ảnh hưởng của độ mặn đến hoạt tính enzyme tiêu hoá của cá tra giống lớn (pangasianodon hypophthalmus)

Nghiên cứu nhằm đánh giá mức độ ảnh hưởng của các độ mặn khác nhau lên khả năng tiêu hóa và khảo sát hoạt tính enzyme chymotrypsine, pepsine, amylase ở dạ dày và ruột cá tra giai đoạn c

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ

KHOA THUỶ SẢN

NGUYỄN THỊ MỸ LINH

ẢNH HƯỞNG CỦA ĐỘ MẶN ĐẾN HOẠT TÍNH ENZYME TIÊU HOÁ CỦA

CÁ TRA GIỐNG LỚN

(Pangasianodon hypophthalmus)

LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH NUÔI TRỒNG THUỶ SẢN

2014

KHOA THUỶ SẢN

NGUYỄN THỊ MỸ LINH

ẢNH HƯỞNG CỦA ĐỘ MẶN ĐẾN HOẠT TÍNH ENZYME TIÊU HOÁ CỦA

CÁ TRA GIỐNG LỚN

(Pangasianodon hypophthalmus)

LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH NUÔI TRỒNG THUỶ SẢN

CÁN BỘ HƯỚNG DẪN PGs Ts ĐỖ THỊ THANH HƯƠNG

2014

ẢNH HƯỞNG CỦA ĐỘ MẶN ĐẾN HOẠT TÍNH ENZYME TIÊU HOÁ CỦA

CÁ TRA GIỐNG LỚN (Pangasianodon hypophthalmus)

Nguyễn Thị Mỹ Linh 1 và Đỗ Thị Thanh Hương 1

1

Khoa Thủy Sản, Trường Đại học Cần Thơ

TÓM TẮT

Cá tra (Pangasianodon hypophthalmus) là đối tượng nuôi quan trọng ở Đồng bằng sông Cửu Long, và đang được mở rộng nuôi ở một số vùng nhiễm mặn nhẹ ven biển Nghiên cứu nhằm đánh giá mức độ ảnh hưởng của các độ mặn khác nhau lên khả năng tiêu hóa và khảo sát hoạt tính enzyme chymotrypsine, pepsine, amylase ở

dạ dày và ruột cá tra giai đoạn cá giống (25 – 30 g) Thí nghiệm được tiến hành ở 6 nghiệm thức và 3 lần lặp lại ở các độ mặn khác nhau là 0, 3, 6, 9, 12, 15 ppt, cá được thả vào bể composite 500L (chứa 400L nước) với mật độ 40 con/bể Hoạt tính của 3 enzyme (pepsine, amylase, chymotrypsine) đều tăng theo theo thời gian làm thí nghiệm từ ngày 1 đến ngày 42 và giảm đến ngày 70 Đồng thời theo độ mặn thì cả 3 men này đều thì tăng từ nghiệm thức 0 ppt đến nghiệm thức 9 ppt và giảm ở nghiệm thức cao hơn là 12, 15 ppt Hoạt tính pepsine tăng theo độ mặn từ 0 ppt (12,8±0,34 mU/mL/mg protein) đến 9 ppt (16,9±0,17 mU/mL/mg protein) và giảm xuống khi độ mặn cao hơn 9 ppt Enzyme chymotrypsine tăng từ 0 ppt (3,45±0,21 mU/mL/mg protein) lên 9 ppt (4,53±0,33 mU/mL/mg protein) và enzyme amylase tăng từ 0 ppt (330±9,58 mU/mL/mg protein) đến 9 ppt (397±13,9 mU/mL/mg protein) nhưng giảm xuống ở độ mặn 12 và 15 ppt Kết quả nghiên cứu cho thấy có thể ứng dụng nuôi cá tra ở vùng nước lợ có độ mặn đến 9 ppt

Từ khóa: cá tra, độ mặn, enzyme

ABSTRACR

Catfish (Pangasianodon hypophthalmus) is an important cultured species in the Mekong Delta , and farming is expanding in some coastal slightly salty The study aimed to evaluate the effects of different salinity on digestibility and chymotrypsine, pepsine and amylase enzyme activity in the stomach and intestine of catfish at the fingerling stage (25 - 30 g) The experiment was conducted in 6 treatments at different salinities of 0, 3 , 6 , 9 , 12 , 15 ppt and three replicates for each treatment, fish were stocked into composite tanks (500L) containing 400L of water, at density of 40 fish/tank The results showed that the activity of three enzymes ( pepsine , amylase , chymotrypsine ) increased with sampling time from the 1 to 42 day and then decreased to 70 day Enzyme activity in all the treatments increased from 0 ppt to 9 ppt treatment and reduced in higher sallinity treatments of 12 , 15 ppt Pepsine activity increased with salinity from 0 ppt (12,8 ±

