phân lập vi khuẩn salmonella và escherichia coli trên gà thả vườn bị tiêu chảy tại huyện vũng liêm tỉnh vĩnh long

DANH MỤC HÌNH 3.1 Khuẩn lạc Escherichia coli trên môi trường MC 22 3.2 Khuẩn lạc Salmonella trên môi trường MLCB 24 3.3 Phản ứng sinh hóa định danh vi khuẩn Escherichia coli 27 3.4 Ph

ii

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ

KHOA NÔNG NGHIỆP & SINH HỌC ỨNG DỤNG

VY VĂN LUẬN

PHÂN LẬP VI KHUẨN SALMONELLA VÀ

ESCHERICHIA COLI TRÊN GÀ THẢ VƯỜN BỊ

TIÊU CHẢY TẠI HUYỆN VŨNG LIÊM

TỈNH VĨNH LONG

Luận văn tốt nghiệp Ngành: THÚ Y

Cần Thơ, 2013

iii

Trang duyệt

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ

KHOA NÔNG NGHIỆP & SINH HỌC ỨNG DỤNG

Luận văn tốt nghiệp Ngành: THÚ Y

PHÂN LẬP VI KHUẨN SALMONELLA VÀ

ESCHERICHIA COLI TRÊN GÀ THẢ VƯỜN BỊ

TIÊU CHẢY TẠI HUYỆN VŨNG LIÊM

TỈNH VĨNH LONG

Giáo viên hướng dẫn: Sinh viên thực hiện:

TS LÝ THỊ LIÊN KHAI VY VĂN LUẬN

MSSV: 3092675 Lớp: Thú Y 35B

Cần Thơ, 2013

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP VÀ SINH HỌC ỨNG DỤNG

BỘ MÔN THÚ Y

Đề tài: “Phân lập vi khuẩn Salmonella và Escherichia coli trên

gà thả vườn bị tiêu chảy tại tỉnh Vĩnh Long”, do sinh viên Vy Văn Luận thực hiện tại 2 hộ chăn nuôi gà ở tỉnh Vĩnh Long và phòng Thí

Nghiệm Vệ Sinh Thực Phẩm - Bộ môn Thú y - Khoa Nông Nghiệp & Sinh Học Ứng Dụng - Trường Đại học Cần Thơ từ tháng 8 năm 2013 đến tháng 11 năm 2013

Cần Thơ, ngày… tháng năm 2013 Cần Thơ, ngày tháng năm 2013

Duyệt Bộ môn Giáo viên hướng dẫn

TS Lý Thị Liên Khai

Cần Thơ, ngày tháng năm 2013

Duyệt Khoa Nông Nghiệp & SHƯD

LỜI CẢM ƠN

Kính dâng lên cha, mẹ

Ơn cha, mẹ đã hy sinh cả đời mình để dạy bảo, nuôi con khôn lớn và cho con được cắp sách đến trường Anh, chị, em và những người thân trong gia đình đã chăm lo, động viên tôi trong suốt quá trình học tập

Xin chân thành cảm tạ

Ban giám hiệu trường Đại Học Cần Thơ, khoa Nông Nghiệp và Sinh Học Ứng Dụng, bộ môn Thú Y đã tạo điều kiện cho tôi thực hiện luận văn tốt nghiệp này Quý thầy cô bộ môn Thú Y, Khoa Nông Nghiệp và Sinh Học Ứng Dụng, trường Đại Học Cần Thơ đã ân cần và tận tình truyền đạt những kiến thức quý báu

và nhận thức xã hội cho tôi trong suốt thời gian qua

Cô cố vấn học tập cô Nguyễn Thị Bé Mười và giáo viên hướng dẫn đề tài Lý Thị Liên Khai đã hết lòng lo lắng, chỉ bảo và động viên tôi trong suốt quá trình học tập và thực hiện đề tài

DANH MỤC VIẾT TẮT

EAEC Enteroaggregative Escherichia coli

MỤC LỤC

Trang duyệt ii

Lời cảm ơn iii

Danh mục viết tắt iv

Mục lục v

Danh mục hình vii

Danh mục sơ đồ vii

Danh mục bảng viii

Tóm lược ix

Chương 1 Đặt vấn đề 1

Chương 2 Cơ sở lý luận 2

2.1 Tình hình nghiên cứu trong nước và thế giới về vi khuẩn Salmonella và Escherichia coli gây bệnh trên gà 2

2.1.1 Tình hình nghiên cứu trong nước về vi khuẩn Salmonella và Escherichia coli gây bệnh trên gà 2

2.1.2 Tình hình nghiên cứu thế giới về vi khuẩn Salmonella và Escherichia coli gây bệnh trên gà 2

2.2 Các nguyên nhân gây bệnh tiêu chảy trên gà 3

2.2.1 Nguyên nhân không truyền nhiễm 3

2.2.2 Nguyên nhân do truyền nhiễm 4

2.3 Chẩn đoán phân biệt một số bệnh gây tiêu chảy trên gà 14

2.3.1 Bệnh tiêu chảy trên gà do Escherichia coli 14

2.3.2 Bệnh tiêu chảy trên gà do Salmonella 17

2.3.3 Tiêu chảy do bệnh cúm gia cầm 18

2.3.4 Tiêu chảy do bệnh Gumboro 19

Chương 3: Phương tiện và phương pháp thí nghiệm 21

3.1 Phương tiện thí nghiệm 21

3.1.1 Thời gian và địa điểm thực hiện 21

3.1.2 Hóa chất 21

3.1.3 Môi trường 21

3.1.4 Thiết bị, dụng cụ và máy móc 21

3.1.5 Đối tượng nghiên cứu 21

3.2 Phương pháp thí nghiệm 21

3.2.1 Phương pháp lấy mẫu 21

3.2.2 Phương pháp nuôi cấy phân lập vi khuẩn Escherichia coli

và Salmonella 22

3.2.3 Phương pháp định danh vi khuẩn Escherichia coli và Salmonella bằng phản ứng sinh hóa 26

3.2.4 Các chỉ tiêu theo dõi 29

3.2.5 Phương pháp xử lý số liệu 29

Chương 4 Kết quả và thảo luận 30

4.1 Tổng quan về tình hình chăn nuôi gà tại địa điểm khảo sát 30

4.2 Kết quả khảo sát tỷ lệ tiêu chảy trên gà ở tỉnh Vĩnh Long 32

4.3 Kết quả khảo sát tỷ lệ tiêu chảy trên gà ở tỉnh Vĩnh Long theo tuần tuổi 33

4.4 Tần xuất xuất hiện triệu chứng trên gà bị tiêu chảy ở tỉnh Vĩnh Long 34 4.5 Tỷ lệ gà chết do bị tiêu chảy ở tỉnh Vĩnh Long 35

4.6 Kết quả phân lập vi khuẩn Escherichia coli và Salmonella trên gà tiêu chảy chết ở tỉnh Vĩnh Long 36

4.7 Tỷ lệ dương tính với vi Escherichia coli và Salmonella trên gà bị tiêu chảy theo tuần 38

4.8 Kết quả kiểm tra sự hiện diện của vi khuẩn Escherichia coli và Salmonella trên các loại mẫu bệnh phẩm gà tiêu chảy ở tỉnh Vĩnh Long 39

Chương 5 Kết luận và đề nghị 42

5.1 Kết luận 42

5.2 Đề nghị 42

Tài liệu tham khảo 43

Phụ chương 46

DANH MỤC HÌNH

3.1 Khuẩn lạc Escherichia coli trên môi trường MC 22 3.2 Khuẩn lạc Salmonella trên môi trường MLCB 24 3.3 Phản ứng sinh hóa định danh vi khuẩn Escherichia coli 27 3.4 Phản ứng sinh hóa định danh vi khuẩn Salmonella 28

