Nghiên cứu bào chế viên nén acyclovir tác dụng kéo dài

Thuốc TDKD là những chế phẩm có khả năng kéo dài quá trình giải phóng và hấp thu dược chất từ dạng thuốc nhằm duy trì nồng độ dược chất trong máu trong vùng điều trị một thời gian dài vớ

LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC

Người hướng dẫn khoa học:

1 TS Phạm Thị Minh Huệ

2 GS TS Võ Xuân Minh

HÀ NỘI, NĂM 2007

Trong suốt thời gian thực hiện đề tài tôi nhận được rất nhiều sự quan tâm, hướng dẫn, giúp đỡ của các thầy cô giáo, các bạn đồng nghiệp, bạn bè và gia đình Tôi xin bày tỏ lòng kính trọng và lời cảm ơn chân thành đến:

GS TS Võ Xuân Minh

TS Phạm Thị Minh Huệ

đã tạo mọi điều kiện, chỉ bảo, giúp đỡ tôi hoàn thành luận văn

Đồng thời tôi cũng xin được cảm ơn các thầy cô giáo, các bạn kỹ thuật viên Bộ môn Bào chế đã giúp đỡ tôi rất nhiều trong suốt thời gian thực hiện luận văn

Ths Nguyễn Thị Trinh Lan, Ths Nguyễn Thị Thanh Duyên - Bộ môn Công

nghiệp dược đã tạo điều kiện giúp đỡ tôi hoàn thành luận văn

Cuối cùng tôi xin cám ơn gia đình, bạn bè - những người đã khuyến khích động viên tôi trong suốt thời gian qua

Hà nội, tháng 12 năm 2007

ACV Acyclovir

BP British Pharmacopoeia (Dược điển Anh)

DĐVN Dược điển Việt Nam

USP The United States Pharmacopeia (Dược điển Mỹ)

HPLC High performance liquid choromatography

(sắc ký lỏng hiệu năng cao)

Trang bìa

Lời cảm ơn

Mục lục

Ký hiệu chữ viết tắt

Danh mục các bảng

Dang mục các hình

CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 3

1.1 VỀ ACYCLOVIR 3

1.1.1 Công thức hoá học 3

1.1.2 Tính chất lý hoá 3

1.1.3 Dược động học 3

1.1.4 Tác dụng dược lý 4

1.1.5 Chỉ định - Chống chỉ định - Thận trọng 5

1.1.6 Liều lượng và cách dùng 5

1.1.7 Tác dụng không mong muốn 7

1.1.8 Tương tác thuốc 7

1.1.9 Lưu ý 8

1.1.10 Một số chế phẩm acyclovir trên thị trường 8

1.2 VỀ THUỐC TÁC DỤNG KÉO DÀI 8

1.2.1 Khái niệm về thuốc tác dụng kéo dài 8

1.2.2 Ưu nhược điểm của thuốc TDKD 8

1.2.3 Cơ chế giải phóng dược chất của một số hệ TDKD 10

1.3 MỘT SỐ NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ ACYCLOVIR 12

1.4 CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG ACYCLOVIR 17

1.5 MỘT SỐ VẤN ĐỀ VỀ TỐI ƯU HOÁ CÔNG THỨC BÀO CHẾ 19

1.5.1 Các phương pháp tối ưu hoá 19

1.5.2 So sánh các phương pháp tối ưu hoá 20

CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 21

2.1 NGUYÊN LIỆU 21

2.2 PHƯƠNG TIỆN NGHIÊN CỨU 21

2.3 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 22

2.3.1 Phương pháp xây dựng đường chuẩn 22

2.3.2 Phương pháp bào chế 23

2.3.3 Phương pháp đánh giá một số chỉ tiêu chất lượng viên 23

2.3.4 Phương pháp thiết kế thí nghiệm và tối ưu hoá công thức 27

CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 28

3.1 KẾT QUẢ 28

3.1.1 Xây dựng đường chuẩn 28

3.1.2 Khảo sát xây dựng công thức cơ bản 31

3.1.3 Xây dựng công thức tối ưu 43

3.1.4 Đề xuất quy trình bào chế 53

3.1.5 Kh ảo sát, đề xuất một số tiêu chuẩn chất lượng cho viên nén ACV TDKD 54

3.2 BÀN LUẬN 58

KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 61

Bảng 2.1 Nguồn gốc và tiêu chuẩn chất lượng của các nguyên liệu 21

Bảng 3.14 Phần trăm dược chất giải phóng của các viên có lực gây vỡ

Bảng 3.18 Giới hạn các biến phụ thuộc

Bảng 3.23 Kết quả thử độ hoà tan của viên bào chế theo công thức tối ưu 55

Hình 3.1 Đường chuẩn biểu thị sự phụ thuộc giữa mật độ quang và nồng

độ ACV trong môi trường HCl 0,1 N Hình 3.2 Đường chuẩn biểu thị sự phụ thuộc giữa mật độ quang và nồng

độ ACV trong môi trường nước cất Hình 3.3 Đường chuẩn biểu thị sự phụ thuộc giữa diện tích pic và nồng độ

dung dịch ACV Hình 3.4 Phần trăm dược chất giải phóng từ cốt gôm xanthan

Hình 3.5 Phần trăm dược chất giải phóng từ cốt phối hợp

Hình 3.6 Phần trăm dược chất giải phóng từ cốt phối hợp

Hình 3.7 Phần trăm giải phóng dược chất giải phóng từ các viên có tá

Hình 3.13 Ảnh hưởng của GX, mgst tới Y3

Hình 3.14 Ảnh hưởng của GX, mgst tới Y8

Hình 3.15 Phần trăm dược chất giải phóng dự đoán và thực tế của viên bào

chế theo công thức tối ưu Hình 3.16 Quy trình bào chế đề xuất

ĐẶT VẤN ĐỀ

Trong vòng 30 năm trở lại đây việc đưa ra thị trường một thuốc mới ngày càng khó khăn và tốn kém Vì vậy, các nhà sản xuất tập trung đầu tư khai thác lĩnh vực bào chế nhằm nâng cao chất lượng các dạng thuốc và đưa

ra các chế phẩm bào chế mới từ các dược chất cũ Thuốc tác dụng kéo dài (TDKD) ra đời từ những năm 50 được coi là thế hệ các dạng thuốc thứ 2 sau các dạng thuốc quy ước, đang được tiếp tục phát triển với nhiều triển vọng mới Thuốc TDKD là những chế phẩm có khả năng kéo dài quá trình giải phóng và hấp thu dược chất từ dạng thuốc nhằm duy trì nồng độ dược chất trong máu trong vùng điều trị một thời gian dài với mục đích kéo dài thời gian điều trị, giảm số lần dùng thuốc cho người bệnh, giảm tác dụng không mong muốn, nâng cao hiệu quả điều trị của thuốc

