nghiên cứu ảnh hưởng của các chủng vi khuẩn nội sinh đến sinh trưởng, phát triển, năng suất lúa tại gia lâm

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PTNT HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM PHẠM THỊ HẢI NGHIÊN CỨU ẢNH HƯỞNG CỦA CÁC CHỦNG VI KHUẨN NỘI SINH ĐẾN SINH TRƯỞNG, PHÁT TRIỂN, NĂNG SUẤT LÚA TẠI GIA LÂM LUẬN VĂN THẠC SĨ HÀ NỘI, 2015 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PTNT HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM PHẠM THỊ HẢI NGHIÊN CỨU ẢNH HƯỞNG CỦA CÁC CHỦNG VI KHUẨN NỘI SINHĐẾN SINH TRƯỞNG, PHÁT TRIỂN, NĂNG SUẤT LÚA TẠI GIA LÂM CHUYÊN NGÀNH: CÔNG NGHỆ SINH HỌC MÃ SỐ:60.42.02.01 NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC GS.TS NGUYỄN QUANG THẠCH HÀ NỘI, 2015 Lời cam đoan Tôi xin cam đoan số liệu kết nghiên cứu luận văn trung thực chưa sử dụng công bố. Tôi xin cam đoan giúp đỡ cho việc thực luận văn cám ơn thông tin trích dẫn rõ nguồn gốc. Học viên Phạm Thị Hải Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page i Lời cảm ơn Sau thời gian làm việc thực tập Viện sinh học nông nghiệp, quan tâm, giúp đỡ dìu dắt tận tình thầy cô giáo, anh chị cán Viện, cố gắng nỗ lực thân, hoàn thành luận văn tốt nghiệp mình. Tôi xin bày tỏ lòng kính trọng biết ơn sâu sắc tới GS.TS. Nguyễn Quang Thạch tận tình hướng dẫn dạy dỗ suốt trình làm việc nghiên cứu. Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn tới anh chị đồng nghiệp, bạn bè, toàn thể cán bộ môn môn Công nghệ sinh học thực vật, ban chủ nhiệm Khoa thầy, cô giáo Khoa Công nghệ sinh họcđã giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi cho suốt thời gian thực tập. Và cuối cùng, với tất lòng kính trọng biết ơn vô hạn, xin gửi lời cảm ơn tới Bố, Mẹ, anh chị em người thân nuôi nấng, động viên tạo động lực cho suốt trình học tập nghiên cứu. Học viên Phạm Thị Hải Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page ii MỤC LỤC Lời cam đoan . i Lời cảm ơn . ii MỤC LỤC . iii DANH SÁCH BẢNG . vi DANH SÁCH HÌNH vii TỪ VIẾT TẮT ix CHƯƠNG I: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1. Khát quát vi khuẩn nội sinh .3 1.1.2. Một số đặc tính vi khuẩn nội sinh 1.1.3. Một số vi khuẩn nội sinh .13 1.2. Tổng quan lúa .20 1.2.1. Vị trí phân loại 20 1.2.2. Đặc điểm hình thái 21 1.2.3. Nhu cầu dinh dưỡng lúa 22 CHƯƠNG II: NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 28 2.1. Đối tượng, vật liệu, địa điểm thời gian nghiên cứu .28 2.1.1. Đối tượng vật liệu nghiên cứu .28 2.1.2. Dụng cụ, thiết bị thí nghiệm 28 2.1.3. Hóa chất 28 2.1.4. Địa điểm thời gian nghiên cứu .31 2.2. Nội dụng nghiên cứu 31 2.2.1. Phân lập chủng vi khuẩn nội sinh từ lúa. .31 2.2.2. Đánh giá khả cố định đạm, phân giải lân, tổng hợp IAA chủng vi khuẩn nội sinh phân lập được, tuyển chọn chủng ưu việt. 31 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page iii 2.2.3. Xác định ảnh hưởng số yếu tố(thời gian nuôi cấy, pH, nhiệt độ môi trường) tới khả cố định đạm, phân giải lân, tổng hợp IAA chủng vi khuẩn tuyển chọn. .31 2.2.4. Xác định số yếu tố ảnh hưởng tới sinh trưởng phát triển chủng vi khuẩn tuyển chọn. 31 2.2.5. Đánh giá tác động chủng vi khuẩn nội sinh tuyển chọn đến sinh trưởng, suất lúa trồng Gia Lâm. 31 2.3. Phương pháp nghiên cứu 32 2.3.1. Phương pháp thu thập, xử lý mẫu phân lập chủng vi khuẩn 32 2.3.2. Xác định đặc điểm hình thái khuẩn lạc hình thái tế bào. .32 2.3.3. Xác định khả cố định đạm, phân giải lân, tổng hợp IAA chủng vi khuẩn nội sinh. 34 2.3.4. Xác định ảnh hưởng thời gian pH đến khả cố định đạm, phân giải lân tổng hợp IAA chủng vi khuẩn tuyển chọn. .39 2.3.5. Xác định số yếu tố ảnh hưởng đến sinh trưởng phát triển vi khuẩn có khả cố định đạm, phân giải lân, tổng hợp IAA cao. .39 2.3.6. Phương pháp bố trí thí nghiệm đồng ruộng 40 2.3.7. Phương pháp xử lý số liệu 42 CHƯƠNG III: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 43 3.1. Phân lập xác định đặc điểm khuẩn lạc tế bào chủng vi khuẩn nội sinh lúa phân lập được. .43 3.2. Xác định khả cố định đạm, phân giải lân, tổng hợp IAA chủng vi khuẩn. 44 3.2.1. Khả cố định đạm chủng vi khuẩn 44 3.2.2. Khả phân giải lân chủng vi khuẩn. 47 3.2.3. Khả tổng hợp IAA 50 3.3. Ảnh hưởng số yếu tố đến khả năngcố định đạm, phân giải lân tổng hợp IAA chủng vi khuẩn tuyển chọn. 53 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page iv 3.3.1.