4.5 Lòng đỏ không tiêu ở gà con bị tiêu chảy 36

DANH MỤC SƠ ĐỒ

1 Quy trình phân lập vi khuẩn Escherichia coli 23

2 Quy trình phân lập vi khuẩn Salmonella 25

4.2 Kết quả khảo sát tỷ lệ tiêu chảy trên gà ở tỉnh Vĩnh Long

4.3 Tần xuất xuất hiện triệu chứng trên gà bị tiêu chảy ở tỉnh

4.4 Tỷ lệ gà chết bị tiêu chảy ở tỉnh Vĩnh Long 35

4.5 Kết quả phân lập vi khuẩn Escherichia coli và Salmonella

trên gà tiêu chảy chết ở tỉnh Vĩnh Long 37

4.6 Tỷ lệ dương tính với Escherichia coli và Salmonella trên

4.7 Kết quả kiểm tra sự hiện diện của vi khuẩn Escherichia

TÓM LƢỢC

Bệnh tiêu chảy là một trong những bệnh xảy ra thường xuyên trên gà con, giai đoạn 1 – 4 tuần tuổi Bệnh do nhiều nguyên nhân gây ra có thể do việc chăm sóc nuôi dưỡng không tốt, điều kiện thời tiết thay đổi làm cho sức đề kháng của gà con giảm tạo điều kiện cho các vi khuẩn tấn công gây bệnh, trong đó đáng quan tâm là

vi khuẩn Escherichia coli và Salmonella Vi khuẩn Escherichia coli và Salmonella

là những vi khuẩn thường xuyên tồn tại trong đường ruột ở người và động vật, có khả năng sinh độc tố gây bệnh tiêu chảy Qua điều tra và lấy mẫu bằng kỹ thuật vô trùng, chúng tôi đã khảo sát được 78/1700 con gà bị tiêu chảy, chiếm tỷ lệ 4,59%,

và tỷ lệ tỷ lệ tiêu chảy này giảm dần từ 1 – 4 tuần tuổi, tuần 1 2,12%, tuần 2 1,24%, tuần 3 0,82% và tuần 4 0,41% Chúng tôi tiến hành mổ khám và phân lập bệnh phẩm (gan, lách, ruột non, và phân) từ 42 con gà chết trong tổng số 78 con gà tiêu chảy nghi do Escherichia coli và Salmonella gây ra Kết quả cho thấy có 42/42 mẫu dương tính với Escherichia coli và 10/42 mẫu dương tính với Salmonella, chiếm tỷ

lệ tương ứng là 100% và 23,81% và tỷ lệ dương tính này trên gan, lách, ruột non, phân đối với Escherichia coli tất cả là 100% còn đối với Salmonella tỷ lệ dương tính này lần lượt là 16,67%, 14,29%, 16,67% và 19,05%, sự khác biệt này không có

ý (P>0,05) Do đó bệnh tiêu chảy trên gà do E coli và Salmonella gây ra có ảnh hưởng không nhỏ đến năng suất và hiệu quả kinh tế trong chăn nuôi gà thả vườn

CHƯƠNG 1 ĐẶT VẤN ĐỀ

Cùng với nhiều tỉnh thành trong cả nước, ngành chăn nuôi gia cầm ở Vĩnh Long ngày càng có những bước phát triển mới, góp phần to lớn vào sự phát triển kinh tế chung của tỉnh nhà Trong đó, chăn nuôi gia cầm giống nòi lai thả vườn với hình thức hộ gia đình phát triển khá mạnh do phẩm chất thịt ngon, sức chống chịu bệnh tốt và đem lại lợi nhuận kinh tế khá cao cho người chăn nuôi Mặc dù kiến thức nuôi dưỡng và phòng bệnh của người chăn nuôi ngày càng được nâng cao, nhưng bệnh và dịch bệnh vẫn thường xuyên xảy ra

Phổ biến nhất là bệnh tiêu chảy trên gà với tỉ lệ nhiễm khá cao Trong đó, E

coli và Salmonella được xem là tác nhân gây bệnh chính Chúng không những

gây tổn thất về kinh tế mà còn ảnh hưởng đến sức khỏe con người Bệnh E

coli xảy ra ở mức độ ngày càng tăng và có thể trở thành một vấn nạn trong

ngành công nghiệp chăn nuôi gia cầm (Blanco et al.,1997) E coli là nguyên nhân gây viêm rốn, viêm túi lòng đỏ ở gà con (Vegad, 2007) Ngoài ra E coli còn gây viêm túi khí, nhiễm trùng huyết và thường kết hợp với Mycoplasma

gallisepticum gây viêm khớp, sưng phù đầu, viêm màng bao tim, viêm màng

bụng, gan viêm dính fibrin (Hồ Thị Việt Thu, 2012) Ngoài ra, vi khuẩn

Samonella cũng là nguyên nhân dẫn đến tiêu chảy ở gà con, nó sẽ xâm nhập

vào nội tạng và gây bệnh khi sức đề kháng của gà con giảm Bệnh xảy ra ở thể cấp tính ở gia cầm con và thể mạn tính ở gia cầm lớn, gây viêm hoại tử niêm mạc đường tiêu hóa và các cơ quan phủ tạng (Hồ Thị Việt Thu, 2012) Bệnh

tiêu chảy trên gà do E coli và Salmonella gây thiệt hại kinh tế nhiều nhất

trong chăn nuôi gà ở Vĩnh Long hiện nay Theo chúng tôi được biết hiện nay chưa có một nghiên cứu nào về bệnh tiêu chảy trên gà ở huyện Vũng Liêm, tỉnh Vĩnh Long

Xuất phát từ tình hình thực tế trên và được sự phân công của Bộ môn Thú y, Khoa nông nghiệp và Sinh học Ứng dụng, Trường Đại học Cần Thơ,

chúng tôi tiến hành thực hiện đề tài “Phân lập vi khuẩn Salmonella và

Escherichia coli trên gà thả vườn bị tiêu chảy tại huyện Vũng Liêm, tỉnh

Vĩnh Long”

Mục tiêu đề tài:

Xác định được tỷ lệ bệnh tiêu chảy trên đàn gà do Salmonella và E coli

gây ra

Xác định được tỷ lệ nhiễm Salmonella và E coli từ 1 – 4 tuần tuổi

Xác định được tỷ lệ nhiễm Salmonella và E coli trên bệnh phẩm gà tiêu

chảy

CHƯƠNG 2 CƠ SỞ LÝ LUẬN

2.1 Tình hình nghiên cứu trong nước và thế giới về vi khuẩn Escherichia

coli và Salmonella trên gà

2.1.1 Tình hình nghiên cứu trong nước về vi khuẩn Escherichia coli và

Salmonella trên gà

Theo Tô Minh Châu và ctv (2002), phân lập và định chủng vi khuẩn

Escherichia coli trên gà, trứng gà tại một số cơ sở chăn nuôi ở Thủ Đức và

vùng lân cận cho thấy trong 103 mẫu bệnh phẩm gồm 50 gà thịt và 53 trứng

gà đã phân lập được 47 chủng Escherichia coli (45,63%), 3 chủng Escherichia

coli đã được xác định là O1: K1, O2:K1 và O78:K80

Võ Thành Thìn và ctv (2008), khảo sát một số yếu tố độc lực của các chủng vi khuẩn Escherichia coli gây bệnh ở gà nuôi tại Khánh Hòa và Phú

Yên, kết quả cho thấy các chủng APEC thuộc 15 nhóm huyết thanh khác nhau

là O8 (10,42%), O15 (8,33%), O115 (4,17%), O2, O5, O17, O83 (3,13%), O6, O20, O103 (2,08%), O9, O18, O88, O102, O132 (1,04%)

Nguyễn Quốc Cường (2010), tình hình nhiễm Escherichia coli và

Salmonella tại trại gà thịt cây gáo, huyện Trảng Bom, tỉnh Đồng Nai và trại gà

giống Phước Tân, huyện Xuyên Mộc, tỉnh Bà Rịa – Vũng Tàu cho thấy tỷ lệ

nhiễm Escherichia coli trên phân là 71,43% và Salmonella là 34,29%

Trương Phước Đức (2010), phân lập và kiểm tra tính nhạy cảm của vi

khuẩn Escherichia coli và Salmonella đối với kháng sinh ở trại gà thịt Tân Lập huyện Trảng Bom, tỉnh Đồng Nai với tỷ lệ nhiễm Escherichia coli trên phân là 69,05% và Salmonella trên phân là 9,25%

Nguyễn Phước Xuân Sơn (2011), tình hình nhiễm Escherichia coli,

Salmonella tại trại gà thịt thuộc thị trấn Cây Dương, huyện Phụng Hiệp, tỉnh

Hậu Giang với tỷ lệ nhiễm Escherichia coli, Salmonella trên phân lần lượt là

92,59% và 25,95%

Nguyễn Minh trí (2012), phân lập Escherichia coli gây bệnh trên gà thịt

từ 1 – 7 tuần tuổi tại trại gà Đinh Ngọc Chân thuộc huyện Châu Thành, tỉnh

Sóc Trăng, với tỷ lệ nhiễm Escherichia coli trên các bệnh phẩm là 100%

2.1.2 Tình hình nghiên trên thế giới về vi khuẩn Escherichia coli và

thanh phân lập từ gà bị nhiễm trùng huyết Escherichia coli, trong đó 18 nhóm

Serogroups (O1, O2, O5, O8, O12, O14, O15, O18, O20, O53, O78, O81, O83, O102, O103, O115, O116 and O132) chiếm 59% và 18 nhóm Serogroups khác chiếm 29% phân lập từ phân gà khỏe