Ngày nay, cùng với sự phát triển của khoa học công nghệ, môi trường sống của con người ngày càng bị ô nhiễm, dẫn đến hậu quả tỉ lệ mắc bệnh càng cao Bệnh do virus gây nên là bệnh khó chữa, phải điều trị dài ngày Acyclovir là một dẫn chất nucleosid (acycloguanosin), có tác dụng chọn lọc trên tế bào nhiễm virus herpes Acyclovir là thuốc có thời gian bán thải ngắn (t1/2 = 2 - 3 h), khiến cho bệnh nhân phải uống nhiều lần trong ngày gây nhiều phiền phức cho bệnh nhân Gần đây đã có nhiều công trình nghiên cứu bào chế acyclovir dưới dạng thuốc TDKD Trên thế giới đã có biệt dược acyclovir TDKD, nhưng ở trong nước dạng thuốc này còn ít được nghiên cứu

Vì vậy, chúng tôi thực hiện đề tài:

“ Nghiên cứu bào chế viên nén Acyclovir tác dụng kéo dài”

để góp phần thúc đẩy bào chế acyclovir TDKD

M ục tiêu của đề tài như sau:

1 Lựa chọn được công thức tối ưu bào chế viên acyclovir TDKD 12h

ở quy mô phòng thí nghiệm

2 Đề xuất phương pháp bào chế

3 Đề xuất một số chỉ tiêu chất lượng cho viên TDKD

CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN

1.1.1 Công thức hoá học

Công thức phân tử: C18H11N5O3

Khối lượng phân tử: 225,2

Tên khoa học: 2 - amino - 9 - [(2 - hydroxyethoxy) - methyl] - 1,9 - dihydro -

6H- purin - 6 - one [6], [24]

1.1.2 Tính chất lý hoá

- Acyclovir là dạng bột kết tinh màu trắng, ít tan trong nước, khó tan trong alcohol, tan tự do trong các dung môi dimethylsulfoxyd, tan được trong dung dịch kiềm và acid loãng

- Acyclovir phân bố rộng trong dịch cơ thể và các cơ quan như: não, thận, phổi, ruột, gan, lách, cơ, tử cung, niêm mạc và dịch âm đạo, nước mắt, thuỷ dịch, tinh dịch, và dịch não tuỷ

- Acyclovir liên kết với protein huyết tương thấp (9 - 33%) Thời gian đạt nồng độ đỉnh trong huyết tương: uống từ 1,5 - 2h; nửa đời sinh học của thuốc ở người lớn khoảng 3h, trẻ em từ 2 - 3h, trẻ sơ sinh là 4h

- Một lượng nhỏ thuốc được chuyển hoá ở gan, còn phần lớn (30% - 90% liều) được đào thải qua thận dưới dạng không biến đổi [3], [24]

- Tác dụng của acyclovir mạnh nhất trên virus herpes simplex typ 1 (HSV - 1) và kém hơn ở virus herpes simplex typ 2 (HSV - 2), virus varicella zoster (VZV), tác dụng yếu nhất trên cytomegalovirus (CMV) Trên lâm sàng không thấy có hiệu quả trên người bệnh nhiễm CMV Tác dụng chống virus epstein barr vẫn còn chưa rõ Trong quá trình điều trị đã xuất hiện một số chủng kháng thuốc và virus herpes simplex tiềm ẩn trong các hạch không bị tiêu diệt Acyclovir có tác dụng tốt trong điều trị viêm não thể nặng do virus HSV - 1, tỷ lệ tử vong giảm từ 70% - 20% Acyclovir dùng liều cao tới 10 mg/kg thể trọng, cứ 8h dùng một lần, dùng trong 10 - 14 ngày Thể viêm não - màng não nhẹ hơn do HSV - 2 cũng có thể điều trị tốt với acyclovir [3]

1.1.5 Chỉ định - Chống chỉ định - Thận trọng

 Chỉ định

- Điều trị khởi đầu và dự phòng tái nhiễm virus herpes simplex typ 1 và

2 ở da và niêm mạc, viêm não herpes simplex

- Điều trị nhiễm herpes zoster (bệnh zona) cấp tính; zona mắt, viêm phổi

do herpes zoster ở người lớn

- Điều trị khởi đầu và tái phát nhiễm herpes sinh dục

- Điều trị thuỷ đậu xuất huyết, thuỷ đậu ở người suy giảm miễn dịch, thuỷ đậu ở trẻ sơ sinh [3]

 Chống chỉ định - Thận trọng

nữ có thai Chỉ nên dùng acyclovir cho người mang thai khi lợi ích điều trị hơn hẳn rủi ro có thể xảy ra với bào thai [3], [13]

- Thận trọng đối với phụ nữ cho con bú, bệnh nhân suy thận, người già, bệnh nhân suy giảm miễn dịch Với người suy thận, liều dùng phải điều chỉnh theo độ thanh thải creatinin Tiêm truyền tĩnh mạch chậm với thời gian trên 1h để tránh kết tủa acyclovir trong thận [3]

1.1.6 Liều lượng và cách dùng

Điều trị bằng acyclovir phải được bắt đầu càng sớm càng tốt khi có dấu hiệu và triệu chứng của bệnh

 Dùng đường uống

- Điều trị do nhiễm herpes simplex:

Người lớn: Mỗi lần 200 mg ngày dùng 5 lần, cách nhau 4h, dùng trong 5 - 10 ngày (400 mg/ ngày ở người suy giảm miễn dịch)

