Nghiên cứu tác dụng hạ đường huyết và khả năng chống rối loạn trao đổi lipid của dịch chiết từ cây Bông ổi (Lantana Camara L.)

Đái tháo đường (ĐTĐ) là bệnh rối loạn trao đổi chất với biểu hiện chung nhất là chứng tăng đường huyết. ĐTĐ không chỉ có tính chất là một bệnh mãn tính, ĐTĐ còn kèm theo nhiều biến chứng nguy hiểm như các bệnh về thận dẫn đến suy thận, bệnh về mắt dẫn đến mù lòa, tổn thương hệ thần kinh và đặc biệt là các biến chứng về mạch máu (xơ vữa động mạch) có thể dẫn đến tử vong như bệnh mạch vành, nhồi máu não, xuất huyết não... Gánh nặng bệnh tật do ĐTĐ đang tăng lên trên toàn cầu, đặc biệt ở các nước đang phát triển, trong đó có Việt Nam – nơi quá trình đô thị hóa đang làm thay đổi tập quán ăn uống, giảm hoạt động thể lực và tăng cân 3. Theo WHO, năm 2000 toàn thế giới có khoảng 151 triệu người mắc bệnh và dự đoán đến năm 2025 con số mắc bệnh sẽ tăng đến 300330 triệu, chiếm 5,4% dân số toàn cầu. Đáng chú ý là bệnh có xu hướng gia tăng mạnh tại các quốc gia đang phát triển như: châu Phi, châu Mỹ La Tinh và châu Á, đặc biệt ở độ tuổi lao động 18. Ngày nay, Y học hiện đại đã có nhiều loại thuốc chữa bệnh ĐTĐ có hiệu quả như insulin, sulfonylure, biguanid,... Tuy nhiên, hầu hết các loại thuốc này đều có tác dụng phụ và chi phí điều trị đắt đỏ 3. Trước tình hình đó ủy ban chuyên gia của WHO đã kiến nghị nên sử dụng các thuốc có nguồn gốc thảo dược có sẵn, có giá thành rẻ và ít độc tính

KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP TRƯỜNG ĐHSP HÀ NỘI 2 Dương Thị Nga, K35C-CN Sinh 1 LỜI CẢM ƠN Với tấm lòng kính trọng và biết ơn sâu sắc, em xin chân thành cảm ơn TS. Trần Thị Phương Liên, người đã tận tình hướng dẫn và tạo mọi điều kiện thuận lợi nhất giúp em hoàn thành đề tài này. Em xin chân thành cảm ơn các cán bộ Trung tâm Hỗ trợ và chuyển giao công nghệ - Trường đại học sư phạm Hà Nội 2, viện Vệ sinh Dịch tễ Trung ương đã tạo mọi điều kiện thuận lợi giúp em trong suốt thời gian học tập và nghiên cứu. Cuối cùng, em xin gửi lời cảm ơn chân thành tới gia đình, bạn bè, những người luôn động viên, quan tâm giúp đỡ và là chỗ dựa tinh thần lớn nhất đưa em vượt qua khó khăn để có được ngày hôm nay. Xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày tháng năm 2013 Sinh viên thực hiện Dương Thị Nga KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP TRƯỜNG ĐHSP HÀ NỘI 2 Dương Thị Nga, K35C-CN Sinh 2 LỜI CAM ĐOAN Em xin cam đoan những kết quả nghiên cứu được trình bày trong khóa luận là do em thực hiện và không trùng lặp với bất cứ tác giả nào khác. Em xin hoàn toàn chịu trách nhiệm với những nội dung được đề cập trong bản khóa luận này. Hà Nội, ngày tháng năm 2013 Sinh viên thực hiện Dương Thị Nga KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP TRƯỜNG ĐHSP HÀ NỘI 2 Dương Thị Nga, K35C-CN Sinh 3 DANH MỤC CÁC BẢNG, HÌNH VẼ VÀ ĐỒ THỊ Bảng 1.1. Phân loại BMI của người trưởng thành châu Âu và châu Á 3 Bảng 1.2. Các tiêu chí để chuẩn đoán ĐTĐ theo WHO 8 Bảng 2.1. Thành phần thức ăn giàu lipid 22 Bảng 2.2. Mô hình nghiên cứu khả năng