Theo Boonmar et al (1998), điều tra mức độ vấy nhiễm của Salmonella

enteritidis trên thịt bán lẻ ở Thái Lan, kết quả cho thấy 28% S enteritidis phân

lập từ thịt bán lẻ, 4,5% S enteritidis phân lập từ lò mổ và 6,6% S enteritidis

Theo Oliveira et al (2009), chủng Escherichia coli gây bệnh trên gia

cầm chủ yếu là Serotypes O, cùng một loại gia cầm nhưng có thể nhiễm các serotype O khác nhau Serotypes O1, O2, O78 được phân lập từ gà mái đẻ, serotypes O8, O15, O78, O86, O88, O103 được phân lập từ gà giò, serotypes O2, O5, O78, O88 được phân lập từ gà con, serotypes O2, O5, O78 được tìm thấy ở gà tây

2.2 Các nguyên nhân gây bệnh tiêu chảy trên gà

2.2.1 Nguyên nhân không truyền nhiễm

Bệnh tiêu chảy thường xả ra và gây chết đối với gà con, nhiều khi không

rõ nguyên nhân Gà con sau khi nở, còn trong giai đoạn nuôi dưới chụp sưởi (úm) và cả gà trên ba, bốn tuần tuổi vẫn hay bị mắc bệnh tiêu chảy

Nguyên nhân: thường có thể do chế độ ăn uống không tốt và do gà bị

cảm lạnh

Chế độ ăn uống với khẩu phần dinh dưỡng đặc biệt cao, quá dư thừa protein động vật, nhất là các loại bột thịt, bột cá bảo quản không tốt, pha trộn với tỷ lệ quá cao, quá nhiều Cũng có trường hợp thức ăn quá nhiều cám, quá nhiều thức ăn xanh giàu chất sơ, thức ăn trộn nhiều chất béo, nhất là dầu động vật (dầu cá, mỡ…) và các chất béo khác đã bị oxy hóa, ôi thiu, biến chất đều

có thể dẫn đến tiêu chảy cho gà

Nguyên nhân do cảm lạnh, trên thực tế cũng khá phổ biến Mỗi khi thời tiết có biến động, nhiệt độ môi trường tăng giảm đột ngột đều gây ảnh hưởng không tốt đến gà con và nhất là mới nở Gà bị lạnh thường bị tiêu chảy Người

ta cũng nhận thấy khi nhiệt độ môi trường cao quá mức, có bão, tính không ổn

định của thời tiết mùa xuân có thể là nguyên nhân, điều kiên thuận lợi cho bệnh tiêu chảy của gà phát sinh, phát triển Nói chung gà con rất kém chịu đựng với stress do biến động nhiệt độ môi trường

Triệu chứng: gà tụ tập thành nhóm, để chống lại cái lạnh của môi

trường Gà đứng bất động, cong lưng, cánh hơi sã Lông khô, xù, nhợt nhạt

Bộ dạng giống như gà con bị bệnh cầu trùng Lớp lót nền chuồng bẩn vì phân tiêu chảy màu hơi nâu Trong phân, có thể thấy chất nhầy, màng ruột bị bong màu xám đỏ Hậu môn, huyệt bị kích thích, gây rặn liên tục Đôi khi hậu môn

bị tắc Bệnh diễn biến cấp tính, gây chết nhanh và thường tổn thất cao Cũng

có thể á cấp và mạn tính Con bệnh bị gầy sút nhanh chóng và dẫn tới tình trạng suy kiệt

Bệnh tích:bệnh tích quan sát được thường là những tổn thương ở ruột,

như biểu hiện viêm, sưng huyệt Niêm mạc ruột có những mảng tụ huyết đỏ có xuất hiện dạng chấm nhỏ

Phòng bệnh: để phòng bệnh, điều quan trọng trước tiên là phải quan tâm

hai nguyên nhân thức ăn và nhiệt độ môi trường

2.2.2 Nguyên nhân do truyền nhiễm

2.2.2.1 Truyền nhiễm do vi khuẩn

a) Bệnh do vi khuẩn Escherichia coli

Escherichia coli ( thường được viết tắt là E coli) là một trong những loài

vi khuẩn chúng ký sinh trong đường ruột của động vật máu nóng (bao gồm chim và động vật có vú) Vi khuẩn này cần thiết trong quá trình tiêu hóa thức

ăn và là thành phần của khuẩn lạc ruột

Hình thái: E coli là trực khuẩn hình gậy ngắn Kích thước 2 - 3µm

Trong cơ thể có hình trực khuẩn đứng riêng lẻ đôi khi xếp thành chuỗi ngắn

Có khi trong môi trường nuôi cấy có những trực khuẩn dài 4 - 8µm, những

loại này thường gặp trong canh khuẩn già Phần lớn E coli di động do có lông

ở xung quanh thân, nhưng một số không thấy di động, không hình thành nha bào, có thể thấy giáp mô

Vi khuẩn bắt màu Gram âm, có thể bắt màu đều hoặc sẫm ở hai đầu khoảng giữa nhạt hơn Nếu lấy khuẩn lạc nhầy để nhuộm có thể thấy giáp mô, còn khi soi tươi thì không thấy được

Đặc tính nuôi cấy: E coli phát triển dễ dàng trên các môi trường nuôi

cấy thông thường, một số chủng có thể phát triển được ở các môi trường tổng hợp đơn giản nên người ta đã chọn chúng làm mẫu để nghiên cứu về sinh vật

học E coli là trực khuẩn hiếu khí hoặc yếm khí tùy tiện có thể sinh trưởng ở

nhiệt độ từ 5 – 40oC, nhiệt độ thích hợp là 37oC, pH thích hợp là 7,2 – 7,4, có thể phát triển được ở pH từ 5,5 – 8

Trên môi trường thạch thường: sau 24 giờ hình thành khuẩn lạc tròn, ướt, không trong suốt mà có màu tro trắng nhạt, hơi lồi, đường kính 2 – 3mm Nuôi lâu khuẩn lạc trở thành gần như nâu nhạt và mọc rộng ra Có thể quan sát thấy

cả những khuẩn lạc dạng R và M

Trên môi trường nước thịt: phát triển tốt, môi trường rất đục, có cặn màu tro nhạt lắng xuống đáy, đôi khi có màng màu xám nhạt trên mặt môi trường, môi trường có mùi phân thối (Nguyễn Như Thanh, 1977)

Trên môi trường MC (Mac conkey agar) vi khuẩn Escherichia coli hình

thành khuẩn lạc to, tròn, đều, màu hồng nhạt, mặt khuẩn lạc hơi lồi, kích thước 2-3µm (Lưu Hữu Mãnh, 2010)

Trên môi trường EMB (Eosin methyl blue) khuẩn lạc Escherichia coli to,

tròn, hơi lồi, bóng, màu thẫm tím, có ánh kim (Lưu Hữu Mãnh, 2010)

Môi trường Nutrient agar (NA), Trypticase soy agar (TSA) qua 18-24 giờ ủ trong tủ ấm 37oC, hình thành những khuẩn lạc tròn ướt, màu trắng nhạt, mặt khuẩn lạc hơi lồi, đường kính 2-3mm (Đào Trọng Đạt, 2001)

Một số hóa chất ức chế sự phát triển của Escherichia coli như chlorine

và dẫn xuất của nó, muối mật (Nguyễn Thanh Bảo, 2006)

Đặc tính sinh hóa: E coli lên men có sinh hơi glucose, galactose,

lactose, maltose, arabinose, xylose, mannitol, fructose…không sinh H2S, hoàn nguyên nitrate thành nitrite, không sử dụng urea, không sử dụng citrate làm

nguồn cung cấp carbon Tất cả vi khuẩn E coli đều lên men đường lactose

nhanh và lên men glucose sinh hơi, đây là một đặc điểm quan trọng, người ta

dựa vào đó để phân biệt E coli và salmonella (Nguyễn Như Thanh, 1977)

Trong môi trường sữa: đông sau 24 – 72 giờ ở 37oC Gelatin, huyết thanh đông, lòng trắng trứng đông: không tan chảy H2S âm tính, VP âm tính, MR dương tính, Indol dương tính

