Nghiên cứu sơ bộ thành phần hóa học của lá cây chè vằng

Bễ Y Tẫ TRlTễNG DAI HOC DUĩC H NễI NGUYấN THI KIM THOAN NGHIấN ClJfU SO Bễ THNH PHAN HO HOC CA L CY CHẩ VNG (K H O L U AN T ễ T N G I I I ấ P DLT0C S K I I O A 1998-2003) Nguoi huforng dõn : PGS.TS. B ởT h i Thuõn DS. Nguyờn Qunh Chi Noi thirc hiờn : Bụ mon Duac lieu Thoi gian thirc hiờn : 3/2003- H NễI, 5/2003 fV9 ^ J i d ( c A n (J q i Tụi xin by tụ su kmh v long biờt on sõu sõc toi: PGS.TS.Be Th| Thuõn DS. Nguyờn Qunh Chi L nhỹng nguụi thy dõ tõn tợnh huụng dõn v giỹp dụ tụi quõ trinh lm de ti ny. Tụi xin trõn cõm on cõc thy giõo, cụ giõo, cõc cụ k thuõt viờn bụ mon Diroc lieu. Cac cõn bụ phong thf nghiờm trung tõm, thu viờn trucmg dai hoc Duoc H Nụi dõ giỹp dụ v tao diộu kiờn thuõn loi de tụi hon thnh khoõ luõn ny. Cuụi cựng tụi xin cõm on gia dùnh, ban bố nhựng nguụi dõ khuyộn khich dụng viờn v giỹp dụ tụi hoc tõp cỹng nhu cuục sụng. H nụi, ngy 16 thõng nam 2003 Sinh viờn : Nguyờn Thi Kim Thoan MTJC LUC DAT VAN VAN D E . PHN I :TễNG QUAN I. Mot so hieu biờt vờ chi Jasminum v cõy chố v n g 1. Vi nột vờ chi jasm inum 2. Cõy chố vng . . .Bac diởm hinh thõi 2.2.Phõn b o 2.3.Bễ phõn dựng, thu hõi v chộ bien 2.4.Thnh phn hoõ hoc . .5 .Tac dung v cụng dung II.Tụm tõt phirong phõp hoõ hoc cõy th u o c . 1.Tụm tõt phuomg phõp hoõ hoc cõy th u o c 1.1.Dinh tfnh .2 .Dinh luong nhụm chõ't chinh . 1.3.Chiột xuõ't . 1.4.Phõn lõ p .' . 1.5.Nhõn d a n g 2. Tụm tõt phucmg phõp hoõ hoc flavonoid cõy thuoc 2.1.Dinh tfnh sa b ụ . 2.2.Dinh luang 2.3.Chiột xuõ't . 2.4.Phõn lõp v tinh c h e . PHAN II: THITC NGHIấM V KET QU . . Nguyờn lieu v phircfng phõp thirc nghiờm 2.1.1.Nguyờn lieu 2.1.2.Phuang phõp thuc nghiờm 2.2.Ket quõ thirc nghiờm 2.2.1.Dinh tfnh cõc nhụm chat lõ chố võng bõng phõn ung hoõ hoc . .2 .2 .Chiờ't xuõ't, dinh tfnh flavonoid lõ chố võng bõng sõc k g iõ y .2 .3.Phõn lõp, phõn tfch v nhõn dang flavonoid . 2.3.Bn luõn PHAN III. KấT LUN V DE XUAT TI LIEU THAM KHO .1 2 3 4 7 7 8 9 9 10 12 12 12 12 14 14 20 24 30 31 BT VAN DE Trong quõ trợnh sinh ton v phõt triởn, nguụi dõ biột sir dung nhiờu loai cõy cụ de phụng v chỹa bờnh. Tuy nhiờn cụ rat nhiờu cõy thuục mụi chù duoc su dung theo kinh nghiờm dõn gian m chua cụ co sụ khoa hoc nht dinh. Viờc kột hop giỹa kinh nghiờm chỹa bờnh cỹa nhõn dõn vụi nhựng nghiờn cỹu khoa hoc sờ tựng buục giỹp cho viờc su dung cõy cụ dựng lm thuục mot cõch hop l, an ton v hiờu quõ hon. L mot cõy thuục thuục chi Jasminum, chố võng dõ duoc su dung tự lõu dõn gian vụi cụng dung chu yộu l chụng nhiởm trựng. Thuụng dựng cho phu nỹ sau sinh, chỹa kinh nguyờt khụng dộu, thõ'y kinh dau bung, dõp tri ' 9, ^ v sung vỹ v tõm tri mun nhot, mõn