Giáo trình thực tập sinh lý 2015

TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y DƯỢC CẦN THƠ KHOA Y BỘ MÔN SINH LÝ GIÁO TRÌNH THỰC TẬP SINH LÝ HỌC (Dành cho Sinh viên chính quy 6 năm) LƯU HÀNH NỘI BỘ 2015 MỤC LỤC Mở đầu Buổi 1 - Sinh lý hồng cầu và nhóm máu - Số lượng hồng cầu - Nhóm máu hệ ABO và Rhesus - Sức bền màng hồng cầu - Thể tích hồng cầu lắng đọng - Tốc độ máu lắng Buổi 2 - Sinh lý bạch cầu, tiểu cầu và cầm máu - Số lượng bạch cầu - Công thức bạch cầu phổ thông - Số lượng tiểu cầu - Thời gian máu chảy - Thời gian máu đông Buổi 3 - Sinh lý tim mạch - Huyết áp trực tiếp - Tâm động ký Buổi 4 - Sinh lý tim mạch và hô hấp - Kỹ thuật ghi điện tâm đồ - Kỹ thuật ghi hô hấp ký - Vai trò của cơ hoành và áp suất âm trong hô hấp Buổi 5 - Sinh lý tiêu hóa, tiết niệu và sinh dục-sinh sản - Nhu động ruột - Bài tiết nước tiểu - Ảnh hưởng của một số hormon lên tử cung và buồng trứng - Áp lực vật thể hang Buổi 6 - Sinh lý thần kinh-cơ và kiểm tra - Mô hình thần kinh – cơ - Điều hòa trương lực cơ - Kiểm tra thực tập MỞ ĐẦU Thực tập sinh lý học có hai phần chính với yêu cầu thực tập khác nhau, sinh viên cần nắm được để có thể học tốt. Sinh viên cũng cần đọc trước bài thực tập, ôn tập để nắm vững các kiến thức lý thuyết có liên quan trước khi thực tập và tuân thủ đúng nội qui thực tập khi đi thực tập. 1. Phần thăm dò chức năng Đây là các xét nghiệm được dùng để đánh giá hoạt động chức năng của một bộ máy cơ quan trong cơ thể góp phần vào việc chẩn đoán và điều trị bệnh. Những thăm dò này được gọi là các cận lâm sàng làm trên đối tượng người bệnh, sinh viên cần nắm rõ nguyên tắc/nguyên lý của từng xét nghiệm. Ví dụ như các thăm dò chức năng về huyết học (nhóm máu, thời gian máu chảy, thời gian máu đông…), về điện sinh lý (điện tim, điện não, điện dẫn truyền thần kinh, điện cơ), về hô hấp (hô hấp ký, khí máu động mạch…)… Trong chương trình thực tập sinh lý này, sinh viên chủ yếu học các thăm dò chức năng về huyết học, kỹ thuật ghi điện tim và hô hấp ký; những thăm dò khác sẽ được học trong phần thực tập của học phần thăm dò chức năng. Khi thực tập phần này sinh viên cần đảm bảo 3 yêu cầu: - Nắm được chỉ định và chống chỉ định: biết cách cho y lệnh đúng. - Làm được thuần thục các thao tác kỹ thuật: chuẩn bị phương tiện, dụng cụ, chuẩn bị bệnh nhân, tiến hành các thao tác theo đúng trình tự và chính xác. - Đọc, nhận định và biện luận được kết quả: xác định đúng kết quả xét nghiệm, đánh giá bình thường hay bất thường bằng cách so sánh với hằng số, biện luận các sai số có thể xảy ra và bước đầu suy luận các cơ chế hoặc nguyên nhân gây ra các bất thường. 