Cấu trúc kháng nguyên: dựa vào cấu trúc bề mặt và cấu trúc bên trong

tế bào vi khuẩn E coli, các nhà khoa học đã xác định được cấu trúc kháng nguyên của vi khuẩn E coli gồm kháng nguyên thân O (Somatic), kháng

nguyên lông H (flagellar), kháng nguyên vỏ K (Capsular) và kháng nguyên F (Fimbriae) Hiện nay người ta xác định được 170 nhóm kháng nguyên O, 70 nhóm kháng nguyên K, 56 nhóm kháng nguyên H và một số kháng nguyên F Bertchinger H.U và cộng sự (1992) Bằng phản ứng ngưng kết, các nhà khoa

học đã phát hiện được các tính chất phức tạp và các yếu tố kháng nguyên của

vi khuẩn E coli, bao gồm các loại kháng nguyên sau:

Kháng nguyên O (Somatic – kháng nguyên thân)

Theo Zinner và Perter (1983) đây là thành phần chính của vi khuẩn và cũng được coi là yếu tố độc lực của vi khuẩn Kháng nguyên O được coi như một ngọai độc tố, có thể tìm thấy ở màng ngoài vỏ của vi khuẩn và thường xuyên được giải phóng vào môi trường nuôi cấy Trọng trạng thái chiết xuất tinh khiết, nó có bản chất là lipopolysaccharide, bao gồm 2 nhóm sau:

Polysaccharide có nhóm hydro ở thành ngoài vi khuẩn, mang tính chất đặc trưng cho từng giống

Polysaccharide không có nhóm hydro nằm ở phía trong, không mang tính đặc trưng mà chỉ tạo sự khác biệt về khuẩn lạc ( từ dạng S sang dạng R) Kháng nguyên O có những đặc tính sau: chịu nhiệt (không bị phá hủy khi đun nóng ở 100oC trong 2 giờ), các chất cồn, axit HCL nồng độ 1N chịu được 20 giờ, nhưng bị phá hủy bởi Formol 0,5% Kháng nguyên O được cấu trúc bởi các phân tử lớn với thành phần các phân tử gồm:

Protein: làm cho phức hợp mang tính kháng nguyên

Polyosit: tạo ra tính đặc hiệu của kháng nguyên

Lypit: kết hợp với Polyosit và là cơ sở của độc tính

Theo Medearis (1968), khi làm mất dần từng phân tử đường của chuỗi polysaccharide hay thay đổi vi trí của các phân tử này sẽ dẫn đến thay đổi độc lực của vi khuẩn Tất cả kháng nguyên O đều cư trú ở bề mặt, do vậy có thể liên kết trực tiếp với hệ thống miễn dịch Kháng nguyên O khi gặp kháng huyết thanh tương ứng sẽ xảy ra phản ứng ngưng kết gọi là “Hiện tượng ngưng kết O” Thân vi khuẩn ngưng kết với nhau dưới dạng những hạt khô, rất khó tan khi lắc

Kháng nguyên H (flagellar – kháng nguyên lông)

Kháng nguyên H được cấu tạo bởi thành phần lông vi khuẩn, có bản chất

là protein giống như chất mycosin của cơ và mang các đặc tính sau: bị phá hủy

ở 60oC trong 1 giờ Dễ bị cồn, acid yếu và các enzyme phân giải protein phá hủy Kháng nguyên H vẫn tồn tại khi sử dụng formol 0,5% xử lý

Kháng nguyên H khi gặp kháng thể tương ứng sẽ xảy ra hiện tượng ngưng kết, trong đó các vi khuẩn được ngưng kết lại với nhau nhờ lông dính lông bên cạnh Các kháng thể H cố định trên lông và là cầu nối với các lông bên cạnh Kết quả tạo nên các hạt ngưng kết giống như cục bông nhỏ Các hạt

ngưng kết rất dễ tan khi lắc vì lông rất nhỏ và dài, dễ nứt Các vi khuẩn di động khi tiếp xúc với kháng thể tương ứng và sẽ trở thành không di động

Kháng nguyên H của vi khuẩn E coli không có vai trò bám dính, đồng

thời không có vai trò đáp ứng miễn dịch nên ít được quan tâm nghiên cứu, nhưng nó có ý nghĩa lớn trong việc xác định giống, loài của vi khuẩn và bảo

vệ vi khuẩn khỏi bị tiêu diệt trong tế bào đại thực bào, giúp vi khuẩn sống lâu

và tồn tại trong đại thực bào (Weinstein, 1984)

Kháng nguyên K (Capsular – kháng nguyên bề mặt)

Kháng nguyên K còn gọi là kháng nguyên bề mặt, chúng bao quanh tế bào vi khuẩn và có bản chất hóa học là polysaccharide Vai trò của kháng nguyên K chưa được thống nhất lắm, có tác giả cho rằng nó không có ý nghĩa

về độc lực, vì vậy chủng E coli có kháng nguyên K cũng giống như chủng

không có kháng nguyên K (Orskov, 1980), cũng có ý kiến cho rằng kháng nguyên K có ý nghĩa về độc lực vì nó tham gia bảo vệ vi khuẩn trước các yếu

tố phòng vệ của cơ thể (Evan et al., 1981) Phần lớn các ý kiến cho rằng kháng

nguyên K có 2 nhiệm vụ chính: hỗ trợ phản ứng ngưng kết với kháng nguyên

O Tạo ra hàng rào bảo vệ giúp vi khuẩn chống lại điều kiện ngoại lai và hiện tượng thực bào Theo Nguyễn Như Thanh (1997), kháng nguyên K gồm 3 loại kháng nguyên: L, A, B

Kháng nguyên L: ngăn không cho hiện tượng ngưng kết O của vi khuẩn sống xảy ra, khi đun 100oC trong 1 giờ kháng nguyên L bị phá hủy

Kháng nguyên A: ngăn hiện tượng ngưng kết O, kháng huyết thanh A

trộn với E coli có kháng nguyên A gây hiện tượng phình vỏ Với nhiệt độ

120oC trong 2 giờ kháng nguyên A mới bị phân hủy

Kháng nguyên B: gồm nhiều thành phần: B1, B2, B3, B4, B5 Kháng nguyên B của vi khuẩn sống xảy ra Đun 100oC trong 1 giờ kháng nguyên này

bị phá hủy một phần Dựa vào cấu tạo kháng nguyên O, vi khuẩn E coli được chia làm nhiều nhóm, căn cứ vào cấu tạo kháng nguyên O, K, H, E coli được

chia làm nhiều type, mỗi type đều được ghi thứ tự các yếu tố kháng nguyên O,

K, H

Kháng nguyên giáp mô (kháng nguyên vỏ lọc)

Chất nhầy giáp mô phần lớn không có tính định hình vì khuếch tán, thường được cấu trúc bởi hợp chất polysaccharide nhưng cấu trúc của polysaccharide lại phụ thuộc vào từng họ vi khuẩn khác nhau thì cấu trúc khác nhau, do đó mà tính kháng nguyên của từng loại vi khuẩn khác nhau Một số

vi khuẩn trong quá trình phát triển tiết ra một chất nhầy có khả năng tan vào

nước ở một mức độ nhất định, chất nhầy này bao bọc xung quanh bên ngoài vách vi khuẩn giúp vi khuẩn chống lại sự tác động của môi trường ngoại cảnh,

có thể quan sát được ở trạng thái ướt, dễ bị mất đi khi thay đổi điều kiện phát triển gọi là giáp mô (Capsul) (Nguyễn Như Thanh., 1997)

Kháng nguyên F (Fimbriae – kháng nguyên bám dính)

Ngoài lông ra, ở nhiều vi khuẩn gram âm nói chung và vi khuẩn E coli

nói riêng còn có những bộ phận khác hình sợi gọi là pili Pili hay Fimbriae có bản chất là protein bao phủ trên toàn bộ bề mặt vi khuẩn Dưới kính hiển vi điện tử, chúng có hình ảnh giống như một chiếc áo lông bao bọc xung quanh

vi khuẩn, pili vi khuẩn đường ruột khác lông ở chỗ nó cứng hơn, không lượn sóng và không liên quan đến chuyển động Trước đây, kháng nguyên bám dính được ký hiệu là K (K88; K99; K987P), nay đổi là F (K88=F4; K99=F5; 987P=F6)

