Bài giảng phương pháp nghiên cứu tế bào tài liệu, giáo án, bài giảng , luận văn, luận án, đồ án, bài tập lớn về tất cả c...
SINH H SINH H Ọ Ọ C T C T Ế Ế B B À À O O N N Ộ Ộ I DUNG V I DUNG V À À PHƯƠNG PH PHƯƠNG PH Á Á P P NGHIÊN C NGHIÊN C Ứ Ứ U T U T Ế Ế B B À À O O M M ụ ụ c c tiêu tiêu h h ọ ọ c c t t ậ ậ p p : : 1. 1. Nêu Nêu đư đư ợ ợ c c kh kh á á i i ni ni ệ ệ m m t t ế ế b b à à o o . . 2. 2. Nêu Nêu đư đư ợ ợ c c c c á á c c l l ĩ ĩ nh nh v v ự ự c c nghiên nghiên c c ứ ứ u u c c ủ ủ a a t t ế ế b b à à o o . . 3. 3. Tr Tr ì ì nh nh b b à à y y c c á á c c phương phương ph ph á á p p đư đư ợ ợ c c s s ử ử d d ụ ụ ng ng đ đ ể ể nghiên nghiên c c ứ ứ u u t t ế ế b b à à o o . . LƯ LƯ Ợ Ợ C S C S Ử Ử T T Ế Ế B B À À O H O H Ọ Ọ C C 1665 Robert 1665 Robert Hooke Hooke , KHV X30 Qs , KHV X30 Qs mô mô b b ầ ầ n n TV TV ⇨ ⇨ “ “ t t ế ế b b à à o o l l à à nh nh ữ ữ ng ng xoang xoang r r ỗ ỗ ng ng = = cellula cellula ” ” , , ti ti ế ế ng ng Latin Latin c c ó ó ngh ngh ĩ ĩ a a l l à à phòng phòng ( ( bu bu ồ ồ ng ng ). ). 1671 1671 Malpighi Malpighi v v à à Grew Grew nghiên nghiên c c ứ ứ u u trên trên c c á á c c mô mô TV TV kh kh á á c c nhau nhau ⇨ ⇨ “ “ t t ế ế b b à à o o l l à à c c á á c c t t ú ú i i , , xoang xoang đư đư ợ ợ c c gi gi ớ ớ i i h h ạ ạ n n b b ở ở i i v v á á ch ch cellulose cellulose ” ” Malpighi Malpighi published his findings in a book Anatomia Plantarum in 1671 KHV x30 Mô bần thưc vật LƯ LƯ Ợ Ợ C S C S Ử Ử T T Ế Ế B B À À O H O H Ọ Ọ C C 1674 1674 Antonie Antonie van Leeuwenhoek, KHV van Leeuwenhoek, KHV X270 (x500) X270 (x500) quan quan s s á á t t t t ế ế b b à à o o đ đ ộ ộ ng ng v v ậ ậ t t ⇨ ⇨ “ “ t t ế ế b b à à o o không không ph ph ả ả i i l l à à xoang xoang r r ỗ ỗ ng ng m m à à c c ó ó c c ấ ấ u u tr tr ú ú c c ph ph ứ ứ c c t t ạ ạ p p ” ” Antonie van Leeuwenhoek (1632 – 1723) is commonly known as "the Father of Microbiology", Microscopic Section through one year old ash (Fraxinus) wood LƯ LƯ Ợ Ợ C S C S Ử Ử T T Ế Ế B B À À O H O H Ọ Ọ C C 1839 1839 h h ọ ọ c c thuy thuy ế ế t t t t ế ế b b à à o o : : t t ế ế b b à à o o l l à à đơn đơn v v ị ị căn căn b b ả ả n n c c ủ ủ a a sinh sinh gi gi ớ ớ i i . . T T ấ ấ t t c c ả ả cơ cơ th th ể ể sinh sinh v v ậ ậ t t t t ừ ừ đơn đơn b b à à o o đ đ ế ế n n đa đa b b à à o o đ đ ề ề u u c c ó ó c c ấ ấ u u t t ạ ạ o o l l à à t t ế ế b b à à o o . . 1841 1841 ⇨ ⇨ Phân Phân b b à à o o vô vô nhi nhi ễ ễ m m . . 