0,34 mU/mL/mg protein) to 9 ppt (16,9 ± 0,17 mU/mL/mg protein) and decreased when salinity is higher than 9 ppt Chymotrypsine activity increased from 0 ppt (3,45±0,21 mU/ mL/mg protein) to 9 ppt (4,53±0,33 mU/mL/mg protein) and the

amylase activity increased from 0 ppt (330±9,58 mU/mL/mg protein) to 9 ppt (397±13,9 mU/mL/mg protein) but decreased at 12 and 15 ppt salinity The study results showed the application is possible to apply on the striped catfish in brackish water which salinity at 9 ppt

Keywords: catfish, salinity, enzyme

1 Giới thiệu

Hiện nay, ở Việt Nam ngành thủy sản có xu hướng phát triển ngày càng mạnh Nhiều đối tượng thủy sản quan trọng như tôm sú, cua biển, cá mú, cá tra…đã được nuôi, trong đó cá tra là một trong những đối tượng được nuôi phổ biến và lâu đời nhất Theo Tổng cục Thủy sản năm 2013, tính đến cuối tháng 11/2013, ĐBSCL

đã thả nuôi cá tra được 4.679 ha, đã thu hoạch 3.638 ha, sản lượng 1 triệu tấn Từ 1/1 đến 15/11/2013, xuất khẩu thủy sản của cả nước đạt 5,912 tỷ USD, trong đó, xuất khẩu cá tra đạt 1,522 tỷ USD, chiếm 25,70% và là mặt hàng xuất khẩu lớn thứ hai sau tôm

Cá tra (Pangasianodon hypophthalmus) là một loài cá da trơn sống nước

ngọt, có thể sống được ở vùng nước hơi lợ (nồng độ muối 7 - 10‰) (Phạm Văn Khánh, 2004) Bên cạnh đó, diện tích nuôi cá tra ngày càng được mở rộng ở các tỉnh

hạ nguồn sông Cửu Long như Tiền Giang, Bến Tre, Vĩnh Long, Trà Vinh và Sóc Trăng nơi có sự xâm nhập mặn vào mùa khô do lượng nước sông Mekong vào mùa này rất thấp (5‰) (Mekong River Commission, 2008) Song song đó do nước biển ngày càng dâng cao sẽ tạo điều kiện cho nước mặn xâm nhập sâu vào vùng nuôi cá nước ngọt đặc biệt ảnh hưởng tới sự bền vững của nghề nuôi cá tra do đối tượng này được nuôi tập trung ở các tỉnh ven sông Mekong

Để phát triển nghề nuôi thủy sản nói chung và nghề nuôi cá tra nói riêng, nhiều nghiên cứu về kỹ thuật nuôi, sinh lý, dinh dưỡng, bệnh học cũng được quan tâm và chú ý thực hiện Song song đó vẫn chưa có nhiều nghiên cứu về sự ảnh hưởng độ mặn đến hoạt tính của các men tiêu hóa như: pepsine, amylase,

chymotrypsine Vì thế, đề tài “Ảnh hưởng của độ mặn đến hoạt tính enzyme tiêu

hoá của cá tra (Pangasianodon hypophthalmus) giống lớn” được thực hiện Mục

tiêu của nghiên cứu này là đánh giá mức độ ảnh hưởng của các độ mặn khác nhau lên khả năng tiêu hóa của cá tra giống nhằm tìm ra độ mặn thích hợp để cá sinh trưởng phát triển tốt góp phần phục vụ cho nghề nuôi thủy sản

2 Phương pháp nghiên cứu

Nghiên cứu được thực hiện tại trại thực nghiệm của Bộ môn Dinh dưỡng và Chế biến Thuỷ Sản - Khoa Thuỷ Sản - Đại học Cần Thơ Nguồn nước ngọt dùng trong thí nghiệm là nước máy sinh hoạt, nước mặn dùng nước ót được mua từ Vĩnh Châu (Sóc Trăng) Cá thí nghiệm là cá giống với kích cỡ trung bình từ 25 – 30 g/con Thí nghiệm được bố trí theo kiểu hoàn toàn ngẫu nhiên, gồm 1 nghiệm thức