Sức đề kháng: vi khuẩn E coli bị diệt ở nhiệt độ 55oC trong 1 giờ, 60o

C trong 30 phút, đun sôi 100oC chết ngay Các chất sát trùng thông thường như acid phenic, biclorua thủy ngân, formol, hydroperoxit 1% diệt khuẩn sau 5

phút E coli đề kháng với sự sấy khô Tuy nhiên ở môi trường bên ngoài, các chủng E coli độc có thể tồn tại đến 4 tháng

Khả năng gây bệnh của vi khuẩn đường ruột tạo ra hội chứng tiêu chảy, viêm ruột, chảy máu đường ruột đã trở thành mối lo về sức khỏe không chỉ ở con người mà cả ở gia súc trên toàn thế giới Trong đó vai trò gây bệnh của vi

khuẩn E coli rất lớn, nó có khả năng gây bệnh cho tất cả các loại động vật

máu nóng

Vi khuẩn E coli tồn tại bình thường trong ống đường tiêu hóa của gia

súc, gia cầm Dưới ảnh hưởng của một số yếu tố nhất định, các chủng vi khuẩn

E coli có độc lực gây bệnh liên quan đến tình trạng tiêu chảy và nhiễm trùng

huyết ở gia súc non hoặc bệnh hô hấp của gia cầm Các chủng khác không gây tiêu chảy có thể trở thành căn bệnh cơ hội khi điều kiện cho phép, chúng thường tấn công vào bầu vú, tử cung, và đường tiết niệu

Vi khuẩn E coli có thể gây bệnh được là do nhiều yếu tố như: khả năng

bám dính, khả năng xâm nhập, các loại kháng nguyên, yếu tố dung huyết, yếu

tố kháng khuẩn, khả năng kháng kháng sinh và độc tố Nhưng quan trọng nhất

là 2 yếu tố độc lực chính: kháng nguyên bám dính (fimbriae) và độc tố đường ruột: kháng nguyên bám dính cho phép vi khuẩn bám dính trên tế bào biểu mô lông ruột non để từ đó gây nên những biến đổi bệnh lý kèm theo Khả năng bám dính của vi khuẩn vào tế bào biểu mô ruột của vật chủ hoặc lớp màng nhầy của tế bào đóng vai trò quan trọng trong quá trình gây bệnh của vi khuẩn

Đa số các chủng vi khuẩn E coli phân lập được từ gia súc non bị tiêu chảy đều

có một kháng nguyên bề mặt gọi là Pili Kháng nguyên này quyết định độc lực

chủ yếu vì nó làm cho vi khuẩn E coli bám dính vào đường ruột Sự tăng

nhanh của tế bào vi khuẩn dường như có liên quan đến khả năng bám dính của chúng vào tế bào biêu mô của ruột để tránh sự đào thải khỏi ruột non do nhu động của ruột

Độc tố đường ruột (Enterotoxin) do vi khuẩn sản sinh ra gắn vào receptor trên tế bào ruột non của vật chủ gây nên những biến đổi chức năng sinh lý màng tế bào, dẫn đến việc tăng cường bài xuất nước và các chất điện giải ra khỏi màng tế bào, cuối cùng gây chết gia súc do mất nước, rối loạn trao đổi điện giải và trúng độc toàn thân (Acres, 1985)

Theo McMullin (2004), trên gà công nghiệp bệnh E coli có thể bùng

phát bởi một số nhân tố sau: điều kiện môi trường, vi sinh vật và thức ăn giàu dưỡng chất

E coli có thể gây bệnh colibacillosis, viêm rốn, viêm túi khí và viêm

màng hoạt dịch E coli là một vi khuẩn cơ hội, thường gây bệnh kế phát khi gia cầm bị stress hay bị bệnh Nhưng chính E coli cũng có thể tự nó gây bệnh,

nhưng hầu hết các trường hợp là kế phát, căn cứ vào nơi phân lập người ta có

thể đoán được trước khi nhiễm E coli, gia cầm bị bệnh gì

Dù do chính bản thân E coli gây bệnh hay chỉ kế phát E coli cũng là

một trong những loại vi khuẩn gây thiệt hại kinh tế nhiều nhất trong chăn nuôi hiện nay

b) Bệnh do vi khuẩn Salmonella

Salmonella mang tên của bác sĩ Thú y người Mỹ là Daniel Salmon – ông

là người đầu tiên phát hiện ra Salmonella cholerasuis vào năm 1885 Năm

1934, theo đề nghị của hội nghị Sinh vật học quốc tế, để kỉ niệm người đầu

tiên tìm ra vi khuẩn Salmonella, tên chính thức của vi khuẩn này được đặt là

Salmonella

Năm 1899, Retter phân lập và định danh S pullorum và Kein phân lập được S galinarum Ngày nay hai loài này đã được chứng minh là có những

đặc điểm hình thái, tính gây bệnh, tính chất nuôi cấy rất giống nhau Theo

Retter (18990), bệnh do S pullorum đã lan rộng ở Mỹ và nhiều nước lân cận,

đến năm 1932 ở Mỹ bệnh này gây chết ở gà đến 100%

Năm 1939, Caldweli và Referson phát hiện S arionae từ động vật máu lạnh và sau đó phát hiện S arizone ở nhiều loài động vật, gia cầm, nhất là gà

tây

Tính gây bệnh: trên gà 2 loại vi khuẩn Salmonella pullorum và S

gallinarum gây bệnh bạch lỵ và bệnh thương hàn Bệnh bạch lỵ ở gà con

thường xảy ra thể cấp tính Bệnh thương hàn ở gà trưởng thành ở thể cấp tính

và mãn tính

Ở gà con: nhỏ hơn 3 tuần tuổi, thường ở thể cấp tính, tỷ lệ mắc bệnh và

tỷ lệ chết cao Phôi không đập bể vỏ trứng được nên bị chết phôi Gà con nở ra nhưng rất yếu và chết ngay sau đó Gà bệnh thường ốm yếu, nhỏ hơn những

gà khỏe mạnh khác Bụng trễ xuống do lòng đỏ không tiêu, mắt nhắm, xù lông, xả cánh, kêu xao xác, tụ đám, phân trắng bết hậu môn

Ở gà trưởng thành: xảy ra ở 2 thể, gà thể cấp tính bất thình lình giảm

lượng thức ăn tiêu thụ với biểu hiện mệt mỏi, gục xuống, xù lông, mào tái nhợt, giảm sảm lượng trứng và khả năng sinh sản, giảm khả năng ấp nở Tiêu chảy, mất nước, suy yếu Thân nhiệt tăng 2 – 3 ngày sau khi bệnh Chết thường xảy ra sau 5 – 10 ngày Thể mạn tính: mặt, mào và yếm tái nhợt do thiếu máu, mào và yếm teo lại Đẻ ít, đẻ không đều hay ngừng đẻ Trứng có vỏ

xù xì, dính máu ở vỏ hay trong lòng đỏ Bụng xệ xuống do viêm phúc mạc chứa nhiều dịch chất Phân lúc bón, lúc tiêu chảy

Bệnh tích: gà con lòng đỏ không tiêu, thối, mềm nhão, có màu xám xanh Lách sưng to gấp 2 – 3 lần so với bình thường, hoại tử Gan sậm màu, sung huyết, xuất huyết Màng ngoài tim dầy, đục, có chứa dịch rỉ viêm màng Có nhiều hạt nhỏ trong tim Ruột viêm xuất huyết, có nhiều nốt dạng cúc áo trong ruột, manh tràng chứa đầy phân trắng Một số gà bị viêm khớp Ở gà trưởng

thành viêm buồng trứng và ống dẫn trứng, trứng méo mó, có nhiều màu sắc khác nhau, trứng có thể bị vỡ làm viêm phúc mạc Gan sưng bở, có những đốm hoại tử Lách, thận sưng lớn Gà trống: dịch hoàn có nốt hoại tử, đôi khi

có điểm casein ở phổi và túi khí

Hình thái: Salmonella là một loại vi khuẩn hình gậy ngắn, hai đầu tròn,

kích thước 0,4 – 0,6 x 1 – 3µm, không hình thành giáp mô và nha bào Đa số

các loài Salmonella đều có khả năng di động mạnh do có lông xung quanh thân trừ Salmonella gallinarum – pullorum, vi khuẩn dễ nhuộm với thuốc

nhuộm thông thường, gram âm, khi nhuộm vi khuẩn bắt màu đều toàn thân hoặc hơi đậm hai đầu (Nguyễn Như Thanh, 1997)