Ảnh hưởng thời gian nuôi cấy đến khả cố định đạm, phân giải lân, tổng hợp IAA chủng vi khuẩn tuyển chọn. 53 3.3.2. Ảnh hưởng nhiệt độ đến khả cố định đạm, phân giải lân, tổng hợp IAA chủng vi khuẩn tuyển chọn. .55 3.3.3. Ảnh hưởng pH đến khả cố định đạm, phân giải lân tổng hợp IAA chủng vi khuẩn tuyển chọn. .58 3.4. Xác định yếu tố ảnh hưởng đến sinh trưởng, phát triển chủng vi khuẩn tuyển chọn. .60 3.4.1. Ảnh hưởng môi trường đến sinh trưởng, phát triển chủng vi khuẩn tuyển chọn 60 3.4.2. Ảnh hưởng nhiệt độ đến sinh trưởng, phát triển chủng vi khuẩn tuyển chọn. .61 3.4.3. Ảnh hưởng pH đến sinh trưởng, phát triển chủng vi khuẩn tuyển chọn. 62 3.5. Ảnh hưởng chủng vi sinh vật nội sinh có khả cố định đạm phân giải lân, tổng hợp IAA mạnh lên sinh trưởng, phát triển, suất lúa Gia Lâm 64 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ .71 Kết luận .71 Kiến nghị .72 TÀI LIỆU THAM KHẢO .73 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page v DANH SÁCH BẢNG Bảng 2.1: Thành phần môi trường RMR (Elbeltagy et al., 2001) 28 Bảng 2.2: Thành phần dãy đường chuẩn NH4+ 35 Bảng 2.3: Thành phần dãy đường chuẩn PO43- 37 Bảng 2.4: Thành phần dãy đường chuẩn IAA 38 Bảng 2.5: Công thức thí nghiệm .41 Bảng 3.1: Đặc điểm khuẩn lạc tế bào chủng vi khuẩn phân lập được. .43 Bảng 3.2: Đường chuẩn NH4+ (mg/l) 45 Bảng 3.3 : Đường chuẩn PO43- 48 Bảng 3.4: Đường chuẩn IAA 50 Bảng 3.5. Ảnh hưởng chủng vi khuẩn nội sinh phân bón đến chiều cao, số nhánh tối đa, số bôngcủa lúa lai TH 3-3 .65 Bảng 3.6: Ảnh hưởng chủng vi khuẩn nội sinh phân bón tới suất yếu tố cấu thành suất lúa lai TH3-3 .66 Bảng 3.7. Ảnh hưởng chủng vi khuẩn phân bón đến chiều cao, số nhánh tối đa, số lúa thuầnBắc thơm 68 Bảng 3.8: Ảnh hưởng chủng vi khuẩn nội sinh phân bón tới suất yếu tố cấu thànhnăng suất lúa Bắc thơm .69 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page vi DANH SÁCH HÌNH Hình 1.1: Tổng quát lộ trình sinh tổng hợp IAA vi khuẩn(Spaepen et al., 2007) Hình 1.2: Cây lúa 20 Hình 3.1: Hình ảnh khuẩn lạc chủng vi khuẩn. 44 Hình 3.2: Đồ thị đường chuẩn NH4+ .46 Hình 3.3: Đồ thị biểu hàm lượng NH4+tổng hợp chủng vi khuẩn 46 Hình 3.4: Khả tổng hợp NH4+của chủng vi khuẩn. 47 Hình 3.5: Phương trình đường chuẩn PO43- 48 Hình 3.6: Hàm lượng PO43- phân giải chủng vi khuẩn .49 Hình 3.7: Khả phân giải lân chủng vi khuẩn .49 Hình 3.8: Phương trình đường chuẩn IAA 51 Hình 3.9: Hàm lượng IAA tổng hợp chủng vi khuẩn 52 Hình 3.10: Khả tổng hợp IAA chủng vi khuẩn .52 Hình 3.12: Ảnh hưởng thời gian đến khả phân giải lân chủng vi khuẩn tuyển chọn. .54 Hình 3.13: Ảnh hưởng thời gian đến khả tổng hợp IAA chủng vi khuẩn tuyển chọn. .55 Hình 3.14. Ảnh hưởng nhiệt độ đến khả cố định đạm chủng vi khuẩn tuyển chọn. .56 Hình 3.15: Ảnh hưởng nhiệt độ đến phân giải lân 57 chủng tuyển chọn 57 Hình 3.16: Ảnh hưởng nhiệt độ đến khả tổng hợp IAA chủng vi khuẩn tuyển chọn. .57 Hình 3.17. Ảnh hưởng pH đến khả cố định đạm chủng vi khuẩn tuyển chọn .58 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page vii Hình 3.18. Ảnh hưởng pH đến khả phân giải lân .59 chủng vi khuẩn tuyển chọn. 59 Hình 3.19: Ảnh hưởng pH đến khả tổng hợp IAA chủngvi khuẩn tuyển chọn .60 Hình 3.21: Ảnh hưởng nhiệt độ đến sinh trưởng, phát triển chủng vi khuẩn tuyển chọn 62 Hình 3.22: Ảnh hưởng pH đến khả sinh trưởng, phát triển chủng vi khuẩn tuyển chọn 63 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page viii Ryan, RP, Germaine K, Franks A, Ryan DJ, Dowling DN 2008a. Bacterial endophytes: recent development and application. MEMS Microbiol. Lett. 1-9. Salles, J.F., E. Samyn, P. Vandamme, J.A. van Veen and J.D. van Elsas. 2006. Changes in agricultural management drive the diversity of Burkholderia species isolated from soil on PCAT medium. Soil Biol. Biochem., 38:661-673, Santi, C., D. Bogusz and C. Franche. 2013, Biological nitrogen fixation in non-legume plants. Ann. Bot., 111(5):743-767. Schultz B, Boyle C, 2005. The endophytic continuum.Myco Res 109: 661-686. Somers, E., D. Ptacek, P. Gysegom, M. Srinivasan and J. Vanderleyden. 2005. Azospirillum brasilense produces the auxin-like phenylacetic acid by using the key enzyme for indole-3-acetic acid biosynthesis. Appl. Environ. Microbiol., 71(4):1803-1810, Spaepen, S., J. Vanderleyden and Remans R. 2007. Indole-3-acetic acid in microbial and microorganism-plant signaling. FEMS Microbiol Rev., 31(4):425-448. Spaepen, S. and J. Vanderleyden. 2011. Auxin and plant-microbe interactions. Cold Spring Harb Perspect Biol., 3(4). Stoltzfus, J.R., R. So, P.P. Malazzithi, J.K. Ladha and F.J. de Bruijn. 1997. Isolation of endophytic bacteria in rice and assessment of their potential for roppling rice with biologically fixed nitrogen. Plant and Soil, 194:25-36. Strobel G, Daisy B, Castillo U, HarperJ 2004 Natural products from endophytic microorganisms. J Nat Prod 67: 257-268. Sturz, A.V., B.R. Christil and J. Nowak. 