Nghiên cứu thành phần hóa học của phương thuốc hoạt lạc vương

ĐẶT VẤN ĐỀ Hội chứng vai gáy là chứng bệnh thường gặp và ngày càng trở nên phổ biến ở Việt Nam cũng như trên thế giới, trong đó người cao tuổi chiếm một tỷ lệ đáng kể, với các triệu chứng: đau cơ ở vùng vai gáy và làm cho người bệnh rất khó quay đầu và quay cổ. Việc sử dụng các t c cho bệnh nhiều cho bệnh nhân. ụng tố thể huốc tân Hoạt lạc vương v ị hội chứng vai gáy, và đang được nhiều lương y sử dụng để điều trị cho bệnh nhân. sắc cổ phương lại làm mất nhiều thời gian và không tiện dụng ổ truyề , , trong đó có dạng cao đặc như một bán thành phẩm trung gian để tiếp tục chuyển sang các dạng bào chế khác. Từ những lý do trên, đề tài “Nghiên cứu thành phần hóa học của phƣơng thuốc Hoạt lạc vƣơng” được thực hiện với mục tiêu sau: Bào chế được cao đặc Hoạt lạc vương. Định tính một số thành phần hóa học của cao đặc Hoạt lạc vương, so sánh với một số vị thuốc chính trong phương thuốc.

BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI  PHẠM THỊ TRÀ MY NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA PHƯƠNG THUỐC HOẠT LẠC VƯƠNG KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ HÀ NỘI 2013 BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI PHẠM THỊ TRÀ MY NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA PHƢƠNG THUỐC HOẠT LẠC VƢƠNG KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƢỢC SĨ Ngƣời hƣớng dẫn: 1. DS. Vũ Thị Thu Trang 2. TS. Đào Thị Thanh Hiền Nơi thực hiện: Bộ môn Dược học cổ truyền HÀ NỘI-2013 LỜI CÁM ƠN Trước hết, tôi xin được bày tỏ lòng biết ơn chân thành và sâu sắc tới DS. Vũ Thị Thu Trang, đồng cảm ơn TS. Đào Thị Thanh Hiền, đã tận tình hướng dẫn và chỉ bảo tôi trong suốt quá trình thực hiện đề tài này. Tôi cũng xin gửi lời cảm ơn chân thành đến TS. Bùi Hồng Cường đã nhiệt tình hướng dẫn giúp đỡ tôi hoàn thành đề tài. Đồng thời, tôi cũng chân trọng cảm ơn các thầy cô giáo, các chị kĩ thuật viên trong bộ môn Dược học cổ truyền – Trường Đại học Dược Hà Nội đã tận tình giúp đỡ và tạo những điều kiện thuận lợi nhất để tôi có thể hoàn thành luận văn. Cuối cùng, tôi xin phép được gửi những tình cảm sâu sắc và lòng biết ơn vô hạn tới gia đình, người thân và bạn bè, những người đã luôn giúp đỡ, động viên tôi trong suốt quá trình học tập và hoàn thành khóa luận tốt nghiệp. Tôi xin chân thành cảm ơn. Hà Nội, ngày 12 tháng 5 năm 2013 Phạm Thị Trà My MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ 1 Chƣơng 1: TỔNG QUAN 2 1.1. Tổng quan về bài thuốc Hoạt lạc vương 2 1.1.1. Xuất xứ bài thuốc 2 1.1.2. Bài thuốc Hoạt lạc vương 2 1.2. Thông tin cơ bản về các vị thuốc trong bài thuốc 3 1.2.1. Quế chi 3 1.2.2. Hương phụ 5 1.2.3. Bạch thược 6 1.2.4. Xuyên khung 8 1.2.5. Sinh khương 10 Chƣơng 2: ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 13 2.1. Đối tượng và phương tiện nghiên cứu 13 2.1.1. Đối tượng nghiên cứu 13 2.1.2. Phương tiện nghiên cứu 13 2.2. Nội dung nghiên cứu 13 2.3. Phương pháp nghiên cứu 14 CHƢƠNG 3: THỰC NGHIỆM, KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 16 3.1. Đặc điểm và