ngỹa.O mot sụ dia phuong cõy chố võng duoc dựng thay chố uụng hng ngy. Dõ cụ mot sụ cụng trợnh nghiờn cỹn vờ tac dung duoc l cỹa cõy chố võng, song vờ thnh phn hoõ hoc v moi tuong quan giỹa thnh phn hoõ hoc vụi tac dung duỗfc l cho dờn võn cụn ft ti lieu nuục v nuục ngoi dờ cõp dộn. Vụi mong muụn hoc tõp vờ phuong phõp nghiờn cỹu thnh phn hoõ hoc cõy thuục, cỹng nhu dộ cụ thờm nhỹng co sụ khoa hoc cho viờc su dung cõy chố vang lm thuục phụng v chỹa bờnh , chỹng tụi tiờn hnh dờ ti: Nghiờn cỹru so bụ thnh phn hụa hoc cỹa la chố võng vụi cõc mue tiờu: > Dinh trnh so bụ mot sụ hop chat tu nhiờn lõ. > Chiờ't xuõt, phõn lõp v du doõn cõu trỹc chõ't phõn lõp duoc. PHN I TễNG QUAN TI LIEU I. MOT Sễ HIEU BIấT VE CHIJASMINUM V CY CHẩ VNG: 1. Vi nột vờ chi Jasminum: Thộo Dirac diởn Viờt Nam in lan thỹr nhõt tõp II [3] chố vng l la phcfi hay sõy khụ cỹa cõy chố vng (Jasminum subtriplinerve Blume), ho Nhi(Oleaceae). Dac diởm thirc võt: chi Jasminum l mot 25 chi thuục ho Oleaceae, bụ Oleales, Phõn lụp Asteridae, ngnh hat km Angrospermae. Vụi khoõng hỹn 200 loi [13].ễ Viờt Nam, ho Nhi (Oleaeceae) cụ chi vụi 60 loi [5], Chi Jasminum gụm nhỷng cõy nhụ hoc nhụ, leo. La moc dụi khụng cụ la kốm. Hoa luụng tmh cụ la bõc v la bõc xộp thnh xim ụ nõch la hay ngon. Bao hoa mõu 5-6 khai van. Bụ nhi giõm cụn drnh ụ trng. Bõu trờn A/ ụ. Quõ mong. Chi Jasminum dirỗfc phõn bụ nhiộu cõc nirục nhiờt dụi nhiù An dụ, Trung Quục, Mien diờn, Xrilanca, Malaixia [9]. Thnh phõn hoa hoc:Tựr la cỹa cõy Jasminum primulinum ngirụi ta xõc dinh diroc mot glycosid l jasmin(C26H380 12)[9,13]. Trong Jasminum officinale cụ tinh du:benzyl acetat (C9 H O2), linalul (C H lgO), jasmon (CuH lụO) v metyl atranilat (CgHgOjN). Ngoi cụn cụ jasmin.Trong la Jasminum grandiflorum cụ chat nhira, acid salisilic v jasminin. Trong cõy Jasminum sp. cụ glycosid dõng [9]. Mot sụ loi thuục chi Jasminum duoc dựng lm thuục theo kinh nghiờm dõn gian (Bõng 1): Bõng :Nhựng cõy thuoc thuục chi Jasminum duac su dung theo kinh nghiờm dõn gian. STT Tờn cõy Tờn Viờt Nam Tờn latin Bụ phõn dựng Ti lieu tham khõo Lõ [4;6;10;11] Gõy non, Hoa [4] giõi dục. Rờ Cụng dung Dựng cho J .subtriplinerve Chố võng phu nỹ s au sinh Nhi nhiờu J .multiflorum hoa tõng tiờ't sựa JJanceaolairum Nhi thon J.scandens Nhi leo J.sambac Nhi J.funale Nhi dõy Chỷa phong thõp Tri nam toc Hoa [9;10] Cõ cõy [4] Rờ [4] Hoa, Lõ [4] Thõn [4] Ha sot, tri mun nhot Ha sot 2. Cõy chố vng 2.1. Dac diờm hinh thõi Chố vng goi l chố man cuục, dõy cõm võn, cõy dõm trng Tờn khoa hoc : Jasminum subtriplinerve Blume, ho Nhi ( Oleaceae) Chố vng l loai cõy nhụ, moc thnh bui b ro hay bui tre hoõc bõm vo cõc cõy 1cm. Thõn cõy