Vi khuẩn có đặc tính chịu nhiệt kém, thuộc họ vi khuẩn đường ruột (Enterobacteriae), là trực khuẩn Gram âm, hai đầu tròn, hiếu khí, không có nha bào Bệnh gây ra ngộ độc, thương hàn và phó thương hàn Bệnh trở nên nghiêm trọng hơn khi ghép với các bệnh truyền nhiễm khác có thể gây viêm ruột, nhiễm trùng huyết và thể hiện triệu chứng thần kinh có thể gây chết

Sức đề kháng: theo D’Aoust (1989), Salmonella có thể tồn tại trong

nước thải, phân gia súc, gia cầm, trong thực phẩm, thức ăn gia súc một thời gian lâu Trong nước có thể tồn tại trong một tuần, trong nước đá có thể sống 2 – 3 tháng Với nhiệt độ, vi khuẩn có sức đề kháng yếu Theo Bayne, Garibaldi (1969), ở 57oC vi khuẩn bị diệt sau 30 phút, ở 70oC vi khuẩn bị diệt 20 phút, ở

100oC vi khuẩn bị diệt trong 5 phút

Đặc tính nuôi cấy: Salmonella vừa hiếu khí vừa kỵ khí không bắt buộc,

dễ nuôi cấy ở nhiệt độ tối hảo 37o

C Theo Pomeroy và Nagaraija (1991),

Salmonella có thể phát triển được ở nhiệt độ 5 – 47oC, pH thích hợp từ 6 – 7,

phát triển được ở pH từ 7 – 9, Salmonella gây bệnh ở người và gia súc, hiếu

khí và kỵ khí tùy nghi

Môi trường nước thịt: theo Nguyễn Như Thanh, Trần Bá Hiên, Nguyễn Thị Lan Hương (1997), cấy vi khuẩn vài giờ đã đục nhẹ, sau 18 giờ đục đều, nuôi cấy lâu ở đáy ống nghiệm có cặn, trên môi trường có màng mỏng

Môi trường thạch: có thể dùng agar để phân lập Salmonella.Trong đó

phổ biến nhất là môi trường Brilliant Green Agar (BGA) và Manitol Lysine Crytal Violet Brilliant Green Agar (MLCB) Khuẩn lạc tròn, nhẵn bóng hơi lồi, có màu đỏ nhạt trên BGA và màu đen xám trên MLCB, đường kính khuẩn lạc 2 – 4mm (Black Burn, Ellis, 1973)

Gelatin: vi khuẩn không làm tan chảy gelatin, chúng hình thành màng mỏng hơi mờ trên mặt thạch, khuẩn lạc nhỏ, không trong suốt, chạy theo

đường cấy sâu (Nguyễn Như Thanh, 1997) Hầu hết vi khuẩn Salmonella của

các loài đều giống nhau về hình thái và tính chất nuôi cấy, do đó không thể phân biệt và định type trên môi trường nuôi cấy bình thường

Đặc tính sinh hóa: mỗi loài Salmonella có khả năng lên men một số loại

đường nhất định và không đổi Theo Nagaraja (1991), phần lớn các loài

Salmonella có tính sinh hơi glucose, maltose, arabinose Một số loài cũng lên

men các loại đường nhưng không sinh hơi: S typhisuis, S typhimurium, S

choleraesuis, S enteritidis, S gallinarum, S choleraesuis không lên men

arabinose, tất cả Salmonella đều không lên men đường lactose, saccharose trừ

S arizonae Enzyme khử carboxyl khoảng 96% Salmonella đều tiết ra enzyme

khử cacboxyl đối với lysine, arginine, orthnithine

Cấu tạo kháng nguyên: Ở Salmonella, ngoài phản ứng huyết thanh đặc

hiệu của từng vi khuẩn còn có hiện tượng ngưng kết chéo giữa các kháng nguyên vi khuẩn này với kháng thể của loài khác Đó là do thành phần kháng

nguyên của Salmonella hết sức phức tạp gồm nhiều thành phần đặc hiệu đại

diện cho cả nhóm, loài, chủng huyết thanh

Cấu trúc kháng nguyên của Salmonella gồm 3 loại: kháng nguyên O,

kháng nguyên H, kháng nguyên Vi (K)

Kháng nguyên thân O: (Somatic antigen)

Đây là loại kháng nguyên rất quan trọng Hiện nay, người ta tìm thấy 67

yếu tố khác nhau, một Salmonella có thể có một hoặc nhiều yếu tố Mỗi một

yếu tố người ta đánh bằng số La Mã

Yếu tố đặc hiệu: Chỉ có loài đó mới có

Yếu tố không đặc hiệu: có thể chung cho một số loài

Kháng nguyên O là một phần của màng ngoài tế bào, gồm 4 lớp: Lipopolysaccharide (LPS), lớp phospholipide, lớp lipoprotein và lớp peptidoglycan Kháng nguyên thân O là một phần của lớp LPS, lớp này gồm 3 thành phần: Phần ngoài là kháng nguyên O có cấu trúc chuỗi mắc xích, phần giữa là lõi polysaccharide và phần 3 gọi là lipid A

Kháng nguyên lông H (Flagellar antigen)

Chỉ có ở các Salmonella có lông Các chủng Salmonella đều có lông trừ

Salmonella gallinarum, Salmonella pullorum Đây là loại kháng nguyên góp

phần xác định một cách chính xác các giống Salmonella Kháng nguyên H

gồm 2 pha (phase)

Pha 1: có tính chất đặc hiệu, gồm 28 loại kháng nguyên được biểu thị bằng mẫu chữ la tinh thường a, b, c…

Pha 2: không có tính chất đặc hiệu, gồm 6 loại kháng nguyên được biểu thị bằng chữ số ả-rập 1, 2, 3, 4…hay chữ la tinh thường e, n, x, … đôi khi

những thành phần này gặp ở Escherichia coli (Nguyễn Như Thanh, 1997) Kháng nguyên nang Vi (Kháng nguyên K, capsular antigen):

Kháng nguyên nang Vi (kháng nguyên k ) của Salmonella không phức tạp, chỉ có Salmonella typhi, Salmonella dublin Kháng nguyên nang Vi gặp

kháng thể Vi gây ra hiện tượng ngưng kết chậm và xuất hiện các hạt nhỏ Bản chất của kháng nguyên nang Vi là phức hợp glucid – lipid – polipeptid gần giống như kháng nguyên O, kháng nguyên nang Vi không tham gia vào quá trình gây bệnh

Tính gây bệnh: Salmonella gây bệnh đường ruột cho người, gia súc và

gia cầm, còn gọi là bệnh thương hàn, phó thương hàn Bình thường có thể phát

hiện Salmonella trong ruột của người, bò, heo, gà, vịt…và một số động vật

khỏe mạnh Trong điều kiện sức đề kháng của động vật giảm sút, vi khuẩn sẽ xâm nhập vào nội tạng và gây bệnh (Nguyễn Như Thanh, 1997)

Vi khuẩn Salmonella có thể xâm nhập vào cơ thể qua đường miệng, thức

ăn, nước uống Đến ruột non vi khuẩn chui qua niêm mạc ruột mà không làm tổn thương niêm mạc ruột, xâm nhập vào các hạch bạch huyết, chúng dừng lại

và phát triển ở đó, đây là thời kỳ ủ bệnh Khi sinh sản nhiều, một số tế bào vi khuẩn sẽ tự ly giải, phóng thích nội độc tố Một số khác theo hệ bạch huyết vào máu gây nhiễm trùng huyết Từ máu, vi khuẩn có thể đi đến hầu hết các

cơ quan trong cơ thể và gây nên các ổ áp xe Tuy nhiên, vi khuẩn thường cư trú ở bàng quang hoặc nhân lên trong túi mật rồi tiết vào đường tiêu hóa Trong thời kỳ đầu của bệnh có thể không tìm thấy vi khuẩn nhưng sang tuần lễ

thứ 3 hoặc thứ 4 thì vi khuẩn Salmonella nhân lên rất cao tương ứng với thời

kỳ vi khuẩn đạt lên đỉnh cao trong túi mật và thải ra đường tiêu hóa (Nguyễn Thanh Bảo, 1993)

Nếu mật độ nuôi gia súc cao, stress do vận chuyển, thay đổi chế độ nuôi dưỡng hoặc bị các bệnh truyền nhiễm khác đều làm tăng khả năng xuất hiện bệnh từ con vật mang trùng và tăng khả năng cảm nhiễm của con vật (Phan Thanh Phượng, 2002)