độ ẩm của các vị dược liệu 16 3.1.1. Quế chi 16 3.1.2. Hương phụ 17 3.1.3. Bạch thược 18 3.1.4. Xuyên khung 19 3.1.5. Sinh khương 20 3.2. Bào chế cao đặc 20 3.2.1. Cao chiết nước 20 3.2.2. Cao chiết Et60% 22 3.3. Định tính một số thành phần hóa học của cao đặc Hoạt lạc vương và dược liệu 24 3.3.1. Định tính các nhóm chất chính trong cao và dược liệu bằng phương pháp hóa học 24 3.3.2. Định tính bằng sắc kí lớp mỏng 32 3.4. Bàn luận 41 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 45 1. KẾT LUẬN 45 2. KIẾN NGHỊ 46 TÀI LIỆU THAM KHẢO DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CÁC CHỮ CÁI VIẾT TẮT BT: Bạch thược BuOH: Butanol CE: Cao chiết EtOH 60% CN: Cao chiết nước dd: Dung dịch dl: Dược liệu Et60%: Ethanol 60% EtOAc: Ethyl acetat HP: Hương phụ MNC: Mẫu nghiên cứu pp: Phương pháp Pư: Phản ứng QC: Quế chi R f * : R f x 100 SK: Sinh khương SKLM: Sắc kí lớp mỏng TT: Thuốc thử XK: Xuyên khung DANH MỤC BẢNG Bảng Tên bảng Trang Bảng 3.1 Hiệu suất bào chế, độ ẩm và cảm quan của cao chiết nước 22 Bảng 3.2 Hiệu suất bào chế, độ ẩm và cảm quan của cao chiết Et60% 24 Bảng 3.3 Kết quả định tính thành phần hóa học trong cao và các vị thuốc 30 Bảng 3.4 Kết quả SKLM định tính cắn ether từ cao và Quế chi 33 Bảng 3.5 Kết quả SKLM định tính cắn n-butanol từ cao và Bạch thược 35 Bảng 3.6 Kết quả SKLM định tính cắn CHCl 3 từ cao, Hương phụ và Xuyên khung 37 Bảng 3.7 Kết quả SKLM định tính cắn EtOAc từ cao, Bạch thược, Hương phụ và Quế chi 40 Bảng 3.8 Một số chỉ tiêu đề xuất trong tiêu chuẩn kĩ thuật của cao đặc Hoạt lạc vương 44 DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ Hình Tên hình Trang Hình 2.1 ẫu HPTLC Linomat 5 13 Hình 3.1 Ảnh vị thuốc Quế chi 16 Hình 3.2 Ảnh đặc điểm vi học bột Quế chi 16 Hình 3.3 Ảnh vị thuốc Hương phụ 17 Hình 3.4 Ảnh đặc điểm vi học bột Hương phụ 17 Hình 3.5 Ảnh vị thuốc Bạch thược 18 Hình 3.6 Ảnh đặc điểm vi học bột Bạch thược 18 Hình 3.7 Ảnh vị thuốc Xuyên khung 19 Hình 3.8 Ảnh đặc điểm vi học bột Xuyên khung 19 Hình 3.9 Ảnh vị thuốc Sinh khương 20 Hình 3.10 Sơ đồ bào chế cao chiết nước 21 Hình 3.11 Sơ đồ bào chế cao chiết Et60% 23 Hình 3.12 Sắc kí đồ định tính cắn ether dầu hỏa từ cao và Quế chi 33 Hình 3.13 Sắc kí đồ định tính cắn n-butanol từ cao và Bạch thược 35 Hình 3.14 Sắc kí đồ định tính cắn CHCl 3 từ cao, Hương phụ và Xuyên khung 37 Hình 3.15 Sắc kí đồ định tính cắn EtOAc từ cao, Bạch thược, Hương phụ và Quế chi 40 1 ĐẶT VẤN ĐỀ Hội chứng vai gáy là chứng bệnh thường gặp và ngày càng trở nên phổ biến ở Việt Nam cũng như trên thế giới, trong đó người cao tuổi chiếm một tỷ lệ đáng kể, với các triệu chứng: đau cơ ở vùng vai gáy và làm cho người bệnh rất khó quay đầu và quay cổ. Việc sử dụng các t c cho bệnh nhiều cho bệnh nhân. ụng tố thể huốc tân Hoạt lạc vương v ị hội chứng vai gáy, và đang được nhiều lương y sử dụng để điều trị cho bệnh nhân. sắc cổ phương lại làm mất nhiều thời gian và không tiện dụng ổ truyề , , trong đó có dạng cao đặc như một bán thành phẩm trung gian để tiếp tục chuyển sang các dạng bào chế khác. Từ những lý do trên, đề tài “Nghiên cứu thành phần hóa học của phƣơng thuốc Hoạt lạc vƣơng” được thực hiện với mục tiêu sau: - Bào chế được cao đặc Hoạt lạc vương. - Định tính một số thành phần hóa học của cao đặc Hoạt lạc vương, so sánh với một số vị thuốc chính trong phương thuốc. 