2. Phần thực nghiệm Đây là các thí nghiệm được tiến hành để chứng minh cơ chế hoạt động chức năng của một bộ máy cơ quan trong cơ thể góp phần làm sáng tỏ hơn các bài học lý thuyết. Những thực nghiệm này được làm trên động vật thí nghiệm nên sinh viên cũng cần chú ý đến đặc điểm sinh học của từng động vật. Ví dụ như thực nghiệm gây duỗi cứng mất não trên thỏ, thực nghiệm ghi huyết áp trực tiếp trên chó, thực nghiệm tâm động ký, nút buộc stanius trên ếch, thực nghiệm hủy một bên tiểu não trên ếch… Khi thực tập phần này sinh viên cần đảm bảo 3 yêu cầu: - Quan sát và mô tả các hiện tượng đã xảy ra trên động vật thực nghiệm: cần quan sát kỹ và ghi nhận đầy đủ các dấu hiệu theo các chỉ tiêu được nêu ra. - Rút ra nhận xét về các hiện tượng đã xảy ra trên động vật thực nghiệm: nhận xét cần ngắn gọn, chính xác và đây cũng chính là yêu cầu hay câu hỏi “tại sao?” đặt ra mà sinh viên cần giải quyết. - Giải thích các hiện tượng đã xảy ra trên động vật thực nghiệm: suy luận và vận dụng các kiến thức đã được học để trả lời câu hỏi “tại sao?” đã đặt ra ở trên. * Sinh viên lưu ý: - Hai buổi học đầu về máu, các thao tác kỹ thuật và kết quả thực hành của sinh viên sẽ được cán bộ kỹ thuật chấm điểm. Trong hai buổi học này sinh viên chia thành các tổ nhỏ, mỗi tổ khoảng 3 sinh viên, cùng thực tập và cuối buổi phải hoàn thành bài phúc trình nêu rõ nguyên tắc, các bước thực hành thực tế, kết quả và biện luận kết quả thu được. - Kiểm tra thực tập được thực hiện theo hình thức chạy trạm vào buổi cuối cùng đợt thực tập. Điểm kiểm tra thực tập được tính là một phần của cột điểm kiểm tra thường xuyên khi đánh giá điểm học phần. SỐ LƯỢNG HỒNG CẦU Mục tiêu: 1. Xác định được số lượng hồng cầu bình thường và các yếu tố ảnh hưởng số lượng hồng cầu. 2. Trình bày được nguyên tắc xét nghiệm đếm số lượng hồng cầu. 3. Thực hiện được kỹ thuật đếm số lượng hồng cầu. 4. Nhận định và biện luận được kết quả xét nghiệm đếm số lượng hồng cầu. 1. ĐẠI CƯƠNG Hồng cầu là một tế bào máu chủ yếu làm nhiệm vụ vận chuyển khí (O 2 , CO 2 ). - Số lượng hồng cầu bình thường ở người Việt Nam là: + Người lớn: Nữ : 4.600.000 ± 250.000/mm 3 máu. Nam : 5.110.000 ± 300.000/mm 3 máu. + Trẻ sơ sinh: 5.000.000 - 7.000.000/mm 3 máu. - Số lượng hồng cầu phụ thuộc vào: + Lượng oxy. + Mức độ hoạt động. + Lứa tuổi, giới. + Lượng erythropoietin - Thay đổi bệnh lý về số lượng hồng cầu: + Giảm hồng cầu gây thiếu máu do nhiều nguyên nhân như: xuất huyết, tán huyết, thiếu sắt, suy tủy + Tăng hồng cầu gặp trong trường hợp mất nước, thiếu oxy, bệnh Vaquez, ung thư hồng cầu 2. NGUYÊN TẮC Lấy máu và pha loãng theo một tỉ lệ nhất định bằng dung dịch phù hợp rồi cho vào buồng đếm đã biết trước kích thước. Đếm số lượng hồng cầu dưới kính hiển vi từ đó tính ra số lượng hồng cầu trong 1mm 3 máu. 3. PHƯƠNG TIỆN DỤNG CỤ VÀ HÓA CHẤT 3.1. Phương tiện dụng cụ - Ống Potain pha loãng máu đếm hồng cầu: bầu trộn lớn, mao quản nhỏ, hạt thủy tinh để trộn máu màu xanh hoặc đỏ, trên ống có khắc các vạch số 0,5; 1 và 101. - Huyết cầu kế: có nhiều loại huyết cầu kế (Goriaev, Agasse-Lafont, Fiessinger, Thomas, Levy, Neubauer, Malasser ). Trong bày này, sử dụng buồng đếm của huyết cầu kế Neubauer cải tiến: trên huyết cầu kế có 2 buồng đếm giống nhau ở 2 bên. Mỗi