đối chứng 0 ppt và 5 nghiệm thức với các độ mặn là: 3 ppt, 6 ppt, 9 ppt, 12 ppt, 15 ppt Mỗi nghiệm thức được lặp lại 3 lần, cá được bố trí trong bể composite 500L (chứa 400L nước) có sục khí liên tục và với mật độ 40 con/bể Cá trong thí nghiệm được thuần để đạt được độ mặn của các nghiệm thức bố trí bằng cách nâng dần độ mặn lên 3ppt/ngày (vào các thời điểm 8h, 13h và 16h thuần hóa cá ở độ mặn cao trước đến khi đạt yêu cầu độ mặn của mỗi nghiệm thức thì dừng lại và bắt đầu tính thời gian thí nghiệm Thời gian thí nghiệm là 10 tuần Thức ăn được sử dụng trong thí nghiệm là thức ăn viên công nghiệp Aquafeed 30% đạm Trong quá trình thí nghiệm cá được cho ăn 2 lần/ngày (8 giờ sáng và 16 giờ chiều) Đồng thời theo dõi các yếu tố môi trường (nhiệt độ, oxy hòa tan, pH) và hoạt động của cá 2 lần/ ngày (8 giờ sáng và 14 giờ chiều) Thu mẫu để phân tích hoạt tính các enzyme trong dạ dày

và ruột của cá, cá được bỏ đói 1 ngày trước khi thu mẫu Cá sau khi bỏ đói 1 ngày, đảm bảo trong đường ruột sạch thức ăn thì tiến hành thu mẫu Sau khi giải phẩu dùng kéo cắt dạ dày và lấy đoạn ruột dài khoảng 2 cm tính từ dạ dày, dùng pen làm sạch thức ăn trong ruột và dạ dày (nếu có) Sau đó cho mẫu vào eppendorf đem trữ -

80oC trước khi tiến hành phân tích, mỗi lần thu 3 con/bể, cá được thu mẫu ở các ngày 1, 3, 7, 14, 28, 42, 56, 70 Pepsine được phân tích theo phương pháp của Worthington, T.M (1982) Amylase được phân tích theo phương pháp của Bernfeld (1951) Chymotrypsine cũng phân tích theo phương pháp của Worthington, T.M (1982)

Số liệu thu thập dùng phần mềm Excel 2010 và phần mềm SPSS phiên bản 13 để tính toán giá trị trung bình, độ lệch chuẩn và so sánh sự khác biệt về các chỉ tiêu theo dõi giữa các nghiệm thức dựa vào phân tích ANOVA và phép thử DUNCAN (mức ý nghĩa

p <0,05)

3 Kết quả và thảo luận

3.1 Yếu tố môi trường

Cá là động vật biến nhiệt nên nhiệt độ ảnh hưởng rất lớn lên quá trình tiêu hóa thức ăn, khi nhiệt độ tăng thì tốc độ tiêu hóa cũng tăng bởi có sự gia tăng hoạt tính men tiêu hóa và khi nhiệt độ giảm thì hoạt tính men cũng giảm, tỉ lệ tiêu hóa giảm và có thể làm cá bỏ ăn (Đỗ Thị Thanh Hương và Nguyễn Văn Tư, 2010)

Quốc Phú, 2006)

Bảng 1: Biến động các yếu tố môi trường trong quá trình thí nhiệm

Nghiệm

thức

NT15ppt 25,9±0,53 27,7±0,60 3,14±0,87 4,19±0,89 7,54±0,54 7,61±0,67

Trong đó pH sáng và chiều dao động trong khoảng 7,54 – 7,69, hàm lượng oxy hòa tan ít thay đổi và dao động trong khoảng 2,16 – 4,19 mg/L pH thích hợp cho hầu hết các loài cá nuôi là 6,5 – 9 và hàm lượng oxy hòa tan lý tưởng cho cá tôm

cá là trên 5 mg/L (Trương Quốc Phú, 2006)