1858 1858 ⇨ ⇨ Phân Phân b b à à o o nguyên nguyên nhi nhi ễ ễ m m . . Virchov Virchov “ “ T T ấ ấ t t c c ả ả t t ế ế b b à à o o đ đ ề ề u u đư đư ợ ợ c c sinh sinh ra ra t t ừ ừ t t ế ế b b à à o o c c ó ó trư trư ớ ớ c c ” ” 1862 1862 ⇨ ⇨ Louis Pasteur Louis Pasteur ch ch ứ ứ ng ng minh minh “ “ s s ự ự s s ố ố ng ng không không t t ự ự ng ng ẫ ẫ u u sinh sinh ” ” LƯ LƯ Ợ Ợ C S C S Ử Ử T T Ế Ế B B À À O H O H Ọ Ọ C C 1870 1870 - - 1883 1883 ⇨ ⇨ Phân Phân b b à à o o gi gi ả ả m m nhi nhi ễ ễ m m , , s s ự ự t t ạ ạ o o giao giao t t ử ử , , s s ự ự th th ụ ụ tinh tinh đư đư ợ ợ c c mô mô t t ả ả l l à à cơ cơ s s ở ở t t ế ế b b à à o o cho cho c c á á c c qui qui lu lu ậ ậ t t di di truy truy ề ề n n c c ủ ủ a a Mendel (1865). Mendel (1865). Cu Cu ố ố i i th th ế ế k k ỷ ỷ XIX XIX ’ ’ s s ⇨ ⇨ c c á á c c b b à à o o quan quan l l ầ ầ n n lư lư ợ ợ t t đư đư ợ ợ c c ph ph á á t t hi hi ệ ệ n n , , nhi nhi ề ề u u qu qu á á tr tr ì ì nh nh sinh sinh lý lý quan quan tr tr ọ ọ ng ng đư đư ợ ợ c c NC. NC. LƯ LƯ Ợ Ợ C S C S Ử Ử T T Ế Ế B B À À O H O H Ọ Ọ C C Gi Gi ữ ữ a a th th ế ế k k ỷ ỷ XIX XIX ’ ’ s s ⇨ ⇨ KHV e KHV e - - ra ra đ đ ờ ờ i i , NC , NC t t ế ế b b à à o o ở ở m m ứ ứ c c siêu siêu vi vi v v à à phân phân t t ử ử . . T T ế ế b b à à o o l l à à đơn đơn v v ị ị cơ cơ b b ả ả n n v v ề ề c c ấ ấ u u tr tr ú ú c c c c ũ ũ ng ng như như ch ch ú ú c c năng năng ( ( sinh sinh s s ả ả n n , , sinh sinh trư trư ở ở ng ng , , v v ậ ậ n n đ đ ộ ộ ng ng , , trao trao đ đ ổ ổ i i ch ch ấ ấ t t , , c c á á c c qu qu á á tr tr ì ì nh nh sinh sinh ho ho á á ) ) c c ủ ủ a a cơ cơ th th ể ể s s ố ố ng ng . . Nh Nh ữ ữ ng ng sinh sinh v v ậ ậ t t cơ cơ th th ể ể ch ch ỉ ỉ c c ó ó m m ộ ộ t t t t ế ế b b à à o o g g ọ ọ i i l l à à sinh sinh v v ậ ậ t t đơn đơn b b à à o o . . Nh Nh ữ ữ ng ng sinh sinh v v ậ ậ t t cơ cơ th th ể ể g g ồ ồ m m nhi nhi ề ề u u t t ế ế b b à à o o t t ậ ậ p p h h ợ ợ p p l l ạ ạ i i m m ộ ộ t t c c á á ch ch c c ó ó t t ổ ổ ch ch ứ ứ c c ch ch ặ ặ t t ch ch ẽ ẽ g g ọ ọ i i l l à à sinh sinh v v ậ ậ t t đa đa b b à à o o . . LƯ LƯ Ợ Ợ C S C S Ử Ử T T Ế Ế B B À À O H O H Ọ Ọ C C H H ọ ọ c c thuy thuy ế ế t t TB: TB: - - TB TB đư đư ợ ợ c c h h ì ì nh nh th th à à nh nh t t ừ ừ TB TB c c ó ó trư trư ớ ớ c c . . - - TB TB l l à à đơn đơn v v ị ị cơ cơ b b ả ả n n v v ề ề c c ấ ấ u u tr tr ú ú c c , , ch ch ứ ứ c c năng năng v v à à t t ổ ổ ch ch ứ ứ c c ở ở t t ấ ấ t t c c ả ả cơ cơ th th ể ể s s ố ố ng ng . . T T ấ ấ t t c c ả ả nh nh ữ ữ ng ng v v ậ ậ t t hay hay cơ cơ th th ể ể s s ố ố ng ng đ đ ề ề u u đư đư ợ ợ c c h h ì ì nh nh th th à à nh nh t t ừ ừ TB. TB. C C Á Á C D C D Ạ Ạ NG S NG S Ố Ố NG NG C C á á c c d d ạ ạ ng ng cơ cơ th th ể ể s s ố ố ng ng t t ồ ồ n n t t ạ ạ i i trong trong sinh sinh gi gi ớ ớ i i đư đư ợ ợ c c phân phân nh nh ó ó m m như như sau sau : : Sinh Sinh v v ậ ậ t t chưa chưa c c ó ó c c ấ ấ u u t t ạ ạ o o t t ế ế b b à à o o : virus, : virus, th th ể ể ăn ăn khu