Nghiên cứu đặc điểm thực vật và thành phần hóa học của cây nhàu núi ở tỉnh ninh thuận

Nghiên cứu đặc điểm thực vật và thành phần hóa học của cây nhàu núi ở tỉnh ninh thuận Nghiên cứu đặc điểm thực vật và thành phần hóa học của cây nhàu núi ở tỉnh ninh thuận Nghiên cứu đặc điểm thực vật và thành phần hóa học của cây nhàu núi ở tỉnh ninh thuận Nghiên cứu đặc điểm thực vật và thành phần hóa học của cây nhàu núi ở tỉnh ninh thuận Nghiên cứu đặc điểm thực vật và thành phần hóa học của cây nhàu núi ở tỉnh ninh thuận Nghiên cứu đặc điểm thực vật và thành phần hóa học của cây nhàu núi ở tỉnh ninh thuận Nghiên cứu đặc điểm thực vật và thành phần hóa học của cây nhàu núi ở tỉnh ninh thuận Nghiên cứu đặc điểm thực vật và thành phần hóa học của cây nhàu núi ở tỉnh ninh thuận Nghiên cứu đặc điểm thực vật và thành phần hóa học của cây nhàu núi ở tỉnh ninh thuận Nghiên cứu đặc điểm thực vật và thành phần hóa học của cây nhàu núi ở tỉnh ninh thuận Nghiên cứu đặc điểm thực vật và thành phần hóa học của cây nhàu núi ở tỉnh ninh thuận Nghiên cứu đặc điểm thực vật và thành phần hóa học của cây nhàu núi ở tỉnh ninh thuận Nghiên cứu đặc điểm thực vật và thành phần hóa học của cây nhàu núi ở tỉnh ninh thuận Nghiên cứu đặc điểm thực vật và thành phần hóa học của cây nhàu núi ở tỉnh ninh thuận Nghiên cứu đặc điểm thực vật và thành phần hóa học của cây nhàu núi ở tỉnh ninh thuận Nghiên cứu đặc điểm thực vật và thành phần hóa học của cây nhàu núi ở tỉnh ninh thuận Nghiên cứu đặc điểm thực vật và thành phần hóa học của cây nhàu núi ở tỉnh ninh thuận Nghiên cứu đặc điểm thực vật và thành phần hóa học của cây nhàu núi ở tỉnh ninh thuận Nghiên cứu đặc điểm thực vật và thành phần hóa học của cây nhàu núi ở tỉnh ninh thuận Nghiên cứu đặc điểm thực vật và thành phần hóa học của cây nhàu núi ở tỉnh ninh thuận Nghiên cứu đặc điểm thực vật và thành phần hóa học của cây nhàu núi ở tỉnh ninh thuận Nghiên cứu đặc điểm thực vật và thành phần hóa học của cây nhàu núi ở tỉnh ninh thuận Nghiên cứu đặc điểm thực vật và thành phần hóa học của cây nhàu núi ở tỉnh ninh thuận Nghiên cứu đặc điểm thực vật và thành phần hóa học của cây nhàu núi ở tỉnh ninh thuận Nghiên cứu đặc điểm thực vật và thành phần hóa học của cây nhàu núi ở tỉnh ninh thuận Nghiên cứu đặc điểm thực vật và thành phần hóa học của cây nhàu núi ở tỉnh ninh thuận Nghiên cứu đặc điểm thực vật và thành phần hóa học của cây nhàu núi ở tỉnh ninh thuận Nghiên cứu đặc điểm thực vật và thành phần hóa học của cây nhàu núi ở tỉnh ninh thuận Nghiên cứu đặc điểm thực vật và thành phần hóa học của cây nhàu núi ở tỉnh ninh thuận

BỘ Y TÊTRƯỜNG ĐẠI HỌC Dược HÀ NỘI

TRẦN PHƯƠNG THUỲ

NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM THựC v ậ t

VÀ THÀNH PHẦN HOÁ HỌC CỦA CÂY NHÀU

NÚI Ở TỈNH NINH THUẬN

( KHOÁ LUẬN TỐT NGHIỆP DUỢC sĩ KHOÁ

Người hướng dẫn : TS Nguyễn Viết Thân

DS Lê Đình Bích Nơi thực hiện : Bộ môn Dược liệuThời gian thực hiện : Tháng 2-5/2004

HÀ NỘI, THÁNG 5-2004

Ĩ ắ i cẴnvcttu

Với lòng kính trọng và biết ơn sâu sắc, em xin chân thành cảm ơn TS Nguyễn Viết Thân, DS Lê Đình Bích, người đã trực tiếp hướng dẫn, chỉ bảo tận tình và giúp đỡ em hoàn thành khoá luận tốt nghiệp.

Em cũng xin chân thành cảm ơn TS Bành Như Cương cùng toàn bộ các thầy cô giáo, các cán bộ kỹ thuật viên Bộ môn Dược liệu đã đóng góp những ý kiến quý báu và tạo điều kiện cho em hoàn thành luận văn này Nhân dịp này em cũng xin được bày tỏ lòng cảm ơn tới người thân, bạn

bè đã luôn động viên, giúp đỡ em trong suốt quá trình làm khoá luận.