buồng đếm có chiều cao là 1/10mm, được chia thành 9 ô vuông lớn, mỗi ô vuông có diện tích 1mm 2 . Như vậy, thể tích của 1 ô vuông lớn: 1mm 2 x 1/10mm = 1/10mm 3 . + 4 ô vuông lớn ở 4 góc là khu vực dùng để đếm bạch cầu, mỗi ô vuông này được chia thành 16 ô vuông trung bình. Thể tích của 4 ô vuông lớn này là 4/10mm 3 . Khi đếm bạch cầu sẽ đếm trong tất cả 64 ô vuông trung bình của 4 ô vuông lớn này. + Ô vuông lớn ở giữa là khu vực dùng để đếm hồng cầu và tiểu cầu. Ô này được chia thành 25 ô vuông trung bình, mỗi ô vuông trung bình lại chia thành 16 ô vuông nhỏ. Vậy thể tích của một ô vuông nhỏ là 1/4.000mm 3 . Khi đếm hồng cầu sẽ đếm trong 5 ô vuông trung bình (gồm 80 ô vuông nhỏ) ở 5 vị trí: A (ô vuông trung bình góc trái trên), B (ô vuông trung bình góc phải trên), C (ô vuông trung bình góc phải dưới), D (ô vuông trung bình góc trái dưới), E (ô vuông trung bình ở trung tâm). Hình 1. Buồng đếm Neubauer cải tiến - Lamen. - Dụng cụ lấy máu mao mạch: kim chích máu, bông, cồn sát trùng. - Găng tay, khay hạt đậu, hộp hủy kim. - Kính hiển vi. - Máy đếm tay. 3.2. Dung dịch và hóa chất - Nước cất, HCl 0,1N, cồn 90 0 , ether, dung dịch sinh lý. A B E D C BCBC BC BC - Dung dịch pha loãng máu đếm hồng cầu: có thể dùng một trong các dung dịch sau: + Dung dịch nước muối sinh lý: NaCl 0,9%. + Dung dịch Hayem: Na 2 SO 4 (5g), NaCl(1g), HgCl 2 (0,5g), nước cất vừa đủ 100mL. + Dung dịch Marcano gồm: Na 2 SO 4 (5g), formol (1mL), nước cất vừa đủ 100Ml (sử dụng trong thực tập này). + Dung dịch Gowers gồm: Na 2 SO 4 , acid acetic, nước cất. 4. KỸ THUẬT 4.1. Chuẩn bị - Chuẩn bị đầy đủ phương tiện dụng cụ, hóa chất. Đảm bảo buồng đếm và ống hút khô, sạch. - Chuẩn bị buồng đếm: dán chặt lamen, đúng vị trí trên buồng đếm. Đặt buồng đếm lên bàn kính hiển vi, tìm được toàn cảnh vi trường buồng đếm và xác định đúng vị trí các ô đếm hồng cầu. - Chuẩn bị bệnh nhân: thường lấy vào buổi sáng lúc đói, tuy nhiên có thể lấy máu bất cứ lúc nào trong trường hợp khẩn cấp. Bệnh nhân đúng chỉ định, tay sạch, giải thích để bệnh nhân yên tâm hợp tác với người làm xét nghiệm. 4.2. Lấy máu - Lấy máu mao mạch (có thể lấy máu tĩnh mạch): vị trí thường lấy máu ở cạnh bên đầu ngón 4 bàn tay không thuận (đối với trẻ nhỏ có thể lấy máu ở ngón chân cái hoặc gót chân). Sát khuẩn vị trí lấy máu. - Lấy kim chích máu: xé bao kim đúng vị trí để cầm vào đuôi kim. - Tạo vết thương: dùng kim chích máu đâm nhanh, dứt khoát vào vị trí ngón tay đã chọn, để máu chảy ra tự nhiên không nặn. - Lau bỏ giọt máu đầu bằng bông khô. 4.3. Pha loãng máu - Khi máu đọng thành giọt trên đầu ngón tay, người làm thí nghiệm cầm ống Potain , đặt đầu ống chạm vào giọt máu nhưng không tỳ lên da và để máu tự mao dẫn (hoặc hút nhẹ) đến vạch 0.5 (chú ý không để có bọt khí lẫn vào). - Lau máu dính quanh đầu ống, giữ cho cột máu không bị tụt xuống. - Hút dung dịch pha loãng lên đến vạch 101. Như vậy, tỷ lệ pha loãng sẽ là 1/200. - Bịt đầu ống