cỷng, chia thnh tựng dot, ducmg kmh 5-6mm, chia thnh nhiờu cnh, cụ thờ vuan cao tụi - ,5m v vuan di tụi 15-20m, thõn v cnh dờu nhõn. Lõ moc doi hinh mỷi mõc, phia cuụng tự hay hai trụn, du lõ nhon, di 4-7,5cm, rụng 2-4,5cm. Nhỹng lõ phia trờn nhụ hcfn lõ phia duụi, mộp nguyờn trờn cụ gõn rụ rờt. Cuụng lõ nhõn, di 3-12mm. Hoa moc thnh xim nhiờu hoa (chựng7-9 hoa ) cõnh hoa mu trng. Quõ hinh cu, duụng kmh 7-8 mm. Khi chrn thợ co mu vng, quõ cụ mot hat rõn chc. Mựa quõ chm tự thõng dộn thõnglO nõm [11] (õnh 1). v Anh : Cõy chố vng Jasminum subtriplinerve Blume, ho Nhi (Oleaeceae) 2.2. Phõn bo: ễ nuục ta chố vng l cõy moc hoang v duoc mot so noi nhu Lo Cai, Ho Bợnh, Vợnh Phỹ, Quõng Ninh, H Nụi, Ninh Bợnh, Thanh Hoõ, Nghờ An qua Thựfa Thiờn Huộ, Quõng Nam, D Nõng tụi Khõnh Ho [4]. 2.3. Bụ phõn dựng, thu hõi v chờ bien: Thộo cõc ti lieu [3;4;10;11] bụ phõn dựng cỹa chố vng l lõ nhung cỹng cụ ti lieu ghi sir dung cõ thõn v lõ[6;9] . Cụn dõn gian nguụi ta võn dựng cõ thõn v lõ cỹa cõy chố vng phoi khụ de dun nuục uụng thay chố. Duoc lieu cụ thộ thu hõi quanh nõm dựng tuoi hoõc khụ. 2.4. Thnh phn hoõ hoc: Cho dộn mot sụ ti lieu cụ dờ cõp dộn su cụ mõt cỹa alcaloid, flavonoid v chat nhua lõ chố vng [4;9]. Trong cụng trợnh nghiờn ciru cỹa mợnh, Nguyờn Thi Ninh Hõi [9] dõ tiộn hnh tõch phõn doan cõc hop chat bng cõc dung mụi cụ dụ phõn eue khõc tir cao cụn 90 cỹa thõn v lõ cõy chố vng. Dira vo kột quõ cỹa phuong phõp sõc k dụi vụi timg phõn doan thu duoc, tac giõ dõ scf bụ xõc dinh cao cụn 90u cỹa chố vng cụ cõc dõn xuõ't terpen, nhira, lignin. glycosid dõng, flavonoid v alcaloid. Tuy nhiờn kột quõ ny duoc dua hoõn ton chợ dua trờn mu sõc cõc cỹa vờt chat sau phun thuục thỹ hiờn mu, kột hop vụi cõc kột quõ nghiờn ctfu trờn thộ giụi vờ mõt hoa hoc cỹa mot sụ loi khõc thuục chi Jasminum. Nhu võy cụ nghùa l nhỷng kột quõ nghiờn cỹru vờ thnh phõn hoa hoc cỹa Jasminum subtriplinerve Blume ghi ti liờu[9] mụi chợ de cõp rat so bụ v mang trnh chat du doõn vờ cõc nhụm chat cụ thõn v la cỹa cõy m thụi. 2.5. Tõc dung v cụng dung: 2.5.1. Mot so k ột quõ nghiờn cỹu vờ tõc dung sinh hoc cỹa chố vng: Tõc dung khõng khuan: Bờnh viờn Thõi Bợnh dõ lm khõng sinh dụ cỹa dich chiột chố vng so sõnh vụi cõc thuục khõng sinh penicillin, streptomycin, clorocid v sulfamid, thõy chờ' pham chố vng cụ tõc dung khõng khuan manh hon cõc thuục trờn dụi vụi tu cu v liờn cu khuan tan huyột [ 1 ] Bng phuong phõp khuyộch tan dựng khoanh giõy trờn mụi truụng thach, chố võng cụ tõc dung manh dụi vụi: Staphylococcus aureus, Streptococcus haemolyticus, Shigella shigap, Shigella dysenteriae, Samonella typhi, tõc dung yờu vụi Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli, Shigella