Hà Nội, ngày 31 tháng 5 năm 2004

Sinh viênTrần Phương Thuỳ

MỤC LỤC

ĐẶT VẤN Đ Ề 1

PHẦN I: TỔNG QUAN 1

1 Vị trí phân loại chi Morinda 1

2 Đặc điểm hình thái cơ bản của họ Cà phê 2

3 Đặc điểm hình thái của chi Morinda 3

4 Đặc điểm hình thái một số loài nhàu thuộc chi Morinda 3

4.1 Cây Nhàu (Morinda citrifolia L ) 3

4.2 Cây nhàu (Morinda trimera Hillebr.) 4

5 Đặc điểm hoá học của một số cây nhàu 5

6 Tác dụng, công dụng và chế phẩm của một số cây nhàu 7

PHẦN II: NGUYÊN LIỆU VÀ PHUƠNG PHÁP NGHIÊN c ú u 11

1 Nguyên liệu 11

2 Phương pháp nghiên cứu 11

PHẦN III: THỤC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ 1 Đặc điểm thực vật 14

1.1 Cây Nhàu n ú i 14

a Đặc điểm hình thái 14

b Đặc điểm giải phẫu 15

1.2 Cây Nhàu Morinda citrifolia L 18

a Đặc điểm hình th á i 18

b Đặc điểm giải phẫu 18

2 Đặc điểm hoá học 22

2.1 Định tính sơ bộ các nhóm chất hữu cơ có trong dược liệu 22

2.2 Sắc ký lớp mỏng hiệu năng cao (HPTLC) 27

2.3 Định lượng anthranoid 31

3 Nhận xét và bàn luận 35

3.1 Về đặc điểm thực v ật 35

3.2 Thành phần hoá h ọ c 37

3.3 Về tác dụng 42

PHẦN IV: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 43

4.1 Kết luận 44

4.2 Đề xuất 45

TÀI LIỆU THAM KHẢO 46

(ĐẶT V Ấ N (ĐỀ

Trong những thập niên gần đây, sự ứng dụng khoa học kĩ thuật vào nghiên cứu, khai thác nguồn dược liệu đã có nhiều bước tiến đáng kể, góp phần nâng cao hiệu quả điều trị, hiệu quả kinh tế Tuy nhiên, cùng với điều đố, nguồn tài nguyên cũng đang cạn kiệt dần Vì vậy, sử dụng hợp lý

và tìm nguồn nguyên liệu mới, nguyên liệu thay thế là hết sức cần thiết Cây nhàu (Morinda citrifolia L.) họ Cà phê (Rubỉaceae) là một cây thuốc quỷ có lịch sử ứng dụng lâu đời ở nước ta và nhiều nơi trên thế giới Hầu hết các bộ phận của cây đều đã được dùng làm thức ăn, đồ uống trong nhân dân hay làm thuốc với các tác dụng chữa bệnh phong phú như: điều trị tăng huyết áp, thuốc nhuận tràng, điều kinh, giảm đau xương khớp, chống oxy hoá, hỗ trợ trong chữa trị ung thư

Tại Ninh Thuận, nhân dân địa phương và hội ỵ học cổ truyền của tỉnh cũng sử dụng một loài nhàu núi làm thuốc tương tự như cây nhàu Morinda citrifolia L Mặt khác, cây nhàu núi ở Ninh Thuận là cây gỗ lớn, phát triển tốt trong điều kiện khô hạn của các tỉnh miền Nam Trung Bộ, cho nhiều khả năng khai thác Tuy nhiên, hiện nay cây chưa được nghiên cứu một cách toàn diện, chưa được ứng dụng phổ biến như một nguồn dược liệu đem lại hiệu lực điều trị và lợi ích kinh tế cao.

Đ ể bước đầu tạo cơ sở khoa học cho việc nâng cao hiệu quả sử dụng

và hiệu quả kinh tế của cây nhàu núi tại Ninh Thuận như một nguồn dược liệu mới, cố thể thay thế cho nguồn dược liệu cũ, chúng tôi tiến hành

nghiên cứu đề tài: “Nghiên cứu đặc điểm thực vật và thành phần hoá

học của cây Nhàu núi ở tỉnh Ninh Thuận” với nội dung: nghiên cứu và

so sánh về mặt thực vật, hoá học của 2 loài nhàu: Cây nhàu núi tại Ninh Thuận, và cây nhàu Morinda citrifolia L.

2 Đặc điểm hình tháỉ cơ bản của họ Cà phê.

Các cây họ Cà phê là cây gỗ, cây bụi, cây thảo hoặc dây leo Lá đơn nguyên mọc đối có lá kèm Lá kèm có khi dính lại với nhau và to như

lá thường, trông như có 4 hoặc 6 lá mọc vòng (Galium, Asperula) Hoa

mọc đơn độc hoặc mọc thành xim hay dạng đầu Hoa đều lưỡng tính, mẫu 4-5 Đài ít phát triển, dính vói bầu, có 4-5 răng Tràng hợp, tiền khai hoa van, lợp hay vặn Bộ nhị gồm số nhị bằng số tràng hoa Nhị nằm xen kẽ với các thuỳ của tràng và dính vào ống hay họng của tràng Bầu gồm 2 lá noãn dính liền với nhau thành bầu dưới với 2 hoặc nhiều ô, mỗi ô gồm 1 hay nhiều lá noãn, vòi nhuỵ một, núm nhuỵ hình đầu hoặc chia đôi

Quả nang, quả mọng hay quả hạch Hạt có phôi nhỏ trong nội nhũ

Họ Cà phê có khoảng 450 chi, 6500-7000 loài, phân bố vùng nhiệt đới, cận nhiệt đới, một số vùng ôn đới Việt Nam có trên 90 chi, khoảng

4300 loài

Chi Morinda là một chi khá lớn của họ Cà phê (khoảng 50 loài) Ở Việt Nam có khoảng 6-9 loài [3], [11]

3 Đặc điểm hình thái của chi Morinda.