Trẻ em dưới 2 tuổi: Dùng ½ liều người lớn

Trẻ em trên 2 tuổi: Dùng bằng liều người lớn

- Phòng tái phát herpes simplex cho người bệnh suy giảm miễn dịch, người ghép cơ quan dùng thuốc giảm miễn dịch, người nhiễm HIV, người dùng hoá liệu pháp:

Người lớn: Mỗi lần 200 - 400 mg, ngày dùng 4 lần

Trẻ em dưới 2 tuổi: Dùng ½ liều người lớn

Trẻ em trên 2 tuổi: Dùng bằng liều người lớn

- Điều trị thủy đậu và zona:

Người lớn: Mỗi lần 800mg, ngày 5 lần, dùng trong 7 ngày

Trẻ em: Bệnh varicella, mỗi lần 20mg/kg thể trọng (tối đa 800mg ngày) x 4 lần trong 5 ngày; hoặc:

Trẻ em dưới 2 tuổi mỗi lần 200mg, ngày 4 lần

Trẻ 2 - 5 tuổi mỗi lần 400 mg, ngày 4 lần

Trẻ em trên 6 tuổi mỗi lần 800 mg, ngày 4 lần [3], [13]

 Dùng đường tiêm truyền tĩnh mạch

khởi đầu nặng, varicella zoster: 5 mg/kg thể trọng, cứ 8h mỗi lần trong 5 - 7 ngày Đối với người suy giảm miễn dịch nhiễm varicella zoster và người bệnh viêm não do herpes simplex: 10 mg/kg thể trọng, 8h mỗi lần, dùng trong 5 - 7 ngày

trọng; 8 h 1 lần, dùng trong 10 ngày

- Trẻ từ 3 tháng tới 12 năm nhiễm herpes simplex hoặc varicella zoster: Dùng liều 250 mg/m2 da, cứ 8h một lần, trong 5 ngày Nếu bệnh nhân bị suy giảm miễn dịch mà nhiễm varicella zoster thì liều 500mg/m2 da 8h 1 lần, dùng trong 5 ngày; bệnh nhân suy giảm miễn dịch nhiễm herpes simplex dùng

liều như trên trong 10 ngày [3]

 Thuốc mỡ acyclovir: Điều trị nhiễm herpes simplex môi và sinh dục khởi

đầu và tái phát, cần điều trị càng sớm càng tốt

Cách dùng thuốc mỡ: Bôi lên vị trí tổn thương cách 4h 1 lần (5 đến 6 lần mỗi ngày); đợt điều trị 5 - 7 ngày, bắt đầu ngay từ khi xuất hiện triệu chứng Nếu là thuốc mỡ tra mắt: Ngày tra 5 lần

1.1.7 Tác dụng không mong muốn

- Đường uống: Dùng ngắn hạn có thể gặp nôn, buồn nôn Dùng dài hạn

1 năm có thể gặp nôn, buồn nôn, ỉa chảy, đau bụng, nhức đầu (< 5% người

bệnh)

- Đường tiêm truyền tĩnh mạch: Thường gặp nhất là viêm, viêm tĩnh

mạch ở vị trí tiêm Ít gặp là các phản ứng thần kinh hoặc tâm thần (ngủ lịm, run, lẫn, ảo giác, cơn động kinh), kết tủa thuốc ở ống thận dẫn đến suy thận cấp, tăng nhất thời urê và creatinin, enzym gan trong huyết thanh, ban da,

buồn nôn

- Kem bôi: Có khi gặp cảm giác nhất thời nóng bỏng hoặc nhói ở vị trí bôi kèm theo ban đỏ nhẹ khi khô

- Thuốc mỡ tra mắt: Một số ít người bệnh thấy nhói nhẹ ngay khi bôi

Tuy nhiên không cần ngừng thuốc cũng sẽ khỏi và không để lại di chứng [3]

1.1.8 Tương tác thuốc

- Dùng đồng thời zidovudin và acyclovir gây trạng thái ngủ lịm và lơ

mơ

- Probenecid ức chế cạnh tranh đào thải acyclovir qua ống thận

- Amphotericin B và ketoconazol làm tăng hiệu lực chống virus của acyclovir

- Interferon làm tăng tác dụng chống virus invitro của acyclovir Thận trọng khi dùng thuốc tiêm acyclovir cho người bệnh trước đây đã có phản ứng

về thần kinh với interferon

- Dùng acyclovir tiêm phải thận trọng đối với người bệnh đã có phản ứng

về thần kinh khi dùng methotrexat [3]

1.1.9 Lưu ý

- Acyclovir là thuốc độc bảng B

- Thành phần giảm độc: Thuốc nhỏ mắt có nồng độ tối đa là 3% [3]

1.1.10 Một số chế phẩm acyclovir trên thị trường

- Viên nén: Zovirax 200 mg, 400mg, 800mg; Acyclovir 200mg; Acy -

Acy 200mg; Lovir 200mg (Acyclovir 200mg)

- Thuốc mỡ dùng ngoài Zovirax 5%, thuốc mỡ tra mắt Zovirax 3% [10]

- Viên TDKD: Zenvir 800 mg

1.2 VỀ THUỐC TÁC DỤNG KÉO DÀI

1.2.1 Khái niệm về thuốc tác dụng kéo dài

Thuốc tác dụng kéo dài (TDKD) là những chế phẩm có khả năng kéo dài quá trình giải phóng và hấp thu dược chất từ dạng thuốc nhằm duy trì nồng độ dược chất trong máu trong vùng điều trị trong thời gian dài với mục đích kéo dài thời gian điều trị, giảm số lần dùng thuốc cho người bệnh, giảm tác dụng không mong muốn, nâng cao hiệu quả điều trị của thuốc [5]

1.2.2 Ưu nhược điểm của thuốc TDKD

So với dạng thuốc quy ước, thuốc TDKD có một số ưu - nhược điểm sau:

 Ưu điểm

dao động nồng độ máu của thuốc (tránh được hiện tượng đỉnh - đáy), do đó giảm được tác dụng không mong muốn của thuốc

tránh quên thuốc, bỏ thuốc, thức dậy giữa đêm để uống thuốc Từ đó đảm bảo

sự tuân thủ của người bệnh theo chế độ liều đã chỉ định Đặc biệt thuận lợi đối với người bệnh cao huyết áp, đái đường