sonnai. Trong dụ thõy tõc dung khõng khuan cỹa cao nuục manh hon cao cụn, dich chiột la cụ tõc dung manh hon dich chiột thõn v rờ[9]. Ngoi chố võng cụn cụ tõc dung khõng vi khuan Entamoeba moshkoskii[12]. Chố võng lm giõm co bụp tỹ cung cụ lõp trờn chuụt cụng trõng tuong tu papaverin[9]. Chố vng cụ tõc dung thỹc dõy quõ trợnh hn gõn vờt thuỹng trờn da dụng võt thi nghiờm. Dang cao cụn 90 cỹa chố vng cụ tõc dung bõo vờ niờm mac da dy chụng lai cõc yộu to gõy loột ỷ trờ dich vi, thnh mach bi hu hai, thiộu mõu[9]. Mot so tac dung khõc cỹa chố vng: Chố vng cụ tac dung chụ'ng viờm cõp trờn cõc mụ hinh gõy viờm cõp bng kaolin, carragenin v serotonin. Doi vụi viờm man, chố vng cụ tac dung mire dụ vira. Ngoi chố vng cụn lm tõng dich mõt[9]. Cõc nghiờn ciru vộ dục tfnh cõp v mn cho thõy chố vng ft dục[9]. Nhung khụng dựng cho phu nỹ cụ thai[6 ]. 2.5.2. Cụng dung theo kinh nghiờm dõn gian v mot sobi thuoc: Thộo Y hoc co truyộn, lõ chố vng cụ vi dng hai chat, tmh õm, qui vo hai kinh tõm v t, vụi cụng nng khu phong, hoat huyờt, dieu kinh, tiờu viờm, trự mỹ v bd dng[3;4].Chố vng duac dựng cho phu nỹ sau sinh de phong v chỷa nhiởm trựng, sot cao, chỷa kinh nguyờt khụng dờu, thõy kinh dau bung, viờm hach bach huyờt, viờm tu cung v viờm tuyộn sỹa, chỷa phong thõp, dau nhirc cõc chi v khop xuang, chỷa ghố la, choc dõu, cõc bờnh ngoi da[3;4;6;8; 10; 11]. Liờu dựng 40-100g tuai hoõc 20-30g khụ/ngy, sc uong hoõc dựng ngoi. Mot so bi thuoc: > Bi thuoc chỷa kinh nguyờt khụng dờu, bờ kinh dau bung [6 ] Chố vng ^ 20g Ich mõu 16g Hy thiờm 16g Ngõi curu g Bach dụng nự g Nuục 500ml. Sc cụn 300ml, chia lõn uong ngy. > Phu nự sau sinh cõm sot, sung hong hay luụi viờm la, nụng khõt, tõc tia sỹa hay ft sỹa, dựng lõ cõy ba chac, chố vng mụi thu* 30g sc uụng[8 ]. > Dựng lõ chố vng chựa õp xe vu [11]: Lõ chố vng giõ nõt, dõp hoc giõ lõ vụi cụn 50 roi dõp võo chụ sung dau, ngy ln, dờm ln.Thụi gian dieu tri l ngy hoc tun, tu theo bờnh nõng, nhe v chựa sụm hay muụn. II. TễM TT PHĩONG PHP NGHIấN CĩU HOA HOC CY THUOC [1;7;14] 1. Tụm tõt phuong phõp nghiờn curu hụa hoc cõy thuục 1.1. Dinh tinh: Dinh tmh cõc nhụm chat hựu co bng cõc phõn ựng hoõ hoc dộ xõc dinh duoc bụ phõn no cỹa cõy cụ nhỷng nhụm chat gợ. Sau dụ dinh tmh bng sõc k lụp mụng hoc sõc k giõy dờ? xõc dinh nhụm chat dụ cụ bao nhiờu vờt chat v vờt chat no cụ dụ dõm cao, de tir dụ cụ huụng viờc chiột xuõt v phõn lõp. 1.2. Dinh litỗrng nhụm chat chinh: Dõy l van dộ quan trong, nụ giỹp xõc dinh bụ phõn no cỹa cõy cụ hm luong chat dụ cao nhõt v hm luong dụ cao nhõt vo thụi diởm no nõm dộ tự dụ cụ kộ hoach thu hõi phự hop. 1.3. Chiột xuõt: Phuong phõp chiột xuõt bao