2.2.2.2 Truyền nhiễm do virus

Bệnh Newcastle (dịch tả gà): do virus Newcastle thuộc họ

Paramyxovirinae, nhóm avian paramyxovirus là một RNA virus có vỏ, virus

có đặc tính gây ngưng kết hồng cầu gà, người, bò, vịt, nhưng không gây ngưng kết hồng cầu ngựa

Những gà bị nhiễm bệnh Newcastle, gà ủ rũ, bỏ ăn, xù lông, gà mái thường ngưng đẻ, trên chuồng có những bãi phân trắng

2.2.2.3 Tiêu chảy do kí sinh trùng

Ký sinh trùng ký sinh trong cơ thể gà là một trong những yếu tố gây tổn thất trong nuôi gà Các loại ký sinh trùng trong cơ thể cướp đoạt các dưỡng chất đồng thời tiết độc tố làm rối loạn tiêu hóa, dẫn đến tiêu chảy cho gà, làm cho gà giảm tăng trọng, còi cọc, chậm lớn

Bệnh cầu trùng ở gà do Protoza gây ra Tác nhân bệnh là nội ký sinh

thuộc giống Eimeria Có 9 loại coccidian có thể gây bệnh cho gà Tuy nhiên

chỉ có 5 loại thường gặp nhất trong các đàn gà với triệu chứng đặc trưng là ủ

rũ, phân đỏ hoặc sáp (màu nâu), giảm đẻ Mức độ bệnh tùy vào phương pháp nuôi Nuôi lồng hoặc trên sàn thì bệnh xảy ra ít hơn ở dưới đất Nuôi theo phương pháp công nghiệp có trộn thuốc chống cầu trùng vào thức ăn hay nước uống thì bệnh ít hơn là nuôi thả rong hoặc cho ăn tự do Bệnh xuất hiện hầu hết ở các nước có chăn nuôi gà

2.3 Chẩn đoán phân biệt một số bệnh gây tiêu chảy trên gà

2.3.1 Bệnh tiêu chảy trên gà do Escherichia coli

Tác nhân gây bệnh

Bệnh gây ra do vi khuẩn Escherichia coli Bệnh thường xảy ra do giảm

sức đề kháng bởi các tác nhân truyền nhiễm và không truyền nhiễm

Phương thức truyền lây

Vi khuẩn Escherichia coli thường hiện diện thường xuyên trong đường

ruột và được thải qua phân với số lượng lớn Bệnh có thể lây qua đường tiêu hóa, qua vết thương ngoài da, qua niêm mạc bị tổn thương, ngoài ra bệnh còn

có thể lây truyền qua trứng

Cơ chế sinh bệnh

Bệnh có thể quan sát ở gà 1 ngày tuổi cho đến nhiều ngày sau khi nở, hầu hết trường hợp này là do trứng ấp bị nhiễm từ phân, vi khuẩn có thể xuyên qua vỏ trứng để vào trứng Ngoài ra, trứng cũng có thể nhiễm vi khuẩn

Escherichia coli từ buồng trứng và ống dẫn trứng Sau khi xâm nhập qua

đường hô hấp gia cầm, vi khuẩn đi vào mao mạch ở túi khí hoặc niêm mạc đường hô hấp bị tổn thương tạo điều kiện cho sự bám dính của vi khuẩn

Escherichia coli

Triệu chứng, bệnh tích

Gà ở mọi lứa tuổi đều mẫn cảm với bệnh, nhưng ở gà con tính mẫn cảm cao và bệnh thường nghiêm trọng hơn

Viêm rốn ở gà con: bệnh viêm rốn bởi Escherichia coli là do trứng bị

nhiễm vi khuẩn từ phân Ngoài ra có thể là do trứng bị nhiễm vi khuẩn từ vòi trứng hoặc buồng trứng từ gà mẹ Trứng bị nhiễm có thể bị chết phôi Tỷ lệ nhiễm bệnh tăng từ khi gà mới nở đến 6 ngày tuổi Những gia cầm sống sót bị còi cọc đến 3 tuần tuổi Những chủng thuộc serotype O1a:K1:H7 gây tử vong cao ở gà con 1 ngày tuổi với triệu chứng viêm cuống rốn Trường hợp gà sống sót trên 4 ngày tuổi bệnh tích thường thấy là viêm màng ngoài tim, túi lòng đỏ không tiêu, giảm tăng trọng

Hội chứng sưng phù đầu: dịch viêm tích tụ lại ở lớp sâu dưới da, viêm

kết mạc mắt, viêm xoang vùng đầu, làm cho vùng đầu sưng lên

Viêm ống dẫn trứng cấp tính: bệnh thường lây qua giao phối Đây là

bệnh cấp tính và thường gây chết ở các đàn gà tây giống trong một thời gian ngắn sau khi thụ tinh Đặc trưng bởi hiện tượng viêm ống dẫn trứng, viêm ổ nhớp, viêm phúc mạc, trứng rớt trong xoang bụng và được bao quanh bởi lớp

bã đậu, những niêm mạc bị tổn thương bị dày lên đáng kể, loét bị bao phủ bởi màng giả, màng casein hoại tử dẫn đến tắc phần dưới của ống dẫn trứng

Viêm vòi trứng, viêm phúc mạc: bệnh làm giảm năng suất trứng và gây

chết lẻ tẻ ở gà mái Bệnh này là một trong những nguyên nhân gây chết ở gà

đẻ thương phẩm và gà giống Viêm vòi trứng kéo dài làm tích tụ các dịch tiết casein đọng lại trong xoang bụng giống như lòng đỏ trứng cô đặc, trứng có thể

bị tắc lại trong ống dẫn trứng Do đó bệnh này còn gọi tên là viêm phúc mạc trứng

Viêm dịch hoàn: bệnh xảy ra ở gà trống do giao phối với gà mái bị nhiễm Escherichia coli thể viêm vòi trứng Bệnh tích thường thấy là dịch hoàn sưng,

cứng, viêm, có hình dạng bất thường và có những điểm hoại tử

Thể nhiễm trùng huyết: có thể thấy ở những thể sau: nhiễm trùng huyết

cấp tính, viêm đa màng thanh dịch á cấp tính và viêm u hạt mạn tính Bệnh tích đặc trưng là sau khi mổ khám các mô tổ chức thường mất màu do tiếp xúc với không khí, và có mùi đặc biệt do vi khuẩn sản sinh indol Túi Fabricius teo hoặc viêm, viêm màng bao tim, viêm cơ tim, bao tim dày đục do tích tụ của dịch tiết có fibrin Trong trường hợp kéo dài, màng ngoài tim có thể dính vào

cơ tim

Thể nhiễm trùng huyết do viêm đường hô hấp: thường kế phát sau các

bệnh đường hô hấp như bệnh hô hấp mạn tính (CRD), viêm phế quản (IBD), Newcastle Bệnh tích thường thấy ở khí quản, phổi, túi khí

Thể nhiễm trùng huyết do viêm ruột: bệnh thường kế phát sau những

bệnh lý viêm ruột xuất huyết do virus Những gia cầm mắc bệnh vẫn có thể trạng tốt, diều vẫn chứa đầy thức ăn nước uống Bệnh lý đặc trưng là gan bị sung huyết sưng to, lách sung huyết

Thể nhiễm trùng huyết sơ sinh: gà con thường biểu hiện 24 – 48 giờ sau

khi nở, gà có thể chết, tỷ lệ chết có thể duy trì đến 2 – 3 tuần sau và có thể lên đến 10 – 20%, tỷ lệ còi cọc có thể lên đến 5%

Thể u hạt: thường xảy ra ở gà và gà tây, đặc trưng là có nhiều hạt ở gan,

manh tràng, tá tràng và ở màng treo ruột nhưng không có hiện diện ở lách Thể này ít xảy ra nhưng tỷ lệ chết có thể lên đến 75%

Chẩn đoán

Chẩn đoán lâm sàng: dựa vào các đặc điểm triệu chứng và bệnh tích như

gan sưng có màu mật, viêm màng ngoài tim, viêm gan, có nhiều dịch hơi vàng

ở túi khí, phúc mạc, viêm phổi, gan và lách hơi sưng, viêm ống dẫn trứng và viêm mắt, viêm khớp, viêm màng não Triệu chứng và bệnh tích rất phức tạp,

khó phân biệt với bệnh thương hàn, bệnh do mycoplasma, bệnh do

pasteurella, bệnh do chlamydia Để chẩn đoán chính xác cần phân lập mầm

bệnh

Chẩn đoán vi khuẩn học: có thể sử dụng các cơ quan nội tạng để phân

lập vi trùng nhưng cần tránh ô nhiễm E coli từ phân Tủy xương là bệnh phẩm

thường được sử dụng nhất vì rất ít bị nhiễm tạp khuẩn Có thể phân lập trên môi trường thạch MacConkey, EMB (eosin-methylene blue) Ngoài ra có thể phát hiện và định danh vi khuẩn bằng kỹ thuật PCR