Nhìn chung, các yếu tố môi trường trong thời gian thí nghiệm biến động

không lớn và tương đối thích hợp cho sự tăng trưởng của cá tra

3.2 Hoạt tính men pepsine ở dạ dày

Bảng 2: Hoạt tính pepsine (mU/mL/mg protein) ở các độ mặn khác nhau

Ngày 1 12,4±0,04aA 12,8±0,99aA 12,8±0,08aA 12,7±0,27aA 12,5±0,49aA 12,3±0,53aA Ngày 3 12,8±0,35aA 12,8±0,02aA 12,8±0,10aAB 12,8±0,13aA 12,8±0,06aA 12,8±0,13aA Ngày 7 12,8±0,22 aA 12,9±0,12 aA 12,9±0,58 aAB 13,0±0,02 aA 12,9±0,05 aA 12,9±0,02 aA

Ngày 14 12,7±0,32aA 13,3±0,23bA 13,6±0,16bB 13,6±0,21bB 13,2±0,22bB 13,2±0,26bB Ngày 28 12,8±0,32aA 15,1±0,48cB 15,3±0,42cC 15,6±0,21cC 14,3±0,23bC 14,1±0,38bC Ngày 42 12,8±0,34aA 16,2±0,42cC 16,3±0,70cD 16,9±0,17cD 14,7±0,31aC 14,3±0,32bC Ngày 56 12,7±0,03aA 15,3±0,05cBC 15,6±0,08cC 16,3±0,06dC 13,7±0,26bBC 13,7±0,24bBC Ngày 70 12,7±0,08aA 15,2±0,22cB 15,4±0,59cC 15,7±0,98cC 13,5±0,13bBC 13,5±0,21bBC

Giá trị là số trung bình ± độ lệch chuẩn Giá trị có các chữ cái khác nhau (A, B, C, D trong cùng 1

cột và a, b, c, d trong cùng 1 hàng) khác biệt có ý nghĩa thống kê (p<0,05)

Kết quả thí nghiệm cho thấy hoạt tính men pepsine ở dạ dày cá có xu hướng tăng theo độ mặn từ nghiệm thức 0 ppt đến nghiệm thức 9 ppt và có chiều hướng giảm khi ở hai độ mặn cao hơn là 12, 15 ppt Trong suốt thời gian thí nghiệm hoạt tính men pepsine đạt giá trị cao nhất ở nghiệm thức 9 ppt và thấp nhất ở nghiệm thức đối chứng 0 ppt

Hoạt tính men pepsine trung bình cao nhất ở nghiệm thức 9 ppt, đến những nghiệm thức thấp hơn là nghiệm thức 6 ppt, nghiệm thức 3 ppt, hai nghiệm thức 12

và 15 ppt tương đương nhau, thấp nhất là nghiệm thức 0 ppt Men pepsine ở ngày 42 tăng từ nghiệm thức 0 ppt đến nghiệm thức 9 ppt (từ 12,8 tăng lên 16,9 mU/mL/mg protein) và hoạt tính men pepsine giảm (từ 16,9 xuống 14,7 và 14,3 mU/mL/mg protein) khi ở hai độ mặn cao hơn 9 ppt là 12, 15 ppt Men pepsine tác động lên những thành phần chất đạm biến đổi chất đạm trong thức ăn thành dạng albumose và peptose do cá sống trong môi trường nước phải tiêu tốn năng lượng cho quá trình điều hòa áp suất từ đó làm tăng hoạt tính enzyme để thúc đẩy quá trình tiêu hóa diễn

ra nhanh hơn đáp ứng đủ năng lượng cho cơ thể

Hoạt tính men pepsine tăng từ ngày 1 đến ngày 42 ở tất cả các nghiệm thức nhưng có xu hướng giảm kể từ ngày 56 đến khi kết thúc thí nghiệm Cụ thể như ở nghiệm thức 9 ppt có sự khác biệt không có ý nghĩa thống kê từ ngày 1 (12,7±0,27 mU/mL/mg protein) đến ngày 7 (13,0±0,02 mU/mL/mg protein) Ngày 14

(13,6±0,21 mU/mL/mg protein) đến ngày 70 (15,7±0,98 mU/mL/mg protein) thì hoạt tính men pepsine có ý nghĩa thống kê Theo Lee and Shu (1989) proteases ở cá được nuôi trong nước mặn cao hơn ở cá nước ngọt nhưng đối với những loài rộng muối

như cá rô phi (O niloticus) thì hoạt tính của enzyme trypsine, chymotrypsin và

pepsin không thay đổi đáng kể từ ở độ mặn từ 0,1 - 20 ppt Điều này phù hợp với kết quả của thí nghiệm hàm lượng pepsine ở dạ dày cá tăng từ độ mặn thấp đến độ mặn cao