Cây gỗ, cây bụi, thỉnh thoảng là dây leo Lá mọc đối, có gân hình lông chim, mặt trên thường nhấn, mặt dưới có lông tơ ở gần gân, có lá kèm, trông giống lá, không đều, phát triển cùng lá Hoa lưỡng tính, có thể đơn tính, nụ hoa thường hình elíp đến hình trứng Lá bắc nhỏ, đài hoa 4-6 thuỳ, ngắn, có thể giảm còn 1-2 Cụm hoa có các dạng khác nhau Tràng hoa thường hình phễu, tiền khai hoa van, có 4-6 thuỳ, đĩa tuyến mật hình khuyên, số nhị bằng số cánh hoa, chỉ nhị ngắn, dính liền với họng tràng, bao phấn đính lưng, bộ nhuỵ có 2 lá noãn, bầu dưới, có 2 ngăn hoặc 4 ngăn không đầy đủ Quả nạc, mọng hay hạch, từ một cụm hoa, quả kép mềm hoặc cứng gồm cả các sụn, gồm một hạt cứng Quả dạng trứng ngược hoặc hình thận [11], [10], [41]

4 Đặc điểm hình thái một số loài nhàu thuộc chi Morinda 4.1 Cây Nhàu (Morinda citrifolia h.):

Tên khác: Cây Ngao, Nhàu núi, cây Giầu, Nhàu lớn, Nhàu rừng.Tên nước ngoài : Indian mulberry, east indian mulberry, awl tree (Anh); morinde (Pháp)

Mô tả: Cây nhỡ hay cây to, cao 6-8

m, thân cành nhẵn, nhiều cành to, cành

non mập có 4 cạnh rõ, hơi dẹt, có rãnh,

màu lục hoặc nâu nhạt Lá mọc đối, hình

xoan hay bầu dục, nhọn ở đầu, láng bóng,

mềm, dài 12-30 cm, rộng 6-15 cm, gốc

thuôn hoặc hình nêm, đầu nhọn hoặc tù,

mép uốn lượn, dày, mặt trên xanh lục

bóng, mặt dưới nhạt, có đường gân dày,

cuống lá dài 0,5- 1,2 cm, lá kèm gần tròn

hay thuôn, khoảng 0,8 -1,3 cm Phiến lá

nguyên hoặc xẻ thuỳ

Cụm hoa mọc ở kẽ lá hoặc đối diện với lá thành đầu tròn hoặc dài, 2-

4 cm, hoa trắng sau vàng nhạt kết thành khối và dính nhau bởi đài Tràng

có ống dài 0,7-1,2 cm, có lông ở họng, 5 cánh hình mác, nhị 5, chỉ nhị ngắn có lông, bầu 2 ô

Quả thịt gồm nhiều quả hạch dính với nhau, hình trứng hoặc hình cầu, xù xì, dài khoảng 5-6 cm, non xanh nhạt, chín vàng nhạt hay hồng, mùi nồng và cay Ruột có lớp mềm ăn được, có nhân cứng dài 6-7 mm, rộng 4-5 cm, 2 ngăn chứa nhiều hạt nhỏ mềm

Mùa hoa: tháng 1-2; Quả: tháng 7-8

Phân bố: Cầy mọc hoang và được trồng nhiều ở vùng nhiệt đới châu

Á, từ Đài Loan, Hải nam - Trung Quốc đến Việt Nam, Lào, Campuchia, Thái Lan, Indonesia, Philippin, Ấn Độ, Australia và một số đảo ở Thái

Bình Dương Ở Việt Nam , thường gặp ở các tỉnh phía Nam, Nam Trung

Bộ

Nhàu là cây ưa sáng, hơi chịu bóng khi còn nhỏ Trong tự nhiên có thể thấy cây cọc ở rừng thứ sinh hoặc rừng phục hồi sau nương rẫy Cây

có thể trồng dễ dàng bằng cách ươm hạt Cây con lên cao khoảng 20 cm

có thể trồng được, sau một năm sẽ cho quả

đông, dùng nhiều nhất Lá thu vào mùa Morinda trimera Hillebr [39]

xuân Quả thu vào mùa hạ Rễ dùng sau

khi phơi khô Lá, quả dùng tươi hoặc

khô [24]

Hillebr.):

Mô tả: Cây cao 4-16 m; cành màu

nâu nhạt, cành non có 4 cạnh với nhiều

bướu nhỏ Lá có hình mác ngược đến

bầu dục, dài 12-26 cm, rộng 3,5-9 cm;

mặt trên nhẵn bóng hoặc có lông thưa, mặt dưới xám, thường nhẵn, đôi

khi có lông mịn, đặc biệt là dọc theo các gân, ồ kẽ giữa gân cấp hai và

gân cấp ba hay ở kẽ gân cấp 2 và gân giữa Cuống lá dài 0,7-4 cm, có lá kèm, hợp sinh, dài khoảng 3-8 mm, thuỳ 2-6,5 mm Tồn tại 5-12 hoa trong một cụm hoa, cuống cụm hoa dài 6-60 mm, lá bắc dài 3-10 mm, đài hoa có 2-3 răng, ống dài 2,5-3 mm, dính liền quả, tràng hoa 3-4, màu xanh, hàn liền, ống dài 4-8 mm, nhị hoa 3-4; vòi nhuỵ dài 5-8 mm Quả kép màu xanh đen, rất chắc khi chín, có thể hoá gỗ một phần; đường kính khoảng 2-3,5 cm; đài tồn tại, dễ nhận thấy [39]

Ngoài ra, chi Morinda còn có nhiều loài khác mang tên nhàu cũng đã được sử dụng làm thuốc như:

Cây nhàu thuốc (ba kích, ba kích thiên): Morinda officinalis How.