khu ẩ ẩ n n . . Sinh Sinh v v ậ ậ t t c c ó ó c c ấ ấ u u t t ạ ạ o o t t ế ế b b à à o o : : - - T T ế ế b b à à o o prokaryot prokaryot : Vi : Vi khu khu ẩ ẩ n n , vi , vi khu khu ẩ ẩ n n lam. lam. - - T T ế ế b b à à o o eukaryot eukaryot : : đ đ ộ ộ ng ng v v ậ ậ t t nguyên nguyên sinh sinh , , n n ấ ấ m m , T , T V, V, ĐV ĐV . . Sinh Sinh v v ậ ậ t t đơn đơn b b à à o o - - Sinh Sinh v v ậ ậ t t đa đa b b à à o o . . [...]... ng:Ca tử Phương pháp nghiên cứu tế bào Phân đoạn các thành phần TB nh Phương pháp nghiên cứu tế bào Phương pháp sắc ký • Phương pháp sắc ký trên giấy • Sắc ký trên bản mỏng ng • Phương pháp sắc ký trên cột • Sắc ký lỏng cao áp - Sắc ký lỏng hiệu năng ng ng cao (HPLC: High Performance Liquid Chromatography - High Pressure Liquid Chromatography) • Phương pháp điện di Phương pháp nghiên cứu tế bào Đánh... t bào: virus, th ăn khu n Sinh v t có c u t o t bào: -T bào prokaryot: Vi khu n, vi khu n lam - T bào eukaryot: ng v t ngun sinh, n m, TV, V Sinh v t ơn bào- Sinh v t a bào 5 gi i sinh v t: - Gi i Vi sinh v t - Gi i ngun sinh - Gi i N m - Gi i Th c v t - Gi i V V Các lónh vực nghiên cứu của tế bào học ♣ Cấu tạo tế bào ♣ Sinh sản và sinh trưởng của tế bào ng ♣ Di truyền học tế bào ♣ Bệnh học tế bào. .. sinh lý khác nhau • Nuôi cấy tế bào để làm tiêu bản nhiễm sắc thể bình thường hay bất thường ng ng Phương pháp nghiên cứu tế bào Phân đoạn các thành phần TB nh 1 Phương pháp siêu ly tâm Mục đích • Tách riêng từng loại bào quan và đại ch ng phân tử củaTB đê, aTB • tìm hiểu về cấu trúc và chức năng mà không làm biến đổi hình thể, chức năng sinh lý Phương pháp nghiên cứu tế bào Phân đoạn các thành phần... và sinh trưởng của tế bào ng ♣ Di truyền học tế bào ♣ Bệnh học tế bào nh ♣ Miễn dòch tế bào học ♣ Sinh lý tế bào ♣ Sinh hóa tế bào KÍCH THƯ C KÍCH THƯ C kích thư c vi sinh v t thư ng o = micromet (1µm= 1/1000 mm hay µ 1/1000 000 m), virus = nanomet (1nn=1/1000 000 mm hay 1/1000 000 000 m) Phương pháp nghiên cứu tế bào Kính hiển vi quang học ♣ kích thước TB rất nhỏ và độ chiết quang các thành phần trong... micromet, nhuộm ng Phương pháp nghiên cứu tế bào Kính hiển vi điện tử ♣ các chùm tia sóng điện tử có bước ng sóng ngắn ng → độ phóng đại tăng 50 – 100 lần lớn ng hơn khv quang học, phân biệt đến Å ♣ Hình ảnh thu được trong kính hiển vi nh điện tử phụ thuộc chủ yếu vào độ khuếch đại và sự hấp thu các điện tử ch do tỷ trọng và độ dày khác nhau của ng các cấu trúc H T PH N Phương pháp nghiên cứu tế bào Kính hiển... nh Phương pháp nghiên cứu tế bào Tách và nuôi tế bào ch ♣ NC hình thái, chuyển động, phân chia &ø các ng đặc tính khác nhau của TB sống ng ♣ Sử dụng rộng rãi trong y học: ng ng • Nuôi cấy các virus: điều chế vacxin • Nuôi cấy