Wang et al., (2006) nghiên cứu về độ tuổi và chế độ cho ăn ảnh hưởng nhiều

đến enzyme tiêu hóa thấy rằng pepsin và trypsine gia tăng đáng kể ở giai đoạn đầu

và giảm ở thời gian sau nhưng thời gian không giống nhau giữa các nhóm enzyme

Theo Jei et al., (2009) nghiên cứu được thực hiện trên cá hồi (Oncorhynchus keta)

về hoạt tính men protease, amylase, lipase và phosphatase ở các cơ quan dạ dày, manh tràng, môn vị, ruột và gan Sau thời gian thí nghiệm thấy rằng hoạt tính của men protease trong dạ dày và đường ruột ở 30 ngày đầu cao hơn so với 130 ngày Trong 30 ngày đầu hoạt tính men protease và amylase trong dạ dày khác biệt không

có ý nghĩa (p<0,05) ở các độ mặn thí nghiệm Hoạt tính men protease trong dạ dày sau 130 ngày khác biệt có ý nghĩa (p<0,05) ở độ mặn 10 và 15 ppt Ở 0 ppt hoạt tính men protease và amylase cao nhất ở manh tràng và môn vị, men protease ở gan là thấp nhất, trong khi amylase và lipase ở gan cao nhất Men phosphatase đạt cao nhất trong ruột khi ở độ mặn 10 ppt Hoạt tính của enzyme cũng phụ thuộc vào nhiều yếu

tố tác động lên (oxy, nhiệt độ, pH, kích cỡ cá, áp suất thẫm thấu…) (Lê Thanh Hùng, 2008)

Một số tài liệu cho rằng độ mặn đã ảnh hưởng đến hoạt tính của các enzyme

trong dạ dày và đường ruột của động vật thủy sản Theo Li et al.,(2008) nghiên cứu

ảnh hưởng của độ mặn khác nhau (3, 17 và 32 ppt) lên hoạt động của các enzyme

tiêu hóa của tôm (Litopenaeus vannamei) thì thấy hoạt động của trypsin ở 3 ppt cao

hơn có ý nghĩa so với 17 và 32 ppt, trong khi hoạt động của amylase ở 17 ppt thì thấp hơn ở 3 ppt; nhưng hoạt động của cellulase và lipase không ảnh hưởng bởi độ mặn khác nhau (khác biệt không có ý nghĩa) Như vậy, ở độ mặn thấp gần điểm đẳng áp hoạt tính của enzyme đạt tối ưu Qua nghiên cứu trên cũng cho thấy được

độ mặn chính là một trong những nhân tố quan trọng ảnh hưởng đến hoạt tính của pepsine Qua đó cho thấy hoạt tính pepsine tăng cùng với độ mặn nhưng chỉ ở nghiệm thức 0 ppt đến nghiệm thức 9 ppt, cao hơn nghiệm thức 9 ppt thì hoạt tính pepsine bắt đầu giảm

3.3 Hoạt tính men amylase ở ruột

Kết quả bảng 3 cho thấy hoạt tính men amylase tăng dần từ các độ mặn 0, 3,

6, 9 ppt và bắt đầu giảm ở hai độ mặn cao là 12, 15 ppt, đạt giá trị trung bình cao nhất vẫn là nghiệm thức 9 ppt, thấp nhất ở nghiệm thức đối chứng 0 ppt

Sau 7 ngày nuôi cho thấy hoạt tính men amylase ở tất cả các nghiệm thức khác biệt không có ý nghĩa thống kê (p>0,05) nhưng đến ngày 14 thì có sự thay đổi

men amylase cao nhất ở nghiệm thức 9 ppt (368±17,3 mU/min/mg protein) và thấp nhất ở nghiệm thức 0 ppt (335±4,47 mU/min/mg protein) hai nghiệm thức này khác biệt có ý nghĩa thống kê với nhau, riêng nghiệm thức 3, 6,12, 15 ppt thì khác biệt không có ý nghĩa thống kê với nghiệm thức 0 ppt Đến ngày 28 thì giữa nghiệm thức đối chứng 0 ppt và các nghiệm thức khác thì khác biệt có ý nghĩa thống kê và

cao nhất vẫn là nghiệm thức 9 ppt

Bảng 3: Hoạt tính amylase (mU/min/mg protein) ở các độ mặn khác nhau

Ngày 1 322±3,45aA 324±4,23aA 325±4,49aA 325±2,99aA 324±4,95aA 323±6,30aA Ngày 3 323±5,35aA 331±5,65aA 330±4,89aA 331±7,31aA 323±3,46aA 326±5,41aA Ngày 7 332±10,5 aA 340±5,00 aBC 337±11,1 aA 348±14,4 aAB 337±9,09 aAB 335±8,90 aA