- Nâng cao sinh khả dụng của thuốc, do thuốc được hấp thu đều đặn, triệt

để hơn Trong nhiều trường hợp tập trung được nồng độ thuốc cao tại nơi điều trị, phát huy được tối đa tác dụng của thuốc

 Nhược điểm: Bên cạnh những ưu điểm trên, thuốc TDKD cũng có một số

nhược điểm sau:

- Nếu có hiện tượng ngộ độc, tác dụng không mong muốn hay không chịu thuốc thì không thải trừ thuốc ngay khỏi cơ thể được

- Thuốc TDKD đòi hỏi kỹ thuật cao Khi uống, quá trình giải phóng dược chất trong đường tiêu hoá lại phụ thuộc vào rất nhiều yếu tố Do đó nếu

có sai sót trong kỹ thuật bào chế hay những thay đổi sinh học ở người bệnh đều có thể dẫn đến thất bại trong đáp ứng lâm sàng so với ý đồ thiết kế ban đầu

một số dược chất chỉ được hấp thu tại một phần nhất định trong đường tiêu hoá như riboflavin, sắt sulphat thì nên chế dạng TDKD dạng “hệ nổi”; các dược chất hấp thu chậm thì không nên bào chế dưới dạng thuốc TDKD)

[4], [5]

1.2.3 C ơ chế giải phóng dược chất của một số hệ TDKD

1.2.3 1 Hệ TDKD giải phóng dược chất theo cơ chế khuếch tán

 Hệ màng bao khuếch tán

• Nguyên tắc cấu tạo

Bao dược chất bởi một màng polymer không tan trong dịch tiêu hoá, đóng vai trò là hàng rào khuếch tán, kiểm soát tốc độ giải phóng dược chất

• Cơ chế giải phóng dược chất

- Nước từ môi trường bên ngoài thấm vào màng, màng hút nước và trương nở

- Hoà tan dược chất trong hệ

- Khuếch tán dược chất ra môi trường bên ngoài [4], [5]

 Hệ cốt trơ khuếch tán

• Nguyên tắc cấu tạo

Dược chất được phân tán vào một cốt trơ xốp, không tan trong đường tiêu hoá, đóng vai trò như một bộ khung mang thuốc Sau khi uống, thuốc giải phóng khỏi cốt bằng cách khuếch tán từ cốt ra dịch tiêu hoá và cốt được đào

thải nguyên vẹn ra ngoài

• Cơ chế giải phóng dược chất

- Cốt thấm môi trường khuếch tán

- Hoà tan lớp dược chất ở bề mặt hệ

thống vi mao quản của cốt, tiếp tục hoà tan lớp dược chất nằm sâu trong cốt

- Dung dịch dược chất khuếch tán từ cốt ra dịch tiêu hoá

- Cốt đã giải phóng hết dược chất được đào thải ra khỏi đường tiêu hoá [4], [5]

1.2.3 2 Hệ TDKD giải phóng dược chất theo cơ chế hoà tan

 Hệ màng bao hoà tan

• Nguyên tắc cấu tạo

Bao dược chất bởi một màng hoà tan chậm hoặc ăn mòn dần trong đường tiêu hoá đóng vai trò là hàng rào làm chậm sự giải phóng dược chất ra

khỏi đường tiêu hoá

 Hệ cốt thân nước và cốt sơ nước ăn mòn

• Nguyên tắc cấu tạo: Phối hợp dược chất với một polymer thân nước hoặc với sáp hay chất béo, đóng vai trò như một cốt mang thuốc

• Cơ chế giải phóng dược chất: Sau khi uống, cốt sẽ hoà tan hoặc ăn mòn

từ từ trong đường tiêu hoá để kéo dài sự giải phóng dược chất Nguyên liệu tạo cốt thường dùng là các nguyên liệu có phân tử lượng lớn, trương nở và hoà tan trong nước như: alginat, gôm xanthan, HPMC [4], [5]

1.2.3.3 Về một số tá dược tạo cốt

chế, là tác nhân làm chậm giải phóng thuốc theo cơ chế khuếch tán, là nguyên liệu tạo cốt trơ khuếch tán EC có màu trắng hoặc trắng ngà, trơn chảy tốt, không vị [16]

trình giải phóng dược chất, tạo cốt trương nở và hoà tan trong nước GX có màu trắng hoặc kem, trơn chảy kém, không vị GX có ưu điểm: độ nhớt và khả năng tạo gel ở khoảng pH và nhiệt độ rộng (pH từ 3 – 12, nhiệt độ từ 10 -

600 C), tương đối trơ với các thành phần khác trong công thức, rẻ tiền, không độc, dễ kiếm [16]

các thuốc dùng đường uống và trong các công thức dược điển hình, là tá dược

tạo cốt trương nở và hoà tan trong nước HPMC không mùi, không vị, màu trắng hoặc kem Sự giải phóng dược chất từ cốt HPMC không bị ảnh hưởng bởi nồng độ các ion trong đường tiêu hoá [16]

1.3 MỘT SỐ NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ ACYCLOVIR

Rokhade A.P và cộng sự đã nghiên cứu bào chế vi cầu bằng phương pháp vi nhũ tương với chất mang là chitosan và sản phẩm đồng trùng hợp giữa acrylamide với dextran Sản phẩm đồng trùng hợp của dextran và acrylamide được điều chế bằng phương pháp đồng trùng hợp gốc tự do ở 60-

0

C trong 6h với xúc tác là muối ceri nitrat Dược chất được hoà tan trong dung dịch acid acetic 2% chứa chất đồng trùng hợp và chitosan Nhũ hoá dung dịch này với dầu pararfin có chứa 1% (w/w) span - 80 và khuấy với vận tốc 400 vòng/phút trong 10 phút tạo nhũ tương nước - dầu Thêm từ từ glutaraldehyd

và khuấy tiếp 2h Vi cầu tạo thành được lọc, rửa với n - hexan và sấy chân không 24h Tác giả đã khảo sát ảnh hưởng của các yếu tố đến một số đặc tính vật lý (kích thước, hình dạng, cấu trúc tiểu phân), khả năng trương nở và khả năng giải phóng dược chất của vi cầu Kết quả cho thấy khi tăng tỉ lệ polyme hoặc tỷ lệ dược chất đều làm tăng tốc độ giải phóng dược chất từ vi cầu Khi tăng lượng glutaraldehyd làm giảm tốc độ giải phóng dược chất Trong 2h đầu, dược chất giải phóng nhanh (20% - 40%), kéo dài 12h nhưng không giải phóng được 100% sau 12h [26]