Chẩn đoán huyết thanh học: có thể phát hiện kháng thể từ các gia cầm

khỏi bệnh bằng kỹ thuật ELISA hoặc xét nghiệm ngưng kết hồng cầu gián tiếp

Điều trị

E.coli nhạy cảm với nhiều loại kháng sinh như ampicillin,

chlortetracylin, neomycin, nitrofurans, gentamycin, spectinomycin

Phòng bệnh

Phòng bằng vaccine: vaccine vô hoạt bao gồm các serotype O2:K1,

O78:K80 được sản xuất trên thị trường thế giới cho thấy có hiệu quả trong

phòng bệnh Vaccine này cần được sử dụng cho các đàn gia cầm giống để tạo miễn dịch thụ động cho gia cầm con

Vệ sinh phòng bệnh: thu nhặt trứng thường xuyên, giữ cho ổ đẻ sạch sẽ,

loại bỏ những vật có thể gây ô nhiễm Loại bỏ những trứng bị dính phân hoặc những trứng bị nứt Cần sát trùng vệ sinh trứng trong vòng 2 giờ sau khi đẻ

2.3.2 Bệnh tiêu chảy trên gà do Salmonella gây ra

Tác nhân gây bệnh

Bệnh gây ra do vi khuẩn Salmonella gallinarum và Salmonella pullorum, ngày nay mầm bệnh được gọi với tên chung la Salmonella gallinarum

pullorum

Phương thức truyền lây

Bệnh có thể lây truyền qua trứng do gà bệnh mạn tính hoặc mang trùng

có nhiễm mầm bệnh ở buồng trứng Ngoài ra, mầm bệnh cũng có thể bám vào

và xuyên qua vỏ trứng để gây bệnh Bệnh cũng có thể lây gián tiếp qua đường tiêu hóa do thức ăn nước uống có nhiễm mầm bệnh từ phân gia cầm bệnh hoặc gia cầm mang trùng

Cơ chế sinh bệnh

Sau khi xâm nhập vào cơ thể, vi khuẩn gây nhiễm trùng huyết làm lách sưng, viêm ruột và gây xuất huyết, một số gà chết trong giai đoạn này (gia cầm con) Những gia cầm còn sống trở nên mang trùng hoặc có thể lành triệu chứng nhưng bên trong phủ tạng có bệnh tích viêm mạn tính, bài tiết mầm bệnh ra ngoài theo phân và truyền căn bệnh cho bào thai, bệnh có thể chuyển thành cấp tính khi có những nguyên nhân làm sức đề kháng của gà giảm sút

Triệu chứng, bệnh tích

Triệu chứng

Ở gà con: bệnh xảy ra ở thể cấp tính Gà con ốm yếu, trọng lượng thấp,

bụng trễ xuống do lòng đỏ không tiêu, tiêu chảy, phân có màu trắng Phần lớn sau 2 – 3 ngày gia cầm hết bệnh, nhưng nếu bệnh nặng có thể kéo dài 1 – 2 tuần, trong trường hợp này con vật suy yếu trầm trọng, viêm ruột nặng, thở khó dần rồi chết

Ở gà lớn: bệnh xảy ra ở thể mạn tính Con vật gầy yếu, ủ rũ, xù lông,

niêm mạc nhợt nhạt, bụng tích nước trương to, tiêu chảy, phân có màu trắng như vôi bết ở hậu môn Gà mái giảm đẻ, vỏ trứng xù xì, lòng đỏ có máu

Bệnh tích

Gà con: lòng đỏ không tiêu, có màu vàng xám, hôi thối Lách sưng to

gấp 2 – 3 lần so với bình thường, tụ máu Ruột tụ máu, xuất huyết, có sự tích

tụ fibrin, thường thấy ở manh tràng tạo thành những khối đông đặc chiếm hết lòng manh tràng Trường hợp bệnh nặng, niêm mạc ruột có thể bị loét, trực tràng hoại tử Nếu bệnh kéo dài, cơ tim, phổi, gan, lách có những nốt hoại tử màu vàng xám, to nhỏ không đều

Gà lớn: Xác gầy, viêm hoại tử mạn tính, ở các cơ quan phủ tạng Gan

sưng, trên bề mặt có những nốt hoại tử màu vàng xám, to nhỏ không đều Cơ tim, phổi, mề, ruột hoại tử Viêm bao tim, bao tim dày lên có dịch thẩm xuất

có fibrin Lách sưng to, tụ máu Buồng trứng méo mó, dị hình, thoái hóa, có màu vàng nâu, xanh đen

Chẩn đoán

Chẩn đoán lâm sàng: dựa vào đặc điểm dịch tễ là bệnh xảy ra ở thể cấp

tính ở gà con và mạn tính ở gà lớn Triệu chứng điển hình là tiêu chảy, phân

có màu trắng, bụng trễ xuống, mào và yếm nhợt nhạt, viêm khớp Bệnh tích đặc trưng là viêm loét ở ruột, hoại tử ở các cơ quan phủ tạng, lách sưng to Cần phân biệt với bệnh cầu trùng, nấm phổi, bệnh lao

Chẩn đoán vi khuẩn học: ở thể bệnh cấp tính có thể phân lập vi khuẩn từ

nhiều cơ quan như gan, lách đặc biệt là ở manh tràng Nếu bệnh tích có hiện diện ở buồng trứng cũng cần lấy mẫu bệnh phẩm từ cơ quan này để chẩn đoán

Điều trị

Sử dụng các dẫn xuất của sulfamide 0,2-0,5% trộn trong thức ăn hay pha vào nước uống hoặc phối hợp tiêm trimethoprim và sulfadiazine cho hiệu quả khả quan Ngoài ra có thể sử dụng các loại kháng sinh khác như colistin, imequil, amoxicylin

Phòng bệnh

Vệ sinh phòng bệnh là biện pháp chủ yếu, bao gồm các biện pháp an toàn sinh học, quản lý chăm sóc, kiểm tra và loại thải đàn có nhiễm bệnh Gia cầm trứng phải mua từ những nơi chắc chắn không có bệnh Sát trùng trứng và máy ấp trước và sau khi ấp Định kỳ trộn kháng sinh vào thức ăn hoặc pha nước uống

2.3.3 Tiêu chảy do bệnh cúm gia cầm

Nguyên nhân gây bệnh

Virus gây bệnh cúm gia cầm được xếp vào nhóm virus cúm type A thuộc

họ Orthomyxoviridae, RNA virus, có kích thước trung bình 80 – 120nm, vỏ

bọc bên ngoài là glycoprotein

Bệnh tích

Xuất huyết từng đám ở khí quản, xuất huyết và mỡ ở tim, xuất huyết dạ dày tuyến, xuất huyết ở mỡ vùng bụng, xuất huyết ở màng treo ruột non

Chẩn đoán

Chẩn đoán lâm sàng:dựa vào đặc điểm dịch tễ là nhiều loại gia cầm cảm

nhiễm với bệnh, tỷ lệ mắc bệnh và tỷ lệ chết cao Triệu chứng điểm hình gồm: thở khó, thở dốc, viêm mũi, phù nề mặt và đầu, xuất huyết mào và tích, xuất huyết ở da chân, triệu chứng thần kinh

Chẩn đoán virus học: tiêm truyền qua phôi gà hoặc tế bào nuôi cấy

Tiêm 0,1ml vào vào túi niệu của phôi gà 9 – 11 ngày tuổi, phôi được ấp tiếp ở

37oC trong 2 – 3 ngày

2.3.4 Tiêu chảy do bệnh Gumboro

Nguyên nhân gây bệnh

Virus Gumboro được xếp vào chi Birnaviridae, có 20 mặt trần với đường kính 55 – 60nm Capsid có 4 cấu trúc protein và 32 capsomeres, cấu trúc di truyền là chuỗi kép RNA

Loài mắc bệnh

Gà được coi là ký chủ tự nhiên của virus Gumboro Ngoài ra virus này cũng được phân lập từ gà gô, chim trĩ, gà lôi, đà điểu