Ngày 14 335±4,47aA 348±7,51abB 350±12,5abAB 368±17,3bB 344±15,1aB 345±4,74aB Ngày 28 328±12,2aA 365±13,0bcC 366±11,9bcB 377±9,01cC 361±14,6bcC 350±9,58bBC Ngày 42 330±9,58aA 382±12,7cdD 383±12,0cdC 397±13,9dC 368±10,7bcC 360±9,30bC Ngày 56 328±0,63aA 377±5,88cCD 372±4,63cBC 378±2,12cC 356±5,32bBC 351±0,78bBC Ngày 70 328±0,45aA 366±5,80cCD 365±8,48cB 366±9,26cB 340±1,21bB 336±3,83abAB

Giá trị là số trung bình ± độ lệch chuẩn Giá trị có các chữ cái khác nhau (A, B, C, D trong cùng 1 cột và a, b, c, d trong cùng 1 hàng) khác biệt có ý nghĩa thống kê (p<0,05)

Qua bảng 3 cho thấy, hoạt tính men amylase ở nghiệm thức đối chứng 0 ppt khác biệt không có ý nghĩa thống kê (p>0,05) ở các lần thu mẫu Nhưng ở tất cả các nghiệm thức có độ mặn lần lượt là (3, 6, 9, 12, 15 ppt) thì có sự khác biệt có ý nghĩa theo thời gian, cao nhất là ở ngày 42 Ở nghiệm thức 9 ppt ta thấy từ ngày 1 đến ngày 7 hoạt tính men amylase có tăng nhưng tăng nhẹ từ (325±2,99 mU/min/mg protein) lên (348±14,4 mU/min/mg protein) không có ý nghĩa thống kê với nhau nhưng đến ngày 14 thì hoạt tính amylase ở ruột cá (368±17,3 mU/min/mg protein)

đã có sự khác biệt có ý nghĩa thống kê và sự khác biệt này vẫn tiếp tục kéo dài đến khi kết thúc thí nghiệm ngày thứ 70 (366±9,26 mU/min/mg protein)

Qua đó cho thấy cá tra có thể nuôi ở nhiều độ mặn khác nhau nhưng để sinh trưởng và phát triển tốt cũng cần tìm ra độ mặn thích hợp Theo Nguyễn Chí Lâm (2010) tăng trưởng của cá tra ở nghiệm thức nuôi 9 ppt ở 90 ngày nuôi đạt cao nhất (68,5 g/con) và khác biệt với các nghiệm thức còn lại (p<0,05) Tốc độ tăng trưởng của nghiệm thức nuôi ở độ mặn 9 ppt là cao nhất (0,5 g/ngày) Kết quả cho thấy nuôi cá tra ở độ mặn 9 ppt cho tăng trưởng cao nhất và hệ số chuyển hóa thức ăn

thấp nhất Huỳnh Hiếu Lộc, (2009) nghiên cứu về sự tăng trưởng của cá bống tượng

(Oxyeleotris marmoratus) ở các độ mặn 0, 5, 10, 15, 20 ppt, cá tăng trưởng tốt nhất

(0,09±0,01 g/ngày) cũng ở độ mặn có điểm đẳng áp giữa cơ thể và môi trường tại 10 ppt, càng xa điểm đẳng áp thì tăng trưởng của cá càng giảm

Nghiên cứu trên cho thấy khi nuôi cá ở những độ mặn khác nhau đã ảnh hưởng đến hoạt tính enzyme tiêu hóa, kết quả nghiên cứu cho thấy nuôi cá tra 9 ppt thì cá tiết enzyme nhiều, do ở độ mặn này đã tác động làm tăng hoạt tính enzyme pepsine và chymotrypsine nên cá sử dụng thức ăn hiệu quả ngoài ra do ở gần điểm