hạ glucose huyết của các phân đoạn dịch chiết từ cây Bông ổi (Lantana Camara L.) 24 Bảng 3.1. Trọng lượng trung bình (tính theo gam) của hai nhóm chuột nuôi bằng hai chế độ dinh dưỡng khác nhau 30 Bảng 3.2. So sánh một số chỉ số lipid máu giữa chuột nuôi thường và nuôi béo phì thực nghiệm 32 Bảng 3.3. Nồng độ glucose huyết lúc đói của các lô chuột trước và sau khi tiêm STZ 35 Bảng 3.4. Kết quả nồng độ glucose huyết lúc đói của các lô chuột sau 21 ngày điều trị 38 Bảng 3.5. Kết quả một số chỉ số lipid máu ở chuột ĐTĐ trước và sau điều trị 41 Hình 1.1. Các giai đoạn phát triển của ĐTĐ type 2 12 Hình 1.2. Cây Bông ổi (Lantana Camara L.) 15 Hình 2.1. Tủ sấy thức ăn cho chuột TN o và chuột nuôi (béo phì, chuẩn) TNo 18 Hình 2.2. Cơ chế gây độc của STZ lên tế bào β của tụy đảo chuột 21 Hình 2.3. Định lượng glucose huyết của chuột nhắt 25 Hình 3.1. Biểu đồ biểu diễn sự tăng trọng của các nhóm chuột với 2 chế độ dinh dưỡng khác nhau trong vòng 8 tuần 31 Hình 3.2. Biểu đồ so sánh một số chỉ số hóa sinh giữa các lô chuột thí nghiệm 33 KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP TRƯỜNG ĐHSP HÀ NỘI 2 Dương Thị Nga, K35C-CN Sinh 4 Hình.3.3. Nồng độ glucose huyết lúc đói của các lô chuột thí nghiệm trước và sau khi tiêm 72 giờ 36 Hình 3.4. Nồng độ glucose huyết lúc đói của các lô chuột trước và sau 21 ngày điều trị 39 Hình 3.5. So sánh một số chỉ số lipid máu ở chuột ĐTĐ trước và sau điều trị 42 KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP TRƯỜNG ĐHSP HÀ NỘI 2 Dương Thị Nga, K35C-CN Sinh 5 DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT ADP Adenosine diphosphate ATP Adenosine triphosphate BMI Body Mass Indey CHCL 3 Chlorform ĐC Đối chứng ĐT Điều trị ĐTĐ Đái tháo đường EtOAc Ethylacetat EtOH Ethanol HDL Lipoprotein tỷ trọng cao (High-density lipoprotein) LDL Lipoprotein tỷ trọng thấp (Low-density lipoprotein) Met Metformin TC Cholesteron TG Triglycerid WHO Tổ chức y tế Thế giới WF Cao nước KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP TRƯỜNG ĐHSP HÀ NỘI 2 Dương Thị Nga, K35C-CN Sinh 6 KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP TRƯỜNG ĐHSP HÀ NỘI 2 Dương Thị Nga, K35C-CN Sinh 7 MỤC LỤC Trang MỞ ĐẦU 1 NỘI DUNG 3 CHƯƠNG 1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3 1.1. Bệnh béo phì (Obesity) 3 1.1.1. Khái niệm 3 1.1.2. Phân loại 4 1.1.3. Thực trạng béo phì trên thế giới và Việt Nam 4 1.1.4. Tác hại của bệnh béo phì 5 1.1.5. Nguyên nhân và giải pháp phòng, điều trị béo phì 5 1.1.6. Rối loạn trao đổi lipid máu 6 1.2. Bệnh đái tháo đường 8 1.2.1. Khái niệm 8 1.2.2. Tỉ lệ mắc bệnh ĐTĐ 9 1.2.3. Phân loại bệnh ĐTĐ 10 1.2.3.1. ĐTĐ type 1 10 1.2.3.2. ĐTĐ type 2 11 1.2.3.3. ĐTĐ thai nghén 12 1.2.3.4. Các thể ĐTĐ khác (hiếm gặp) 13 1.2.4. Biến chứng bệnh ĐTĐ 13 1.2.5. Các thuốc điều trị bệnh ĐTĐ 14 1.3. Cây Bông ổi (Lantana Camara L.) 15 1.3.1. Thực vật học 15 1.3.2. Phân loại, nguồn gốc và phân bố cây Bông ổi 16 1.3.3. Thành phần hóa học 16 1.3.4. Một số tác dụng Sinh - Dược và công dụng của cây Bông ổi 16 CHƯƠNG 2. ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 18 2.1. Đối tượng nghiên cứu 18 2.1.1. Mẫu thực vật 18 2.1.2. Động vật thí nghiệm 18 KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP TRƯỜNG ĐHSP HÀ NỘI 2 Dương Thị Nga, K35C-CN Sinh 8 2.1.3. Dụng cụ, hóa chất thí nghiệm 19 2.2. Phương pháp nghiên cứu 19 2.2.1. Phương pháp gây ĐTĐ thực nghệm STZ và xây dựng mô hình chuột béo phì thực nghiệm 19 2.2.1.1. Phương pháp gây ĐTĐ thực nghệm STZ 19 2.2.1.2. Xây dựng mô hình chuột béo phì thực nghiệm 21 2.2.2. Phương pháp nghiên cứu tác dụng hạ glucose huyết của dịch chiết cây Bông ổi (Lantana Camara L.) trên mô hình chuột ĐTĐ type 2 23 2.2.2.1. Tạo mô hình chuột ĐTĐ type 2 23 2.2.2.2. Thử khả năng hạ glucose huyết của các phân đoạn dịch chiết 23 2.2.3. Một số kĩ thuật phân tích hóa sinh 24 2.2.3.1. Phương pháp định lượng glucose huyết 24 2.2.3.2. Định lượng một số chỉ số lipid trong huyết thanh 25 2.2.4. Xử lý số liệu 28 CHƯƠNG 3. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 30 3.1. Kết quả mô hình chuột béo phì và ĐTĐ thực nghiệm 30 3.1.1. Kết quả mô hình chuột béo phì 30 3.1.2. Kết quả tạo mô hình chuột ĐTĐ type2 bằng thuốc STZ 35 3.2. Tác dụng hạ glucose huyết của dịch chiết cây Bông ổi trên mô hình chuột ĐTĐ type 2 38 3.3. Tác dụng của dịch chiết từ cây Bông ổi đến khả năng chống rối loạn trao đổi lipid trên mô hình chuột ĐTĐ type 2 41 KẾT LUẬN 44 KIẾN NGHỊ 45 TÀI LIỆU THAM KHẢO 46 KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP TRƯỜNG ĐHSP HÀ NỘI 2 Dương Thị Nga, K35C-CN Sinh 1 MỞ ĐẦU 1. Lý do chọn đề tài Đái tháo đường (ĐTĐ) là bệnh rối loạn trao đổi chất với biểu hiện chung nhất là chứng tăng đường huyết. ĐTĐ không chỉ có tính chất là một bệnh mãn tính, ĐTĐ còn kèm theo nhiều biến chứng nguy hiểm như các bệnh về thận dẫn đến suy thận, bệnh về mắt dẫn đến mù lòa, tổn thương hệ thần kinh và đặc biệt là các biến chứng về mạch máu (xơ vữa động mạch) có thể dẫn đến tử vong như bệnh mạch vành, nhồi máu não, xuất huyết não Gánh nặng bệnh tật do ĐTĐ đang tăng lên trên toàn cầu, đặc biệt ở các nước đang phát triển, trong đó có Việt Nam – nơi quá trình đô thị hóa đang làm thay đổi tập quán ăn uống, giảm hoạt động thể lực và tăng cân [3]. Theo WHO, năm 2000 toàn thế giới có khoảng 151 triệu người mắc bệnh và dự đoán đến năm 2025 con số mắc bệnh sẽ tăng đến 300-330 triệu, chiếm 5,4% dân số toàn cầu. Đáng chú ý là bệnh có xu hướng gia tăng mạnh tại các quốc gia đang phát triển như: châu Phi, châu Mỹ La Tinh và châu Á, đặc biệt ở độ tuổi lao động [18]. Ngày nay, Y học hiện đại đã có nhiều loại thuốc chữa bệnh ĐTĐ có hiệu quả như insulin, sulfonylure, biguanid, Tuy nhiên, hầu hết các loại thuốc này đều có tác dụng phụ và chi phí điều trị đắt đỏ [3]. Trước tình hình đó ủy ban chuyên gia của WHO đã kiến nghị nên sử dụng các thuốc có nguồn gốc thảo dược có sẵn, có giá thành rẻ và ít độc tính. Trong lịch sử Y học từ 1550 năm trước công nguyên, con người đã biết dùng cây cỏ để chữa ĐTĐ. Nhiều loại thảo dược đó chứng tỏ có tác dụng rất tốt trong việc điều trị ĐTĐ như: mướp đắng, sinh địa, hoàng kỳ, huyền sâm, cỏ ngọt, chè xanh, khoai lang,…Việc nghiên cứu, khảo sát về thành phần hóa học KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP TRƯỜNG ĐHSP HÀ NỘI 2 Dương Thị Nga, K35C-CN Sinh 2 và tác dụng dược lý của các loài cây thuốc có giá trị của Việt Nam nhằm đặt cơ sở khoa học cho việc sử dụng chúng một cách hợp lý, hiệu quả có tầm quan trọng đặc biệt. Bông ổi hay hoa ngũ sắc, tên khoa học là Lantana Camara L. thuộc họ roi ngựa. Một số nơi người ta cho rằng lá Bông ổi có tính sát trùng, cầm máu nên dùng lá cây Bông ổi giã nát đắp lên vết thương, vết loét, thậm chí chỗ bị rắn cắn. Lá Bông ổi có thể cho vào nồi nước xông chữa cảm, sốt[7]. Từ thực tế đó, nhằm góp phần tìm kiếm và nghiên cứu thuốc điều trị đái tháo đường em quyết định chọn đề tài nghiên cứu “Nghiên cứu tác dụng hạ đường huyết và khả năng chống rối loạn trao đổi lipid của dịch chiết từ cây Bông ổi (Lantana Camara L.)”. 2. Nhiệm vụ nghiên cứu 2.1. Tạo mô hình chuột béo phì và ĐTĐ type 2 2.2. Nghiên cứu tác động hạ đường huyết và khả năng chống rối loạn trao đổi lipid trên mô hình chuột thực nghiệm của dịch chiết từ cây Bông ổi (Lantana Camara L.). [...]... ĐHSP HÀ NỘI 2 2.2.2 Phương pháp nghiên cứu tác dụng hạ glucose huyết của dịch chiết cây Bông ổi (Lantana Camara L.) trên mô hình chuột ĐTĐ type 2 Để tìm hiểu tác dụng của dịch chiết cây Bông ổi lên đường huyết, trước tiên chúng em tiến hành gây mô hình chuột ĐTĐ mô phỏng type 2 dựa trên chế độ ăn giàu chất béo kết hợp với STZ liều đơn của Srinivasan 2.2.2.1 Tạo mô hình chuột ĐTĐ type 2 Để có mô hình... chứa cameren, isocameren và micranen Trong vỏ có 0.08% lantanin, là một alkaloid Lá trong thời kỳ có hoa chứa 0.31- 0.68% lantanin, còn có lantaden [4] 1.3.4 Một số tác dụng Sinh - Dược và công dụng của cây Bông ổi Lá có vị đắng, hôi, tính mát, hơi có độc, có tác dụng hạ sốt, tiêu độc, tiêu sưng Hoa có vị ngọt, tính mát, có tác dụng cầm máu Rễ có vị dịu, tính mát, có tác dụng hạ sốt, tiêu độc, giảm đau... 30-60 gam cây tơi sắc uống Dương Thị Nga, K35C-CN Sinh 17 TRƯỜNG ĐHSP HÀ NỘI 2 KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Chương 2 ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tượng nghiên cứu 2.1.1 Mẫu thực vật Các phân đoạn dịch chiết cây Bông ổi ( Lantana Camara L.) đã được định tính (xác định thành phần các hợp chất tự nhiên trong cây Bông ổi) , định lượng polyphenol tổng số bằng phương pháp sắc kí lớp mỏng và phương... K35C-CN Sinh 14 KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP TRƯỜNG ĐHSP HÀ NỘI 2 1.3 Cây Bông ổi (Lantana Camara L.) 1.3.1 Thực vật học Hình 1.2 Cây Bông ổi (Lantana Camara L.) Cây cao từ 1.5-2 m, hay có thể hơn một chút Cây bụi, thân gỗ Thân có gai, cành dài hình vuông có gai ngắn và lông ráp Lá mọc đối, khía răng, mặt dưới có lông Lá hình trái xoan, nhọn đầu, xanh nhạt, mặt trên phủ lông ngắn, mặt dưới có lông mềm Cuống ngắn,... tiết và hoạt động của insulin [6] Bệnh ĐTĐ được xác định dựa vào những tiêu chí trong bảng 1.2 Bảng 1.2 Các tiêu chí để chuẩn đoán