2000, Bacterial endophytes: Potential role in devepoping sustainable systems of crop production. Crits. Rev. Plant Sci., 19:130, Theologies, A. and P.M. Ray. 1982. Early auxin-regulated polyade-nylylated messenger-RNA sequences in pea stem tissue. Biological Sciences, 79:418-421. Toyoda H., Utsumi R., 1991. Method for the prevention of Fusarium diseases and microorganisms used for the same. US Patent No. 4, 988, p. 586. Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 84 Van, T.V., P. Mavingui, O. Berge, J. Balandreau and T. Heulin. 1994. Promotion de croissance du riz incocule par une bacteria fixatrice dazote, Burkholderia vietnamiensis, isolated in soil acid Viet Nam. Agronomie, 14:697:707. Van, T.V., O. Berge, S. Ngo Ke, J. Balandreau and T. Heulin. 2000, Repeated beneficial effects of rice inoculation with a strain of Burkholderia vietnamiensis on early and late yield component in low fertility sulphate acid soils of Viet Nam. Plant Soil, 218:273-284. Vandamme, P., J. Goris, W.M. Chen, P. de Vos, and A. Willems. 2002. Burkholderia tuberum sp. nov. and Burkholderia phymatum sp. nov. nodulate the roots of tropical legumes. Syst. Appl. Microbiol., 25:507-512. Vera et al. (2000). Inoculation of rice plants with the endophytic diazotrophs Herbaspirillum seropedicae and Burkholderia spp., Biol Fertil Soil 30, pp 485491. Vlassak, K., L. Van Holm, L. Duchateau, J. Vanderleyden and R. De Mot. 1992. Isolation and characterization of fluorescent Pseudomonas associated with the roots of rice and banana grown Sri Lanka. Plant Soil, 145:51-63, Yahya and Al-Aseawi. 1989. Occurrence of phosphate solubilizing bacteria in some Iraqi soils. Plant and Soil, 117:135-141. Yamada, Y., K. Hoshino and T. Ishikawa. 1997. The phylogeny of acetic acid bacteria based on the partial sequences of 16S ribosomal RNA: the elevation of the subgenus Gluconoacetobacter to the generic level. Biosci. Biotechnol. Biochem., 61(8):1244-1251. Zinniel, D.K., P. Lambrecht, N.B. Harris, Z. Feng, D. Kuczmarski, P. Higley, C.A. Ishimaru, A. Arunakumari, R.G. Barletta and A.K. Vidaver. 2002. Isolation and characterization of endophytic colonizing bacteria from agronomic crops and prairie plants. Appl. Environ. Microbiol., 68(5):2198-208. Zhao Y., Christensen S. K., Fankhauser C., Cashman J. R., Cohen J. D., Weigel D., Chory J. (2001) A role for flavin monooxygenaselike enzymes in auxin biosynthesis. Science 291: 306–309. Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 85 PHỤ LỤC Phụ lục 1: Thành phần môi trường Burk không đạm(Park et al., 2005) Hóa chất Khối lượng (g/l) Sucrose 10 KH2PO4 0,41 K2HPO4 0,52 Na2SO4 0,05 CaCl2 0,2 MgSO4.7H2O 0,1 FeSO4.7H2O 0,005 Na2MoO4.2H2O 0,0025 pH 7,0 Phụ lục 2: Thành phần môi trường NBRIP lỏng (Nautiyal, 1999) Hóa chất Khối lượng (g/l) Sucrose 10 MgCl2.6H2O MgSO4.7H2O 0,25 KCl 0,2 (NH4)2SO4 0,1 Apatit pH 7,0 Phụ lục 3: Thành phần môi trường King B (Mazumdar et al, 2007) Hóa chất Khối lượng (g/l) Peptone 20 g/l MgSO4.7H2O 1M ml/l K2HPO4 1,5 g/l Glycerol ml/l pH 7±2 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 86 - Môi trường nhân nuôi vi khuẩn nội sinh. Phụ lục 4: Thành phần môi trường Nfb (Krieg Döbereiner, 1984) Khối lượng (g/l) Hóa chất - D L malic acid K2HPO4 0,5 MgSO4.7H2O 0,2 CaCl2 0,02 NaCl 0,1 KOH 4,5 Dung dịch vitamin(1) 1ml Dung khoáng vi lượng(2) 2ml 1,64% dung dịch FeEDTA 4ml 4ml Bromothymol blue 2ml Agar 20 pH 6.8 Thành phần dung dịch vi lượng gồm: 0,4g/l CuSO4; 0,12g/l ZnSO4.7H2O; 1.4g/l H3BO3; 1.5g/l MnSO4.H2O; 1g/l Na2MoO4.2H2O - Thành phần dung dịch vitamin: 1mg/l biotin; 2mg/l pyridoxine –HCl. Phụ lục : Thành phần môi trường Fallik. Khối lượng(g/l) Hóa chất Acid malic 4g KH2PO4: 4g K2HPO4: 6g Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 87 Na-Succinate: 5g NH4Cl: 1g MgSO4 .7H2O: 0,2g Cao nấm men: 0,2g NaOH: 3,5g Nước cất vừa đủ lít pH 6.8 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 88 KẾT QUẢ XỬ LÝ BẰNG PHẦN MỀM IRISSTAT 5.0 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CC FILE CCLL 11/ 6/** 6:11 ---------------------------------------------------------------- PAGE anh huong cua vi khuan noi sinh va phan bon den chieu cao cay, so nhanh toi da so bong cua lua lai TH 3-3 VARIATE V003 CC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF SQUARES MEAN F RATIO PROB SQUARES ER LN ============================================================================= CT 1704.29 213,036 32.10 0,000 * RESIDUAL 18 119.443 6.63572 ----------------------------------------------------------------------------* TOTAL (CORRECTED) 26 1823,73 70,1436 ----------------------------------------------------------------------------BALANCED ANOVA FOR VARIATE SN FILE CCLL 11/ 6/** 6:11 ---------------------------------------------------------------- PAGE