gụm cõ viờc xỹ l nguyờn lieu, chon dung mụi, dung eu chiột v phuong phõp chiột xuõt. Cõc hop chõ't tu nhiờn cụ tmh chat dc trung khõc v tmh chõt cn quan tõm nhõt chiột xuõt l tmh phõn eue. Tu theo dụ phõn eue cỹa nhụm chõt dộ chon dung mụi thfch hop. Phuong phõp chiột xuõt co diờn mot duoc lieu de nghiờn cỷu thõm dụ l dựng mụt dõy dung mụi bõt dau tự khụng phõn eue dộn phõn eue manh, vf du: ether du, ether, cloroform, cụn v cuụi cựng l nuục. Cõch chiột thụng dung l chiột nụng bng mõy chiột liờn tuc(soxhlet) hoc chiột hụi luu. Cõch chiột don giõn nhõt l ngõm phõn doan hay cụn goi l chiột nguụi. Ngoi cụn chiột bng dung eu ngõm kiờt, chiột nguoc dụng. A/ - Ong 1:1ml dich chiột, thờm2-3 giot thuoc thu Mayer, lc khụng thõy xuõt hiờn tua mu trng. A/ - Ong 2: ml dich chiột, thờm 2-3 giot thuoc thu Dragendorff, khụng thy xuõt hiờn tỹa mu dụ cam. A/ - Ong 3: 1ml dich chiột, thờm 2-3 giot thuoc thỹ Bouchardat, dung dich khụng cụ tỹa nõu A/ - Ong 4: 1ml dich chiột, thờm 2-3 giot dung dich acid picricl% dung dich khụng cụ tỹa vng. So bụ kột luõn duoc lieu khụng cụ alcaloid. 2.2.1.6.Dinh tfnh chat bộo: Lõy g bụt duoc lieu cho vo bợnh non cụ nỹt mi dung tich 50 ml, thờm ether dau hoõ ngõp duoc lieu, ngõm qua dờm, loc. Nhụ giot dich chiột lờn giõy bụng mụ, ho nụng dở bay hoi hột dung mụi. Khụng thõy dở lai vột mụ trờn giõy bụng mụ. So bụ kột luõn duoc lieu khụng cụ chõt bộo. Dua vo kột quõ cỹa cõc phõn ỹng dinh tfnh trờn dõy, chỹng tụi so bụ kột luõn lõ chố vng cụ: Flavonoid, coumarin, acid amin, saponin, duụng khỹ, khụng cụ glycosid tim, tanin, alcaloid, anthranoid, chõt bộo, acid hỹu co (Bõng 2) 18 Bng : Kột quõ dinh tmh cõc nhụm chõt lõ chố võng duoc trợnh by ụ bõng sau: STT 1 Q J Tờn nhụm chõt Alcaloid Phõn ung dinh tmh Tao tua vụi thuục thu chung: - Thuục thu Mayer - Thuục thu Bouchardat - Thuục thu Dragendorff Glycosid tim - Lieberman-Burchardt - Lộgal - Baljet - Keller-Kiliani - Cyanidin Flavonoid - Vụi kiờm - Vụi dung dich FeCl3 5% - Vụi dung dich A1C13 3% - Vụi thuục thu Diazo Coumarin - Mo v dụng vụng lacton - Soi hunh quang duụi õnh sõng tỹ ngoai Anthranoid - Phõn ỹng Bomtraeger oô Duụng khỹ tu - Vụi dung dich FeCl3 5% - Vụi dung dich gelatin % Hiờn tuỗmg tao bot - Phõn ỹng Salkowski -Vụi thuục thỹ FehlingA v FehlingB Acid hựu co Tanin f. 7/ 11 Saponin Chõt bộo Acid amin Kờt quõ Kột luõn so bụ Khụng cụ _ Khụng cụ + + + Cụ + + Cụ + + Khụng cụ + Khụng cụ + Cụ + + Cụ - Tao bot vụi Na2 C Khụng cụ - Vột dõu bộo trờn giõy Khụngcụ -Vụi dung dich Ninhydrin % + Cụ Ghi chu: Dõu +: phõn ung duong tmh Dõu -: phõn ựng õm tmh 19 2.2.2.Chiet xuõt, dinh tinh flavonoid l chố võng bng sõcky giõy(SKG). .2 .2 . .Chiột xuõt flavonoid: Cho duoc lieu dõ duoc sõy khụ, tan nhụ vo tỹi giõy loc dộ chiột loai bụ nhựng thnh phõn thõn du duoc lieu bõng Soxhlet vụi dung mụi l cloroform. Sau dụ tõi duoc lieu khay men de bay hột dung mụi roi cho vo bợnh thu tinh cụ nỹt mi, thờm ethanol 70 ngõp duoc lieu dộ chiột xuõt flavonoid bng phuong phõp ngõm lanh. Sau tun rut dich chiột dõu, bõ cụn lai thờm dung mụi chiột tiộp lan v 3. Dich chiột dem cõ't thu hoi dung mụi duụi õp xuõt giõm ụ 50C bng mõy cõ't quay thu duoc dich chiột dõm dõc, tiộp tue cụ cõch thu dờ'n dang cao mờm. Ho tan cao bng nuục nụng, loc nụng qua giõy loc. Dich loc thu duoc cụ chira flavonoid ton phõn duoc cụ trờn nụi cõch thu soi dộn dang cao mờm. Quõ trợnh chiột flavonoid ton phõn tir la chố võng duoc tụm tõt so dụ 20 So dụ 1. Sa dụ chiột xuõt flavonoid lõ chố võng 21 2.22.2. Dinh trnh flavonoid ton phn bng SKG: Dich chõ'm sõc k: flavonoid ton phn ho tan MeOH. Giõy sc k : Giõy Whatman N - Sõc k giõy chiờu khai triởn hờ dung mụi kinh diởn: acid acetic-nuục( 15:85) Kột quõ cho thõy cụ vột chõt (nh 2, bõng 3) nh 2: SKG chiờu duụi õnh sõng UV sau phun thuoc thir A1C133 % 22 Bõng : Kột quõ dinh tmh flavonoid ton phõn bng SKG chiờu STT vột chõt Rf*100 53,47 Khụng mu Mu cõc vột chõt UV n h 3/ u v A1C133% (366nm) (366nm) AS thuụng Nõu Vng Vng 64,28 Khụng mu Nõu dõm Vng Vng dõm Vng 75,00 Vng nõu Xanh tim Vng Vng Vng xanh AS thuụng A1C133%/ (366nm) Vng xanh Ghi chu: AS: õnh sang - Sõc k hai chiờu: Sõc k duoc khai triởn chiờu hờ dung mụi: Acid acetic - Ntfục(15 : 85)[Hờ I] chiờu hờ dung mụi: n-Butanol-Acid acetic-Nuục(4:1:5)[Hờ II]. Kột quõ duoc thộ hiờn trờn õnh v ghi bõng 4: nh 3: SKG chiờu flavonoid ton phõn la chố võng dudi AS UV sau phun thuục thu* A1C133%. 23 Bng 4: Kột quõ dinh tmh flavonoid ton phõn bõng SKG hai chiờu Mu sc vột Vột chõ't UV(366nm) u v /n h AICI3 /UV AICI3 /AS thuụng (366nm) * Nõu dõm Vng Vng Xanh vng Nõu dõm Vng Vng Xanh vng Nõu Vng xanh Vng Vng xanh Xanh lo Vng xanh Vng Xanh vng Xanh lo Vng xanh Vng Xanh vng Nhu võy bng sõc k chiờu dich chiột flavonoid ton phn cho vột chõt. 2.2.3. Phõn lõp, phõn tich v nhõn dang flavonoid 2.2.31. Phõn lõp flavonoid bng sc k cụt - Chun bi cụt: Rua sach cụt, de khụ, sau dụ trõng thõt k bng methanol, duụi dõy cụt dt bụng. Sau dụ rụt tir tir hụn dich Cephadex LH20 trongmethanol 80% vo cụt, gụ nhe vo thnh cụt. Rua cụt bõng methanol 80% v ụn dinh cụt giụ. - Chun bi dich chay sc k: Flavonoid ton phn duoc ho tan mot luong tụi thiởu methanol 80%. - Dựng pipet sach, khụ chuyởn dich chiột flavonoid vo cụt cn thõn de trõnh xõo dụng bờ mõt Cephadex. - Dung mụi rira giõi l methanol 80 %. Sau dua mõu lờn cụt cho dung mụi chõy qua cụt vụi toc dụ 10 giot mot phỹt. Hỹng cõc phõn doan vo ong nghiờm riờng biờt, mụi ong hỹng khoõng 3ml. Bay hoi cõch thu cõc phõn doan dộn cụn khoõng ml, kiởm tra cõc phõn doan bng sõc k giõ'y giõ'y, hờ dung mụi khai triởn l acid aceticnuục (15:85). 