đẳng áp là 12 ppt ( Ngô Tú Trinh, 2012) cá tốn ít năng lượng cho quá trình điều hòa

áp suất thẩm thấu và các quá trình duy trì sự sống khác nên cá tăng trưởng tốt ở các nghiệm thức điều này đúng với nhận định của Boeuf and Payan (2001) khi độ mặn môi trường tăng cá sẽ tốn nhiều năng lượng cho quá trình điều hòa áp suất thẫm thấu và ion

Một số nghiên cứu cho thấy hoạt tính amylase của cá hồi tăng lên theo kích

cỡ của cá và khi cá đạt 100 g thì hoạt tính của men là cao nhất Tương tự ở các loài

cá khác, hoạt tính protease và amylase giảm dần khi cá đạt kích thước trưởng thành

và enzyme tiêu hóa có hoạt tính thay đổi theo: tuổi cá, trạng thái sinh lý, mùa vụ, các yếu tố môi trường (Lê Thanh Hùng, 2008) Cá trong thí nghiệm này ở độ mặn 6

và 9 ppt có biểu hiện ăn mạnh hơn các nghiệm thức 12, 15 ppt điều đó cho thấy nguyên nhân có thể do cá không thích nghi ở độ mặn cao vì ở độ mặn này theo quan sát thấy ở các bể nuôi cá có biểu hiện giảm ăn và hoạt động không mạnh Ngoài ra các enzyme như pepsine, chymotrypsine cũng bị ảnh hưởng bởi độ mặn làm cho hệ tiêu hóa bị rối loạn cá hấp thu kém, tăng trưởng chậm

Qua thí nghiệm trên cho thấy hoạt tính men amylase trong thí nghiệm tăng từ nghiệm thức đối chứng 0 ppt đến nghiệm thức 9 ppt và giảm ở hai nghiệm thức 12,

15 ppt, chứng tỏ khi độ mặn tăng quá cao thì sẽ làm giảm hoạt tính amylase trong ruột cá Từ các kết quả trên cho thấy được độ mặn chính là yếu tố làm thay đổi hoạt tính của hệ enzyme tiêu hóa trong ruột cá

cá ăn động vật Cá tráp (Sparus aurata), Cá bơn (Scophthahmus maximus) và cá hồi

đỏ (Sebastes mentella) cho thấy trong cá hồi đỏ hoạt tính amylase đã tăng ở tất cả

các nồng độ muối (từ 0 đến 0,5M) hoạt tính amylase ở dạ dày cao hơn ở ruột tuy nhiên trong cá bơn, nồng độ NaCl thấp thì hoạt tính amylase tăng nhưng nồng độ muối cao lại ức chế, trong cá tráp hoạt tính này đã bị giảm mạnh khi nồng độ muối tăng nhưng một sự gia tăng nhỏ trong dạ dày đã được phát hiện khi có nồng độ NaCl thấp Kết quả này cho thấy sự tác động của độ mặn đã làm thay đổi hoạt tính của amylase nhưng tùy theo loài mà có sự tăng hay giảm khác nhau

3.4 Hoạt tính men chymotrypsine ở ruột cá tra

Hoạt tính men chymotrypsine ở thí nghiệm này cũng giống với hai men pepsine và amylase là đều tăng từ nghiệm thức đối chứng 0 ppt đến nghiệm thức 9 ppt và có xu hướng giảm xuống ở hai độ mặn cao là 12, 15 ppt Nhưng có sự khác giữa hoạt tính chymotrypsine với hai hoạt tính men pepsine và amylase đến ngày 28 mới có sự khác biệt có ý nghĩa thống kê giữa nghiệm thức đối chứng 0 ppt với hai nghiệm thức 6, 9 ppt và khác biệt không có ý nghĩa thống kê với các nghiệm thức 3,

12, 15 ppt

Chymotrypsine là một protease được tiết ra từ tuyến tụy được tụy tiết ra dưới dạng không hoạt động là chymotrypsinogen, sau đó được chuyển sang dạng hoạt động là chymotrypsine nhờ tác dụng của trypsine Khi chymotrypsine phối hợp với

trypsine cùng tác động lên protein, sẽ đạt hiệu quả cao hơn sự tác động của từng men riêng lẻ, hoạt tính của chymotrypsine tương đối yếu hơn trypsine nhưng lại có khả năng thủy phân protein sâu sắc hơn Chymotrypsine là một protease kiềm tương tự như trypsine Trong ruột non, chymotrypsine thủy phân protein và các sản phẩm đã được tiêu hóa một phần bởi pepsine để tạo ra các peptide ngắn và các amino acid tự

do (Nguyễn Văn Mùi, 2012) Chymotrypsin và trypsine là hai loại men giữ vai trò quan trọng nhất giúp cho việc tiêu hoá thức ăn có nguồn gốc đạm (Hofer and

