi lua chon dang côt dë bào ché viên nén ACV TDKD

Dë sa bô khào sât ânh huông cüa ta duofc toi su giài phông ACV khôi viên,

chüng tôi tién hành bào ché và dânh giâ giâi phông duçfc chât tùr viên khi sü dung

tùng loai tâ dugc tao cot sau:

- Dicalci phosphat (DCP): tâ dugc vô ca, không hoà tan trong nuôc, là

nguyên liêu tao côt tra khuyéch tân

- HPMC E l5: polyme truang nô và hoà tan trong nuôc, là nguyên

liêu tao côt truang nâf hoà tan (cot thân nuôc)

- Ethyl cellulose (EC): polyme không tan trong nuôc tao côt tra khuéch tân

2.2.2.I Khâo sât viên nén ché voi tâ dirac DCP

Do ACV là dang bôtxôp, khô chiu nén nên khi bào ché viên vôi DCP-

là mot tâ dugc vô ca, sa nuôc- cân phâi thêm tâ dugc dmh thî viên môi dàm

bào dugc dô bên ca hoc Chüng tôi dâ lua chon môt so tÿ lê tâ dugc dë bào

ché viên nhu ôf bàng 3 Két quâ thü hoà tan dugc trînh bày ô bàng 4 và hînh 4.

Bàng 3: Thành phân viên nén bào chê'vâi ty lê DCP và PVP khâc nhau