anh huong cua vi khuan noi sinh va phan bon den chieu cao cay, so nhanh toi da, so bong cua lua lai TH 3-3 VARIATE V004 SN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF SQUARES MEAN F RATIO PROB SQUARES ER LN ============================================================================= CT 59.1234 7.39042 60,27 0,000 * RESIDUAL 18 2.20707 .122615 ----------------------------------------------------------------------------* TOTAL (CORRECTED) 26 61.3304 2.35886 ----------------------------------------------------------------------------BALANCED ANOVA FOR VARIATE SB FILE CCLL 11/ 6/** 6:11 ---------------------------------------------------------------- PAGE anh huong cua vi khuan noi sinh va phan bon den chieu cao cay, so nhanh toi da, so bong cua lua lai TH 3-3 VARIATE V005 SB LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF SQUARES MEAN SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT 21.2373 2.65466 39.42 0,000 * RESIDUAL 18 1.21220 .673445E-01 ----------------------------------------------------------------------------* TOTAL (CORRECTED) 26 22.4495 .863441 ----------------------------------------------------------------------------- Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 89 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE CCLL 11/ 6/** 6:11 ---------------------------------------------------------------- PAGE anh huong cua vi khuan noi sinh va phan bon den chieu cao cay, so nhanh toi da,so bong cua lua lai TH 3-3 MEANS FOR EFFECT CT -----------------------------------------------------------------------------CT NOS 3 3 3 3 CC 107.780 103,760 101.330 97.6700 83,6700 105.890 103,220 99.7800 86.3300 SN 8.89000 8.33000 8.00000 6.44000 4.78000 8.67000 8.44000 7.00000 5.00333 SB 5.78000 5.33000 5.22000 4.78000 3,22000 5.56000 5.44000 5.00000 3,33000 SE(N= 3) 1.48725 0,202167 0,149827 5%LSD 18DF 4.41883 0,600669 0,445158 -----------------------------------------------------------------------ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE CCLL 11/ 6/** 6:11 ---------------------------------------------------------------- PAGE anh huong cua vi khuan noi sinh va phan bon den chieu cao cay, so nhanh toi da,so bong cua lua lai TH 3-3 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL. SECTION - VARIATE CC SN SB GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V| CT | (N= 27) ---------------SD/MEAN| | NO. BASED ON BASED ON% | | OBS. TOTAL SS RESID SS | | 27 98.826 8.3752 2.5760 2.6 0,0000 27 7.2837 1.5359 0,35016 4.8 0,0000 27 4.8511 0,92922 0,25951 5.3 0,0000 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 90 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CC FILE CCLT 11/ 6/** 6:19 ---------------------------------------------------------------- PAGE Anh huong cua vi khuan noi sinh va phan bon den chieu cao cay, so nhanh toi đa,so bong cua lua thuan Băc Thơm VARIATE V003 CC LN SOURCE OF VARIATION SQUARES SQUARES DF SUMS OF LN MEAN F RATIO PROB ER ============================================================================= CT 1005.80 125.725 10,66 0,000 * RESIDUAL 18 212.334 11.7963 ----------------------------------------------------------------------------* TOTAL (CORRECTED) 26 1218.14 46.8514 ----------------------------------------------------------------------------BALANCED ANOVA FOR VARIATE SN FILE CCLT 11/ 6/** 6:19 ---------------------------------------------------------------- PAGE Anh huong cua vi khuan noi sinh va phan bon den chieu cao cay, so nhanh toi da,so bong cua lua thuan Băc Thơm VARIATE V004 SN LN SOURCE OF VARIATION SQUARES SQUARES DF SUMS OF LN MEAN F RATIO PROB ER ============================================================================= CT 81.7266 10,2158 48.12 0,000 * RESIDUAL 18 3,82160 .212311 ----------------------------------------------------------------------------* TOTAL (CORRECTED) 26 85.5482 3,29032 ---------------------------------------------------------------------------BALANCED ANOVA FOR VARIATE SB FILE CCLT 11/ 6/** 6:19 ---------------------------------------------------------------- PAGE Anh huong cua vi khuan noi sinh va phan bon den chieu cao cay, so nhanh toi da,so bong cua lua thuan Băc Thơm VARIATE V005 SB LN SOURCE OF VARIATION SQUARES SQUARES DF SUMS OF LN MEAN F RATIO PROB ER ============================================================================= * TOTAL (CORRECTED) 26 28.8605 1.11002 ----------------------------------------------------------------------------TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE CCLT 11/ 6/** 6:19 ---------------------------------------------------------------- PAGE Anh huong cua vi khuan noi sinh