Groning R và cộng sự nghiên cứu bào chế viên nén acyclovir TDKD

và sử dụng từ tính để kéo dài thời gian khu trú của thuốc trong dạ dày Tá dược được lựa chọn để kéo dài giải phóng là HPMC với hai tỷ lệ 10% và 15% Quá trình bào chế viên được tiến hành như sau: lõi nam châm được bao màng sáp carnauba bằng cách nhúng vào dung dịch sáp đun chảy, sau đó nén với hỗn hợp bột tạo thành 2 lớp: lớp trong và lớp ngoài Hỗn hợp bột tạo lớp trong gồm HPMC, magnesi stearat và 160 mg acyclovir Hỗn hợp bột tạo lớp

ngoài gồm HPMC, lactose, magnesi stearat và 40 mg acyclovir Nghiên cứu invitro cho thấy từ tính không làm ảnh hưởng đến sự giải phóng dược chất Khi sử dụng 10% HPMC ở lớp ngoài, 80% acyclovir giải phóng trong 5h, khi

sử dụng 15% HPMC, 80% acyclovir giải phóng trong 8h Dược chất giải phóng hết sau 12h ở cả hai trường hợp Viên nén chứa 10% HPMC được dùng để nghiên cứu invivo trên 5 người tình nguyện và đối chiếu với viên zovirax 200 mg Kết quả cho thấy dưới tác dụng của từ tính, diện tích dưới đường cong biểu diễn nồng độ dược chất trong huyết tương theo thời gian trong 24h thu được là 2082,7 ng.h/ml, còn nếu không sử dụng từ tính thì giá trị này là 1598,8 ng.h/ml Như vậy sử dụng từ tính để điều khiển thời gian khu trú của thuốc trong dạ dày có thể cải thiện mức độ hấp thu dược chất từ viên nén acyclovir TDKD [23]

Fuertes I và cộng sự đã nghiên cứu bào chế viên nén dạng cốt với tá dược HPMC K4M và đánh giá tính thấm của hệ cốt này Tác giả lựa chọn 5 tỉ

lệ dược chất khác nhau (60%, 70%, 80%, 90% và 95%) để dập viên với HPMC K4M mà không sử dụng tá dược độn nào khác Viên nén được dập với hàm lượng 500 mg, đường kính 12 mm Kết quả cho thấy tỉ lệ tá dược trong viên tăng làm giảm tốc độ giải phóng dược chất Khi tỉ lệ HPMC trên 10% (w/w) có thể kéo dài giải phóng dược chất Với tỉ lệ HPMC 10% dược chất giải phóng được 50% sau 5h, với tỉ lệ HPMC 5% dược chất giải phóng được 100% sau 5h Tác giả đã chứng minh được sự khác biệt rõ rệt của tốc độ giải phóng dược chất và khả năng thấm ẩm của viên chứa 90% và 95% acyclovir,

từ đó xác định được ngưỡng tính thấm của tá dược Với kết quả này có thể rút ngắn được thời gian khảo sát để bào chế hệ cốt acyclovir TDKD dựa trên ngưỡng tính thấm của tá dược [22]

Degim Tuncer và cộng sự đã bào chế viên nén kết dính niêm mạc miệng để điều trị nhiễm trùng tại miệng do herpes simplex gây ra với các

thành phần: Carbopol 934 (C - 934), Polycarbophil (PC) và Sodium Taurocholat (ST) Kết quả nghiên cứu cho thấy độ tan và giá trị log của hệ số phân bố octanol/nước của acyclovir thay đổi theo theo pH Các giá trị này thay đổi theo xu hướng giống nhau trong khoảng pH từ 2,2 đến 7,4 Đánh giá ảnh hưởng của các thành phần trong công thức viên nén cho kết quả:

mạc, ngược lại khả năng này giảm khi tăng lượng PC

- Việc thêm ST vào công thức có hiệu quả làm tăng sự hấp thu của acyclovir qua niêm mạc Qua khảo sát khả năng hoà tan dược chất từ viên nén trong môi trường dịch nước bọt nhân tạo, công thức thích hợp nhất cho các thử nghiệm tiếp theo là: C - 934 (64,4%), PC (34,4%), ST (0,8%) Viên nén giải phóng theo công thức này giải phóng dược chất theo mô hình động học bậc không với tốc độ 9,708 mg/h, thời gian dược chất giải phóng được 6h Tác giả cũng đã xây dựng được một mô hình động học để phân tích, dự đoán quá trình hấp thu của acyclovir trên chó thử nghiệm Mô hình này có thể được

áp dụng để mô phỏng quá trình động học của thuốc trong cơ thể con người [20]

Cheu SJ và cộng sự đã bào chế vi nang acyclovir TDKD bằng phương pháp bốc hơi dung môi từ nhũ tương với chất mang EC, dung môi hoà tan là dicloromethan Tác giả đã nghiên cứu ảnh hưởng của một số yếu tố đến khả năng giải phóng dược chất từ vi nang như: độ nhớt của EC (45cps, 100cps), tỷ

lệ EC/ACV (1/1,2/1) tỷ lệ dicloromethan/EC (15/1,20/1) cho kết quả như sau:

- Độ nhớt của EC tăng thì khả năng giải phóng dược chất tăng

- Tỷ lệ EC/ACV tăng, khả năng giải phóng dược chất giảm

- Tỷ lệ dicloromethan /EC tăng, khả năng giải phóng dược chất tăng [19] Nguyễn Thị Hồng cũng đã tiến hành nghiên cứu bào chế vi nang acyclovir với chất mang EC bằng phương pháp bốc hơi dung môi từ nhũ

tương, dung môi hoà tan là diclomethan Aerosil được thêm vào để chống dính giữa các vi nang và chống bám dính vào cánh khuấy Nghiên cứu ảnh hưởng của các yếu tố: Tỷ lệ ACV/EC, thể tích dicloromethan, % aerosil đến hiệu suất tạo vi nang, tỷ lệ vi nang hoá và khả năng giải phóng dược chất cho thấy: tỷ lệ vi nang hoá và khả năng giải phóng dược chất tăng khi tăng tỷ lệ ACV/EC nhưng hiệu suất lại giảm; thêm aerosil làm tăng tỷ lệ giải phóng dược chất nhưng ảnh hưởng khá phức tạp đến tỷ lệ vi nang hoá và hiệu suất tạo vi nang; tăng thể tích dicloromethan làm giảm tỷ lệ dược chất được vi nang hoá, hiệu suất tạo vi nang và tỷ lệ giải phóng dược chất [9]

Lê Hoàng Anh đã bào chế vi cầu nổi acyclovir TDKD với chất mang là hỗn hợp hai polyme EC và Eudragit L100, đồng thời nghiên cứu ảnh hưởng của một số yếu tố trong công thức đến một số đặc tính của vi cầu Nhận thấy, khi tăng tỷ lệ EC - Eudragit làm chậm giải phóng dược chất và tăng các giá trị như: hiệu suất tạo vi cầu, tỷ lệ dược chất được vi cầu hoá và tỷ lệ vi cầu nổi sau 6 h Tăng tỷ lệ aerosil làm tăng khả năng giải phóng dược chất, giảm hiệu suất và tỷ lệ ACV được vi cầu hoá nhưng không ảnh hưởng đến khả năng nổi Qua nghiên cứu tác giả đưa ra công thức tối ưu để bào chế vi cầu acyclovir TDKD 12 h [1]

Dương Ngọc Ngà đã nghiên cứu viên nang chứa hạt bao acyclovir TDKD, hạt bao acyclovir được bào chế bằng phương pháp tạo hạt ướt và xát hạt qua rây Tá dược độn sử dụng là avicel 20% (w/w), tá dược dính là hỗn hợp polyvinyl alcohol (PVA) 5% và polyvinyl pyrolidon (PVP) 10% trong nước Hạt sau khi bào chế được bao bằng dung dịch PVA 3% trong máy tầng sôi nhằm tạo bề mặt thích hợp cho bao TDKD Hạt bao xong cần thời gian để

ổn định màng Kết quả cho thấy, thời gian ổn định màng khác nhau thì khả năng giải phóng dược từ màng bao khác nhau Qua nghiên cứu ảnh hưởng của

4 yếu tố: lượng EC, lượng PVP, lượng magnesi stearat, loại chất hoá dẻo và

lượng chất hoá dẻo: triethyl citrat (TEC) boặc dibutyl phtalat (DBP), cho thấy

EC là nhân tố chính đóng vai trò kiểm soát quá trình giải phóng Tăng lượng

EC làm chậm tốc độ giải phóng từ hạt bao, PVP đóng vai trò tạo kênh khuếch tán làm tăng tốc độ giải phóng dược chất Lượng chất hoá dẻo và magnesi stearat cũng có ảnh hưởng đến khả năng giải phóng dược chất từ hạt bao Sử dụng DBP dược chất giải phóng chậm hơn so với TEC [11]

Ngô Thị Thu Hằng nghiên cứu bào chế viên nang acyclovir TDKD chứa hạt bao ACV bằng phương pháp đun chảy với poly ethyllen glycol

đến khả năng giải phóng dược chất Trong đó EC là nhân tố chính ảnh hưởng đến khả năng giải phóng dược chất, EC tăng làm chậm tốc độ giải phóng dược chất Sử dụng TEC làm chất hoá dẻo để làm tăng tốc độ giải phóng dược chất còn dibutyl phtalat (DBP) làm chậm tốc độ giải phóng dược chất Talc và titan dioxyd ảnh hưởng không nhiều đến tốc độ giải phóng dược chất [8]

An Thị Vui đã nghiên cứu bào chế viên nén acyclovir TDKD từ hệ cốt

sơ nước ăn mòn Thành phần gồm: acyclovir, sáp carnauba, alcolcetostearylic, lactose, avicel Viên nén được bào chế bằng phương pháp xát hạt ướt: acyclovir và lactose nghiền mịn rồi trộn theo nguyên tắc trộn đồng lượng; sáp

carnauba, alcolcetostearylic đun chảy cách thuỷ cho đến khi tạo thành hỗn

hợp lỏng đồng nhất; thêm hỗn hợp bột kép vào trộn đều rồi xát hạt qua rây 0,8mm Sáp carnauba đóng vai trò là tá dược tạo cốt ăn mòn [14]

Nguyễn Thị Trang nghiên cứu bào chế hỗn dịch uống acyclovir Sử dụng natri cacboxy methyl cellulose (NaCMC) và gôm xanthan là chất có khả năng ổn định hỗn dịch acyclovir HPMC, PVP K30, gôm arabic, natri alginat không có khả năng ổn định hỗn dịch acyclovir Mức độ ảnh hưởng của pH đến độ ổn định hoá học của acyclovir trong hỗn dịch là không đáng kể Mức

độ giải phóng của ACV sau 4h từ hỗn dịch sử dụng gôm xanthan cao nhất ở

pH 6,0; hỗn dịch sử dụng NaCMC đạt cao nhất ở pH 4,0 và pH 5,0 [15]

1.4.1 Phương pháp quang phổ

bằng phương pháp quang phổ hấp thụ khả kiến [27]

Phương pháp tiến hành như sau:

- Thuốc thử: 3 - methylbenzothiazolin - 2 - one hydrazone (MBTH), dung dịch FeCl3.6H2O