24 Kột quõ cho thõy: tự phõn doan 20-25 chợ cụ vột chõt cụ hunh quang mu nõu dõm duụi õnh sang tir ngoai (=366nm). Gụp cõc phõn doan ny lai, cụ cõch thu cho bay bụt dung mụi, dở nguụi, thõy xuõt hiờn nhỹng tinh thở mu vng, chỹng tụi k hiờu l Fh . 2.2.3.2. Phõn tfch v nhõn dang Fh: Fh sau kột tinh lai ln bõng methanol 80% l nhỹng tinh thở hợnh kim, mu vng,dở tan cụn, nuục v hụn hop cụn nuục, khụng tan hoõc ft tan ether ethylic. Dung dich Fh cụn cho mu hụng cho tac dung vụi magie kim loai v acid HC1, cho mu vng dõm vụi dung dich NaOH 10%, mu xanh den vụi dung dich FeCL 5%, mu dụ vụi thuoc thỹ Diazoni. Bõng sõc k giõy chiờu vụi hờ dung mụi I v II. Kột quõ cho trờn sõc k dụ cụ vột. Trong dụ vờt tuong duong vụi vột sụ v vờt tuong duong vụi vột sụ trờn SGK chiờu cỹa flavonoid ton phn. Kột quõ duoc thở hiờn trờn õnh nh 4: SKG chiờu Fh duụi AS UV sau phun A1C13 3% Phụ tir ngoai chõt Fh (hợnh 1) dung dich methanol cho dùnh hõp thu eue dai ụ bõng II, ,maxl=257nm v bõng I, A, m a x = 358nm dõc trung cho flavonoid. Pho hụng ngoai chõt Fh (hợnh 2) duụi dang viờn nộn KBr, cho cõc pic t dõc trung cho cõc nhụm chỹrc OH phộnol (3424cm'1), nhụm chirc carbonyl (C = O) cỹa vụng y-pyron (1654cm 1) v cõc bng hõp thu cỹa cõc hỗfp chõt thom(1610cm'1, 1505cm'1, v 1364cm'1) vụi nhựng kột quõ phõn tfch vờ tmh chõt võt l v hoa hoc trờn dõy cho thõy Fh l hụn hop cỹa chõt flavonoid glycosid. 2.2.3.3.Thu phõn Fhxõc dinh phõn aglycon: Thu phõn Fh: Fh duoc thu phõn bõng dung dich H S 5%vụi sinh hn hoi luu giụ. Dich thu phõn sau de nguụi lõc k vụi ether ethylic de tõch riờng phõn aglycon. Dich chiột ether ethylic sau dõ lõc lai ln vụi nuục cõ't, duoc bay hoi trờn nụi cõch thu dờ'n khụ thu duoc cõn mu vng (k hiờu Fha). Fha tan tụt ethanol, methanol, ft tan cụn thõ'p dụ v hu nhu khụng tan nuục, cho mu dõc trung vụi cõc phõn ung cỹa flavonoid, SKG chiờu hờ dung mụi acid acetic-nuục (60:40) v acid acetic-acid clohydric-nuục (30:3:10) vụi cõc mõu chuan tinh khiờ't l quercetin v kaemferol, kột quõ cho thõy Fha cho vờt chõt cụ giõ tri Rf v mu sõc tuong duong vụi aglycon chuÊtn( õnh 5, õnh v bõng ). 26 3S 3S BS 0.29549 0.35999 2.59998 - .0 0 NM NM NM S ù - 11 >22______________ Basgling OfF 358.889 257.778 208.889 PftHg 1*ằ* 0 .0 . . HH : 208.80 -> 586.80 IBS_____________ : 8.8880 -> 3.8808 ;sel inc Erase ĩ l e õ R e - s c a le 2ooô ĩợùùSaW LaJbel More :e the graphies cursor. track, siope______________________________________ Hinh 1: Pho tu ngoai cỷa Fh 27 HH r*&rU[...]