Cây nhàu lá có lông; Morinda trichophylla Merr.

Cây nhàu nước (nhàu nhỏ): Morinda persicaefolia Buch- Ham var

oblongifolia Pit.

Cây nhàu lông mềm (cây gạch): Morinda villosa Hook.

Cây Nhàu tán (cây mặt quỷ [8], nhàu đó, dây đất, cây ganh [9],

[13]): Morinda umbellata L.

5 Đặc điểm hoá học của một số cây nhàu.

- Cây nhàu Morinda citrifolia L.

Vỏ rễ chứa morindon (trihydroxymethylanthraquinon), chủ yếu dưới dạng glucosid là morindin Sau khi thuỷ phân, morindin cho glucose, rhamnose và morindon Ngoài ra, rễ còn chứa acid rubicloric, alizarin, ũ- methylether và rubiadin-l-methylether, 2 đồng phân dihydroxymethylanthraquinon (morindadiol, soranjidiol) và 2- trihydroxymethylanthraquinon monomethylether và selen

Một số hợp chất khác trong rễ 2- methyl-7-hydroxy-8- methoxyanthraquinon, 2-methyl-3,5-dimethoxy-6-hydroxyanthraquinon,

1 -8-dihydroxy-7-methoxy-anthraquinon, damnacanthal (9-10-dihydro-3- hydroxy-1 -methoxy-9, 10-dioxy-2-anthracen-carboxaldehyd).

Hoa chứa một anthraquinon glycosid, 2 flavon glycosid; 5,7 -

a c a c e tin -7 -0 -J3 -D (+ )-g lu c o p y ra n o sid và 5 , 7 - dimethylapigenin-

4 - 0 -13 - D (+) - galactopyranosid [28]

Quả chứa ít tinh dầu, trong đó có acid hexoic, acid octoic, một ít parafin và các ester của các alcol ethylic và methylic, acid caproic, acid caprulic, glucose [32]; vitamin c và Kali [33] damnacanthal và một số các anthraquinon khác [21]

Lõi gỗ có một chất anthraquinon glycosid là physcion - 8 - 0 - [(jj_

- L - arabinopyranosyl (1—>3)] (6 - D - galactopyranosyl (1—>6) G - D -

galactopyranosid) Ngoài ra, còn có physcion và morindon Từ cây Nhàu

Morinda citrifolia L bằng phương pháp nuôi cấy mô còn có thể thu được

các hợp chất damnacanthal; lucidin; licidin-3-primeveroside; morindone- 66-primeveroside [38]

- Nhàu lông 0Morinda tomemtosa Heyn.), nhàu nước (Morinda

persicaefolia Buch- Ham var oblongifolia Pit.): Rễ cây chứa anthranoid

là morindin và một dẫn xuất của trihydroxyanthraquinon và hai dẫn xuất

khác của anthraquinon có điểm sôi theo thứ tự là 222°c và 270°c [24].

- Nhàu tán (Morinda umbellata L.): Rễ cây chứa dẫn chất

anthranoiđ: sorajidiol, damnacanthol, morindon, morindin [22]

- Nhàu thuốc (Ba kích) (Morinda officinalis How.) phát hiện trong

rễ cây có: Anthraglucosid: tectoquinon, alizarin 1 methyl ether, lucidin- co-methyl ether, l-hydroxy-3-hydroxy-methylanthraquinon, 1-hydroxy- 2,3-dimethylanthraquinon, rubiadin, rubiadin-l-methylether [24] Theo phương pháp phân tích quang phổ còn thấy vitamin c , succinic acid (1), nystose (2), lF-fructofuranosylnystose (3), hexasaccharide (4) và heptasaccharide (5) [22]

Ngoài ra trong rễ cây ba kích còn có: iridoid glucosid, sterol, lacton, các chất vô cơ, đường, nhựa, acid hữu cơ, tinh dầu.

- Cây nhàu lá nhỏ (Morinda parvifolia Bari): có 2 loại anthraquinone

mới là morindaparvin-A và B, ngoài ra còn có: lucidin-omega-ethylether, luciđin-omega-methylether, alizarin-1-methylether, l-hydroxy-6 hoặc 7- hyđroxymethylanthraquinone and 2-hydroxy-methylanthraquinone [24]

6 Tác dụng, công dụng và chế phẩm của một số cây nhàu:

- Cây nhàu Morinda citrifolia L.

Tác dung dươc /ý:

Tác dụng hạ huyết áp: Trên thỏ và mèo thí nghiệm, nước sắc rễ

Nhàu có tác dụng gây dãn mạch, đối kháng với tác dụng gây tăng huyết

áp của adrenalin, noradrenalin và làm mất tác dụng của nicotin Trên điện tâm đồ mèo, thuốc không gây ảnh hưởng rõ rệt với tần số co bóp của tim Thuốc không ảnh hưởng đáng kể đến chức năng bài niệu và điện giải đồ

Tác dung trên than Jonh trung ương;, ức chế nhẹ.