2 Chƣơng 1: TỔNG QUAN 1.1. Tổng quan về bài thuốc Hoạt lạc vƣơng 1.1.1. Xuất xứ bài thuốc Bài thuốc Hoạt lạc vương xuất phát từ bài Quế chi thang Quế chi thang - Thành phần: [10] Quế chi 20g Bạch thược 9g Sinh khương 9g Chích cam thảo 6g Đại táo 5quả - Cách dùng: sắc nước uống [10], sắc vũ hỏa, uống nóng, ngày 1 thang [3]. - Công năng, chủ trị: phát tán phong hàn, thông kinh lạc [3], giải cơ phát biểu, điều hòa dinh vệ [14], dùng trong trường hợp cảm lạnh có đau dây thần kinh ngoại biên [3], các chứng ngoại cảm phong hàn biểu hư, sốt nhức đầu, mồ hôi ra sợ gió, mũi ngáy nôn khan, rêu lưỡi trắng không khát, mạch phù hoãn [10]. Chú ý: - Dùng thuốc để phát hãn: phải đủ liều để làm ra mồ hôi. Khi hết sốt thì ngưng uống thuốc. Dùng kéo dài sẽ gây hao tổn tân dịch, rối loạn vận mạch ngoại biên, rối loạn chức năng tiết mồ hôi gây triệu chứng tê, mỏi, lạnh [3]. - Dùng thận trọng đối với người viêm loét dạ dày, khi đang chảy máu [3], nên ăn nhẹ trước khi uống thuốc [3]. 1.1.2. Bài thuốc Hoạt lạc vƣơng - Thành phần: Quế chi 20g Hương phụ 15g Bạch thược 5g Xuyên khung 5g Sinh khương 5g Một số vị khác, tổng khối lượng 1 thang là 70g [...]... pipet… Hóa chất – dung môi: + Hóa chất: các hóa chất để định tính + Dung môi: ethanol, ethyl acetat, chloroform… + Bản sắc ký lớp mỏng Silica gel 60 F254 của Merck 2.2 Nội dung nghiên cứu Linomat 5 14 Đặc điểm và độ ẩm của dược liệu Bào chế cao đặc Hoạt lạc vương Định tính một số thành phần chính của cao Hoạt lạc vương 2.3 Phƣơng pháp nghiên cứu 2.3.1 Đặc điểm và độ ẩm của dƣợc liệu Mẫu nghiên cứu: các... coumarin… trong cao bằng phản ứng hóa học với các thuốc thử chung và thuốc thử đặc hiệu của từng nhóm [4], [5], [8], [9] - Định tính một số thành phần trong cao so sánh với dược liệu đối chiếu bằng sắc kí lớp mỏng [8], [9] + Cao thuốc và mỗi vị thuốc được tiến hành sắc kí theo cùng một quy trình và cùng điều kiện + So sánh trên sắc kí đồ vị thuốc cần kiểm tra với cao đặc bài thuốc 16 CHƢƠNG 3: THỰC NGHIỆM,... 567,14 g dược liệu thu được 50,24 g cao đặc ế cao - 8,49 ± 0,62 - Cao chiết ethanol bài thuốc đạt các chỉ tiêu chung theo DĐVN IV về thể chất, hình thức, độ ẩm 3.3 Định tính một số thành phần hóa học của cao đặc Hoạt lạc vƣơng và dƣợc liệu 3.3.1 Định tính các nhóm chất chính trong cao và dƣợc liệu bằng phƣơng pháp hóa học  Định tính alcaloid MNC: 2 cao đặc, bột các dược liệu: Quế chi, Hương phụ, Bạch... * Cảm quan về màu sắc, mùi, vị…bằng phương pháp quan sát, ngửi, nếm trực tiếp [8] * Hiệu suất bào chế: được tính theo công thức: Khối lượng cao khô tuyệt đối H (%) = Khối lượng dược liệu khô tuyệt đối × 100 % * Hàm ẩm: xác định bằng phương pháp mất khối lượng do làm khô theo phụ lục 9.6 trong DĐVN IV [8] 2.3.3 Định tính một số thành phần hóa học của cao đặc Hoạt lạc vƣơng và dƣợc liệu - Định tính một... trong cứu gián tiếp các huyệt