va phan bon den chieu cao cay, so nhanh toi da,so bong cua lua thuan Băc Thơm Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 91 MEANS FOR EFFECT CT -----------------------------------------------------------------------------CT NOS 3 3 3 3 CC 98.8900 94.1100 90,5600 88.1100 79.0000 96.2200 92.8900 89.7800 81.7800 SN 10,5600 9.56000 8.78000 7.78000 5.33000 10,0000 9.22000 8.33000 5.56000 SB 6.22000 5.89000 5.44000 5.11000 3,33000 6.11000 5.67000 5.33000 3,44000 SE(N= 3) 1.98295 0,266027 0,146262 5%LSD 18DF 5.89164 0,790405 0,434566 -----------------------------------------------------------------------------ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE CCLT 11/ 6/** 6:19 ---------------------------------------------------------------- PAGE Anh huong cua vi khuan noi sinh va phan bon den chieu cao cay, so nhanh toi da,so bong cua lua thuan Băc Thơm F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL. SECTION - VARIATE CC SN SB GRAND MEAN (N= 27) NO. OBS. 27 90,149 27 8.3467 27 5.1711 STANDARD DEVIATION C OF V |CT -------------------- SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | | TOTAL SS RESID SS | 6.8448 3,4346 3,8 0,0000 1.8139 0,46077 5.5 0,0000 1.0536 0,25333 4.9 0,0000 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp | | | Page 92 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SB FILE LL1 11/ 6/** 5:25 ---------------------------------------------------------------- PAGE anh huong cua vi khuan noi sinh va phan bon den nang suat lua lai TH 3-3 VARIATE V003 SB LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF SQUARES MEAN SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT 25.0543 3,13178 46.32 0,000 * RESIDUAL 18 1.21700 .676111E-01 ----------------------------------------------------------------------------* TOTAL (CORRECTED) 26 26.2713 1.01043 ----------------------------------------------------------------------------BALANCED ANOVA FOR VARIATE SH FILE LL1 11/ 6/** 5:25 ---------------------------------------------------------------- PAGE anh huong cua vi khuan noi sinh va phan bon den nang suat lua lai TH 3-3 VARIATE V004 SH LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF SQUARES MEAN SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT 2768.20 346.025 4.60 0,004 * RESIDUAL 18 1352.58 75.1431 ----------------------------------------------------------------------------* TOTAL (CORRECTED) 26 4120,77 158.491 ----------------------------------------------------------------------------BALANCED ANOVA FOR VARIATE HC FILE LL1 11/ 6/** 5:25 ---------------------------------------------------------------- PAGE anh huong cua vi khuan noi sinh va phan bon den nang suat lua lai TH 3-3 VARIATE V005 HC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF SQUARES MEAN SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT 3996.59 499.574 20,30 0,000 * RESIDUAL 18 442.894 24.6052 ----------------------------------------------------------------------------* TOTAL (CORRECTED) 26 4439.49 170,749 ----------------------------------------------------------------------------BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLHC FILE LL1 11/ 6/** 5:25 ---------------------------------------------------------------- PAGE anh huong cua vi khuan noi sinh va phan bon den nang suat lua lai TH 3-3 VARIATE V006 TLHC Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 93 LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF SQUARES MEAN SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT 104.144 13,0180 12.51 0,000 * RESIDUAL 18 18.7277 1.04043 ----------------------------------------------------------------------------* TOTAL (CORRECTED) 26 122.872 4.72583 ----------------------------------------------------------------------------BALANCED ANOVA FOR VARIATE M1000 FILE LL1 11/ 6/** 5:25 ---------------------------------------------------------------- PAGE 5anh huong cua vi khuan noi sinh va phan bon den nang suat lua lai TH 3-3 VARIATE V007 M1000 LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF SQUARES MEAN F RATIO PROB SQUARES ER LN ============================================================================= CT 1.06320 .132900 3,32 0,016 * RESIDUAL 18 .719999 .400000E-01 ----------------------------------------------------------------------------* TOTAL (CORRECTED) 26 1.78320 .685846E-01 ----------------------------------------------------------------------------BALANCED ANOVA FOR VARIATE NSLT FILE LL1 11/ 6/** 5:25 ---------------------------------------------------------------- PAGE anh huong cua vi khuan noi sinh va phan bon den nang suat lua lai TH 3-3 VARIATE V008 NSLT LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF SQUARES MEAN F RATIO PROB SQUARES ER LN ============================================================================= CT 682.130 85.2662 90,92 0,000 * RESIDUAL 18 16.8800 .937778 ----------------------------------------------------------------------------* TOTAL (CORRECTED) 26 699.010 26.8850 ----------------------------------------------------------------------------BALANCED ANOVA FOR VARIATE NSTT FILE LL1 11/ 6/** 5:25 ---------------------------------------------------------------- PAGE anh huong cua vi khuan noi sinh va phan bon den nang suat lua lai TH 3-3 VARIATE V009 NSTT LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF SQUARES MEAN SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT 268.756 33,5945 169.29 0,000 * RESIDUAL 18 3,57195 .198442 ----------------------------------------------------------------------------- Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 94 * TOTAL (CORRECTED) 26 272.328 10,4742 ----------------------------------------------------------------------------TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE LL1 11/ 6/** 5:25 ---------------------------------------------------------------- PAGE anh huong cua vi khuan noi sinh va phan bon den nang suat lua lai TH 3-3 MEANS FOR EFFECT CT -----------------------------------------------------------------------------CT NOS 3 3 3 3 SE(N= 3) 5%LSD 18DF CT SB SH HC 5.89000 5.44000 5.11000 4.56000 3,11000 5.78000 5.33000 4.89000 3,22000 194.000 191.390 189.560 180,780 166.390 193,440 190,780 182.060 167.330 169.430 164.860 162.187 148.790 135.000 167.413 164.113 151.563 137.913 0,150123 0,446038 5.00477 14.8699 2.86387 8.50898 NOS 3 3 3 3 M1000 25.4200 25.2300 25.1000 24.9600 24.7900 25.3500 25.1800 25.0500 24.8800 NSLT 25.2300 22.5100 20,7100 16.9800 10,4100 24.8200 21.9200 18.4900 11.7100 TLHC 86.8900 85.7200 85.1500 82.4633 81.1100 86.1100 85.6000 82.9000 82.1000 0,588904 1.74972 NSTT 16.9100 16.0367 15.3900 13,0200 8.20000 16.6833 15.8200 13,6100 8.51000 SE(N= 3) 0,115470 0,559100 0,257191 5%LSD 18DF 0,343078 1.66117 0,764152 -----------------------------------------------------------------------------ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE LL1 11/ 6/** 5:25 ---------------------------------------------------------------- PAGE anh huong cua vi khuan noi sinh va phan bon den nang suat lua lai TH 3-3 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL. SECTION - VARIATE SB SH GRAND MEAN (N= 27) NO. OBS. 27 4.8144 27 183,97 STANDARD DEVIATION C OF V |CT -------------------- SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | | TOTAL SS RESID SS | 1.0052 0,26002 5.4 0,0000 12.589 8.6685 4.7 0,0035 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp | | | Page 95 HC TLHC M1000 NSLT NSTT 27 27 27 27 27 155.70 84.227 25.107 19.198 13,798 13,067 2.1739 0,26189 5.1851 3,2364 4.9604 1.0200 0,20000 0,96839 0,44547 3,2 1.2 0,8 5.0 3,2 0,0000 0,0000 0,0164 0,0000 0,0000 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SB FILE LT1 11/ 6/** 5:42 ---------------------------------------------------------------- PAGE anh huong cua vi khuan noi sinh va phan bon den nang suat lua thuan Bac thom VARIATE V003 SB LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF SQUARES MEAN SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT 27.7053 3,46316 53,96 0,000 * RESIDUAL 18 1.15520 .641777E-01 ----------------------------------------------------------------------------* TOTAL (CORRECTED) 26 28.8605 1.11002 ----------------------------------------------------------------------------BALANCED ANOVA FOR VARIATE SH FILE LT1 11/ 6/** 5:42 ---------------------------------------------------------------- PAGE anh huong cua vi khuan noi sinh va phan bon den nang suat lua thuan Bac thom VARIATE V004 SH LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF SQUARES MEAN SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT 606.450 75.8062 2.32 0,066 * RESIDUAL 18 588.033 32.6685 ---------------------------------------------------------------------------* TOTAL (CORRECTED) 26 1194.48 45.9416 ----------------------------------------------------------------------------BALANCED ANOVA FOR VARIATE HC FILE LT1 11/ 6/** 5:42 --------------------------------------------------------------- PAGE 3Anh huong cua vi khuan noi sinh va phan bon den nang suat lua thuan Bac thom VARIATE V005 HC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF SQUARES MEAN SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT 769.471 96.1839 4.49 0,004 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 96 * RESIDUAL 18 385.843 21.4357 ----------------------------------------------------------------------------* TOTAL (CORRECTED) 26 1155.31 44.4351 ----------------------------------------------------------------------------BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLHC FILE LT1 11/ 6/** 5:42 ---------------------------------------------------------------- PAGE anh huong cua vi khuan noi sinh va phan bon den nang suat lua thuan Bac thom VARIATE V006 TLHC PROB LN ER SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF SQUARES MEAN F RATIO SQUARES LN ============================================================================= CT 36.7602 4.59503 2.39 0,060 * RESIDUAL 18 34.6726 1.92626 ----------------------------------------------------------------------------* TOTAL (CORRECTED) 26 71.4328 2.74742 ------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- PAGE anh huong cua vi khuan noi sinh va phan bon den nang suat lua thuan Bac thom VARIATE V007 M1000 LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF SQUARES MEAN F RATIO PROB SQUARES ER L ============================================================================= CT 1.69380 .211725 2.94 0,027 * RESIDUAL 18 1.29600 .719999E-01 ----------------------------------------------------------------------------* TOTAL (CORRECTED) 26 2.98980 .114992 ----------------------------------------------------------------------------BALANCED ANOVA FOR VARIATE NSLT FILE LT1 11/ 6/** 5:42 ---------------------------------------------------------------- PAGE anh huong cua vi khuan noi sinh va phan bon den nang suat lua thuan Bac thom VARIATE V008 NSLT LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF SQUARES MEAN SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT 208.401 26.0501 81.57 0,000 * RESIDUAL 18 5.74867 .319370 * TOTAL (CORRECTED) 26 214.150 8.23653 ----------------------------------------------------------------------------BALANCED ANOVA FOR VARIATE NSTT FILE LT1 11/ 6/** 5:42 ---------------------------------------------------------------- PAGE anh huong cua vi khuan noi sinh va phan bon den nang suat lua thuan Bac thom Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 97 VARIATE V009 NSTT LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF SQUARES MEAN SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT 89.5207 11.1901 157.67 0,000 * RESIDUAL 18 1.27747 .709704E-01 ----------------------------------------------------------------------------* TOTAL (CORRECTED) 26 90,7982 3,49224 ----------------------------------------------------------------------------TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE LT1 11/ 6/** 5:42 ---------------------------------------------------------------- PAGE anh huong cua vi khuan noi sinh va phan bon den nang suat lua thuan Bac thom MEANS FOR EFFECT CT -----------------------------------------------------------------------------CT SE(N= 5%LSD 3) 18DF CT NOS 3 3 3 3 NOS 3 3 3 3 SB 6.22000 5.89000 5.44000 5.11000 3,33000 6.11000 5.67000 5.33000 3,44000 SH 133,443 130,610 128.113 122.777 120,380 132.250 130,280 123,057 121.443 HC 117.557 114.280 111.333 105.443 102.777 116.087 113,830 106.170 103,667 TLHC 88.9000 87.4900 86.9000 85.8900 85.1000 87.7800 87.3800 86.2800 85.3600 0,146262 0,434566 3,29992 9.80455 2.67306 7.94205 0,801302 2.38079 M1000 20,5800 20,3700 20,2200 20,1000 20,0200 20,4800 20,3000 20,1600 19.6900 NSLT 15.0500 13,7100 12.2433 10,8333 6.85333 14.5300 13,1033 11.4100 7.15000 NSTT 10,5300 9.87000 9.06000 8.23000 5.35000 10,32000 9.56333 8.55000 5.51000 SE(N= 3) 0,154919 0,326277 0,153808 5%LSD 18DF 0,460288 0,969417 0,456985 ------------------------------------------------------------------------ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE LT1 11/ 6/** 5:42 ---------------------------------------------------------------- PAGE Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 98 anh huong cua vi khuan noi sinh va phan bon den nang suat lua thuan Bac thom F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL. SECTION - VARIATE SB SH HC TLHC M1000 NSLT NSTT GRAND MEAN (N= 27) NO. OBS. 27 5.1711 27 126.93 27 110,13 27 86.787 27 20,213 27 11.624 27 8.6530 STANDARD DEVIATION C OF V |CT -------------------- SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | | TOTAL SS RESID SS | 1.0536 0,25333 4.9 0,0000 6.7780 5.7156 4.5 0,0657 6.6660 4.6299 4.2 0,0040 1.6575 1.3879 1.6 0,0598 0,33910 0,26833 1.3 0,0274 2.8699 0,56513 4.9 0,0000 1.8688 0,26640 3,1 0,0000 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp | | | Page 99 [...]