Đôc tính: phạm vi sử dụng an toàn khá rộng, v ề độc tính cấp, thí

nghiệm tiến hành trên chuột nhắt trắng bằng đường uống với liều 80g/kg

thể trọng, chuột dùng thuốc không có biểu hiện ngộ độc cấp và sống bình thường Về độc tính bán mãn, thí nghiệm trên thỏ với liều hàng ngày

8g/kg dùng liên tục trong 15 ngày không ảnh hưởng đến số lượng hồng

cầu, bạch cầu và chức năng gan thận [24]

Tính vi, Công' nấng: Rễ nhàu có tác dụng thanh nhiệt, giải độc.

Công dung:

Rễ nhàu thường được nhân dân miền nam dùng chữa cao huyết áp

Rễ thái nhỏ, phơi khô, sắc nước uống thay chè với liều 10-20g mỗi

ngày Sau khi dùng thuốc 14-15 ngày bắt đầu thấy kết quả; sau đó giảm

liều, dùng liên tục trong vài tháng thì huyết áp ổn định

Chữa nhức mỏi, đau lưng, tê bại: dùng rễ nhàu thái nhỏ, sao vàng ngâm rượu uống mỗi ngày 2 lần, mỗi lần một thìa canh Có thể dùng quả

nhàu non thái mỏng, sao khô để thay thế Rễ nhàu phối hợp với muồng trâu, rễ gừa, cù đèn, thài lài, cỏ bấc, vòi voi, ngũ gia bì chân chim, quao nước với liều lượng bằng nhau, phơi khô sắc uống, chữa sỏi thận Cao nước rễ nhàu có tác dụng tốt với viêm khớp dạng thấp ở giai đoạn 1 và

Quả nhàu chín ăn vói muối có tác dụng giúp tiêu hoá, nhuận tràng, lợi tiểu, điều kinh Quả nhàu non (3 quả) phối hợp với rễ mía dò (lOg), củ tầm sét (lOg) phơi khô tán nhỏ, sắc với 400ml nước còn 100ml, uống trong ngày chữa tụ huyết do ngã hay bị đánh Quả nhàu nướng chín ăn chữa kiết lỵ

Lá nhàu để tươi, rửa sạch, giã nhỏ đắp làm mụn nhọt sớm mưng

mủ, mau lành chóng lên da non Lá nhàu phơi khô (lOg) thái nhỏ sắc uống chữa sốt rét, kiết lỵ Lá nhàu còn được dùng nấu canh ăn

Trên thế giới nước sắc rễ nhàu cũng được sử dụng để làm thuốc bổ, thuốc hạ sốt (Trung Quốc, Nhật Bản), chữa lỵ (Đài Loan); cao huyết áp, sung huyết, tri, xuất huyết não (Philippin) Lá nhàu hơ nóng đắp lên ngực bụng chữa ho, nôn mửa, đau bụng, lách to (Malaysia) [24] Nước ép quả nhàu chữa ho, sốt, tiểu tiện khô, đái đường, giun sán, kinh nguyệt không đều Dịch hãm từ vỏ rễ và quả nhàu được dùng để rửa vết thương giúp chóng lành bệnh [24] Quả khi chín được dùng để chữa bệnh lao, khớp, ung thư; giảm lão hoá Lá và thân cây được nghiền lấy nước được uống để chữa các bệnh đường tiết niệu; đau cơ, đau xương khớp; nước quả nhàu được dùng để gội đầu chữa chấy rận Ngày nay, khi tầng ozon đang bị phá huỷ sản phẩm từ cây nhàu cũng rất hữu dụng trong việc bảo vệ da tránh ảnh hưởng có hại của tia cực tím [34] Ngoài ra khi sử dụng quả nhàu với tỏi, có tác dụng rất tốt trong việc tái tạo máu; quả nhàu non có thể nghiền thành bột trộn kỹ vói muối, có tác dụng làm lành vết thương sâu hoặc gẫy xương; bột quả nhàu chín có thể dùng để xoa lên mặt có tác dụng làm đẹp

da và giảm trứng cá; mụn nhọt [35]

Gần đây, cả trong và ngoài nước ngày càng có nhiều nghiên cứu về

cây nhàu Morinda citrifolia L trong đó tập trung vào những tác dụng

chính sau:

- Tăng cường hệ thống miễn dịch [29]

- Tăng cường chức năng và khả năng phục hồi của tế bào [27]

- Úc chế sự phát triển của tế bào ung thư [31], [29], [30]

Tri đau nhức xương

Giữ ẩm, cân bằng độ

pH cho da, bảo vệ da khỏi tác động tia tử ngoại, ngăn ngừa lão

hoáTrà nhàu hoà

tan

Nacati Foods (HCMC) Quả nhàuQuả nhàu

Giúp kích thích tiêu

hoáRượu trái

Giữ ẩm da mặt, bảo

vệ da khỏi những tác động xấu của môi trường

- Nhàu lá nhỏ (.Morinda parvifolia Bartl.): Rễ cây cũng được sử

dụng để điều trị cao huyết áp, đau lưng mỏi gối như rễ nhàu [1]

- Nhàu lông mềm (Morinda vilỉosa Hook.): Rễ cây thường được

dùng để chữa đau lưng, tê thấp, lỵ Lá tươi giã nhỏ đắp chữa mụn nhọt [1]

- Nhàu nước (Morinda persicaefolia Buch-Ham Var oblongifolia

Pit.): Rễ cây có tác dụng hạ huyết áp nhẹ và nhuận tràng Nhân dân thường dùng rễ Nhàu nước thái nhỏ, sao vàng, ngâm rượu uống để chữa đau lưng, nhức mỏi chân tay, tê thấp Ngoài ra cũng được dùng để chữa bệnh cao huyết áp, mất ngủ hồi hộp, tim đập không đều