bằng đầu ngón tay trỏ trái và tháo ống cao su. - Bịt hai đầu ống bằng ngón 1 và 2, lắc trộn đều trong 3 phút. 4.4 Cho hỗn dịch vào buồng đếm - Nhỏ bỏ 3-4 giọt đầu. - Nghiêng ống Potain 45 0 , đặt đầu ống vào sát cạnh lamen ngay khe giữa lamen và huyết cầu kế để cho hỗn dịch mao dẫn lan tỏa vào buồng đếm bên dưới lamen. - Để yên 5 phút. Hình 2. Cách cho hỗn dịch máu vào buồng đếm 4.5. Đếm hồng cầu - Chỉnh vi trường với vật kính 10, sau đó chuyển sang vật kính 40. - Đếm số lượng hồng cầu (N) có trong 5 ô quy định: A, B, C, D, E. Hình 3. Cách đếm số hồng cầu trong một ô trung bình * Nguyên tắc đếm: - Đếm các ô quy định theo hình chữ Z, bắt đầu từ ô trái trên đi dần sang phải cho đến hết các ô hàng ngang. Sau đó xuống 1 ô phía bìa bên phải và đi dần ngược lại về bên trái cho hết các ô hàng ngang rồi lại xuống 1 ô Tiếp tục như thế cho đến ô cuối cùng là ô phải dưới. - Đếm 2 cạnh liên tiếp: đếm tất cả các tế bào nằm trong lòng ô, đối với các tế bào nằm trên cạnh của ô thì chỉ đếm những tế bào nằm trên 2 cạnh liên tiếp (tuỳ chọn, thường là cạnh trên và cạnh trái) và bỏ những tế bào nằm trên 2 cạnh còn lại. 4.6. Tính kết quả và biện luận - Tính số lượng hồng cầu trong 1mm 3 máu theo công thức: N x 10.000 - Ghi nhận, biện luận kết quả và kết luận. 4.7. Rửa, dọn dụng cụ - Rửa ống Potain bằng nước cất rồi tráng lại bằng HCl 0,1N, cồn 90 0 , ether (2 lần) - Rửa huyết cầu kế bằng nước cất, tốt nhất rửa dưới vòi nước chảy rồi lau nhẹ bằng gạc mềm. - Sấy ống Potain và huyết cầu kế. - Chuyển kính hiển vi về trạng thái nghỉ và bảo quản. 5. ỨNG DỤNG Đếm số lượng hồng cầu là một xét nghiệm máu thường quy được sử dụng rộng rãi trên lâm sàng. NHÓM MÁU HỆ ABO VÀ RHESUS Mục tiêu: 1. Trình bày được các thành phần của nhóm máu hệ ABO và hệ Rhesus. 2. Trình bày được các nguyên tắc xét nghiệm xác định nhóm máu hệ ABO và Rhesus. 3. Thực hiện được kỹ thuật xét nghiệm xác định nhóm máu hệ ABO và Rhesus. 4. Nhận định và biện luận được kết quả xét nghiệm xác định nhóm máu hệ ABO và Rhesus. 5. Trình bày được các ứng dụng xét nghiệm xác định nhóm máu ABO và Rhesus. 1. ĐẠI CƯƠNG Nhóm máu là sự hiện diện của kháng nguyên trên màng hồng cầu. Bản chất của các kháng nguyên là những glycoprotein. Trên màng hồng cầu có rất nhiều loại glycoprotein nên có nhiều loại kháng nguyên tạo thành những hệ nhóm máu khác nhau, trong đó có hai hệ nhóm máu quan trọng là hệ nhóm máu ABO và Rhesus. Mỗi kháng nguyên sẽ có kháng thể tương ứng, khi kháng nguyên và kháng thể tương ứng gặp nhau sẽ xảy ra hiện tượng ngưng kết. Kháng thể tồn tại trong huyết thanh và được chia thành 2 loại: kháng thể tự nhiên (ví dụ kháng thể của hệ nhóm máu ABO) và kháng thể miễn dịch (ví dụ kháng thể của hệ nhóm máu Rhesus). Bảng 1. Thành phần của hệ nhóm máu ABO Thứ tự Nhóm máu Kháng nguyên trên màng hồng cầu Kháng thể trong huyết thanh 1 A A Anti B 2 B B Anti B 3 AB A và B - 4 O - Anti A và anti B Bảng 2. Thành phần của hệ nhóm máu Rhesus Thứ tự Nhóm máu Kháng nguyên trên màng hồng cầu Kháng thể trong huyết thanh 1 Rhesus (+) D - 2 Rhesus (-) - - [...]