... nội sinh đến sinh trưởng, phát triển, năng suất lúa tại Gia Lâm được thực hiện Mục tiêu đề tài - Phân lập, tuyển chọn được các chủng vi khuẩn nội sinh ở cây lúa có các khả năng cố định đạm, phân giải lân, tổng hợp IAA cao - Đánh giá được tác động của các chủng vi khuẩn nội sinh phân lập được đến sinh trưởng, năng suất một số giống lúa trồng tại Gia Lâm Yêu cầu: - Phân lập được các chủng vi khuẩn nội sinh. .. của các chủng vi khuẩn tuyển chọn - Đánh giá được tác độngcủa các chủng vi khuẩn nội sinh tuyển chọn được đến sinh trưởng, năng suất của một số giống lúa trồng tại Gia Lâm Học vi n Nông nghiệp Vi t Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 2 CHƯƠNGI: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1.Khát quát về vi khuẩn nội sinh 1.1.1 Giới thiệu Mối quan hệ giữa vi khuẩn có ích và thực vật trong đó có các nhóm vi khuẩn. .. dụng vi khuẩn nội sinh ở cây lúa như phân lập được Burkholderia vietnamiensi, Azospirillum lipoferum từ cây lúa trồng ở miền Nam Vi t Nam(Van et al., 1994; Cao Ngọc Điệp et al., 2007) Tuy nhiên, vi c nghiên cứu và hiểu biết về các loài vi khuẩn nội sinh hữu ích ở cây lúa trồng ở đồng bằng sông Hồng chưa được tập trung nghiên cứu Vì các lý do trên, đề tài Nghiên cứu ảnh hưởng của các chủng vi khuẩn nội. .. lúa - Đánh giá đượckhả năng cố định đạm, phân giải lân, tổng hợp IAA của các chủng vi khuẩn nội sinh phân lập được, tuyển chọn được các chủng ưu vi t - Xác định ảnh hưởng của một số yếu tố (thời gian nuôi cấy, pH, nhiệt độ môi trường) tới khả năng cố định đạm, phân giải lân, tổng hợp IAA của các chủng vi khuẩn tuyển chọn - Xác định được một số yếu tố ảnh hưởng tới sự sinh trưởng và phát triển của các. .. khuẩn kích thích tăng trưởng thực vật là chủ đề của nhiều nghiên cứu gần đây Hầu hết các nghiên cứu này đều tập trung vào vi khuẩn vùng rễ của thực vật trong đó có các vi khuẩn nội sinh (Ryan et al., 2008) Vi khuẩn nội sinh là vi khuẩn sống toàn bộ hay một phần thời gian của chu kì sống của chúng trong mô thực vật, không làm tổn thương mô mà những loại vi khuẩn này có lợi ích đối với cây (Schulz và Boyle.,... nhân kiểm soát sinh học Một ứng dụng quan trọng khác của vi khuẩn nội sinhtrong nông nghiệp là khả năng kiểm soát sinh học.Với cơ chế cạnh tranh các chất dinh dưỡng, tạo sức đề kháng hệ thống và sản sinh các chất chuyển hóa chống nấm (AFMs) là phương thức hoạt động kiểm soát sinh học của vi khuẩn nội sinh Trong số các chủng vi khuẩn nội sinh, Pseudomonasđược xem là tác nhân kiểm soát sinh học tốt nhất... nguyêntốđalượngquantrọngđốivớisựsinhtrưởngvàpháttriểncủacâylúa.Kalicótácdụng xúctiếnsựdichuyểncủacácchấtđồnghoátrongcây.Ngoàira,kalicònlàmchosựdiđộngcủa sắttrongcâyđượctốtdođóảnhhưởnggiántiếpđếnquátrìnhhôhấp.Kalicũngrấtcầnchosựtổ nghợpprotit,quanhệmậtthiếtvớisựphânchiatếbào Vaitròcủakaliđốivớisinhtrưởng,cácyếutốcấuthànhnăngsuấtvànăngsuấtlúađãđượ cnhiềutácgiảtrongvàngoàinướcnghiêncứu.Nóichung,khithiếukalithìdẫnđếnsựquangh ợpcủacâybịgiảmsútrõrệt,kéotheocườngđộhôhấptănglên,làmchosựtíchluỹsảnphẩmcủa... có thể phân hủy các sợi nấm Fusarium solani (Mauch et al., 1988) Các vi khuẩn nội sinh có thể sản sinh các chất hạn chế sự phá hoại cây của tác nhân gây bệnh Các chất này gồm chất mang sắt, kháng sinh, các phân tử nhỏ khác và hàng loạt các enzyme(Glick và Pasternak., 2003) Vi khuẩn nội sinh( ví dụ như Pseudomonas putida) có thể ngăn chặn sự tăng sinh của nấm gây bệnh thực vật bằng cách sinh chất mang... của enzym trong dịch trích rễ làm tăng sự tổng hợp kích thích tăng trưởng của cây trồng(Muller et al., 1989), tăng cường khả năng hấp thu nước và chất khoáng cho cây làm tăng sự phát triển, năng suất cây trồng.Hiện nay, các nhà nghiên cứu quan tâm nhiều đến những loài vi khuẩn nội Học vi n Nông nghiệp Vi t Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 3 sinh có khả năng tốt như vi khuẩn có khả năng. .. có thể là các sản phẩm tích lũy quan trọng liên quan đến sự điều hòa sinh tổng hợp IAA 1.1.2.4.Đối kháng sinh học Vi khuẩn nội sinh có thể có khả năng làm yếu đi hay ngăn cản tác hại của các sinh vật gây hại; điều này có thể dẫn đến hiện tượng gia tăng kháng bệnh (ISR = induced systemic resistance) hay kích kháng (SAR = systemic-acquired resistance) Các nghiên cứu chỉ ra rằng vi khuẩn nội sinh khác . HỌC VI N NÔNG NGHIỆP VI T NAM PHẠM THỊ HẢI NGHIÊN CỨU ẢNH HƯỞNG CỦA CÁC CHỦNG VI KHUẨN NỘI SINH ĐẾN SINH TRƯỞNG, PHÁT TRIỂN, NĂNG SUẤT LÚA TẠI GIA LÂM . 60 3.4.1. Ảnh hưởng của môi trường đến sinh trưởng, phát triển của các chủng vi khuẩn tuyển chọn 60 3.4.2. Ảnh hưởng của nhiệt độ đến sự sinh trưởng, phát triển của các chủng vi khuẩn tuyển. tác động của các chủng vi khuẩn nội sinh phân lập được đến sinh trưởng, năng suất một số giống lúa trồng tại Gia Lâm. Yêu cầu: - Phân lập được các chủng vi khuẩn nội sinh từ cây lúa. - Đánh