Schiemer, 1981)

Bảng 4: Hoạt tính chymotrypsine (mU/mL/mg protein) ở các độ mặn khác nhau

Ngày 1 3,34±0,17aA

3,36±0,10aA 3,39±0,06aA 3,56±0,42aA 3,38±0,27aA 3,33±0,88aA Ngày 3 3,38±0,16aA

3,40±0,11aA 3,43±0,21aA 3,64±0,79aA 3,39±0,78aA 3,35±0,44aA Ngày 7 3,40±0,23aA

3,51±0,19aAB 3,52±0,10aA 3,57±0,06aA 3,49±0,14aA 3,48±0,93aA Ngày 14 3,45±0,40 aA

3,85±0,02aAB 3,87±0,07aAB 3,96±0,21aAB 3,64±0,08aA 3,55±0,68aA Ngày 28 3,47±0,18 aA

4,13±0,44abB 4,21±0,47bBC 4,25±0,33bAB 3,73±0,25abA 3,68±0,31abA Ngày 42 3,45±0,21 aA

4,38±0,24bC 4,40±0,34bC 4,53±0,33bB 3,85±0,39aA 3,77±0,10aA Ngày 56 3,43±0,80 aA

4,15±0,02bB 4,26±0,22bBC 4,38±0,28bB 3,70±0,25aA 3,67±0,16aA Ngày 70 3,44±0,03 aA

4,06±0,13abB 4,10±0,23abB 4,17±0,17bAB 3,63±0,60abA 3,67±0,52abA

Giá trị là số trung bình ± độ lệch chuẩn Giá trị có các chữ cái khác nhau (A, B, C, D trong cùng 1

cột và a, b, c, d trong cùng 1 hàng) khác biệt có ý nghĩa thống kê (p<0,05)

Nhìn chung, hoạt tính men chymotrypsine có sự khác biệt không có ý nghĩa thống kê (p>0,05) giữa nghiệm thức đối chứng và nghiệm thức 3, 6, 9, 12, 15 ppt ở những ngày 1, 3, 7, 14 nhưng ở ngày 28 thì giữa nghiệm thức đối chứng 0 ppt (3,47±0,18 mU/mL/mg protein )với các nghiệm thức của các độ mặn 3, 12, 15 ppt (4,13±0,44, 3,73±0,25 và 3,68±0,31 mU/mL/mg protein )có sự khác biệt không có

ý nghĩa thống kê (p>0,05) và khác biệt có ý nghĩa thống kê với 2 nghiệm thức 6 ppt (4,21±0,47 mU/mL/mg protein )và 9 ppt (4,25±0,33 mU/mL/mg protein) Qua đó cho thấy theo thời gian thí nghiệm thì hoạt tính men chymotrypsine của cá đạt giá trị

cao nhất ở ngày 42

Hoạt tính men chymotrypsine ở tất cả các nghiệm thức (0, 3, 6, 9, 12, 15 ppt) điều tăng cao nhất ở ngày 42, đạt cao nhất ở nghiệm thức 9 ppt (4,53±0,33 mU/mL/mg protein Điều này cho thấy hoạt tính chymotrypsine có sự thay đổi theo

thời gian và theo độ mặn Hidalgo et al., (2011) khi nghiên cứu về các enzyme tiêu hóa của hai loài cá nước ngọt (Limia vittata và Gambusia punctata) với tập tính ăn

khác nhau ở ba giai đoạn phát triển đã kết luận hoạt tính của enzyme trypsine và chymotrypsine tăng theo độ tuổi cá, trong khi hoạt động amylase lại giảm Theo

Chiang et al., (1987) nghiên cứu một số độ mặn kích hoạt các enzyme phân giải

protein từ dạ dày cá hồi và cá tuyết, chỉ ra rằng độ mặn có thể tăng cường hoạt động của protease nhất định Shehadah and Gordon (1969) cho rằng thành phần của nước