vị, dùng làm thang trong một số phương thuốc, làm phụ liệu để chế biến một số vị thuốc, là nguyên liệu chế biến thức ăn [1], [3], [8] Kiêng kị Âm hư nội nhiệt, biểu hư ra mồ hôi nhiều, mất máu không nên dùng [1], [8], người bị ho do phế nhiệt và nôn do vị nhiệt không nên dùng [3] 13 Chƣơng 2: ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tƣợng và phƣơng tiện nghiên cứu 2.1.1... thông kinh lạc, dùng trong hội chứng vai gáy, kinh lạc bị ứ trệ gây đau cứng cơ (đau cổ gáy, giãn dây chằng lưng), tê mỏi cơ, đau dây thần kinh ngoại biên như: liệt dây thần kinh VII, thần kinh liên sườn Giải thích bài thuốc: Hoạt lạc vương là phương Quế chi thang gia giảm trong đó giảm Đại táo, Cam thảo, gia thêm Hương phụ, Xuyên khung và một số vị khác nhằm tăng tác dụng giảm đau, hành khí, hoạt huyết... tràng 1.2 Thông tin cơ bản về các vị thuốc trong bài thuốc 1.2.1 Quế chi Tên khoa học: Ramulus Cinnamomi [2], [3], [8] Bộ phận dùng: cành non phơi hay sấy khô của cây Quế (Cinnamomum cassia Presl.) hoặc một số loài Quế khác: Quế quan - Cinnamomum zeylanicum Blume, Quế thanh - Cinnamomum loureirii Nees, họ Long não - Lauraceae [2], [3], [8] 1.2.1.1 Thành phần hóa học - Tinh dầu: hàm lượng tinh dầu thay... dùng, không dùng cùng Lê lô [3], [8] 1.2.4 Xuyên khung Tên khoa học: Rhizoma Ligustici wallichii [2], [3], [8], [12] Bộ phận dùng: thân rễ đã phơi hay sấy khô của cây Xuyên khung (Ligusticum wallichii Franch.), họ Hoa tán (Apiaceae) [2], [3], [12] 1.2.4.3 Thành phần hóa học - Tinh dầu: loài Ligusticum wallichii chứa tinh dầu 1% [12] - Thành phần khác: dầu béo, acid ferulic, một hợp chất kết tinh [2],... khƣơng Tên khoa học: Rhizoma Zingiberis [1], [3] Bộ phận dùng: thân rễ của cây Gừng Zingiber officinale Rosc., họ Gừng (Zingiberaceae), tươi là Sinh khương, khô là Can khương, qua bào chế là Bào khương, sao cháy là Thán khương [1], [3] 1.2.5.1 Thành phần hóa học Gừng chứa 2 - 3% tinh dầu [1], [5], [12], 5% chất nhựa dầu, 3,7% chất béo, tinh bột và các chất cay [12] - Tinh dầu Gừng có thành phần chủ yếu... dược liệu có trong bài thuốc Kiểm tra chất lượng từng vị thuốc theo phương pháp ghi trong DĐVN IV bao gồm các nội dung: - Mô tả hình thái, chụp ảnh: quan sát trực tiếp để mô tả vị thuốc, mùi, vị,…[8], [13] - Vi học: soi bột, sử dụng kính hiển vi để quan sát đặc điểm đặc trưng của bột [8], [13] - Xác định hàm ẩm dược liệu: + Quế chi, Hương phụ, Xuyên khung, Sinh khương: bằng phương pháp cất với dung . PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 13 2.1. Đối tượng và phương tiện nghiên cứu 13 2.1.1. Đối tượng nghiên cứu 13 2.1.2. Phương tiện nghiên cứu 13 2.2. Nội dung nghiên cứu 13 2.3. Phương pháp nghiên cứu 14. đặc Hoạt lạc vương. - Định tính một số thành phần hóa học của cao đặc Hoạt lạc vương, so sánh với một số vị thuốc chính trong phương thuốc. 2 Chƣơng 1: TỔNG QUAN 1.1. Tổng quan về bài thuốc. BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI  PHẠM THỊ TRÀ MY NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA PHƯƠNG THUỐC HOẠT LẠC VƯƠNG KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ HÀ