định mức 50 ml, thêm nước cất vừa đủ, lắc đều

Xây dựng đường cong định lượng (đường chuẩn của dung dịch ACV): Lấy 1ml dung dịch MBTH cho vào bình định mức 10 ml Một thể tích đã được tính toán trước của dung dịch ACV chuẩn được thêm vào các bình để được các nồng độ nằm trong khoảng 20 - 200 μg/ml, sau đó cho thêm 1 ml FeCl3 Dung dịch được lắc siêu âm 20 phút sau đó lắc đều Điều chỉnh thể tích đến vạch bằng nước cất Đo độ hấp thụ ở bước sóng 616 nm, mẫu trắng là các mẫu chứa thuốc thử không chứa ACV Từ kết quả thu được, vẽ đường cong định lượng biểu thị mối quan hệ giữa độ hấp thụ và nồng độ ACV hoặc suy ra phương trình hồi quy

bột viên tương ứng khoảng 25 mg ACV vào bình định mức 50 ml, lắc đều,

siêu âm trong 15 phút Điều chỉnh thể tích đến vạch bằng nước cất, lắc đều, lọc Tiến hành tiếp theo như mô tả ở phần xây dựng đường chuẩn

UV để định lượng ACV trong viên nén [29]

Mục đích của nghiên cứu là cải tiến tính đơn giản, nhanh, chính xác, và

độ tin cậy của phương pháp quang phổ trong xác định hàm lượng ACV bằng phương pháp quang phổ hấp thụ tử ngoại (UV) Cực đại hấp thụ của ACV trong môi trường nước cất là 253 nm và tại đây tuân theo định luật Beer ở nồng độ khoảng 2 - 20 μg/ml

Sử dụng máy quang phổ UV - 1700 Shimadzu với cuvet 1cm được sử dụng để đo dung dịch chuẩn có nồng độ 100 μg/ml được pha trong nước cất Dung dịch thử được tiến hành như sau: cân 20 viên acyclovir, tính khối lượng trung bình viên, nghiền mịn Cân một lượng bột tương ứng khoảng 10 mg ACV cho vào bình định mức 100 ml, lắc siêu âm 20 phút, điều chỉnh thể tích đến vạch bằng nước cất

Để xây dựng đường chuẩn ACV trong môi trường nước cất: pha 1 dãy dung dịch có nồng độ từ 2 - 20 μg/ml từ dung dịch chuẩn, đo độ hấp thụ ở bước sóng 253 nm Từ kết quả thu được vẽ được đường chuẩn và rút ra được phương trình hồi quy Tương tự đối với dung dịch thử Phương pháp này được cho là đơn giản hơn cả

- Pha động: Hỗn hợp acetonitril : đệm amonium acetat pH 4,5 (40 : 60)

- Môi trường thử: : Hỗn hợp acetonitril : nước (40 : 60)

trường thử để pha loãng

- Tốc độ dòng 0,8 ml/phút

- Thể tích tiêm: 20 μl

Kết quả: Sử dụng cột ODS pha đảo cho thời gian lưu của ACV khoảng

3 phút và tổng thời gian phân tích hơn 5 phút

thời ACV và tạp chính của nó là guanine trong các chế phẩm bào chế Sử

nhiệt độ cột 250

hành chạy sắc ký với các điều kiện như trên, thể tích tiêm mẫu là 20 μl, tốc độ dòng 2,0 ml/phút Kết quả: thời gian lưu của guanine là 1,25 phút; thời gian

lưu của acyclovir là 3,51 phút [25]

Tối ưu hoá công thức là cơ sở để thành lập cũng như thẩm định trước một quy trình sản xuất mới [7]

1.5.1 Các phương pháp tối ưu hoá

Hai phương pháp tối ưu thường được sử dụng là dựa trên hàm mục tiêu bậc hai (phương pháp truyền thống) và dựa trên mạng thần kinh nhân tạo (phương pháp thông minh)

• Tối ưu hoá dựa trên hàm mục tiêu bậc hai: Phương pháp này gồm các

bước cơ bản sau:

- Xác định biến đầu ra (biến phụ thuộc) cần tối ưu hoá

- Xác định biến đầu vào (biến độc lập) ảnh hưởng đến yếu tố đầu ra Thiết kế thí nghiệm nhằm phân tích ảnh hưởng của các biến độc lập lên biến phụ thuộc

- Từ kết quả thí nghiệm, xây dựng các phương trình hồi quy dạng đa thức bậc hai biểu diễn quan hệ giữa các biến độc lập và biến phụ thuộc

đa thức bậc hai để tìm ra giá trị tối ưu của các biến độc lập

- Làm thí nghiệm theo giá trị các biến độc lập vừa tìm được

- Chọn công thức tối ưu

• Tối ưu hoá dựa trên mạng thần kinh nhân tạo: Sự vận hành của mạng

thần kinh nhân tạo (ANN) dựa trên sự mô phỏng quá trình sinh học diễn ra trong bộ não người ANN rất hữu ích đối với những mô hình hệ thống mà ở

đó mối quan hệ giữa các biến độc lập và biến phụ thuộc là rất phức tạp khi mà phương trình hồi quy dạng đa thức bậc hai không mô tả đầy đủ mối quan hệ này Các bước cơ bản của quá trình:

- Bào chế các công thức dựa trên thiết kế thí nghiệm

- Phân tích mặt đáp của mỗi biến phụ thuộc

- Làm thí nghiệm theo các giá trị tối ưu của các biến độc lập

- Chọn công thức tối ưu [7]

1.5.2 So sánh các phương pháp tối ưu hoá

• Tối ưu hoá dựa trên hàm mục tiêu bậc hai

- Không đáp ứng với nhiều biến độc lập, đòi hỏi có mô hình toán học

- Không phù hợp với các dữ liệu phức tạp

liệu phức tạp

• Tối ưu hoá dựa trên mạng thần kinh nhân tạo: Khắc phục được các

nhược điểm trên Tuy nhiên, ANN không thích hợp cho các vấn đề đòi hỏi về thao tác đối với ký hiệu và bộ nhớ [7]

CHƯƠNG 2 ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

2.1 NGUYÊN LIỆU

Bảng 2.1 Nguồn gốc và tiêu chuẩn chất lượng của các nguyên liệu

Tên nguyên liệu Nguồn gốc Tiêu chuẩn

Hydroxypropylmethylcellulose

- Cân xác định độ ẩm Satorius MA30 (Đức)