TB ung thư: xác đònh kiểu bệnh, nh nguồn gốc và sinh trưởng, ảnh hưởng của ng nh ng các loại thuốc • chụp ảnh, quay phim chậm, NC quá trình nh sống diễn ra trong tế bào: thực bào, ... phải giải quyết: Phóng đại các vật thể cần quan sát ng Tăng độ chiết quang của các thành nh phầnTB nTB = các công cụ quang học, = phương pháp đònh hình và nhuộm v.v ♣ Độ phóng đại kính hiển vi quang học: ng vài trăm → 2000 lần Phương pháp nghiên cứu tế bào Quan sát tế bào sống ng ♣ Cấu tạo của TB không bò biến đổi ♣ Đặt TB trong môi trường lỏng # môi trường sống ng ng ng ng ♣ Phân biệt các bộ phận... nhuộm sống: ng • Đỏ trung hòa, lam cresyl (1/5000 hoặc 1/10000): không bào • Xanh Janus, tím metyl: ty thể • Rodamin: lục lạp • Tím thược dược: nhân Phương pháp nghiên cứu tế bào Quan sát TB đã đònh hình & nhuộm ♣ Đònh hình: làm TB chết đột ngột cũng gây ít nhiều biến đổi: một số vật thể trong tế bào bò co lại hoặc phồng ng lên, bào tương bò đông, mô bò cứng v.v… ng ♣ Yếu tố đònh hình • Vật lý: sức... thành phần có tỷ trọng lớn sẽ nằm dưới, nh ng các thành phần có tỷ trọng nhỏ sẽ nằm trên nh ng thu lấy các thành phần lắng ở đáy ống nh ng ng nghiệm để nghiên cứu, phần còn ở trên lại đem ly tâm tiếp với lực ly tâm lớn hơn Phương pháp nghiên cứu tế bào Phân đoạn các thành phần TB nh • Dòch đồng nhất của TB Ly tâm:#1000 G ng Kết lắng: chứa TB, nhân, bộ xươngTB ng • Dòch trong trên ly tâm #100000 G Kết . T Ế Ế B B À À O O M M ụ ụ c c tiêu tiêu h h ọ ọ c c t t ậ ậ p p : : 1. 1. Nêu Nêu đư đư ợ ợ c c kh kh á á i i ni ni ệ ệ m m t t ế ế b b à à o o . . 2. 2. Nêu Nêu đư đư ợ ợ c c c c á á c c l l ĩ ĩ nh nh v v ự ự c c nghiên nghiên c c ứ ứ u u c c ủ ủ a a t t ế ế b b à à o o . . 3. 3. Tr Tr ì ì nh nh b b à à y y c c á á c c phương phương ph ph á á p p đư đư ợ ợ c c s s ử ử d d ụ ụ ng ng đ đ ể ể nghiên nghiên c c ứ ứ u u t t ế ế b b à à o o . . LƯ LƯ Ợ Ợ C. SINH H SINH H Ọ Ọ C T C T Ế Ế B B À À O O N N Ộ Ộ I DUNG V I DUNG V À À PHƯƠNG PH PHƯƠNG PH Á Á P P NGHIÊN C NGHIÊN C Ứ Ứ U T U T Ế Ế B B À À O O M M ụ ụ c c tiêu tiêu h h ọ ọ c c t t ậ ậ p p : : 1. 1. Nêu Nêu đư đư ợ ợ c c kh kh á á i i ni ni ệ ệ m m t t ế ế b b à à o o . . 2. 2. Nêu Nêu đư đư ợ ợ c c c c á á c c l l ĩ ĩ nh nh v v ự ự c c nghiên nghiên c c ứ ứ u u c c ủ ủ a a t t ế ế b b à à o o . . 3. 3. Tr Tr ì ì nh nh b b à à y y c c á á c c phương phương ph ph á á p p đư đư ợ ợ c c s s ử ử d d ụ ụ ng ng đ đ ể ể nghiên nghiên c c ứ ứ u u t t ế ế b b à à o o . . LƯ LƯ Ợ Ợ C. c c ó ó ngh ngh ĩ ĩ a a l l à à phòng phòng ( ( bu bu ồ ồ ng ng ). ). 1671 1671 Malpighi Malpighi v v à à Grew Grew nghiên nghiên c c ứ ứ u u trên trên c c á á c c mô mô TV TV kh kh á á c c nhau nhau ⇨ ⇨ “ “ t t ế ế b b à à o o l l à à c c á á c c t t ú ú i i ,