- Nhàu tán 0Morinda umbellata L.) Rễ cây có tác dụng xổ mạnh,

dùng để làm thuốc chữa mụn nhọt, mẩn ngứa, chữa giun sán, chữa lỵ [13]

Ở Nghệ An, rễ còn được dùng để chữa đau lưng, mỏi gối Lá cây được dùng để tẩy giun [22]

- Nhàu thuốc (ba kích) (Morinda officinalis How.) Nước sắc rễ cây

có tác dụng làm tăng nhu động ruột và làm giảm huyết áp Theo Y học cổ truyền, Ba kích là vị thuốc bổ dương dùng cho nam giới khi chức năng sinh dục suy yếu, thuốc bổ gân cốt, trí não, chữa cao huyết áp [24]

- Nhàu núi tại tỉnh Ninh Thuận cũng được nhân dân địa phương

dùng làm thuốc tương tự như cây Nhàu Morinda citrifolia L Hội y học cổ

truyền tỉnh Ninh Thuận cũng đã sử dụng nước sắc rễ nhàu núi để điều trị bệnh cao huyết áp và có hiệu quả tốt

PHẦN II: NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN c ứ u

1 Nguyên liệu:

Các nguyên liệu sử dụng gồm có quả, lá, cành, thân, vỏ thân của cây

Nhàu núi và quả, lá, cành, thân của cây Nhàu Morinda citrifolia L., được

thu hái tại một số tỉnh phía Nam và Nam Trung Bộ (Ninh Thuận, Bình Thuận) vào tháng 9/2001, 8/2003

2 Phuơng pháp nghiên cứu:

- Thu hái và bảo quản:

Dược liệu tươi được được làm khô và bảo quản trong túi polyetylen kín, để nơi khô ráo ở nhiệt độ phòng

Một phần nhỏ dược liệu tươi được bảo quản trong hỗn hợp cồn-nước

- Nghiên cứu đặc điểm thực vật:

Đăc điểm hmh thái: Qua sự quan sát tại địa phương và thực tế, theo

dõi sự ra hoa kết quả, mô tả đặc điểm của cây và cơ quan sinh sản

Chụp ảnh: Ảnh chụp toàn cây hoặc một bộ phận của cây bằng máy ảnh thông thường, quét thành file ảnh bằng máy quét và được in

Đăc diem vi hoc: nghiên cứu sau khi xử lý dược liệu phù hợp.

Bột dược liệu:

+ Phoi hoặc sấy khô

+ Quan sát trực tiếp, nếm, ngửi để xác định màu, mùi, vị

+ Nghiền nhỏ

+ Lên tiêu bản bằng hỗn hợp Glycerin-nước (1:1) hoặc dung dịch cloranhydrat 75%

+ Quan sát và mô tả dưới kính hiển vi

+ Chụp ảnh: Chọn những đặc điểm của bột trên kính hiển vi, có gắn máy ảnh, chụp và chuyển thành các file ảnh trên máy vi tính và in

Vi phẫu:

+Làm mềm: ngâm mẫu dược liệu vào nước 2-3 giờ, sau đó chuyển và giữ trong hỗn hợp nước-Glycerin-Ethanol (1:1:1) từ 1-3 ngày [7]

+ cắt: Chọn lấy một phần dược liệu đầy đủ đặc điểm thực vật để cắt tiêu bản nghiên cứu bằng máy cắt mỏng cầm tay.

+ Xử lý lát cắt: Lát cắt được tẩy bằng dung dịch cloramin B 5-10%, rửa sạch bằng nước, ngâm trong acid acetic 10%, rửa lại bằng nước đến hết acid Sau đó, tiến hành nhuộm kép với đỏ son phèn và xanh methylen, loại nước, cố định tiêu bản thực vật [6]

+ Quan sát mô tả: Tiêu bản đã được ổn định, đưa lên kính hiển vi quan sát, mô tả đặc điểm giải phẫu

+ Chụp ảnh: Vi phẫu được đưa lên kính hiển vi có gắn máy ảnh, chụp và chuyển thành các file ảnh trên máy vi tính

- Nghiên cứu thành phần hóa học:

+ Định tính sơ bô các nhóm chat hữu cơ : Được thực hiện theo các

• Xây dựng, sắc ký đồ tạo dữ liệu làm cơ sở cho quá trình kiểm nghiệm dược liệu sau này

• So sánh hình ảnh sắc ký đồ của các dược liệu nghiên cứu dưới ánh sáng có bước sóng khác nhau A=254nm; A=366nm, ánh sáng thường và trường hợp có phun thuốc thử hiện mầu

Nguyên tắc:

• Sắc ký lớp mỏng hiệu năng cao (HPTLC) dựa trên sắc ký lớp mỏng thông thường, được tiến hành trong điều kiện chuẩn Quá trình chấm sắc ký được tiến hành bằng máy, sử dụng phần mềmWINCATS

+ Định lươns anthranoid:

• Mục đích: Định lượng các dạng anthranoid toàn phần, tự do, oxy hoá, dạng khử trong dược liệu bằng phương pháp đo quang Từ

đó so sánh tương đối về mặt hàm lượng anthranoid giữa 2 loài thuộc

chi Morinda đang nghiên cứu.

• Nguyên tắc: Dùng acid acetic thuỷ phân anthraglycosid thanh aglycon rồi chiết bằng ether ethylic Làm phản ứng Bomtraeger với dịch chiết Đo mật độ quang của dung dịch ở bước sóng Ả= 455 nm Căn cứ vào đồ thị chuẩn tính hàm lượng anthraquinon trong dược liệu [18]

PHẦN III: THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ.