2.3 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

2.3.1 Phương pháp xây dựng đường chuẩn

• Phương pháp đo quang trong môi trường HCl 0,1N

- Cách tiến hành: cân chính xác khoảng 100 mg acyclovir, hoà tan trong bình định mức 100 ml bằng dung dịch HCl 0,1 N Từ dung dịch này pha loãng thành các dung dịch có nồng độ 4, 8, 10, 12, 16 μg/ml Đo quang ở bước sóng 255 nm Mẫu trắng là dung dịch HCl 0,1N

vẽ đồ thị biểu thị sự tương quan giữa mật độ quang và nồng độ dược chất

• Phương pháp đo quang trong môi trường nước cất

trong bình định mức 100 ml bằng nước cất, thêm nước cất vừa đủ đến vạch, lắc đều, pha loãng dung dịch đến các dung dịch có nồng độ 4, 6, 8, 10, 12 μg/ml, đo quang ở bước sóng 252 nm, mẫu trắng là nước cất

vẽ đồ thị biểu thị sự tương quan giữa mật độ quang và nồng độ dược chất

• Phương pháp HPLC

- Điều kiện chạy sắc ký:

Cột C18 Pha động: acid acetic 0,02 M Tốc độ dòng 1,5 ml/phút Detector UV 254 nm Thể tích tiêm mẫu: 20 μl

- Dung dịch tiêm mẫu: Cân chính xác khoảng 100 mg acyclovir trong bình định mức 100 ml, thêm khoảng 60 ml nước cất, siêu âm 15 phút, thêm nước cất vừa đủ, lắc đều (được dung dịch 1000 μg/ml) Hút 10 ml dung dịch này pha loãng thành 100ml bằng nước cất (được dung dịch 100 μg/ml) Lấy dung dịch này làm gốc, pha loãng thành các dung dịch có nồng độ 10; 20; 50; 100; 150 μg/ml

Từ kết quả thu được, xây dựng phương trình hồi quy thực nghiệm, vẽ

đồ thị biểu thị sự tương quan giữa diện tích pic và nồng độ dược chất

- Thêm ethanol 800vào khối bột, nhào ẩm

- Xát hạt qua rây 1mm, sấy se ở nhiệt độ 50-550

C khoảng 15 phút

- Sửa hạt qua rây 1mm, sấy ở nhiệt độ 50 - 550 C đến khi độ ẩm của hạt nhỏ hơn 3%

- Trộn tá dược trơn theo tỉ lệ khảo sát

- Dập viên với bộ chày cối Ф=12mm, khối lượng viên trung bình 500mg, hàm lượng acyclovir 200mg

2.3.3 Phương pháp đánh giá một số chỉ tiêu chất lượng viên

• Phương pháp đánh giá khả năng giải phóng

phóng sau mỗi giờ, với các thông số sau:

Máy cánh khuấy Nhiệt độ môi trường thử 37 ± 0,50

C

Môi trường thử: 900 ml nước cất Tốc độ khuấy: 100 vòng / phút

- Các bước tiến hành:

 Sau mỗi thời điểm 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 h hút 5 ml môi trường thử, lọc qua giấy lọc, bổ sung lại 5 ml nước cất vào các cốc thử Hút 1 ml dịch lọc pha loãng vừa đủ bằng nước cất trong bình định mức 25 ml

 Pha dung dịch chuẩn có nồng độ 10 μg/ml,

 Mẫu thử và mẫu chuẩn được đo quang ở bước sóng 252 nm, mẫu trắng là nước cất

 Công thức tính hàm lượng dược chất giải phóng trong viên:

Hlv (%) =

2 , 0 100

% 100 900

x x xP D

x xm xHlcx xP D

t c

tbv c

t

Trong đó:

Dt, Dc lần lượt là mật độ quang của mẫu thử và mẫu chuẩn

Pc là khối lượng mẫu chuẩn (g)

Hlc là hàm lượng mẫu chuẩn (%)

mtbv là khối lượng viên trung bình (g)

Pt là khối lượng mẫu thử (g)

• Phương pháp đánh giá lực gây vỡ viên

Thử trên máy thử độ cứng ERWEKA, thử 10 viên, lấy giá trị trung bình

• Phương pháp đánh giá độ bở, độ mài mòn của viên

- Lấy một số lượng viên tương ứng khoảng 6,5g; sàng loại bột dính ở viên Cân chính xác khối lượng số viên đã lấy (M1), chuyển vào trống, cho trống quay 100 vòng Lấy viên ra, đem rây để loại bột bị mất đi từ viên trong quá trình trống quay, đem cân lại khối lượng số viên vừa lấy ra (M2)

- Công thức tính kết quả:

Độ bở (độ mài mòn) =

1

2

1 ) 100 % (

M

x M

• Phương pháp đánh giá độ đồng đều khối lượng

từng viên

so với khối lượng trung bình [2]

• Phương pháp định lượng

Xác định hàm lượng của viên theo 2 phương pháp [18]

 Pha mẫu thử: Cân 20 viên, xác định khối lượng trung bình viên, nghiền mịn trong cối sứ Cân khối lượng bột viên tương ứng khoảng 0,1 g acyclovir trong bình định mức 100 ml Hoà tan trong khoảng 60 ml dung dịch HCl 0,1N; siêu âm 15 phút, thêm dung dịch HCl 0,1N vừa đủ, lắc đều, lọc

0,1N

 Pha mẫu chuẩn: Cân chính xác khoảng 0,1g chuẩn acyclovir trong bình định mức 100 ml; thêm 60 ml HCl 0,1N; siêu âm 15 phút; thêm vừa đủ bằng dung dịch HCl 0,1N, lắc đều Hút 1 ml dung dịch này vào bình định mức 100 ml; thêm dung dịch HCl 0,1N vừa đủ

 Mẫu thử và mẫu chuẩn được đo quang tại bước sóng 255 nm, mẫu trắng là dung dịch HCl 0,1 N

 Công thức tính: Hl (%) =

2 , 0

% 100

x xP D

x xHlcxm xP

D

t c

tbv c

t

Trong đó:

- Dt; Dc lần lượt là mật độ quang của dung dịch thử và dung dịch chuẩn