... luõn trong duoc lieu khụng cụ alcaloid 2.2.1.6.Dinh tfnh chat bộo: Lõy 2 g bụt duoc lieu cho vo bợnh non cụ nỹt mi dung tich 50 ml, thờm ether dau hoõ ngõp duoc lieu, ngõm qua dờm, loc Nhụ 2 giot dich chiột lờn giõy bụng mụ, ho nụng dở bay hoi hột dung mụi Khụng thõy dở lai vột mụ trờn giõy bụng mụ So bụ kột luõn trong duoc lieu khụng cụ chõt bộo Dua vo kột quõ cỹa cõc phõn ỹng dinh tfnh trờn dõy, chỹng... Hiờn tuỗmg tao bot - Phõn ỹng Salkowski -Vụi thuục thỹ FehlingA v FehlingB 9 Acid hựu co Tanin f 7 / 1 0 11 Saponin Chõt bộo Acid amin Kờt quõ Kột luõn so bụ Khụng cụ _ Khụng cụ + + + Cụ + + Cụ + + Khụng cụ + Khụng cụ + Cụ + + Cụ - Tao bot vụi Na2 C 0 3 Khụng cụ - Vột dõu bộo trờn giõy Khụngcụ -Vụi dung dich Ninhydrin 2 % + Cụ Ghi chu: Dõu +: phõn ung duong tmh Dõu -: phõn ựng õm tmh 19 2.2.2.Chiet... kột quõ cỹa cõc phõn ỹng dinh tfnh trờn dõy, chỹng tụi so bụ kột luõn trong lõ chố vng cụ: Flavonoid, coumarin, acid amin, saponin, duụng khỹ, khụng cụ glycosid tim, tanin, alcaloid, anthranoid, chõt bộo, acid hỹu co (Bõng 2) 18 Bng 2 : Kột quõ dinh tmh cõc nhụm chõt trong lõ chố võng duoc trợnh by ụ bõng sau: STT 1 1 9 Q J 4 5 Tờn nhụm chõt Alcaloid Phõn ung dinh tmh Tao tua vụi thuục thu chung: -... lõp: Phuong phõp pho biộn nhõt de phõn lõp cõc chat l dựng sõc k cụt Sõc k l mot phuong phõp võt l dựng dộ tõch riờng cõc thnh phõn ra khụi hụn hỗfp bõng cõch phõn bụ chỹng ra thnh hai pha: mot pha cụ bộ rụng goi l pha cụ dinh v pha kia l mot chõ't long hoõc khi goi l pha di dụng di chuyởn di qua pha cụ' dinh 1.5 Nhõn dang: Dõu tiờn phõi dinh tmh bõng cõc phõn ỷng hoa hoc, sõc k giõ'y hoõc sõc k lụp... duoc nhỹng kột quõ sau: Bõng cõc phõn ỹng hoõ hoc dõ so bụ xõc dinh duoc trong lõ chố vng cụ flavonoid, coumarin, acid amin, saponin, duụng khỷ; khụng cụ glycosid tim, tanin, alcaloid, anthranoid, chõt bộo v acid hỹu co Bng phuong phõp SGK 1 chiờu v 2 chiờu cho thõy cao cụn 70 cỹa lõ chố võng cụ 5 vột chõt flavonoid Bng phuong phõp sõc k cụt vụi cephadex LH20, phõn lõp duoc mot hụn hop flavonoid gụm . là chè man cuôc, dây câm vân, cây dâm tràng Tên khoa hoc : Jasminum subtriplinerve Blume, ho Nhài ( Oleaceae) Chè vàng là loai cây nhô, moc thành bui à bà rào hay bui tre hoâc bâm vào câc cây. biêt vê chi Jasminum và cây chè v àn g 1. Vài nét vê chi jasm inum 2. Cây chè vàng 2 .1 .Bac diëm hinh thâi 2.2.Phân bo 2.3.BÔ phân dùng, thu hâi và ché bien 2.4 .Thành phàn hoâ hoc 2 .5. thâp Câ cây [4] 4 J.scandens Nhài leo Tri nam toc Rê [4] 5 J.sambac Nhài Ha sot, tri mun nhot Hoa, Lâ [4] 6 J.funale Nhài dây Ha sot Thân [4] 2. Cây chè vàng 2.1. Dac diêm hinh thâi Chè vàng