ĐTĐ theo WHO Đường Đái tháo đường huyết lúc sau khi làm nghiệm đói pháp tăng đường (mmol/l) Kết luận Đường huyết 2 giờ huyết (mmol/l) >7 > 11.1 Đường huyết tại thời điểm bất kì (mmol/l) >11.1 Rối loạn dung nạp đường 5.6 – 7 7.8 - 11.1 kèm triệu chứng uống nhiều, đái huyết. .. khi điều trị), ngày thứ 5, thứ 10, thứ 15, thứ 21 khi điều trị Dương Thị Nga, K35C-CN Sinh 23 TRƯỜNG ĐHSP HÀ NỘI 2 KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Bảng 2.2 Mô hình nghiên cứu khả năng hạ glucose huyết của các phân đoạn dịch chiết từ cây Bông ổi (Lantana Camara L.) Lô Chế độ ăn trước điều trị Mục đích Tiêm 1 Thức ăn chuẩn Uống nước cất, không điều trị 2 Thức ăn béo STZ Uống nước cất, không điều trị 3 Thức ăn béo... khi cho chuột nhịn qua đêm (12 giờ), chỉ cho uống nước 2.2.2.2 Thử khả năng hạ glucose huyết của các phân đoạn dịch chiết Các lô chuột ĐTĐ type 2 (5 con/lô) được ăn thức ăn thường và điều trị hằng ngày bằng cách cho uống cao các phân đoạn dịch chiết như bảng 2.2 Đường huyết của các con chuột được đo vào cùng một thời điểm trong ngày và sau khi nhịn đói 12 giờ ở các ngày thứ 0 (trước khi điều trị), ngày... trạng rối loạn và hoặc tăng nồng độ các thành phần lipid trong máu, hậu quả là sự tạo thành các mảng xơ vữa gây tắc mạch làm tăng nguy cơ biến chứng tim mạch và đột qụy, tăng các biến chứng mạch máu khác, hậu quả nặng nề nhất là dẫn đến tử vong hoặc tàn phế gọi là rối loạn chuyển hóa [3] Ngày nay người ta đã xem là có rối loạn lipid máu ngay từ khi tỉ lệ thành phần của lipid máu có sự thay ổi Khái... nhóm hai với tác dụng chủ yếu là ức chế phân giải glycogen thành glucose ở gan, làm tăng tính nhạy cảm của insulin ngoại vi, tác động hạ glucose trong khoảng 2 - 4 mmol/l, giảm HbA1C đến 2% Vì thế, Metformin được dùng cho cả bệnh nhân béo phì và tiểu đường Tuy nhiên thuốc cũng có một số tác dụng phụ với đường tiêu hóa, chống chỉ định với người suy tim nặng, bệnh gan, bệnh thận và những người từng có tiền... ĐTĐ do tế bào  của đảo tụy Langerhan bị phá hủy mất khả năng sản xuất insulin, một hormon điều hòa glucose trong máu (ĐTĐ type 1) hoặc do rối loạn trao ổi chất lipid – glucid dẫn đến đối kháng insulin (ĐTĐ type 2) [9] 1.2.2 Tỉ lệ mắc bệnh ĐTĐ Tỷ lệ mắc bệnh ĐTĐ thay ổi theo lứa tuổi, dân tộc, các vùng địa lý khác nhau và theo sự phát triển kinh tế của mỗi quốc gia Những số liệu mới nhất cho thấy tỷ . Hà Nội, ngày tháng năm 2013 Sinh viên thực hiện Dương Thị Nga KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP TRƯỜNG ĐHSP HÀ NỘI 2 Dương Thị Nga, K35C-CN Sinh 2 LỜI CAM ĐOAN Em xin cam đoan những kết. này. Hà Nội, ngày tháng năm 2013 Sinh viên thực hiện Dương Thị Nga KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP TRƯỜNG ĐHSP HÀ NỘI 2 Dương Thị Nga, K35C-CN Sinh 3 DANH MỤC CÁC BẢNG, HÌNH VẼ VÀ ĐỒ THỊ Bảng. KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP TRƯỜNG ĐHSP HÀ NỘI 2 Dương Thị Nga, K35C-CN Sinh 6 KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP TRƯỜNG ĐHSP HÀ NỘI 2 Dương Thị Nga, K35C-CN Sinh 7 MỤC LỤC Trang MỞ ĐẦU 1 NỘI DUNG