... đối với nhóm máu Rhesus - Xác định nhóm máu trong y pháp SỨC BỀN MÀNG HỒNG CẦU Mục tiêu: 1 Trình bày được hiện tượng thẩm thấu qua màng tế bào hồng cầu 2 Trình bày được nguyên tắc của xét nghiệm sức bền màng hồng cầu 3 Nhận định và biện luận được kết quả xét nghiệm xác định sức bền màng hồng cầu 4 Trình bày được các ứng dụng xét nghiệm xác định sức bền màng hồng cầu 1 ĐẠI CƯƠNG Màng... trong tiêu chảy, sốt xuất huyết) TỐC ĐỘ LẮNG CỦA MÁU Vitessed Sedimentation (VS) Mục tiêu: 1 Trình bày được tỷ trọng và độ nhớt của máu và các thành phần của máu 2 Trình bày được nguyên tắc xét nghiệm xác định tốc độ lắng huyết cầu 3 Nhận định và biện luận được kết quả xét nghiệm xác định tốc độ lắng huyết cầu 4 Trình bày được các ứng dụng xét nghiệm xác định tốc độ lắng huyết cầu 1 ĐẠI CƯƠNG VS là tốc... định và biện luận được kết quả xét nghiệm xác định thể tích hồng cầu lắng đọng 4 Trình bày được các ứng dụng xét nghiệm xác định thể tích hồng cầu lắng đọng 1 ĐẠI CƯƠNG Thể tích hồng cầu lắng đọng là tỷ lệ bách phân hồng cầu lắng đọng trong 1 thể tích máu toàn phần Trị số bình thường của Hct: - Trẻ sơ sinh : 44-64% trung bình 54% - Người lớn: Nam : 42-52% trung bình 47% Nữ : 37-47% trung bình... một xét nghiệm sàng lọc cho một số bệnh lý về máu: - Sức bền màng hồng cầu giảm thường gặp trong thiếu máu huyết tán - Sức bền màng hồng cầu tăng thường gặp trong các bệnh về huyết sắc tố nói chung, ngoài ra còn tăng sau cắt lách, một số bệnh về gan THỂ TÍCH HỒNG CẦU LẮNG ĐỌNG Hematocrit (Hct) Mục tiêu: 1 Trình bày được các thành phần của máu 2 Trình bày được nguyên tắc của xét nghiệm... Hình 1 Kết quả đo VS 4.7 Rửa, dọn dụng cụ 5 ỨNG DỤNG VS phản ánh đặc tính vật lý của máu Có nhiều yếu tố ảnh hưởng đến tốc độ lắng của huyết cầu nên xét nghiệm này không có giá trị chẩn đoán quyết định (VS không đặc hiệu cho bệnh nào) VS thường gia tăng khi lượng protein trong máu tăng nên thường được chỉ định trong các bệnh lý về viêm nhiễm như viêm khớp, nhiễm khuẩn lao ... hơn huyết tương nên huyết cầu sẽ lắng xuống Có 2 phương pháp thường sử dụng để xác định thể tích hồng cầu lắng đọng là phương pháp Wintrobe (Macrohematocrit) và phương pháp Microhematocrit Wintrobe Bài thực hành này chỉ đề cặp đến phương pháp Microhematocrit Wintrobe 2 NGUYÊN TẮC Lấy máu cho vào ống microhematocrit có sẵn chất chống đông cô đem quay ly tâm để hồng cầu lắng xuống và đọc kết quả chiều... thường, (b): giảm, (c): tăng Lưu ý: nếu không thể đọc ngay kết quả phải đặt các ống microhematocrit ở thế thẳng đứng, nếu để ống này nằm ngang quá 30 phút lớp huyết cầu sẽ bị nghiêng xéo đi Tốt nhất là luôn thực hiện 2 ống cho mỗi bệnh nhân để phòng ngừa 1 ống bị vỡ khi ly tâm 4.6 Rửa, dọn dụng cụ 5 ỨNG DỤNG Hct phản ánh đặc tính của hai thành phần là huyết cầu và huyết tương do đó Hct được chỉ định trong