Với mục tiêu tạo cơ sở khoa học ban đầu cho việc nâng cao hiệu quả sử

dụng cây Nhàu núi ở tỉnh Ninh Thuận và xem xét khả năng thay thế cho cây Nhàu Morinda citrifolia L., chúng tôi tiến hành nghiên cứu đồng thời 2 loài

Nhàu nói trên Quá trình thực nghiệm thu được những kết quả như sau:

15 cm, rộng 6-8 cm, mặt trên bóng láng nhẵn hoặc rất ít lông, mặt dưới xám, thường nhẵn, rải rác có lông che chở đặc biệt là dọc theo gân lá Hoa trắng, mẫu 4-5, đều, lgồm 5-12 hoa hữu thụ Tràng hợp, gồm 4-5 thuỳ, nhị 4-5, nằm xen kẽ với các thuỳ, dính vào ống tràng Bầu gồm 2 lá noãn dính với nhau thành bầu dưởi, chia thành 2 ô, mỗi ô có một noãn Đài hoa dai, dễ nhận thấy Quả kép gồm nhiều quả hạch dính liền nhau, cao 2-3 cm, đường kính 1-2 cm Quả non xanh, chuyển màu xanh đen khi chín, rất chắc, hoá gỗ một phần (Hình 1)

Đối chiếu với các tài liệu nghiên cứu [36] chúng tôi thấy rằng: cây Nhàu núi ở tỉnh Ninh Thuận có những đặc điểm hình thái và mô tả tương tự loài

Nhàu có tên khoa học là Morinda trimera Hilkbr Rubiaceae.

Hoa thức:

*

b Đặc điểm giải phẫu:

Vi phẫu:

- Vi phẫu lá:

+ Phần gân lá: Gân lá lồi cả hai phía trên và dưới Rải rác có lông che chở (1) Biểu bì gồm một hàng tế bào nhỏ, xếp liên tục, đều đặn (2) Mô dày gồm vài lớp tế bào thành hơi dày xếp đều đặn sát lớp biểu bì (3) Mô mềm gồm những tế bào thành mỏng, hình dạng khác nhau (tròn, đa giác, dẹt) (4)

Bó libe-gỗ hình cung ở giữa gân lá, bó libe (5) ở phía ngoài ôm bó gỗ (6) hình

ở trong Gỗ gồm các mạch gỗ không đều nằm trong các mô gỗ

+ Phần phiến lá: Biểu bì trên gồm các tế bào hình chữ nhật to, xếp đều đặn Biểu bì dưới gồm các tế bào hình chữ nhật nhỏ, dài, hẹp Mô giậu gồm một lớp tế bào hình trụ, xếp đứng vuông góc với lớp biểu bì (7) Mô khuyết gồm các tế bào, xếp lộn xộn, có khoảng gian bào trong tế bào mô khuvết chứa các bó tinh thể calci oxalat hình kim (Hình 2)

che chở (1) Biểu bì gồm một hàng tế bào hình chữ nhật dài, xếp sát vào nhau, thành vòng tròn đồng tâm (2) Mô mềm vỏ gồm các tế bào thành mỏng, hình dạng khác nhau (tròn, dẹt, đa giác )- Mô cứng gồm các tế bào thành dày hoá

gỗ, xếp vòng rời nhau, nằm gần phía libe (3) Libe gồm (4) các tế bào dẹt ômlấy gỗ (5), có chứa các bó sợi Gỗ có các mạch gỗ không đều nằm trong mô

gỗ Mô mềm ruột gồm các tế bào hình tròn, không đều nhau (6) Rải rác trong

mô mềm và libe có tinh thể calci oxalat hình kim xếp thành bó (7) (Hình 3)

Vi phẫu cành: Mặt cắt hình gần tròn, từ ngoài vào trong có: Lông

Sơ đồ tổng quát cành Nhàu núi: Sơ đồ tổng quát lá Nhàu núi:

Hình 1: Cây và quả Nhàu núi.

Bốt dươc liêu:

-Bột cành lá:

Bột có màu xám, không mùi, có màu đắng nhẹ Soi dưới kính hiển vi thấy:

Mảnh bần ( 1), mảnh mô mềm mang hạt tinh bột (2),mảnh mạch điểm (3),

sợi xếp thành bó (4) hoặc đơn lẻ (5), mảnh mạch xoắn (6), tế bào cứng xếp

vói hình dạng khác nhau đứng đơn lẻ hoặc xếp thành đám (7), mảnh biểu bì màu vàng hay nâu nhạt (8), tinh thể calci oxalat hình kim (9), mảnh biểu bì

mang lỗ khí (10), lông che chở (11) (Hình 4)

2 Cây Nhàu Morinda citrifolm L.,

a Đặc điểm hình thái:

Cây gỗ cao 7-10 m, đường kính cây 15-20 cm, thân nhẵn không có lông Cây có nhiều cành to, cành non có 4 cạnh rõ, màu lục hoặc hoi nhạt Lá to, đơn nguyên, mọc đối, có lá kèm Lá hình xoan hay bầu dục, có mũi ngắn nhọn ở đầu, dày, có mép uốn lượn dài 12-30 cm, rộng 6-15 cm, màu xanh đậm, mặt trên láng bóng, mềm, mặt dưới có lông che chở nhỏ và thưa Lá kèm hình gần tròn, nguyên hay chẻ 2-3 thuỳ ở đỉnh, màu xanh nhạt Hoa màu trắng, mẫu 5, đều, lưỡng tính, tập hợp thành đầu, đơn độc, dính với nhau bởi đài mọc ngoài nách lá, vành có lông ở miệng Đài ít phát triển, dính liền với bầu Bầu 2 ô, mỗi ô có một đến nhiều noãn Quả kép do nhiều quả hạch dính lại với nhau Quả hình trứng, xù xì dài 5-6 cm, đường kính 2-4 cm Non màu xanh, khi chín màu vàng nhạt Ruột quả có lớp mềm ăn được, 2 ngăn chứa hạt nhỏ mềm Cây ra hoa vào tháng 1-2, quả chín vào tháng 7-8 (Hình 6)

thành bó Bó libe gỗ hình cung ở giữa gân lá, bó libe (3) ở ngoài ôm bó gỗ ở

trong (4)

Phần phiến lá: Biểu bì trên cấu tạo bởi một lớp tế bào hình chữ nhật tương đối lớn, biểu bì dưới gồm một lớp tế bào hình chữ nhật nhỏ hơn, các tế bào xếp liên tục và đều đặn, thành tế bào hoá cutin (2) Mô mềm giậu cấu tạo gồm một đến hai lớp tế bào xếp đứng đều đặn, vuông góc với biểu bì trên (7)

Mô khuyết gồm các tế bào hình chữ nhật dài xếp lộn xộn để hỏ những khuyếtnhỏ (Hình 9)

- Vi phẫu thân:

Lát cắt hình gần tròn, từ ngoài vào trong có: Lông che chở (1) Lớp biểu

bì cấu tạo bởi một hàng tế bào nhỏ xếp đều đặn (2) Mô mềm vỏ gồm các tế bào thành mỏng có hình dạng thay đổi, hình tròn, hình nhiều cạnh, hình dẹt, thỉnh thoảng có các tế bào mô cứng và sợi Libe (4) cấu tạo bởi các tế bào nhỏ, dẹt xếp thành vòng mỏng bao bọc quanh gỗ (5) Tầng phát sinh Libe gỗ Gỗ

có các mạch gỗ xếp rải rác trong mô gỗ, phần ngoài nhiều hơn phần trong

Mô mềm ruột cấu tạo bởi các tế bào to, hình trứng, thành cellulose, các tế bào thành mỏng (6) Rải rác có các bó tinh thể Calci oxalat hình kim ở trong mô mềm và Libe (Hình 8)

Sơ đồ tổng quát thân Nhàu Sơ đồ tổng quát lá Nhàu

Bốt dươc liêu:

-Bột cành lá:

Bột màu nâu xám, không mùi, vị đắng nhẹ Quan sát dưới kính hiển vi thấy: Mảnh biểu bì có các tế bào hình chữ nhật ( 1) Mảnh biểu bì mang lỗ khí (2) Lông che chở đơn bào (3) Mảnh mô mềm có các tếbào thành mỏng Các mảnh mạch, chủ yếu là mảnh mạch điểm Các sợi trông rõ ống trao đổi, riêng lẻ hoặc xếp thành bó (4) Tếbào cứng có thành dày hoá gỗ trông thấy rõ các ống trao đổi, riêng lẻ hoặc xếp thành đám (5) Lỗ khí (6) Các tinh thể calci oxalat hình kim dài 70-100^n đường kính 3-5^m Các hạt tinh bột tròn nhỏ (Hình 10)

Bột màu nâu, mùi hắc, vị mặn đắng hơi chua Quan sát dưới kính hiển vi thấy:

Mảnh mô mềm với các tếbào thành mỏng có mang bó sợi (1) Mảnh vỏ quả trong hoá gỗ màu đỏ nâu (2) Tếbào cứng trông rõ ống trao đổi Các tinh thể calci oxalat hình kim dài 70-8Ọw, đường kính (6) Mảnh mạch Mảnh nội nhũ (4) Sợi và

bó sợi (5) Các hạt tinh bột Rải rác có các hạt dầu béo (Hình 11)

2 Đặc điểm hoá học:

2.1 Định tính sơ bộ các nhóm chất hữu cơ có trong dược liệu.

Tiến hành phản ứng định tính sơ bộ các nhóm chất hữu cơ với các dược liệu: Quả, thân, lá, vỏ thân của cây Nhàu núi và quả, thân, lá của cây Nhàu

Anthranoid:

- Phản ứng Borntraeger:

Lấy khoảng 5g bột dược liệu cho vào bình nón dung tích 100ml, thêm 50ml acid H2S04 IN Đun cách thuỷ sôi 15 phút Lọc nóng qua một lớp bông mỏng vào bình gạn dung tích 100ml, làm nguội dịch lọc Thêm 5ml ether ethylic, lắc nhẹ Gạn lấy lớp ether ethylic làm phản ứng

Lấy lml dịch chiết ether ethylic cho vào ống nghiệm, thêm lml dung dịch NaOH 10% Lắc nhẹ Lớp nước sẽ có màu đỏ sim khi dịch chiết chứa hợp chất anthranoid

Kết quả:

Lớp nước màu đỏ sim với tất cả các dược liệu nghiên cứu

- Vi thăng hoa: Cho một ít bột dược liệu vào một nút chai bằng kim loại Đưa lên trên ngọn lửa đèn cồn có cách lưới amiăng, để một lúc cho bay hết hơi nước Đậy lên một phiến kính mặt trên có để một ít bông thấm nước Để khoảng 5-10 phút, lấy ra, quan sát dưới kính hiển vi (vật kính số 10) thấy các tinh thể anthranoid hình kim màu vàng